Name: measurement of microtubule dynamics by spinning disk microscopy in monopolar mitotic spindles
Uploaded: 2019-11-15T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measurement of Microtubule Dynamics by Spinning Disk Microscopy in Monopolar Mitotic Spindles at JoVE.com

우리는 그들의 전문가 적인 조언 및 지원에 대한 빛 현미경 검사시설, 실험 의학의 막스 플랑크 연구소의 회원들에게 감사드립니다.

1. 헬라 세포의 파종
<ol><li>인산완식염수(PBS)에 5 μg/mL 섬유넥틴 용액 2mL를 준비하고 4개의 잘 챔버된 커버슬립(#1.5)의 각 우물에 450 μL을 추가합니다. 슬라이드를 37 °C 및 5 %CO2에서15 분 동안 배양합니다.</li>
	<li>덜베코의 인산완충식염수(DPBS)로 비동기적으로 성장하는 헬라 세포를 헹구고 트립신-EDTA(0.05%: 0.02%,w:v)로 배양하여 37°C에서 5분 동안 배양합니다. 로스웰 공원 기념 연구소의 추가...

여기서, 우리는 Ertych 등44에의해 처음 설립 된 방법의 수정을 설명합니다. 몇 가지 다른 수정과 함께, 우리는 이중 회전 디스크 공초점 이미징MT 역학 분석의이 기술을 결합합니다. 듀얼 스피닝 디스크를 사용하면 증가하는 MT의 해상도를 향상시키는 동시에 광독성36을줄입니다. 우리는 더 긴 파장 형광 리포터로 전환하여 광 표백 및 레이저 광 유도 세포의 손상?...

미세소관 (MTs)은 거의 모든 진핵 세포와 일부 박테리아1에서발견되는 매우 역동적 인 구조입니다. 액틴 및 중간 필라멘트와 함께 세포 골격2,3을조각합니다. 세포 분열4,분자 수송5,6을치는 편모, 1 차 실륨7,청각 (kinocilium)8,9,배아 발생10,11,12,침략 및 전이13,14,심지어 기억 형성15,16,17,18, 그리고 다른 많은 프로세스는 주로 MTs에 의존. 이러한 모든 이벤트에 있는 MTs의 참여는 급속하게 성장 (중합) 및 수축 (탈중합) 사이를 전환하는 그들의 놀라운 능력 없이는 불가능할 것입니다. 이 속성은 동적불안정성 19로설명됩니다. MT 역학은 많은 병리학 적 조건20,21,22에서변경됩니다. 따라서이 속성의 특성을 결정하는 것은 질병 메커니즘과 그 후의 치료를 이해하는 데 도움이 될 수 있습니다.
MT 역학 분석을 위한 방법의 긴 목록은, 대부분은 화상 진찰 기술23에근거를 둔 개발되었습니다. 초기에, 넓은 필드 광 현미경은 시험관 내 의 tubulin 중합체의 형성을 관찰하기 위해 사용되었다24. MT 플러스 엔드에서 수집되는 단자 결합(EB)-단백질의 발견과 형광성 단백질을 표지하는 방법의 개발은 넓은 필드 및 공초점 형광 현미경25,26,27를가진 살아있는 세포에서 직접 MT의 거동을 관찰할 수 있게 하였다. EB-단백질 1개(EB3)는 말단결합 단백질 3(EB3)28; 형광 단백질에 융합된 EB3를 과발현 및 추적함으로써, MT 플러스 엔드 조립속도는 29,30으로결정될 수 있다.
공초점 레이저 스캐닝 형광 현미경 검사법(CLSM)은 MT 역학을 따르기 위해 자주 사용됩니다. 그러나, 이 화상 진찰 기술은 광독성 및 광표백의 고위험, 살아있는 세포 및 희미한 견본 화상 진찰을 위한 2개의 바람직하지 않은 프로세스를 포즈31. 더 나은 신호 대 잡음 비를 얻으려면 레이저 전력과 노출 기간이 충분히 높아야하며 샘플을 손상시키지 않아야하며 속도를 대가로 해상도를 희생해야합니다. CLSM에 적합한 대안은 디스크현미경(32)을회전하는 것입니다. 이 이미징 양식은 핀홀배열을 포함하는 움직이는 디스크로 구성된 Nipkow디스크(33)의사용을 기반으로 하며, 동일한 샘플을 동시에34개시료를 이미징하는 많은 CLS 현미경과 동등하게 작동한다. 따라서 레이저의 빛은 시료의 여러 영역을 동시에 비추지만 공초점 특성을 유지합니다. 따라서 Nipkow 디스크를 사용하면 CLSM과 유사하지만 더 빠르고 레이저 전력을 적게 사용하여 이미지를 얻을 수 있습니다. Nipkow 디스크는 요코가와 일렉트릭에 의해 더욱 개선되었으며, 각 핀홀에 개별적으로 빛을 직접 전달하는 마이크로 렌즈 배열이있는 두 번째 디스크를 도입하여 광독성및 광 표백35를더욱 감소시켰습니다. 따라서, 회전 디스크 레이저 스캐닝 현미경 은 라이브 셀 이미징을위한 선택의 방법이되었고, 고속31,36에서높은 신호 대 잡음 비로 이미지를 얻을 수있게하며, 이는 빠르게 성장하는 MT 끝에서와 같은 신호를 해결하는 데 중요합니다.
MT 역학은 일시적으로 다릅니다. 예를 들어, 유사분열 MT는37,38. 유사하게, 유사하게, 유사하게, 유사하게, 유사하게, 유사하게 증가율 및 수축의 차이는 유사분열39,40과같은 동일한 세포 주기 단계 내에서도 관찰되었다. 따라서 잘못된 데이터 수집을 방지하기 위해 MT 역학의 측정은 셀 주기 동안 좁은 시간 창으로 제한되어야 합니다. 예를 들어, 프로메타상에서의 MT 역학의 측정은 모터 키네신 Eg541을 억제하고 양극성 유사분열스핀들(42)의형성을 방지하는 모나스트랄 유사체인 디메틸레나스트론(DME)으로 세포를 처리함으로써 달성될 수 있다. Eg5 억제제 DME 및 다른 모나스트랄 유도체와 함께 프로메타상에서 세포의 억제는 MT 역학43,44,45에영향을 미치지 않으며, 이는 DME를 고정 및 살아있는 세포 모두에서 MT 역학을 연구하는 데 유용한도구(44)로만든다.
여기에서 우리는 Ertych 등44에 의해 기술된 prometaphase 세포에 있는 MT 역학 분석의 방법을 이중 회전 디스크 화상 진찰을 결합합니다. 이 방법을 사용하면 광표백과 최소한의 광독성 없이 단일 초점 평면에서 수집된 전미상 세포에서 MT 역학을 측정할 수 있습니다. 또한, 형광 리포터로서, 녹색 형광 단백질(EGFP)에 비해 밝기와 광안정성을 향상시키고 저에너지라이트(46)로흥분하는 탠덤 디머 토마토 형광 단백질(tdTomato)을 사용합니다. 따라서 tdTomato는 여기를 위해 레이저 전력을 덜 필요로하며 광독성이 적습니다. MT 역학 분석에 필요한 광독성을 줄이고 분해능 및 후처리를 개선하여 방법을 더욱 개선합니다. 또한 다른 동기화 기술과 결합하여 메서드를 향후 수정할 수 있는 기반을 만듭니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:849px;" width="849">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Dimethylenastron</td>
			<td style="width:123px;">Merck</td>
			<td style="width:344px;">324622</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">DMEM w/o phenol red</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>31053-28</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">DPBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14190-094</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Fetal bovine serum</td>
			<td>Biochrom</td>
			<td>S0415</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Fibronectin Bovine Plasma</td>
			<td>Merck</td>
			<td>F4759</td>
			<td>Sterile powder</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">GlutaMAX</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>35050-038</td>
			<td>Stable glutamine substitutive</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">jetPRIME</td>
			<td>Polyplus</td>
			<td>114-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">EB3-TdTomato</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>plasmid #50708</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">RPMI 1640</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>61870-010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Trypan Blue</td>
			<td>Merck</td>
			<td>T8154-20ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Trypsin/EDTA solution</td>
			<td>Biochrom</td>
			<td>L2143</td>
			<td>0.05% / o.02 % w/o calcium and magnesium</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">&#181;-slide</td>
			<td>Ibidi</td>
			<td>80426</td>
			<td>4-well slide with #1.5 coverslip</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Eclipse Ti Inverted microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Objective</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>MRD01991</td>
			<td>CFI Apo TIRF 100XC Oil</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">ACAL Laser Excahnger</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td>Laser box. 405, 458, 488, 514, 561 and 647nm</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Spinning disk module</td>
			<td>Andor</td>
			<td>CSU-W</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Camera</td>
			<td>Andor</td>
			<td>iXon Ultra 888</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Environmental Chamber</td>
			<td>Okolab</td>
			<td></td>
			<td>Dark chamber equipped with CO2 supply, tmeperature control and humidifier</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">HeLa Cells</td>
			<td>DSMZ</td>
			<td>ACC-57</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">NIS Elements v4</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td>Spinning disk microscope. Acquisition Software</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">MATLAB</td>
			<td>Mathworks</td>
			<td></td>
			<td>Computing environment</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Prism 8</td>
			<td>GraphPad</td>
			<td></td>
			<td>Statistical analysis and display software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measurement of microtubule dynamics by spinning disk microscopy in monopolar mitotic spindles

우리는 살아있는 세포에 있는 microtubule 역학을 결정하기 위하여 확립된 방법의 수정을 기술합니다. 이 프로토콜은 마이크로소관(tdTomato 형광 단백질로 표시된 EB3)의 양성 말단과 회전 디스크 공초점 현미경을 사용하여 고속, 고해상도, 라이브 셀 이미징에 대한 유전자 부호 인코딩 된 마커의 발현을 기반으로합니다. 세포 주기 동기화 및 미세소관의 증가 된 밀도는 유사분열 세포에서 중추 분리를 억제함으로써 달성되며, 성장 분석은 오픈 소스 U-Track 소프트웨어를 사용하여 수행됩니다. 밝고 적색 이동형 형광 단백질을 사용하여 낮은 레이저 파워와 함께 디스크 현미경 검사법에 필요한 노출 시간을 줄여 광독성과 빛으로 인한 유물의 확률을 감소시입니다. 이것은 표준 배양 조건의 성장 배지에서 세포를 유지하면서 동일한 제제에서 더 많은 수의 세포를 이미징할 수 있게 한다. 분석은 감독된 자동 방식으로 수행되므로 통계적으로 강력하고 재현 가능한 결과를 제공합니다.

도 1A에설명된 주어진 프로토콜에 따라, pEB3-tdTomato 플라스미드는 비동기적으로 성장하는 HeLa 세포에서 일시적으로 발현되었다. 세포는 DME 처리를 통해 프로메타상에서 형질전환 후 48시간 동기화되었다(도1B). 이 단계는 MT 역학의 측정이 항상 세포 주기의 동일한 단계에서 수행되었다는 것을 보장했습니다. 타임랩스 동영상은 보충 문서<sup class=...

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Measurement of Microtubule Dynamics by Spinning Disk Microscopy in Monopolar Mitotic Spindles

여기에서 우리는 살아있는 세포 회전 디스크 공초점 현미경 검사법 및 MATLAB 기지를 둔 심상 처리를 사용하여 prometaphase에서 동기화된 세포에 있는 microtubule 역학 분석의 강력하고 상세한 방법을 제시합니다.

단극성 미토틱 스핀들에서 디스크 현미경 검사법에 의한 미세소관 역학 측정

We describe a modification of an established method to determine microtubule dynamics in living cells. The protocol is based on the expression of a ...

여기서 제시하는 것은 프로메타단계에서 동기화된 세포에서 라이브 셀 방적 디스크 공초점 이미징을 사용하여 미세tubule 역학을 분석하는 강력하고 간단한 방법이며, 이후 MATLAB 기반 플랫폼에서 이미지를 분석합니다. 회전 디스크 현미경 검사법과 함께 적변형 단백질을 사용하면 광독성이 줄어듭니다. 따라서, 더 많은 수의 셀이 동일한 준비 내에서 이미지화될 수 있다.미세 투골 역학은 많은 수의 병리학 적 조건에서 변경됩니다. 따라서, 그 프로세스에 있는 microtubule 역학의 규정 그리고 행동을 이해하는 것은 우리가 질병의 기계장치를 이해하는 것을 도울 수 있고, 결국, 그(것)들을 보상하기 위하여 치료를 개발하는 것을 도울 수 있습니다. 그리고 이 방법은 또한 확장가능하므로 잠재적으로 약물 발견 노력에 적용될 수 있습니다.이 방법은 형광 비동기화 프로토콜을 변경하고 세포 주기의 상이한 단계에서 세포를 획득하여 변형될 수 있다. 이것은 microtubules에 대하여 약을 검열하고 분할 및 비 분할 세포에 결함을 확인할 때 유용할 수 있습니다. 각 셀 유형에 대한 전환 프로토콜 및 시드 밀도를 최적화할 필요가 있습니다.EB3의 발현 수준은 단일 성장하는 마이크로투블러를 검출하기 위해 낮어야 합니다. DPBS에서 비동기적으로 성장하는 HeLa 세포를 헹구는 것으로 시작한 다음 섭씨 37도에서 트립신-EDTA로 5분 동안 배양합니다. 3 대 1 비율로 10 %의 열 비활성화 FCS로 보충 RPMI-1640 매체를 추가하여 트립시니화를 중지, 추가 트립신-EDTA.원고 방향에 따라 세포의 농도를 계산하고, 50, 000 세포를 준비된 챔버 커버슬립의 각 웰에 계산한다. 커버슬립을 인큐베이터에 반환하고, 섭씨 37도, 이산화탄소 5%에서 24시간 동안 세포를 성장시다. 다음 날, 인큐베이터에서 세포를 제거하고, 드롭 와이즈는 각 우물에 100 마이크로 리터의 형질 혼합물을 추가합니다.세포를 인큐베이터로 되돌리고 4시간 동안 배양한 후 세포를 신선한 배지로 보충하고 20시간 동안 추가로 배양합니다. 10%FCS와 2밀리몰러 L-글루타민으로 보충된 페놀 레드 프리 DMEM에서 디메틸렌스트론(dimethylenastron) 또는 DME의 2.5 마이크로몰라 용액을 준비합니다. 챔버 커버슬립의 성장 배지를 DME 성장 배지로 대체하고 세포를 인큐베이터로 되돌려 보입니다.3.5시간의 배양 후 챔버 커버슬립을 섭씨 37도, 이산화탄소 5%로 설정하여 현미경으로 세포를 옮기고, 이미징을 위한 어두운 패널을 장착한다. 그런 다음 총 4 시간 동안 인큐베이션을 계속하십시오. 100X, 1.49 숫자 조리개, 오일 침수 목표, 듀얼 디스크 공초점 시스템 및 신뢰할 수 있는 자동 초점 시스템으로 반전된 현미경으로 시간 경과 이미징을 수행합니다.텍스트 원고에 설명된 대로 이미징 매개 변수를 정의합니다. 단극성 미토틱 스핀들의 중심에 대응하는 Z 평면에 세포를 찾아서 초점을 맞춥니다. 그런 다음 총 1분 동안 5초마다 이미지를 획득하고, 비닝이 없고 노출 사이에 조명이 없습니다.먼저 수치 분석 소프트웨어를 로드하고 명령 창에서 영화 선택기 GUI라고 하는 소프트웨어 검색 경로에 u-track V2.0 폴더를 추가합니다. 그런 다음 이미지 수집 소프트웨어에 의해 생성된 원시 파일을 가져옵니다. 수동으로 목표의 숫자 조리개와 이미징에 사용되는 시간 간격을 입력합니다.모든 이미지가 로드되면 동영상 목록으로 저장하고 대화 창 오른쪽에 있는 U-track 옵션을 선택하여 입력된 타임랩스 시리즈를 영화로 저장합니다. 팝업 메뉴에서 microtubule 플러스 끝을 선택하고 새 대화 창을 열어 분석의 세 단계의 매개 변수를 결정하는 확인을 클릭합니다. 1단계의 경우 설정을 클릭하고 드롭다운 메뉴에서 혜성 탐지를 선택합니다.원고에 설명된 대로 가우시안 필터와 분수령 분할의 차이에 대한 매개변수를 정의합니다. 그런 다음 모든 동영상에 적용 설정을 선택하고 적용을 클릭합니다. 2단계의 경우 마이크로튜브 플러스 엔드 역학을 선택하고 텍스트 원고에 따라 설정 옵션을 사용하여 연결, 갭 클로징, 병합 및 분할 및 Kalman 필터 함수의 값을 정의합니다.치수 문제의 경우 드롭다운 메뉴에서 2개를 선택하고 최대 간격을 닫을 수 있도록 5프레임을 사용하고 첫 번째 단계에서 최소 트랙 세그먼트 길이에 3프레임을 사용합니다. 이전과 마찬가지로 모든 동영상에 설정 적용을 선택하고 적용을 클릭합니다. 3단계의 경우 마이크로튜블러 역학 분류를 트랙 분석 방법으로 선택하고 설정 단추를 통해 매개변수를 정의합니다.영화의 시작과 끝에 트랙을 제거하고 통계 히스토그램을 만들기 위해 상자를 선택합니다. 드롭다운 목록에서 전방 간격 전에 2~3프레임, 전방 갭 속도 분포의 95번째 백분위수를 사용하여 앞뒤로 재분류할 수 있습니다. 모든 매개 변수가 정의되면 모든 동영상에 확인/선택 취소를 선택하고 컨트롤 창 U-track 창에서 모든 동영상 상자를 실행한 다음 실행을 누릅니다.동영상 처리가 완료되면 메시지가 표시됩니다. pEB3-tdTomato 플라스미드는 HeLa 세포에서 일시적으로 발현되었다. 세포는 DME 처리와 동기화되었습니다.미세수염 성장의 시간 경과 영화를 분석하고, 결과 성장 속도와 역학을 플롯했다. 최대 갭 길이 및 최대 수축 계수와 같은 분석에 영향을 미치는 매개 변수는 동일한 시간 경과 동영상 집합에 대해 수정되었습니다. 성장 속도와 역학의 해당 값을 계산했습니다.결과 성장 속도는 크게 영향을 받지 는 않았지만 최대 갭 길이가 수정되었을 때 역학이 달랐습니다. 세 가지 경우 모두, 마이크로튜블러 서브트랙의 검출은 유사했지만, 최대 갭 길이가 15로 설정되었을 때 전체 MT 궤적의 재구성은 대부분 영향을 받았다. 이미징 조건이 미세투하 거동을 방해했는지 여부를 평가하기 위해 타임랩스 시리즈의 첫 번째 및 두 번째 반쪽을 별도로 분석하고 해당 성장 속도 및 역학을 비교했습니다.예상대로, 중요한 차이점이 감지되지 않았습니다. 세포가 프로메타단계에서 동기화되기 때문에 미세 투덜의 밀도가 매우 높다는 것을 명심하는 것이 중요합니다. 따라서 다른 마이크로튜블러를 잘못 식별하지 말고 분석의 매개 변수를 매우 신중하게 설정해야 합니다.이 방법을 사용한 미세 tubule 역학의 측정은 마이크로 튜블러를 직접, 간접적으로 조절하는 다른 생물학적 표적의 연구와 비교할 수 있습니다.

Research

JoVE Journal

Biology

In vivo Micro-circulation Measurement in Skeletal Muscle by Intra-vital Microscopy

내부 핵심 현미경에 의해 골격근의 생체내 미세 순환 측정

BACKGROUND: Regulatory factors and detailed physiology of in vivo microcirculation have remained not fully clarified after many different modalities of ...

연구

생물학

Studying Mitotic Checkpoint by Illustrating Dynamic Kinetochore Protein Behavior and Chromosome Motion in Living Drosophila Syncytial Embryos

Studying Mitotic Checkpoint by Illustrating Dynamic Kinetochore Protein Behavior and Chromosome Motion in Living Drosophila Syncytial Embryos

생활에서 보여주는 동적 Kinetochore 단백질 행동과 염색체 모션으로 Mitotic 검사 점 유학<em&gt; Drosophila</em&gt; Syncytial 태아

The spindle assembly checkpoint (SAC) mechanism is an active signal, which monitors the interaction between chromosome kinetochores and spindle ...

Live Cell Imaging of Primary Rat Neonatal Cardiomyocytes Following Adenoviral and Lentiviral Transduction Using Confocal Spinning Disk Microscopy

차 쥐 신생아 심근 라이브 셀 이미징은 아데노 바이러스 다음과 렌티 바이러스 형질 도입은 공 초점 현미경 디스크를 회전시키는 사용

Primary rat neonatal cardiomyocytes are useful in basic in vitro cardiovascular research because they can be easily isolated in large numbers in a single ...

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

성인 마우스 두개골 골수에서 조혈 줄기 및 전구 세포의 생체 내 4 차원 추적에서

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

Using plusTipTracker Software to Measure Microtubule Dynamics in Xenopus laevis Growth Cones

Using plusTipTracker Software to Measure Microtubule Dynamics in Xenopus laevis Growth Cones

에 미세 소관 역학을 측정하는 plusTipTracker 소프트웨어를 사용<em&gt; 운송에 필요한 정보 미국 교통부</em&gt; 성장 콘

Microtubule (MT) plus-end-tracking proteins (+TIPs) localize to the growing plus-ends of MTs and regulate MT dynamics1,2. One of the most well-known and ...

High-resolution Time-lapse Imaging and Automated Analysis of Microtubule Dynamics in Living Human Umbilical Vein Endothelial Cells

고해상도 시간 경과 이미징 및 생활 인간 제대 정맥 내피 세포의 미세 소관 역학의 자동 분석

The physiological process by which new vasculature forms from existing vasculature requires specific signaling events that trigger morphological changes ...

Reconstitution of Basic Mitotic Spindles in Spherical Emulsion Droplets

구형 에멀젼 방울의 기본 유사 분열 스핀들의 재구성

Mitotic spindle assembly, positioning and orientation depend on the combined forces generated by microtubule dynamics, microtubule motor proteins and ...

Simultaneous Measurement of Mitochondrial Calcium and Mitochondrial Membrane Potential in Live Cells by Fluorescent Microscopy

형광 현미경으로 살아있는 세포의 잠재적 인 미토콘드리아의 칼슘과 미토콘드리아 막의 동시 측정

Apart from their essential role in generating ATP, mitochondria also act as local calcium (Ca2+) buffers to tightly regulate intracellular Ca2+ ...

High-resolution Imaging and Analysis of Individual Astral Microtubule Dynamics in Budding Yeast

고해상도 이미징 및 개인 별이 미세 소관 역학의 분석 신진 효모에서

Dynamic microtubules are fundamental to many cellular processes, and accurate measurements of microtubule dynamics can provide insight into how cells ...

Examination of Mitotic and Meiotic Fission Yeast Nuclear Dynamics by Fluorescence Live-cell Microscopy

형광 라이브 세포 현미경 검사법에 의한 미토틱 및 Meiotic 핵분열 효모 핵 역학의 검사

Live-cell imaging is a microscopy technique used to examine cell and protein dynamics in living cells. This imaging method is not toxic, generally does ...