Name: design of a biocompatible drug-eluting tracheal stent in mice with laryngotracheal stenosis
Uploaded: 2020-01-21T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Design of a Biocompatible Drug-Eluting Tracheal Stent in Mice with Laryngotracheal Stenosis at JoVE.com

Nationale Institut for døvhed og andre kommunikationsforstyrrelser i de nationale institutter for sundhed under Award numre 1K23DC014082 og 1R21DC017225 (Alexander Hillel). Denne undersøgelse blev også støttet finansielt af det Triologiske samfund og American College of kirurger (Alexander Hillel), American Medical Association Foundation, Chicago, IL (Madhavi Duvvuri) og et T32 NIDCD Training Grant (Kevin Motz).

Bemærk: alle metoder, der er beskrevet her, blev godkendt af Johns Hopkins University Animal Care og use Committee (MO12M354).
1. klargøring af Rapamycin i PLLA-PCL
<ol><li>Forbered to hætteglas (med hætter) på 70:30 PLLA-PCL-polymer opløsninger (iboende viskositet 1,3 − 1,8 DL/G; Tabel over materialer) med et hætteglas, der indeholder 1,0% Rapamycin og den anden uden Rapamycin.<ol>
<li>Lav en 1,0% Rapamycin-indeholdende polymeropløsning ved at tilføje 6 mg Rapamy...

<ol>
	<li>Minnigerode, B., Richter, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology+of+subglottic+tracheal+stenosis+in+childhood.">Pathophysiology of subglottic tracheal stenosis in childhood.</a> Progress in Pediatric Surgery. 21, 1-7 (1987).</li><li>Wynn, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibrotic+disease+and+the+T(H)1/T(H)2+paradigm.">Fibrotic disease and the T(H)1/T(H)2 paradigm.</a> Nature Reviews Immunology. 4 (8), 583-594 (2004).</li><li>Kaplan, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systemic+Toxicity+Following+Administration+of+Sirolimus+(formerly+Rapamycin)+for+Psoriasis.">Systemic Toxicity Following Administration of Sirolimus (formerly Rapamycin) for Psoriasis.</a> Archives of Dermatology. 135 (5), 553-557 (1999).</li><li>Kalra, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New-Generation+Coronary+Stents:+Current+Data+and+Future+Directions.">New-Generation Coronary Stents: Current Data and Future Directions.</a> Currrent Atherosclerosis Reports. 19 (3), 14 (2017).</li><li>Chao, Y. K., Liu, K. S., Wang, Y. C., Huang, Y. L., Liu, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biodegradable+cisplatin-eluting+tracheal+stent+for+malignant+airway+obstruction:+in+vivo+and+in+vitro+studies.">Biodegradable cisplatin-eluting tracheal stent for malignant airway obstruction: in vivo and in vitro studies.</a> Chest. 144 (1), 193-199 (2013).</li><li>Duvvuri, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineering+an+immunomodulatory+drug-eluting+stent+to+treat+laryngotracheal+stenosis.">Engineering an immunomodulatory drug-eluting stent to treat laryngotracheal stenosis.</a> Biomaterials Science. 7 (5), 1863-1874 (2019).</li><li>Mugru, S. D., Colt, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complications+of+silicone+stent+insertion+in+patients+with+expiratory+central+airway+collapse.">Complications of silicone stent insertion in patients with expiratory central airway collapse.</a> Annals of Thoracic Surgery. 84 (6), 1870-1877 (2007).</li><li>Hillel, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+in+situ,+in+vivo+murine+model+for+the+study+of+laryngotracheal+stenosis.">An in situ, in vivo murine model for the study of laryngotracheal stenosis.</a> JAMA Otolaryngolology Head Neck Surgery. 140 (10), 961-966 (2014).</li><li>Can, E., Udenir, G., Kanneci, A. I., Kose, G., Bucak, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigation+of+PLLA/PCL+blends+and+paclitaxel+release+profiles.">Investigation of PLLA/PCL blends and paclitaxel release profiles.</a> AAPS PharmSciTech. 12 (4), 1442-1453 (2011).</li><li>Wang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paclitaxel+Drug-eluting+Tracheal+Stent+Could+Reduce+Granulation+Tissue+Formation+in+a+Canine+Model.">Paclitaxel Drug-eluting Tracheal Stent Could Reduce Granulation Tissue Formation in a Canine Model.</a> Chinese Medical Journal (Engl). 129 (22), 2708-2713 (2016).</li><li>Sigler, M., Klotzer, J., Quentin, T., Paul, T., Moller, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stent+implantation+into+the+tracheo-bronchial+system+in+rabbits:+histopathologic+sequelae+in+bare+metal+vs.+drug-eluting+stents.">Stent implantation into the tracheo-bronchial system in rabbits: histopathologic sequelae in bare metal vs. drug-eluting stents.</a> Molecularand Cellular Pediatrics. 2 (1), 10 (2015).</li><li>Robey, T. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+internal+bioabsorbable+PLGA+"finger-type"+stents+in+a+rabbit+tracheal+reconstruction+model.">Use of internal bioabsorbable PLGA "finger-type" stents in a rabbit tracheal reconstruction model.</a> Archives of Otolaryngology Head Neck Surgery. 126 (8), 985-991 (2000).</li></ol>

De mest kritiske trin for vellykket konstruktion og anvendelse af en Drug-eluting stent in vivo er 1) bestemmelse af den optimale plla-PCL ratio for den ønskelige Drug elueringsrate, 2) bestemmelse af passende koncentration af lægemiddel, der skal eluppes, 3) støbning af stenter omkring angiocatheter til in vivo-brug og 4) transorally levere stenten til musene efter LTS-induktion uden at forårsage dødelig luftvejsobstruktion.
Mens der er flere metoder til levering af lægemidler ved hjæl...

Laryngotracheal stenose (LTS) er en patologisk indsnævring af luftrøret oftest på grund af iatrogen Post-intubation skade. Kombinationen af bakteriel kolonisering, fremmedlegeme respons på en trakeostomi eller endotracheal tubus tube, og patient-specifikke faktorer fører til en afvigende inflammatorisk respons. Denne Maladaptive immunrespons fører til aflejring af kollagen i luftrøret, hvilket resulterer i luminale indsnævring af luftrør og efterfølgende stenose1,2. Som Aktuel behandling for denne sygdom er primært kirurgisk, udvikle en alternativ medicinsk baseret behandling paradigme rettet mod de afvigende inflammatoriske og profibrotiske veje, der fører til overdreven kollagen deposition er blevet undersøgt. Rapamycin, som hæmmer mTOR signalering kompleks, har vist sig at have Immunsuppressive virkninger samt en robust antifibroblast effekt. Men, når Rapamycin er systemisk administreret, almindelige bivirkninger (f. eks hyperlipidæmi, anæmi, trombocytopeni) kan udtales3. Formålet med vores metodologi er at udvikle et køretøj til lokal lægemiddel levering, der er praktisk muligt til brug i luftvejene, som ville mindske disse systemiske virkninger. Vores vurderinger fokuserer på at undersøge det lokale immunrespons på lægemiddel leverings konstruktionen samt dets evne til at hæmme fibroblast funktion og ændre det lokale immun mikromiljø. Sygdomsspecifikke resultater omfatter in vivo-testning, der evaluerer markører for fibrose.
Biologisk nedbrydelige stoffer, der elueret, er blevet anvendt i dyre sygdomsmodeller i flere organ systemer, herunder luftvejene4. Til håndtering af luftvejs stenose eller kollaps har tidligere undersøgelser brugt stof belagt silikone og nikkelbaserede stenter5. En PLLA-PCL-konstruktion blev valgt til denne særlige metode på grund af stoffets elueringsprofil og mekaniske styrke under fysiologiske forhold over en periode på 3 uger, hvilket er blevet påvist i tidligere offentliggjorte undersøgelser6. PLLA-PCL er også et biokompatibelt og biologisk nedbrydeligt materiale, der allerede er godkendt af FDA4. Biokompatible stenter elutering af Cisplatin og MMC er blevet undersøgt i store dyremodeller som kaniner og hunde. I disse dyremodeller blev stenter imidlertid ikke anbragt i en dyre sygdomsmodel og blev implanteret transcervically. Denne undersøgelse giver en unik metode til vurdering af en biokompatibel Drug-eluting stent placeret transorally i en musemodel af luftvejs skader og laryngotracheal stenose. En biokompatibel stent, der elutter en immunmodulerende lægemiddel lokalt og kan miniaturiserede for undersøgelse i en murine model er værdifuld for Translationel præklinisk forskning. Tidligere forsøg på stent udnyttelse med andre materielle konstruktioner genereret robuste fremmedlegeme svar forværret den underliggende inflammation, der skelner LTS7. Denne metode, til vores viden, er den første af sin art til at studere immunmodulerende og anti fibrotiske virkninger af en stent-baserede Drug delivery system i en murine model af LTS. Den murine model selv giver flere fordele for at studere virkningerne af en immunmodulerende stof på luftrøret. Genetisk modificerede mus og eksperimentelle kohorter af raske og syge mus kan undersøgt, hvilket kan føre til eksperimentel reproducerbarhed og forbedre omkostningseffektiviteten. Desuden efterligner leveringen af stenten transorally i muse luftrøret klinisk levering af en sådan stent hos mennesker, hvilket yderligere fremhæver den translationelle fordel ved denne metode. Endelig, den relative lethed, hvormed PLLA-PCL stent med stoffet kan produceres giver mulighed for modifikationer til at levere alternative lægemidler behandlinger med henblik på at reducere ardannelse i luftrøret.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1. For stent</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>22-gauge angiocatheter</td>
			<td>Jelco</td>
			<td>4050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dichloromethane</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>270997-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>56-81-5</td>
			<td>Available from other vendors as well.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDLGA</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>739955-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PLLA-PCL (70 : 30)</td>
			<td>Evonik Industries AG</td>
			<td>65053</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rapamycin</td>
			<td>LC Laboratories</td>
			<td>R-5000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2. Animal surgery</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wire brush</td>
			<td>Mill-Rose Company</td>
			<td>320101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3. For immunohistochemistry staining</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antigen retrival buffer</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab93678</td>
			<td>Available from other vendors as well; acidic pH needed</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Cell Signaling</td>
			<td>8961S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>11965-092</td>
			<td>Available from other vendors as well.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS (Fetal Bovine Serum)</td>
			<td>MilliporeSigma</td>
			<td>F4135-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-rabbit-488 antibody</td>
			<td>Lif technology</td>
			<td>a11008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-rat-633 antibody</td>
			<td>Lif technology</td>
			<td>a21094</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrophilic plus slide</td>
			<td>BSB7028</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>100-10023</td>
			<td>Available from other vendors as well.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit anti-CD3 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab5690</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat antiF4/80 antibody</td>
			<td>Biolengend</td>
			<td>123101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zeiss LSM 510 Meta Confocal Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4. For quantative PCR</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.5mm glass beads</td>
			<td>OMNI International</td>
			<td>19-645</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bead Mill Homoginizer</td>
			<td>OMNI International</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gene Specific Forward/Reverse Primers</td>
			<td>Genomic Resources Core Facility</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanodrop 2000 spectrophotometer</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Power SYBR Green Mastermix</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>4367659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNeasy mini kit</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>80404</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>StepOnePlus Real Time PCR system</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

design of a biocompatible drug-eluting tracheal stent in mice with laryngotracheal stenosis

Laryngotracheal stenose (LTS) er en patologisk forsnævring af subglottis og luftrør, der fører til extrathoracic obstruktion og signifikant kortåndethed. LTS resultater fra slimhinde skade fra et fremmedlegeme i luftrøret, fører til vævsskade og en lokal inflammatorisk respons, der går skævt, fører til aflejring af patologisk arvæv. Behandling for LTS er kirurgisk på grund af manglen på effektive medicinske terapier. Formålet med denne metode er at konstruere en biokompatibel stent, der kan miniaturiserede at placere i mus med LTS. Vi påviste, at en PLLA-PCL (70% poly-L-lactide og 30% polycaprolactone) konstruere havde optimal Biomekanisk styrke, var biokompatibel, praktisk anvendelig til en in vivo placering stent, og i stand til at eluere stof. Denne metode giver et lægemiddel levering system til afprøvning af forskellige immunmodulerende agenter til lokalt hæmme inflammation og reducere luftvejs fibrose. Fremstilling af stenter tager 28 − 30 h og kan gengives nemt, giver mulighed for eksperimenter med store kohorter. Her inkorporerede vi lægemidlet Rapamycin i stent for at teste dets effektivitet i at reducere fibrose og kollagen deposition. Resultaterne afslørede, at PLLA-PCL-telte viste pålidelig Rapamycin-frigivelse, var mekanisk stabile under fysiologiske forhold og var biokompatible, hvilket inducerende lille inflammatorisk respons i luftrøret. Desuden reducerede Rapamycin-eluting plla-PCL-stenter ardannelse i luftrøret in vivo.

Den bionedbrydelige PLLA-PCL-stentkonstruktion med Rapamycin anvendt i dette studie var i stand til at eluere Rapamycin på en konsistent og forudsigelig måde under fysiologiske forhold (figur 1). Figur 2 viser plla-PCL-stenten omkring en 22 G angiocatheter til brug i en murine-model af LTS. For at afgøre, om virkningerne af Rapamycin eluering i luftrøret er effektive i formildende fibrose, kan de målte ændringer i Fibrosis-relateret genekspression og mark?...

Watch this Scientific Journal Video about Design of a Biocompatible Drug-Eluting Tracheal Stent in Mice with Laryngotracheal Stenosis at JoVE.com

Design of a Biocompatible Drug-Eluting Tracheal Stent in Mice with Laryngotracheal Stenosis

Laryngotracheal stenose resultater fra patologisk ar deposition, der kritisk indsnævrer trakeal luftvejene og mangler effektive medicinske behandlinger. Ved hjælp af en PLLA-PCL (70% poly-L-lactide og 30% polycaprolactone) stent som et lokalt lægemiddel fremføringssystem, kan potentielle terapier, der tager sigte på at nedsætte ar-spredningen i luftrøret, undersøgt.

Design af en biokompatibel Drug-Eluting tracheal stent i mus med Laryngotracheal stenose

Laryngotracheal stenosis (LTS) is a pathologic narrowing of the subglottis and trachea leading to extrathoracic obstruction and significant shortness of ...

Denne protokol giver os mulighed for at undersøge narkotika-eluting stents i en lille dyremodel af laryngotracheal stenose lade os udnytte genetisk modificerede dyr på en omkostningseffektiv måde. Transoral placering af lægemiddel-eluting luftvejs stent skåner dyrene fra et åbent snit i luftrøret, der repræsenterer en mere klinisk relevant model af laryngotracheal stenose. Denne teknik letter præklinisk undersøgelse af lokale lægemiddelleveringsstrategier til behandling af laryngotracheal stenose.Denne teknik udgør en gennemførlig og effektiv platform for translationel undersøgelse af lægemiddels eluterende luftvejsstents i en lille dyremodel, der kan anvendes til fremtidig undersøgelse i større dyremodeller samt klinisk anvendelse. teknik, især transoral intubation, induktion af luftrør skade, og luftvejene stent placering trin. Visuel demonstration af denne teknisk udfordrende operation er kritisk, da mange af de fine detaljer ikke kan beskrives fuldt ud i ord.For at gøre en 1% rapamycin indeholder polymer opløsning, tilføje seks milligram rapamycin til 600 milligram 70-30 PLLA-PCL i et glas hætteglas. Under en røghætte tilsættes der seks milliliter dichlormethan til rapamycin suppleret og kontrollerer hætteglasset og tilsættes 120 mikroliter glycerol til hvert hætteglas. Hætteglassene skal derefter sættes under, og PLLA-PCL-opløsningen kan homogeniseres i seks til 12 timer ved stuetemperatur.For at skabe en murine luftvejs stent, ved hjælp af sterile materialer og teknik, anvende en milliliter rapamycin suppleret PLLA-PCL opløsning på venøs kanyle af en 22 gauge fluorholdige ethylen propylen baseret angiocatheter mens bremse rotere kateteret. Når alle opløsningen er blevet anvendt, prop den støbte angiokasteter med spidsen af angiocatheter vender nedad og fæstet af kateteret på kanten af et glas Petriskål i en vakuumhætte. Efter 24 timer under vakuum ved stuetemperatur skal katetret forsigtigt vrides og skubbes fra den tørrede stentkonstruktion og kontrollere stenten omkreds for eventuelle fejl, der kan have været opstået under støbningsprocessen.For at hjælpe i visualisering, er det nyttigt at tegne en tynd sort linje ned længden af stenten. Trim hver ende af de støbte stents med fine lige saks, så kanterne er aksiale og bruge saks til at skære hver stent i tre millimeter aksiale segmenter. Derefter indlæses hver tre millimeter stent på et nyt 22 gauge venekateter.For laryngotracheal stenose induktion, efter at have bekræftet en manglende reaktion på tå knivspids, placere den første mus på en kirurgisk platform i liggende position og loop et lille stykke tråd fastgjort til toppen af platformen omkring de centrale fortænder. Fastgør lemmerne til bordet med tape og lav en 1,5 centimeter midterlinje lodret snit i halsen på musen. Del den overliggende thymus og lateralize de to resulterende lapper til at visualisere luftrøret.Del de overliggende sternohyoid og sternothyroid muskler på den overlegne vedhæftet fil bilateralt og passere en 22 gauge angiocatheter transorally gennem strubehovedet i luftrøret. Brug små hæceser, tryk på den forreste strubehoved af musen til at hjælpe med den korrekte placering af kateteret. En korrekt placeret angiokatteri kan visualiseres ved sin hvide farve gennem luftrøret.For at fremkalde skaden skal du passere en Bleomycin-belagt stålbørste gennem det indsatte angiokasteter og langsomt trække kateteret tilbage, så kun stålbørsten forbliver i luftrøret. Brug fine scepinces, anvende modtryk på luftrøret til mekanisk forstyrre trakeal lumen med børsten, før du genindsætte kateteret i luftrøret over børsten. Fjern trådbørsten, og anvend Bleomycin igen, før du sætter og fjerner børsten fire gange mere, som det netop er påvist.Efter sidste Bleomycin påføring fjernes kateteret fra luftrøret. Ved transoral placering af en PLLA-PCL skal det sikres, at der er indbygget en tynd sort lodret linje i hver stent og transoralt intuberere musen med den forudindlæste angiokatteri. Stenten skal visualiseres i luftrøret gennem transcervikalt snit.Når stenten er på plads, skal du bruge fine kraftpind til at tage let, men forsigtigt gribe luftrøret gennem snittet for at holde stenten på plads og fjerne kateteret. Det er afgørende at placere stenten så omhyggeligt som muligt. For meget pres på luftrøret vil resultere i sammenbrud af stenten forårsager luftvejsobstruktion og død for dyret.Luk snittet med væv lim eller absorberbare 4-0 kromiske suturer, der anvendes her og lad musen til at komme sig med overvågning, før du returnerer dyret til sit hjem bur. På passende eksperimentelle endepunkt, placere musen af interesse i liggende position på den kirurgiske platform og bruge fine buede iris saks til at genåbne snittet. Udsæt luftrøret som påvist, og brug saksen til at opdele det distale luftrør under stentens niveau.Dernæst opdele proksimale luftrør under strubehovedet og over stenten og adskille den delte luftrør fra spiserøret posteriort. Fjern derefter stenten fra luftrøret og fastgør luftrøret i 10% formalin i 24 timer. Den biologisk nedbrydelige rapamycin-lastet PLLA-PCL stentkonstruktion, der anvendes i denne undersøgelse, er i stand til at eluting rapamycin på en konsekvent og forudsigelig måde under fysiologiske forhold.I dette billede kan den miniaturiserede biokomplicerede stent observeres in situ i luftrøret som angivet ved den sorte markør på stenten visualiseret gennem den gennemskinnelige muserør. Efter 21 dage kan den sorte farvestofmarkør bruges til at bekræfte opretholdelsen af stentpositionen i luftrøret. Biokompatibilitetstest ved hjælp af immunfluorescerende farvning for markører for akut og kronisk inflammation viser, at PLLA-PCL stentkonstruktionen ikke er immunoraktiv som bestemt af det minimale antal immunceller, der er til stede efter anbringelse i mangel af skade.Manipulation af luftvejene i en delikat og atramatisk måde er afgørende for succes i proceduren. Overdreven kraft, flere intubationer, og stent sammenbrud kan føre til dyrs død. Efter behandling med rapamycin-eluterende stent kan der udføres vurdering af overlevelse, genekspression via kvantitativ pcr i realtid, immunoassay, herunder flowcytometri, ELISA og immunhistokkemi.Da det giver en vellykket platform for narkotika elution i en musemodel, denne teknik baner vejen for fremtidige undersøgelser af lokalt anvendte terapeutiske i laryngotracheal stenose. Dichlormethan er en ætsende væske. Sørg altid for at bruge en røghætte, personlige værnemidler og ikke-ætsende materialer

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Monitoring the Wall Mechanics During Stent Deployment in a Vessel

Overvågning af Wall Mekanik Under Stent Deployment i en beholder

Clinical trials have reported different restenosis rates for various stent designs1. It is speculated that stent-induced strain concentrations on the ...

Design of a Biaxial Mechanical Loading Bioreactor for Tissue Engineering

Design af en Biaksial Mekanisk Loading bioreaktor for Tissue Engineering

We  designed a loading device that is capable of applying uniaxial or biaxial  mechanical strain to a tissue engineered biocomposites fabricated for  ...

Experimental Investigation of Secondary Flow Structures Downstream of a Model Type IV Stent Failure in a 180&#176; Curved Artery Test Section

Experimental Investigation of Secondary Flow Structures Downstream of a Model Type IV Stent Failure in a 180Ãƒâ€šÃ‚Â° Curved Artery Test Section

Eksperimentel undersøgelse af Sekundære Flow Structures Downstream af en model type IV Stent Fejl i en 180 ° Buet Artery Test Sektion

The arterial network in the human vasculature comprises of ubiquitously present blood vessels with complex geometries (branches, curvatures and ...

Ferromagnetic Bare Metal Stent for Endothelial Cell Capture and Retention

Ferromagnetisk Bare Metal Stent for Endothelial Cell Capture og Retention

Rapid endothelialization of cardiovascular stents is needed to reduce stent thrombosis and to avoid anti-platelet therapy which can reduce bleeding risk. ...

Automated Robotic Liquid Handling Assembly of Modular DNA Devices

Automatiseret robot flydende håndtering forsamling af modulære DNA enheder

Recent advances in modular DNA assembly techniques have enabled synthetic biologists to test significantly more of the available &#34;design space&#34; ...

Synthesis of Biocompatible Liquid Crystal Elastomer Foams as Cell Scaffolds for 3D Spatial Cell Cultures

Syntese af Biokompatible Liquid Crystal Elastomer Skum som Cell Stilladser til 3D Spatial Cell Cultures

Here, we present a step-by-step preparation of a 3D, biodegradable, foam-like cell scaffold. These scaffolds were prepared by cross-linking star block ...

Anatomically Realistic Neonatal Heart Model for Use in Neonatal Patient Simulators

Anatomisk realistisk Neonatal hjerte Model til brug i Neonatal Patient simulatorer

Neonatal patient simulators (NPS) are artificial patient surrogates used in the context of medical simulation training. Neonatologists and nursing staff ...

Repressing Gene Transcription by Redirecting Cellular Machinery with Chemical Epigenetic Modifiers

Undertrykke gen transskription ved at omdirigere cellulære maskiner med kemiske epigenetiske modifikatorer

Regulation of chromatin compaction is an important process that governs gene expression in higher eukaryotes. Although chromatin compaction and gene ...

Design and Synthesis of a Reconfigurable DNA Accordion Rack

Design og syntese af en omkonfigurerbare DNA harmonika Rack

DNA nanostructure-based mechanical systems or DNA nanomachines, which produce complex nanoscale motion in 2D and 3D in the nanometer to &#229;ngstr&#246;m ...

Seeding and Implantation of a Biosynthetic Tissue-engineered Tracheal Graft in a Mouse Model

Såning og Implantation af en biosyntetiske væv-manipuleret trakeal Graft i en musemodel

Treatment options for congenital or secondary long segment tracheal defects have historically been limited due to an inability to replace functional ...