Name: design of a biocompatible drug-eluting tracheal stent in mice with laryngotracheal stenosis
Uploaded: 2020-01-21T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Design of a Biocompatible Drug-Eluting Tracheal Stent in Mice with Laryngotracheal Stenosis at JoVE.com

National Institute på døvhet og andre kommunikasjons forstyrrelser av National Institutes of Health under prisen tall 1K23DC014082 og 1R21DC017225 (Alexander Hillel). Denne studien ble også økonomisk støttet av Triological Society og American College of kirurger (Alexander Hillel), American Medical Association Foundation, Chicago, IL (Madhavi Duvvuri) og en T32 NIDCD trening stipend (Kevin Motz).

Merk: alle metoder beskrevet her ble godkjent av Johns Hopkins University Animal Care og use Committee (MO12M354).
1. utarbeidelse av Rapamycin i PLLA-PCL
<ol><li>Forbered to hetteglass (med caps) av 70:30 PLLA-PCL polymer løsninger (iboende viskositet 1.3 − 1,8 DL/G; Tabell med materialer) løsninger, med ett hetteglass som inneholder 1,0% Rapamycin og den andre uten Rapamycin.<ol>
<li>Lag en 1,0% Rapamycin som inneholder polymer løsning ved å tilsette 6 mg Rapamycin t...

<ol>
	<li>Minnigerode, B., Richter, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology+of+subglottic+tracheal+stenosis+in+childhood.">Pathophysiology of subglottic tracheal stenosis in childhood.</a> Progress in Pediatric Surgery. 21, 1-7 (1987).</li><li>Wynn, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibrotic+disease+and+the+T(H)1/T(H)2+paradigm.">Fibrotic disease and the T(H)1/T(H)2 paradigm.</a> Nature Reviews Immunology. 4 (8), 583-594 (2004).</li><li>Kaplan, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systemic+Toxicity+Following+Administration+of+Sirolimus+(formerly+Rapamycin)+for+Psoriasis.">Systemic Toxicity Following Administration of Sirolimus (formerly Rapamycin) for Psoriasis.</a> Archives of Dermatology. 135 (5), 553-557 (1999).</li><li>Kalra, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New-Generation+Coronary+Stents:+Current+Data+and+Future+Directions.">New-Generation Coronary Stents: Current Data and Future Directions.</a> Currrent Atherosclerosis Reports. 19 (3), 14 (2017).</li><li>Chao, Y. K., Liu, K. S., Wang, Y. C., Huang, Y. L., Liu, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biodegradable+cisplatin-eluting+tracheal+stent+for+malignant+airway+obstruction:+in+vivo+and+in+vitro+studies.">Biodegradable cisplatin-eluting tracheal stent for malignant airway obstruction: in vivo and in vitro studies.</a> Chest. 144 (1), 193-199 (2013).</li><li>Duvvuri, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineering+an+immunomodulatory+drug-eluting+stent+to+treat+laryngotracheal+stenosis.">Engineering an immunomodulatory drug-eluting stent to treat laryngotracheal stenosis.</a> Biomaterials Science. 7 (5), 1863-1874 (2019).</li><li>Mugru, S. D., Colt, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complications+of+silicone+stent+insertion+in+patients+with+expiratory+central+airway+collapse.">Complications of silicone stent insertion in patients with expiratory central airway collapse.</a> Annals of Thoracic Surgery. 84 (6), 1870-1877 (2007).</li><li>Hillel, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+in+situ,+in+vivo+murine+model+for+the+study+of+laryngotracheal+stenosis.">An in situ, in vivo murine model for the study of laryngotracheal stenosis.</a> JAMA Otolaryngolology Head Neck Surgery. 140 (10), 961-966 (2014).</li><li>Can, E., Udenir, G., Kanneci, A. I., Kose, G., Bucak, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigation+of+PLLA/PCL+blends+and+paclitaxel+release+profiles.">Investigation of PLLA/PCL blends and paclitaxel release profiles.</a> AAPS PharmSciTech. 12 (4), 1442-1453 (2011).</li><li>Wang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paclitaxel+Drug-eluting+Tracheal+Stent+Could+Reduce+Granulation+Tissue+Formation+in+a+Canine+Model.">Paclitaxel Drug-eluting Tracheal Stent Could Reduce Granulation Tissue Formation in a Canine Model.</a> Chinese Medical Journal (Engl). 129 (22), 2708-2713 (2016).</li><li>Sigler, M., Klotzer, J., Quentin, T., Paul, T., Moller, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stent+implantation+into+the+tracheo-bronchial+system+in+rabbits:+histopathologic+sequelae+in+bare+metal+vs.+drug-eluting+stents.">Stent implantation into the tracheo-bronchial system in rabbits: histopathologic sequelae in bare metal vs. drug-eluting stents.</a> Molecularand Cellular Pediatrics. 2 (1), 10 (2015).</li><li>Robey, T. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+internal+bioabsorbable+PLGA+"finger-type"+stents+in+a+rabbit+tracheal+reconstruction+model.">Use of internal bioabsorbable PLGA "finger-type" stents in a rabbit tracheal reconstruction model.</a> Archives of Otolaryngology Head Neck Surgery. 126 (8), 985-991 (2000).</li></ol>

De mest kritiske trinnene for vellykket bygging og bruk av et medikament-tent stent in vivo er 1) å bestemme den optimale PLLA-PCL-forholdet for ønskelig medikament eluering rate, 2) å bestemme den aktuelle konsentrasjonen av stoffet å være eluert, 3) molding stents rundt angiocatheter for in vivo-bruk, og 4) transoralt å levere stent til musene etter at LTS-induksjon uten å forårsake hindring av dødelig luftveier.
Mens det er flere metoder for narkotika levering bruker stents i dyrem...

Laryngotracheal stenose (LTS) er en patologisk innsnevring av luftrøret oftest på grunn av iatrogenic etter intubering Kader. Kombinasjonen av bakteriell kolonisering, fremmedlegeme respons på en trakeostomi eller endotrakeal tube, og pasientspesifikke faktorer fører til en avvikende inflammatorisk respons. Denne mistilpasset immunresponsen fører til deponering av kollagen i luftrøret, noe som resulterer i luminal innsnevring av luftrøret og påfølgende stenose1,2. Som dagens behandling for denne sykdommen er primært kirurgisk, utvikle et alternativ medisinsk-basert behandling paradigme rettet mot avvikende inflammatoriske og profibrotic trasé som fører til overdreven kollagen deponering har blitt studert. Rapamycin, som hemmer mTOR signalering kompleks, har vist å ha immunsuppressiv effekter, samt en robust antifibroblast effekt. Men når Rapamycin er systemisk administreres, vanlige bivirkninger (f. eks, hyperlipidemi, anemi, trombocytopeni) kan uttales3. Hensikten med vår metodikk er å utvikle et redskap for lokal narkotika levering praktisk mulig for bruk i luftveiene som vil minske disse systemiske effektene. Våre vurderinger fokus på å undersøke den lokale immunresponsen til stoffet levering konstruere så vel som sin evne til å hemme Fibroblast funksjon og endre den lokale immun mikromiljøet. Sykdomsspesifikke utfall inkluderer in vivo testing som evaluerer markører for fibrose.
Biologisk nedbrytbart narkotika-tent stents har blitt brukt i dyremodeller av sykdom i flere organsystemer, inkludert luftveiene4. For håndtering av luftveis stenose eller kollaps, tidligere undersøkelser har brukt stoff-belagt silikon og nikkel-baserte stents5. En PLLA-PCL-konstruksjon ble valgt for denne spesielle metoden på grunn av sin narkotika eluering profil og mekaniske styrke i fysiologiske forhold over en periode på 3 uker, som har blitt demonstrert i tidligere publiserte studier6. PLLA-PCL er også et biokompatible og biologisk nedbrytbart materiale som allerede er godkjent av FDA4. Biokompatible stents tent Cisplatin og MMC har blitt studert i store dyremodeller som kaniner og hunder. Imidlertid, inne disse dyr modeller, stents var ikke oppstilt inne en dyr modell av sykdommen og var implantert transcervically. Denne studien gir en unik metode for å vurdere en biokompatible narkotika-tent stent plassert transoralt i en mus modell av luftveis skade og laryngotracheal stenose. En biokompatible stent som elutes et immunmodulerende stoff lokalt og kan bli miniatyriserte for studier i en murine modell er verdifullt for translational prekliniske forskning. Tidligere forsøk på stent utnyttelse med andre materielle konstruksjoner generert robuste utenlandske kroppen responser forverre den underliggende betennelsen som skiller LTS7. Denne metodikken, til vår kunnskap, er den første i sitt slag for å studere immunmodulerende og antifibrotic virkningene av et stent legemiddel leveringssystem i en murine modell av LTS. Den murine modellen selv tilbyr flere fordeler for å studere virkningene av et immunmodulerende stoff på luftrøret. Genmodifiserte mus og eksperimentelle kohorter av friske og syke mus kan bli studert, som kan føre til eksperimentell reproduserbarhet og bedre kostnadseffektivitet. Dessuten, leveringen av stent transoralt inn i musen luftrøret etterligner klinisk leveranse av slik en stent inne human, hvilke fremme høydepunkt det translational fordel av denne metoden. Til slutt, den relative letthet som PLLA-PCL stent med stoffet kan produseres tillater modifikasjoner for å levere alternative medikament terapi sikte på å redusere arrdannelse i luftrøret.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1. For stent</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>22-gauge angiocatheter</td>
			<td>Jelco</td>
			<td>4050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dichloromethane</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>270997-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>56-81-5</td>
			<td>Available from other vendors as well.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDLGA</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>739955-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PLLA-PCL (70 : 30)</td>
			<td>Evonik Industries AG</td>
			<td>65053</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rapamycin</td>
			<td>LC Laboratories</td>
			<td>R-5000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2. Animal surgery</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wire brush</td>
			<td>Mill-Rose Company</td>
			<td>320101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3. For immunohistochemistry staining</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antigen retrival buffer</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab93678</td>
			<td>Available from other vendors as well; acidic pH needed</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Cell Signaling</td>
			<td>8961S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>11965-092</td>
			<td>Available from other vendors as well.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS (Fetal Bovine Serum)</td>
			<td>MilliporeSigma</td>
			<td>F4135-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-rabbit-488 antibody</td>
			<td>Lif technology</td>
			<td>a11008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-rat-633 antibody</td>
			<td>Lif technology</td>
			<td>a21094</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrophilic plus slide</td>
			<td>BSB7028</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>100-10023</td>
			<td>Available from other vendors as well.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit anti-CD3 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab5690</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat antiF4/80 antibody</td>
			<td>Biolengend</td>
			<td>123101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zeiss LSM 510 Meta Confocal Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4. For quantative PCR</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.5mm glass beads</td>
			<td>OMNI International</td>
			<td>19-645</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bead Mill Homoginizer</td>
			<td>OMNI International</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gene Specific Forward/Reverse Primers</td>
			<td>Genomic Resources Core Facility</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanodrop 2000 spectrophotometer</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Power SYBR Green Mastermix</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>4367659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNeasy mini kit</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>80404</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>StepOnePlus Real Time PCR system</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

design of a biocompatible drug-eluting tracheal stent in mice with laryngotracheal stenosis

Laryngotracheal stenose (LTS) er en patologisk innsnevring av subglottis og luftrøret som fører til extrathoracic obstruksjon og betydelig kortpustethet. LTS resultater fra slimhinne skade fra et fremmedlegeme i luftrøret, noe som fører til vevskader og en lokal inflammatorisk respons som går galt, fører til deponering av patologisk arr vev. Behandling for LTS er kirurgisk på grunn av mangel på effektiv medisinsk behandling. Hensikten med denne metoden er å konstruere en biokompatible stent som kan være miniatyriserte å plassere i mus med LTS. Vi viste at en PLLA-PCL (70% Poly-L-laktid og 30% polycaprolactone) konstruere hadde optimal Biomekaniske styrke, var biokompatible, praktisk mulig for en in vivo plassering stent, og i stand til tent narkotika. Denne metoden gir et medikamentlevering system for å teste ulike immunmodulerende agenter til lokalt hemme betennelser og redusere luftveiene fibrose. Fremstilling av stents tar 28 − 30 timer og kan enkelt gjengis, noe som åpner for eksperimenter med store kohorter. Her har vi innarbeidet stoffet Rapamycin innenfor stent å teste sin effektivitet i å redusere fibrose og kollagen deponering. Resultatene avslørte at PLLA-PCL-telt viste pålitelig Rapamycin utgivelse, var mekanisk stabile i fysiologiske forhold, og var biokompatible og inducing lite inflammatorisk respons i luftrøret. Videre har Rapamycin-tent PLLA-PCL-stents redusert arrdannelse i luftrøret in vivo.

Den biologisk nedbrytbare PLLA-PCL-stent konstruere lastet med Rapamycin som ble brukt i denne studien var i stand til å tent Rapamycin på en konsistent og forutsigbar måte i fysiologiske forhold (figur 1). Figur 2 viser PLLA-PCL-stent som er støpt rundt en 22 G angiocatheter for bruk i en murine modell av LTS. For å avgjøre om effekten av Rapamycin eluering i luftrøret er effektiv i demping fibrose, kan målte endringer i fibrose-relaterte genuttrykk og ...

Watch this Scientific Journal Video about Design of a Biocompatible Drug-Eluting Tracheal Stent in Mice with Laryngotracheal Stenosis at JoVE.com

Design of a Biocompatible Drug-Eluting Tracheal Stent in Mice with Laryngotracheal Stenosis

Laryngotracheal stenose resultater fra patologisk arr deponering som kritisk begrenser tracheal luftveiene og mangler effektiv medisinsk behandling. Ved hjelp av en PLLA-PCL (70% Poly-L-laktid og 30% polycaprolactone) stent som et lokalt medikament leveringssystem, kan potensielle terapier som tar sikte på å redusere arr spredning i luftrøret bli studert.

Design av en biokompatible Drug-tent tracheal stent i mus med Laryngotracheal stenose

Laryngotracheal stenosis (LTS) is a pathologic narrowing of the subglottis and trachea leading to extrathoracic obstruction and significant shortness of ...

Denne protokollen lar oss undersøke stoff-eluting stenter i en liten dyremodell av laryngotracheal stenose slik at vi kan utnytte genmodifiserte dyr på en kostnadseffektiv måte. Transoral plassering av den legemiddel-eluting luftveistent sparer dyrene fra et åpent snitt inn i luftrøret som representerer en mer klinisk relevant modell av laryngotracheal stenose. Denne teknikken letter preklinisk undersøkelse av lokale legemiddelleveringsstrategier for å behandle laryngotrakeal stenose.Denne teknikken gir en mulig og effektiv plattform for den translasjonelle undersøkelsen av legemiddeluttående luftveisteter i en liten dyremodell som kan brukes til fremtidig undersøkelse i større dyremodeller samt klinisk anvendelse. teknikk spesielt transoral intubasjon, induksjon av luftrør skade, og luftveiene stent plassering trinn. Visuell demonstrasjon av denne teknisk utfordrende operasjonen er kritisk, da mange av de fine detaljene ikke kan beskrives fullt ut med ord.For å lage en 1% rapamycin som inneholder polymerløsning, tilsett seks milligram rapamycin til 600 milligram 70-30 PLLA-PCL i et hetteglass med glass. Under en røykhette, tilsett seks milliliter diklormetan til rapamycin supplert og kontrollere hetteglasset og legge til 120 mikroliter glyserol til hvert hetteglass. Deretter cap hetteglassene og la PLLA-PCL løsning homogenisere i seks til 12 timer ved romtemperatur.For å lage en murine luftveistent, ved hjelp av sterile materialer og teknikk, bruk en milliliter rapamycin supplert PLLA-PCL-løsning på venøs kanyle av en 22 gauge fluorisert etylenpropylenbasert angiocatheter mens du bremser roterende kateteret. Når all oppløsningen er påført, støtter du det støpte angiocatheteret med spissen av angiocatheteret vendt nedover og hilt av kateteret på kanten av et glass Petriskål i en vakuumhette. Etter 24 timer under vakuum ved romtemperatur vrir du forsiktig og skyver kateteret fra den tørkede stenten og kontroller stenten omkrets eventuelle feil som kan ha forårsaket under støpeprosessen.For å hjelpe til med visualisering, er det nyttig å tegne en tynn svart linje ned lengden på stenten. Trim hver ende av de støpte stentene med fin rett saks slik at kantene er aksiale og bruk saksen til å kutte hver stent i tre millimeter aksiale segmenter. Deretter laster du hver tre millimeter stent på et nytt 22 gauge venøs kateter.For laryngotrakeal stenose induksjon, etter å ha bekreftet mangel på respons på tåklemme, plasser den første musen på en kirurgisk plattform i liggende stilling og sløyfe et lite stykke tråd festet til toppen av plattformen rundt de sentrale fortenner. Fest lemmer til bordet med tape og gjør en 1,5 centimeter midtlinje vertikalt snitt i musens hals. Del den overlying thymus og lateralize de to resulterende fliker for å visualisere luftrøret.Del de overlying sternohyoid og sternothyroid musklene på overlegen vedlegg bilateralt og passere en 22 gauge angiocatheter transoralt gjennom strupehodet inn i luftrøret. Bruk små tang, påfør trykk på musens fremre strupehode for å hjelpe til med riktig plassering av kateteret. En riktig plassert angiocatheter kan visualiseres med sin hvite farge gjennom luftrøret.For å indusere skaden, pass en Bleomycinbelagt trådbørste gjennom det innsatte angiocatheteret og trekk langsomt kateteret langsomt ut slik at bare trådbørsten forblir i luftrøret. Bruk fine tang til å bruke mottrykk på luftrøret for å mekanisk forstyrre trakeallummen med børsten før du setter kateteret inn i luftrøret over børsten. Fjern trådbørsten og påfør Bleomycin på nytt før du setter inn og fjerner børsten fire ganger til som nettopp demonstrert.Etter siste Bleomycin-påføring, fjern kateteret fra luftrøret. For transoral plassering av en PLLA-PCL, sørg for at en tynn svart vertikal linje er innlemmet i hver stent og transoralt intubere musen med forhåndslastet angiocatheter. Stenten skal visualiseres i luftrøret gjennom transcervical snittet.Når stenten er på plass, bruk fine tang for å gripe tak i luftrøret forsiktig gjennom snittet for å holde stenten på plass og fjerne kateteret. Det er viktig å plassere stenten så nøye som mulig. For mye press på luftrøret vil føre til sammenbrudd av stenten forårsaker luftveisobstruksjon og død for dyret.Lukk snittet med vevlim eller absorberbare 4-0 kromosyresuturer som brukes her, og la musen komme seg med overvåking før du returnerer dyret til sitt hjembur. På riktig eksperimentelt endepunkt, plasser musen av interesse i liggende posisjon på den kirurgiske plattformen og bruk fin buet iris saks for å gjenåpne snittet. Utsett luftrøret som demonstrert og bruk saksen til å dele den distale luftrøret under stentens nivå.Deretter deler du den proksimale luftrøret under strupehodet og over stenten og skiller den delte luftrøret fra spiserøret bakre. Fjern deretter stenten fra luftrøret og fest luftrøret i 10% formalin i 24 timer. Den biologisk nedbrytbare rapamycin lastet PLLA-PCL stent konstruksjon som brukes i denne studien er i stand til å eluting rapamycin på en konsekvent og forutsigbar måte under fysiologiske forhold.I dette bildet kan den miniatyriserte biokompatible stenten observeres in situ i luftrøret som indikert av den svarte markøren på stenten visualisert gjennom den gjennomsiktige musetracheaen. Etter 21 dager kan den svarte fargemarkøren brukes til å bekrefte vedlikehold av stentposisjonen i luftrøret. Biokompatibilitetstesting ved hjelp av immunofluorescerende farging for markører for akutt og kronisk betennelse viser at PLLA-PCL-stentkonstruksjonen ikke er immunoraktiv som bestemt av det minimale antallet immunceller tilstede etter plassering i fravær av skade.Manipulering av luftveiene på en delikat og atraumatisk måte er avgjørende for prosedyrens suksess. Overdreven kraft, flere intubasjoner og stentkollaps kan føre til dyredød. Etter behandling med rapamycin-eluting stent, kan vurdering av overlevelse, genuttrykk via kvantitativ sanntids-PCR, immunanalyse inkludert strømningscytometri, ELISA og immunohistokjemi utføres.Som det gir en vellykket plattform for narkotika elution i en musemodell, denne teknikken baner vei for fremtidige undersøkelser av lokalt anvendte terapeutiske midler i laryngotracheal stenose. Dichloromethane er en korroderende væske. Pass på at du alltid bruker en røykhette, personlig verneutstyr og ikke-korrosive materialer

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Monitoring the Wall Mechanics During Stent Deployment in a Vessel

Overvåking veggen Mechanics Under Stent Deployment i en Vessel

Clinical trials have reported different restenosis rates for various stent designs1. It is speculated that stent-induced strain concentrations on the ...

Design of a Biaxial Mechanical Loading Bioreactor for Tissue Engineering

Design av en Biaxial Mekanisk belastning bioreaktor for Tissue Engineering

We  designed a loading device that is capable of applying uniaxial or biaxial  mechanical strain to a tissue engineered biocomposites fabricated for  ...

Experimental Investigation of Secondary Flow Structures Downstream of a Model Type IV Stent Failure in a 180&#176; Curved Artery Test Section

Experimental Investigation of Secondary Flow Structures Downstream of a Model Type IV Stent Failure in a 180Ãƒâ€šÃ‚Â° Curved Artery Test Section

Eksperimentell Undersøkelse av sekundære strøm Structures Nedstrøms av en modell Type IV Stent Svikt i en 180 ° Buet Artery Test Seksjon

The arterial network in the human vasculature comprises of ubiquitously present blood vessels with complex geometries (branches, curvatures and ...

Ferromagnetic Bare Metal Stent for Endothelial Cell Capture and Retention

Ferromagnetisk Bare Metal Stent for endotelcelle Capture og oppbevaring

Rapid endothelialization of cardiovascular stents is needed to reduce stent thrombosis and to avoid anti-platelet therapy which can reduce bleeding risk. ...

Automated Robotic Liquid Handling Assembly of Modular DNA Devices

Automatisert robot flytende håndtering samlingen av modulære DNA enheter

Recent advances in modular DNA assembly techniques have enabled synthetic biologists to test significantly more of the available &#34;design space&#34; ...

Synthesis of Biocompatible Liquid Crystal Elastomer Foams as Cell Scaffolds for 3D Spatial Cell Cultures

Syntese av Biokompatible Liquid Crystal Elastomer Skum som Cell Stillas for 3D Spatial cellekulturer

Here, we present a step-by-step preparation of a 3D, biodegradable, foam-like cell scaffold. These scaffolds were prepared by cross-linking star block ...

Anatomically Realistic Neonatal Heart Model for Use in Neonatal Patient Simulators

Anatomisk realistisk Neonatal hjertet modell for bruk i Neonatal pasienten simulatorer

Neonatal patient simulators (NPS) are artificial patient surrogates used in the context of medical simulation training. Neonatologists and nursing staff ...

Repressing Gene Transcription by Redirecting Cellular Machinery with Chemical Epigenetic Modifiers

Repressing Gene transkripsjon av omadresserer cellulære maskiner med kjemiske Epigenetic modifikatorer

Regulation of chromatin compaction is an important process that governs gene expression in higher eukaryotes. Although chromatin compaction and gene ...

Design and Synthesis of a Reconfigurable DNA Accordion Rack

Design og syntese av en rekonfigurerbare DNA trekkspill Rack

DNA nanostructure-based mechanical systems or DNA nanomachines, which produce complex nanoscale motion in 2D and 3D in the nanometer to &#229;ngstr&#246;m ...

Seeding and Implantation of a Biosynthetic Tissue-engineered Tracheal Graft in a Mouse Model

Såing og implantering av en biosyntetiske vev-konstruert Tracheal pode i en musemodell

Treatment options for congenital or secondary long segment tracheal defects have historically been limited due to an inability to replace functional ...