Name: design of a biocompatible drug-eluting tracheal stent in mice with laryngotracheal stenosis
Uploaded: 2020-01-21T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Design of a Biocompatible Drug-Eluting Tracheal Stent in Mice with Laryngotracheal Stenosis at JoVE.com

Nationella institutet för dövhet och andra kommunikationsstörningar i National Institutes of Health under tilldelning nummer 1K23DC014082 och 1R21DC017225 (Alexander Hillel). Denna studie stöddes också ekonomiskt av det Triologiska sällskapet och American College of kirurger (Alexander Hillel), American Medical Association Foundation, Chicago, IL (Madhavi Duvvuri) och ett T32 NIDCD Training Grant (Kevin Motz).

Anmärkning: alla metoder som beskrivs här godkändes av Johns Hopkins University djuromsorg och användning kommittén (MO12M354).
1. beredning av rapamycin i PLLA-PCL
<ol><li>Förbered två glasflaskor (med lock) av 70:30 PLLA-PCL polymerlösningar (inneboende viskositet 1,3 − 1.8 DL/G; Tabell över material) lösningar, med en injektionsflaska innehållande 1,0% rapamycin och den andra utan rapamycin.<ol>
<li>Gör en 1,0% rapamycin innehållande polymerlösning genom a...

<ol>
	<li>Minnigerode, B., Richter, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology+of+subglottic+tracheal+stenosis+in+childhood.">Pathophysiology of subglottic tracheal stenosis in childhood.</a> Progress in Pediatric Surgery. 21, 1-7 (1987).</li><li>Wynn, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibrotic+disease+and+the+T(H)1/T(H)2+paradigm.">Fibrotic disease and the T(H)1/T(H)2 paradigm.</a> Nature Reviews Immunology. 4 (8), 583-594 (2004).</li><li>Kaplan, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systemic+Toxicity+Following+Administration+of+Sirolimus+(formerly+Rapamycin)+for+Psoriasis.">Systemic Toxicity Following Administration of Sirolimus (formerly Rapamycin) for Psoriasis.</a> Archives of Dermatology. 135 (5), 553-557 (1999).</li><li>Kalra, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New-Generation+Coronary+Stents:+Current+Data+and+Future+Directions.">New-Generation Coronary Stents: Current Data and Future Directions.</a> Currrent Atherosclerosis Reports. 19 (3), 14 (2017).</li><li>Chao, Y. K., Liu, K. S., Wang, Y. C., Huang, Y. L., Liu, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biodegradable+cisplatin-eluting+tracheal+stent+for+malignant+airway+obstruction:+in+vivo+and+in+vitro+studies.">Biodegradable cisplatin-eluting tracheal stent for malignant airway obstruction: in vivo and in vitro studies.</a> Chest. 144 (1), 193-199 (2013).</li><li>Duvvuri, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineering+an+immunomodulatory+drug-eluting+stent+to+treat+laryngotracheal+stenosis.">Engineering an immunomodulatory drug-eluting stent to treat laryngotracheal stenosis.</a> Biomaterials Science. 7 (5), 1863-1874 (2019).</li><li>Mugru, S. D., Colt, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complications+of+silicone+stent+insertion+in+patients+with+expiratory+central+airway+collapse.">Complications of silicone stent insertion in patients with expiratory central airway collapse.</a> Annals of Thoracic Surgery. 84 (6), 1870-1877 (2007).</li><li>Hillel, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+in+situ,+in+vivo+murine+model+for+the+study+of+laryngotracheal+stenosis.">An in situ, in vivo murine model for the study of laryngotracheal stenosis.</a> JAMA Otolaryngolology Head Neck Surgery. 140 (10), 961-966 (2014).</li><li>Can, E., Udenir, G., Kanneci, A. I., Kose, G., Bucak, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigation+of+PLLA/PCL+blends+and+paclitaxel+release+profiles.">Investigation of PLLA/PCL blends and paclitaxel release profiles.</a> AAPS PharmSciTech. 12 (4), 1442-1453 (2011).</li><li>Wang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paclitaxel+Drug-eluting+Tracheal+Stent+Could+Reduce+Granulation+Tissue+Formation+in+a+Canine+Model.">Paclitaxel Drug-eluting Tracheal Stent Could Reduce Granulation Tissue Formation in a Canine Model.</a> Chinese Medical Journal (Engl). 129 (22), 2708-2713 (2016).</li><li>Sigler, M., Klotzer, J., Quentin, T., Paul, T., Moller, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stent+implantation+into+the+tracheo-bronchial+system+in+rabbits:+histopathologic+sequelae+in+bare+metal+vs.+drug-eluting+stents.">Stent implantation into the tracheo-bronchial system in rabbits: histopathologic sequelae in bare metal vs. drug-eluting stents.</a> Molecularand Cellular Pediatrics. 2 (1), 10 (2015).</li><li>Robey, T. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+internal+bioabsorbable+PLGA+"finger-type"+stents+in+a+rabbit+tracheal+reconstruction+model.">Use of internal bioabsorbable PLGA "finger-type" stents in a rabbit tracheal reconstruction model.</a> Archives of Otolaryngology Head Neck Surgery. 126 (8), 985-991 (2000).</li></ol>

De mest kritiska stegen för att framgångsrikt konstruera och använda en Drug-eluting stent in vivo är 1) att fastställa den optimala plla-PCL förhållandet för den önskvärda drogen eluering Rate, 2) bestämma lämplig koncentration av läkemedel för att elueras, 3) gjutning stent runt angiocatheter för in vivo användning, och 4) transoralt leverera stent till möss efter LTS induktion utan att orsaka dödlig luftvägsobstruktion.
Även om det finns flera metoder för läkemedelslev...

Laryngotracheal stenos (LTS) är en patologisk förträngning av luftstrupen oftast på grund av iatrogen efter intubation skada. Kombinationen av bakteriell kolonisering, främmande kropp svar på en trakeostomi eller endotrakealtub, och patientspecifika faktorer leder till en avvikande inflammatorisk reaktion. Detta maladaptiva immunsvar leder till avsättning av kollagen i luftstrupen, vilket resulterar i luminala förträngning av luftstrupen och efterföljande stenos1,2. Eftersom nuvarande behandling för denna sjukdom är främst kirurgisk, utveckla en alternativmedicinskt-baserade behandling paradigm inriktning de avvikande inflammatoriska och profibrotic vägar som leder till överdriven kollagen deposition har studerats. Rapamycin, som hämmar mTOR signal komplex, har visat sig ha immunsuppressiva effekter samt en robust antifibroblast effekt. Emellertid, när rapamycin administreras systemiskt, vanliga biverkningar (t. ex., hyperlipidemi, anemi, trombocytopeni) kan uttalas3. Syftet med vår metodik är att utveckla ett fordon för lokal läkemedelsleverans möjligt för användning i luftvägarna som skulle minska dessa systemiska effekter. Våra bedömningar fokuserar på att undersöka det lokala immunsvaret på drogen leverans konstruktion samt dess förmåga att hämma fibroblast funktion och förändra den lokala immunförsvaret mikromiljö. Sjukdomsspecifika resultat inkluderar in vivo-tester som utvärderar markörer för fibros.
Biologiskt nedbrytbara läkemedel-eluerande stent har använts i djurmodeller av sjukdom i flera organsystem, inklusive luftvägarna4. För hantering av luftvägsstenos eller kollaps, tidigare undersökningar har använt läkemedel belagda silikon och nickel-baserade stent5. En PLLA-PCL-konstruktion valdes för denna speciella metod på grund av dess läkemedelelutionsprofil och mekaniska hållfasthet under fysiologiska förhållanden under en period av 3 veckor, vilket har visats i tidigare publicerade studier6. PLLA-PCL är också ett biokompatibelt och biologiskt nedbrytbart material som redan godkänts av FDA4. Biokompatibla stent elminerande cisplatin och MMC har studerats i stora djurmodeller som kaniner och hundar. Men i dessa djurmodeller, stent inte placerades i en djurmodell av sjukdom och implanterades transcervically. Denna studie ger en unik metod för att bedöma en biokompatibel Drug-eluting stent placeras transperoralt i en musmodell av luftvägs skador och laryngotrakeal stenos. En biokompatibel stent som eluera ett immunmodulerande läkemedel lokalt och kan miniatyriseras för studier i en murin-modell är värdefull för translationell preklinisk forskning. Tidigare försök till stent-användning med andra material konstruktioner genererade robusta reaktioner från främmande kropp förvärrade den underliggande inflammationen som skiljer LTS7. Denna metodik, till vår kännedom, är den första i sitt slag att studera immunmodulerande och antifibrotiska effekter av ett stent-baserat läkemedel leveranssystem i en murin modell av LTS. Den murina modellen själv erbjuder flera fördelar för att studera effekterna av en immunmodulerande läkemedel på luftstrupen. Genetiskt modifierade möss och experimentella kohorter av friska och sjuka möss kan studeras, vilket kan leda till experimentell reproducerbarhet och förbättra kostnadseffektiviteten. Dessutom, leveransen av stent transorally in i musen luftstrupe härmar klinisk leverans av en sådan stent hos människor, vilket ytterligare belyser den translationella fördelen med denna metod. Slutligen, den relativa lätthet med vilken PLLA-PCL stent med drogen kan produceras möjliggör ändringar för att leverera alternativa läkemedel terapier som syftar till att minska ärrbildning i luftstrupen.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1. For stent</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>22-gauge angiocatheter</td>
			<td>Jelco</td>
			<td>4050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dichloromethane</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>270997-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>56-81-5</td>
			<td>Available from other vendors as well.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDLGA</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>739955-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PLLA-PCL (70 : 30)</td>
			<td>Evonik Industries AG</td>
			<td>65053</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rapamycin</td>
			<td>LC Laboratories</td>
			<td>R-5000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2. Animal surgery</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wire brush</td>
			<td>Mill-Rose Company</td>
			<td>320101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3. For immunohistochemistry staining</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antigen retrival buffer</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab93678</td>
			<td>Available from other vendors as well; acidic pH needed</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Cell Signaling</td>
			<td>8961S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>11965-092</td>
			<td>Available from other vendors as well.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS (Fetal Bovine Serum)</td>
			<td>MilliporeSigma</td>
			<td>F4135-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-rabbit-488 antibody</td>
			<td>Lif technology</td>
			<td>a11008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-rat-633 antibody</td>
			<td>Lif technology</td>
			<td>a21094</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrophilic plus slide</td>
			<td>BSB7028</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>100-10023</td>
			<td>Available from other vendors as well.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit anti-CD3 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab5690</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat antiF4/80 antibody</td>
			<td>Biolengend</td>
			<td>123101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zeiss LSM 510 Meta Confocal Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4. For quantative PCR</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.5mm glass beads</td>
			<td>OMNI International</td>
			<td>19-645</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bead Mill Homoginizer</td>
			<td>OMNI International</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gene Specific Forward/Reverse Primers</td>
			<td>Genomic Resources Core Facility</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanodrop 2000 spectrophotometer</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Power SYBR Green Mastermix</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>4367659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNeasy mini kit</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>80404</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>StepOnePlus Real Time PCR system</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

design of a biocompatible drug-eluting tracheal stent in mice with laryngotracheal stenosis

Laryngotracheal stenos (LTS) är en patologisk förträngning av subglottis och luftstrupe som leder till extrathoracic obstruktion och betydande andfåddhet. LTS resultat från slemhinnor skada från en främmande kropp i luftstrupen, vilket leder till vävnadsskada och en lokal inflammatorisk reaktion som går snett, vilket leder till avsättning av patologisk ärrvävnad. Behandling för LTS är kirurgisk på grund av bristen på effektiva medicinska terapier. Syftet med denna metod är att konstruera en biokompatibel stent som kan miniatyriseras att placera i möss med LTS. Vi visade att en plla-PCL (70% Poly-L-lactide och 30% polycaprolactone) konstruera hade optimal biomekanisk styrka, var biokompatibel, praktiskt möjligt för en in vivo placering stent, och kan elminerande läkemedel. Denna metod ger ett läkemedel leveranssystem för att testa olika immunmodulerande medel för att lokalt hämma inflammation och minska luftvägs fibros. Tillverkningen av stent tar 28 − 30 h och kan återges enkelt, vilket möjliggör experiment med stora kohorter. Här har vi införlivat drogen rapamycin inom stent för att testa dess effektivitet för att minska fibros och kollagen deposition. Resultaten visade att PLLA-PCL tält visade tillförlitlig rapamycin release, var mekaniskt stabila under fysiologiska förhållanden, och var biokompatibla, inducera lite inflammatorisk respons i luftstrupen. Vidare, den rapamycin-eluting plla-PCL stent minskad ärrbildning i luftstrupen in vivo.

Den biologiskt nedbrytbara PLLA-PCL stent-konstruktionen laddad med rapamycin som användes i denna studie var kapabel att eluera rapamycin på ett konsekvent och förutsägbart sätt under fysiologiska förhållanden (figur 1). Figur 2 visar plla-PCL stent gjuten runt en 22 G angiocatheter för användning i en murin modell av LTS. För att avgöra om effekterna av rapamycin eluering i luftstrupen är effektiv vid dämpning av fibros, kan uppmätta förändring...

Watch this Scientific Journal Video about Design of a Biocompatible Drug-Eluting Tracheal Stent in Mice with Laryngotracheal Stenosis at JoVE.com

Design of a Biocompatible Drug-Eluting Tracheal Stent in Mice with Laryngotracheal Stenosis

Laryngotrakeal stenos resultat från patologiska ärr deposition som kritiskt smalnar trakealluftvägarna och saknar effektiva medicinska terapier. Med hjälp av en PLLA-PCL (70% Poly-L-lactide och 30% polycaprolactone) stent som ett lokalt läkemedel leveranssystem, potentiella terapier som syftar till att minska ärr spridning i luftstrupen kan studeras.

Utformning av en biokompatibel drog-Eluting Trakealstent hos möss med Laryngotrakeal stenos

Laryngotracheal stenosis (LTS) is a pathologic narrowing of the subglottis and trachea leading to extrathoracic obstruction and significant shortness of ...

Detta protokoll låter oss undersöka drog-eluering stent i ett litet djur modell av laryngotrakcheal stenos låter oss utnyttja genetiskt modifierade djur på ett kostnadseffektivt sätt. Transoral placering av drogen-eluerar luftvägarna stent skonar djuren från ett öppet snitt i luftstrupen som representerar en mer kliniskt relevant modell av laryngotracheal stenos. Denna teknik underlättar preklinisk undersökning av lokala strategier narkotika leverans för att behandla laryngotracheal pylorusstenos.Denna teknik ger en genomförbar och effektiv plattform för translationell undersökning av drog-eluering luftvägarna stent i ett litet djur modell som kan tillämpas för framtida undersökning i större djurmodeller samt klinisk tillämpning. teknik särskilt transoral intubation, induktion av luftstrupe skada, och luftvägarna stent placering steg. Visuell demonstration av denna tekniskt utmanande kirurgi är kritisk eftersom många av de fina detaljerna inte kan beskrivas fullt ut i ord.För att göra en 1%rapamycin som innehåller polymerlösning, tillsätt sex milligram rapamycin till 600 milligram 70-30 PLLA-PCL i en glasflaska. Under en rök huva, tillsätt sex milliliter av diklormetan till rapamycin kompletteras och kontroll injektionsflaska och tillsätt 120 mikroliter glycerol till varje injektionsflaska. Därefter locket injektionsflaskan och låt PLLA-PCL lösningen homogenisera i sex till 12 timmar i rumstemperatur.För att skapa en murin luftvägsstent, med hjälp av sterila material och teknik, applicera en milliliter rapamycin kompletterad PLLA-PCL-lösning på den venösa kanylen hos en 22 gauge fluorerad etylenpropen baserad angiocatheter medan du saktar in roterande katetern. När all lösning har applicerats, prop den gjutna angiokateter med spetsen av angiokatetern nedåt och fästet av katetern på kanten av ett glas Petriskål i en vakuumhuva. Efter 24 timmar under vakuum i rumstemperatur, försiktigt vrida och skjut katetern från den torkade stentkonstruktionen och cirkumferentially kontrollera stent för eventuella defekter som kan ha resulterat under gjutprocessen.Som stöd i visualisering, är det bra att dra en tunn svart linje ner längden på stent. Trimma varje ände av de gjutna stenten med fin rak sax så att kanterna är axiella och använd saxen för att skära varje stent i tre millimeter axiella segment. Sedan laddar varje tre millimeter stent på en ny 22 gauge venkateter.För laryngotrakeal stenos induktion, efter att ha bekräftat en brist på svar på tå nypa, placera den första musen på en kirurgisk plattform i ryggläge och slinga en liten bit tråd fästs på toppen av plattformen runt de centrala framten. Säkra lemmarna till bordet med tejp och gör en 1,5 centimeter mittlinjen vertikal snitt i halsen på musen. Dela överlysning bräss och lateralize de två resulterande lober att visualisera luftstrupen.Dela överlydning sternohyoid och sternothyroid muskler vid överlägsen fastsättning bilateralt och passera en 22 gauge angiocatheter transorally genom struphuvudet i luftstrupen. Med hjälp av små tofter, applicera tryck på musens främre struphuvud för att hjälpa till vid korrekt placering av katetern. En korrekt placerad angiokateter kan visualiseras genom sin vita färg genom luftstrupen.För att framkalla skadan, passera en Bleomycin-belagd stålborste genom den insatta angiokatetern och dra långsamt tillbaka katetern så att endast stålborsten förblir inom luftstrupen. Använd fina kraftpensor, applicera mottryck på luftstrupen för att mekaniskt störa luftstrupslumen med borsten innan katetern sätts i igen i luftstrupen över borsten. Ta bort stålborsten och applicera Bleomycin igen innan du sätter in och tar bort borsten ytterligare fyra gånger som den bara visat.Efter den sista Bleomycin-appliceringen, ta bort katetern från luftstrupen. För transoral placering av en PLLA-PCL, se till att en tunn svart vertikal linje har införlivats i varje stent och transoral intubate musen med den förinstallerade angiocatheter. Stenten ska visualiseras inom luftstrupen genom det transcerviska snittet.När stenten är på plats, använd fina tlyckor för att bestämt men försiktigt fatta luftstrupen genom snittet för att hålla stenten på plats och ta bort katetern. Det är avgörande att placera stenten så noggrant som möjligt. För mycket tryck på luftstrupen kommer att resultera i kollaps av stent orsakar luftvägarna obstruktion och död för djuret.Stäng snittet med vävnadslim eller absorberbara 4-0 kroma suturer som används här och låt musen återhämta sig med övervakning innan du återvänder djuret till sin hembur. Vid lämplig experimentell endpoint, placera musen av intresse i ryggpositionen på den kirurgiska plattformen och använda fina böjda iris sax för att öppna snittet igen. Exponera luftstrupen som visat och använd saxen för att dela upp den distala luftstrupen under stentens nivå.Därefter delar du den proximala luftstrupen under struphuvudet och ovanför stenten och separerar den delade luftstrupen från matstrupen posteriort. Ta sedan bort stenten från luftstrupen och fixa luftstrupen i 10%formalin i 24 timmar. Den biologiskt nedbrytbara rapamycin laddade PLLA-PCL stent konstruktion som används i denna studie kan elutera rapamycin på ett konsekvent och förutsägbart sätt under fysiologiska förhållanden.I den här bilden kan den miniatyriserade biokompatibla stenten observeras in situ inom luftstrupen som indikeras av den svarta markören på stenten som visualiseras genom den genomskinliga mustrakepen. Efter 21 dagar kan den svarta färgämnesmarkören användas för att bekräfta underhållet av stentpositionen inom luftstrupen. Biokompatibilitetstestning med hjälp av immunofluorescerande färgning för markörer för akut och kronisk inflammation visar att PLLA-PCL-stentkonstruktionen inte är immunoreaktiv som bestäms av det minimala antalet immunceller som förekommer efter placering i avsaknad av skada.Att manipulera luftvägarna på ett känsligt och atraumatiskt sätt är avgörande för förfarandets framgång. Överdriven kraft, flera intubations, och stent kollaps kan leda till djurdöd. Efter behandling med rapamycin-eluting stent, bedömning av överlevnad, genuttryck via kvantitativ realtid PCR, immunoassay inklusive flödescytometri, ELISA och immunohistokemi kan utföras.Eftersom det ger en framgångsrik plattform för läkemedelseuering i en musmodell, banar denna teknik vägen för framtida undersökningar av lokalt tillämpade therapeutics i laryngotrakeal stenos. Diklormetan är en frätande vätska. Var noga med att alltid använda en rökhuva, personlig skyddsutrustning och icke-korrosiva material

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Monitoring the Wall Mechanics During Stent Deployment in a Vessel

Övervakning av Wall Mechanics Under stentutveckling i ett kärl

Clinical trials have reported different restenosis rates for various stent designs1. It is speculated that stent-induced strain concentrations on the ...

Design of a Biaxial Mechanical Loading Bioreactor for Tissue Engineering

Design av en Biaxial mekanisk belastning Bioreaktor för Tissue Engineering

We  designed a loading device that is capable of applying uniaxial or biaxial  mechanical strain to a tissue engineered biocomposites fabricated for  ...

Experimental Investigation of Secondary Flow Structures Downstream of a Model Type IV Stent Failure in a 180&#176; Curved Artery Test Section

Experimental Investigation of Secondary Flow Structures Downstream of a Model Type IV Stent Failure in a 180Ãƒâ€šÃ‚Â° Curved Artery Test Section

Experimentell undersökning av sekundärflöde strukturer nedströms en modell av typ IV Stent Misslyckande i en 180 ° Böjd Artery testsektionen

The arterial network in the human vasculature comprises of ubiquitously present blood vessels with complex geometries (branches, curvatures and ...

Ferromagnetic Bare Metal Stent for Endothelial Cell Capture and Retention

Ferromagnetiska Bare Metal Stent för Endothelial Cell Capture och retention

Rapid endothelialization of cardiovascular stents is needed to reduce stent thrombosis and to avoid anti-platelet therapy which can reduce bleeding risk. ...

Automated Robotic Liquid Handling Assembly of Modular DNA Devices

Automatiserad robot vätskehantering montering av modulära DNA enheter

Recent advances in modular DNA assembly techniques have enabled synthetic biologists to test significantly more of the available &#34;design space&#34; ...

Synthesis of Biocompatible Liquid Crystal Elastomer Foams as Cell Scaffolds for 3D Spatial Cell Cultures

Syntes av biokompatibla Liquid Crystal Elastomer Skum som Cell Ställningar för 3D Spatial cellkulturer

Here, we present a step-by-step preparation of a 3D, biodegradable, foam-like cell scaffold. These scaffolds were prepared by cross-linking star block ...

Anatomically Realistic Neonatal Heart Model for Use in Neonatal Patient Simulators

Anatomiskt realistiska Neonatal hjärtat modell för användning i Neonatal patienten simulatorer

Neonatal patient simulators (NPS) are artificial patient surrogates used in the context of medical simulation training. Neonatologists and nursing staff ...

Repressing Gene Transcription by Redirecting Cellular Machinery with Chemical Epigenetic Modifiers

Ompressning gentranskription genom att omdirigera cellulära maskineriet med kemiska epigenetiska modifierare

Regulation of chromatin compaction is an important process that governs gene expression in higher eukaryotes. Although chromatin compaction and gene ...

Design and Synthesis of a Reconfigurable DNA Accordion Rack

Design och syntes av ett dragspel omkonfigurerbara DNA-Rack

DNA nanostructure-based mechanical systems or DNA nanomachines, which produce complex nanoscale motion in 2D and 3D in the nanometer to &#229;ngstr&#246;m ...

Seeding and Implantation of a Biosynthetic Tissue-engineered Tracheal Graft in a Mouse Model

Sådd och Implantation av en biosyntetiska vävnadstekniska trakeal transplantat i en musmodell

Treatment options for congenital or secondary long segment tracheal defects have historically been limited due to an inability to replace functional ...