Name: quantitative measurement of intrathecally synthesized proteins in mice
Uploaded: 2019-11-29T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Quantitative Measurement of Intrathecally Synthesized Proteins in Mice at JoVE.com

ويشكر المؤلفون موظفي مركز الطب المقارن والبحوث (CCMR) في دارتموث علي رعايتهم الخبيرة للفئران المستخدمة في هذه الدراسات. ومول صندوق بحوث بورنشتاين هذا البحث.

تستخدم جميع الاعمال الحيوانية البروتوكولات التي استعرضتها ووافقت عليها اللجنة المؤسسية للعناية بالماشية واستخدامها في كليه جيسيل للطب في دارتموث.
1-جمع السوائل
ملاحظه: كل من المصل والسائل الدماغي الشوكي مطلوبه. هناك حاجه إلى بروتوكولين لكل مجموعه السوائل لل...

<ol>
	<li>Whedon, J. M., Glassey, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebrospinal+fluid+stasis+and+its+clinical+significance.">Cerebrospinal fluid stasis and its clinical significance.</a> Alternative Therapies in Health and Medicine. 15 (3), 54-60 (2009).</li><li>Kang, J. H., Vanderstichele, H., Trojanowski, J. Q., Shaw, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+analysis+of+cerebrospinal+fluid+biomarkers+using+microsphere-based+xMAP+multiplex+technology+for+early+detection+of+Alzheimer's+disease.">Simultaneous analysis of cerebrospinal fluid biomarkers using microsphere-based xMAP multiplex technology for early detection of Alzheimer's disease.</a> Methods. 56 (4), 484-493 (2012).</li><li>Barro, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluid+biomarker+and+electrophysiological+outcome+measures+for+progressive+MS+trials.">Fluid biomarker and electrophysiological outcome measures for progressive MS trials.</a> Multiple Sclerosis. 23 (12), 1600-1613 (2017).</li><li>Tourtellotte, W. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+sclerosis:+measurement+and+validation+of+central+nervous+system+IgG+synthesis+rate.">Multiple sclerosis: measurement and validation of central nervous system IgG synthesis rate.</a> Neurology. 30 (3), 240-244 (1980).</li><li>Bonnan, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrathecal+IgG+synthesis:+a+resistant+and+valuable+target+for+future+multiple+sclerosis+treatments.">Intrathecal IgG synthesis: a resistant and valuable target for future multiple sclerosis treatments.</a> Multiple Sclerosis International. 2015, 296184 (2015).</li><li>Reiber, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebrospinal+fluid--physiology,+analysis+and+interpretation+of+protein+patterns+for+diagnosis+of+neurological+diseases.">Cerebrospinal fluid--physiology, analysis and interpretation of protein patterns for diagnosis of neurological diseases.</a> Multiple Sclerosis. 4 (3), 99-107 (1998).</li><li>DiSano, K. D., Linzey, M. R., Royce, D. B., Pachner, A. R., Gilli, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+neuro-immune+patterns+in+two+clinically+relevant+murine+models+of+multiple+sclerosis.">Differential neuro-immune patterns in two clinically relevant murine models of multiple sclerosis.</a> Journal of Neuroinflammation. 16 (1), 109 (2019).</li><li>Pachner, A. R., Li, L., Lagunoff, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasma+cells+in+the+central+nervous+system+in+the+Theiler's+virus+model+of+multiple+sclerosis.">Plasma cells in the central nervous system in the Theiler's virus model of multiple sclerosis.</a> Journal of Neuroimmunology. 232 (1-2), 35-40 (2011).</li><li>Reiber, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow+rate+of+cerebrospinal+fluid+(CSF)--a+concept+common+to+normal+blood-CSF+barrier+function+and+to+dysfunction+in+neurological+diseases.">Flow rate of cerebrospinal fluid (CSF)--a concept common to normal blood-CSF barrier function and to dysfunction in neurological diseases.</a> Journal of Neurological Sciences. 122 (2), 189-203 (1994).</li><li>Reiber, H., Zeman, D., Kusnierova, P., Mundwiler, E., Bernasconi, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnostic+relevance+of+free+light+chains+in+cerebrospinal+fluid+-+The+hyperbolic+reference+range+for+reliable+data+interpretation+in+quotient+diagrams.">Diagnostic relevance of free light chains in cerebrospinal fluid - The hyperbolic reference range for reliable data interpretation in quotient diagrams.</a> Clinica Chimica Acta. 497, 153-162 (2019).</li><li>Reiber, H., Felgenhauer, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+transfer+at+the+blood+cerebrospinal+fluid+barrier+and+the+quantitation+of+the+humoral+immune+response+within+the+central+nervous+system.">Protein transfer at the blood cerebrospinal fluid barrier and the quantitation of the humoral immune response within the central nervous system.</a> Clinica Chimica Acta. 163 (3), 319-328 (1987).</li><li>Dorta-Contreras, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reibergrams:+essential+element+in+cerebrospinal+fluid+immunological+analysis.">Reibergrams: essential element in cerebrospinal fluid immunological analysis.</a> Revista de Neurologia. 28 (10), 996-998 (1999).</li><li>Metzger, F., Mischek, D., Stoffers, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Connected+Steady+State+Model+and+the+Interdependence+of+the+CSF+Proteome+and+CSF+Flow+Characteristics.">The Connected Steady State Model and the Interdependence of the CSF Proteome and CSF Flow Characteristics.</a> Frontiers Neuroscience. 11, 241 (2017).</li><li>Wolforth, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+of+blood+collection+in+the+mouse.">Methods of blood collection in the mouse.</a> Laboratory Animals. 29, 47-53 (2000).</li><li>Liu, L., Duff, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+technique+for+serial+collection+of+cerebrospinal+fluid+from+the+cisterna+magna+in+mouse.">A technique for serial collection of cerebrospinal fluid from the cisterna magna in mouse.</a> Journal of Visualized Experiments. (21), e960 (2008).</li><li>Machholz, E., Mulder, G., Ruiz, C., Corning, B. F., Pritchett-Corning, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Manual+restraint+and+common+compound+administration+routes+in+mice+and+rats.">Manual restraint and common compound administration routes in mice and rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (67), e2771 (2012).</li><li>Johnston, S. A., Tobias, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Veterinary+Surgery:+Small+Animal+Expert+Consult+-+E-Book.">Veterinary Surgery: Small Animal Expert Consult - E-Book.</a> Elsevier Health Sciences. , (2017).</li><li>Nigrovic, L. E., Shah, S. S., Neuman, M. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correction+of+cerebrospinal+fluid+protein+for+the+presence+of+red+blood+cells+in+children+with+a+traumatic+lumbar+puncture.">Correction of cerebrospinal fluid protein for the presence of red blood cells in children with a traumatic lumbar puncture.</a> Journal of Pediatrics. 159 (1), 158-159 (2011).</li><li>McCarthy, D. P., Richards, M. H., Miller, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+multiple+sclerosis:+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+and+Theiler's+virus-induced+demyelinating+disease.">Mouse models of multiple sclerosis: experimental autoimmune encephalomyelitis and Theiler's virus-induced demyelinating disease.</a> Methods in Molecular Biology. 900, 381-401 (2012).</li><li>Link, H., Tibbling, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+of+albumin+and+IgG+analyses+in+neurological+disorders.+II.+Relation+of+the+concentration+of+the+proteins+in+serum+and+cerebrospinal+fluid.">Principles of albumin and IgG analyses in neurological disorders. II. Relation of the concentration of the proteins in serum and cerebrospinal fluid.</a> Scandinavian Journal of Clinical Laboratory Investigation. 37 (5), 391-396 (1977).</li><li>Tibbling, G., Link, H., Ohman, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+of+albumin+and+IgG+analyses+in+neurological+disorders.+I.+Establishment+of+reference+values.">Principles of albumin and IgG analyses in neurological disorders. I. Establishment of reference values.</a> Scandinavian Journal of Clinical Laboratory Investigation. 37 (5), 385-390 (1977).</li><li>Deisenhammer, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+on+routine+cerebrospinal+fluid+analysis.+Report+from+an+EFNS+task+force.">Guidelines on routine cerebrospinal fluid analysis. Report from an EFNS task force.</a> European Journal of Neurology. 13 (9), 913-922 (2006).</li><li>Johanson, C. E., Stopa, E. G., McMillan, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+blood-cerebrospinal+fluid+barrier:+structure+and+functional+significance.">The blood-cerebrospinal fluid barrier: structure and functional significance.</a> Methods in Molecular Biology. 686, 101-131 (2011).</li><li>Zaias, J., Mineau, M., Cray, C., Yoon, D., Altman, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reference+values+for+serum+proteins+of+common+laboratory+rodent+strains.">Reference values for serum proteins of common laboratory rodent strains.</a> Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 48 (4), 387-390 (2009).</li><li>Felgenhauer, K., Renner, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hydrodynamic+radii+versus+molecular+weights+in+clearance+studies+of+urine+and+cerebrospinal+fluid.">Hydrodynamic radii versus molecular weights in clearance studies of urine and cerebrospinal fluid.</a> Annals of Clinical Biochemistry. 14 (2), 100-104 (1977).</li><li>Pachner, A. R., DiSano, K., Royce, D. B., Gilli, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+utility+of+a+molecular+signature+in+inflammatory+demyelinating+disease.">Clinical utility of a molecular signature in inflammatory demyelinating disease.</a> Neurology, Neuroimmunology &amp; Neuroinflammation. 6 (1), 520 (2019).</li><li>Pachner, A. R., Li, L., Gilli, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemokine+biomarkers+in+central+nervous+system+tissue+and+cerebrospinal+fluid+in+the+Theiler's+virus+model+mirror+those+in+multiple+sclerosis.">Chemokine biomarkers in central nervous system tissue and cerebrospinal fluid in the Theiler's virus model mirror those in multiple sclerosis.</a> Cytokine. 76 (2), 577-580 (2015).</li><li>Gerbi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+concentration+in+the+arterial+and+venous+renal+blood+serum+of+the+rabbit.">Protein concentration in the arterial and venous renal blood serum of the rabbit.</a> Archives of Biochemistry and Biophysics. 31 (1), 49-61 (1951).</li><li>Abbott, N. J., Patabendige, A. A., Dolman, D. E., Yusof, S. R., Begley, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure+and+function+of+the+blood-brain+barrier.">Structure and function of the blood-brain barrier.</a> Neurobiology of Disease. 37 (1), 13-25 (2010).</li><li>Reiber, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proteins+in+cerebrospinal+fluid+and+blood:+barriers,+CSF+flow+rate+and+source-related+dynamics.">Proteins in cerebrospinal fluid and blood: barriers, CSF flow rate and source-related dynamics.</a> Restorative Neurology and Neuroscience. 21 (3-4), 79-96 (2003).</li><li>Reiber, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Knowledge-base+for+interpretation+of+cerebrospinal+fluid+data+patterns.+Essentials+in+neurology+and+psychiatry.">Knowledge-base for interpretation of cerebrospinal fluid data patterns. Essentials in neurology and psychiatry.</a> Arquivos de Neuropsiquiatria. 74 (6), 501-512 (2016).</li><li>Kuehne, L. K., Reiber, H., Bechter, K., Hagberg, L., Fuchs, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebrospinal+fluid+neopterin+is+brain-derived+and+not+associated+with+blood-CSF+barrier+dysfunction+in+non-inflammatory+affective+and+schizophrenic+spectrum+disorders.">Cerebrospinal fluid neopterin is brain-derived and not associated with blood-CSF barrier dysfunction in non-inflammatory affective and schizophrenic spectrum disorders.</a> Journal of Psychiatric Research. 47 (10), 1417-1422 (2013).</li><li>Bromader, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+serum+and+cerebrospinal+fluif+cytokines+in+response+to+non-neurological+surgery:+an+observational+study.">Changes in serum and cerebrospinal fluif cytokines in response to non-neurological surgery: an observational study.</a> Journal of Neuroinflammation. 9, 242 (2012).</li><li>Starhof, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebrospinal+fluid+pro-inflammatory+cytokines+differentiate+parkinsonian+syndromes.">Cerebrospinal fluid pro-inflammatory cytokines differentiate parkinsonian syndromes.</a> Journal of Neuroinflammation. 15 (1), 305 (2018).</li></ol>

الطرق الكمية لتقييم زيادة تركيزات البروتين السائل الدماغي الشوكي هي أدوات مفيده في توصيف الحالة الفسيولوجية والمرضية للجهاز العصبي المركزي. ومع ذلك ، وبعد التحديد الكمي الموثوقه لمستويات بروتين السائل النخاعي ، يتطلب الكشف عن بروتينات السائل الدماغي الشوكي التعبير عن النتائج التي تميز...

السائل الدماغي الشوكي ، وهو سائل واضح وعديم اللون المحيطة الدماغ والحبل النخاعي ، يحمل اهميه كبيره السريرية والعلمية الاساسيه. وهكذا ، وبما ان تكوين السائل الدماغي الشوكي يعكس نشاط النفثالينات العصبية المركزية ، فان هذا السائل يوفر وصولا قيما ، وان كان غير مباشر ، لتوصيف الحالة الفسيولوجية والمرضية للجهاز العصبي المركزي.
وقد استخدم السائل الدماغي الشوكي لتشخيص الحالات التي تؤثر علي النفثالينات العصبي المركزي لأكثر من مائه سنه ، وفي معظم الوقت ، تمت دراسته في المقام الأول من قبل الأطباء كاداه تشخيصيه. ومع ذلك ، في السنوات الاخيره وقد اعترف علماء البيولوجيا العصبية إمكانات السائل الدماغي الشوكي لدراسة الفيزيولوجيا المرضية للجهاز العصبي المركزي. وعلي وجه الخصوص ، تم إدخال العديد من أدوات تحليل البروتين عاليه الانتاجيه في مجال علوم الأعصاب مما يسمح باجراء دراسة مفصله لتكوين البروتين في السائل الدماغي الشوكي ، مع توقع ان هذا التحليل قد يساعد في توفير نظره ثاقبه علي التغيرات الديناميكية التي تحدث داخل النفثالينات العصبية.
التطورات التكنولوجية في تقنيات الفحص متعددة المناعة مثل لومينكس وتقنيات سيموا 2،3، تزودالباحثيناليوم بالقدرة علي اكتشاف المئات من البروتينات بتركيزات منخفضه جدا. وعلاوة علي ذلك ، تسمح هذه التكنولوجيات نفسها باستخدام كميات صغيره من العينات ، مما يشجع علي اجراء دراسات في الكائنات الصغيرة ، بما في ذلك الفئران ، التي حالت فيها احجام العينات المحدودة من السائل الدماغي الشوكي دون التوصيف المفصل للسائل حتى وقت قريب.
ومع ذلك ، فان أحد التحذيرات هو ان البروتينات المقيسة في السائل الدماغي الشوكي قد تستمد من التوليف داخل البراز و/أو من المصل بسبب وجود واجهه تالفة في الدم والدماغ (آيبي). لسوء الحظ ، تحليل البروتين من السائل الدماغي الشوكي وحده لا يمكن الا ان يحدد مجموع هذين العنصرين. للتمييز بين البروتينات المنتجة والبروتينية داخل الدم ، يجب تعديل قياسات بروتين السائل الدماغي الشوكي باستخدام اي أداه تحليل البروتين المتاحة للتغير الفردي في تركيزات المصل وكذلك سلامه الحاجز. ومع ذلك ، علي الرغم من ان هذا التعديل يستخدم عاده في الممارسة السريرية ، علي سبيل المثال ، مؤشر السائل الدماغي الشوكي ، الذي لديه حساسية عاليه للكشف عن التوليف داخل البراز4،5،6، حتى الآن الدراسات البحثية قليله جدا تصحيح تركيزات بروتينالسائل النخاعي لتركيزالمصل
وفي الوقت الراهن ، فان نهج ريبرغرام هو أفضل طريقه لتحديد وظيفة الحاجز وتوليف البروتينات داخل البراز. وهو تقييم رسومي في مخططات السائل الدماغي الشوكي/المصل الذي يحلل ، بطريقه متكاملة ، كل من وظيفة الحاجز (dys) وتخليق البروتين داخل البراز ، في اشاره إلى بروتين مشتق من الدم حصرا9،10. وعاده ما يتم اختيار الزلال البروتين وفيرة للغاية كمرجع البروتين لأنه يتم إنتاجه فقط في الكبد ولان حجمه ، تقريبا 70 كده ، هو وسيط بين البروتينات الصغيرة والكبيرة11. تم تعريف الرسم التخطيطي التحليل لأول مره من قبل رييبر وفينشهاور في 1987 للفئات الرئيسية من الغلوبولين المناعي (Igs)11, يجري تجريبيا استنادا إلى النتائج التي تم الحصول عليها من تحليل آلاف من العينات البشرية9. وقد تاكد هذا النهج في وقت لاحق من خلال تطبيق قوانين Fick الخاصة بالنشر في نظرية الانتشار الجزيئي/معدل التدفق12. مثل هذه النظرية يدل علي انتشار البروتين من خلال الحاجز لديه توزيع القطعي ويمكن ان تفسر كميا ديناميات البروتينات في الCNS9,13. وعموما ، فان ميزه استخدام ريبرجرام لإظهار تخليق البروتين داخل البراز هو انه يحدد في نفس الوقت كسر البروتين الذي يدخل السائل الدماغي الشوكي من المصل وكذلك كميه البروتين الموجودة في السائل الدماغي الشوكي بسبب الإنتاج المحلي.
تصف هذه المادة والبروتوكول المتعلق بها الاجراء بأكمله ، من السائل الدماغي الشوكي وجمع الدم إلى الحسابات النهائية لتصحيح مستويات بروتين السائل النخاعي ، للقياس الكمي لتخليق البروتين داخل البراز في نماذج الفئران من العصبية اضطرابات. ويوفر هذا الاجراء أساسا لتقييم (1) الأصل الباثولوجي لأي بروتين سائل نخاعي و (2) الاستقرار والاهميه الوظيفية لسلامه الحاجز. هذا الاجراء والبروتوكول ليست مفيده فقط لتقييم عينات الماوس السائل الدماغي الشوكي ولكنها مفيده أيضا في تحليل السائل الدماغي الشوكي في العديد من النماذج الحيوانية من الامراض العصبية والمرضي البشريين.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1484px;" width="1482">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">1 mL insulin syringe</td>
			<td style="width:184px;">BD</td>
			<td style="width:127px;">329650</td>
			<td style="width:847px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">1 mL syringe</td>
			<td style="width:184px;">BD</td>
			<td style="width:127px;">329622</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">25 gauge needle</td>
			<td style="width:184px;">BD</td>
			<td style="width:127px;">305122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">3 mL syringe</td>
			<td style="width:184px;">BD</td>
			<td style="width:127px;">309582</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">30 gauge insulin needle</td>
			<td style="width:184px;">BD</td>
			<td style="width:127px;">305106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Absorbent pads</td>
			<td style="width:184px;">Any suitable brand</td>
			<td style="width:127px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Acepromazine</td>
			<td style="width:184px;">Patterson Vet Supply Inc</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">BioPlex Handheld Magnetic Washer</td>
			<td style="width:184px;">BioRad</td>
			<td style="width:127px;">171020100</td>
			<td>Magnet</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">BioPlex MAGPIX Multiplex Reader</td>
			<td style="width:184px;">BioRad</td>
			<td style="width:127px;">171015001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">BioPlex Pro Flat Bottom Plates</td>
			<td style="width:184px;">BioRad</td>
			<td style="width:127px;">171025001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Biotinilated detection antibody</td>
			<td style="width:184px;">Any suitable source</td>
			<td style="width:127px;"></td>
			<td>The antibody has to be directed against the species of the protein of interest.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Bovine Serum Albumin (BSA)</td>
			<td style="width:184px;">Sigma</td>
			<td>A4503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Buprenorphine hydrochloride</td>
			<td style="width:184px;">PAR Pharmaceutical</td>
			<td style="width:127px;">NDC 42023-179-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Capillary Tubes</td>
			<td style="width:184px;">Sutter Instrument</td>
			<td style="width:127px;">B100-75-10</td>
			<td>OD: 1.0 mm, ID: 0.75 mm Borosilicate glass 10 cm; drawn over Bunsen to make ID smaller.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Centrifuge tube, 0.2 mL</td>
			<td style="width:184px;">VWR</td>
			<td style="width:127px;">20170-012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Centrifuge tube, 0.5 mL</td>
			<td style="width:184px;">VWR</td>
			<td style="width:127px;">87003-290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Centrifuge tube, 1.5 mL</td>
			<td style="width:184px;">VWR</td>
			<td style="width:127px;">87003-294</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Chlorhexidine diacetate</td>
			<td style="width:184px;">Nolvasan</td>
			<td style="width:127px;">E004272</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Disposable pipettes tips</td>
			<td style="width:184px;">Any suitable brand</td>
			<td style="width:127px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Ear bars</td>
			<td style="width:184px;">KOPF Instruments</td>
			<td style="width:127px;">1921 or 1922</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Ethanol</td>
			<td style="width:184px;">Kopter</td>
			<td style="width:127px;">V1001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Freezer</td>
			<td style="width:184px;">VWR</td>
			<td style="width:127px;">VWR32086A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Gauze</td>
			<td style="width:184px;">Medline</td>
			<td style="width:127px;">NON25212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Heating pad</td>
			<td style="width:184px;">Sunbeam</td>
			<td style="width:127px;"></td>
			<td>XL King Size SoftTouch, 4 Heat Settings with Auto-Off, Teal, 12-Inch x 24-Inch</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Induction Chamber</td>
			<td style="width:184px;">VETEQUIP</td>
			<td style="width:127px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:327px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:184px;">Patterson Vet Supply Inc</td>
			<td style="width:127px;">NDC 14043-704-06</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Ketamine (KetaVed)</td>
			<td style="width:184px;">Patterson Vet Supply Inc</td>
			<td style="width:127px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">MagPlex Microspheres (antibody-coupled)</td>
			<td style="width:184px;">BioRad</td>
			<td style="width:127px;"></td>
			<td style="width:847px;">Antibody-coupled magnetic bead</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Microplate Shaker</td>
			<td style="width:184px;">Southwest Scientific</td>
			<td>SBT1500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Microretractors</td>
			<td style="width:184px;">Carfill Quality</td>
			<td style="width:127px;">ACD-010</td>
			<td>Blunt - 1 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Microsoft Office (Excel)</td>
			<td style="width:184px;">Microsoft</td>
			<td style="width:127px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:327px;">MilliPlex MAP Mouse Immunoglobulin Isotyping Magnetic Bead Panel</td>
			<td style="width:184px;">EMD Millipore</td>
			<td style="width:127px;">MGAMMAG-300K</td>
			<td>Commercial kit for the quantification through Luminex of a panel of immunoglobulin isotypes and subclasses in mouse fluids.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Mouse Albumin capture ELISA kit</td>
			<td style="width:184px;">Novus Biological</td>
			<td style="width:127px;">NBP2-60484</td>
			<td>Commercial kit for the quantification through ELISA of albumin in mouse fluids.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Multichannel pipette</td>
			<td style="width:184px;">Eppendorf</td>
			<td>3125000060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Non-Sterile swabs</td>
			<td style="width:184px;">MediChoice</td>
			<td style="width:127px;">WOD1002</td>
			<td>Need to be autoclaved for sterility</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Oxygen</td>
			<td style="width:184px;">AIRGAS</td>
			<td style="width:127px;">OX USPEA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Pasteur Pippettes</td>
			<td style="width:184px;">Fisher</td>
			<td style="width:127px;">13-678-20A</td>
			<td>5 &#38; 3/4&#34;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">PDS suture with disposable needle, 6-0 Prolen</td>
			<td style="width:184px;">Patterson Vet</td>
			<td style="width:127px;">8695G</td>
			<td>P-3 Reverse Cutting, 18&#34;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">PE-Streptavidin</td>
			<td style="width:184px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:127px;">554061</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Pipetters</td>
			<td style="width:184px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:127px;">Research seriers</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Polyethylene tubing</td>
			<td style="width:184px;"></td>
			<td style="width:127px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Refrigerated Centrifuge</td>
			<td style="width:184px;">Beckman Coulter</td>
			<td style="width:127px;">ALLEGRA X-12R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Scale</td>
			<td style="width:184px;">Uline</td>
			<td style="width:127px;">H2716</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Scalpel</td>
			<td style="width:184px;">Feather</td>
			<td style="width:127px;">EF7281</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Shaver</td>
			<td style="width:184px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:127px;">52-5204</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Standard proteins</td>
			<td>Any suitable source</td>
			<td></td>
			<td>The best choice for a reference standard is a purified, known concentration of the protein of interest.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Stereotaxic instrument</td>
			<td style="width:184px;">KOPF Instruments</td>
			<td style="width:127px;">Model 900LS</td>
			<td>Standard Accessories</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Sterile 1 x PBS</td>
			<td style="width:184px;">Corning Cellgro</td>
			<td style="width:127px;">21-040-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Sterile saline</td>
			<td style="width:184px;">Baxter</td>
			<td style="width:127px;">0338-0048-02</td>
			<td>0.9 % Sodium Chloride Irrigation USP</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Surgical Forceps Curved, 7 (2)</td>
			<td style="width:184px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:127px;">11271-30</td>
			<td>Dumont</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Surgical Scissors</td>
			<td style="width:184px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:127px;">14094-11</td>
			<td>Stainless 25x</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:327px;">Vaporizer + Flow meter</td>
			<td style="width:184px;">Moduflex Anhestesia Instruments</td>
			<td style="width:127px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Vortex</td>
			<td style="width:184px;">Fisher</td>
			<td>02-215-414</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Warming pad</td>
			<td style="width:184px;">Kent Scientific Corporation</td>
			<td style="width:127px;">RT-JR-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Water Sonicator</td>
			<td style="width:184px;">Cole Parmer</td>
			<td>EW-08895-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Xylazine</td>
			<td style="width:184px;">Patterson Vet Supply Inc</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

quantitative measurement of intrathecally synthesized proteins in mice

السائل النخاعي (السائل الدماغي الشوكي) ، وهو السوائل الموجودة في الدماغ والحبل الشوكي ، له اهميه كبيره للعلوم الاساسيه والسريرية علي حد سواء. تحليل تكوين بروتين السائل الدماغي الشوكي يوفر معلومات حاسمه في البحوث الاساسيه لعلوم الأعصاب وكذلك الامراض العصبية. ويتمثل أحد التحذيرات في ان البروتينات المقيسة في السائل الدماغي الشوكي قد تستمد من كل من التوليف داخل البراز والاستخلاص من المصل ، وان تحليل البروتين في السائل الدماغي الشوكي لا يمكن الا ان يحدد مجموع هذين المكونين. ان يميز بين [ترنسسوايشن] بروتين من الدم وينتج [اينترثيكلي] بروتينات في نماذج حيوانيه [اس ول س] في أناس, يجب ان تشمل قياسات البروتين السائل الدماغي الشوكي باستخدام أدوات تحليل البروتين التقليدية حساب الزلال السائل الدماغي الشوكي/مصل الدم (سالزلال) ، وهو علامة علي سلامه واجهه الدماغ (ابي) ، ومؤشر البروتين (سبروتين/سالزلال) ، وهو تقدير لتخليق البروتين داخل البراز. يوضح هذا البروتوكول الاجراء بأكمله ، من السائل الدماغي الشوكي وجمع الدم إلى حسابات الحواصل والمؤشرات ، للقياس الكمي لتخليق البروتين داخل البراز وضعف الكلي في نماذج الفئران من الاضطرابات العصبية.

وتهدف هذه التجربة التمثيلية لمقارنه التوليف داخل البراز من مفتش في اثنين من نماذج القوارض ذات الصلة سريريا من التصلب المتعدد (MS): الانتكاس139-151المستحثة الدماغية المناعية الذاتية التجريبية (R-eae) والتقدمية المزمنة, theiler في الدماغ الدماغية R-EAE هو نموذج مفيد لفهم الانتكاس-تحويل MS ، في حين ...

Watch this Scientific Journal Video about Quantitative Measurement of Intrathecally Synthesized Proteins in Mice at JoVE.com

Quantitative Measurement of Intrathecally Synthesized Proteins in Mice

يمكن ان تكون مستويات بروتين السائل الشوكي مرتفعه اما نتيجة لانتشار بروتين البلازما عبر حاجز الدم في الدماغ المتغيرة أو توليف داخل البراز. يتم تقديم بروتوكول الاختبار الأمثل في هذه المقالة التي تساعد علي التمييز بين الحالتين ويوفر قياسات كميه من البروتينات توليفها داخل المركبة.

القياس الكمي للبروتينات التركيبية داخل الفئران

Cerebrospinal fluid (CSF), a fluid found in the brain and the spinal cord, is of great importance to both basic and clinical science. The analysis of the ...

يسمح هذا البروتوكول CSF وجمع الدم في التصحيح الكمي لمستويات بروتين CSF لقياس في تخليق البروتين الهسال في نماذج الماوس من الاضطرابات العصبية. يوفر هذا الإجراء خط أساس، والذي ضد المنشأ الفسيولوجية لبروتينات CSF ذات الاهتمام، والاستقرار والأهمية الوظيفية للدم CSF صالح السلامة يمكن تقييمها. يمكن تطبيق تحليل تخليق البروتين البيني وسلامة الحاجز على نماذج حيوانية ودراسات بشرية أخرى.على سبيل المثال ، للتحقق من أمراض الجهاز العصبي المركزي. جمع كميات كبيرة من CSF نظيفة يمكن أن يكون تحديا من الناحية الفنية في الفئران، لذلك ممارسة هذه التقنية حتى كميات كبيرة من العينة غير ملوثة ينصح. سيكون إظهار الإجراءات هو مايكل لينزي، وهو طالب غراد من البرنامج في الطب التجريبي والجزيئي في دارتموث، في مجموعتنا الجديدة لأبحاث المناعة.لجمع المصل عن طريق النزيف المداري الرجعية. بعد التأكد من عدم وجود استجابة لدواسة منعكس في أكثر من 15 غرام الماوس تخدير، فهم الجلد فضفاضة وراء الأذنين مع الإبهام وسببة اليد غير المهيمنة، واستخدام السبابة لرسم مرة أخرى الجلد فوق العينين. باستخدام الإبهام لرسم الجلد مرة أخرى تحت العينين، ضع طرف ماصة باستير، التي عقدت بزاوية 45 درجة تقريبا، في مقبس العين تحت مقلة العين، موجهة نحو منتصف مقبس العين، في حين تناوب الماصة بين الأصابع.ثم تطبيق ضغط قصير ولطيف وإطلاق سراح للسماح للدم بالدخول إلى ماصة. عندما يتم جمع عينة الدم، قم بإزالة الشعيرات الدموية بلطف دون إصابة العين، ونقل الدم إلى أنبوب طرد مركزي 1.5 ملليلتر. بعد إغلاق الجفن، ضع ضغطًا خفيفًا مع الشاش لمنع حدوث المزيد من النزيف.السماح للدم أن تجلط لمدة 30 إلى 60 دقيقة في درجة حرارة الغرفة قبل الغزل أسفل العينة عن طريق الطرد المركزي. باستخدام تقنية ماصة نظيفة، وجمع المصل المنفصل في قارورة جديدة، وصفت 500 ميكرولتر، وتجميد المصل على الفور في 80 درجة مئوية. بعد التأكد من عدم الاستجابة لردود الفعل دواسة، وإزالة مساحة كبيرة بما يكفي من الشعر للسماح لجمع السائل الشوكي الدماغي على الفور في نهاية السد من الجمجمة من الماوس تخدير.ضع الماوس في وضع عرضة على جهاز مُجسم في ظروف معقمة، واثبت الرأس بقضبان الأذن. مسحة الموقع الجراحي مع diacetate chlorhexidine 30٪، وجعل شق الجلد القوس أدنى من القذال لفضح العضلات الإفراط في magna cisterna. باستخدام ملقط، وتشريح حادة الأنسجة تحت الجلد والعضلات، واستخدام الداورسات الصغرى لعقد العضلات وبصرف النظر لفضح طبقة ماتر دورا على ماغنا cisterna.غسل بلطف الأنسجة مع برنامج تلفزيوني معقمة لإزالة أي تلوث ممكن في الدم، واستخدام مسحة القطن العقيمة للطخة الجافة ماتر دورا. إن وضع الثقب الأولي في ماغنا سيستيرنا ضروري للحصول على الوفرة والرافة غير الملوثة. باستخدام إبرة قياس 30، ثقب بلطف الغشاء الذي يغطي ماغنا سيستيرنا، وبسرعة وبلطف إدراج أنبوب صغير الشعرية الزجاجية في ثقب.عندما تم جمع خمسة إلى 12 ميكرولترات من CSF، قم بإزالة الأنبوب بعناية من الغشاء واستخدم قطعة من أنابيب البولي إيثيلين لتوصيل الأنبوب بحقنة ثلاثة ملليلتر. حقن CSF التي تم جمعها في أنبوب 500 ميكرولتر المسمى على الجليد، واستخدام إبرة المتاح وخيوط البولي ديوكسانون متنوعة لإغلاق شق. تنظيف المنطقة من أي دم المجففة أو الأنسجة، ووضع الماوس في قفص نظيفة، دافئ مع مراقبة حتى إعادة شغل كامل.جمع CSF عن طريق الطرد المركزي، وفحص بصريا بيليه وsupernate أنه لأي علامات على تلوث الدم. ثم باستخدام تقنية ماصة نظيفة، ونقل عظمى التي تحتوي على CSF إلى أنبوب 200 ميكرولتر جديد، وتمييع CSF بنسبة واحد إلى ثلاثة مع برنامج تلفزيوني لتخزين فوري في 80 درجة مئوية. لجمع المصل عن طريق ثقب القلب، مباشرة بعد جمع CSF، كما أظهرت للتو، وضع الماوس في موقف supine.مسحة الجلد البطني مع 70٪ الكحول. استخدم المقص لفتح تجويف الصدر، مما يعرض القلب، وأدخل إبرة قياس 25 تعلق على حقنة 3 ملليلتر في البطين الأيسر. ثم تطبيق بلطف الضغط السلبي على المكبس حقنة، وسحب الإبرة بعد أن تم جمع الدم.اِكتِل المُغطّى لإخراج الدم المجمّع في قارورة 1.5 مليلتر. الآن، السماح للدم أن يتخثر لمدة 30 إلى 60 دقيقة في درجة حرارة الغرفة قبل فصل المصل عن طريق الطرد المركزي. ثم، باستخدام تقنية ماصة نظيفة، نقل المصل إلى قارورة جديدة تسمى 500 ميكرولتر لتخزين فوري في 80 درجة مئوية.لتحديد كمية البروتينات المستهدفة والزوالب في عينات مصل متطابقة و CSF، استخدم مقايسة كمية البروتين القياسية القياسية، وذلك باستخدام البروتينات القياسية المشار إليها لإعداد منحنى قياسي لكل بروتين من البروتينات ذات الاهتمام. بعد التحليل، تصدير البيانات الخام إلى برنامج الرسم البياني البرامج المناسبة، والرسم البياني الكشف عن كثافة fluorescence مقارنة بتركيزات البروتين القياسية لإنشاء منحنى قياسي لكل بروتين من الفائدة. ثم استخدم المنحنيات القياسية لحساب تركيزات كل تحليل من الاهتمام في العينات.وأخيراً، استخدمي الزّومات و استهدفي تركيزات التحليلات لحساب قيم Q وفهرس داخل الـ.. المستويات الفعلية لمجموع IgG هي زيادة كبيرة في CSF من اثنين من نماذج القوارض اختبار التصلب المتعدد، بالمقارنة مع العمر المقابلة الضوابط صورية مطابقة. تظهر فئران R-EAE قيم حاصلة معززة بشكل كبير، مما يشير إلى زيادة نفاذية حاجز الدم في الدماغ في هذه الفئران.Nonverversely ، لا توجد اختلافات في حاصل الألبومات بين TMEV - IDD والفئران الشام ، مما يؤكد النتائج السابقة لحاجز سليم في الفئران TMEV - IDD. وبالإضافة إلى ذلك، في الحيوانات TMEV-IDD، أعلى بكثير من قيم مؤشر IgG، وبالتالي، لوحظ إنتاج داخل IgG داخل. وييسر حساب مؤشر البروتين تحديد المؤشرات الحيوية البروتينية الجديدة المفيدة للتشخيص المبكر، والتنبؤ بالنتيجة، ورصد مسار المرض لكل من الأمراض العصبية العصبية والعصبية.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

The Vermicelli and Capellini Handling Tests: Simple quantitative measures of dexterous forepaw function in rats and mice

والشعيرية والتعامل مع الاختبارات Capellini : تدابير كمية بسيطة من وظيفة forepaw حاذق في الجرذان والفئران

Previous characterizations of rodent eating behavior have revealed that they use coordinated forepaw movements to manipulate food pieces. We have extended ...

Video-oculography in Mice

الفيديو oculography في الفئران

Eye movements are very important in order to track an object or to stabilize an image on the retina during movement. Animals without a fovea, such as the ...

A Simple and Inexpensive Method for Determining Cold Sensitivity and Adaptation in Mice

طريقة بسيطة وغير مكلفة لتحديد الباردة الحساسية والتكيف في الفئران

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life.  The cold ...

Quantitative Measurement of Relative Retinoic Acid Levels in E8.5 Embryos and Neurosphere Cultures Using the F9 RARE-Lacz Cell-based Reporter Assay

القياس الكمي لمستويات حمض الريتينويك النسبية في E8.5 الأجنة وNeurosphere الثقافات باستخدام F9 نادر-Lacz القائم على خلية مراسل الفحص

Retinoic acid (RA) is an important developmental morphogen that coordinates anteroposterior and dorsoventral axis patterning, somitic differentiation, ...

In Vivo Gene Transfer to Schwann Cells in the Rodent Sciatic Nerve by Electroporation

In Vivo Gene Transfer to Schwann Cells in the Rodent Sciatic Nerve by Electroporation

في نقل فيفو جين لخلايا شوان في العصب القوارض وركي من Electroporation لل

The formation of the myelin sheath by Schwann cells (SCs) is essential for rapid conduction of nerve impulses along axons in the peripheral nervous ...

Quantitative Measurement of &#947;-Secretase-mediated Amyloid Precursor Protein and Notch Cleavage in Cell-based Luciferase Reporter Assay Platforms

Quantitative Measurement of ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â³-Secretase-mediated Amyloid Precursor Protein and Notch Cleavage in Cell-based Luciferase Reporter Assay Platforms

القياس الكمي لبروتين اميلويد السلائف γ-سيكريتاسي-بوساطة والانقسام الشق في لوسيفراس يستند إلى الخلية مراسل منصات المقايسة

We have developed a pair of cell-based reporter gene assays to quantitatively measure &#947;-secretase cleavage of distinct substrates. This manuscript ...

Quantitative Analysis of Neuronal Dendritic Arborization Complexity in Drosophila

Quantitative Analysis of Neuronal Dendritic Arborization Complexity in Drosophila

التحليل الكمي لتعقيد أربوريزاتيون الجذعية العصبية في المورفولوجية

Dendrites are the branched projections of a neuron, and dendritic morphology reflects synaptic organization during the development of the nervous system. ...

An Objective and Reproducible Test of Olfactory Learning and Discrimination in Mice

إجراء اختبار موضوعي واستنساخه من التعلم حاسة الشم والتمييز في الفئران

Olfaction is the predominant sensory modality in mice and influences many important behaviors, including foraging, predator detection, mating, and ...

Quantitative Cell Biology of Neurodegeneration in Drosophila Through Unbiased Analysis of Fluorescently Tagged Proteins Using ImageJ

Quantitative Cell Biology of Neurodegeneration in Drosophila Through Unbiased Analysis of Fluorescently Tagged Proteins Using ImageJ

بيولوجيا الخلية كمية من نيوروديجينيريشن في المورفولوجية من خلال تحليل غير منحازة للبروتينات فلوريسسينتلي المعلمة باستخدام إيماجيج

With the rising prevalence of neurodegenerative diseases, it is increasingly important to understand the underlying pathophysiology that leads to neuronal ...

Imaging and Analysis of Neurofilament Transport in Excised Mouse Tibial Nerve

التصوير والتحليل لنقل الليفية العصبية في العصب الذبي الماوس المخزّن

Neurofilament protein polymers move along axons in the slow component of axonal transport at average speeds of ~0.35-3.5 mm/day. Until recently the study ...