Name: coronary progenitor cells and soluble biomarkers in cardiovascular prognosis after coronary angioplasty
Uploaded: 2020-01-28T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Coronary Progenitor Cells and Soluble Biomarkers in Cardiovascular Prognosis after Coronary Angioplasty at JoVE.com

Författarna tackar stödet från institutionella programmet E015; och Fondo Sectorial FOSSIS-CONACYT, SALUD-2014-1-233947.

Detta protokoll uppfyller de institutionella riktlinjerna från etikkommittén för humanforskning.
1. Koronar angiografi, ultraljud och blodprov
<ol><li>Begär grundläggande klinisk och demografisk information före koronar intervention. Samla in individens data: ålder, kön, nuvarande rökning status, body mass index (BMI), högt blodtryck, dyslipidemi, diabetes mellitus, mediciner, och indikationen för nuvarande koronar angiografi.</li>
	<li>Utför koronar angiografi genom hjärtkatete...

<ol>
	<li>Cassar, A., Holmes, D. R., Rihal, C. S., Gersh, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+coronary+artery+disease:+diagnosis+and+management.">Chronic coronary artery disease: diagnosis and management.</a> Mayo Clinic Proceedings. 84 (12), 1130-1146 (2009).</li><li>Regueiro, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mobilization+of+endothelial+progenitor+cells+in+acute+cardiovascular+events+in+the+PROCELL+study:+time-course+after+acute+myocardial+infarction+and+stroke.">Mobilization of endothelial progenitor cells in acute cardiovascular events in the PROCELL study: time-course after acute myocardial infarction and stroke.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 80, 146-155 (2015).</li><li>Sen, S., McDonald, S. P., Coates, P. T., Bonder, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+progenitor+cells:+novel+biomarker+and+promising+cell+therapy+for+cardiovascular+disease.">Endothelial progenitor cells: novel biomarker and promising cell therapy for cardiovascular disease.</a> Clinical Science (Lond). 120 (7), 263-283 (2011).</li><li>Samman Tahhan, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progenitor+Cells+and+Clinical+Outcomes+in+Patients+With+Acute+Coronary+Syndromes.">Progenitor Cells and Clinical Outcomes in Patients With Acute Coronary Syndromes.</a> Circulation Research. 122 (11), 1565-1575 (2018).</li><li>Tomuli&#263;, V., Gobi&#263;, D., Luli&#263;, D., &#381;idan, D., Zaputovi&#263;, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soluble+adhesion+molecules+in+patients+with+acute+coronary+syndrome+after+percutaneous+coronary+intervention+with+drug-coated+balloon,+drug-eluting+stent+or+bare+metal+stent.">Soluble adhesion molecules in patients with acute coronary syndrome after percutaneous coronary intervention with drug-coated balloon, drug-eluting stent or bare metal stent.</a> Medical Hypotheses. 95, 20-23 (2016).</li><li>Jaumdally, R., Varma, C., Macfadyen, R. J., Lip, G. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+sinus+blood+sampling:+an+insight+into+local+cardiac+pathophysiology+and+treatment?.">Coronary sinus blood sampling: an insight into local cardiac pathophysiology and treatment?.</a> European Heart Journal. 28 (8), 929-940 (2007).</li><li>Kremastinos, D. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracoronary+cyclic-GMP+and+cyclic-AMP+during+percutaneous+transluminal+coronary+angioplasty.">Intracoronary cyclic-GMP and cyclic-AMP during percutaneous transluminal coronary angioplasty.</a> International Journal of Cardiology. 53 (3), 227-232 (1996).</li><li>Karube, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+cytokine+levels+by+coronary+sinus+blood+sampling+during+cardiac+surgery+with+cardiopulmonary+bypass.">Measurement of cytokine levels by coronary sinus blood sampling during cardiac surgery with cardiopulmonary bypass.</a> American Society for Artificial Internal Organs Journal. 42 (5), M787-M791 (1996).</li><li>Truong, Q. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+sinus+biomarker+sampling+compared+to+peripheral+venous+blood+for+predicting+outcomes+in+patients+with+severe+heart+failure+undergoing+cardiac+resynchronization+therapy:+the+BIOCRT+study.">Coronary sinus biomarker sampling compared to peripheral venous blood for predicting outcomes in patients with severe heart failure undergoing cardiac resynchronization therapy: the BIOCRT study.</a> Heart Rhythm. 11 (12), 2167-2175 (2014).</li><li>Su&#225;rez-Cuenca, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+circulating+mononuclear+progenitor+cells+and+soluble+biomarkers+in+the+cardiovascular+prognosis+after+coronary+angioplasty.">Coronary circulating mononuclear progenitor cells and soluble biomarkers in the cardiovascular prognosis after coronary angioplasty.</a> Journal of Cellular and Molecular Medicine. 23 (7), 4844-4849 (2019).</li><li>Su&#225;rez-Cuenca, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relation+of+Coronary+Artery+Lumen+with+Baseline,+Post-angioplasty+Coronary+Circulating+Pro-Inflammatory+Cytokines+in+Patients+with+Coronary+Artery+Disease.">Relation of Coronary Artery Lumen with Baseline, Post-angioplasty Coronary Circulating Pro-Inflammatory Cytokines in Patients with Coronary Artery Disease.</a> Angiology Open Access. 7, 01 (2019).</li><li>Schmidt-Lucke, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+circulating+endothelial+progenitor+cells+using+the+modified+ISHAGE+protocol.">Quantification of circulating endothelial progenitor cells using the modified ISHAGE protocol.</a> PLoS One. 5 (1), e13790 (2010).</li><li>Moyer, C. F., Sajuthi, D., Tulli, H., Williams, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+of+IL-1+alpha+and+IL-1+beta+by+arterial+cells+in+atherosclerosis.">Synthesis of IL-1 alpha and IL-1 beta by arterial cells in atherosclerosis.</a> American Journal of Pathology. 138 (4), 951-960 (1991).</li><li>Morales-Portano, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echocardiographic+measurements+of+epicardial+adipose+tissue+and+comparative+ability+to+predict+adverse+cardiovascular+outcomes+in+patients+with+coronary+artery+disease.">Echocardiographic measurements of epicardial adipose tissue and comparative ability to predict adverse cardiovascular outcomes in patients with coronary artery disease.</a> International Journal of Cardiovascular Imaging. 34 (9), 1429-1437 (2018).</li><li>Huang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+progenitor+cells+correlated+with+oxidative+stress+after+mild+traumatic+brain+injury.">Endothelial progenitor cells correlated with oxidative stress after mild traumatic brain injury.</a> Yonsei Medical Journal. 58 (5), 1012-1017 (2017).</li></ol>

Blodinsamling från den drabbade kranskärlen kan vara svår. Ibland är kranskärlen knappt tillgänglig. I detta fall kan provtagning från venous sinus vara ett alternativ. Vi utförde valideringstester jämföra cirkulerande biomarkörer i kranskärl kontra venous sinus, utan betydande skillnader. Prestandan hos cirkulerande biomarkörer validerades dock endast för koronarprovtagning. Därför återstår att utforska biomarkörernas prestanda från den venösa sinus.
Det är bäst att bea...

Kranskärlsangioplastik och stenting representerar ett bärgningsförfarande för patienter med kranskärlssjukdom (CAD). Men stora negativa kardiovaskulära händelser (MACEs), inklusive kardiovaskulär död, hjärtinfarkt, koronar restenosoch episoder av angina eller dekompensera hjärtsvikt, kan uppstå månader efter koronar ingripande, vilket föranledde oplanerade besök på sjukhuset. MacEs är vanliga över hela världen och deras bbidödlighet är hög1.
Koronarischemisk skada inducerar tidig vaskulär respons och reparativa mekanismer som innebär mobilisering av MPCs på grund av deras differentieringförmåga och/eller angio-reparativ potential, samt produktion av lösliga molekyler som intercellulära vidhäftningsmolekyler (IKU:er), matrismetalloproteinaser (MMPs), och reaktiva syrearter, reflekterande cellvidhäftning, vävnadsremodellering och oxidativ stress. Även inneboende vaskulära funktioner som plack egenskaper och kranskärl komplexitet har använts för att förutsäga MACEs, vissa studier har föreslagit att biomarkörer relaterade till de mekanismer för skada och reparation som förekommer i kranskärlen kan vara mycket användbart för tidig identifiering och prognos av kardiovaskulära händelser hos patienter med CAD lämnas in till koronar angioplastik2,3,4,5.
Kontinuerligt intresse för att förstå de mekanismer som ligger till grund för CAD skada och reparation har motiverade utredare att studera intracoronary cirkulerande biomarkörer, eftersom koronar provtagning närmare återspeglar vaskulär skada och reparation6. Karakterisering av koronar biomarkörer i studier i människa har dock varit knappa7,8,9. Syftet med denna studie var därför att beskriva en metod för att bestämma mängden koronar som cirkulerar mpcs och lösliga molekyler, vilket återspeglar både vaskulär skada och reparation, och att visa om dessa biomarkörer är associerade med MACEs och den kliniska prognosen hos CAD-patienter som genomgick koronar angioplastik. Denna metod bygger på användning av vaskulära, cirkulerande MPCs och lösliga molekyler som erhålls genom provtagningplatser närmast kärlskadan. Det kan också vara användbart för kliniska studier för nedre delen ischemi, stroke, vaskulit, venös trombos och andra skador med vaskulär skada och reparation.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>BSA</td>
			<td>Roche</td>
			<td>10735086001</td>
			<td>Bovine Serum Albumin (BSA) as a buffering agent, stabilizer, standard and for blending.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calibration Beads</td>
			<td>Miltenyi Biotec / MACS</td>
			<td>#130-093-607</td>
			<td>MACQuant calibration beads are supplied in aqueous solution containing 0.05% sodium azide. 3.5 ml for up to 100 tests</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD133/1 (AC133)-PE</td>
			<td>Milteny Biotec / MACS</td>
			<td>#130-080-801</td>
			<td>Antibody conjugated to R-Phycoerythrin in PBS/EDTA buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD184 (CXCR4)-PE-VIO770</td>
			<td>Miltenyi Biotec / MACS</td>
			<td>#130-103-798</td>
			<td>Monoclonal, Isotype recombinant human IgG1, conjugated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD309 (VEGFR-2/KDR)-APC</td>
			<td>Miltenyi Biotec / MACS</td>
			<td>#130-093-601</td>
			<td>Antibody conjugated to R-Phycoerythrin in PBS/EDTA buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD34-FITC</td>
			<td>Miltenyi Biotec / MACS</td>
			<td>#130-081-001</td>
			<td>The monoclonal antibody clone AC136 detecs a class III epitope of the CD34</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD45- VioBlue</td>
			<td>Miltenyi Biotec / MACS</td>
			<td>#130-092-880</td>
			<td>Monoclonal CD45 Antibody, human conjugated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conical Tubes</td>
			<td>Thermo SCIENTIFIC</td>
			<td>#339651</td>
			<td>15ml conical centrifuge tubes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cytometry Tubes</td>
			<td>FALCON Corning Brand</td>
			<td>#352052</td>
			<td>5 mL Polystyrene Round-Bottom Tube. 12x75 style. Sterile.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>BIO-RAD</td>
			<td>#161-0729</td>
			<td>Heavy metals, (as Pb) &#60;10ppm, Fe &#60;0.01%, As &#60;1ppm, Insolubles &#60;0.005%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Improved Neubauer</td>
			<td>Without brand</td>
			<td>Without catalog number</td>
			<td>Hemocytometer for cell counting. (range 0.1000mm, 0.0025mm2)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>K2 EDTA Blood Collection Tubes</td>
			<td>BD Vacutainer</td>
			<td>#367863</td>
			<td>Lilac plastic vacutainer tube (K2E) 10.8mg, 6 mL.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lymphoprep</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>01-63-12-002-A</td>
			<td>Sterile and checked on the presence of endotoxins. Density: 1.077&#177;0.001g/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>SIGMA-ALDRICH</td>
			<td>#SZBF0920V</td>
			<td>Fixation of biological samples, (powder, 95%)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette Transfer 1,3mL</td>
			<td>CRM Globe</td>
			<td>PF1016, PF1015</td>
			<td>The transfer pipette is a tool that facilitates liquid transfer with greater accuracy.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Test Tubes</td>
			<td>KIMBLE CHASE</td>
			<td>45060 13100</td>
			<td>Heat-resistant test tubes. SIZE/CAP 13 x 100 mm</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

coronary progenitor cells and soluble biomarkers in cardiovascular prognosis after coronary angioplasty

Stora negativa kardiovaskulära händelser (MACEs) påverkar negativt den kardiovaskulära prognosen hos patienter som genomgår koronar angioplastik på grund av koronar ischemisk skada. Omfattningen av koronarskador och mekanismerna för vaskulär reparation är faktorer som påverkar den framtida utvecklingen av MACEs. Inneboende vaskulära funktioner som plack egenskaper och kranskärl komplexitet har visat prognostisk information för MACEs. Användningen av intrakoronar cirkulerande biomarkörer har dock lagts ned som en lämplig metod för tidig identifiering och prognos för MACEs, eftersom de närmare återspeglar dynamiska mekanismer som involverar koronarskador och reparation. Bestämning av koronar cirkulerande biomarkörer under angioplastik, såsom antalet subpopulationer av mononukleära stamceller (MPCs) samt koncentrationen av lösliga molekyler som reflekterar inflammation, cellvidhäftning och reparation, möjliggör bedömning av den framtida utvecklingen och prognosen för MACEs 6 månader efter koronar angioplastik. Denna metod framhävs av dess translationella karaktär och bättre prestanda än perifert blod cirkulerande biomarkörer när det gäller förutsägelse av MACEs och dess effekt på den kardiovaskulära prognosen, som kan tillämpas för riskstratifiering av patienter med kranskärlssjukdom som genomgår angioplastik.

Koronar, venös sinus och perifert blod samlades in från 52 patienter som genomgick koronar angiografi (figur 1) och visade en hög prevalens av hypertoni och dyslipidemi. Vid den kliniska uppföljningen var 11 (21,1 %) MacEs inträffade 6 månader efter koronar angiografi: död (n = 1), angina som kräver sjukhusnärvaro (n = 6), hjärtinfarkt (n = 2), och/eller bevis på hjärtsvikt (n = 4).
Koro...

Watch this Scientific Journal Video about Coronary Progenitor Cells and Soluble Biomarkers in Cardiovascular Prognosis after Coronary Angioplasty at JoVE.com

Coronary Progenitor Cells and Soluble Biomarkers in Cardiovascular Prognosis after Coronary Angioplasty

Utveckling av stora negativa kardiovaskulära händelser, som påverkar kardiovaskulär prognos efter koronar angioplastik, påverkas av omfattningen av koronar skador och vaskulär reparation. Användningen av nya koronar cellulära och lösliga biomarkörer, reaktiva till vaskulär skada och reparation, är användbara för att förutsäga utvecklingen av MACEs och prognos.

Koronar progenitorceller och lösliga biomarkörer i kardiovaskulär prognos efter koronar angioplastik

Major adverse cardiovascular events (MACEs) negatively impact the cardiovascular prognosis of patients undergoing coronary angioplasty due to coronary ...

Även angioplastik hjälper patienter med kranskärlssjukdom, kan kardiovaskulära händelser fortfarande inträffa efter ingreppet. Som MPCs och lösliga molekyler erhålls från koronarcirkulationen, kan de korreleras till graden av vaskulär skada och reparation. Koronar MPC och lösliga medlare nivåer därför kan användas för att uppskatta kardiovaskulär händelser och prognos hos patienter med kranskärlssjukdom genomgår koronar angioplastik.MPCs och lösliga molekyler kan också användas för att uppskatta komplikationer och prognoser som uppstår under olika ischemisk inställningar, såsom återkommande lem ischemiary stroke. Demonstrerar förfarandet kommer att Eduardo Vera-Gomez och Alejandro Hernandez-Patricio, lab tekniker, och Karen De La Vega-Moreno och Carlos Zamora-Aleman, undergrad studenter. Också visar kommer att Gabriela Alexandra Dominguez-Perez, en Master's of Science student, Alberto Melchor-Lopez, en doktorand, och Mario Antonio Tellez-Gonzalez, en Master's of Science medarbetare.Inom en timme efter insamlingen överför du sex milliliter av det skördade blodprovet till ett koniskt rör på 15 milliliter och späder ut blodet i ett till ett förhållande i PBS. Tillsätt två milliliter av densitetsgradient medium till tre provrör och överför försiktigt tre lika stora alikvoter av utspädd blod till varje rör av densitetsgradientmedium. Separera cellerna genom centrifugering och överför cellerna vid gränssnittet till ett nytt rör.Tvätta de insamlade cellerna en gång i två milliliter PBS i sex minuter, följt av sex tvättar i två milliliter färsk PBS per tvätt i två minuter. Efter den sista tvätten, åter upphäva MPC-innehållande cell pellet i en milliliter pbs för räkning och lägga till en gånger tio till de sex cellerna till märkta fem milliliter flöde cytometrirör. Pellet cellerna genom centrifugering och tillsätt 100 mikroliter av lämplig antikropp av intresse, utspädd i antikropps inkubation lösning till varje rör.Blanda försiktigt cellerna med varje tillsatt antikroppscocktail i 10 sekunder och placera proverna på fyra grader Celsius, skyddad från ljus, i 20 minuter. Vid slutet av inkubationen centrifugerar proverna och åter uppställ pelletsen i 500 mikroliter pbs kompletterade med två millimolar EDTA. Använda isotype-matchade kontroller för att ställa in bakgrunden färgning, analysera proverna genom flöde cytometri enligt standardprotokoll, gating på lymfocyterna i en framåt vid sida scatter plot, att utesluta resterande granulocyter, cellulära skräp, och andra partiklar.Ställ in en grind så att den innehåller ett högt antal celler med en CD45-positiv CD34-positiv fenotyp. Därefter använder cd45-positiva CD34-positiva gate för att välja för Kinas infoga domän receptor CD133 eller CD184-positiva celler. MPC-delpopulationerna kan sedan identifieras med sina specifika cellytmarkörer och rapporteras som procentandelen gated events.För att bestämma koncentrationen av lösliga biomarkörer i de insamlade blodproverna, först, tvätta lämpliga pre-coated ELISA plattor två gånger med kit-provided tvätt buffert och etikett standard, prov, och kontrollrör. Centrifugera blodprovet för att separera blodkomponenterna och alikvotera plasman i provrören. Överför standarderna, proverna och kontrollerna till lämpliga brunnar och förslut och inkubera plattan i 37 grader Celsius i 90 minuter.Vid slutet av inkubationen, kassera brunnsinnehållet och tillsätt biotindetekteringsantikroppen till varje brunn. Efter en timmes inkubation vid 37 grader Celsius, kassera plattan innehållet och tvätta brunnarna tre gånger med färsk tvätt buffert per tvätt. Efter den sista tvätten, inkubera proverna med Streptavidin arbetslösning i 30 minuter vid 37 grader Celsius följt av tre tvättar, som visats.Efter den sista tvätten, behandla proverna med tetramethylbenzidinsubstrat i 30 minuter vid 37 grader Celsius. När färgen utvecklas, lägg till stopplösning från satsen och läs av den optiska densitetsabsorbansen i en mikroplatta ELISA-läsare. För att bestämma koncentrationen av tumörnekros faktor alfa, och interleukin-1 beta, med hjälp av immunomagnetisk multiplexering, etikett standard, prov, och kontroll rör och virvel den magnetiska pärla injektionsblad i 30 sekunder.Lägg pärlor till lämpliga brunnar av multiplexering assay plattan. När alla pärlor har lagts till, sätt säkert in den handhållna magnetiska plattan bricka, och vänta två minuter för pärlorna att ackumuleras på botten av varje brunn, innan snabbt invertera både handhållna magnetiska plattan bricka, och plattan montering över en avfallsbehållare. Därefter lägger du till 150 mikroliter av tvättbuffert till varje brunn och vänta 30 sekunder för att låta pärlorna samlas på botten.Kassera innehållet igen som bara visat och tillsätt 25 mikroliter av universell analys buffert och 25 mikroliter av de beredda standarder, prover och kontroller. Täta plattan för en minst 60 minuters inkubation, skyddad från ljus vid rumstemperatur, och 500 rotationer per minut. I slutet av inkubationen, tillsätt 150 mikroliter av tvättbuffert till varje brunn och låt pärlorna att bosätta sig i 30 sekunder.Använd sedan tallriksbrickan för att kassera brunnsinnehållet och märk varje brunn med 25 mikroliter av detektionsantikroppsblandning följt av två tvättar, vilket visas. Efter den andra tvätten, inkubera proverna med 25 mikroliter streptavidin PE i 30 minuter vid rumstemperatur. I slutet av inkubationen, tillsätt 120 mikroliter av läsbuffert till varje brunn och försegla plattan för en fem minuters inkubation, skyddad från ljus vid rumstemperatur, för 500 rotationer per minut.Sedan, ladda plattan på en multiplexering assay läsare och justera avläsningsparametrar enligt varje analyt. Koronar, venus-sinus och perifert blod samlades in från 52 patienter som genomgick koronar angiografi och visat en hög prevalens av högt blodtryck och dyslipidemi. Den koronarkoncentrationen för baslinjen för de flesta MPC var signifikant lägre hos patienter som utvecklade stora negativa kardiovaskulära händelser, med en större minskning av MPC-subpopulationer CD34-positiva CD133-positiva och CD45-positiva, CD34-positiva, CD133- positiva, CD184- positiva.På samma sätt hade patienter som utvecklade stora negativa kardiovaskulära händelser en ökad baslinje i koronarmängder av lösliga ICAM- 1 och lägre mängder metallomtrixprotein 9. Koronar MPCs och lösliga ICAM-1 visat en prognostisk förmåga för stora negativa kardiovaskulära händelse-fri överlevnad. Intressant nog visade uttrycket av tumör nekros faktor alfa variationer enligt tidpunkten för mätning och placeringen av den koronar provtagning baserat på en jämförelse av olika lumen områden vid samma födans gatan, med hjälp av intravaskulära ultraljud.Under MPC isolering, se till att överföra blodet på densiteten gradient, och att samla cellerna från gränssnittet efter centrifugeringen noggrant. Periodisk virvelning förhindrar pärlutfällning och med hjälp av en magnetisk tallriksbricka hjälper till att hålla pärlorna inuti brunnarna under tvättar. Koronar MPCs och lösliga molekyler är användbara för stratifiering av risken för kardiovaskulära händelser under uppföljning efter angioplastik, bistå vid tillhandahållande av sekundära preventions till högriskpersoner som denna teknik återspeglar den patofysiologiska processen som sker under upphörandet av lösningen, det kan vara användbart för förhållanden där vaskulär biologi spelar en roll.

Research

JoVE Journal

Medicine

Coronary Artery Ligation and Intramyocardial Injection in a Murine Model of Infarction

Koronar Ligation och Intramyocardial Injektion i en murin modell för infarkt

Mouse models are a valuable tool for studying acute injury and chronic remodeling of the myocardium in vivo.  With the advent of genetic modifications to ...

Modified Technique for Coronary Artery Ligation in Mice

Ändrad Teknik för kransartärligering hos möss

Myocardial infarction (MI) is one of the most important causes of mortality in humans1-3. In order to improve morbidity and mortality in patients with MI ...

Retrograde Perfusion and Filling of Mouse Coronary Vasculature as Preparation for Micro Computed Tomography Imaging

Retrograd perfusion och påfyllning av mus kranskärlen som förberedelse för Micro datortomografi Imaging

Visualization of the vasculature is becoming increasingly important for understanding many different disease states. While several techniques exist for ...

Permanent Ligation of the Left Anterior Descending Coronary Artery in Mice: A Model of Post-myocardial Infarction Remodelling and Heart Failure

Permanent Ligering av vänster främre Fallande Kranskärls hos möss: En modell av efter hjärtinfarkt Remodelling och hjärtsvikt

Heart failure is a syndrome in which the heart fails to pump blood at a rate commensurate with cellular oxygen requirements at rest or during stress. It ...

Ultrasound Based Assessment of Coronary Artery Flow and Coronary Flow Reserve Using the Pressure Overload Model in Mice

Ultraljud Baserat Bedömning av kranskärls Flow och Coronary Flow Reserve Använda tryckÖverbelastnings Model hos möss

Transthoracic Doppler echocardiography (TTDE) is a clinically useful, noninvasive tool for studying coronary artery flow velocity and coronary flow ...

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery (ALCAPA)

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery ALCAPA

Direkt Re-implantation av vänstra kransartären in i aorta i Adults med Anomalous ursprung vänstra kransartären från lungartären (ALCAPA)

Anomalous origin of the left coronary artery from the pulmonary artery (ALCAPA) is a rare congenital anomaly which is one of leading causes of myocardial ...

Identifying Coronary Artery Calcification on Non-gated Computed Tomography Scans

Att identifiera kranskärl förkalkning på beräknas icke-gated tomografi skanningar

Coronary artery calcification (CAC) provides an objective measure of coronary artery disease and can readily be identified on non-gated computed ...

Evaluation of Coronary Flow Reserve After Myocardial Ischemia Reperfusion in Rats

Utvärdering av Koronarflödesreserv efter myokardischemi Refusion hos råttor

Coronary artery disease is the leading cause of death worldwide. After an acute myocardial infarction, early and successful myocardial intervention via ...

In Vitro Model of Coronary Angiogenesis

In Vitro Modell av födans Angiogenes

Here, we describe an in vitro culture assay to study coronary angiogenesis. Coronary vessels feed the heart muscle and are of clinical importance. Defects ...

Novel Percutaneous Approach for Deployment of 3D Printed Coronary Stenosis Implants in Swine Models of Ischemic Heart Disease

Nya perkutanmetod för utplacering av 3D-tryckta kranskärlstenosimplantat i svinmodeller av ischemisk hjärtsjukdom

Minimally invasive methods for creating models of focal coronary narrowing in large animals are challenging. Rapid prototyping using three-dimensionally ...