Name: measurement of pulse propagation velocity, distensibility and strain in an abdominal aortic aneurysm mouse model
Uploaded: 2020-02-23T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measurement of Pulse Propagation Velocity, Distensibility and Strain in an Abdominal Aortic Aneurysm Mouse Model at JoVE.com

Este trabalho foi apoiado pela R01HL124155 (CPH) e financiamento do Instituto de Pesquisa da Universidade do Missouri para a CPH.

O protocolo de manuseio de camundongos e ultrassom foi aprovado pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da Universidade do Missouri (protocolo animal número 8799) e foi conduzido de acordo com a AAALAC International.
1. Configuração de equipamentos e preparação de camundongos
<ol><li>Configuração de equipamentos<ol>
<li>Ligue o instrumento de ultrassom, o aquecedor de gel ultrassônico e a almofada de aquecimento.</li>
		<li>Abra o programa de ultrassom e digite o nome...

<ol>
	<li>Wanhainen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+to+Define+an+Abdominal+Aortic+Aneurysm+&#8212;+Influence+on+Epidemiology+and+Clinical+Practice.">How to Define an Abdominal Aortic Aneurysm &#8212; Influence on Epidemiology and Clinical Practice.</a> Scandinavian Journal of Surgery. 97, 105-109 (2008).</li><li>Benjamin, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+Disease+and+Stroke+Statistics&#8212;2018+Update:+A+Report+From+the+American+Heart+Association.">Heart Disease and Stroke Statistics&#8212;2018 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. 137, 67 (2018).</li><li>Xu, J., Shi, G. -. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+wall+extracellular+matrix+proteins+and+vascular+diseases.">Vascular wall extracellular matrix proteins and vascular diseases.</a> Biochimica et biophysica acta. 1842, 2106-2119 (2014).</li><li>Daugherty, A., Manning, M. W., Cassis, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiotensin+II+promotes+atherosclerotic+lesions+and+aneurysms+in+apolipoprotein+E-deficient+mice.">Angiotensin II promotes atherosclerotic lesions and aneurysms in apolipoprotein E-deficient mice.</a> Journal of Clinical Investigation. 105, 1605-1612 (2000).</li><li>Au - Sawada, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasound+Imaging+of+the+Thoracic+and+Abdominal+Aorta+in+Mice+to+Determine+Aneurysm+Dimensions.">Ultrasound Imaging of the Thoracic and Abdominal Aorta in Mice to Determine Aneurysm Dimensions.</a> Journal of Visualized Experiments. , 59013 (2019).</li><li>Raaz, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Segmental+Aortic+Stiffening+Contributes+to+Experimental+Abdominal+Aortic+Aneurysm+Development.">Segmental Aortic Stiffening Contributes to Experimental Abdominal Aortic Aneurysm Development.</a> Circulation. 131, 1783-1795 (2015).</li><li>van Disseldorp, E. M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+limited+field-of-view+on+wall+stress+analysis+in+abdominal+aortic+aneurysms.">Influence of limited field-of-view on wall stress analysis in abdominal aortic aneurysms.</a> Journal of Biomechanics. 49, 2405-2412 (2016).</li><li>Miyatani, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulse+wave+velocity+for+assessment+of+arterial+stiffness+among+people+with+spinal+cord+injury:+a+pilot+study.">Pulse wave velocity for assessment of arterial stiffness among people with spinal cord injury: a pilot study.</a> Journal of Spinal Cord Medicine. 32, 72-78 (2009).</li><li>Sharma, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deficiency+of+IL12p40+(Interleukin+12+p40)+Promotes+Ang+II+(Angiotensin+II)-Induced+Abdominal+Aortic+Aneurysm.">Deficiency of IL12p40 (Interleukin 12 p40) Promotes Ang II (Angiotensin II)-Induced Abdominal Aortic Aneurysm.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 39, 212-223 (2019).</li><li>Raaz, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Segmental+Aortic+Stiffening+Contributes+to+Experimental+Abdominal+Aortic+Aneurysm+Development.">Segmental Aortic Stiffening Contributes to Experimental Abdominal Aortic Aneurysm Development.</a> Circulation. 131, 1783-1795 (2015).</li><li>Sharma, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacological+inhibition+of+Notch+signaling+regresses+pre-established+abdominal+aortic+aneurysm.">Pharmacological inhibition of Notch signaling regresses pre-established abdominal aortic aneurysm.</a> Scientific Reports. , (2019).</li><li>Bray, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Notch+signalling:+a+simple+pathway+becomes+complex.">Notch signalling: a simple pathway becomes complex.</a> Nature Reviews Molecular and Cell Biology. 7, 678-689 (2006).</li><li>Hans, C. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+Notch1+signaling+reduces+abdominal+aortic+aneurysm+in+mice+by+attenuating+macrophage-mediated+inflammation.">Inhibition of Notch1 signaling reduces abdominal aortic aneurysm in mice by attenuating macrophage-mediated inflammation.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis and Vascular Biology. 32, 3012-3023 (2012).</li><li>Cheng, J., Koenig, S. N., Kuivaniemi, H. S., Garg, V., Hans, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacological+inhibitor+of+notch+signaling+stabilizes+the+progression+of+small+abdominal+aortic+aneurysm+in+a+mouse+model.">Pharmacological inhibitor of notch signaling stabilizes the progression of small abdominal aortic aneurysm in a mouse model.</a> Journal of American Heart Association. 3, 001064 (2014).</li><li>Hans, C. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcriptomics+analysis+reveals+new+insights+into+the+roles+of+Notch1+signaling+on+macrophage+polarization.">Transcriptomics analysis reveals new insights into the roles of Notch1 signaling on macrophage polarization.</a> The Journal of Immunology. 200, (2018).</li><li>Paraskevas, K. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+aortic+stiffness+(aortic+pulse-wave+velocity)+before+and+after+elective+abdominal+aortic+aneurysm+repair+procedures:+a+pilot+study.">Evaluation of aortic stiffness (aortic pulse-wave velocity) before and after elective abdominal aortic aneurysm repair procedures: a pilot study.</a> Open Cardiovascular Medicine Journal. 3, 173-175 (2009).</li><li>Fortier, C., Desjardins, M. P., Agharazii, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aortic-Brachial+Pulse+Wave+Velocity+Ratio:+A+Measure+of+Arterial+Stiffness+Gradient+Not+Affected+by+Mean+Arterial+Pressure.">Aortic-Brachial Pulse Wave Velocity Ratio: A Measure of Arterial Stiffness Gradient Not Affected by Mean Arterial Pressure.</a> Pulse. 5, 117-124 (2017).</li><li>Golledge, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abdominal+aortic+aneurysm:+update+on+pathogenesis+and+medical+treatments.">Abdominal aortic aneurysm: update on pathogenesis and medical treatments.</a> Nature Reviews Cardiology. 16 (4), 225-242 (2019).</li><li>Choksy, S. A., Wilmink, A. B., Quick, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ruptured+abdominal+aortic+aneurysm+in+the+Huntingdon+district:+a+10-year+experience.">Ruptured abdominal aortic aneurysm in the Huntingdon district: a 10-year experience.</a> Annals of the Royal College of Surgeons of England. 81, 27-31 (1999).</li><li>Luo, F., Zhou, X. -. L., Li, J. -. J., Hui, R. -. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammatory+response+is+associated+with+aortic+dissection.">Inflammatory response is associated with aortic dissection.</a> Ageing Research Reviews. 8, 31-35 (2009).</li></ol>

A imagem de ultrassom fornece uma técnica poderosa para determinar propriedades funcionais da aorta através de medições de PPV, destensibilidade e cepa radial. Essas medidas são particularmente instrutivas para estudar modelos de camundongos da AAA e a abordagem in vivo permite a coleta de dados longitudinal que são potencialmente importantes para entender o desenvolvimento temporal da patologia aórtica. Especificamente, as medidas de rigidez aórtica in vivo são determinadas localmente na aorta abdominal por PPV...

Um aneurisma abdominais (AAA) representa uma doença cardiovascular significativa caracterizada por uma dilatação localizada permanente da aorta que excede o diâmetro original do vaso em 1,5 vezes1. A AAA está entre as 13 principais causas de mortalidade nos Estados Unidos2. A progressão da AAA é atribuída à degeneração da parede aórtica e à fragmentação da elastina, levando, em última instância, à ruptura aórtica. Essas alterações na parede aórtica podem ocorrer sem um aumento significativo no diâmetro intraluminal máximo (MILD), sugerindo assim que o MILD sozinho não é suficiente para prever a gravidade da doença3. Portanto, fatores adicionais precisam ser identificados para detectar alterações iniciais na parede aórtica, o que pode orientar as opções de tratamento precoce. O objetivo geral deste protocolo é fornecer um guia prático para avaliar propriedades funcionais aórticas utilizando imagens de ultrassom caracterizadas por medições de velocidade de propagação de pulso (PPV), destensibilidade e cepa radial.
Um modelo experimental bem caracterizado para estudar AAA, descrito pela primeira vez por Daugherty e colegas, envolve infusão subcutânea de angiotensin II (AngII) através de bombas osmóticas em Apoe-/- ratos4. A medição precisa do LEVE usando imagens de ultrassom tem sido fundamental para caracterizar a AAA neste mouse modelo5. Embora as mudanças histológicas durante o desenvolvimento da AAA tenham sido extensivamente estudadas, as mudanças nas propriedades funcionais da parede da embarcação, como a rigidez aórtica, não foram bem caracterizadas. Este protocolo enfatiza o uso de ultrassom de alta frequência em combinação com as análises sofisticadas como ferramentas poderosas para estudar a progressão temporal da AAA. Especificamente, essas abordagens nos permitem avaliar as propriedades funcionais da parede da embarcação medida pelo PPV, destensibilidade e cepa radial.
Estudos clínicos recentes em indivíduos humanos com AAA, bem como no modelo AAA induzido por elastase murina, sugerem uma correlação positiva entre rigidez aórtica e diâmetro aórtico6,7. O PPV, indicador de rigidez aórtica, é aceito como uma excelente medida para quantificar mudanças na rigidez na parede do vaso6,8. O PPV é calculado medindo o tempo de trânsito da forma de onda de pulso em dois locais ao longo da vasculatura, proporcionando assim uma avaliação regional da rigidez aórtica. Recentemente demonstramos que o aumento da rigidez aórtica medida pelo PPV, e no nível celular determinado usando microscopia de força atômica, correlaciona positivamente com o desenvolvimento do aneurisma9. Além disso, a literatura sugere que a rigidez aórtica pode preceder a dilatação aneurismal e, portanto, pode fornecer informações úteis sobre propriedades intrínsecas regionais da parede do navio durante o desenvolvimento da AAA10. Da mesma forma, destensibilidade e medidas de tensão são as ferramentas de quantificação para medir mudanças anteriores do condicionamento arterial. Artérias saudáveis são flexíveis e elásticas, enquanto com aumento da rigidez e menos elasticidade, destensibilidade e tensão são diminuídas. Aqui, fornecemos um guia prático e protocolo passo a passo para o uso de um sistema de ultrassom de alta frequência para medir leve, PPV, destensibilidade e tensão radial em camundongos. O protocolo fornece abordagens técnicas que devem ser utilizadas em conjunto com as informações básicas fornecidas por manuais para instrumentos específicos de ultrassom e o tutorial de vídeo que acompanha. É importante ressaltar que, em nossas mãos, o protocolo de imagem descrito fornece dados reprodutíveis e precisos que parecem valiosos no estudo do desenvolvimento e progressão da AAA experimental.
Para demonstrar ainda mais a utilidade da imagem de ultrassom, fornecemos imagens e medições de exemplo retiradas de nossos próprios estudos com o objetivo de usar abordagens farmacológicas para prevenir o AAA11experimental . Especificamente, a sinalização de entalhe foi proposta para estar envolvida em múltiplos aspectos do desenvolvimento vascular e inflamação12. Usando haploinsuficiência genética e abordagens farmacológicas, já demonstramos anteriormente que a inibição de notch reduz o desenvolvimento de AAA em camundongos, prevenindo a infiltração de macrófagos no local de lesão vascular13,14,15. Para o artigo atual, utilizando a abordagem farmacológica para inibição de Notch focamos na relação entre rigidez aórtica e fatores relacionados à AAA. Esses estudos ilustram que a inibição do notch reduz a rigidez aórtica, que é uma medida da progressão AAA11.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Angiotensin II</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A9525</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Apoe-/- mice</td>
			<td>The Jackon lab</td>
			<td><img src="/files/ftp_upload/60515/60515mateq.jpg"/></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clippers</td>
			<td>WAHL</td>
			<td>1854</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swab</td>
			<td>Q-tips</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPT</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D5942</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Depilatory cream</td>
			<td>Nair</td>
			<td>LL9038</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrode cream</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>17-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gel warmer</td>
			<td>Thermasonic (Parker)</td>
			<td>82-03 (LED)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>Stryker</td>
			<td>T/pump professional</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>VetOne</td>
			<td>Fluriso TM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane vaporizer</td>
			<td>Visualsonics</td>
			<td>VS4244</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lubricating ophthalmic ointment</td>
			<td>Lacri-lube</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Osmotic pumps</td>
			<td>Alzet</td>
			<td>Model 2004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oxygen tank</td>
			<td>Air gas</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tranducer</td>
			<td>Visualsonics</td>
			<td>MS-400 or MS550D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasonic gel</td>
			<td>Parker</td>
			<td>Aquasonic clear</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound Imaging System</td>
			<td>Visualsonics</td>
			<td>Vevo 2100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo Vasc Software</td>
			<td>Visualsonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measurement of pulse propagation velocity, distensibility and strain in an abdominal aortic aneurysm mouse model

Um aneurisma abdominais (AAA) é definido como uma dilatação localizada da aorta abdominal que excede o diâmetro intraluminal máximo (MILD) em 1,5 vezes do seu tamanho original. Estudos clínicos e experimentais mostraram que pequenos aneurismas podem romper, enquanto uma subpopulação de grandes aneurismas pode permanecer estável. Assim, além da medição do diâmetro intraluminal da aorta, o conhecimento dos traços estruturais da parede da embarcação pode fornecer informações importantes para avaliar a estabilidade da AAA. O endurecimento aórtico surgiu recentemente como uma ferramenta confiável para determinar mudanças precoces na parede vascular. A velocidade de propagação do pulso (PPV) juntamente com a destensibilidade e a cepa radial são métodos altamente úteis baseados em ultrassom relevantes para avaliar a rigidez aórtica. O objetivo principal deste protocolo é fornecer uma técnica abrangente para o uso do sistema de imagem de ultrassom para adquirir imagens e analisar as propriedades estruturais e funcionais da aorta determinadas por LEVE, PPV, destensibilidade e cepa radial.

Imagens representativas do modo M da aorta abdominal normal e aneurisma dos camundongos são mostradas na Figura 2A e Figura 2B,respectivamente. A aorta abdominal suprarrenal é identificada por sua localização ao lado da artéria renal direita e a artéria mesentérica superior(Figura 2A). Imagens representativas utilizadas para o cálculo do MILD, em três batimentos cardíacos ...

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Measurement of Pulse Propagation Velocity, Distensibility and Strain in an Abdominal Aortic Aneurysm Mouse Model

Este manuscrito descreve um protocolo detalhado para o uso de imagens de ultrassom de alta frequência para medir o diâmetro luminal, a velocidade de propagação do pulso, a destensibilidade e a tensão radial em um modelo de camundongo do aneurisma aórtico abdominal.

Medição da velocidade de propagação do pulso, destensibilidade e tensão em um modelo de rato aórtico abdominal

An abdominal aortic aneurysm (AAA) is defined as a localized dilation of the abdominal aorta that exceeds the maximal intraluminal diameter (MILD) by 1.5 ...

A imagem de ultrassom e a análise funcional são técnicas muito poderosas para determinar o crescimento e estabilidade dos aneurismas abdominais, além dos métodos tradicionais de tamanho aórtico e diâmetro. Esta técnica não invasiva mede a velocidade da onda de pulso, a capacidade de distância e a distância da aorta para monitorar mudanças sutis nas funções aórticas, juntamente com o diâmetro aórtico. A rigidez aórtica é um indicador da progressão do aneurisma de aoriedade abdominal e a estabilidade pode ser útil na avaliação dos efeitos dos agentes terapêuticos de interesse em ensaios pré-clínicos.Além disso, as medidas de velocidade e tensão também podem estar correlacionadas com as alterações vasculares que ocorrem durante o desenvolvimento de diversas doenças cardiovasculares, como hipertensão arterial, diabetes, obesidade e aterosclerose. Demonstrando o procedimento estará o Dr.Sun, um professor assistente de pesquisa da instalação do Núcleo de Imagens. Para preparar o mouse para o procedimento de imagem, após confirmar a falta de resposta ao reflexo do pedal, aplique solução opthalmic aos olhos do camundongo anestesiado e coloque o mouse na posição supina na plataforma de imagem animal inclinada 10 graus para o lado inferior direito.Aplique gel de eletrodo nas quatro patas e tape as patas nos condutores de eletrocardiograma de cobre na plataforma de imagem. Use cortadores para raspar o cabelo no local da imagem e aplique creme depilatório na pele exposta. Depois de menos de um minuto, use uma toalha de papel úmida para remover o creme e o cabelo, e aplique 37 graus Celsius de gel ultrassônico no local preparado.Em seguida, use a extremidade de madeira de um cotonete para suavizar o gel e remover quaisquer bolhas. Para a imagem da aorta abdominal, conecte o transdutor ao seu suporte e coloque o transdutor perpendicular à linha média do camundongo. Abaixe o transdutor até tocar o gel e posicione a ponta 0,5 a um centímetro abaixo do diafragma.Quando o transdutor estiver no lugar, visualize a aorta abdominal na visão de eixo curto. Em seguida, gire suavemente o transdutor 90 graus no sentido horário e ajuste lentamente o botão micro manipulador do eixo X para visualizar a aorta na visão de eixo longo. Use a zona de foco e os alternadores de profundidade de foco para definir a zona de foco e profundidade na região da aorta.Ajuste manualmente o controle deslizante de compensação de ganho de tempo para escurecer o lúmen da aorta para obter um contraste ideal da parede de aorta. Ajuste o manipulador do eixo Y para visualizar os pontos de ramificação das artérias mesentéricas superiores e as artérias renais direitas. A artéria renal direita pode ser usada como um marco para capturar uma imagem da aorta super renal.Depois de gravar pelo menos 100 quadros de imagens no modo B na aorta super renal, salve as imagens e selecione o modo final. Role a bola do cursor para levar a linha indicadora amarela para uma seção de aorta normal com uma imagem clara da parede do vaso ou para as seções onde o diâmetro máximo do aneurisma é observado. Clique no alternador do portão SV e ajuste a bola do cursor para garantir que as paredes do vaso estejam incluídas no suporte de medição.Em seguida, pressione a atualização para gravar as medições do modo M e envie para armazenar para capturar as medidas. Para obter imagens EKV pressione o botão do modo B para voltar à gravação do modo B e pressione o botão Configurações de Physio para permitir a seleção de gating de respiração. Ajuste manualmente o atraso e a janela de gating para registrar os dados somente durante as partes mais lisonjeiras da onda de respiração.As seções de gravação serão mostradas como blocos coloridos no rastreamento da onda de respiração. Pressione o botão EKV para ativar o modo EKV. No menu apropriado, defina a resolução Tipo de Aquisição para Padrão, a Taxa de Quadros para 3.000 ou mais e clique em Digitalizar para gravar as imagens EKV.Em seguida, pressione enviar para armazenar para salvar as imagens e use a imagem do modo EKV para obter medições do PPV, distensibilidade e tensão radial. Para medir o leve, abra o programa de ultrassom e digite o nome do estudo e informações descritivas para cada mouse. Abra os dados do ultrassom e a imagem do modo M e pause o batimento cardíaco.Clique em medições e selecione o Pacote Vascular e a Profundidade a partir das opções de drop-down. Em seguida, desenhe uma linha através do lúmen aórtico estendendo-se da parede interna para a parede. Para análise de PPV abra a imagem EKV e pause o batimento cardíaco.Clique no ícone para abrir uma nova janela no software de análise e selecione a opção PPV. Uma pequena janela aparecerá com a imagem da aorta. Clique na parede superior do vaso e arraste o ponteiro para cobrir ambas as paredes da aorta super renal com uma caixa de aproximadamente quatro milímetros e clique em Aceitar para salvar os valores do PPV.Para análise de distensibilidade na imagem EKV aberta, clique no ícone de software e selecione Trace New Region of Interest para desenhar uma caixa retangular em ambas as paredes do navio. O software rastreará automaticamente as paredes superiores e inferiores da nave. Clique nos pontos verdes para ajustar o alinhamento do rastreamento, se necessário, e clique em Aceitar.O software calculará a distensibilidade dentro da região de interesse selecionada. Para obter a medição da tensão radial selecione a opção de tensão apropriada no menu e clique em Coestar. As imagens para tensão radial e tensão tangencial se abrirão.Em seguida, mova o cursor para o pico da curva para obter o valor para a tensão radial. Para a reprodutibilidade ideal e detecção de determinados estágios, as imagens devem ser analisadas pela mesma pessoa no mesmo local anatômico para garantir a consistência dentro dos dados. Aqui, imagens representativas do modo M de aortas abdominais de camundongos normais e aneurismas são mostradas.A aorta abdominal super renal pode ser identificada por sua localização ao lado do ramo direito da artéria renal e da artéria mesentérica superior. Como ilustrado nestas imagens, o leve pode ser calculado usando três batimentos cardíacos diferentes do ciclo cardíaco sistólico em aortas normais e aneurismals. No caso de um aneurisma de aorta, o diâmetro luminal pode ser determinado desenhando uma linha amarela perpendicular entre as duas bordas internas do lúmen na área de dilatação máxima.Nesta análise representativa, a ultrassonografia transdominais revelou um aumento progressivo da leve e do VPP e diminuição da distensibilidade e da tensão radial em resposta à angiotensina II no dia 28. A infusão de angiotensina II aumentou marginalmente a partir do dia 28 para 56, enquanto o tratamento com um inibidor de entalhe não afetou significativamente levemente em comparação com a angiostatina II. É importante notar que o VPP correlacionou-se fortemente com leve no dia 28, enquanto no dia 56, a correlação foi relativamente fraca.Histologicamente, a infusão de angiotensina II aumentou a degradação do colágeno e a atividade proteolítica na camada de mídia da aorta. O tratamento inibidor do entalhe, no entanto, minimizou essas alterações na degradação da matriz celular extra. Realmente configurar o animal e a sonda e identificar a aorta abdominal são os passos mais críticos.Iniciantes eu aconselho a usar o botão micromanipulador para fazer ajustes finos. Usando este método também podemos medir o fluxo de blocos na aorta ou na artéria renal, avaliar a função cardíaca e monitorar doenças vasculares periféricas. Depois de atingir determinado tamanho, os aneurismas abdominais não crescem excessivamente.Nestas circunstâncias, certas mudanças de estrutura são rapidamente detectadas por essas técnicas em resposta a agentes farmacológicos ou outras manipulações. Durante a administração da anestesia, certifique-se de usar o carvão e solvente para isofluorent, e o desgaste do escapamento. Certifique-se também de que não há vazamento do orifício do nariz.

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Biliary atresia (BA) is a fatal disease involving obstructive jaundice, and it is the most common indication for liver transplantation in children. Due to ...

Single&#45;Copy Gene Expression for Characterizing Multidrug Efflux Systems

Characterizing Multidrug Efflux Systems in Acinetobacter baumannii Using an Efflux&#45;Deficient Bacterial Strain and a Single&#45;Copy Gene Expression System

Author Spotlight: Advancing Antibiotic Resistance Research Using an Efflux&#45;Deficient Bacterial Strain and a Single&#45;Copy Gene Expression System

Acinetobacter baumannii is recognized as a challenging Gram-negative pathogen due to its widespread resistance to antibiotics. It is crucial to comprehend ...