Name: identification of novel regulators of plant transpiration by large-scale thermal imaging screening in helianthus annuus
Uploaded: 2020-01-30T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Identification of Novel Regulators of Plant Transpiration by Large-Scale Thermal Imaging Screening in Helianthus Annuus at JoVE.com

इस काम को पोमोना कॉलेज स्टार्ट-अप फंड्स और हिर्श रिसर्च दीक्षा ग्रांटफंड (एफजे के साथ-साथ तारकीय ग्रीष्मकालीन अनुसंधान सहायक कार्यक्रम (केजी के लिए) के माध्यम से पोमोना कॉलेज आणविक जीव विज्ञान कार्यक्रम द्वारा समर्थित किया गया था ।

1. पौधों को उगाना
<ol><li>मानक 10 इंच x 20 इंच (254 मिमी x 501 मिमी) पौधे ट्रे में 4 सेमी मोटी परत डालकर कोई छेद नहीं है।</li>
	<li>पौधे की ट्रे में बीज धारकों (सामग्री की तालिकादेखें) 2 सेमी अलग रखें।</li>
	<li>वर्मीकुलाइट से बी...

<ol>
	<li>Basu, S., Ramegowda, V., Kumar, A., Pereira, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plant+adaptation+to+drought+stress.">Plant adaptation to drought stress.</a> F1000Research. 5, (2016).</li><li>McLachlan, D. H., Kopischke, M., Robatzek, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gate+control:+guard+cell+regulation+by+microbial+stress.">Gate control: guard cell regulation by microbial stress.</a> The New Phytologist. 203 (4), 1049-1063 (2014).</li><li>Leung, J., Bazihizina, N., Mancuso, S., Valon, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Revisiting+the+Plant's+Dilemma.">Revisiting the Plant's Dilemma.</a> Molecular Plant. 9 (1), 7-9 (2016).</li><li>Macarron, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+high-throughput+screening+in+biomedical+research.">Impact of high-throughput screening in biomedical research.</a> Nature Reviews Drug Discovery. 10 (3), 188-195 (2011).</li><li>Wigglesworth, M. J., Murray, D. C., Blackett, C. J., Kossenjans, M., Nissink, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increasing+the+delivery+of+next+generation+therapeutics+from+high+throughput+screening+libraries.">Increasing the delivery of next generation therapeutics from high throughput screening libraries.</a> Current Opinion in Chemical Biology. 26, 104-110 (2015).</li><li>Zhao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+genetic+interrogation+of+natural+variation+uncovers+a+molecule+that+is+glycoactivated.">Chemical genetic interrogation of natural variation uncovers a molecule that is glycoactivated.</a> Nature Chemical Biology. 3 (11), 716-721 (2007).</li><li>Park, S. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abscisic+acid+inhibits+type+2C+protein+phosphatases+via+the+PYR/PYL+family+of+START+proteins.">Abscisic acid inhibits type 2C protein phosphatases via the PYR/PYL family of START proteins.</a> Science. 324 (5930), 1068-1071 (2009).</li><li>Ma, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulators+of+PP2C+phosphatase+activity+function+as+abscisic+acid+sensors.">Regulators of PP2C phosphatase activity function as abscisic acid sensors.</a> Science. 324 (5930), 1064-1068 (2009).</li><li>Cao, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+ABA-mimicking+ligand+that+reduces+water+loss+and+promotes+drought+resistance+in+plants.">An ABA-mimicking ligand that reduces water loss and promotes drought resistance in plants.</a> Cell Research. 23 (8), 1043-1054 (2013).</li><li>Okamoto, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+dimeric+ABA+receptors+elicits+guard+cell+closure,+ABA-regulated+gene+expression,+and+drought+tolerance.">Activation of dimeric ABA receptors elicits guard cell closure, ABA-regulated gene expression, and drought tolerance.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 110 (29), 12132-12137 (2013).</li><li>Rodriguez, P. L., Lozano-Juste, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unnatural+agrochemical+ligands+for+engineered+abscisic+acid+receptors.">Unnatural agrochemical ligands for engineered abscisic acid receptors.</a> Trends in Plant Science. 20 (6), 330-332 (2015).</li><li>Kim, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+genetics+reveals+negative+regulation+of+abscisic+acid+signaling+by+a+plant+immune+response+pathway.">Chemical genetics reveals negative regulation of abscisic acid signaling by a plant immune response pathway.</a> Current Biology. 21 (11), 990-997 (2011).</li><li>Ito, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+Abscisic+Acid+Antagonists+Identified+with+Chemical+Array+Screening.">Novel Abscisic Acid Antagonists Identified with Chemical Array Screening.</a> ChemBioChem. 16 (17), 2471-2478 (2015).</li><li>Ye, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Novel+Chemical+Inhibitor+of+ABA+Signaling+Targets+All+ABA+Receptors.">A Novel Chemical Inhibitor of ABA Signaling Targets All ABA Receptors.</a> Plant Physiology. 173 (4), 2356-2369 (2017).</li><li>Takeuchi, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Designed+abscisic+acid+analogs+as+antagonists+of+PYL-PP2C+receptor+interactions.">Designed abscisic acid analogs as antagonists of PYL-PP2C receptor interactions.</a> Nature Chemical Biology. 10 (6), 477-482 (2014).</li><li>Rauf, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+in+modification+of+sunflower+oil+to+expand+its+industrial+value.">Progress in modification of sunflower oil to expand its industrial value.</a> Journal of the Science of Food and Agriculture. 97 (7), 1997-2006 (2017).</li><li>Caraus, I., Alsuwailem, A. A., Nadon, R., Makarenkov, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detecting+and+overcoming+systematic+bias+in+high-throughput+screening+technologies:+a+comprehensive+review+of+practical+issues+and+methodological+solutions.">Detecting and overcoming systematic bias in high-throughput screening technologies: a comprehensive review of practical issues and methodological solutions.</a> Briefings in Bioinformatics. 16 (6), 974-986 (2015).</li><li>Costa, J. M., Grant, O. M., Chaves, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thermography+to+explore+plant-environment+interactions.">Thermography to explore plant-environment interactions.</a> Journal of Experimental Botany. 64 (13), 3937-3949 (2013).</li><li>Merlot, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+infrared+thermal+imaging+to+isolate+Arabidopsis+mutants+defective+in+stomatal+regulation.">Use of infrared thermal imaging to isolate Arabidopsis mutants defective in stomatal regulation.</a> The Plant Journal. 30 (5), 601-609 (2002).</li></ol>

किसी दिए गए दिन पर परीक्षण किए जा सकने वाले यौगिकों की संख्या ज्यादातर पौधों को विकसित करने और स्क्रीन करने के लिए उपलब्ध पर्यावरण की दृष्टि से नियंत्रित स्थान के साथ-साथ (ii) उन व्यक्तियों की संख्या पर न...

पौधों में तनाव सहनशीलता एक पॉलीजेनिक विशेषता है जो विभिन्न आणविक, सेलुलर, विकासात्मक और शारीरिक विशेषताओं और तंत्र1से प्रभावित होती है। एक उतार चढ़ाव वाले वातावरण में पौधों को पर्याप्त पानी बनाए रखते हुए कार्बन की फोटोसिंथेटिक मांग को संतुलित करने और रोगजनक आक्रमण को रोकनेकेलिए अपने स्टोमटाल आंदोलनों को लगातार मिलाना चाहिए । हालांकि, तंत्र जिसके द्वारा इन व्यापार बंद "निर्णय" किया जाता है खराब3समझ रहे हैं . पौधों में जैव सक्रिय अणुओं का परिचय उनके शरीर विज्ञान को मिलाना और विनियमन के नए तंत्र की जांच में मदद कर सकते हैं ।
छोटे अणुओं की बड़े पैमाने पर स्क्रीनिंग एक प्रभावी रणनीति है जिसका उपयोग कैंसर रोधी दवा खोज और औषधीय परखों में किया जाता है ताकि कम समय मेंसैकड़ोंसे हजारों अणुओं के शारीरिक प्रभावों का परीक्षण किया जा सके। संयंत्र जीव विज्ञान में, उच्च थ्रूपुट स्क्रीनिंग ने सिंथेटिक अणु पायराबैक्टिन6की पहचान में उदाहरण के लिए अपनी प्रभावशीलता दिखाई है, साथ ही एबीएससीआईसी एसिड (एबीए)7,8के लंबे समय से मांग वाले रिसेप्टर की खोज की है। तब से, ABA रिसेप्टर्स के agonists और विरोधी, और छोटे अणुओं ABA-inducible रिपोर्टर जीन की अभिव्यक्ति को मिलाना करने में सक्षम9,10,11,12,13,14,15की पहचान की गई है । उच्च थ्रूपुट स्क्रीनिंग वर्तमान में छोटे यौगिकों की पहचान करने के लिए उपलब्ध दृष्टिकोण जो स्टोमेटल एपर्चर को मिला सकते हैं कुछ कमियां हैं: (i) एबीए सिग्नलिंग मार्ग के आसपास घूमने वाले प्रोटोकॉल उपन्यास एबीए-स्वतंत्र तंत्र की पहचान को रोक सकते हैं, और (ii) जैव सक्रिय छोटे अणुओं की पहचान के लिए उपयोग की जाने वाली वीवो रणनीतियों में मुख्य रूप से अंकुरण या अंकुर वृद्धि पर उनके शारीरिक प्रभावों पर भरोसा करते हैं, न कि पौधे के नियमन पर।
इसके अतिरिक्त, जबकि जैव सक्रिय अणुओं के साथ पौधों के इलाज के कई तरीके हैं, उनमें से अधिकांश स्टॉमटाल आंदोलन के बड़े पैमाने पर अध्ययन के लिए अच्छी तरह से अनुकूल नहीं हैं। संक्षेप में, तीन सबसे आम तकनीकों छिड़काव या सूई, जड़ प्रणाली के उपचार, और जड़ सिंचाई द्वारा पत्तेदार आवेदन कर रहे हैं । पत्ते की सतह पर बूंदों की उपस्थिति बड़े पैमाने पर डेटा संग्रह में हस्तक्षेप के बाद से स्टॉमीटल एपर्चर को मापने के लिए सबसे आम और तेजी से पद्धतियों के साथ फोलियार एप्लिकेशन संगत नहीं है। रूट सिंचाई की प्रमुख सीमाएं बड़े नमूना मात्रा आवश्यकताएं, राइजोस्फीयर में तत्वों द्वारा यौगिकों की संभावित अवधारण, और सक्रिय जड़ तेज पर निर्भरता हैं।
यहां, हम संयंत्र के वाष्पीकरण को विनियमित करने वाले नए यौगिकों की पहचान करने के लिए एक बड़े पैमाने पर विधि प्रस्तुत करते हैं जिसमें जरूरी नहीं कि ABA-या ज्ञात सूखा-उत्तरदायी तंत्र शामिल हो और पौधों के कुशल और विश्वसनीय उपचार के लिए अनुमति देता है । इस प्रणाली में, हेलिएथस एन्युअलस पौधों को एक रूट फीडिंग दृष्टिकोण का उपयोग करके इलाज किया जाता है जिसमें हाइड्रोपोनिक रूप से उगाए गए रोपण की प्राथमिक जड़ को काटना और कट साइट को नमूना समाधान में डुबोना शामिल है। एक बार इलाज के बाद, पौधों के वाष्पीकरण पर प्रत्येक यौगिक के प्रभाव को अवरक्त थर्मल इमेजिंग कैमरे का उपयोग करके मापा जाता है। चूंकि पत्ती की सतह के तापमान का एक प्रमुख निर्धारक पत्ती से वाष्पीकरण की दर है, थर्मल इमेजिंग डेटा सीधे स्टोमटाल चालन से सहसंबद्ध हो सकता है। रासायनिक उपचार के बाद पत्तेदार तापमान में सापेक्ष परिवर्तन इस प्रकार पौधे के वाष्पीकरण की मात्रा निर्धारित करने का प्रत्यक्ष साधन प्रदान करता है।
एच annuus दुनिया में पांच सबसे बड़ी तिलहन फसलों में से एक है16 और इस संयंत्र पर सीधे की गई खोजों प्रौद्योगिकी के भविष्य के हस्तांतरण की सुविधा हो सकती है । इसके अलावा, एच एन्युस रोपण में बड़े और फ्लैट कोटाइलेडन होते हैं, साथ ही एक मोटी प्राथमिक जड़ होती है, जो इस प्रोटोकॉल के विकास के लिए आदर्श थी। हालांकि, इस विधि को आसानी से अन्य पौधों और विभिन्न यौगिकों के लिए अनुकूलित किया जा सकता है।
इस प्रोटोकॉल का उपयोग स्टॉमेंटल क्लोजर को ट्रिगर करने या स्टोमटाल ओपनिंग को बढ़ावा देने में सक्षम अणुओं की प्रभावी पहचान करने के लिए किया जा सकता है, जिसमें पर्यावरण के लिए स्टोमटाल आचरण और पौधे अनुकूलन को विनियमित करने वाले संकेतों को समझने के लिए प्रमुख निहितार्थ हैं तनाव.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1020 plastic growing trays without drain holes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Standard 10 x 20 inch trays</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2.0 mL microtubes, capless</td>
			<td>Genesee Scientific</td>
			<td>22-283NC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Abscisic acid (ABA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A1049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Air pump</td>
			<td>Active Aqua</td>
			<td>AAPA7.8L</td>
			<td>2 Outlets, 3W, 7.8 L/min</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Airstones</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chemical compound library</td>
			<td>MicroSource Discovery</td>
			<td></td>
			<td>Natural Product Collection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Creative Versa-Tool (wood burning tool)</td>
			<td>Nasco</td>
			<td>9724549</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethylsulfoxide (DMSO), plant cell culture tested</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D4540</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dwarf Sunspot Sunflower seeds</td>
			<td>Outsidepride.com</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Erythrosin B</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>200964</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydroponics fertilizer set (FloraBloom, FloraGrow, FloraMicro)</td>
			<td>General Hydroponics</td>
			<td>GL51GH1421.31.11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kimwipes Delicate Task Wipers</td>
			<td>Kimberly-Clark Professional</td>
			<td>34155</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laptop</td>
			<td>Dell</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MES hydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M2933</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microdissection scissors</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsoft Excel</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium hydroxide (KOH)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P5958</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ResearchIR Software</td>
			<td>FLIR</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>R-Tech Rigid Polystyrene Foam Board</td>
			<td>Insulfoam</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Seedholders</td>
			<td>Araponics</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Super Tub (plastic utility tub)</td>
			<td>Maccourt</td>
			<td>ST3608</td>
			<td>36 x 24 x 8 inch tub used for hydroponics</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T450sc LWIR (Long-Wave Infrared) Handheld Thermal Imaging Camera</td>
			<td>FLIR</td>
			<td>FLIR-T62101</td>
			<td>Comes with required charging cable and USB cable needed to connect to laptop</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vermiculite</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water filter</td>
			<td>SunSun</td>
			<td>HW-304B Pro Canister Filter</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

identification of novel regulators of plant transpiration by large-scale thermal imaging screening in helianthus annuus

बायोटिक और अजैविक तनावों के लिए पौधे अनुकूलन विभिन्न कारकों द्वारा नियंत्रित होते हैं, जिनमें से पानी की कमी या रोगजनकों के जवाब में स्टोमटाल एपर्चर का विनियमन एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। इसलिए स्टॉमटाल आंदोलन को विनियमित करने वाले छोटे अणुओं की पहचान करने से शारीरिक आधार को समझने में योगदान मिल सकता है जिसके द्वारा पौधे अपने पर्यावरण के अनुकूल होते हैं । बड़े पैमाने पर स्क्रीनिंग दृष्टिकोण है कि स्टोमटाल आंदोलन के नियामकों की पहचान करने के लिए इस्तेमाल किया गया है संभावित सीमाएं हैं: कुछ abscisic एसिड (ABA) हार्मोन संकेत मार्ग पर भारी भरोसा करते हैं, इसलिए ABA स्वतंत्र तंत्र को छोड़कर, जबकि दूसरों को अप्रत्यक्ष, दीर्घकालिक शारीरिक प्रभाव जैसे संयंत्र के विकास और विकास के अवलोकन पर भरोसा करते हैं । यहां प्रस्तुत स्क्रीनिंग विधि थर्मल इमेजिंग द्वारा उनके वाष्पीकरण के प्रत्यक्ष मात्रा के साथ मिलकर रसायनों की एक पुस्तकालय के साथ पौधों के बड़े पैमाने पर उपचार की अनुमति देता है । चूंकि पत्तियों की सतह ठंडा होने के परिणामस्वरूप वाष्पीकरण के माध्यम से पानी का वाष्पीकरण होता है, थर्मल इमेजिंग समय के साथ स्टोमेटल आचरण में परिवर्तन की जांच करने के लिए एक गैर-आक्रामक दृष्टिकोण प्रदान करता है। इस प्रोटोकॉल में, हेलिनथस एन्युअलस रोपण को हाइड्रोपोनिक रूप से उगाया जाता है और फिर रूट फीडिंग द्वारा इलाज किया जाता है, जिसमें प्राथमिक जड़ को काट कर परीक्षण किए जा रहे रसायन में डुबोया जाता है। थर्मल इमेजिंग के बाद समय के साथ कोटाइलेडरी तापमान परिवर्तन के सांख्यिकीय विश्लेषण के बाद जैव सक्रिय अणुओं की पहचान के लिए अनुमति देता है स्टोमेटल एपर्चर । हमारे प्रूफ-ऑफ-कॉन्सेप्ट प्रयोगों से पता चलता है कि एक रसायन कट रूट से 10 मिनट के भीतर सूरजमुखी अंकुर के कोटाइलेडन तक ले जाया जा सकता है । इसके अलावा, जब पौधों को एबीए के साथ सकारात्मक नियंत्रण के रूप में माना जाता है, तो पत्तियों की सतह के तापमान में वृद्धि का पता मिनटों के भीतर लगाया जा सकता है। इस प्रकार हमारी विधि स्टॉमेंटल एपर्चर को विनियमित करने वाले उपन्यास अणुओं की कुशल और तेजी से पहचान की अनुमति देती है।

लाल रंग एरिथ्रोसिन बी (0.8 केडीए) का उपयोग करने वाला एक प्रयोग रसायनों की क्षमता को दर्शाता है कि 10 मिनट के भीतर सूरजमुखी के अंकुर के कोटाइलेडन में कट रूट के माध्यम से अवशोषित हो सकता है<strong class="xfig"...

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Identification of Novel Regulators of Plant Transpiration by Large-Scale Thermal Imaging Screening in Helianthus Annuus

हम एक यौगिक पुस्तकालय की बड़े पैमाने पर स्क्रीनिंग द्वारा पत्तेदार वाष्पीकरण के मॉड्यूलर की पहचान करने के लिए एक विधि प्रदान करते हैं ।

हेलिएथस एन्युस में बड़े पैमाने पर थर्मल इमेजिंग स्क्रीनिंग द्वारा पौधों के वाष्पीकरण के उपन्यास नियामकों की पहचान

Plant adaptation to biotic and abiotic stresses is governed by a variety of factors, among which the regulation of stomatal aperture in response to water ...

यह प्रोटोकॉल थर्मल इमेजिंग का उपयोग करता है ताकि संयंत्र वाष्पीकरण को विनियमित करने में सक्षम नए यौगिकों की पहचान की जा सके । यह तकनीक पौधों की प्रजातियों के संबंध में बहुमुखी है जिनका परीक्षण किया जा सकता है, यौगिक की प्रकृति, और इमेजिंग के प्रकार। खेती के लिए पौधों को स्थापित करने के लिए, पहले बिना छेद के 20 इंच के पौधे ट्रे द्वारा मानक 10 में ठीक वर्मीकुलाइट की चार सेंटीमीटर मोटी परत जोड़ें और बीज धारकों को ट्रे में दो सेंटीमीटर अलग रखें।बीज धारकों को वर्मीकुलाइट से भरें और एक सूरजमुखी के बीज को प्रत्येक धारक में समाप्त करें ताकि बीज का आधा हिस्सा उजागर हो जाए। जब सभी बीज चढ़ाया गया है, उन्हें ऊपर से पानी के साथ ठीक वर्मीकुलाइट और धुंध के एक अतिरिक्त दो सेंटीमीटर के साथ कवर। एक घंटे के बाद, ट्रे को ढक्कन से कवर करें और पौधों को ग्रीनहाउस में एक विकास कक्ष में रखें।हाइड्रोपोनिक्स प्रणाली स्थापित करने के लिए, आसुत पानी के साथ हाइड्रोपोनिक रूप से पौधों को उगाने के लिए उपयुक्त एक उचित आकार के कंटेनर को भरें और निर्माता द्वारा इंगित सामान्य हाइड्रोपोनिक्स उर्वरक जोड़ें। फिर लगातार आंदोलन के साथ परिणामी हाइड्रोपोनिक्स समाधान को वात करने के लिए हवा और पानी पंपों का उपयोग करें। हाइड्रोपोनिक्स फ्लोटर्स तैयार करने के लिए, कंटेनर के आयामों के लिए दो सेंटीमीटर मोटी विस्तारित पॉलीस्टीरिन फोम की एक चादर काटें और फोम में एक से दो सेंटीमीटर व्यास छेद बनाने के लिए लकड़ी के जलने वाले उपकरण का उपयोग करें।इसके बाद फ्लोटर्स को हाइड्रोपोनिक्स सिस्टम में रखें। रोपण के पांच दिन बाद, धीरे-धीरे रोपण को वर्मीकुलाइट से बाहर खींचें। अतिरिक्त वर्मीकुलाइट को हटाने और शेष पेरिकारप्स को नरम करने के लिए तुरंत रोपण को पानी के एक कंटेनर में 30 मिनट के लिए रखें।जब उभरती हुई प्राथमिक जड़ें दिखाई दे रही हों, तो आवश्यक के रूप में हाथ से पेरिकार्प को हटा दें। बीज धारकों के भीतर रोपण को हाइड्रोपोनिक्स प्रणाली में तैयार पॉलीस्टीरिन फोम फ्लोटर्स में स्थानांतरित करें। दो दिनों के लिए हाइड्रोपोनिक्स में पौधों को उगाएं।छोटे यौगिक पुस्तकालय से रसायनों कमरे के तापमान पर गल चलो । नकारात्मक नियंत्रण उपचार के लिए छह कैपलेस दो मिलीलीटर माइक्रोट्यूब लेबल, एबीए उपचार के लिए तीन ट्यूब, और ट्रिपलीकेट में रुचि के 20 रसायनों के प्रभावों के विश्लेषण के लिए अंतिम 60 ट्यूब। प्रत्येक टेस्ट ट्यूब में प्रत्येक रसायन के 10 माइक्रोलीटर, 10 मिलीमोलर एबीए और डिमिथाइल सल्फॉक्साइड के 10 माइक्रोलीटर को तीन एबीए ट्यूबों में और डिमिथाइल सल्फॉक्साइड के 10 माइक्रोलीटर को छह नियंत्रण ट्यूबों में जोड़ें ।फिर ध्यान से प्रत्येक ट्यूब में 10 मिलीमोलर एमईएस पोटेशियम हाइड्रोक्साइड के 990 माइक्रोलीटर मिलाएं। सकारात्मक और नकारात्मक नियंत्रण और प्रयोगात्मक ट्यूबों समान रूप से रैक के भीतर वितरित करने के लिए स्थिति से संबंधित पूर्वाग्रह के लिए खाते के साथ एक ट्यूब रैक में ट्यूब रैक में रखें । थर्मल इमेजिंग कैमरा स्थापित करने के लिए, पहले एक कॉपी स्टैंड पर कैमरे माउंट और एक लैपटॉप के लिए केबल के सभी कनेक्ट ।लैपटॉप चालू करने से पहले कैमरे को चालू करें और थर्मल इमेजिंग विश्लेषण सॉफ्टवेयर खोलें। रिकॉर्डिंग मापदंडों को समायोजित करने के लिए, रिकॉर्ड सेटिंग्स के तहत रिंच आइकन के चयन की अनुमति देने के लिए रिकॉर्ड बटन पर माउस को रोल करें और उपयुक्त रिकॉर्ड मोड और विकल्पों का चयन करें। रोपण के उपचार के लिए, बीज धारक को ध्यान से उठाएं और तेजी से पानी युक्त उथले पकवान में जड़ को डुबोएं।कैपिटेशन को रोकने के लिए बीज धारक के सबसे बेसल छोर के नीचे पानी के नीचे प्रत्येक अंकुर की प्राथमिक जड़ को काटें और रसायनों की एक ट्यूब में हौसले से काटे गए पौधे को डालें। जब सभी रोपण स्थानांतरित कर दिए गए हैं, तो पौधों को थर्मल इमेजिंग कैमरे के नीचे रखें और पुष्टि करें कि सभी पौधे कैमरे के दृश्य के क्षेत्र में हैं। कोटिलेडन्स की सतह पर कैमरे को केंद्रित करने के लिए, प्रेस कंट्रोल ऑल्ट ए और एक फिल्म रिकॉर्ड पर क्लिक करें।रिकॉर्डिंग की पुष्टि करने वाली एक नई विंडो खुलेगी। एक से दो घंटे बाद रिकार्डिंग बंद कर दें। डेटा विश्लेषण के लिए, सही एसईक्यू फ़ाइलों को खोलें और फिल्म को रोकें।तीन पिक्सल आइकन द्वारा ब्याज तीन के एक माप कर्सर क्षेत्र जोड़ने पर क्लिक करें और पहले संयंत्र के एक cotyledon के केंद्र पर माउस ले जाएँ। कॉटिलेडन को लेबल करने के लिए छवि पर बाएं-क्लिक करें। पहले पौधे के दूसरे कोटिलेडन को उसी तरीके से लेबल करें।जब सभी पौधों को दो कर्सर के साथ लेबल किया गया हो, तो ब्याज आइकन और लेफ्ट-क्लिक होल्ड के संपादित क्षेत्रों पर क्लिक करें और ब्याज के सभी क्षेत्रों का चयन करने के लिए स्क्रॉल करें। इसके बाद, सांख्यिकी दर्शक आइकन पर माउस को रोल करें और अस्थायी साजिश का चयन करें। एक नई खिड़की खुलेगी।फिल्म चलाएं, एक ग्राफ डेटा के साथ भर जाएगा । इसके बाद ग्राफ विंडो में एक नया मेन्यू खोलने के लिए डबल एरो पर क्लिक करें और डेटा को सेव करने के लिए सेव आइकन पर क्लिक करें। लाल डाई एरिथ्रोसिन बी का उपयोग रसायनों की क्षमता को दर्शाता है जो 10 मिनट के भीतर सूरजमुखी के अंकुर के कोटिलेडोन में एक कट रूट के माध्यम से अवशोषित होता है।जब पौधों को एबीए के साथ इलाज किया जाता है, तो 30 मिनट के भीतर सूरजमुखी के कोटिलेडोन में पत्ती के तापमान में वृद्धि का पता लगाया जाता है जो स्टोमेटल अपर्चर और स्टोमेटल कंडक्टेंस में कमी से जुड़ा होता है। इसके अलावा, 10 माइक्रोमोलर एबीए के साथ उपचार के 15 मिनट बाद और पांच माइक्रोमोलर एबीए के साथ उपचार के 20 मिनट बाद एक बढ़ा हुआ फोलियर तापमान देखा जाता है जो यह प्रदर्शित करता है कि थर्मल इमेजिंग द्वारा पत्ती के तापमान की माप स्टोमेटल अपर्चर और कंडक्टेंस को मापने के लिए एक अच्छा प्रॉक्सी है। इस प्रतिनिधि प्रयोग में, एक मानक स्कोर-आधारित सांख्यिकीय उपचार उन रसायनों की पहचान की अनुमति देता है जो स्टोमेटल बंद होने या खोलने को बढ़ावा देते हैं।वाष्पीकरण पर यौगिकों के प्रभाव को मापने के लिए, प्रकाश, आर्द्रता और तापमान की इष्टतम स्थितियों में पौधों को विकसित करना महत्वपूर्ण है। यह प्रोटोकॉल अधिकांश डिकॉट पर लागू किया जा सकता है। इसका उपयोग फोटोसिंथेटिक प्रदर्शन पर नए यौगिकों के प्रभाव का मूल्यांकन करने के लिए भी किया जा सकता है, उदाहरण के लिए क्लोरोफिल फ्लोरेसेंस को मापने के द्वारा।

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