Name: development of a noninvasive, laser-assisted experimental model of corneal endothelial cell loss
Uploaded: 2020-04-24T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Development of a Noninvasive, Laser-Assisted Experimental Model of Corneal Endothelial Cell Loss at JoVE.com

Мы благодарим Кристино Эрон и Яна А. М. Сочурек за помощь в экспериментальных методах.

Все процедуры, связанные с тканью животных, следуют рекомендациям местного комитета по уходу за животными и этике.
1. Подготовка культуры органов и лазерное лечение
<ol><li>Получить свежеэнкулеционированные свиные глаза из местной скотобойни. Держите их в прохладном (4 кС) ?...

<ol>
	<li>DelMonte, D. W., Kim, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomy+and+physiology+of+the+cornea.">Anatomy and physiology of the cornea.</a> Journal of Cataract and Refractive Surgery. 37 (3), 588-598 (2011).</li><li>Edelhauser, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+balance+between+corneal+transparency+and+edema:+the+Proctor+Lecture.">The balance between corneal transparency and edema: the Proctor Lecture.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 47 (5), 1754-1767 (2006).</li><li>Tuft, S. J., Coster, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+corneal+endothelium.">The corneal endothelium.</a> Eye. 4, 389-424 (1990).</li><li>Bourne, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biology+of+the+corneal+endothelium+in+health+and+disease.">Biology of the corneal endothelium in health and disease.</a> Eye. 17, 912-918 (2003).</li><li>He, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3D+map+of+the+human+corneal+endothelial+cell.">3D map of the human corneal endothelial cell.</a> Scientific Reports. 6, 29047 (2016).</li><li>Gain, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+Survey+of+Corneal+Transplantation+and+Eye+Banking.">Global Survey of Corneal Transplantation and Eye Banking.</a> JAMA Ophthalmology. 134 (2), 167-173 (2016).</li><li>Schwartzkopff, J., Bredow, L., Mahlenbrey, S., Boehringer, D., Reinhard, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+of+corneal+endothelium+following+complete+endothelial+cell+loss+in+rat+keratoplasty.">Regeneration of corneal endothelium following complete endothelial cell loss in rat keratoplasty.</a> Molecular Vision. 16, 2368-2375 (2010).</li><li>Bredow, L., Schwartzkopff, J., Reinhard, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+of+corneal+endothelial+cells+following+keratoplasty+in+rats+with+bullous+keratopathy.">Regeneration of corneal endothelial cells following keratoplasty in rats with bullous keratopathy.</a> Molecular Vision. 20, 683-690 (2014).</li><li>Bartakova, A., Kunzevitzky, N. J., Goldberg, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regenerative+Cell+Therapy+for+Corneal+Endothelium.">Regenerative Cell Therapy for Corneal Endothelium.</a> Current Ophthalmology Reports. 2 (3), 81-90 (2014).</li><li>Zhao, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+three-dimensional+organ+culture+model+for+corneal+wound+healing+and+corneal+transplantation.">Development of a three-dimensional organ culture model for corneal wound healing and corneal transplantation.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 47 (7), 2840-2846 (2006).</li><li>Aron-Rosa, D., Aron, J. J., Griesemann, M., Thyzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+the+neodymium-YAG+laser+to+open+the+posterior+capsule+after+lens+implant+surgery:+a+preliminary+report.">Use of the neodymium-YAG laser to open the posterior capsule after lens implant surgery: a preliminary report.</a> Journal - American Intra-Ocular Implant Society. 6 (4), 352-354 (1980).</li><li>Vogel, A., Hentschel, W., Holzfuss, J., Lauterborn, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cavitation+bubble+dynamics+and+acoustic+transient+generation+in+ocular+surgery+with+pulsed+neodymium:+YAG+lasers.">Cavitation bubble dynamics and acoustic transient generation in ocular surgery with pulsed neodymium: YAG lasers.</a> Ophthalmology. 93 (10), 1259-1269 (1986).</li><li>Vogel, A., Schweiger, P., Frieser, A., Asiyo, M. N., Birngruber, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraocular+Nd:YAG+laser+surgery:+laser-tissue+interaction,+damage+range,+and+reduction+of+collateral+effects.">Intraocular Nd:YAG laser surgery: laser-tissue interaction, damage range, and reduction of collateral effects.</a> IEEE Journal of Quantum Electronics. 26 (12), 2240-2260 (1990).</li><li>Zhu, Q., Zhu, Y., Tighe, S., Liu, Y., Hu, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineering+of+Human+Corneal+Endothelial+Cells+In+Vitro.">Engineering of Human Corneal Endothelial Cells In Vitro.</a> International Journal of Medical Sciences. 16 (4), 507-512 (2019).</li><li>Li, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nicotinamide+inhibits+corneal+endothelial+mesenchymal+transition+and+accelerates+wound+healing.">Nicotinamide inhibits corneal endothelial mesenchymal transition and accelerates wound healing.</a> Experimental Eye Research. 184, 227-233 (2019).</li><li>Pescina, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+convenient+ex+vivo+model+for+the+study+of+the+transcorneal+permeation+of+drugs:+histological+and+permeability+evaluation.">Development of a convenient ex vivo model for the study of the transcorneal permeation of drugs: histological and permeability evaluation.</a> Journal of Pharmaceutical Sciences. 104 (1), 63-71 (2015).</li><li>Smeringaiova, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+Wound+Repair+of+the+Organ-Cultured+Porcine+Corneas.">Endothelial Wound Repair of the Organ-Cultured Porcine Corneas.</a> Current Eye Research. 43 (7), 856-865 (2018).</li><li>Yamashita, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Rabbit+Corneal+Endothelial+Dysfunction+Model+Using+Endothelial-Mesenchymal+Transformed+Cells.">A Rabbit Corneal Endothelial Dysfunction Model Using Endothelial-Mesenchymal Transformed Cells.</a> Scientific Reports. 8 (1), 16868 (2018).</li><li>Schubert, H. D., Trokel, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+repair+following+Nd:YAG+laser+injury.">Endothelial repair following Nd:YAG laser injury.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 25 (8), 971-976 (1984).</li><li>Zhang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rabbit+Model+of+Corneal+Endothelial+Injury+Established+Using+the+Nd:+YAG+Laser.">Rabbit Model of Corneal Endothelial Injury Established Using the Nd: YAG Laser.</a> Cornea. 36 (10), 1274-1281 (2017).</li><li>McCally, R. L., Bonney-Ray, J., de la Cruz, Z., Green, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+endothelial+injury+thresholds+for+exposures+to+1.54+micro+m+radiation.">Corneal endothelial injury thresholds for exposures to 1.54 micro m radiation.</a> Health Physics. 92 (3), 205-211 (2007).</li><li>Nash, J. P., Wickham, M. G., Binder, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+damage+following+focal+laser+intervention.">Corneal damage following focal laser intervention.</a> Experimental Eye Research. 26 (6), 641-650 (1978).</li></ol>

Результаты этого экспериментального исследования показывают, что nd:YAG лазер может быть использован для выборочно абляции роговицы эндотелиальных клеток, когда соответствующие параметры для дозы энергии и точки фокуса позиции выбраны.
Поскольку эндотелиальная функция ...

Прозрачность роговицы необходима для передачи света на сетчатку и ее фоторецепторов1. В связи с этим, относительное состояние обезвоживания имеет решающее значение для поддержания коллагеновых волокон в роговицы стромы правильно выровнены. Этот гомеостаз поддерживается эндотелиальных клеток роговицы (CEC), расположенных на мембране Descemet (DM)2. Эндотелий является самым внутренним слоем роговицы. Он имеет важный барьер и насос функции, которая имеет решающее значение для прозрачности роговицы3. В отличие от эпителия, эндотелий не способен самостоятельно обновить4. Таким образом, любое повреждение клеток, вызванных болезнью или травмой стимулирует оставшиеся эндотелиальные клетки, чтобы увеличить и мигрировать, для покрытия результирующих дефектов и для поддержания функциональности роговицы5. Однако, если плотность ЦИК падает ниже критического порога, декомпенсация эндотелия приводит к отеку, что приводит к затуманенное зрение и дискомфорт или даже сильная боль4. Несмотря на наличие препаратов для облегчения симптомов, в настоящее время единственным окончательным лечением в этих случаях является трансплантация роговицы, которая может быть выполнена в виде полной толщины трансплантата или ламеллярной эндотелиальной трансплантации. Последняя процедура доступна как мембранная эндотелиальная кератопластика Десцемета (DMEK), а также зачистка Десемета автоматизированной эндотелиальной кератопластики (DSAEK)6. Однако защита оставшихся ЦИК и повышение их выживания могут быть альтернативной мишенью, которая нуждается в адекватной модели заболевания для тестирования потенциальных терапевтических препаратов.
Текущие модели болезни потери ЦИК сосредоточиться на разрушении эндотелия путем инъекции токсичных агентов (например, хлорид бензалкония) в переднюю камеру или механической ссадении клеток с использованием инвазивной техники descemetorhexis7,8. Хотя эти модели хорошо зарекомендовали себя, существуют такие недостатки, как общая воспалительная реакция и неточный сопутствующий ущерб. Таким образом, эти модели, скорее всего, представляют собой заключительные стадии заболевания, когда вышеупомянутые хирургические варианты неизбежны.
С достижениями в клеточных стратегий лечения, таких как стволовые клетки и генной терапии, применение этих клеточных методов лечения может быть полезным на ранних стадиях потери ЦИК9. Впоследствии нам нужна модель, которая представляет эти ранние стадии заболевания более адекватно. В этой связи, модели клеточной культуры улучшились за последнее десятилетие, но все еще ограничены в своей действительности, так как клетки in vitro не могут приблизиться к репликации сложных взаимодействий, которые происходят между различными типами клеток в роговице10. Таким образом, модели ex vivo и in vivo по-прежнему пользуется большим спросом, и улучшение существующих представляет наибольший интерес.
Неинвазивная, внутриглазная хирургия с помощью лазера neodymium:YAG (Nd:YAG) стала обычной процедурой для офтальмологов во всем мире с момента его введения в конце1970-х годов 11. Фотонарушение зависит от нелинейного поглощения света, что приводит к образованию плазмы, генерации акустических ударных волн и созданию кавитационных пузырей, всякий раз, когда сайт приложения находится в жидкой среде12. В целом, эти процессы способствуют предполагаемому эффекту точной резки тканей. Тем не менее, они также могут быть источником ненужного сопутствующего ущерба, ограничивающего местное заключение лазерной хирургии13.
Прогнозирование полученных механических эффектов значительно улучшилось за счет характеристики курса распространения ударной волны и кавитации. Наша цель – нацелиться на ТО, чтобы ЦИК нацелился на как можно меньше ею, чтобы обеспечить неинвазивную модель экспериментального заболевания с лазерной помощью на ранних стадиях потери ЦИК. Для этого необходимо определить оптимальные импульсные энергии и положение фокусных пятен лазера.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:933px;" width="932">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:313px;">BARRON VACUUM TREPHINE</td>
			<td style="width:213px;">Katena</td>
			<td style="width:344px;">K20-2058</td>
			<td style="width:63px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Cryostat</td>
			<td>Leica</td>
			<td>CM 3050S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Dulbecco&#8217;s Modified Eagle&#8217;s Medium - high glucose</td>
			<td>PAA</td>
			<td>E-15009</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Eye holder</td>
			<td>Self</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Inverted Microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>DMI 6000 B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">KH2PO4</td>
			<td>Merck</td>
			<td>529568</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Na2HPO4</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1065860500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Nd:YAG laser</td>
			<td>Zeiss Meditec</td>
			<td>visuLAS YAG II plus</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">OCT Tissue Tek</td>
			<td>Sakura Finetechnical</td>
			<td>4583</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P4333</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Phosphate Buffered Saline (PBS)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10010056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Porcine serum</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>12736C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Spectral-domain optical coherence tomograph</td>
			<td>Heidelberg Engineering</td>
			<td>Spectralis</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Tissue culture plate 12-well</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>833921</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Two-Photon Microscope</td>
			<td>JenLab</td>
			<td>DermaInspect</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Viscoelastic</td>
			<td>OmniVision</td>
			<td>Methocel</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

development of a noninvasive, laser-assisted experimental model of corneal endothelial cell loss

Nd: YAG лазеры были использованы для выполнения неинвазивных внутриглазной хирургии, такие как капсулотомия в течение нескольких десятилетий. Резкий эффект зависит от оптической поломки при лазерном фокусе. Создаются акустические ударные волны и кавитационные пузыри, что приводит к разрыву тканей. Размеры пузырьков и амплитуды давления варьируются в зависимости от импульсной энергии и положения координационного центра. В этом исследовании, энуклеированные свиные глаза были расположены перед коммерчески доступным nd:YAG лазера. Были протестированы переменные импульсные энергии, а также различные положения очаговых пятен, задних к роговице. Полученные поражения оценивались двухфотонической микроскопией и гистологией для определения наилучших параметров для эксклюзивного отделения эндотелиальных клеток роговицы (CEC) с минимальным сопутствующим ущербом. Преимуществами этого метода являются точная абляция ЦИК, снижение сопутствующего ущерба и, прежде всего, бесконтактное лечение.

Используя представленную здесь процедуру, мы обработали глаза лазером Nd:YAG, оценивая различные импульсные энергии (1,0–4,6 мДж) и положения фокусных точек (расстояние от задней поверхности роговицы: 0,0–0,2 мм), чтобы найти оптимальные параметры. Для каждого созвездия параметров лазера (12 x 21...

Watch this Scientific Journal Video about Development of a Noninvasive, Laser-Assisted Experimental Model of Corneal Endothelial Cell Loss at JoVE.com

Development of a Noninvasive, Laser-Assisted Experimental Model of Corneal Endothelial Cell Loss

Здесь мы представляем протокол для отстыковки пенотелировых клеток (CEC) от мембраны Десцемета (DM) с помощью неодимия:YAG (Nd:YAG) лазер в качестве модели ex vivo болезни для булловой кератопатии (BK).

Разработка неинвазивной, лазерной экспериментальной модели потери эндотелиальной клетки Корнела

Nd:YAG lasers have been used to perform noninvasive intraocular surgery, such as capsulotomy for several decades now. The incisive effect relies on the ...

Текущие модели заболеваний для эндотелиальной потери роговицы клетки сосредоточиться на разрушении эндотелия и, скорее всего, представляют собой заключительные стадии заболевания, когда трансплантация роговицы неизбежна. Новые методы лечения с использованием стволовых клеток или генной терапии, однако, в настоящее время доступны, которые могли бы быть более полезными для ранних стадиях заболевания, модели для которых отсутствуют. Неинвазивная внутриглазная хирургия с помощью фотоподкупа с помощью лазера Nd:YAG стала обычной процедурой для офтальмологов.После получения свежеухвеченных свиных глаз из местной скотобойни, поместите образцы в четыре градуса по Цельсию полной среды. Используйте ножницы, чтобы удалить внеклеточные ткани и замочить глаза в 5%povidone йод офтальмологический раствор в течение пяти минут. Затем поместите дезинфицированные образцы в стерильный PBS при комнатной температуре.Используя спектральный домен оптической когерентной томографии устройства, экран глаза для основных патологий переднего сегмента, таких как рубцы роговицы, отек, и другие непрозрачности. После скрининга, положение глаз перед скольжения лампы блок оснащен Nd:YAG лазер с длиной волны 1, 064 нанометров и фокусное пятно диаметром 10 микрометров в воздухе. Выберите 12X увеличение и отвлечь освещение, чтобы визуализировать отдельные слои роговицы.После установки импульсной энергии и фокусировки указать на соответствующие параметры для селективной абляции эндотелиальных клеток роговицы, применить несколько лазерных выстрелов в ткани. Затем под рассекающий микроскоп, поместите четкий парацентез роговицы близко к лимбусу и ввилите вязкость для стабилизации передней камеры. Затем используйте восьмимиллиметровый трефин, чтобы вырезать лазер, обработанный центральной роговицей, и поместите изолированную роговицу в один колодец эндотелиальной стороны пластины 12-хорошо.Когда все роговицы были собраны, добавить три миллиметра полной среды к каждому образцу хорошо и инкубировать образцы на срок до трех дней при 37 градусов по Цельсию. В конце инкубации замените среду в каждой хорошо с метанол-бесплатно 4%paraformaldehyde в буфере Соренсена для 20-минутной инкубации при комнатной температуре. В конце инкубации поместите фиксированные образцы в 20% сахарозы в PBS в течение примерно одного часа, пока роговицы раковина.Передача образцов в 30% сахарозы в PBS ночь перед встраиванием тканей в оптимальной температуре резки для хранения при температуре минус 80 градусов по Цельсию. Используйте криостат, установленный до минус 27 градусов по Цельсию, чтобы получить 10 микрометровых секций замороженных тканей, собирающих каждый раздел на слайде микроскопа в течение одной минуты после его приобретения. Затем храните горки при температуре минус 80 градусов по Цельсию до окрашивания.Для окрашивания гематоксилина и эозинов воздух высушит замороженные секции в течение нескольких минут, чтобы удалить влагу перед окрашивание фильтрованным гематоксилином 0,1%Mayer в течение 10 минут в 50-миллилитровой трубке. В конце инкубации, промыть горки в двойной дистиллированной воды в течение пяти минут в cuvette. Затем окуните горки в 0,5%эозин 10 раз, а затем окуните полоскания в двойной дистиллированной воде, пока эозин останавливается полос.Опустите промытые горки 10 раз в 50% этанола и 10 раз в 70% этанола. После последнего падения 70% этанола, эквилибрировать разделы в 95%этанола в течение 30 секунд, а затем 60 секунд в 100% этанола до нескольких провалов в ксилена. Затем смонтировать образцы с крышкой, прежде чем получить изображения на световом микроскопе.Два фотона и световой микроскопии изображения должны быть независимо оценены как никакого ущерба, слишком большой ущерб, или правильное количество ущерба. На основе этих оценок можно рассчитать тепловую карту, чтобы выбрать правильное созвездие лазерных параметров для селективной абляции эндотелиальных клеток роговицы с минимальным ущербом окружающим тканям. Предыдущий анализ показал, что координационный центр лазера должен быть не менее 0,15 миллиметра позади эндотелия роговицы для самого низкого импульсного импульса энергии испытания.Для импульсных энергий выше 2,9 миллиджоулей, самое длинное фокусное расстояние, испытанное, все еще слишком близко к эндотелию. Различные цитопротекторные агенты могут быть протестированы в то время как подакцизные образцы находятся в культуре. Если они оказались успешными, они могут быть добавлены в раствор орошения для лечения.

Research

JoVE Journal

Medicine

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Ортотопическая аорты трансплантации: Крыса модель для изучения развития хронического заболевания сосудов

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

Corneal Donor Tissue Preparation for Endothelial Keratoplasty

Подготовка ткани роговицы донора для эндотелиальных Кератопластика

Over the past ten years, corneal transplantation surgical techniques have undergone revolutionary changes1,2. Since its inception, traditional full ...

An Alkali-burn Injury Model of Corneal Neovascularization in the Mouse

Щелочно-сжечь травмы Модель неоваскуляризации роговицы у мышей

Under normal conditions, the cornea is avascular, and this transparency is essential for maintaining good visual acuity. Neovascularization (NV) of the ...

Murine Corneal Transplantation: A Model to Study the Most Common Form of Solid Organ Transplantation

Мышиные Трансплантация роговицы: Модель по изучению наиболее распространенная форма твердого трансплантации органов

Corneal transplantation is the most common form of organ transplantation in the United States with between 45,000 and 55,000 procedures performed each ...

Corneal Donor Tissue Preparation for Descemet's Membrane Endothelial Keratoplasty

Роговицы донора Подготовка ткани для Десцемета мембраны эндотелиальных кератопластики

Descemet&#8217;s Membrane Endothelial Keratoplasty (DMEK) is a form of corneal transplantation in which only a single cell layer, the corneal endothelium, ...

Evaluation of a Novel Laser-assisted Coronary Anastomotic Connector - the Trinity Clip - in a Porcine Off-pump Bypass Model

Оценка роман с помощью лазера коронарной Анастомотическое Connector - держатель Троицы - в свиней Off-насоса байпаса модели

To simplify and facilitate beating heart (i.e., off-pump), minimally invasive coronary artery bypass surgery, a new coronary anastomotic connector, the ...

Neural Stem Cell Transplantation in Experimental Contusive Model of Spinal Cord Injury

Neural трансплантации стволовых клеток в экспериментальной Contusive модели с повреждением спинного мозга

Spinal cord injury is a devastating clinical condition, characterized by a complex of neurological dysfunctions. Animal models of spinal cord injury can ...

A Neonatal Mouse Spinal Cord Compression Injury Model

Неонатальной спинного мозга мыши Сжатие Травма Модель

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal ...

In Vivo Tracking of Edema Development and Microvascular Pathology in a Model of Experimental Cerebral Malaria Using Magnetic Resonance Imaging

In Vivo Tracking of Edema Development and Microvascular Pathology in a Model of Experimental Cerebral Malaria Using Magnetic Resonance Imaging

In Vivo Отслеживание развития отек и микрососудистая патология в модели экспериментальной церебральной малярии с использованием магнитно-резонансной томографии

Cerebral malaria is a sign of severe malarial disease and is often a harbinger of death. While aggressive management can be life-saving, the detection of ...

An Experimental Model of Diet-Induced Metabolic Syndrome in Rabbit: Methodological Considerations, Development, and Assessment

Экспериментальная модель диета индуцированной метаболического синдрома в кролика: методологические соображения, развития и оценки

In recent years, obesity and metabolic syndrome (MetS) have become a growing problem for public health and clinical practice, given their increased ...