Name: detection of lung tumor progression in mice by ultrasound imaging
Uploaded: 2020-02-27T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Detection of Lung Tumor Progression in Mice by Ultrasound Imaging at JoVE.com

Wij danken Dr. I. Verma voor de lentivirale Ca2Cre-shp53 vector. Het werk werd ondersteund door fondsen van de Canadian Institutes of Health Research (CIHR MOP 137113) aan AEK.

Dierstudies werden uitgevoerd in overeenstemming met het Institutioneel Comité voor dierenverzorging en -gebruik (IACUC) van de McGill University en de procedures werden goedgekeurd door het Comité voor dierenwelzijn van de McGill University (protocol voor dierenwelzijn # 2009-5754).
1. Generatie ca2Cre-shp53 Lentivirale Titre
OPMERKING: Het volgende protocol is hetzelfde als dat beschreven in Xia et al.6, met kleine wijzigingen.
<ol><li>...

<ol>
	<li>Eisenstein, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Personalized+medicine:+Special+treatment.">Personalized medicine: Special treatment.</a> Nature. 513, 8 (2014).</li><li>Karachaliou, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=KRAS+mutations+in+lung+cancer.">KRAS mutations in lung cancer.</a> Clinical Lung Cancer. 14 (3), 205-214 (2013).</li><li>Jackson, E. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+lung+tumor+initiation+and+progression+using+conditional+expression+of+oncogenic+K-ras.">Analysis of lung tumor initiation and progression using conditional expression of oncogenic K-ras.</a> Genes &amp; Development. 15 (24), 3243-3248 (2001).</li><li>DuPage, M., Dooley, A. L., Jacks, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditional+mouse+lung+cancer+models+using+adenoviral+or+lentiviral+delivery+of+Cre+recombinase.">Conditional mouse lung cancer models using adenoviral or lentiviral delivery of Cre recombinase.</a> Nature Protocol. 4 (7), 1064-1072 (2009).</li><li>Chen, J., Lecuona, E., Briva, A., Welch, L. C., Sznajder, J. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Carbonic+anhydrase+II+and+alveolar+fluid+reabsorption+during+hypercapnia.">Carbonic anhydrase II and alveolar fluid reabsorption during hypercapnia.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 38 (1), 32-37 (2008).</li><li>Xia, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduced+cell+proliferation+by+IKK2+depletion+in+a+mouse+lung-cancer+model.">Reduced cell proliferation by IKK2 depletion in a mouse lung-cancer model.</a> Nature Cell Biology. 17 (4), 532 (2015).</li><li>Demi, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+a+potential+quantitative+measure+of+the+state+of+the+lung+using+lung+ultrasound+spectroscopy.">Determination of a potential quantitative measure of the state of the lung using lung ultrasound spectroscopy.</a> Scientific Reports. 7, 12746 (2017).</li><li>Mohanty, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+Lung+Parenchyma+Using+Ultrasound+Multiple+Scattering.">Characterization of the Lung Parenchyma Using Ultrasound Multiple Scattering.</a> Ultrasound in Medicine and Biology. 43, 993-1003 (2017).</li><li>Vandivort, T. C., An, D., Parks, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Improved+Method+for+Rapid+Intubation+of+the+Trachea+in+Mice.">An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (108), e53771 (2016).</li><li>Saraogi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lung+ultrasound:+Present+and+future.">Lung ultrasound: Present and future.</a> Lung India. 32 (3), 250-257 (2015).</li><li>Gargani, L., Volpicelli, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+I+do+it:+lung+ultrasound.">How I do it: lung ultrasound.</a> Cardiovascular Ultrasound. 12, 25 (2014).</li><li>Soldati, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+Physical+Basis+of+Pulmonary+Sonographic+Interstitial+Syndrome.">On the Physical Basis of Pulmonary Sonographic Interstitial Syndrome.</a> Journal of Ultrasound in Medicine. 35 (10), 2975 (2016).</li><li>Raes, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-Resolution+Ultrasound+and+Photoacoustic+Imaging+of+Orthotopic+Lung+Cancer+in+Mice:+New+Perspectives+for+Onco-Pharmacology.">High-Resolution Ultrasound and Photoacoustic Imaging of Orthotopic Lung Cancer in Mice: New Perspectives for Onco-Pharmacology.</a> PLoS One. 11 (4), 15 (2016).</li><li>Lakshman, M., Needles, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Screening+and+quantification+of+the+tumor+microenvironment+with+micro-ultrasound+and+photoacoustic+imaging.">Screening and quantification of the tumor microenvironment with micro-ultrasound and photoacoustic imaging.</a> Nature Methods. 12 (4), 372 (2015).</li><li>Chichra, A., Makaryus, M., Chaudhri, P., Narasimhan, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasound+for+the+Pulmonary+Consultant.">Ultrasound for the Pulmonary Consultant.</a> Clinical Medicine Insights: Circulatory Respiratory and Pulmonary Medicine. 10, 9 (2016).</li></ol>

We demonstreren een methode die de groei van longtumoren in het Cre-inducible LSL-KRAS G12D muismodel kan beoordelen aan de hand van echografie. Deze methode kan worden gebruikt voor de evaluatie van het effect van farmacologische remmers op de groei van longtumoren. Het kan ook worden gebruikt om de groei van longtumoren tussen muizen van verschillende genetische achtergronden te vergelijken. Het gebruik van deze techniek vereist echter geen gespecialiseerde rekenvaardigheden, maar het is belangrijk om systematisch te z...

Als de belangrijkste oorzaak van kankergerelateerde sterfgevallen wereldwijd, blijft longkanker vuurvast voor behandelingen, voornamelijk door gebrek aan relevante preklinische modellen die de ziekte in het lab kunnen samenvatten1. Ongeveer 25% van de gevallen van longkanker is het gevolg van mutaties in het KRAS-oncogene2. KRAS-gedreven longkanker wordt vaak geassocieerd met een slechte prognose en een lage respons op therapie, wijzend op het belang van verdere studies in deze ziekte2.
We hebben een methode geoptimaliseerd die de relatieve evaluatie van de groei van longtumoren in real time mogelijk maakt bij kras-longkanker-geïnduceerde immuun-competente muizen. We gebruiken Lox-Stop-Lox KRAS G12D (LSL-KRAS G12D) muizen waarbij het KRAS G12D oncogene kan worden uitgedrukt door Cre lentivirale vectoren3,4. Deze vectoren worden aangedreven door koolzuurhoudende anhydrase 2, waardoor de virale infectie specifiek kan plaatsvinden in alveolar epitheelcellen5. Bovendien, om de initiatie en progressie van longtumoren te versnellen, drukt de lentivirale constructie ook P53 shRNA uit van een U6/H1 promotor (de lentivirale constructie hierin zal ca2Cre-shp53 worden genoemd)6. De biologische relevantie van deze methode ligt in het natuurlijke verloop van de ontwikkeling van longtumoren bij muizen in tegenstelling tot xenografts van niet-orthotopische tumoren bij muizen. Een obstakel met behulp van de orthotopische methode is het monitoren van de groei van de longtumor zonder de muis op te offeren. Om deze beperking te overwinnen, hebben we echografie geoptimaliseerd om de analyse van de progressie van longtumoren in de tweedimensionale (2D) modus in dit muismodel mogelijk te maken. Initiëren van tumoren op 7 weken na de infectie worden weerspiegeld als B-lijnen in echografie beelden, die kunnen worden geteld, maar zal niet weerspiegelen het exacte aantal tumoren aanwezig op de long. B-lijnen worden gekenmerkt door laserachtige verticale witte lijnen die voortvloeien uit de pleuralijn in de longparenchyma7,8. Grote tumoren kunnen worden gevisualiseerd na 18 weken infectie. Het relatieve volume van deze tumoren wordt gekwantificeerd door 2D-metingen gedaan op echografie.
Deze methode is optimaal voor onderzoekers die het effect van farmacologische geneesmiddelen op de groei van longtumoren in het LSL-KRAS G12D muismodel onderzoeken. Bovendien kan de progressie van longtumoren worden vergeleken tussen muizen met verschillende genetische geslachten, om het belang van de aanwezigheid of afwezigheid van bepaalde genen/eiwitten op de ontwikkeling van het longtumorvolume te onderzoeken.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.45 &#956;m Acrodisc Syringe Filters</td>
			<td>Pall Corporation</td>
			<td>PN 4614</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100-mm Cell Cultre Plate</td>
			<td>CELLSTAR</td>
			<td>664 160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well Cell Culture Plate</td>
			<td>CELLSTAR</td>
			<td>657 160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amicon Ultra - 15 Centrifugal Filter Units</td>
			<td>Merck Millipore Ltd.</td>
			<td>UFC910024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD LSR-Fortessa</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>649225B 3024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CA2Cre-shp53 lentiviral vector</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>From Dr. I Verma Laboratory</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Multicell</td>
			<td>319-005-CL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Multicell</td>
			<td>80450</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSL-KRASG12D mouse</td>
			<td>JAX Mice</td>
			<td>8179</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MX550S; Centre Transmit: 40 MHz</td>
			<td>FUJIFILM VisualSonics</td>
			<td>51070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OptiMEM</td>
			<td>gibco</td>
			<td>11058-021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pen/strep</td>
			<td>Multicell</td>
			<td>450-201-EL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pMD2.G</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>12259</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PsPAX2</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>12260</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VEVO-3100</td>
			<td>FUJIFILM VisualSonics</td>
			<td>51072-50</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

detection of lung tumor progression in mice by ultrasound imaging

Met ~ 1,6 miljoen slachtoffers per jaar, longkanker draagt enorm bij aan de wereldwijde last van kanker. Longkanker wordt deels gedreven door genetische veranderingen in oncogenes zoals de KRAS oncogene, die ~ 25% van de gevallen van longkanker vormt. De moeilijkheid in het therapeutisch richten op KRAS-gedreven longkanker komt deels voort uit het hebben van slechte modellen die de progressie van de ziekte in het lab kunnen nabootsen. We beschrijven een methode die de relatieve kwantificering van primaire KRAS longtumoren in een Cre-inducible LSL-KRAS G12D muis model via echografie mogelijk maakt. Deze methode is gebaseerd op de helderheid (B)-modus verwerving van de long parenchyma. Tumoren die in eerste instantie worden gevormd in dit model worden gevisualiseerd als B-lijnen en kunnen worden gekwantificeerd door het tellen van het aantal B-lijnen aanwezig in de verworven beelden. Deze zouden het relatieve tumornummer vertegenwoordigen dat op de oppervlakte van de muislong wordt gevormd. Als de gevormde tumoren ontwikkelen met de tijd, ze worden gezien als diepe gespleten haarvaten in de long parenchyma. Aangezien de omtrek van de gevormde tumor goed gedefinieerd is, wordt het berekenen van het relatieve tumorvolume bereikt door de lengte en breedte van de tumor te meten en toe te passen in de formule die wordt gebruikt voor tumorrempermetingen. Echografie is een niet-invasieve, snelle en gebruiksvriendelijke techniek die vaak wordt gebruikt voor tumorkwantificeringen bij muizen. Hoewel artefacten kunnen verschijnen bij het verkrijgen van echografiebeelden, is aangetoond dat deze beeldvormingstechniek voordeliger is voor tumorkwantificeringen bij muizen in vergelijking met andere beeldvormingstechnieken zoals computertomografie (CT) beeldvorming en bioluminescentiebeeldvorming (BLI). Onderzoekers kunnen nieuwe therapeutische doelen met behulp van deze techniek te onderzoeken door het vergelijken van longtumor initiatie en progressie tussen verschillende groepen muizen.

Na het verkrijgen van een lentivirale infectieuze titer van ~2 x 106 TU/mL (figuur 1), werd het Ca2Cre-shp53 lentivirus intratracheally geïnjecteerd toen LSL-KRAS G12D muizen een geschikte leeftijd bereikten (6−8 weken)9. Echografie werd uitgevoerd na 7 weken infectie bij het initiëren van tumoren(figuur 3B). Beeldvorming werd gedaan op 7 weken om de verschillende soorten precursorlaesies die zich voordoen ...

Watch this Scientific Journal Video about Detection of Lung Tumor Progression in Mice by Ultrasound Imaging at JoVE.com

Detection of Lung Tumor Progression in Mice by Ultrasound Imaging

Dit protocol beschrijft de stappen die zijn genomen om KRAS longtumoren bij muizen te induceren, evenals de kwantificering van gevormde tumoren door echografie. Kleine tumoren worden gevisualiseerd in vroege tijdpunten als B-lijnen. Op latere tijdpunten worden relatieve tumorvolumemetingen bereikt door het meetinstrument in de echografiesoftware.

Detectie van longtumorprogressie bij muizen door echografie

With ~1.6 million victims per year, lung cancer contributes tremendously to the worldwide burden of cancer. Lung cancer is partly driven by genetic ...

De betekenis van dit protocol ligt in de real-time detecteerbaarheid van de longtumoren die zich spontaan ontwikkelden in dit muismodel, van tumorinitiatie tot tumorprogressie. Het voordeel van deze techniek is dat niet-invasief is, alleen basisvaardigheid vereist en ons in staat stelt het effect van het medicijn en de behandeling van belang direct te controleren. De progressie van de longtumor kan ook worden geëvalueerd in de aanwezigheid of afwezigheid van een gen van belang.Met behulp van deze analyse kunnen nieuwe behandelingsstrategieën mogelijk worden uitgebreid tot de kliniek. Zet zeven en 18 weken na de lentivirale intubatie de warmtepomp voor de ultrasone gel en de temperatuurmonitor aan en zet een couveuse van 33 graden Celsius in. Plaats de 3D-motor op het geïntegreerde spoorwegsysteem en bevestig dat het motor- en transducermontagesysteem op zijn plaats is bevestigd.Sluit een 40 hertz frequentietransducer aan op de 3D-motor en open een nieuwe studie in de echografiesoftware. Voer in het nieuwe studievenster de studienaam in. Voer in het venster serienaam de naam van de reeks en andere relevante informatie in.Nadat u op gereed hebt geklikt, selecteert u het type transducer. Het programma wordt gewijzigd in de B-modus. Plaats een verwarmingslamp in een handige positie boven het dierenplatform en bevestig een gebrek aan reactie op pedaalreflex in de verdoofde experimentele muis.Plaats de muis op het dierenplatform in cubitus ventrale en breng zalf aan op de ogen van het dier. Zet de ledematen stevig vast op het platform met tape en breng een dunne laag van de opgewarmde ultrasone gel aan op de borst van het dier. Gebruik de hoogtecontroleknop om de acquisitiesonde te verlagen totdat deze het oppervlak van de muisborst raakt en de sonde zodanig positioneert dat het hart van de muis ongeveer gecentreerd is.Gebruik vervolgens de microknoppen om beelden van de hele borst van beide ledematen in de dwarse oriëntatie te verkrijgen. Idealiter het verzamelen van 500 frames per muis. Wanneer alle beelden zijn vastgelegd, reinigt u de gel uit de borst van de muis en plaatst u het dier in de opwarmende couveuse.Voor 2D-analyse van de ultrasone beelden, open de verworven frames in de echografie software en handmatig scannen van de frames voor tumoren. Voor kleine initiërende tumoren, tel het aantal beelines periodiek om de 10 frames voor de volledige lengte van de 500 frames verworven. Voor 2D-metingen van grote tumoren gebruikt u het lineaire gereedschap om de breedte en lengte van de aanwezige tumor te meten en vervolgens het volume van de tumoren te berekenen met behulp van de formule.Zeven weken na intra tracheale infectie wordt echografie uitgevoerd om de verschillende soorten precursorlaesies te visualiseren die na de injectie in het experimentele muismodel voorkomen. Deze beeline geïdentificeerde voorloper laesies kunnen worden geteld door het oog en vertegenwoordigen kleine tumoren op het oppervlak van de longen. Scatter plotting van deze gegevens maakt kwantificering van de tumoren binnen de experimentele muizen mogelijk te maken schatting van de relatieve tumor nummer per dier.Op 18 weken na infectie, grote tumoren verschijnen als diepe kloven onderbreken het meervoud oppervlak dat kan worden gemeten in de echografie software. Het relatieve tumorvolume kan vervolgens worden gekwantificeerd voor statistische analyse. Hematoxylin en eosine kleuring op longsecties geoogst op 20 weken na infectie bevestigt de vorming van grote tumoren evenals de vorming van adenoom en adenocarcinoom.Het is belangrijk om de longtumoren, die dynamisch zijn, niet te verwarren met valse positieven, die statisch zijn. Aangezien de kwalificatie van het tumornummer van het volume relatief is in deze methode, raden we aan om extra methoden te gebruiken, zoals petri-kleuring. Dit model maakt directe beoordeling van de effecten van genetische afwijkingen of behandelingsstrategieën op de ontwikkeling van longkanker bij muizen mogelijk.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Lung Tumor Cell Recruitment Assay

Long Tumor cel aanwerving Assay

To investigate the molecular mechanisms governing tumor metastasis, various assays using the mouse as a model animal have been proposed. Here, we ...

A Murine Orthotopic Bladder Tumor Model and Tumor Detection System

Een muizen orthotope Blaas Tumor Model en Tumor Detection System

This protocol describes the generation of bladder tumors in female C57BL/6J mice using the murine bladder cancer cell line MB49, which has been modified ...

Ex Vivo Imaging of Resident CD8 T Lymphocytes in Human Lung Tumor Slices Using Confocal Microscopy

Ex Vivo Imaging of Resident CD8 T Lymphocytes in Human Lung Tumor Slices Using Confocal Microscopy

Ex Vivo Beeldvorming van Resident CD8 T lymfocyten in menselijke longen Tumor plakjes met behulp van confocale microscopie

CD8 T cell are key players in the fight against cancer. In order for CD8 T cells to kill tumor cells they need to enter into the tumor, migrate within the ...

The Establishment of a Lung Colonization Assay for Circulating Tumor Cell Visualization in Lung Tissues

De oprichting van een Long kolonisatie Assay voor het circulerende Tumor visualisatie van de cel in de weefsels van de longen

Metastasis is the major cause of cancer death. The role of circulating tumor cells (CTCs) in promoting cancer metastasis, in which lung colonization by ...

Radionuclide-fluorescence Reporter Gene Imaging to Track Tumor Progression in Rodent Tumor Models

Radionuclide-fluorescentie Reporter Gene Imaging als u wilt bijhouden van de Tumor progressie in knaagdier Tumor modellen

Metastasis is responsible for most cancer deaths. Despite extensive research, the mechanistic understanding of the complex processes governing metastasis ...

Real Time Detection of In Vitro Tumor Cell Apoptosis Induced by CD8+ T Cells to Study Immune Suppressive Functions of Tumor-infiltrating Myeloid Cells

Real Time Detection of In Vitro Tumor Cell Apoptosis Induced by CD8+ T Cells to Study Immune Suppressive Functions of Tumor-infiltrating Myeloid Cells

Real-time detectie van In Vitro Tumor cel Apoptosis geïnduceerd door CD8+ T cellen te bestuderen immuun onderdrukkende functies van Tumor-infiltreren myeloïde cellen

Potentiation of the tumor-killing ability of CD8+ T cells in tumors, along with their efficient tumor infiltration, is a key element of successful ...

Semi-automatic PD-L1 Characterization and Enumeration of Circulating Tumor Cells from Non-small Cell Lung Cancer Patients by Immunofluorescence

Semi-automatische PD-L1 karakterisering en opsomming van circulerende tumor cellen van niet-kleincellige longkanker patiënten door immunofluorescentie

Circulating tumor cells (CTCs) derived from the primary tumor are shed into the bloodstream or lymphatic system. These rare cells (1&#8722;10 cells per mL ...

Perfusion and Inflation of the Mouse Lung for Tumor Histology

Perfusie en inflatie van de muislong voor tumor histologie

The ability to evaluate lung histology is critical for the fields of lung cancer research and cancer metastasis. It is equally important to perform ...

Multidimensional Coculture System to Model Lung Squamous Carcinoma Progression

Multidimensionaal Coculture System model Long Plaveisel Carcinoom Progressie

Tumor-stroma interactions play a critical role in the development of lung squamous carcinoma (LUSC). However, understanding how these dynamic interactions ...

Pathological Analysis of Lung Metastasis Following Lateral Tail-Vein Injection of Tumor Cells

Pathologische analyse van longmetastase na laterale staartaderinjectie van tumorcellen

Metastasis, the primary cause of morbidity and mortality for most cancer patients, can be challenging to model preclinically in mice. Few spontaneous ...