Name: assessment of the acute inhalation toxicity of airborne particles by exposing cultivated human lung cells at the air-liquid interface
Uploaded: 2020-02-23T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessment of the Acute Inhalation Toxicity of Airborne Particles by Exposing Cultivated Human Lung Cells at the Air-Liquid Interface at JoVE.com

इस काम को जर्मन फेडरल मिनिस्ट्री ऑफ एजुकेशन एंड रिसर्च (बुंदेसियम फ्यूर बिलडुंग एंड फोर्सचुंग, बीएमबीएफ, जर्मनी (ग्रांट 031A581, सब-प्रोजेक्ट ए-डी) और जर्मन रिसर्च फाउंडेशन (ड्यूश फोर्सचुंग्सेस्चेफ्ट, डीएफजी) द्वारा समर्थित किया गया था, अनुसंधान प्रशिक्षण समूह GRK 2338)।

नोट: एक एक्सपोजर प्रयोग के प्रोटोकॉल में तीन दिनों की अवधि शामिल है।
1 दिन
1. सामान्य तैयारी और कोशिकाओं की खेती
नोट: मानव फेफड़ों adenocarcinoma एपिथेलियल सेल लाइन A549 जोखिम प्रयोगों...

<ol>
	<li>Faber, S. C., McCullough, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Through+the+Looking+Glass:+In+vitro+Models+for+Inhalation+Toxicology+and+Interindividual+Variability+in+the+Airway.">Through the Looking Glass: In vitro Models for Inhalation Toxicology and Interindividual Variability in the Airway.</a> Applied In vitro Toxicology. 4 (2), 115-128 (2018).</li><li>De Matteis, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+and+new+challenges+in+occupational+lung+diseases.">Current and new challenges in occupational lung diseases.</a> European Respiratory Review. 26 (146), 1-15 (2017).</li><li>LANUV Nordrhein-Westfalen. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Gesundheitliche Risiken von Nanomaterialien nach inhalativer Aufnahme. , (2009).</li><li>B&#233;rub&#233;, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+Models+of+Inhalation+Toxicity+and+Disease.+The+report+of+a+FRAME+workshop.">In vitro Models of Inhalation Toxicity and Disease. The report of a FRAME workshop.</a> Alternatives To Laboratory Animals. 37 (1), 89-141 (2009).</li><li>Lopez, A. D., Murray, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+global+burden+of+disease,+1990-2020.">The global burden of disease, 1990-2020.</a> Nature Medicine. 4 (11), 1241-1243 (1998).</li><li>Clippinger, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alternative+approaches+for+acute+inhalation+toxicity+testing+to+address+global+regulatory+and+non-regulatory+data+requirements:+An+international+workshop+report.">Alternative approaches for acute inhalation toxicity testing to address global regulatory and non-regulatory data requirements: An international workshop report.</a> Toxicology In vitro. 48, 53-70 (2018).</li><li>Agrawal, M. R., Winder, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Frequency+and+Occurrence+of+LD50+Values+for+Materials+in+the+Workplace.">Frequency and Occurrence of LD50 Values for Materials in the Workplace.</a> Journal Of Applied Toxicology. 16 (5), 407-422 (1996).</li><li>Amtsblatt der Europ&#228;ischen Union. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Verordnung+(EG)+Nr.+1907/2006+des+Europ&#228;ischen+Parlaments+und+des+Rates.">Verordnung (EG) Nr. 1907/2006 des Europ&#228;ischen Parlaments und des Rates.</a> Europ&#228;ische Union. 860, (2006).</li><li>Huh, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstituting+Organ-Level+Lung+Functions+on+a+Chip.">Reconstituting Organ-Level Lung Functions on a Chip.</a> Science. 328 (5986), 1662-1668 (2010).</li><li>Fisher, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Use+of+Human+Lung+Slices+in+Toxicology.">The Use of Human Lung Slices in Toxicology.</a> Human and Experimental Toxicology. 13 (7), 466-471 (1994).</li><li>Lenz, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammatory+and+Oxidative+Stress+Responses+of+an+Alveolar+Epithelial+Cell+Line+to+Airborne+Zinc+Oxide+Nanoparticles+at+the+Air-Liquid+Interface.">Inflammatory and Oxidative Stress Responses of an Alveolar Epithelial Cell Line to Airborne Zinc Oxide Nanoparticles at the Air-Liquid Interface.</a> Biomed Research International. 12, (2013).</li><li>Steinritz, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+the+CULTEX+Radial+Flow+System+as+an+in+vitro+exposure+method+to+assess+acute+pulmonary+toxicity+of+fine+dusts+and+nanoparticles+with+special+focus+on+the+intra-+and+inter-laboratory+reproducibility.">Use of the CULTEX Radial Flow System as an in vitro exposure method to assess acute pulmonary toxicity of fine dusts and nanoparticles with special focus on the intra- and inter-laboratory reproducibility.</a> Chemico-Biological Interactions. 206 (3), 479-490 (2013).</li><li>Lacroix, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Air-Liquid+Interface+In+vitro+Models+for+Respiratory+Toxicology+Research.">Air-Liquid Interface In vitro Models for Respiratory Toxicology Research.</a> Applied In vitro Toxicology. 4 (2), 91-106 (2018).</li><li>Eskes, C., Whelan, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Validation of Alternative Methods for Toxicity Testing. 418, (2016).</li><li>Rach, J., Budde, J., M&#246;hle, N., Aufderheide, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+exposure+at+the+air-liquid+interface:+Evaluation+of+an+in+vitro+approach+for+simulating+inhalation+of+airborne+substances.">Direct exposure at the air-liquid interface: Evaluation of an in vitro approach for simulating inhalation of airborne substances.</a> Journal Of Applied Toxicology. 34 (5), 506-515 (2014).</li><li>Aufderheide, M., Halter, B., M&#246;hle, N., Hochrainer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+CULTEX+RFS:+A+comprehensive+Technical+Approach+for+the+In+vitro+Exposure+of+Airway+Epithelial+Cells+to+the+Particulate+Matter+at+the+Air-Liquid+Interface.">The CULTEX RFS: A comprehensive Technical Approach for the In vitro Exposure of Airway Epithelial Cells to the Particulate Matter at the Air-Liquid Interface.</a> Biomed Research International. 15, (2013).</li><li>Lieber, M., Todaro, G., Smith, B., Szakal, A., Nelson-Rees, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+continuous+tumor-cell+line+from+a+human+lung+carcinoma+with+properties+of+type+II+alveolar+epithelial+cells.">A continuous tumor-cell line from a human lung carcinoma with properties of type II alveolar epithelial cells.</a> International Journal Of Cancer. 17 (1), 62-70 (1976).</li><li>Carterson, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A549+lung+epithelial+cells+grown+as+three-dimensional+aggregates:+Alternative+tissue+culture+model+for+Pseudomonas+aeruginosa+pathogenesis.">A549 lung epithelial cells grown as three-dimensional aggregates: Alternative tissue culture model for Pseudomonas aeruginosa pathogenesis.</a> Infection And Immunity. 73 (2), 1129-1140 (2005).</li><li>Kim, K. J., Borok, Z., Crandall, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+useful+in+vitro+model+for+transport+studies+of+alveolar+epithelial+barrier.">A useful in vitro model for transport studies of alveolar epithelial barrier.</a> Pharmaceutical Research. 18 (3), 253-255 (2001).</li><li>OECD. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Test+No.+403:+Acute+Inhalation+Toxicity.">Test No. 403: Acute Inhalation Toxicity.</a> OECD Guidelines for the Testing of Chemicals, Section 4. , (2009).</li><li>OECD. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Test+No.+436:+Acute+Inhalation+Toxicity+–+Acute+Toxic+Class+Method.">Test No. 436: Acute Inhalation Toxicity – Acute Toxic Class Method.</a> OECD Guidelines for the Testing of Chemicals, Section 4. , (2009).</li><li>Tsoutsoulopoulos, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+the+CULTEX+Radial+Flow+System+for+the+assessment+of+the+acute+inhalation+toxicity+of+airborne+particles.">Validation of the CULTEX Radial Flow System for the assessment of the acute inhalation toxicity of airborne particles.</a> Toxicology In vitro. 58, 245-255 (2019).</li><li>Tsoutsoulopoulos, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+exposure+system+generating+nebulized+aerosol+of+sulfur+mustard+in+comparison+to+the+standard+submerse+exposure.">A novel exposure system generating nebulized aerosol of sulfur mustard in comparison to the standard submerse exposure.</a> Chemico-Biological Interactions. 298, 121-128 (2019).</li><li>Tsoutsoulopoulos, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+the+CULTEX+radial+flow+system+for+in+vitro+investigation+of+lung+damaging+agents.">Optimization of the CULTEX radial flow system for in vitro investigation of lung damaging agents.</a> Toxicology Letters. 244, 28-34 (2016).</li><li>Osman, J. J., Birch, J., Varley, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+response+of+GS-NS0+myeloma+cells+to+pH+shifts+and+pH+perturbations.">The response of GS-NS0 myeloma cells to pH shifts and pH perturbations.</a> Biotechnology and Bioengineering. 75 (1), 63-73 (2001).</li><li>OECD. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Test+Guideline+433:+Acute+Inhalation+Toxicity+–+Acute+Toxic+Class+Method.">Test Guideline 433: Acute Inhalation Toxicity – Acute Toxic Class Method.</a> OECD Guidelines for the Testing of Chemicals, Section 4. , (2018).</li><li>OECD. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guidance Document on Inhalation Toxicity Studies. , (2018).</li></ol>

हाल के वर्षों में साँस लेने योग्य कणों के तीव्र साँस लेने के खतरे के बारे में जानकारी प्राप्त करने और 3आर सिद्धांत25के अनुसार पशु प्रयोगों को कम करने और प्रतिस्थापित करने के लिए कई गैर-पशु साँस ?...

जहरीले हवाई कणों का साँस लेना एक सार्वजनिक स्वास्थ्य चिंता का विषय है, जिससे दुनिया भर में स्वास्थ्य जोखिमों की एक भीड़ और सालाना कई लाखों मौतें1,2। जलवायु परिवर्तन, चल रहे औद्योगिक विकास और ऊर्जा, कृषि और उपभोक्ता उत्पादों की बढ़ती मांग ने पिछलेवर्षोंमें फेफड़े की बीमारियों को बढ़ाने में योगदान दिया है । उनकी तीव्र साँस लेना विषाक्तता के बारे में साँस लेने योग्य पदार्थों का ज्ञान और मूल्यांकन जोखिम मूल्यांकन और जोखिम प्रबंधन का आधार प्रदान करता है, लेकिन यह जानकारी अभी भी इनपदार्थोंकी एक विस्तृत श्रृंखला के लिए7,8की कमी है । २००६ के बाद से, यूरोपीय संघ के रासायनिक कानून पहुंच (पंजीकरण, मूल्यांकन, प्राधिकरण और रसायनों के प्रतिबंध) की आवश्यकता है कि पहले से ही मौजूदा और नए शुरू उत्पादों को बाजार पर रखा जा रहा से पहले साँस लेना मार्ग सहित एक विषविज्ञानी लक्षण वर्णन से गुजरना । इसलिए, रीच वैकल्पिक और पशु मुक्त तरीकों, "3आर" सिद्धांत (प्रतिस्थापन, शोधन और पशु प्रयोगों में कमी) के कार्यान्वयन और उपयुक्त इन विट्रो मॉडल9का उपयोग पर केंद्रित है। हाल के वर्षों में, कई अलग और पर्याप्त गैर पशु साँस लेना विषाक्तता परीक्षण मॉडल (जैसे, इन विट्रो सेल संस्कृतियों, फेफड़ों पर एक चिप मॉडल, सटीक कट फेफड़ों के स्लाइस (PCLS)) का आकलन करने के लिए हवाई कणों की तीव्र साँस लेना विषाक्तताकाआकलन करने के लिए विकसित किया गया है5,7,10,11। इन विट्रो सेल संस्कृति मॉडल के संदर्भ में, खेती की कोशिकाओं को जलमग्न परिस्थितियों में या अली(चित्रा 1)में उजागर किया जा सकता है। हालांकि, जलमग्न एक्सपोजर अध्ययनों की वैधता हवाई यौगिकों विशेष रूप से कणों की विषाक्तता के मूल्यांकन के संबंध में सीमित है । जलमग्न एक्सपोजर तकनीक वीवो स्थिति में मानव के अनुरूप नहीं है; कोशिकाओं को कवर करने वाला सेल कल्चर मीडियम फिजीको-रासायनिक गुणों को प्रभावित कर सकता है और इस प्रकार, एक परीक्षण पदार्थ के जहरीले गुण12,13। अली इन विट्रो साँस लेना मॉडल परीक्षण कणों के साथ कोशिका संस्कृति माध्यम के हस्तक्षेप के बिना परीक्षण पदार्थों के लिए कोशिकाओं के प्रत्यक्ष जोखिम की अनुमति है, इस प्रकार, जलमग्न जोखिम12,14की तुलना में उच्च शारीरिक और जैविक समानता के साथ मानव जोखिम नकल उतार ।
हालांकि, रीच जैसी नियामक प्रक्रियाओं के लिए, तीव्र साँस लेना विष विज्ञान के क्षेत्र में केवल पशु मॉडल उपलब्ध हैं, क्योंकि विट्रो विधियों में कोई विकल्प पर्याप्त रूप से मान्य नहीं किया गया है और आधिकारिक तौर पर अब तक14को स्वीकार नहीं किया गया है। इस उद्देश्य के लिए, परीक्षण मॉडल को परीक्षण वैधता15पर पशु परीक्षण के विकल्प के विकल्प के लिए यूरोपीय संघ संदर्भ प्रयोगशाला (EURL-ECVAM) सिद्धांतों की आवश्यकताओं के अनुसार मान्य किया जाना है ।
एक पूर्व पूर्व सत्यापन अध्ययन और हाल ही में पूरा सत्यापन अध्ययन सफलतापूर्वक CULTEX RFS जोखिम प्रणाली और इसकी हस्तांतरणीयता, स्थिरता, और प्रजननक्षमता 13के आवेदन क्षेत्र का प्रदर्शन किया । यह एक्सपोजर सिस्टम एक इन विट्रो सेल-आधारित एक्सपोजर सिस्टम है जो अपनी रेडियल एयरोसोल वितरण अवधारणा और कोशिकाओं16पर निरंतर प्रवाह में परीक्षण एयरोसोल के चालन के कारण अली में गैसों, कणों या जटिल वायुमंडल (जैसे, सिगरेट का धुआं) कोशिकाओं के समरूप जोखिम को सक्षम बनाता है। इस रेडियल फ्लो सिस्टम के मूल मॉड्यूल में इनलेट एडाप्टर, रेडियल एयरोसोल वितरण के साथ एयरोसोल गाइडिंग मॉड्यूल, नमूना और सॉकेट मॉड्यूल, और हैंड व्हील(चित्रा 2)के साथ लॉकिंग मॉड्यूल शामिल है। उत्पन्न कण इनलेट एडाप्टर और एयरोसोल मार्गदर्शक मॉड्यूल के माध्यम से कोशिकाओं तक पहुंचते हैं और सेल संस्कृति आवेषण पर जमा होते हैं, जो नमूना मॉड्यूल के तीन रेडियल व्यवस्थित एक्सपोजर कक्षों में स्थित होते हैं। एयरोसोल गाइडिंग मॉड्यूल के साथ - साथ सैंपलिंग मॉड्यूल को बाहरी पानी के स्नान17से जोड़कर गर्म किया जा सकता है ।
दोनों अध्ययनों के ढांचे के भीतर, A549 कोशिकाओं का उपयोग सभी एक्सपोजर प्रयोगों के लिए किया गया था। सेल लाइन A549 एक मानव अमर एपीथेलियल सेल लाइन है जो बहुत अच्छी तरह से विशेषता है और कई विषविज्ञानी अध्ययनों में टाइप II अल्वेलर एपिथेलियल कोशिकाओं के लिए इन विट्रो मॉडल के रूप में उपयोग किया गया है। कोशिकाओं को लैमेलर निकायों, सर्फेक्टेंट का उत्पादन और सूजन-प्रासंगिक कारकों की एक संख्या18द्वारा विशेषता है । वे अपने बलगम उत्पादन19के कारण ब्रोंकियल एपिथेलियल कोशिकाओं के गुण भी दिखाते हैं । इसके अलावा, वे अली में संस्कारित किया जा सकता है । यद्यपि इस सेल लाइन में सेल-सेल संपर्कों के निर्माण में कमी है, लेकिन इन कोशिकाओं की खेती बहुत अधिक सुविधाजनक है, कम लागत महंगी है और इसके प्राप्त परिणाम प्राथमिक कोशिकाओं20की तुलना में दाता-स्वतंत्र हैं।
A549 कोशिकाओं को 6-अच्छी तरह से सेल कल्चर आवेषण (पीईटी झिल्ली, 4.67 सेमी2,पोर आकार 0.4 मिमी) में वरीयता प्राप्त की गई थी, जिसमें 3.0 x 105 कोशिकाओं प्रति डालने का घनत्व था और जलमग्न परिस्थितियों में 24 घंटे के लिए खेती की गई थी। कोशिकाओं को तो तीन स्वतंत्र प्रयोगशालाओं में उजागर करने के लिए हवा साफ और तीन अलग जोखिम खुराक (25, ५०, और १०० μg/सेमी2)अली में 20 परीक्षण पदार्थों की । एक्सपोजर खुराक जमाव समय से सहसंबद्ध होती है जिसके परिणामस्वरूप क्रमशः 15, 30 या ६० मिन के बाद कोशिकाओं पर 25 μg/cm2,५० μg/cm2 और १०० μg/सेमी2 की लगातार कण दर होती है । जमा कणों, हालांकि, बयान के बाद नहीं धोया गया था, लेकिन 24 घंटे के लिए कोशिकाओं पर बने रहे । कणों के बयान समय इसलिए 15, 30 और ६० मिन थे, लेकिन कोशिकाओं के जोखिम कुल में 24 घंटे के लिए चली । परीक्षण पदार्थों की जमाव दर पिछले तरीकों के अनुसार प्रारंभिक प्रयोगों में निर्धारित की गई थी17.
विषाक्तता के एक संकेतक के रूप में सेल व्यवहार्यता एक सेल व्यवहार्यता परख का उपयोग कर कण बयान के बाद 24 घंटे का आकलन किया गया था । स्वच्छ वायु नियंत्रण की गुणवत्ता, एक्सपोजर प्रोटोकॉल के अनुकूलन और शोधन, अंतर और अंतर-प्रयोगशाला प्रजनन क्षमता और एक भविष्यवाणी मॉडल (पीएम) की स्थापना पर विशेष ध्यान केंद्रित किया गया था। पदार्थ है कि ५०% से नीचे सेल व्यवहार्यता की कमी के लिए नेतृत्व (प्रधानमंत्री ५०%) या 75% (पीएम 75%) तीन एक्सपोजर खुराकों में से किसी में एक तीव्र साँस लेना खतरा लागू करने के लिए माना जाता था। परिणाम तब वीवो डेटा में मौजूदा की तुलना में थे (ओईसीडी परीक्षण दिशानिर्देश (टीजी) 403 या टीजी 43621,22के अनुसार कम से कम एक विश्वसनीय अध्ययन के आधार पर, 83% की विशिष्टता और 88%23की संवेदनशीलता के साथ 85% का समग्र सामंजस्य होता है।
सेल व्यवहार्यता के माप के अलावा, साइटोकिन रिलीज जैसे अन्य अंत बिंदुओं, एलडीएच परख के माध्यम से सेल लाइसेट या झिल्ली अखंडता की जांच का मूल्यांकन किया जा सकता है लेकिन सत्यापन अध्ययन के लिए आवश्यक नहीं थे। इस प्रकार, एक्सपोजर सिस्टम (उदाहरण के लिए, CULTEX आरएफएस) परीक्षण किए गए हवाई कणों की तीव्र साँस लेना विषाक्तता के गुणात्मक मूल्यांकन के लिए एक भविष्य कहनेवाला स्क्रीनिंग प्रणाली के रूप में साबित हुआ, जो पशु परीक्षण के लिए एक आशाजनक वैकल्पिक विधि का प्रतिनिधित्व करता है। इस एक्सपोजर सिस्टम का उपयोग करके हवाई कणों के संपर्क प्रयोगों के लिए निम्नलिखित प्रोटोकॉल की सिफारिश की जाती है।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Cells</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>A549</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CCL-185</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture medium and supplies</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Biochrom, Berlin, Germany</td>
			<td>FG 0415</td>
			<td>used as growth medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Gibco-Invitrogen, Darmstadt, Germany</td>
			<td>22320</td>
			<td>used as exposure medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS superior</td>
			<td>Biochrom, Berlin, Germany</td>
			<td>S 0615</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamycin (10mg/mL)</td>
			<td>Biochrom, Berlin, Germany</td>
			<td>A 2710</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES 1M</td>
			<td>Th. Geyer, Renningen, Germany</td>
			<td>L 0180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Biochrom, Berlin, Germany</td>
			<td>L 1825</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin/EDTA (0.05%/0.02%)</td>
			<td>Biochrom, Berlin, Germany</td>
			<td>L 2143</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture material</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CASY Cups</td>
			<td>Roche Diagnostic GmbH, Mannheim, Germany</td>
			<td>REF 05651794</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture plates</td>
			<td>Corning, Wiesbaden, Germany</td>
			<td>3516</td>
			<td>6&#173;-well plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning Transwell cell culture inserts</td>
			<td>Corning, Wiesbaden, Germany</td>
			<td>3450</td>
			<td>24mm inserts; 6-&#173;well plates; 0.4 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chemicals</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CASYton</td>
			<td>Roche Diagnostic GmbH, Mannheim, Germany</td>
			<td>REF 05651808001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compressed Air (DIN EN 12021)</td>
			<td>Linde Gas Therapeutics GmbH, Oberschlei&#223;heim, Germany</td>
			<td>2290152</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>WST-1</td>
			<td>Abcam, Cambridge, United Kingdom</td>
			<td>ab155902</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Instruments + equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CASY Cell Counter</td>
			<td>Sch&#228;rfe System GmbH, Reutlingen, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Circulation thermostat</td>
			<td>LAUDA, Lauda-K&#246;nigshofen, Germany</td>
			<td>Ecoline RE 100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CULTEX HyP - Hydraulic Press</td>
			<td>Cultex&#174; Technology GmbH, Hannover, Gemany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CULTEX insert sleeve</td>
			<td>Cultex&#174; Technology GmbH, Hannover, Gemany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CULTEX RFS - Radial Flow System Type 2 (module for particle exposure)</td>
			<td>Cultex&#174; Technology GmbH, Hannover, Gemany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CULTEX RFS - Radial Flow System Type 2 (module for clean air exposure)</td>
			<td>Cultex&#174; Technology GmbH, Hannover, Gemany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CULTEX supply</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flow controller 0-30 ml/min (IQ-Flow)</td>
			<td>Bronkhorst Deutschland Nord GmbH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flow controller 0-1,5 l/min (EL-Flow)</td>
			<td>Bronkhorst Deutschland Nord GmbH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filters (large)</td>
			<td>Munktell &#38; Filtrak GmbH, Sachsen, Germany</td>
			<td>LP-050</td>
			<td>Munktell Sterile Filter; Particle retention efficiency &#62; 99,999%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filters (small)</td>
			<td>Parker Hannifin Corporation, Mainz, Germany</td>
			<td>9933-05-DQ</td>
			<td>Balston disposable filter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium pump</td>
			<td>Cole-Parmer GmbH, Wertheim, Germany</td>
			<td>Ismatec IPC High Precision Multichannel Dispenser</td>
			<td>digital peristaltic pump</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microplate Reader Infinite M200 Pro</td>
			<td>Tecan Deutschland GmbH, Crailsheim, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vakuum pump</td>
			<td>KNF, Freiburg, Germany</td>
			<td>N86 KT.18</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>V&#246;gtlin mass flow controller 0,2-10 l/min</td>
			<td>TrigasFI GmbH</td>
			<td>V&#246;gtlin red-y compact regulator, Typ-Nr.: GCR-C3SA-BA20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water Bath</td>
			<td>LAUDA, Lauda-K&#246;nigshofen, Germany</td>
			<td>Ecoline Staredition RE 104</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessment of the acute inhalation toxicity of airborne particles by exposing cultivated human lung cells at the air-liquid interface

यहां, हम एक विशेष रूप से डिजाइन मॉड्यूलर इन विट्रो एक्सपोजर सिस्टम पेश करते हैं जो अली में खेती की गई मानव फेफड़ों की कोशिकाओं के समरूप जोखिम को गैसों, कणों या जटिल वायुमंडल (जैसे, सिगरेट का धुआं) में सक्षम बनाता है, इस प्रकार यथार्थवादी शारीरिक प्रदान करता है मानव अल्वेलर क्षेत्र की एपिकल सतह का हवा में जोखिम। रैखिक एयरोसोल मार्गदर्शन के साथ अनुक्रमिक एक्सपोजर मॉडल के विपरीत, रेडियल प्रवाह प्रणाली का मॉड्यूलर डिजाइन कोशिकाओं के लिए परीक्षण वातावरण की निरंतर पीढ़ी और परिवहन के लिए सभी आवश्यकताओं को पूरा करता है, एक समरूप वितरण और जमाव कण और वातावरण को लगातार दूर करना। यह एक्सपोजर विधि मुख्य रूप से हवाई कणों के लिए कोशिकाओं के जोखिम के लिए डिज़ाइन की गई है, लेकिन एयरोसोल उत्पादन विधि और एक्सपोजर मॉड्यूल की सामग्री के आधार पर तरल एयरोसोल और अत्यधिक विषाक्त और आक्रामक गैसों के संपर्क में आड्ड किया जा सकता है .
हाल ही में पूरा सत्यापन अध्ययन के ढांचे के भीतर, यह एक्सपोजर सिस्टम हवाई कणों की तीव्र फेफड़े के साइटोटॉक्सिकता के गुणात्मक मूल्यांकन के लिए एक हस्तांतरणीय, प्रजनन योग्य और भविष्य कहनेवाला स्क्रीनिंग विधि के रूप में साबित हुआ था, जिससे संभावित रूप से पशु प्रयोगों को कम करना या प्रतिस्थापित करना जो आम तौर पर इस विषविज्ञानी आकलन प्रदान करेगा।

CULTEX RFS एक विशेष रूप से डिजाइन मॉड्यूलर इन विट्रो एक्सपोजर सिस्टम है जो अली में कोशिकाओं के प्रत्यक्ष और समरूप जोखिम को सक्षम बनाता है। एक पूर्व पूर्व सत्यापन अध्ययन के भीतर, इस एक्सपोजर सिस्?...

Watch this Scientific Journal Video about Assessment of the Acute Inhalation Toxicity of Airborne Particles by Exposing Cultivated Human Lung Cells at the Air-Liquid Interface at JoVE.com

Assessment of the Acute Inhalation Toxicity of Airborne Particles by Exposing Cultivated Human Lung Cells at the Air-Liquid Interface

हम एयर-लिक्विड इंटरफेस (अली) में खेती की मानव फेफड़ों की कोशिकाओं को उजागर करके उनके तीव्र फेफड़े के साइटोटॉक्सिकता से संबंधित हवाई कणों की स्क्रीनिंग और निगरानी के लिए एक मजबूत, हस्तांतरणीय और भविष्य कहनेवाला इन विट्रो एक्सपोजर सिस्टम पेश करते हैं।

एयर-लिक्विड इंटरफेस पर खेती मानव फेफड़ों की कोशिकाओं को उजागर करके हवाई कणों की तीव्र साँस लेना विषाक्तता का आकलन

Here, we present a specially designed modular in vitro exposure system that enables the homogenous exposure of cultivated human lung cells at the ALI to ...

इस इन विट्रो एक्सपोजर सिस्टम का उपयोग करके अली में खेती की गई मानव फेफड़ों की कोशिकाओं को उजागर करके तीव्र फेफड़े के साइटोटॉक्सिटी से संबंधित हवाई कणों की स्क्रीनिंग पशु प्रयोगों को कम करने में मदद कर सकती है। इस एक्सपोजर सिस्टम का मुख्य लाभ रेडियल एयरोसोल वितरण अवधारणा है जिससे एक सजातीय वितरण और कोशिकाओं पर कणों की स्थिति होती है। कोशिकाओं को बोने से पहले, एक छह अच्छी तरह से थाली के प्रत्येक कुएं में 2.5 मिलीलीटर टेम्पर्ड ग्रोथ मीडियम जोड़ें।कोशिका संस्कृति कोशिकाओं के बिना सावधानी से कुओं के अंदर सम्मिलित करें और हर कोशिका संस्कृति डालने के लिए विकास माध्यम का एक मिलीलीटर जोड़ें। प्लेटों को 30 मिनट के लिए 37 डिग्री सेल्सियस और 5% कार्बन डाइऑक्साइड पर इनक्यूबेट करें। कोशिकाओं के ट्राइपिनाइजेशन के बाद, आइसोटोनिक समाधान के 10 मिलीलीटर से भरे कप में सेल कल्चर सस्पेंशन के 100 माइक्रोलीटर को पतला करें।कप को बिना हिलाए धीरे-धीरे झुकाएं। एक सेल काउंटर पर, A549 कोशिकाओं के सेल विशिष्ट माप मापदंडों के आधार पर मिलीलीटर और सेल व्यवहार्यता प्रति व्यवहार्य कोशिकाओं की संख्या निर्धारित करें। प्लेट के तड़के के बाद, कोशिका संस्कृति आवेषण के भीतर माध्यम को एस्पिरेट करें और प्रत्येक कोशिका संस्कृति डालने में प्रति मिलीलीटर पांचवीं कोशिकाओं के लिए तीन गुना 10 के घनत्व के साथ A549 कोशिकाओं के एक मिलीलीटर बीज।कोमल कमाल और 24 घंटे के लिए इनक्यूबेट द्वारा सेल निलंबन वितरित करें। प्रेस के सामने की ओर समय नियंत्रण के माध्यम से दबाने का समय निर्धारित करें। कंप्रेस्ड एयर वॉल्व पर कंप्रेस्ड एयर सप्लाई खोलें।प्रेस के सामने की ओर दबाव नियामक का उपयोग करना, लगभग दो बार के लिए संकुचित हवा दबाव सेट । दराज बाहर खींचो, प्रेस बटन दबाएं, और डिजिटल दबाव स्विच पर दबाव पढ़ें । पदार्थ कंटेनर को परीक्षण पदार्थ की थोड़ी मात्रा से भरें।पदार्थ कंटेनर में प्लंजर डालें और कंटेनर में पाउडर को समान रूप से वितरित करने के लिए इसे थोड़ा आगे और पीछे घुमाएं। पदार्थ कंटेनर, प्लंजर के साथ, दराज में रखें और प्रेस बटन दबाएं। दराज खोलें और प्लंजर को हटा दें।एक महत्वपूर्ण कदम परीक्षण पदार्थों का दबाव है जिन्हें स्थिर कण जोखिम को सक्षम करने के लिए पदार्थ कंटेनर के भीतर पाउडर केक को विशेष रूप से संकुचित किया जाना है। एयरोसोल मार्गदर्शक मॉड्यूल से इनलेट एडाप्टर और कंडेनसेट रिफ्लेक्टर निकालें। प्लग के साथ एयरोसोल मार्गदर्शक मॉड्यूल में तीन एयरोसोल फीडिंग बोरों को बंद करें और डमी फ्लैप के साथ सैंपलिंग मॉड्यूल पर मध्यम आपूर्ति कनेक्शन करें।एयरोसोल मार्गदर्शक मॉड्यूल के ट्यूब कनेक्टर के साथ वैक्यूम लाइनों कनेक्ट। मॉड्यूल को बंद करने और प्रवाह नियंत्रकों के मूल्य को मापने के लिए हाथ के पहिए का उपयोग करें। बंद होने के कुछ मिनट बाद, मूल्य प्रति मिनट पांच मिलीलीटर से नीचे कम हो जाते हैं।एयरोसोल जनरेटर सॉफ्टवेयर शुरू करें। यदि पदार्थ स्क्रैपर सबसे निचले स्थान पर नहीं है, तो बटन होमिंग मोड दबाएं। पदार्थ स्क्रैपर पर दबाया परीक्षण सामग्री के साथ पदार्थ कंटेनर उल्टा रखें।सुनिश्चित करें कि पदार्थ कंटेनर का गिलास सामने का सामना करता है। पदार्थ कंटेनर के ऊपर स्लॉट में लॉकिंग प्लेट रखें और काले पेंच को कस लें। फ़ीड और रोटेशन के लिए मानों को वांछित सेटिंग्स में बदलें।पदार्थ स्क्रैपर दबाया पदार्थ के पास है जब तक पदार्थ खुरचनी के साथ स्लाइड नीचे धक्का करने के लिए नीचे तीर का प्रयोग करें। मास फ्लो कंट्रोलर के टैप से एयरोसोल जनरेटर में कंप्रेस्ड एयर सप्लाई खोलें और स्टार्ट बटन पर क्लिक करके एयरोसोल जेनरेशन शुरू करें। लंबी प्रतीक्षा समय से बचने के लिए फीड रेट को 15 से 20 मिलीमीटर प्रति घंटे निर्धारित करें।एल्यूटिएटर के ग्लास ट्यूब के पीछे नीचे से तैनात एक छोटे टॉर्च के साथ ठीक धूल बादल को देख कर सही कण पीढ़ी को नियंत्रित करें। पहले से गरम एक्सपोजर माध्यम के साथ मध्यम आपूर्ति शुरू करें और मॉड्यूल के खुले होने के दौरान डाउनपाइप कवर होने तक नमूना मॉड्यूल भरें। एक्सपोजर मॉड्यूल में ब्लाइंड सेल कल्चर आवेषण डालें, एक्सपोजर मीडियम को तब तक पंप करें जब तक डाउनपाइप मीडियम से कवर न हो जाएं और आवेषण के निचले हिस्से मीडियम के संपर्क में न हों।एयरोसोल जनरेटर शुरू करें, एक्सपोजर मॉड्यूल को बंद करें, और एक्सपोजर मॉड्यूल को एयरोसोल जनरेटर के एक्सपोजर मॉड्यूल आउटलेट से कनेक्ट करें। लीड समय के 30 मिनट बाद, एल्यूट्रिेटर के एक्सपोजर मॉड्यूल आउटलेट को रबर प्लग के साथ सील करें और ब्लाइंड आवेषण को हटा दें। जब तक डाउनपाइप माध्यम से कवर न हो जाएं तब तक एक्सपोजर माध्यम को फिर से भरें।चिमटी की मदद से छह अच्छी तरह से प्लेटों से सेल संस्कृति सम्मिलन निकालें। आवेषण को गिराकर सेल संस्कृति आवेषण से विकास माध्यम को सावधानी से डालें और अवशिष्ट तरल को एस्पिरेट करने और त्यागने के लिए एक पिपेट का उपयोग करें। एक्सपोजर और क्लीन एयर मॉड्यूल दोनों के एक्सपोजर कक्षों में आवेषण रखें।मॉड्यूल को बंद करें और एक्सपोजर मॉड्यूल को एयरोसोल जनरेटर के एक्सपोजर मॉड्यूल आउटलेट और एक साथ वाहक गैस आपूर्ति के लिए स्वच्छ वायु मॉड्यूल से जोड़कर एक्सपोजर प्रयोग शुरू करें। प्रयोग पूरा होने के बाद, एक्सपोजर और क्लीन एयर मॉड्यूल को डिस्कनेक्ट करें और एक्सपोजर मॉड्यूल आउटलेट को सील करें। स्टॉप बटन पर क्लिक करके कंप्रेस्ड एयर सप्लाई और एयरोसोल जनरेटर को रोकें।एक्सपोजर और स्वच्छ वायु मॉड्यूल खोलें और तैयार पोस्ट-इनक्यूबेशन छह अच्छी प्लेटों में सेल संस्कृति आवेषण को स्थानांतरित करने के लिए चिमटी का उपयोग करें। छह अच्छी तरह से प्लेटों, साथ ही उजागर सेल संस्कृति आवेषण, ३७ डिग्री सेल्सियस और एयर लिक्विड इंटरफेस पर 5% कार्बन डाइऑक्साइड पर 24 घंटे के लिए इनक्यूबेट । एक्सपोजर के 24 घंटे बाद, नए तैयार छह अच्छी तरह से प्लेटों में सेल संस्कृति आवेषण डालें।प्रत्येक सेल संस्कृति डालने के लिए ताजा तैयार WST1 समाधान का एक मिलीलीटर जोड़ें। कोशिकाओं पर सजातीय समाधान वितरित करने के लिए प्लेटों को सावधानी से रॉक करें। सेल संस्कृति आवेषण के साथ छह अच्छी तरह से प्लेटों को ३७ डिग्री सेल्सियस और 5% कार्बन डाइऑक्साइड पर एक घंटे के लिए इनक्यूबेट ।उसके बाद, प्रत्येक छह अच्छी प्लेट से 96 अच्छी प्लेट में ट्राइलेट में सुपरनेटेंट के 100 माइक्रोलीटर स्थानांतरित करें। एक माइक्रोप्लेट रीडर का उपयोग करना, 650 नैनोमीटर की एक संदर्भ तरंग दैर्ध्य के साथ 450 नैनोमीटर पर अवशोषित उपाय। CULTEX RFS एक विशेष रूप से डिजाइन मॉड्यूलर इन विट्रो एक्सपोजर सिस्टम है जो एयर लिक्विड इंटरफेस पर हवाई कणों के लिए कोशिकाओं के प्रत्यक्ष और समरूप जोखिम को सक्षम बनाता है।हवा को साफ करने के लिए कोशिकाओं के संपर्क में आने से समय के साथ कोशिका व्यवहार्यता में कोई कमी नहीं आती है। एक्सपोजर सिस्टम को सफलतापूर्वक मान्य किया गया था और परीक्षण यौगिकों के तीव्र साँस लेने के खतरों के लिए एक भविष्यवाणी मॉडल के रूप में स्थापित किया गया था। विभिन्न परीक्षण पदार्थों के लिए A549 कोशिकाओं का एक्सपोजर जो कोई, मध्यम या मजबूत विषाक्तता का प्रदर्शन करता है।कृपया सुनिश्चित करें कि आप कड़ाई से समय फ्रेम है कि इनक्यूबेशन बार, कण पीढ़ी के नेतृत्व समय, और कण जमा समय कर रहे है रखो । यह एक्सपोजर विधि मुख्य रूप से कोशिकाओं के कण जोखिम के लिए डिज़ाइन की गई है, लेकिन एयरोसोल उत्पादन विधि को अनुकूल बनाकर तरल एयरोसोल और गैसों के जोखिम तक बढ़ाया जा सकता है। यह स्क्रीनिंग विधि विट्रो में तीव्र साँस लेने की विषाक्तता के बारे में साँस लेने योग्य कणों के गुणात्मक मूल्यांकन को सक्षम बनाती है, जिससे पशु परीक्षण को कम किया जा सकता है जो सामान्य रूप से इस विषविज्ञानी मूल्यांकन प्रदान करेगा।यह न भूलें कि विषाक्त परीक्षण पदार्थों के साथ काम करना बेहद खतरनाक हो सकता है और ऐसे दस्ताने पहनना, एक मुखौटा, हमेशा ऐसे यौगिकों को संभालते समय लिया जाना चाहिए।

Research

JoVE Journal

Medicine

Isolation of Mouse Respiratory Epithelial Cells and Exposure to Experimental Cigarette Smoke at Air Liquid Interface

एयर तरल इंटरफेस पर माउस श्वसन उपकला कोशिकाओं और प्रायोगिक सिगरेट धूम्रपान करने के लिए एक्सपोजर के अलगाव

Pulmonary epithelial cells can be isolated from the respiratory tract of mice and cultured at air-liquid interface (ALI) as a model of differentiated ...

High-throughput Flow Cytometry Cell-based Assay to Detect Antibodies to N-Methyl-D-aspartate Receptor or Dopamine-2 Receptor in Human Serum

मानव सीरम में एन मिथाइल-D-aspartate रिसेप्टर या dopamine का 2 रिसेप्टर के लिए एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए उच्च throughput फ्लो सेल आधारित परख

Over the recent years, antibodies against surface and conformational proteins involved in neurotransmission have been detected in autoimmune CNS diseases ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

वाम पूर्वकाल अवरोही धमनी की ligation के माध्यम से myocardial ischemia-reperfusion चोट के एक murine मॉडल

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Isolation of Human Lymphatic Endothelial Cells by Multi-parameter Fluorescence-activated Cell Sorting

मल्टी पैरामीटर प्रतिदीप्ति सक्रिय सेल छँटाई द्वारा मानव लिम्फेटिक endothelial कोशिकाओं का अलगाव

Lymphatic system disorders such as primary lymphedema, lymphatic malformations and lymphatic tumors are rare conditions that cause significant morbidity ...

Diffuse Optical Spectroscopy for the Quantitative Assessment of Acute Ionizing Radiation Induced Skin Toxicity Using a Mouse Model

तीव्र विकिरण प्रेरित त्वचा विषाक्तता के मात्रात्मक आकलन के लिए ऑप्टिकल स्पेक्ट्रोस्कोपी एक माउस मॉडल का उपयोग करना फैलाना

Acute skin toxicities from ionizing radiation (IR) are a common side effect from therapeutic courses of external beam radiation therapy (RT) and ...

Primary Outcome Assessment in a Pig Model of Acute Myocardial Infarction

तीव्र रोधगलन के एक सुअर के मॉडल में प्राथमिक परिणाम मूल्यांकन

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are ...

Open Tracheostomy Gastric Acid Aspiration Murine Model of Acute Lung Injury Results in Maximal Acute Nonlethal Lung Injury

ओपन Tracheostomy गैस्ट्रिक एसिड आकांक्षा Murine गंभीर फेफड़ों की चोट के मॉडल अधिकतम एक्यूट nonlethal फेफड़ों की चोट में परिणाम

Acid pneumonitis is a major cause of sterile acute lung injury (ALI) in humans. Acid pneumonitis spans the clinical spectrum from asymptomatic to acute ...

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

फास्फोरस-31 चुंबकीय अनुनाद स्पेक्ट्रोस्कोपी: मापने के लिए एक उपकरण<em&gt; Vivo</em&gt; मानव कंकाल की मांसपेशी में Mitochondrial ऑक्सीडेटिव Phosphorylation क्षमता

Skeletal muscle mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity, which is critically important in health and disease, can be measured in vivo ...

Inducing Acute Lung Injury in Mice by Direct Intratracheal Lipopolysaccharide Instillation

प्रत्यक्ष इंट्राट्रेकल लिपोपॉलीसैकराइड आसवन द्वारा चूहे में तीव्र फेफड़ों की चोट को प्रेरित करना

Airway administration of lipopolysaccharide (LPS) is a common way to study pulmonary inflammation and acute lung injury (ALI) in small animal models. ...

Oral Health Assessment by Lay Personnel for Older Adults

पुराने वयस्कों के लिए लेटे कर्मियों द्वारा मौखिक स्वास्थ्य मूल्यांकन

Oral health is an often-undervalued contributor to overall health. The literature, however, underscores the myriad of systemic diseases influenced by oral ...