Name: process optimization using high throughput automated micro-bioreactors in chinese hamster ovary cell cultivation
Uploaded: 2020-05-18T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Process Optimization using High Throughput Automated Micro-Bioreactors in Chinese Hamster Ovary Cell Cultivation at JoVE.com

Les auteurs souhaitent remercier le Bundesministerium f’r Bildung und Forschung (BMBF), le Ministère fédéral de l’éducation et de la recherche, en Allemagne, et l’équipe bioprocessue de Sartorius Stedim Biotech GmbH, en Allemagne, pour leur soutien.

1. Procédure de préculture
REMARQUE: Recombinant CHO DG44 cellules avec une concentration cellulaire viable de 1 x 107 cellules/mL sont utilisés pour ce protocole.
<ol><li>Décongeler la fiole contenant 1,2 ml de cellules à température ambiante et transférer immédiatement la suspension cellulaire dans un tube de centrifugeuse conique de 15 ml contenant 10 ml de milieu de graines froides.</li>
	<li>Centrifuge le tube de centrifugeuse conique pendant 5 minute...

<ol>
	<li>Walsh, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biopharmaceutical+benchmarks+2018.">Biopharmaceutical benchmarks 2018.</a> Nature Biotechnology. 36, 1136 (2018).</li><li>Kim, J. Y., Kim, Y., Lee, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CHO+cells+in+biotechnology+for+production+of+recombinant+proteins:+current+state+and+further+potential.">CHO cells in biotechnology for production of recombinant proteins: current state and further potential.</a> Applied Microbiology and Biotechnology. 93 (3), 917-930 (2012).</li><li>Lai, T., Yang, Y., Ng, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+Mammalian+cell+line+development+technologies+for+recombinant+protein+production.">Advances in Mammalian cell line development technologies for recombinant protein production.</a> Pharmaceuticals (Basel). 6 (5), 579-603 (2013).</li><li>Carlage, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+dynamic+changes+in+the+proteome+of+a+Bcl-XL+overexpressing+Chinese+hamster+ovary+cell+culture+during+exponential+and+stationary+phases.">Analysis of dynamic changes in the proteome of a Bcl-XL overexpressing Chinese hamster ovary cell culture during exponential and stationary phases.</a> Biotechnology Progress. 28 (3), 814-823 (2012).</li><li>Hacker, D. L., de Jesus, M., Wurm, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=25+years+of+recombinant+proteins+from+reactor-grown+cells+-+where+do+we+go+from+here.">25 years of recombinant proteins from reactor-grown cells - where do we go from here.</a> Biotechnology Advances. 27 (6), 1023-1027 (2009).</li><li>Shukla, A. A., Gottschalk, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-use+disposable+technologies+for+biopharmaceutical+manufacturing.">Single-use disposable technologies for biopharmaceutical manufacturing.</a> Trends in Biotechnology. 31 (3), 147-154 (2013).</li><li>Ao, S., Gelman, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Advances in electrical engineering and computational science. Lecture notes in electrical engineering. 39, (2009).</li><li>Bareither, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+disposable+small+scale+reactor+for+high+throughput+bioprocess+development:+a+proof+of+concept+study.">Automated disposable small scale reactor for high throughput bioprocess development: a proof of concept study.</a> Biotechnology and Bioengineering. 110 (12), 3126-3138 (2013).</li><li>Kang, Y., Ludwig, D. L., Balderes, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+can+cell+culture+flocculation+offer+for+antibody+purification+processes.">What can cell culture flocculation offer for antibody purification processes.</a> Pharmaceutical Bioprocessing. 2 (6), 483-485 (2014).</li><li>Choe, W., Durgannavar, T. A., Chung, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fc-Binding+Ligands+of+Immunoglobulin+G:+An+Overview+of+High+Affinity+Proteins+and+Peptides.">Fc-Binding Ligands of Immunoglobulin G: An Overview of High Affinity Proteins and Peptides.</a> Materials (Basel). 9 (12), (2016).</li><li>Sch&#228;pper, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+microbioreactors+in+fermentation+process+development:+a+review.">Application of microbioreactors in fermentation process development: a review.</a> Analytical and Bioanalytical Chemistry. 395 (3), 679-695 (2009).</li><li>Zhang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microbioreactors+for+Bioprocess+Development.">Microbioreactors for Bioprocess Development.</a> Journal of the Association for Laboratory Automation. 12 (3), 143-151 (2007).</li><li>Cla&#223;en, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spectroscopic+sensors+for+in-line+bioprocess+monitoring+in+research+and+pharmaceutical+industrial+application.">Spectroscopic sensors for in-line bioprocess monitoring in research and pharmaceutical industrial application.</a> Analytical and Bioanalytical Chemistry. 409 (3), 651-666 (2017).</li><li>Janoschek, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+protocol+to+transfer+a+fed-batch+platform+process+into+semi-perfusion+mode:+The+benefit+of+automated+small-scale+bioreactors+compared+to+shake+flasks+as+scale-down+model.">A protocol to transfer a fed-batch platform process into semi-perfusion mode: The benefit of automated small-scale bioreactors compared to shake flasks as scale-down model.</a> Biotechnology Progress. 35 (2), 2757 (2019).</li></ol>

L’optimisation du processus d’augmentation du rendement est d’une importance cruciale dans l’industrie biopharmaceutique. Des flacons de secousse pourraient être utilisés pour le criblage de la souche; cependant, la surveillance des paramètres du processus tels que le pH et le DO ne sont pas disponibles dans les flacons. Les micro-bioréacteurs ont un avantage car ils permettent une surveillance et un contrôle continus du processus. Ces boucles de contrôle dans le micro-bioréacteur fournissent également un...

Le marché biopharmaceutique mondial valait plus de 250 milliards de dollars AMÉRICAINS en 2018 et n’a cessé d’augmenterde 1. Les sociétés pharmaceutiques s’éloignent de la production de petits médicaments moléculaires à des thérapies biotechno logiquement produites telles que des protéines recombinantes. À eux seuls, ils représentent un chiffre d’affaires de plus de 150 milliards de dollars1. Les cellules mammifères sont maintenant largement utilisées pour la production de ces protéines recombinantes pharmaceutiques. Dans la période actuelle, parmi les 68 produits approuvés produits par des cellules de mammifères, 57 sont produits par les cellules ovaires hamster chinois (CHO)2. Les cellules CHO sont spécifiquement utilisées pour la production de protéines recombinantes qui nécessitent des modifications post-traductionnelles. Ces cellules sont préférées car elles se développent dans une suspension et permettent ainsi des résultats reproductibles dans un milieu chimiquement défini de sérum3,4. L’autre avantage de l’utilisation des cellules DE CHO est que la structure de glycan du produit ressemble à celle de l’anticorps monoclonal humain (mAb) et a comme conséquence le rendement plus élevé de protéine recombinante et la productivité spécifique due à l’amplification de gène5.
Le rendement de la culture cellulaire recombinante CHO (rCHO) a été multiplié par cent au cours des deux dernières décennies. Cette amélioration est attribuée à l’optimisation des paramètres du processus, à la stratégie d’alimentation et au développement du milieu6défini chimiquement par le sérum. Avec l’augmentation des besoins des produits pharmaceutiques, la pression augmente sur l’efficacité des coûts et du temps pour le développement du processus de production7. Pour réduire la pression tout en assurant la qualité du produit a redirigé l’accent de l’industrie pharmaceutique sur la qualité par la conception (QbD). QbD est utilisé pour comprendre la production du produit ainsi que le processus. Un outil essentiel utilisé dans l’ObD est la conception de l’expérience (DOE). Il contribue à mieux comprendre le processus en révélant la relation entre les différentes variables d’entrée et les données de sortie qui en résultent. L’application de l’approche DOE pour optimiser le bioprocessus est bénéfique au cours des premières étapes du projet dans l’assimiler les conditions du processus et d’augmenter la quantité et la qualité de titer. Cette approche est bénéfique par rapport à la stratégie à l’ancienne : un facteur à la fois (OFAT). Les approches statistiques du DOE à l’aide de Classical, Shainin ou Taguchi sont de loin supérieures à l’OFAT8.
Le processus et l’optimisation des médias peuvent être effectués dans des flacons de secousse. Les flacons sont relativement peu coûteux. Cependant, il n’est pas possible de contrôler des paramètres tels que la température, le pH et l’oxygène dissous (DO). Pour surmonter ces inconvénients, des bioréacteurs multi-utilisés de banc-top allant du volume de travail de 0,5 L à 5 L peuvent être utilisés. Les réacteurs assurent une surveillance et un contrôle complets des procédés en ligne. Cependant, l’utilisation du bioréacteur multi-utilisation est exigeante en temps et en main-d’œuvre. Afin de surmonter ces inconvénients, un nouveau bioréacteur à usage unique qui combine le processus complet de surveillance du bioréacteur de banc-dessus et la manipulation facile du flacon de secousse est utilisé. Le système de criblage à haut débit et la technologie à usage unique ont contribué à améliorer l’efficacité de la performance et du développement des processus9.
Dans cet article, les lignes directrices pour charger la recette dans le logiciel automatisé de micro-bioréacteur (AMBR) sont énumérées. L’influence de différentes vitesses d’agitateur et de pH sur la concentration de cellules viables (VCC) et le titer est étudiée au cours de cette expérience. Le résultat expérimental et l’analyse sont effectués avec la conception du logiciel d’expérience MODDE 12. L’analyse du produit est effectuée dans un système de chromatographie liquide à haute pression (HPLC) avec une colonne Protéique A. Il est basé sur le principe que la région de Fc du mAb se lie à la protéine A avec une affinité élevée10,11. Avec cette méthode, il est possible d’identifier et de quantifier le mAb. La quantification est effectuée sur les zones mesurées de pointe d’elution à 280 nm.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 mL disposable pipette tips, sterilized</td>
			<td>Sartorius Stedim Biotech GmbH</td>
			<td>A-0040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>200 mM L-glutamine</td>
			<td>Corning, Merck</td>
			<td>25-005-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24 Well deep well plates</td>
			<td>Sartorius Stedim Biotech GmbH</td>
			<td>A-0038</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 mL disposable pipette tips, sterilized</td>
			<td>Sartorius Stedim Biotech GmbH</td>
			<td>A-0039</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ambr 15 automated microbioreactor system</td>
			<td>Sartorius Stedim Biotech GmbH</td>
			<td>001-2804</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ambr 15 Cell Culture 24 Disposable Bioreactors - Sparged</td>
			<td>Sartorius Stedim Biotech GmbH</td>
			<td>001-1B86</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antifoam C Emulsion</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Merck</td>
			<td>A8011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bottle Top Sterile filter</td>
			<td>Corning, Merck</td>
			<td>CLS431474</td>
			<td>0.1 &#956;m pore size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CEDEX Detergent (3% Mucosol)</td>
			<td>Roche Innovatis AG</td>
			<td>05-650-658-001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell counter</td>
			<td>Roche Innovatis AG</td>
			<td>05-650-216-001</td>
			<td>CEDEX HiRes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CHO DG44 cell line</td>
			<td>Cellca, Sartorius Stedim Biotech GmbH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CHOKO Feed Media A (FMA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Merck</td>
			<td>CR80025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CHOKO Feed Media B (FMB)</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Merck</td>
			<td>CR80026</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CHOKO Production Medium</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Merck</td>
			<td>CR80027</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CHOKO Stock Culture Meium</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Merck</td>
			<td>CR80028</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chromaster high pressure liquid chromatography system</td>
			<td>VWR International</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conical Centrifuge tube</td>
			<td>Corning, Merck</td>
			<td>SIAL0790</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1070179026</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycine</td>
			<td>Carl Roth</td>
			<td>56-40-6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HPLC Vials</td>
			<td>VWR International</td>
			<td>SUPLSU860181</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Sigma-Aldrich,Merck</td>
			<td>P4417</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protein A Column</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>1502226</td>
			<td>POROS&#8482; A 1.7&#160;mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich,Merck</td>
			<td>7647-14-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium phosphate dibasic anhydrous</td>
			<td>Sigma-Aldrich,Merck</td>
			<td>7558-79-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan Blue</td>
			<td>VWR International</td>
			<td>VWRVK940</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>YSI</td>
			<td>YSI Inc</td>
			<td>2900D</td>
			<td>YSI 2900 Select</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

process optimization using high throughput automated micro-bioreactors in chinese hamster ovary cell cultivation

L’optimisation des bioprocessus pour augmenter le rendement des produits désirés est importante dans l’industrie biopharmaceutique. Ceci peut être réalisé par la sélection des souches et par le développement de paramètres de bioprocessus. Des flacons de secousse ont été utilisés à cette fin. Ils n’ont toutefois pas la capacité de contrôler les paramètres du processus tels que le pH et l’oxygène dissous (DO). Cette limitation peut être surmontée à l’aide d’un micro-bioréacteur automatisé. Ces bioréacteurs imitent la culture à plus grande échelle. L’un des principaux avantages de ce système est l’intégration de la conception de l’expérience (DOE) dans le logiciel. Cette intégration permet d’établir une conception où plusieurs paramètres de processus peuvent être variés simultanément. Les paramètres critiques du processus et les conditions optimales de bioprocessus peuvent être analysés dans le logiciel. L’objectif du travail présenté ici est d’introduire l’utilisateur aux étapes impliquées dans la conception de processus dans le logiciel et l’incorporation du DOE dans la culture.

Un aperçu de la culture pratiquée dans cette étude est présenté à la figure 2.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60577/60577fig02.jpg"> Figure 2 : Représentation schématique des conditions expérimentales pour tester les profils de pH et de vitesse d’agitateur dans les stations de culture. Le chiffre représente également la disposition correcte pour placer les navires. <a hre...

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Process Optimization using High Throughput Automated Micro-Bioreactors in Chinese Hamster Ovary Cell Cultivation

Ici, nous présentons une procédure détaillée pour exécuter une conception de l’expérience dans un micro-bioréacteur automatisé suivi par la récolte cellulaire et la quantification des protéines à l’aide d’une colonne de protéines A.

Optimisation des processus à l’aide de micro-bioréacteurs automatisés à haut débit dans la culture chinoise de cellules d’ovaires de Hamster

Optimization of bioprocesses to increase the yield of desired products is of importance in the biopharmaceutical industry. This can be achieved by strain ...

Dans cette vidéo, les utilisateurs introduits dans le logiciel micro bioréacteur avec la planification et l’exécution de la conception d’expériences ou doe. Les valves auxiliaires des analyseurs sont également démontrées pour optimiser l’état du processus. L’incorporation de modet dans le logiciel automatisé de micro-bioréacteur a été officielle pour l’analyse des données.Un grand nombre d’expériences peuvent être planifiées et exécutées simultanément à petite échelle. Tamanna Nagraik, doctorante de mon laboratoire, démontrera la procédure. Commencez par la procédure de pré-culture dans la culture principale telle que décrite dans le protocole de texte.Pour créer une nouvelle expérience, ouvrez le logiciel d’auto-culture Amber et, dans l’onglet d’introduction, cliquez dessus, créez une nouvelle expérience. Dans le nouvel onglet expérience, entrez le nom de l’expérience avec la date à laquelle elle sera menée. Activer le point de contrôle pour la station de culture dans les navires à utiliser pendant la culture.Les balises DOE à ajouter automatiquement seront également activées pour une transition facile pendant la programmation de l’expérience DOE. Cliquez sur suivant pour passer à l’onglet suivant. Pour définir des informations sur l’ajout de supports dans le navire, ainsi que l’anti-mousse, l’inoculum, l’alimentation et le glucose, activez le point de contrôle de la plaque multimédia.Définissez le type de plaque, le nom et l’emplacement de la plaque contenant le support. Cliquez sur ajouter des supports aux navires. Entrez le volume des supports à ajouter dans les navires.Définir la cartographie du transfert des médias de la plaque aux navires. Cliquez sur suivant pour passer à l’onglet suivant. Une fois que l’information des médias a été alimentée dans le logiciel, assignez les conditions de culture.Cliquez sur les supports d’état, et remplissez la température, ciblez DO, limite supérieure de PH, et remuant RPM. Cliquez ensuite en remuant ou en remuant vers le bas. Pour régler l’ajout d’inoculums dans les vaisseaux, activez ajouter la plaque cellulaire.Définissez le type de plaque, le nom et l’emplacement de la plaque contenant le support. Cliquez sur ajouter des cellules aux vaisseaux. Entrez le moment de l’inoculation et le volume des supports à ajouter aux navires.Définissez le chemin parcouru par le gestionnaire liquide pour transférer la cellule de la plaque aux vaisseaux. Cliquez sur suivant pour passer à l’onglet suivant. Pour régler l’ajout d’aliments, de glucose et d’anti mousse, activez la plaque d’alimentation supplémentaire et définissez le type, le nom et l’emplacement de la plaque.Cliquez sur ajouter de l’alimentation aux navires et entrez le volume de l’aliment à ajouter aux navires. Selon la culture, ajouter le nombre d’aliments ajoutés. Pour cette culture, le réacteur est alimenté après 72 heures toutes les 24 heures.Ajoutez manuellement le délai entre l’alimentation en entrant les données en retard à partir des cellules ajoutées. Le premier jour d’alimentation est après 72 heures d’inoculation, le prochain est après 96 heures, et ainsi de suite. Définir la cartographie du transfert de l’alimentation de la plaque vers les navires.Pour définir l’échantillonnage pendant la culture, activez la plaque d’échantillon supplémentaire » et définissez le type, le nom et l’emplacement de la plaque. Vérifiez prendre l’échantillon des navires et entrez le volume de l’échantillon à retirer des navires. Assurez-vous que le volume ne diminue pas en dessous de 10 mililiters pendant tout le cours de la culture.Ajouter le nombre d’échantillons à prélever pendant la culture. Comme pour l’alimentation, ajouter le temps d’enlever l’échantillon du navire pour chaque point d’échantillon d’entrée. Enregistrez le processus.Il est maintenant prêt pour l’exécution. Enfin, définissez la cartographie du transfert de l’échantillon des navires vers la plaque. Ouvrez le logiciel Amber 15 DOE.Cliquez sur enquête » et sélectionnez nouveau. Entrez le nom de la nouvelle enquête doe dans la boîte de dialogue create investigation. Afin d’assigner une expérience à l’enquête doe, ouvrez la recette créée pour étudier les différents paramètres.Cliquez sur parcourir et sélectionnez l’expérience respective. Les étiquettes du navire sont déjà enrôlées dans la colonne. Pour définir le facteur DOE désiré, sélectionnez le paramètre et cliquez sur la colonne étiquetée, facteur DOE.Sélectionnez nouveau » et ajoutez les unités, l’abréviation, ainsi que la limite inférieure et supérieure des facteurs. Dans l’onglet réponses, définissez les valeurs à prendre en compte pour l’analyse des données. Cliquez sur modifier les réponses doe et définissez le nom de la réponse, de l’abréviation, des unités et des limites minimales et maximales.Une fois les réponses définies, sélectionnez la variable ambrée pour chaque réponse et définissez. Une réponse peut être automatiquement associée à une variable bioréacteur microbe. Choisissez la variable requise à partir de la liste d’abandon.Modifiez l’équation pour chaque réponse en fonction de l’exigence. Les choix entre les données minimales, maximales, d’abord, last et moyennes. Pour créer une conception, utilisez l’assistant de conception Démarrer pour sélectionner le type de conception expérimentale et pour ajouter ou supprimer le nombre de répliques et de points central.Sélectionnez l’objectif, qui détermine le choix des modèles et des modèles. Terminez et créez des paquets de travail qui peuvent être importés dans le logiciel d’auto-culture Amber tel que décrit dans le protocole texte. Dans l’onglet expérience, cliquez sur créer l’expérience DOE et recherchez le paquet de travail créé à l’aide du logiciel DOE.Initialisez le processus en cliquant sur démarrer. Une fois l’expérience exécutée, exportez les données à l’aide des résultats du DOE à l’exportation. La fenêtre des résultats du DOE à l’exportation s’ouvre, et les lignes indiquant le navire et la station de culture sont énumérées dans le tableau.Sélectionnez les lignes désirées et cliquez sur les lignes sélectionnées à l’exportation ou exportez des données expérimentales pour stocker tous les résultats et enregistrer le fichier pour une analyse plus approfondie. Importez les données dans le module Amber DOE en optant pour l’onglet résultats et en sélectionnant les résultats d’importation. Recherchez le fichier de données désiré et cliquez sur analyser les résultats.La croissance cellulaire des bioréacteurs microbes automatisés est comparable aux bioréacteurs multi-utilisations. En comparant la concentration cellulaire de trois échelles différentes, on observe que le bioréacteur microbe automatisé de 15 millilitres imite le bioréacteur en verre de deux litres. Les résultats de la fiole de secousse sont également comparés à montrer l’avantage de l’ambre.L’influence de la vitesse d’agitation différente et de ph est étudiée dans les bioréacteurs automatisés de microbe. Il est indiqué ici une comparaison de la concentration viable de cellules, ou VCC, et de la concentration monoclonale d’anticorps dans les différents bioréacteurs microbes. L’influence négative du PH 6.9 sur le VCC peut être observée.En outre, la croissance des cellules s’est améliorée de manière significative sous la culture à PH 7.3 comparé à PH 7.1. On y voit les parcelles de contour de réponse du VCC et la concentration monoclonale d’anticorps. Les valeurs sont comparables dans les navires ayant la même vitesse ph et la même vitesse d’agitateur, ce qui indique que la vitesse d’agitation recueillie pour ce processus n’a pas d’influence significative sur la sortie du processus.Chaque instruction donnée à la machine doit être soigneusement écrite pour éviter les erreurs lors de l’exécution de l’expérience. Le logiciel est flexible et il peut exécuter un certain nombre d’expériences à la fois, réduisant ainsi le temps nécessaire pour optimiser un processus. La conception de l’expérience est utile dans le domaine du bioprotraitement, car les résultats donnent une compréhension des processus fondée sur les connaissances, qui peut être étendue à d’autres organismes dans une certaine mesure.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

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Recherche

Bio-ingénierie

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