Name: a revised method for inducing secondary lymphedema in the hindlimb of mice
Uploaded: 2019-11-02T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Revised Method for Inducing Secondary Lymphedema in the Hindlimb of Mice at JoVE.com

Yazarlar Peter Bollen, Mikroskoplar aracılığıyla görülen görüntüleri kaydetmek için gerekli ekipman ödünç için Biyomedikal Laboratuvarı başkanı teşekkür ederim.

Hayvanlar, kurumsal kurallara göre Güney Danimarka Hayvan Bakım Tesisi'nde barınDı. Hayvan denekleri ile ilgili tüm prosedürler Hayvan Deneyleri Müfettişliği, Danimarka Çevre ve Gıda Bakanlığı tarafından onaylanmıştır.
1. Ameliyat öncesi ışınlama
NOT: Ameliyat öncesi ışınlama ameliyattan 7 gün önce gerçekleşir.
<ol><li>Anesteziyi teşvik edin.<ol>
<li>Fareyi bir indüksiyon kutusuna yerleştirin ve inhalasyon anestezisini sağlamak i...

<ol>
	<li>Lawenda, B. D., Mondry, T. E., Johnstone, P. A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymphedema:+a+primer+on+the+identification+and+management+of+a+chronic+condition+in+oncologic+treatment.">Lymphedema: a primer on the identification and management of a chronic condition in oncologic treatment.</a> CA: A Cancer Journal for Clinicians. 59 (1), 8-24 (2009).</li><li>Greene, A. K., Greene, A. K., Slavin, S. A., Brorson, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+and+morbidity+of+lymphedema.">Epidemiology and morbidity of lymphedema.</a> Lymphedema: Presentation, Diagnosis, and Treatment. , 33-44 (2015).</li><li>Hespe, G. E., Nores, G. G., Huang, J. J., Mehrara, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology+of+lymphedema-Is+there+a+chance+for+medication+treatment?.">Pathophysiology of lymphedema-Is there a chance for medication treatment?.</a> Journal of Surgical Oncology. 115 (1), 96-98 (2017).</li><li>Grada, A. A., Phillips, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymphedema:+Pathophysiology+and+clinical+manifestations.">Lymphedema: Pathophysiology and clinical manifestations.</a> Journal of the American Academy of Dermatology. 77 (6), 1009-1020 (2017).</li><li>Chang, D. W., Masia, J., Garza, R., Skoracki, R., Neligan, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymphedema:+Surgical+and+Medical+Therapy.">Lymphedema: Surgical and Medical Therapy.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 138 (3 Suppl), 209S-218S (2016).</li><li>Carl, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+Review+of+the+Surgical+Treatment+of+Extremity+Lymphedema.">Systematic Review of the Surgical Treatment of Extremity Lymphedema.</a> Journal of Reconstructive Microsurgery. 33 (6), 412-425 (2017).</li><li>DiSipio, T., Rye, S., Newman, B., Hayes, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+of+unilateral+arm+lymphoedema+after+breast+cancer:+a+systematic+review+and+meta-analysis.">Incidence of unilateral arm lymphoedema after breast cancer: a systematic review and meta-analysis.</a> The Lancet Oncology. 14 (6), 500-515 (2013).</li><li>Douglass, J., Graves, P., Gordon, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-Care+for+Management+of+Secondary+Lymphedema:+A+Systematic+Review.">Self-Care for Management of Secondary Lymphedema: A Systematic Review.</a> PLoS Neglected Tropical Diseases. 10 (6), e0004740 (2016).</li><li>Shih, Y. C. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence,+treatment+costs,+and+complications+of+lymphedema+after+breast+cancer+among+women+of+working+age:+a+2-year+follow-up+study.">Incidence, treatment costs, and complications of lymphedema after breast cancer among women of working age: a 2-year follow-up study.</a> Journal of Clinical Oncology. 27 (12), 2007-2014 (2009).</li><li>Ridner, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+psycho-social+impact+of+lymphedema.">The psycho-social impact of lymphedema.</a> Lymphatic Research and Biology. 7 (2), 109-112 (2009).</li><li>Gutknecht, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cost-of-illness+of+patients+with+lymphoedema.">Cost-of-illness of patients with lymphoedema.</a> Journal of the European Academy of Dermatology and Venereology. 31 (11), 1930-1935 (2017).</li><li>Hayes, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+and+prognostic+significance+of+secondary+lymphedema+following+breast+cancer.">Prevalence and prognostic significance of secondary lymphedema following breast cancer.</a> Lymphatic Research and Biology. 9 (3), 135-141 (2011).</li><li>Danese, C. A., Georgalas-Bertakis, M., Morales, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+model+of+chronic+postsurgical+lymphedema+in+dogs'+limbs.">A model of chronic postsurgical lymphedema in dogs' limbs.</a> Surgery. 64 (4), 814-820 (1968).</li><li>Das, S. K., Franklin, J. D., O'Brien, B. M., Morrison, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+practical+model+of+secondary+lymphedema+in+dogs.">A practical model of secondary lymphedema in dogs.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 68 (3), 422-428 (1981).</li><li>Huang, G. K., Hsin, Y. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+experimental+model+for+lymphedema+in+rabbit+ear.">An experimental model for lymphedema in rabbit ear.</a> Microsurgery. 4 (4), 236-242 (1983).</li><li>Tobbia, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymphedema+development+and+lymphatic+function+following+lymph+node+excision+in+sheep.">Lymphedema development and lymphatic function following lymph node excision in sheep.</a> Journal of Vascular Research. 46 (5), 426-434 (2009).</li><li>Lahteenvuo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+factor+therapy+and+autologous+lymph+node+transfer+in+lymphedema.">Growth factor therapy and autologous lymph node transfer in lymphedema.</a> Circulation. 123 (6), 613-620 (2011).</li><li>Honkonen, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymph+node+transfer+and+perinodal+lymphatic+growth+factor+treatment+for+lymphedema.">Lymph node transfer and perinodal lymphatic growth factor treatment for lymphedema.</a> Annals of Surgery. 257 (5), 961-967 (2013).</li><li>Wang, G. Y., Zhong, S. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+model+of+experimental+lymphedema+in+rats'+limbs.">A model of experimental lymphedema in rats' limbs.</a> Microsurgery. 6 (4), 204-210 (1985).</li><li>Oashi, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+model+of+acquired+lymphedema+in+the+mouse+hind+limb:+a+preliminary+report.">A new model of acquired lymphedema in the mouse hind limb: a preliminary report.</a> Annals of Plastic Surgery. 69 (5), 565-568 (2012).</li><li>Slavin, S. A., Van den Abbeele, A. D., Losken, A., Swartz, M. A., Jain, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Return+of+lymphatic+function+after+flap+transfer+for+acute+lymphedema.">Return of lymphatic function after flap transfer for acute lymphedema.</a> Annals of Surgery. 229 (3), 421-427 (1999).</li><li>Cheung, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+experimental+model+for+the+study+of+lymphedema+and+its+response+to+therapeutic+lymphangiogenesis.">An experimental model for the study of lymphedema and its response to therapeutic lymphangiogenesis.</a> BioDrugs : Clinical Immunotherapeutics, Biopharmaceuticals and Gene Therapy. 20 (6), 363-370 (2006).</li><li>Rutkowski, J. M., Moya, M., Johannes, J., Goldman, J., Swartz, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Secondary+lymphedema+in+the+mouse+tail:+Lymphatic+hyperplasia,+VEGF-C+upregulation,+and+the+protective+role+of+MMP-9.">Secondary lymphedema in the mouse tail: Lymphatic hyperplasia, VEGF-C upregulation, and the protective role of MMP-9.</a> Microvascular Research. 72 (3), 161-171 (2006).</li><li>Tammela, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+differentiation+and+maturation+of+lymphatic+vessels+after+lymph+node+dissection+and+transplantation.">Therapeutic differentiation and maturation of lymphatic vessels after lymph node dissection and transplantation.</a> Nature Medicine. 13 (12), 1458-1466 (2007).</li><li>Frueh, F. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+in+surgical+lymphedema+research--a+systematic+review.">Animal models in surgical lymphedema research--a systematic review.</a> Journal of Surgical Research. 200 (1), 208-220 (2016).</li><li>Jorgensen, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+Chronic+Lymphedema+in+a+Revised+Mouse+Model.">Quantification of Chronic Lymphedema in a Revised Mouse Model.</a> Annals of Plastic Surgery. 81 (5), 594-603 (2018).</li><li>Frueh, F. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+3D+volumetry+versus+conventional+measuring+techniques+for+the+assessment+of+experimental+lymphedema+in+the+mouse+hindlimb.">High-resolution 3D volumetry versus conventional measuring techniques for the assessment of experimental lymphedema in the mouse hindlimb.</a> Scientific Reports. 6, 34673 (2016).</li><li>Biau, D. J., Kerneis, S., Porcher, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Statistics+in+brief:+the+importance+of+sample+size+in+the+planning+and+interpretation+of+medical+research.">Statistics in brief: the importance of sample size in the planning and interpretation of medical research.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. 466 (9), 2282-2288 (2008).</li><li>Korula, P., Varma, S. K., Sunderrao, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+wound+contraction+by+point-to-point+adherent+splintage.">Inhibition of wound contraction by point-to-point adherent splintage.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 95 (4), 725-730 (1995).</li><li>Komatsu, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymph+Drainage+During+Wound+Healing+in+a+Hindlimb+Lymphedema+Mouse+Model.">Lymph Drainage During Wound Healing in a Hindlimb Lymphedema Mouse Model.</a> Lymphatic Research and Biology. 15 (1), 32-38 (2017).</li></ol>

Bu protokolde birkaç kritik adım vardır. İlk olarak, araştırmacıların radyoaktivite ile çalışırken güvenlik önlemleri almaları önemlidir. İkinci olarak, bu protokolün cerrahi kısmı sırasında, fare anestezi edildikten sonra işlemi başlatmak ve gereksiz molalar vermeden bitirmek önemlidir. Bu hayvan için aşırı uzun bir cerrahi süre önlemek ve anestezi ameliyat sırasında etkisini kaybetmesini önlemek için önemlidir. Sadece bir adet anestezi enjeksiyonunun yapılması ve cerrahi işlemin t...

Lenfödem lokalize doku şişmesine yol açan lenf sıvısı birikimi ile karakterizedir, esas olarak lenf damarlarında lenf sıvısının bozulmuş veya bozulmuş akışı nedeniyle oluşur1. Lenf akışı, lenf atik sisteminde enfeksiyon, obstrüksiyon, yaralanma veya konjenital defektler nedeniyle bozulabilir veya bozulabilir2. Bu etyolojiler lenfatik sıvı birikimi ile sonuçlanır, hangi inflamasyon kronik bir devlet yol açar, sonraki fibrozis ile sonuçlanan, yanı sıra yağ dokusu birikimi3. Lenfödem primer veya sekonder lenfödem olarak kategorize edilebilir. Primer lenfödem gelişimsel anormallikler veya genetik mutasyon neden olur2,4. Sekonder lenfödem altta yatan sistemik hastalık, cerrahi veya travma2,4nedeniyle oluşur. Sekonder lenfödem dünyada lenfödemin en sık görülen şeklidir2. Gelişmiş ülkelerde sekonder lenfödemin en sık nedeni adjuvan radyoterapi ve lenf nodülüdiseksiyonu 5 gibi onkolojik tedavidir. Lenfödem meme kanseri hastaları arasında en sık, ama aynı zamanda jinekolojik hastalarda gelişebilir, melanom, genitoüriner veya boyun kanseri6. Meme kanseri tanısı konan tüm kadınların %21'inde lenfödem7.
Lenfödem hasta için hem fiziksel hem de psikolojik olarak stresli olabilir. Lenfödem olan hastalar enfeksiyon riski var5,8,9, yaşam kalitesi düşük ve sosyal anksiyete ve depresyon belirtileri gelişebilir10. Kronik lenfödem komplikasyonları bakım yüksek maliyet ve artan bir hastalık yükü yol9,11. Bulgular da lenfödem meme kanseri tedavisi sonrası ölüm riski ile ilişkili olabileceğini ileri sürmüşlerdir12. Etkilenen bölgenin sıkıştırığı, manuel lenf drenajı ve genel cilt bakımı gibi konservatif yönetim ilk basamak yaklaşımı olmaya devam etmektedir. Şu anda hiçbir iyileştirici tedavi6. Cerrahi ve medikal tedavi alanında ilerleme kaydedilmiş olsa da, hala gelişme için yer vardır. Daha fazla araştırma, patofizyoloji ve hastalığın ilerlemesi içgörü sağlayan, klinisyenler hastalar için daha iyi tedavi seçenekleri sağlamak için gereklidir5.
Hastalıkların patofizyolojisini anlamak ve potansiyel tedavi seçeneklerini geliştirmek için klinik öncesi araştırmalarda hayvan modelleri kullanılmaktadır. Birkaç farklı lenfödem hayvan modelleri köpekleri13,14, tavşan 15 , koyun16, domuz17,18 ve kemirgenler19,20, 21,22,23,24. Kemirgen modeli en uygun maliyetli model gibi görünüyor, lenfatik fonksiyonun rekonstrüksiyonu araştırırken, kemirgenler nedeniyle kolayca erişilebilir ve nispeten düşük fiyatlı25. Fare modellerinin çoğunluğu farelerin kuyruğunda lenfödem indükleyen odaklanmıştır21,22,23. Kuyruk modeli çok güvenilirdir ancak lenfödemi indükleyen tam cerrahi teknik önceki yayınlanmış materyalde önemli ölçüde farklılık gösterir. Bu durum, bilinen litterature25'tesunulan gelişmiş lenfödemin süresi ve sağlamlığında dalgalanmalara neden olabilir. Farklı teknikler de hindlimb modelinde lenfödem indüklemek için kullanılmaktadır ve onlar da değişen sonuçlar verim, ancak hindlimb modeli çevirisel bir perspektiften anlamak daha kolay olabilir. Önceki lenfödem modelleri spontan lenfödem çözünürlüğü ile engellenmiş ve bu nedenle tekrarlanabilir ve kalıcı lenfödem modeline ihtiyaç duyulmaktadır25. Araştırmacılar daha önce radyasyon dozu artırmak için çalıştık, spontan lenfödem çözünürlüğünü önlemek için, ama bu genellikle sonraki şiddetli morbidite yol açmıştır25.
Bu model, mikrocerrahi ile radyasyonu birleştirerek, ciddi morbiditeye neden olmadan istatistiksel olarak anlamlı lenfödem ile sonuçlanır. Model lenfödem neden ışınlama bir doz ekleyerek önceki bir cerrahi modelden revize edilmiştir, ciddi morbidite neden olmadan26. Ayrıca mikrocerrahi eğitimi için büyük bir fırsat sunuyor. Farelerin küçük anatomik yapıları nedeniyle mikrocerrahi ekipmana ve mikroskopa erişim gereklidir. Cerrahi işlem, kullanıcıya mikrocerrahi aletlerle dikiş gibi temel mikrocerrahi teknikler öğretildiğinde yapılabilir. Bu prosedürü gerçekleştiren operatörler, Acland'ın mikrocerrahi becerileri (1981) ve temel mikrosutür tekniği (1985) ön koşulları üzerine eğitim videolarını izlediler. Araştırmada kullanmadan önce cerrahi işlemi 8−10 kez uygulamanızı öneririz. Yordamın uygulanması, daha az hata yapılmasını ve yordamın daha verimli bir şekilde gerçekleştirilmesini sağlar. Mastered zaman, cerrahi işlem 45 dakika içinde yapılabilir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>10-0 Nylon suture</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>12051-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 Nylon suture - Dafilon</td>
			<td>B Braun</td>
			<td>C0933112</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coagulator - ICC 50</td>
			<td>ERBE</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton tipped applicators</td>
			<td>Yibon medical co</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting forceps</td>
			<td>Lawton</td>
			<td>09-0190</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Elastic retractors</td>
			<td>Odense University Hospital</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrical clipper</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>GT420</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fentanyl 0,315 mg/ml</td>
			<td>Matrix</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad - PhysioSuite</td>
			<td>Kent Scientific Corp.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane 1000mg Attane</td>
			<td>Scan Vet</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane vaporizer - PPV</td>
			<td>Penlon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro jewler forceps</td>
			<td>Lawton</td>
			<td>1405-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Needle holder</td>
			<td>Lawton</td>
			<td>25679-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro scissors</td>
			<td>Lawton</td>
			<td>10128-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro tying forceps</td>
			<td>Lawton</td>
			<td>43953-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microfine U-40 syringe 0,5ml</td>
			<td>BD</td>
			<td>328821</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microlance syringe 25g</td>
			<td>BD</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microlance syringe 27g</td>
			<td>BD</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Midazolam 5 mg/ml (hameln)</td>
			<td>Matrix</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder - Circle wood</td>
			<td>Lawton</td>
			<td>08-0065</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non woven swabs</td>
			<td>Selefa</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opmi pico microscope F170</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Patent blue V - 25 mg/ml</td>
			<td>Guerbet</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors - Joseph</td>
			<td>BD</td>
			<td>RH1630</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Siemens INVEON multimodality pre-clinical scanner</td>
			<td>Siemens pre-clinical solutions</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Source of radiation - D3100</td>
			<td>Gulmay</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stata Statistical Software: Release 15</td>
			<td>StataCorp LLC</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temgesic - 0,2 mg</td>
			<td>Indivior</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vet eye ointment - viscotears</td>
			<td>Bausch &#38; Lomb</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a revised method for inducing secondary lymphedema in the hindlimb of mice

Hayvan modelleri hastalığın patofizyolojisini anlamak için lenfödem araştırmalarında ve aynı zamanda potansiyel tedavi seçeneklerini araştırmak için büyük önem taşımaktadır. Bu fare modeli araştırmacılar ın en az 8 hafta süren önemli lenfödem neden sağlar. Lenfödem fraksiyonlu radyoterapi ve lenfatiklerin cerrahi ablasyon kombinasyonu kullanılarak indüklenir. Bu model fareler ameliyat öncesi ve sonrası 10 Gri (Gy) radyasyon bir doz almak gerektirir. Modelin cerrahi kısmı üç lenf damarlarının ligasyonu ve fare arka limb iki lenf düğümleri çıkarma içerir. Farelerin küçük anatomik yapıları nedeniyle mikrocerrahi aletlere ve mikroskoba erişim esastır. Bu modelin avantajı istatistiksel olarak anlamlı lenfödem sonuçları, hangi farklı tedavi seçenekleri değerlendirmek için iyi bir temel sağlar. Aynı zamanda mikrocerrahi eğitim için büyük ve kolay kullanılabilir bir seçenektir. Bu modelin sınırlaması, yordamın özellikle önceden uygulanmadıysa zaman alıcı olabileceğidir. Model farelerde objektif olarak ölçülebilir lenfödem ile sonuçlanır, ciddi morbidite neden olmadan ve üç ayrı projede test edilmiştir.

Bu yordam daha önce üç ayrı denemede kullanılmıştır. Tüm deneyler tüm bu makalenin ortak yazarları olan farklı kurşun araştırmacılar tarafından yapılmıştır. Her üç deneyde de, bu protokolde açıklandığı gibi aynı prosedüre uymak için büyük özen alınmıştır. Her üç deneyde de sekonder lenfödem bir arka ekte indüklenirken, diğer arka ekstremite kontrol olarak görev yaptı. Arka uzuvların hacimleri her üç deneyde de birincil sonuç oldu. <strong c...

Watch this Scientific Journal Video about A Revised Method for Inducing Secondary Lymphedema in the Hindlimb of Mice at JoVE.com

A Revised Method for Inducing Secondary Lymphedema in the Hindlimb of Mice

Bu hayvan modeli, araştırmacıların farelerin arka eklerinde en az 8 hafta süren istatistiksel olarak anlamlı sekonder lenfödemi indüklemelerini sağlar. Model lenfödem patofizyolojisi çalışma ve yeni tedavi seçenekleri araştırmak için kullanılabilir.

Farelerin Hindlimb Sekonder Lenfödem Indükleme için Gözden Geçirilmiş Bir Yöntem

Animal models are of paramount importance in the research of lymphedema in order to understand the pathophysiology of the disease but also to explore ...

Bu yöntemin genel amacı, ciddi morbiditeye neden olmadan farelerin arka eksinde tutarlı sekonder lenfödemi indüklemektir. Bu yöntem farelerin arka eksinde sekonder lenfödemi indüklemek için kullanılabilir. Bu yöntemin en büyük avantajı, ciddi morbiditeye neden olmadan en az sekiz hafta süren önemsiz lenfödemi giderir.Prosedüre yeni yeni gelen biri mikrocerrahi tekniklerle mücadele edebilir. Bu nedenle başarılı bir sonuç elde etmek için mikrocerrahi eğitimi ve çeşitli uygulama prosedürleri ni öneriyoruz, aynı zamanda araştırmacıyı daha verimli bir şekilde uygulayabilmesi için hazırlamak için. Radyasyon kaynağını ayarlayın ve protokolde açıklandığı gibi fareyi anestezi edin.Sadece ameliyat olan alanın Radyasyona maruz kalmasını sağlamak için 1,5 milimetre kalınlığında bir kurşun ped yerleştirin. Gösterilen örnek, bölgeyi netleştirmek için ameliyat sonrası bir faredir. 10 gri ışınlama dozu ver.Araştırmacılar radyasyon ile çalışırken önlem almalıdır. Bu deney sırasında tüm ışınlama bir radyasyon yalıtımlı odada yapıldı. Radyasyon kaynağı sadece tüm personel odadan çıktığında açık oldu.Ameliyat öncesi fareyi tart. Pati veya kuyruk kıskaç testi ile anestezik derinliği inceleyin. İşlem için seçilen bacağı tıraş edin.Oksijen akışını dakikada 0,8 Litre'ye ayarlayın. Bir burun konisi ile bağlayın. Oftalmik merhem uygulayın.Cerrahi sırasında hipovolemi önlemek için tercihen farenin scruff 0.5 mililitre salin subkutan enjekte. Fareyi cerrahi bezin üzerine supine pozisyonunda yerleştirin. Burun konisini burun üzerine yerleştirin.Farenin ameliyat sırasında kaymasını önlemek için arka bacakların ucunu bantla hafifçe sabitleyin. Pürüzsüz forseps ile cilt kaldırın ve popliteal fossa yaklaşık beş milimetre proksimal küçük bir açılış klip. Keskin makasları açıklığa doğru kaydırın ve dize doğru titretin, böylece kesi diz den hemen yukarıda sona erer.Kırpma sırasında forseps ile cildi kaldırarak, altta yatan damarları delmemeye niçin emin olun. Fareyi yatkın konuma getirin ve çevresel kesiği tamamlayın. Açının birkaç milimetre yukarısına kadar deriyi inceleyin.Tüm işlem sırasında steril salin ile doku nemli tutmak için unutmayın. Proksimal yaraların derisini elastik bir retraktörle geri alın. Ve siyatik ven gösterildiği gibi görünür olduğundan emin olun.Enjekte 0.01 mililitre Patent Mavi V subkutan ikinci ve üçüncü ayak arasında. Patent Mavi V.Patent Mavi V dağıtımı mikroskop yoluyla görülebilir dağıtmak için yavaşça pençe birkaç kez basın. Görüntülenecek yapılar proksimal lenf damarı, PLV, popliteal lenf nod, PLN, ilk distal lenf damarı, DLV1 ve ikinci distal lenf damarı DLV2'dir.PLV görselleştirmek ve 10-0 naylon dikiş kullanarak ligate büyütmek. Hiçbir Patent Mavi ligature proksimal geçer emin olmak için pençe basın. Gösterildiği gibi iki distal lenf damarları ligate.Hiçbir Patent Blue V ligatür proksimal geçer emin olmak için pençe birkaç kez tekrar basın. Bu örnekte, lenf damarlarından birinin lenf akışını engelleyen bağ nedeniyle patlar görülebilir. Popliteal lenf düğümü çıkarın, lenf düğümü pürüzsüz bir inci gibi yüzeye sahiptir ve çevreleyen yağ dokusuaksine Patent Mavi V ile renklidir.Inguinal yağ yastığı çıkarmadan önce, gösterildiği gibi bu damar cauterize. Sonra tek parça halinde yağ pedi çıkarın. Aktif kanama olmadığından emin olun.Bu bulunan inguinal lenf düğümü bir örnektir. Inguinal yağ yastığı bulunan lenf düğümü nadiren Patent Mavi V tarafından renkli ve yağ ayırt etmek zor olabilir. Tek parça halinde yağ yastığı çıkarma lenf düğümü kaldırıldı sağlamak için en iyi yoldur.Dikiş alt kas fasya için deri kenarları, forseps ve iğne tutucu kullanarak 6-0 naylon dikiş ile, iki ila üç milimetrelik bir boşluk bırakarak, yüzeysel lenf akışını kısıtlamak için. Bu bitmiş dikişbir örnektir, popliteal fossa, arka bacak lateral tarafında, diz üzerinde, ve arka bacak medial tarafı. Analjezi uygulayın ve ameliyat sonrası faretartın, sonra kurtarma için ısıtılan bir kabine yerleştirin.Ameliyat öncesi ışınlama işlemini tekrarlayın. Bu grafik, ameliyattan sonraki sekiz hafta içinde yapılan üç ayrı çalışmanın ortalama arka kaynık hacmini göstermektedir. Toplam 31 fare dahil edildi.X ekseni ameliyattan haftalar sonrasını temsil eder. Y ekseni metreküp olarak arka bacak hacmini temsil eder. Ok çubukları standart sapmayı temsil ediyor.Bu ameliyat ve indüklenen lenfödem ilk dört hafta içinde azalacak şişlik beklenebilir. İlk dört haftadan sonra göreceli olarak stabil bir lenfödem durumu görüyoruz. Kontrol arka ekstremite hacmi sekiz hafta boyunca artar, böylece kesinlikle lenfödem hindlimb ve kontrol arka ekstremite arasındaki hacim farkı söyleyerek, bu beklenmedik oldu.Bunun nedeni, farelerin ameliyattan sonraki haftalarda ameliyat edilen arka ekstremiteden daha fazla ameliyat edilmeyen arka ekstremitelerini kullanmaları dır. Bu kontrol arka ekstremite hipertrofisine yol açabilir ve belki hacminde artış açıklamak. Dahil edilen üç çalışmadaki tek tek rakamlar için lütfen protokolü okuyunuz.Bu tablo, Sidak'ın üç çalışmanın birleşik hacim ölçümleri için çoklu karşılaştırma testini göstermektedir. Hesaplanan P-değeri, sekiz haftalık takip boyunca indüklenen lenfödemi olan arka bacaklar ile kontrol hindlimbs arasında istatistiksel olarak anlamlı fark olduğunu göstermektedir. Dahil edilen üç proje üzerinde bireysel istatistiksel analiz için lütfen protokolü okuyun.Bu yöntem istatistiksel olarak anlamlı lenfödem neden olur, en az sekiz hafta süren. Prosedür lenfödem petrifisiti incelemek ve yeni tedavi seçenekleri araştırmak için kullanılabilir. Bu videoyu izledikten sonra, mikrocerrahi ve ameliyat öncesi ve sonrası ışınlama bir arada kullanarak, farelerin arka eksinde sekonder lenfödem neden nasıl bir anlayış kazanmış olmalıdır.Bir kez hakim, cerrahi işlem 45 dakika içinde yapılabilir.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Simple Guide Screw Method for Intracranial Xenograft Studies in Mice

Basit Fare İntrakranial Xenograftlarında Çalışmaları Kılavuzu Vida Yöntemi

The grafting of human tumor cells into the brain of immunosuppressed mice is an established method for the study of brain cancers including glioblastoma ...

The Trier Social Stress Test Protocol for Inducing Psychological Stress

Psikolojik Stres Başlatmaya Trier Sosyal Stres Testi Protokolü

This article demonstrates a psychological stress protocol for use in a laboratory setting.  Protocols that allow researchers to study the biological ...

Inducing Myointimal Hyperplasia Versus Atherosclerosis in Mice: An Introduction of Two Valid Models

Farelerde Ateroskleroz Karşı miyointimal hiperplazide uyaran: İki Geçerli Modellerinin An Introduction

Various in vivo laboratory rodent models for the induction of artery stenosis have been established to mimic diseases that include arterial plaque ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

Farelerde Taksanlar Farmakokinetik ve Farmakodinamik Analiz Karotis Arter İnfüzyonlar

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice

Farelerde Miyokard İnfarktüsü Oluşturan Minimal İnvaziv Cerrahi Prosedür

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last ...

An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice

Farelerde Trakea hızlı intübasyon için geliştirilmiş bir yöntem

Despite some anatomical and physiological differences, mouse models continue to be an essential tool for studying human lung disease. Bleomycin toxicity ...

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The "Wire-Injury" Model

Farelerde Hızlandırılmış Ateroskleroz Indüksiyonu: "Tel-Yaralanma" Modeli

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. ...

Assessing Therapeutic Angiogenesis in a Murine Model of Hindlimb Ischemia

Hindekstremite Iskemi bir Murine modelinde terapötik anjiyogenezi değerlendirilmesi

Critical limb ischemia (CLI) is a serious condition that entails a high risk of lower limb amputation. Despite revascularization being the gold-standard ...

Inducing Acute Lung Injury in Mice by Direct Intratracheal Lipopolysaccharide Instillation

Doğrudan Intratracheal Lipopolysaccharide Instilasyon ile farelerde akut akciğer hasarının İndükleme

Airway administration of lipopolysaccharide (LPS) is a common way to study pulmonary inflammation and acute lung injury (ALI) in small animal models. ...

A High-Throughput In Situ Method for Estimation of Hepatocyte Nuclear Ploidy in Mice

Farelerde Hepatosit Nükleer Ploidi Tahmini için Yerinde Yüksek Throughput Yöntemi

When the liver is injured, hepatocyte numbers decrease, while cell size, nuclear size and ploidy increase. The expansion of non-parenchymal cells such as ...