Name: in vivo augmentation of gut-homing regulatory t cell induction
Uploaded: 2020-01-22T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Augmentation of Gut-Homing Regulatory T Cell Induction at JoVE.com

이 작품은 수상 번호에 따라 동료 검토 의료 연구 프로그램을 통해 건강 담당 차관의 사무실에 의해 지원되었다. W81XWH-15-1-0240 (XT). 의견, 해석, 결론 및 권장 사항은 저자의 의견이며 반드시 국방부의 승인을 받지는 않습니다. 이 작품은 또한 부분적으로 로마 린다 대학에서 의학부의 연구 혁신 보조금에 의해 지원되었다 (681207-2967 [XT와 GG], 681205-2967 [XT], 325491 [DJB]).

모든 생체 내 동물 연구 프로토콜은 로마 린다 대학 기관 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC)뿐만 아니라 미국 육군 의학 연구 및 마테리엘 사령부 (USAMRMC)의 동물 관리 및 사용 검토 사무소 (ACURO)에 의해 검토 및 승인되었습니다. 국방부.
1. 1α-하이드록실라제와 RALDH2(렌티-CYP-ALDH 바이러스)를 모두 발현하는 렌티바이러스의 제조
<ol><li>일 0: 이른 아침에, CM-10-D 세포 배양 배지에서 ...

<ol>
	<li>Abraham, C., Cho, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammatory+bowel+disease.">Inflammatory bowel disease.</a> New England Journal of Medicine. 361 (21), 2066-2078 (2009).</li><li>Kaser, A., Zeissig, S., Blumberg, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammatory+bowel+disease.">Inflammatory bowel disease.</a> Annual Reviews in Immunology. 28, 573-621 (2010).</li><li>Clifford, D. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Natalizumab-associated+progressive+multifocal+leukoencephalopathy+in+patients+with+multiple+sclerosis:+lessons+from+28+cases.">Natalizumab-associated progressive multifocal leukoencephalopathy in patients with multiple sclerosis: lessons from 28 cases.</a> Lancet Neurology. 9 (4), 438-446 (2010).</li><li>Linda, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+multifocal+leukoencephalopathy+after+natalizumab+monotherapy.">Progressive multifocal leukoencephalopathy after natalizumab monotherapy.</a> New England Journal of Medicine. 361 (11), 1081-1087 (2009).</li><li>Fischer, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+effects+of+alpha4beta7+and+GPR15+on+homing+of+effector+and+regulatory+T+cells+from+patients+with+UC+to+the+inflamed+gut+in+vivo.">Differential effects of alpha4beta7 and GPR15 on homing of effector and regulatory T cells from patients with UC to the inflamed gut in vivo.</a> Gut. 65 (10), 1642-1664 (2016).</li><li>Xu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Vivo+Generation+of+Gut-Homing+Regulatory+T+Cells+for+the+Suppression+of+Colitis.">In Vivo Generation of Gut-Homing Regulatory T Cells for the Suppression of Colitis.</a> Journal of Immunology. 202 (12), 3447-3457 (2019).</li><li>Rosenblum, M. D., Way, S. S., Abbas, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulatory+T+cell+memory.">Regulatory T cell memory.</a> Nature Reviews Immunology. 16 (2), 90-101 (2016).</li><li>Grimm, A. J., Kontos, S., Diaceri, G., Quaglia-Thermes, X., Hubbell, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Memory+of+tolerance+and+induction+of+regulatory+T+cells+by+erythrocyte-targeted+antigens.">Memory of tolerance and induction of regulatory T cells by erythrocyte-targeted antigens.</a> Science Report. 5, 15907 (2015).</li><li>Kim, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stable+inhibitory+activity+of+regulatory+T+cells+requires+the+transcription+factor+Helios.">Stable inhibitory activity of regulatory T cells requires the transcription factor Helios.</a> Science. 350 (6258), 334-339 (2015).</li><li>Bhela, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Plasticity+and+Stability+of+Regulatory+T+Cells+during+Viral-Induced+Inflammatory+Lesions.">The Plasticity and Stability of Regulatory T Cells during Viral-Induced Inflammatory Lesions.</a> Journal of Immunology. 199 (4), 1342-1352 (2017).</li><li>Bluestone, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Type+1+diabetes+immunotherapy+using+polyclonal+regulatory+T+cells.">Type 1 diabetes immunotherapy using polyclonal regulatory T cells.</a> Science Translational Medicine. 7 (315), (2015).</li><li>Marek-Trzonkowska, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapy+of+type+1+diabetes+with+CD4(+)CD25(high)CD127-regulatory+T+cells+prolongs+survival+of+pancreatic+islets+-+results+of+one+year+follow-up.">Therapy of type 1 diabetes with CD4(+)CD25(high)CD127-regulatory T cells prolongs survival of pancreatic islets - results of one year follow-up.</a> Clinical Immunology. 153 (1), 23-30 (2014).</li><li>Desreumaux, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+and+efficacy+of+antigen-specific+regulatory+T-cell+therapy+for+patients+with+refractory+Crohn's+disease.">Safety and efficacy of antigen-specific regulatory T-cell therapy for patients with refractory Crohn's disease.</a> Gastroenterology. 143 (5), 1201-1202 (2012).</li><li>Di Ianni, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tregs+prevent+GVHD+and+promote+immune+reconstitution+in+HLA-haploidentical+transplantation.">Tregs prevent GVHD and promote immune reconstitution in HLA-haploidentical transplantation.</a> Blood. 117 (14), 3921-3928 (2011).</li><li>Brunstein, C. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infusion+of+ex+vivo+expanded+T+regulatory+cells+in+adults+transplanted+with+umbilical+cord+blood:+safety+profile+and+detection+kinetics.">Infusion of ex vivo expanded T regulatory cells in adults transplanted with umbilical cord blood: safety profile and detection kinetics.</a> Blood. 117 (3), 1061-1070 (2011).</li><li>Kang, S. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=1,25-Dihyroxyvitamin+D3+promotes+FOXP3+expression+via+binding+to+vitamin+D+response+elements+in+its+conserved+noncoding+sequence+region.">1,25-Dihyroxyvitamin D3 promotes FOXP3 expression via binding to vitamin D response elements in its conserved noncoding sequence region.</a> Journal of Immunology. 188 (11), 5276-5282 (2012).</li><li>Correale, J., Ysrraelit, M. C., Gaitan, M. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunomodulatory+effects+of+Vitamin+D+in+multiple+sclerosis.">Immunomodulatory effects of Vitamin D in multiple sclerosis.</a> Brain. 132, 1146-1160 (2009).</li><li>Iwata, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retinoic+acid+imprints+gut-homing+specificity+on+T+cells.">Retinoic acid imprints gut-homing specificity on T cells.</a> Immunity. 21 (4), 527-538 (2004).</li><li>Steinman, R. M., Banchereau, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Taking+dendritic+cells+into+medicine.">Taking dendritic cells into medicine.</a> Nature. 449 (7161), 419-426 (2007).</li><li>Vicente-Suarez, I., Brayer, J., Villagra, A., Cheng, F., Sotomayor, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TLR5+ligation+by+flagellin+converts+tolerogenic+dendritic+cells+into+activating+antigen-presenting+cells+that+preferentially+induce+T-helper+1+responses.">TLR5 ligation by flagellin converts tolerogenic dendritic cells into activating antigen-presenting cells that preferentially induce T-helper 1 responses.</a> Immunology Letters. 125 (2), 114-118 (2009).</li><li>Danova, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NF-kappaB,+p38+MAPK,+ERK1/2,+mTOR,+STAT3+and+increased+glycolysis+regulate+stability+of+paricalcitol/dexamethasone-generated+tolerogenic+dendritic+cells+in+the+inflammatory+environment.">NF-kappaB, p38 MAPK, ERK1/2, mTOR, STAT3 and increased glycolysis regulate stability of paricalcitol/dexamethasone-generated tolerogenic dendritic cells in the inflammatory environment.</a> Oncotarget. 6 (16), 14123-14138 (2015).</li><li>Liu, P. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toll-like+receptor+triggering+of+a+vitamin+D-mediated+human+antimicrobial+response.">Toll-like receptor triggering of a vitamin D-mediated human antimicrobial response.</a> Science. 311 (5768), 1770-1773 (2006).</li><li>Cao, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+vitamin+D+and+vitamin+D+analogs+in+acute+myelogenous+leukemia.">Application of vitamin D and vitamin D analogs in acute myelogenous leukemia.</a> Experimental Hematology. 50, 1-12 (2017).</li><li>Anderson, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lasting+Impact+of+Clostridium+difficile+Infection+in+Inflammatory+Bowel+Disease:+A+Propensity+Score+Matched+Analysis.">Lasting Impact of Clostridium difficile Infection in Inflammatory Bowel Disease: A Propensity Score Matched Analysis.</a> Inflammatory Bowel Disease. 23 (12), 2180-2188 (2017).</li><li>Tsai, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Association+of+Aneuploidy+and+Flat+Dysplasia+With+Development+of+High-Grade+Dysplasia+or+Colorectal+Cancer+in+Patients+With+Inflammatory+Bowel+Disease.">Association of Aneuploidy and Flat Dysplasia With Development of High-Grade Dysplasia or Colorectal Cancer in Patients With Inflammatory Bowel Disease.</a> Gastroenterology. 153 (6), 1492-1495 (2017).</li><li>Lee, H. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracking+of+dendritic+cell+migration+into+lymph+nodes+using+molecular+imaging+with+sodium+iodide+symporter+and+enhanced+firefly+luciferase+genes.">Tracking of dendritic cell migration into lymph nodes using molecular imaging with sodium iodide symporter and enhanced firefly luciferase genes.</a> Science Reports. 5, 9865 (2015).</li><li>Shen, Z., Reznikoff, G., Dranoff, G., Rock, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cloned+dendritic+cells+can+present+exogenous+antigens+on+both+MHC+class+I+and+class+II+molecules.">Cloned dendritic cells can present exogenous antigens on both MHC class I and class II molecules.</a> Journal of Immunology. 158 (6), 2723-2730 (1997).</li><li>Okada, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Administration+route-dependent+vaccine+efficiency+of+murine+dendritic+cells+pulsed+with+antigens.">Administration route-dependent vaccine efficiency of murine dendritic cells pulsed with antigens.</a> British Journal of Cancer. 84 (11), 1564-1570 (2001).</li><li>Li, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+cells,+engineered+to+overexpress+25-hydroxyvitamin+D+1alpha-hydroxylase+and+pulsed+with+a+myelin+antigen,+provide+myelin-specific+suppression+of+ongoing+experimental+allergic+encephalomyelitis.">Dendritic cells, engineered to overexpress 25-hydroxyvitamin D 1alpha-hydroxylase and pulsed with a myelin antigen, provide myelin-specific suppression of ongoing experimental allergic encephalomyelitis.</a> FASEB J. , (2017).</li><li>Narula, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+High-Dose+Vitamin+D3+Supplementation+in+Patients+with+Crohn's+Disease+in+Remission:+A+Pilot+Randomized+Double-Blind+Controlled+Study.">Impact of High-Dose Vitamin D3 Supplementation in Patients with Crohn's Disease in Remission: A Pilot Randomized Double-Blind Controlled Study.</a> Digestive Disease Science. 62 (2), 448-455 (2017).</li><li>Ahmad, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vitamin+A+Supplementation+during+Pregnancy+Enhances+Pandemic+H1N1+Vaccine+Response+in+Mothers,+but+Enhancement+of+Transplacental+Antibody+Transfer+May+Depend+on+When+Mothers+Are+Vaccinated+during+Pregnancy.">Vitamin A Supplementation during Pregnancy Enhances Pandemic H1N1 Vaccine Response in Mothers, but Enhancement of Transplacental Antibody Transfer May Depend on When Mothers Are Vaccinated during Pregnancy.</a> Journal of Nutrition. 148 (12), 1968-1975 (2018).</li><li>Noronha, S. M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aldefluor+protocol+to+sort+keratinocytes+stem+cells+from+skin.">Aldefluor protocol to sort keratinocytes stem cells from skin.</a> Acta Cirurgica Brasileira. 32 (11), 984-994 (2017).</li><li>Ferreira, G. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vitamin+D3+Induces+Tolerance+in+Human+Dendritic+Cells+by+Activation+of+Intracellular+Metabolic+Pathways.">Vitamin D3 Induces Tolerance in Human Dendritic Cells by Activation of Intracellular Metabolic Pathways.</a> Cell Reports. 10 (5), 711-725 (2015).</li><li>Bakdash, G., Vogelpoel, L. T., van Capel, T. M., Kapsenberg, M. L., de Jong, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retinoic+acid+primes+human+dendritic+cells+to+induce+gut-homing,+IL-10-producing+regulatory+T+cells.">Retinoic acid primes human dendritic cells to induce gut-homing, IL-10-producing regulatory T cells.</a> Mucosal Immunology. 8 (2), 265-278 (2015).</li></ol>

이 문서에서 우리는 DC-CYP-ALDH 세포의 사용을 설명, 말초 림프 조직에 창 자-homing Treg 세포의 유도를 증가 대 한. 우리의 데이터는 DC-CYP-ALDH 세포가 상응하는 기질(즉, 25[OH]D 및 레티놀,각각)의 존재 하에서 시험관내 에서 모두 1,25(OH)2D 및 RA의 국소 고농도 드노보를 합성할 수 있음을 보여주었다. 25(OH)D및 레티놀의 충분한 혈중 농도는 결핍이 있는 환자에서 각각 비타민 D와 A 보충제를 통해 쉽?...

염증성 장 질환 (IBD) 위장관에서 염증성 만성 질환 (GUT). 미국에서는, 대략 1.4 백만 IBD 환자가 있습니다. 장내 세균에 대한 이질관계가 있는 면역 반응이 질병을 개시하고 점막 상피 장벽을 방해하는 것이 일반적으로 받아들여진다1,2. 이러한 이유로, 현재 사용할 수 있는 미국 식품 의약국 (FDA) 승인 약물 염증 중재자의 기능을 억제 하거나 창 자에 면역 세포의 homing차단. 그러나, 표적으로 하는 선동적인 매개체 및 면역 세포는 또한 면역 방어를 위해 필요합니다. 그 결과, 염증성 중개제 억제제는 전신 면역 방어를 손상시키고 면역 세포 호밍 차단제는 장 내 면역 방어를 약화시키고, 둘 다 심각한 결과를 초래할 수 있다3,4. 또한, 면역 세포 호밍 차단제는 또한 장내로 규제 T (Treg) 세포의 호밍을 차단할 수 있으며, 따라서 IBD 환자에서 이미 손상된 장 면역 내성을 악화시킬 수 있습니다. 더욱이, 창자에 있는 Treg 세포의 차단은 또한 혈액에 있는 Treg 세포의 축적 때문에 전신 면역 억제로 이끌어 낼 수 있습니다5. 마지막으로, 억제제와 차단제는 일시적으로 기능하므로 빈번한 투여가 필요합니다. 이러한 억제제 및 차단제의 빈번한 투여는 불리한 부작용을 더욱 악화시킬 수 있다.
최근, 우리는 잠재적으로 완화 하거나 IBD 치료에 대 한 현재 약물과 관련 된 부작용을 제거 할 수 있는 새로운 전략을 제안6. 이 전략은 말초 림프 조직에 있는 창자 homing Treg 세포의 유도를증강합니다 6. 이 전략의 근거는 창 자-homing Treg 세포 특히 창 자에 가정 하 고 따라서 전신 면역 방어를 손상 하지 않습니다. 또한, Treg 세포는 잠재적으로메모리를형성할 수 있기 때문에7,8,창자-호밍 트레그 세포는 잠재적으로 IBD 환자에서 만성 장 염증의 안정적인 제어를 제공할 수 있으며, 따라서, 치료는 자주 투여될 필요가 없다. 더욱이, 이 전략은 생체 내에서 장-호밍 트레그 세포의 유도를 증가시키기 때문에, 시험관내 생성 된 Treg 세포의 채택 전이와 관련된 고도로 전염하는 환경에서 생체 내 불안정성에 대한 우려가 없다9,10. 이와 관련하여, 시험관내 생성 트레그 세포는 자가면역 질환의 치료를 위한 제안된 전략 중하나(11,12, 13및 이식거부14,15)이다. 마지막으로, 이 전략에서 수지상 세포(DC)는 활성 비타민 D(1,25-디하이드록시비타민 D 또는 1,25[OH]2D)및 활성 비타민 A(레티노산 또는 RA)의 두 분자의 국소 고농도를 생산하도록 설계되었습니다. 1,25(OH) 2D는 조절 분자의 발현을 유도할 수 있기 때문에 1,25(OH)2D(예를 들어, 포크헤드 박스 P3[foxp3]] 및 인터류핀-10[IL-10]))(16, 17 및 RA가 T 세포 18에서 장-호밍 수용체의 발현을 자극할 수 있기때문이다.18). 1,25(OH)2D와 RA 모두 DC28,29를견딜 수 있기 때문에, 우리는 엔지니어링된 DC가 생체 내에서 내성 상태로 안정적으로 유지될 것이고, 따라서 생체외 에서 생성된 톨레생성 DC(TolDCs)19,20, 21을우회할 수 있는 이유이다. 이러한 점에서, TolDC는 또한 Treg 세포 기능19,20,21의생체 내 증강을 위한 제안된 전략 중 하나이다. 우리의 추론을 지원하기 위해, 우리는 생체 내 납품시 엔지니어링 된 DC가 말초 림프 조직에서 창자 호밍 Treg 세포의 유도를 증가 시킬 수 있음을 보여주었습니다6.
우리의 제안된 전략의 추가 이점은 1,25 (OH)2D는 또한 IBD 환자를 잠재적으로 유익할 수 있는 그밖 기능이 있다는 것입니다. 이러한 다른 기능은 항균제(22)의 분비를 자극하고 발암을 억제하는 1,25(OH)2D의능력을 포함한다. 감염 및 암은 IBD24,25와자주 연관됩니다.
1,25(OH)2D 및 RA de novo 의 국소 고농도를 생성할 수 있는 DC를 생성하기 위해, 우리는 렌티바이러스 벡터를 사용하여 DC를 설계하여 두 개의 유전자를 과발현한다. 한 유전자는 25-하이드록시비타민 D 1α-하이드록실라제(1α-hydroxylase)를 암호화하는 시토크롬 P450 패밀리 27서브패밀리 B부재 1(CYP27B1)으로, 생리적으로 1,25(OH)2D의합성을 촉매한다. 다른 유전자는 생리적으로 RA6의합성을 촉매하는 망사형 탈수소 효소 2 (RALDH2)를 인코딩하는 알데히드 탈수소 효소 1 가족 구성원 A2 (ALDH1a2)이다.
내장-호밍 Treg 세포 유도의 생체 내 확대는 IBD의 처리에 잠재적으로 중요하기 때문에, 다음 프로토콜에서 우리는 1α-하이드록실라제-RALDH2-과발현 DC(DC-CYP-ALDH 세포)의 생성을 위한 절차를 상세히 설명할 것이다. 생체 내에서 창자 호밍 Treg 세포의 향후 조사에 사용할 수 있습니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>10 mL syringes</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# 03-377-23</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 mm x 20 mm culture dishes</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Cat# CLS430167</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12-well culture plates</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# 07-200-82</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>150 mm x 25 mm culture dishes</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Cat# CLS430559</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25-hydroxycholecalciferol (25[OH]D)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Cat# H4014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>293T cells</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CRL-3216</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-mercaptoethanol</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat#: 21985023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well culture plates</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# 07-200-83</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ALDEFLUOR kit</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>Cat# 01700</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-CYP27B1</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>Cat# ab95047</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACSAria II</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Cat# C1016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CM-10-D cell culture medium</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>DMEM medium containing 10% fetal bovine serum (FBS), 100 U/ml penicillin/streptomycin, 0.055 mM 2-mercaptoethanol (2-ME), 1 mM sodium pyruvate, 0.1 mM nonessential amino acid, and 2 mM L-glutamine.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CM-10-R cell culture medium</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>RPMI 1640 medium (no glutamine) containing 10% fetal bovine serum (FBS), 100 U/ml penicillin/streptomycin, 0.055 mM 2-mercaptoethanol (2-ME), 1 mM sodium pyruvate, 0.1 mM nonessential amino acid, and 2 mM L-glutamine.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CM-4-D cell culture medium</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>DMEM medium containing 4% fetal bovine serum (FBS), 100 U/ml penicillin/streptomycin, 0.055 mM 2-mercaptoethanol (2-ME), 1 mM sodium pyruvate, 0.1 mM nonessential amino acid, and 2 mM L-glutamine.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning bottle-top vacuum filters, 0.22 mM, 500 mL</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Cat# CLS430513</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning bottle-top vacuum filters, 0.45 mM, 500 mL</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Cat# CLS430514</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting scissor</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# 08-940</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM medium</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# 11960044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# 16000044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# 22-327379</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gibco ACK lysing buffer</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# A1049201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Cat# G5516</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-rabbit IgG</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>Cat# ab205718</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>Cat# 391340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lenti-CYP-ALDH</td>
			<td>Custom-made</td>
			<td>1.6-kb mouse CYP27B1 and ALDH1a2 cDNAs were amplified by PCR using a plasmid containing the CYP27B1 cDNA and a plasmid containing the ALDH1a2 cDNA respectively (GeneCopoeia). The amplified CYP27B1 cDNA fragment with a 5&#39; KOZAK ribosome entry sequence was cloned into the pRRL-SIN.cPPt.PGKGFP.WPRE lentiviral vector (Addgene). The resulting construct was designated as lenti-CYP-GFP. The amplified ALDH1a2 cDNA fragment was cloned into the lenti-CYP-GFP to replace the GFP and was designated as lenti-CYP-ALDH. This bicistronic plasmid expresses CYP27B1 controlled by SFFV promoter and ALDH1a2 controlled by PGK promoter.</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-glutamine</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat#25030081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipopolysaccharide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Cat# L3755</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Murine GM-CSF</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>Cat# 315-03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Murine IL-4</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>Cat# 214-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2HPO4</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Cat# NIST2186II</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Cat# S9888</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needles</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# 14-841-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nonessential Amino Acids</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat#: 11140076</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pCMVR8.74</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>Plasmid# 22036</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat#15140148</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phoshate Balanced Solution (PBS)</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat#: 20012027</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PMD2G</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>Plasmid# 12259</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene tube, 15 mL</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# AM12500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene tube, 50 mL</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# AM12502</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protamine sulfate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Cat# P3369</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit polycloncal IgG isotype control</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>Cat# ab171870</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Radioimmunoassay for 1,25(OH)2D measurement</td>
			<td>Heartland Assays</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640 medium, no glutamine</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# 21870076</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium pyruvat</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat#: 11360070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sorvall Legend XTR Centrifuge</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# 75004521</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Cell strainers, 40 mm</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# 07-201-430</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile storage bottles, 500 mL</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# CLS431432</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo augmentation of gut-homing regulatory t cell induction

염증성 장 질환 (IBD) 위장관에서 염증성 만성 질환 (GUT). 미국에서는, 대략 1.4 백만 IBD 환자가 있습니다. 창자 박테리아에 dysregulated 면역 반응이 질병을 시작하고 점막 상피 장벽을 중단한다는 것은 일반적으로 받아들여집니다. 우리는 최근에 창자 homing 규제 T (Treg) 세포가 IBD를 위한 유망한 치료이다는 것을 보여줍니다. 따라서, 이 문서는 내장-호밍 트레그 세포 유도의 생체 내 확대를 위한 프로토콜을 제시한다. 이 프로토콜에서 수지상 세포는 두 분자 데 노보, 활성 비타민 D (1,25-디하이드록시 비타민 D 또는 1,25 [OH]2D) 및 활성 비타민 A (레티노산 또는 RA)의 국소 고농도를 생산하도록 설계되었습니다. 우리는 1,25(OH)2D가 조절 분자의 발현을 유도할 수 있다는 것을 보여주는 이전 연구 결과에 기초하여 1,25(OH)2D 및 RA를 선택하였다(예를 들어, 포크헤드 박스 P3 및 인터류키틴-10)와 RA가 T 세포에서 장-호밍 수용체의 발현을 자극할 수 있다. 이러한 엔지니어링 수지상 세포를 생성하기 위해, 우리는 두 개의 유전자를 과발현하기 위해 수지상 세포를 트랜스듀싱하는 렌티 바이러스 벡터를 사용합니다. 한 유전자는 1,25(OH)2D의 합성을 생리적으로 촉매하는 25-하이드록시비타민 D 1α-하이드록실라아제를 암호화하는 시토크롬 P450 패밀리 27서브패밀리 B부재 1종이다. 다른 유전자는 생리학적으로 RA의 합성을 촉매하는 망막알데히드 탈수소효소 2를 암호화하는 알데히드 탈수소효소 1가족 구성원 A2이다. 이 프로토콜은 생체 내에서 장-호밍 트레그 세포의 향후 조사에 사용될 수 있다.

DC-CYP-ALDH 세포발은 1α-하이드록실라종의 양을 현저하게 증가하였다. BMDC로부터 생성된 DC-CYP-ALDH 세포가 1α-하이드록실라종의 양을 현저히 증가시키는지 여부를 확인하기 위해, BMDCs는 골수 유래 DC-CYP-ALDH 세포(BMDC-CYP-ALDH 세포)를 생산하기 위해 렌티-CYP-ALDH 바이러스로 트랜스듀싱하였다. 이어서, BMDC-CYP-ALDH 세포를 FACS에 의해 1α-하이드록실라제의 발현을 조사하였다. 우리의 데이터는 BM...

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In Vivo Augmentation of Gut-Homing Regulatory T Cell Induction

여기에서 우리는 창자 호밍 조절 T 세포 유도의 생체 내 확대를 위한 프로토콜을 제시합니다. 이 프로토콜에서 수지상 세포는 활성 비타민 D (1,25-디하이드록시 비타민 D 또는 1,25 [OH]2D) 및 활성 비타민 A (레티노산 또는 RA) 드 노보의 고농도를 국부적으로 생산하도록 설계되었습니다.

내장 호밍 규제 T 세포 유도의 생체 내 확대

Inflammatory bowel disease (IBD) is an inflammatory chronic disease in the gastrointestinal tract (GUT). In the United States, there are approximately 1.4 ...

이 프로토콜은 인간 응용 프로그램에 대해 쉽게 수정할 수 있는 잠재적으로 새로운 치료 전략을 설명합니다. 이 기술은 직접 말초 림프구 조직에서 창자 호밍 조절 T 세포의 유도를 강화하고 매우 프로 염증 환경에서도 안정적으로 구현 될 수있다. 이러한 기술은 또한 말초 면역 계통 내의 활성 비타민 D와 비타민 A의 역할을 조사하기 위하여 이용될 수 있습니다.이 시각적 데모는 이 기술의 성공에 중요한 고품질 엔지니어링 수지상 세포의 생성을 위한 단계별 지침을 제공합니다. CM-10-D 세포 배양 배지 의 20 밀리리터에서 7개의 293T 세포에 1회 10번 을 10번 시드하여 150x 25mm 배양판에서 섭씨 37도및 이산화탄소 5%에서 24시간 배양플레이트를 배양한다. 다음 날, 새로 준비된 2배 농축 HBS 용액 1.62밀리리터, 봉투 플라스미드 9.5마이크로그램, 포장 플라스미드 17.5마이크로그램, 렌티-CYP-ALDH 플라스미드 27마이크로그램을 50밀리리터 원추형 튜브에 추가합니다.튜브 내용물의 최종 부피량은 최대 3.0375 밀리리터에 물을 공급한 후 2개의 어금니 칼슘 염화물을 202.5 마이크로리터를 첨가합니다. DNA 강수 혼합물을 실온에서 20분 동안 그대로 두어 간헐적으로 혼합한 후 293T 배양당 3.24 밀리리터를 떨어뜨려 부드럽게 접시를 소용돌이치게 한다. 플레이트를 PBS로 부드럽게 세척하고 CM-4-D 배양 배지로 세포를 공급하기 전에 24 시간 동안 인큐베이터에 놓습니다.또 다른 24 시간의 배양 후, 수퍼나티를 멸균 병으로 수확하여 섭씨 4~8도에서 보관하고 신선한 CM-4-D 배지로 세포를 24시간 동안 공급합니다. 4일째에는 수퍼네이츠를 다시 수확하고 3일 과 4일 부터 0.45 마이크로미터 필터로 슈퍼네이츠를 변형시다. 이어서, VSV-G 의사형 바이러스를 원심분리에 의한 24시간 동안 농축한다.다음 날은 초월자를 장식합니다. 튜브가 멸균 바이오 안전 캐비닛에서 몇 분 동안 종이 타월에 배출한 다음 문화 접시당 5 %의 글리세롤을 함유 한 멸균 PBS의 33.3 마이크로 리터로 펠릿을 다시 분리하십시오. 골수 유래 수지상 세포 생성의 경우 BALB/c 마우스에서 수확한 심정과 대퇴골을 신선한 배양 배지를 함유한 100x 20mm 배양 접시에 넣습니다.해부 가위와 집게를 사용하여 뼈에서 조직을 제거합니다. 모든 뼈가 청소되었을 때 가위를 사용하여 각 골격의 양쪽 끝을 잘라 골수 구멍을 노출시합니다. 30 게이지 바늘이 장착된 10 밀리리터 주사기를 사용하여 15 밀리리터 튜브에서 골수를 수집하여 10 밀리리터의 신선한 배양 배지로 각 뼈를 플러시합니다.모든 골수가 수집되면 골수를 원심분리에 의한 퇴적시키고 적혈구 용해 완충제의 2밀리리터에서 펠릿을 재보편하게 한다. 가끔 흔들림과 실온에서 4 ~ 5 분 후, 세포 배양 배지의 10 밀리리터와 반응을 중지하고 원심 분리에 의해 세포를 수집합니다. CM-10-R 배양 배지의 10 밀리리터에서 펠릿을 재보중단하고 CM-10-R 배양 배지 농도의 밀리리터당 6개의 세포로 10배 씩 셀을 조절한다.다음으로, 재조합 뮤린 GM-CSF의 밀리리터 당 100 단위와 IL-4의 밀리리터 당 10 단위를 세포에 추가합니다. 세포의 4 밀리리터를 6개의 우물로 접시에 넣고 37°C에서 배양하고 48시간 동안 이산화탄소를 5%로 배양합니다. 인큐베이션의 끝에서, 부드럽게 비 부착 세포를 흡인.추가 48 시간 동안 세포 배양 인큐베이터에 세포를 반환하기 전에 배양에 GM-CSF 및 IL-4로 보충 신선한 배지를 추가합니다. 두 번째 인큐베이션의 끝에서, 그들의 원심 분리를 위한 50 밀리리터 원추형 관으로 비 부착된 골수 유래 수지상 세포를 수확하십시오. BMDC-CYP-ALDH 세포를 생성하기 위해, CM-10-R 배지의 500 마이크로리터당 10내지 6개의 수지상 세포로 10배배기를 재중단하고, 새로운 6개의 음배양판의 각 웰에 500마이크로리터의 세포를 플레이트한다.LENTI-CYP-ALDH 바이러스 50마이크로리터와 프로타민 밀리리터당 8마이크로그램을 각 웰에 추가한 다음 24시간 동안 인큐베이터에 플레이트를 넣습니다. 다음 날, 슈퍼네티를 신선한 배양 배지로 교체하고 판을 세포 배양 인큐베이터로 24시간 더 되돌려 보냅니다. 두 번째 인큐베이션의 끝에서, 세포는 기능 분석을 위해 수확하기 전에 24 시간 동안 잘 당 리포 폴리사카라이드의 밀리리터 당 100 나노그램으로 활성화 될 수 있습니다.부모 골수 유래 수지상 세포에 비해, BMDC-CYP-ALDH 세포는 1 알파-하이드록실라제의 향상된 발현을 표시합니다. BMDC-CYP 및 BMDC-CYP-ALDH 세포의 배양 수퍼나츠에서 활성 형태의 비타민 D농도는 부모 골수 유래 수지상 세포 및 BMDC-ALDH 세포 배양에서 관찰된 것보다 약 20배 더 높습니다. 기판으로 처리된 BMDC-CYP-ALDH 세포의 평균 형광점 강도는 기판으로 처리된 부모 골수 유래 수지상 세포의 그보다 약 6배 더 높습니다.이것은 BMDC-CYP-ALDH 세포가 현저하게 향상된 망막 탈화물 수소효소-2 효소 활성을 표현한다는 것을 건의합니다. 25-하이드록시 비타민 D와 망막으로 처리된 DC2.4 세포는 foxp3 양성 Cd4 양성 T 세포의 풍부에 큰 변화를 유도하지 않는다. 대조적으로, DC2.4 CYP-ALDH 세포는 25-하이드록시 비타민 D와 망막으로 처리된 농도 의존적인 방식으로 장 호밍 조절 T 세포의 상당히 높은 수를 유도한다.또한, 내과음 주입제어세포에 비해 DC CYP-ALDH 세포는 BALB/c 수신자 동물에 대한 복막 주사 후 폭스P3 양성 CCR9 양성 CD4 양성 T 세포의 수가 현저한 증가를 유도한다. 절차의 성공은 건강한 T 세포와 올바르게 준비된 DNA 혼합물의 준비에 달려 있습니다.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Retroviral Transduction of T-cell Receptors in Mouse T-cells

마우스 T - 세포에서 T - 세포 수용체의 Retroviral 전달

T-cell receptors (TCRs) play a central role in the immune system. TCRs on T-cell surfaces can specifically recognize peptide antigens presented by antigen ...

연구

면역학 및 감염병학

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

이식 - 대 - 호스트 질병의 유도 및<em&gt; 생체 내</emMHC 검색 손쥐 모델을 사용&gt; T 셀 모니터링

Graft-versus-host disease (GVHD) is the limiting barrier to the broad use of bone marrow transplant as a curative therapy for a variety of hematological ...

Generation of Induced Regulatory T Cells from Primary Human Na&iuml;ve and Memory T Cells

Generation of Induced Regulatory T Cells from Primary Human NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve and Memory T Cells

기본 인적 나이브 및 메모리 T의 세포로부터 유도된 규제 T 세포의 생성

The development and maintenance of immunosuppressive CD4+ regulatory T cells (Tregs) contribute to the peripheral tolerance needed to remain in ...

piggyBac Transposon System Modification of Primary Human T Cells

piggyBac Transposon System Modification of Primary Human T Cells

기본 인간 T 세포 piggyBac Transposon 시스템 변경

The piggyBac transposon system is naturally active, originally derived from the cabbage looper moth1,2. This non-viral system is plasmid based, most ...

New Tools to Expand Regulatory T Cells from HIV-1-infected Individuals

새로운 도구는 HIV-1에 감염된 개인으로부터 규제 T 세포를 확장하려면

CD4+ Regulatory T cells (Tregs) are potent immune modulators and serve an important function in human immune homeostasis. Depletion of Tregs has led to ...

The Use of Fluorescent Target Arrays for Assessment of T Cell Responses In vivo

The Use of Fluorescent Target Arrays for Assessment of T Cell Responses In vivo

T 세포 반응의 평가를위한 형광 대상 배열의 사용<em&gt; 생체 내</em

The ability to monitor T cell responses in vivo is important for the development of our understanding of the immune response and the design of ...

An Ex vivo Model of an Oligodendrocyte-directed T-Cell Attack in Acute Brain Slices

An Ex vivo Model of an Oligodendrocyte-directed T-Cell Attack in Acute Brain Slices

<em&gt; 생체 내</em&gt; 급성 뇌 조각의 희소 돌기 아교 세포 지시 T 세포 공격의 모델

Death of oligodendrocytes accompanied by destruction of neurons and axons are typical histopathological findings in cortical and subcortical grey matter ...

Induction of Murine Intestinal Inflammation by Adoptive Transfer of Effector CD4+CD45RBhigh T Cells into Immunodeficient Mice

Induction of Murine Intestinal Inflammation by Adoptive Transfer of Effector CD4+CD45RBhigh T Cells into Immunodeficient Mice

이펙터 CD4의 입양 전송하여 쥐과 장내 염증의 유도<sup&gt; +</sup&gt; CD45RB<sup&gt; 높은</sup&gt; 면역 결핍 마우스에게 T 세포

There are many different animal models available for studying the pathogenesis of human inflammatory bowel diseases (IBD), each with its own advantages ...

Mouse Na&#239;ve CD4+ T Cell Isolation and In vitro Differentiation into T Cell Subsets

Mouse NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve CD4+ T Cell Isolation and In vitro Differentiation into T Cell Subsets

마우스 나이브 CD4<sup&gt; +</sup&gt; T 세포의 분리 및<em&gt; 시험관</em&gt; T 세포 하위 집합으로 차별화

Antigen inexperienced (na&#239;ve) CD4+ T cells undergo expansion and differentiation to effector subsets at the time of T cell receptor (TCR) recognition ...