Name: in vivo augmentation of gut-homing regulatory t cell induction
Uploaded: 2020-01-22T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Augmentation of Gut-Homing Regulatory T Cell Induction at JoVE.com

Bu çalışma, Sağlık İşleri Savunma Bakan Yardımcısı Ofisi tarafından Ödül No altında Peer Reviewed Tıbbi Araştırma Programı ile desteklenmiştir. W81XWH-15-1-0240 (XT). Görüşler, yorumlar, sonuçlar ve öneriler yazarın görüşleridir ve Savunma Bakanlığı tarafından mutlaka onaylanmaz. Bu çalışma aynı zamanda Kısmen Loma Linda Üniversitesi Tıp Bölümü (681207-2967 [XT ve GG], 681205-2967 [XT] ve 325491 [DJB] Araştırma Yenilik Hibetarafından desteklenmiştir.

Tüm in vivo hayvan çalışma protokolleri gözden geçirildi ve Loma Linda Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) yanı sıra Hayvan Bakım ve Kullanım İnceleme Ofisi (ACURO) ABD Ordusu Tıbbi Araştırma ve Materiel Komutanlığı (USAMRMC) tarafından onaylandı Savunma Bakanlığı.
1. Hem 1α-hidroksilaz hem de RALDH2 (lenti-CYP-ALDH Virüs) ifade eden Lentivirüs hazırlanması
<ol><li>0. Gün: Sabahın erken saatlerinde CM-10-D hücre kültürü ortamın...

<ol>
	<li>Abraham, C., Cho, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammatory+bowel+disease.">Inflammatory bowel disease.</a> New England Journal of Medicine. 361 (21), 2066-2078 (2009).</li><li>Kaser, A., Zeissig, S., Blumberg, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammatory+bowel+disease.">Inflammatory bowel disease.</a> Annual Reviews in Immunology. 28, 573-621 (2010).</li><li>Clifford, D. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Natalizumab-associated+progressive+multifocal+leukoencephalopathy+in+patients+with+multiple+sclerosis:+lessons+from+28+cases.">Natalizumab-associated progressive multifocal leukoencephalopathy in patients with multiple sclerosis: lessons from 28 cases.</a> Lancet Neurology. 9 (4), 438-446 (2010).</li><li>Linda, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+multifocal+leukoencephalopathy+after+natalizumab+monotherapy.">Progressive multifocal leukoencephalopathy after natalizumab monotherapy.</a> New England Journal of Medicine. 361 (11), 1081-1087 (2009).</li><li>Fischer, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+effects+of+alpha4beta7+and+GPR15+on+homing+of+effector+and+regulatory+T+cells+from+patients+with+UC+to+the+inflamed+gut+in+vivo.">Differential effects of alpha4beta7 and GPR15 on homing of effector and regulatory T cells from patients with UC to the inflamed gut in vivo.</a> Gut. 65 (10), 1642-1664 (2016).</li><li>Xu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Vivo+Generation+of+Gut-Homing+Regulatory+T+Cells+for+the+Suppression+of+Colitis.">In Vivo Generation of Gut-Homing Regulatory T Cells for the Suppression of Colitis.</a> Journal of Immunology. 202 (12), 3447-3457 (2019).</li><li>Rosenblum, M. D., Way, S. S., Abbas, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulatory+T+cell+memory.">Regulatory T cell memory.</a> Nature Reviews Immunology. 16 (2), 90-101 (2016).</li><li>Grimm, A. J., Kontos, S., Diaceri, G., Quaglia-Thermes, X., Hubbell, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Memory+of+tolerance+and+induction+of+regulatory+T+cells+by+erythrocyte-targeted+antigens.">Memory of tolerance and induction of regulatory T cells by erythrocyte-targeted antigens.</a> Science Report. 5, 15907 (2015).</li><li>Kim, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stable+inhibitory+activity+of+regulatory+T+cells+requires+the+transcription+factor+Helios.">Stable inhibitory activity of regulatory T cells requires the transcription factor Helios.</a> Science. 350 (6258), 334-339 (2015).</li><li>Bhela, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Plasticity+and+Stability+of+Regulatory+T+Cells+during+Viral-Induced+Inflammatory+Lesions.">The Plasticity and Stability of Regulatory T Cells during Viral-Induced Inflammatory Lesions.</a> Journal of Immunology. 199 (4), 1342-1352 (2017).</li><li>Bluestone, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Type+1+diabetes+immunotherapy+using+polyclonal+regulatory+T+cells.">Type 1 diabetes immunotherapy using polyclonal regulatory T cells.</a> Science Translational Medicine. 7 (315), (2015).</li><li>Marek-Trzonkowska, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapy+of+type+1+diabetes+with+CD4(+)CD25(high)CD127-regulatory+T+cells+prolongs+survival+of+pancreatic+islets+-+results+of+one+year+follow-up.">Therapy of type 1 diabetes with CD4(+)CD25(high)CD127-regulatory T cells prolongs survival of pancreatic islets - results of one year follow-up.</a> Clinical Immunology. 153 (1), 23-30 (2014).</li><li>Desreumaux, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+and+efficacy+of+antigen-specific+regulatory+T-cell+therapy+for+patients+with+refractory+Crohn's+disease.">Safety and efficacy of antigen-specific regulatory T-cell therapy for patients with refractory Crohn's disease.</a> Gastroenterology. 143 (5), 1201-1202 (2012).</li><li>Di Ianni, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tregs+prevent+GVHD+and+promote+immune+reconstitution+in+HLA-haploidentical+transplantation.">Tregs prevent GVHD and promote immune reconstitution in HLA-haploidentical transplantation.</a> Blood. 117 (14), 3921-3928 (2011).</li><li>Brunstein, C. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infusion+of+ex+vivo+expanded+T+regulatory+cells+in+adults+transplanted+with+umbilical+cord+blood:+safety+profile+and+detection+kinetics.">Infusion of ex vivo expanded T regulatory cells in adults transplanted with umbilical cord blood: safety profile and detection kinetics.</a> Blood. 117 (3), 1061-1070 (2011).</li><li>Kang, S. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=1,25-Dihyroxyvitamin+D3+promotes+FOXP3+expression+via+binding+to+vitamin+D+response+elements+in+its+conserved+noncoding+sequence+region.">1,25-Dihyroxyvitamin D3 promotes FOXP3 expression via binding to vitamin D response elements in its conserved noncoding sequence region.</a> Journal of Immunology. 188 (11), 5276-5282 (2012).</li><li>Correale, J., Ysrraelit, M. C., Gaitan, M. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunomodulatory+effects+of+Vitamin+D+in+multiple+sclerosis.">Immunomodulatory effects of Vitamin D in multiple sclerosis.</a> Brain. 132, 1146-1160 (2009).</li><li>Iwata, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retinoic+acid+imprints+gut-homing+specificity+on+T+cells.">Retinoic acid imprints gut-homing specificity on T cells.</a> Immunity. 21 (4), 527-538 (2004).</li><li>Steinman, R. M., Banchereau, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Taking+dendritic+cells+into+medicine.">Taking dendritic cells into medicine.</a> Nature. 449 (7161), 419-426 (2007).</li><li>Vicente-Suarez, I., Brayer, J., Villagra, A., Cheng, F., Sotomayor, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TLR5+ligation+by+flagellin+converts+tolerogenic+dendritic+cells+into+activating+antigen-presenting+cells+that+preferentially+induce+T-helper+1+responses.">TLR5 ligation by flagellin converts tolerogenic dendritic cells into activating antigen-presenting cells that preferentially induce T-helper 1 responses.</a> Immunology Letters. 125 (2), 114-118 (2009).</li><li>Danova, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NF-kappaB,+p38+MAPK,+ERK1/2,+mTOR,+STAT3+and+increased+glycolysis+regulate+stability+of+paricalcitol/dexamethasone-generated+tolerogenic+dendritic+cells+in+the+inflammatory+environment.">NF-kappaB, p38 MAPK, ERK1/2, mTOR, STAT3 and increased glycolysis regulate stability of paricalcitol/dexamethasone-generated tolerogenic dendritic cells in the inflammatory environment.</a> Oncotarget. 6 (16), 14123-14138 (2015).</li><li>Liu, P. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toll-like+receptor+triggering+of+a+vitamin+D-mediated+human+antimicrobial+response.">Toll-like receptor triggering of a vitamin D-mediated human antimicrobial response.</a> Science. 311 (5768), 1770-1773 (2006).</li><li>Cao, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+vitamin+D+and+vitamin+D+analogs+in+acute+myelogenous+leukemia.">Application of vitamin D and vitamin D analogs in acute myelogenous leukemia.</a> Experimental Hematology. 50, 1-12 (2017).</li><li>Anderson, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lasting+Impact+of+Clostridium+difficile+Infection+in+Inflammatory+Bowel+Disease:+A+Propensity+Score+Matched+Analysis.">Lasting Impact of Clostridium difficile Infection in Inflammatory Bowel Disease: A Propensity Score Matched Analysis.</a> Inflammatory Bowel Disease. 23 (12), 2180-2188 (2017).</li><li>Tsai, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Association+of+Aneuploidy+and+Flat+Dysplasia+With+Development+of+High-Grade+Dysplasia+or+Colorectal+Cancer+in+Patients+With+Inflammatory+Bowel+Disease.">Association of Aneuploidy and Flat Dysplasia With Development of High-Grade Dysplasia or Colorectal Cancer in Patients With Inflammatory Bowel Disease.</a> Gastroenterology. 153 (6), 1492-1495 (2017).</li><li>Lee, H. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracking+of+dendritic+cell+migration+into+lymph+nodes+using+molecular+imaging+with+sodium+iodide+symporter+and+enhanced+firefly+luciferase+genes.">Tracking of dendritic cell migration into lymph nodes using molecular imaging with sodium iodide symporter and enhanced firefly luciferase genes.</a> Science Reports. 5, 9865 (2015).</li><li>Shen, Z., Reznikoff, G., Dranoff, G., Rock, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cloned+dendritic+cells+can+present+exogenous+antigens+on+both+MHC+class+I+and+class+II+molecules.">Cloned dendritic cells can present exogenous antigens on both MHC class I and class II molecules.</a> Journal of Immunology. 158 (6), 2723-2730 (1997).</li><li>Okada, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Administration+route-dependent+vaccine+efficiency+of+murine+dendritic+cells+pulsed+with+antigens.">Administration route-dependent vaccine efficiency of murine dendritic cells pulsed with antigens.</a> British Journal of Cancer. 84 (11), 1564-1570 (2001).</li><li>Li, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+cells,+engineered+to+overexpress+25-hydroxyvitamin+D+1alpha-hydroxylase+and+pulsed+with+a+myelin+antigen,+provide+myelin-specific+suppression+of+ongoing+experimental+allergic+encephalomyelitis.">Dendritic cells, engineered to overexpress 25-hydroxyvitamin D 1alpha-hydroxylase and pulsed with a myelin antigen, provide myelin-specific suppression of ongoing experimental allergic encephalomyelitis.</a> FASEB J. , (2017).</li><li>Narula, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+High-Dose+Vitamin+D3+Supplementation+in+Patients+with+Crohn's+Disease+in+Remission:+A+Pilot+Randomized+Double-Blind+Controlled+Study.">Impact of High-Dose Vitamin D3 Supplementation in Patients with Crohn's Disease in Remission: A Pilot Randomized Double-Blind Controlled Study.</a> Digestive Disease Science. 62 (2), 448-455 (2017).</li><li>Ahmad, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vitamin+A+Supplementation+during+Pregnancy+Enhances+Pandemic+H1N1+Vaccine+Response+in+Mothers,+but+Enhancement+of+Transplacental+Antibody+Transfer+May+Depend+on+When+Mothers+Are+Vaccinated+during+Pregnancy.">Vitamin A Supplementation during Pregnancy Enhances Pandemic H1N1 Vaccine Response in Mothers, but Enhancement of Transplacental Antibody Transfer May Depend on When Mothers Are Vaccinated during Pregnancy.</a> Journal of Nutrition. 148 (12), 1968-1975 (2018).</li><li>Noronha, S. M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aldefluor+protocol+to+sort+keratinocytes+stem+cells+from+skin.">Aldefluor protocol to sort keratinocytes stem cells from skin.</a> Acta Cirurgica Brasileira. 32 (11), 984-994 (2017).</li><li>Ferreira, G. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vitamin+D3+Induces+Tolerance+in+Human+Dendritic+Cells+by+Activation+of+Intracellular+Metabolic+Pathways.">Vitamin D3 Induces Tolerance in Human Dendritic Cells by Activation of Intracellular Metabolic Pathways.</a> Cell Reports. 10 (5), 711-725 (2015).</li><li>Bakdash, G., Vogelpoel, L. T., van Capel, T. M., Kapsenberg, M. L., de Jong, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retinoic+acid+primes+human+dendritic+cells+to+induce+gut-homing,+IL-10-producing+regulatory+T+cells.">Retinoic acid primes human dendritic cells to induce gut-homing, IL-10-producing regulatory T cells.</a> Mucosal Immunology. 8 (2), 265-278 (2015).</li></ol>

Bu makalede, dc-CYP-ALDH hücrelerinin kullanımı açıklanır, periferik lenfoid dokularda gut-homing Treg hücrelerinin indüksiyon artırmak için. Verilerimiz DC-CYP-ALDH hücrelerinin sırasıyla 1,25(OH)2D ve RA in vitro yerel olarak yüksek konsantrasyonlarda sentezleyebildiği gösterilmiştir (sırasıyla 25[OH]D ve retinol). 25(OH)D ve retinol yeterli kan konsantrasyonları kolayca eksikliği olan hastalarda sırasıyla D vitamini ve A takviyesi ile elde edilebilir çünkü30...

İnflamatuar barsak hastalığı (IBD) gastrointestinal sistemde (GUT) inflamatuar kronik bir hastalıktır. Amerika Birleşik Devletleri'nde yaklaşık 1.4 milyon IBD hastası bulunmaktadır. Genellikle bağırsak bakterileri için bir disregulated bağışıklık yanıtı hastalığı başlatır ve mukozal epitel bariyer bozan kabul edilir1,2. Bu nedenle, şu anda mevcut ABD Gıda ve İlaç İdaresi (FDA) onaylı ilaçlar inflamatuar mediatörlerin işlevlerini inhibe veya bağırsak içine bağışıklık hücrelerinin homing engellemek. Ancak, inflamatuar mediatörler ve hedeflenen bağışıklık hücreleri de bağışıklık savunması için gereklidir. Sonuç olarak, inflamatuar arabulucu inhibitörleri sistemik bağışıklık savunma ve bağışıklık hücresi homing blokerler bağışıklık bağışıklık savunma zayıflatmak, her ikisi de ciddi sonuçlara yol açabilir3,4. Buna ek olarak, bağışıklık hücresi homing blokerler de bağırsak içine düzenleyici T homing engelleyebilir (Treg) hücreleri ve dolayısıyla IBD hastalarında zaten tehlikeye bağırsak bağışıklık toleransı kötüleştirebilir. Ayrıca, bağırsak içine Treg hücre homing engelleme de kanda Treg hücrelerinin birikimi nedeniyle sistemik bağışıklık baskılanmasına yol açabilir5. Son olarak, inhibitörler ve blokerler geçici olarak çalışır ve bu nedenle sık sık yönetimgerektirir. Bu inhibitörlerve blokerlerin sık uygulanması daha da istenmeyen yan etkileri şiddetlendirebilir.
Son zamanlarda, potansiyel olarak hafifletmek ve hatta IBD tedavisi için mevcut ilaçlar ile ilişkili yan etkileri ortadan kaldırmak yeni bir strateji önerdi6. Bu strateji periferik lenfoid dokularda gut-homing Treg hücrelerinin indüksiyon artar6. Bu stratejinin mantığı gut-homing Treg hücreleri özellikle bağırsak ev ve dolayısıyla sistemik bağışıklık savunma ödün olmayacaktır. Buna ek olarak, Treg hücreleri potansiyel bellek oluşturabilir beri7,8, bağırsak-homing Treg hücreleri potansiyel IBD hastalarında kronik bağırsak iltihabı istikrarlı bir kontrol sağlayabilir ve, bu nedenle, tedavi sık sık uygulanması gerekmez. Ayrıca, bu strateji in vivo bağırsak-homing Treg hücrelerinin indüksiyon artırır bu yana, in vitro oluşturulan Treg hücrelerinin benimseyen transferi ile ilişkili son derece proinflamatuar bir ortamda in vivo instabilite endişe yok9,10. Bu bağlamda, in vitro oluşturulan Treg hücreleri otoimmün hastalıkların tedavisi için önerilen stratejilerden biridir11,12,13 ve nakil reddi14,15. Son olarak, bu stratejide, dendritik hücreler (DCs) iki molekül de novo yerel olarak yüksek konsantrasyonlarda üretmek için tasarlanmış: aktif D vitamini (1,25-dihidroksyvitamin D veya 1,25[OH]2D) ve aktif A vitamini (retinoik asit veya RA). Biz 1,25 (OH)2D ve RA seçti, çünkü 1,25(OH)2D düzenleyici moleküllerin ekspresyonunu neden olabilir (örneğin, forkhead kutusu P3 [foxp3] ve interlökin-10 [IL-10])16,17 ve RA T hücrelerinde bağırsak-homing reseptörlerinin ekspresyonunu uyarabilir18. Her iki 1.25 (OH)2D ve RA da DCs28,29tolere çünkü, biz mühendislik DC'ler stably vivo bir tolerojenik statüde muhafaza edilecek ve dolayısıyla in vitro tolerojenik DCs (TolDCs)19,20,21oluşturulan in vivo invivo instabilite endişeleri atlatmak neden . Bu bağlamda, TolDCs da Treg hücre fonksiyonları19,20,21in vivo büyütme için önerilen stratejilerden biridir. Bizim akıl desteklemek için, biz mühendislik DC'ler, in vivo teslim üzerine, periferik lenfoid dokularda gut-homing Treg hücrelerinin indüksiyon artırabilirsiniz göstermiştir6.
Önerilen stratejimizin bir diğer avantajı da 1,25(OH)2D'nin IBD hastalarına fayda sağleyebilecek başka işlevlere sahip olmasıdır. Bu diğer fonksiyonlar antimikrobiyallerin salgılanmasını uyarmak için 1,25 (OH)2D yeteneği içerir22 ve karsinogenez bastırmak için23. Enfeksiyonlar ve kanserler sık lıkla IBD24,25ile ilişkilidir.
1,25(OH)2D ve RA de novo yerel olarak yüksek konsantrasyonlarda üretebilir DC'ler oluşturmak için, iki gen aşırı ifade etmek için DC'ler mühendislik için bir lentiviral vektör kullanın. Genlerden biri, fizyolojik olarak 1,25(OH) 2 D sentezini katalize eden 25-hidroksivitamin D 1α-hidroksilaz (1α-hidroksilaz) kodlayan sitokrom P450 familyası27alt familya B üyesi 1 (CYP27B1) dir. Diğer gen aldehit dehidrogenaz 1 aile üyesi A2 (ALDH1a2) retinaldehit dehidrogenaz kodlar 2 (RALDH2), fizyolojik RAsentezinikatalizler 6 .
Gut-homing Treg hücre indüksiyonunun in vivo arttırılması IBD tedavisinde potansiyel olarak önemli olduğundan, aşağıdaki protokolde 1α-hidroksilaz-RALDH2-aşırı ifade edici DC'lerin (DC-CYP-ALDH hücreleri) üretimi için prosedürleri ayrıntılı olarak açıklayacaktır. in vivo bağırsak-homing Treg hücrelerinin gelecekteki araştırma için kullanılabilir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>10 mL syringes</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# 03-377-23</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 mm x 20 mm culture dishes</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Cat# CLS430167</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12-well culture plates</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# 07-200-82</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>150 mm x 25 mm culture dishes</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Cat# CLS430559</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25-hydroxycholecalciferol (25[OH]D)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Cat# H4014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>293T cells</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CRL-3216</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-mercaptoethanol</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat#: 21985023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well culture plates</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# 07-200-83</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ALDEFLUOR kit</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>Cat# 01700</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-CYP27B1</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>Cat# ab95047</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACSAria II</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Cat# C1016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CM-10-D cell culture medium</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>DMEM medium containing 10% fetal bovine serum (FBS), 100 U/ml penicillin/streptomycin, 0.055 mM 2-mercaptoethanol (2-ME), 1 mM sodium pyruvate, 0.1 mM nonessential amino acid, and 2 mM L-glutamine.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CM-10-R cell culture medium</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>RPMI 1640 medium (no glutamine) containing 10% fetal bovine serum (FBS), 100 U/ml penicillin/streptomycin, 0.055 mM 2-mercaptoethanol (2-ME), 1 mM sodium pyruvate, 0.1 mM nonessential amino acid, and 2 mM L-glutamine.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CM-4-D cell culture medium</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>DMEM medium containing 4% fetal bovine serum (FBS), 100 U/ml penicillin/streptomycin, 0.055 mM 2-mercaptoethanol (2-ME), 1 mM sodium pyruvate, 0.1 mM nonessential amino acid, and 2 mM L-glutamine.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning bottle-top vacuum filters, 0.22 mM, 500 mL</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Cat# CLS430513</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning bottle-top vacuum filters, 0.45 mM, 500 mL</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Cat# CLS430514</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting scissor</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# 08-940</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM medium</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# 11960044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# 16000044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# 22-327379</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gibco ACK lysing buffer</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# A1049201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Cat# G5516</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-rabbit IgG</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>Cat# ab205718</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>Cat# 391340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lenti-CYP-ALDH</td>
			<td>Custom-made</td>
			<td>1.6-kb mouse CYP27B1 and ALDH1a2 cDNAs were amplified by PCR using a plasmid containing the CYP27B1 cDNA and a plasmid containing the ALDH1a2 cDNA respectively (GeneCopoeia). The amplified CYP27B1 cDNA fragment with a 5&#39; KOZAK ribosome entry sequence was cloned into the pRRL-SIN.cPPt.PGKGFP.WPRE lentiviral vector (Addgene). The resulting construct was designated as lenti-CYP-GFP. The amplified ALDH1a2 cDNA fragment was cloned into the lenti-CYP-GFP to replace the GFP and was designated as lenti-CYP-ALDH. This bicistronic plasmid expresses CYP27B1 controlled by SFFV promoter and ALDH1a2 controlled by PGK promoter.</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-glutamine</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat#25030081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipopolysaccharide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Cat# L3755</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Murine GM-CSF</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>Cat# 315-03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Murine IL-4</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>Cat# 214-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2HPO4</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Cat# NIST2186II</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Cat# S9888</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needles</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# 14-841-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nonessential Amino Acids</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat#: 11140076</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pCMVR8.74</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>Plasmid# 22036</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat#15140148</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phoshate Balanced Solution (PBS)</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat#: 20012027</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PMD2G</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>Plasmid# 12259</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene tube, 15 mL</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# AM12500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene tube, 50 mL</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# AM12502</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protamine sulfate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Cat# P3369</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit polycloncal IgG isotype control</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>Cat# ab171870</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Radioimmunoassay for 1,25(OH)2D measurement</td>
			<td>Heartland Assays</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640 medium, no glutamine</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# 21870076</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium pyruvat</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat#: 11360070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sorvall Legend XTR Centrifuge</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# 75004521</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Cell strainers, 40 mm</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# 07-201-430</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile storage bottles, 500 mL</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Cat# CLS431432</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo augmentation of gut-homing regulatory t cell induction

İnflamatuar barsak hastalığı (IBD) gastrointestinal sistemde (GUT) inflamatuar kronik bir hastalıktır. Amerika Birleşik Devletleri'nde yaklaşık 1.4 milyon IBD hastası bulunmaktadır. Genellikle bağırsak bakterileri için bir disregulated bağışıklık yanıtı hastalığı başlatır ve mukozal epitel bariyeri bozar kabul edilir. Biz son zamanlarda gut-homing düzenleyici T (Treg) hücreleri IBD için umut verici bir tedavi olduğunu göstermektedir. Buna göre, bu makalede gut-homing Treg hücre indüksiyon in vivo büyütme için bir protokol sunar. Bu protokolde, dendritik hücreler iki molekül de novo, aktif D vitamini (1,25-dihidroksyvitamin D veya 1,25[OH]2D) ve aktif A vitamini (retinoik asit veya RA) yerel olarak yüksek konsantrasyonlarda üretmek için tasarlanır. 1,25(OH)2D ve RA'yı, 1,25(OH)2D'nin düzenleyici moleküllerin ekspresyonunu (örneğin, çatal kafa kutusu P3 ve interlökin-10) ve RA'nın T hücrelerindeki bağırsak-homing reseptörlerinin ekspresyonunu uyarabileceğini gösteren önceki bulgulara dayanarak seçtik. Bu tür mühendislik dendritik hücreleri oluşturmak için, dendritik hücreleri iki geni aşırı eksprese etmek için vermek için lentiviral vektör kullanıyoruz. Genlerden biri, fizyolojik olarak 1,25(OH) 2 D sentezini katalize eden 25-hidroksivitamin D 1α-hidroksilaz kodlayan sitokrom P450 familyası27alt familya 1'dir. Diğer gen aldehit dehidrogenaz 1 aile üyesi A2 retinaldehit dehidrogenaz kodlar 2, fizyolojik RA sentezini katalizler. Bu protokol in vivo bağırsak-homing Treg hücrelerinin gelecekteki araştırma için kullanılabilir.

DC-CYP-ALDH hücreleri 1α-hidroksilaz miktarının önemli ölçüde arttığını ifade etti. KBM'lerden üretilen DC-CYP-ALDH hücrelerinin 1α-hidroksilaz miktarını önemli ölçüde ifade edip etmediğini belirlemek için, KBM'ler lenti-CYP-ALDH virüsü ile kemik iliği kaynaklı DC-CYP-ALDH hücreleri (BMDC-CYP-ALDH hücreleri) üretmek için transe geçirildi. Daha sonra, BMDC-CYP-ALDH hücreleri FACS tarafından 1α-hidroksilaz ekspresyonu için incelendi. Verilerimiz, BMDC-CYP-ALDH hücreleri...

Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Augmentation of Gut-Homing Regulatory T Cell Induction at JoVE.com

In Vivo Augmentation of Gut-Homing Regulatory T Cell Induction

Burada bağırsak-homing düzenleyici T hücre indüksiyon invivo büyütme için bir protokol sıyoruz. Bu protokolde, dendritik hücreler lokal olarak aktif D vitamini (1,25-dihidroksivitamin D veya 1,25[OH]2D) ve aktif A vitamini (retinoik asit veya RA) de novo yüksek konsantrasyonlarda üretmek için tasarlanır.

Bağırsak-Homing Düzenleyici T Hücre İndüksiyon In Vivo Augmentation

Inflammatory bowel disease (IBD) is an inflammatory chronic disease in the gastrointestinal tract (GUT). In the United States, there are approximately 1.4 ...

Bu protokol, insan uygulamaları için kolayca değiştirilebilen potansiyel olarak yeni bir tedavi stratejisini açıklamaktadır. Bu teknik doğrudan periferik lenfoid dokularda bağırsak-homing düzenleyici T hücrelerinin indüksiyon artırır ve stably son derece pro-inflamatuar ortamlarda bile uygulanabilir. Bu teknikler aynı zamanda periferik bağışıklık sistemi içinde aktif D vitamini ve A vitamini rolünü araştırmak için kullanılabilir.Bu görsel gösteri, bu tekniğin başarısı için kritik olan yüksek kaliteli mühendislik dendritik hücrelerin üretimi için adım adım talimatlar sağlayacaktır. 37 santigrat derece ve% 5 karbondioksit 24 saat kuluçka için 150 cm-10-D hücre kültürü orta 20 mililitre yedi 293T hücreleri bir kez 10 tohumlama ile başlayın. Ertesi gün, taze hazırlanmış iki kat konsantre HBS çözeltisi 1.62 mililitre ekleyin, zarf plazmid 9.5 mikrogram, ambalaj plazmid 17.5 mikrogram, ve 50 mililitrelik konik tüp LENTI-CYP-ALDH plazmid 27 mikrogram.Tüp içeriğinin son hacmini 3,0375 mililitreye kadar su ile getirin ve ardından iki azı dişi kalsiyum klorür 202,5 mikrolitre ilave edin. 293T kültürüne 3,24 mililitre çözelti eklemeden önce, kabı hafifçe döndürerek 20 dakika oda sıcaklığında DNA çökeltme karışımını bırakın. Plakaları, her bir tabağı PBS ile hafifçe yıkamadan ve hücreleri CM-4-D kültür ortamıyla beslemeden önce 24 saat boyunca kuvöze yerleştirin.Kültürün başka bir 24 saat sonra, dört ila sekiz santigrat depolama için steril şişeler içine supernatants hasat ve başka bir 24 saat boyunca taze CM-4-D orta hücreleri beslemek. Dördüncü günde, supernatants tekrar hasat ve 0.45 mikrometre filtre hem gün üç ve dört supernatants zorlanma. Daha sonra, 24 saat boyunca santrifüj ile VSV-G psödotipli virüs konsantre.Ertesi gün süpernatants decant. Tüpler birkaç dakika için steril bir biyo-güvenlik kabininde bir kağıt havlu üzerinde drenaj izin, sonra kültür çanak başına% 5 gliserol içeren steril PBS 33.3 mikrolitre pelet resuspend. Kemik iliği dendritik hücre üretimi için, BALB/c farelerinden hasat edilen tibias ve femurları taze kültür ortamı nı içeren 100 ila 20 milimetrelik bir kültür yemeğine yerleştirin.Kemiklerden herhangi bir doku kaldırmak için kesme makas ve forceps kullanın. Tüm kemikler temizlendikten sonra, kemik iliği boşluklarını ortaya çıkarmak için her kemiğin iki ucunu kesmek için makas kullanın. Her kemiği 10 mililitrelik taze kültür ortamıyla yıkamak için 30 gauge iğneyle donatılmış 10 mililitrelik bir şırınga kullanın ve kemik iliğini 15 mililitrelik bir tüpte toplayın.Tüm kemik iliği toplandığında, merkezle kemik iliğini tortulayın ve iki mililitre kırmızı kan hücresi lisis tamponu içinde peleti yeniden askıya alın. Ara sıra sallayarak oda sıcaklığında dört ila beş dakika sonra, hücre kültürü orta 10 mililitre ile reaksiyonu durdurmak ve santrifüj ile hücreleri toplamak. Cm-10-R kültür orta 10 mililitre pelet resuspend sayma ve cm-10-R kültür orta konsantrasyon mililitre başına altı hücre için bir kez 10 hücreleri ayarlamak.Daha sonra, hücrelere rekombinant murine GM-CSF mililitre başına 100 birim ve IL-4 mililitre başına 10 birim ekleyin. 48 saat boyunca 37 santigrat derece ve % 5 karbondioksit onların kuluçka için altı kuyu kültür plaka bireysel kuyular içine hücrelerin plaka dört mililitre. Kuluçka sonunda, yavaşça non-yapışık hücreleri aspire.Bir ek 48 saat için hücre kültürü kuluçka hücreleri iade etmeden önce kültürlere GM-CSF ve IL-4 ile takviye taze orta ekleyin. İkinci kuluçka sonunda, non-yapışık kemik iliği onların santrifüj için 50 mililitre konik tüp içine dendritik hücreler elde hasat. BMDC-CYP-ALDH hücreleri oluşturmak için, iyi konsantrasyon başına CM-10-R orta 500 mikrolitre başına altıncı dendritik hücreler için bir kez on kültürleri yeniden askıya, ve plaka 500 hücre mikrolitre yeni bir altı iyi kültür plaka her kuyuiçine.Her kuyuya 50 mikrolitre LENTI-CYP-ALDH virüsü ve mililitre başına 8 mikrogram protamin ekleyin, sonra plakayı 24 saat boyunca kuvöze yerleştirin. Ertesi gün, supernatants taze kültür ortamı ile değiştirin ve başka bir 24 saat için hücre kültürü kuluçka için plakaları iade. İkinci kuluçka sonunda, hücreler fonksiyonel analizler için hasat tan önce 24 saat boyunca kuyu başına mililitre başına 100 nanogram ile aktive edilebilir.Ebeveyn kemik iliği türetilen dendritik hücreler ile karşılaştırıldığında, BMDC-CYP-ALDH hücreleri 1-alfa-hidroksilaz gelişmiş bir ifade görüntüler. BMDC-CYP ve BMDC-CYP-ALDH hücrelerinin kültür supernatants D vitamini aktif form konsantrasyonları yaklaşık 20 kat daha yüksek bu ebeveyn kemik iliği kaynaklı dendritik hücre ve BMDC-ALDH hücre kültürleri gözlenen daha yüksektir. SUBstrat ile tedavi edilen BMDC-CYP-ALDH hücrelerinin ortalama floresan yoğunlukları, substrat ile tedavi edilen ebeveyn kemik iliği türetilen dendritik hücrelere göre yaklaşık altı kat daha fazladır.Bu, BMDC-CYP-ALDH hücrelerinin retinal dehydehidrogenaz-2 enzimatik aktivitesini önemli ölçüde ifade ettiğini göstermektedir. 25-hidroksi D vitamini ve retinal ile tedavi EDILEN DC2.4 hücreleri foxp3 pozitif CCR9 pozitif CD4 pozitif T hücrelerinin bolluğunda önemli bir değişikliğe neden olmaz. Buna karşılık, DC2.4 CYP-ALDH hücreleri 25-hidroksi D vitamini ve retinal ile tedavi konsantrasyonbağımlı bir şekilde bağırsak-homing düzenleyici T hücrelerinin önemli ölçüde daha yüksek sayıda indükler.Ayrıca, intraperitoneally enjekte kontrol hücreleri ile karşılaştırıldığında, DC CYP-ALDH hücreleri de BALB / c alıcı hayvanlara intraperitoneal enjeksiyon sonra foxp3 pozitif CCR9 pozitif CD4 pozitif T hücrelerinin sayısında önemli bir artış neden. İşlemin başarısı sağlıklı T hücrelerinin hazırlanmasına ve doğru hazırlanmış DNA karışımına bağlıdır.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Retroviral Transduction of T-cell Receptors in Mouse T-cells

Fare T-hücrelerinin, T-hücre reseptörleri retroviral İletimi

T-cell receptors (TCRs) play a central role in the immune system. TCRs on T-cell surfaces can specifically recognize peptide antigens presented by antigen ...

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Graft-versus-host hastalığı indüksiyonu ve<em&gt; In Vivo</emBir MHC-eşlemeli murin Model Kullanma&gt; T Hücre İzleme

Graft-versus-host disease (GVHD) is the limiting barrier to the broad use of bone marrow transplant as a curative therapy for a variety of hematological ...

Generation of Induced Regulatory T Cells from Primary Human Na&iuml;ve and Memory T Cells

Generation of Induced Regulatory T Cells from Primary Human NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve and Memory T Cells

İlköğretim İnsan naif ve Bellek T Hücreleri gelen İsteyerek Düzenleyici T Hücreleri Üretimi

The development and maintenance of immunosuppressive CD4+ regulatory T cells (Tregs) contribute to the peripheral tolerance needed to remain in ...

piggyBac Transposon System Modification of Primary Human T Cells

piggyBac Transposon System Modification of Primary Human T Cells

Primer insan T hücrelerinin piggyBac Transposon Sistem Modifikasyon

The piggyBac transposon system is naturally active, originally derived from the cabbage looper moth1,2. This non-viral system is plasmid based, most ...

New Tools to Expand Regulatory T Cells from HIV-1-infected Individuals

Yeni Araçlar HIV-1 ile enfekte bireyler gelen Düzenleyici T hücreleri büyütmek için

CD4+ Regulatory T cells (Tregs) are potent immune modulators and serve an important function in human immune homeostasis. Depletion of Tregs has led to ...

The Use of Fluorescent Target Arrays for Assessment of T Cell Responses In vivo

The Use of Fluorescent Target Arrays for Assessment of T Cell Responses In vivo

T hücre yanıtlarının Değerlendirme Floresan hedef Dizilerin Kullanımı<em&gt; In vivo</em

The ability to monitor T cell responses in vivo is important for the development of our understanding of the immune response and the design of ...

An Ex vivo Model of an Oligodendrocyte-directed T-Cell Attack in Acute Brain Slices

An Ex vivo Model of an Oligodendrocyte-directed T-Cell Attack in Acute Brain Slices

Bir<em&gt; Ex vivo</em&gt; Akut Beyin Dilimleri bir Oligodendrosit yönelik T-Hücre Saldırı Modeli

Death of oligodendrocytes accompanied by destruction of neurons and axons are typical histopathological findings in cortical and subcortical grey matter ...

Induction of Murine Intestinal Inflammation by Adoptive Transfer of Effector CD4+CD45RBhigh T Cells into Immunodeficient Mice

Induction of Murine Intestinal Inflammation by Adoptive Transfer of Effector CD4+CD45RBhigh T Cells into Immunodeficient Mice

Efektör CD4 Evlatlık transferi ile Kemirgen Bağırsak Enflamasyon indüksiyonu<sup&gt; +</sup&gt; CD45RB<sup&gt; Yüksek</sup&gt; Bağışık yetmezliği olan farelere içine T Hücreleri

There are many different animal models available for studying the pathogenesis of human inflammatory bowel diseases (IBD), each with its own advantages ...

Mouse Na&#239;ve CD4+ T Cell Isolation and In vitro Differentiation into T Cell Subsets

Mouse NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve CD4+ T Cell Isolation and In vitro Differentiation into T Cell Subsets

Fare Naif CD4<sup&gt; +</sup&gt; T Hücre İzolasyonu ve<em&gt; In vitro</em&gt; T hücre alt içine Farklılaşma

Antigen inexperienced (na&#239;ve) CD4+ T cells undergo expansion and differentiation to effector subsets at the time of T cell receptor (TCR) recognition ...