Name: at-risk butterfly captive propagation programs to enhance life history knowledge and effective ex situ conservation techniques
Uploaded: 2020-02-11T13:00:00
Duration: 7 min 10 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about At-Risk Butterfly Captive Propagation Programs to Enhance Life History Knowledge and Effective Ex Situ Conservation Techniques at JoVE.com

Bu çalışma, ABD Balık ve Yaban Hayatı Servisi'nin Koruma Kurtarma Girişimi (F17AP00467) ve Disney Koruma Fonu'ndan gelen hibelerle desteklenmiştir. Ek destek Florida Doğal Tarih Müzesi ve Florida Üniversitesi Entomoloji ve Nematoloji Bölümü tarafından sağlanmıştır.

1. Başarılı yetişkin kur ve miyeting güvence altına
<ol><li>Başarılı klopsion ardından, güvenli bir içine canlı yetişkin kelebekler serbest, walk-in, bir sıcaklık kontrollü sera bulunan ekranlı uçuş kafesi(Ek Şekil 2). NOT: Genetik çizgilerin, stok kökeninin ayrılması veya organizmanın uzun ömürlülüğü, davranışı ile ilgili belirli veri toplama için belirli bireylerin belirlenmesi isteniyorsa, yetişkinler kanatların ventral yüzeyinde kalıcı mürekkep belirteçleri ile işaretlenebilir, Vb.<ol>
<li>Tam kafes boyutları değişebilir iken, yeterli nektar bitki malzeme ev yetişkin kelebeklerin yoğunluğunu desteklemek ve serbestçe durmak ve etrafında pivot bir insan için yer sağlamak için gerekli karşılamak için yeterli alan olduğundan emin olun.</li>
		<li>Sıcaklık düzenlemenin ötesinde, seranın sert hava koşullarına (örn. şiddetli yağmur, rüzgar) karşı korumayla birlikte ikinci bir çevreleme katmanı sağlayabilmesini sağlamak için güvenli olduğundan emin olun.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Saksıne nektar bitkisi malzemesini kafesin iç kısmından en yüksek çiçek açan çiçeklere kadar en fazla 30 cm boşluk olmayacak şekilde yükseltin(Ek Şekil 2). Bu, mevcut nektar kaynaklarına en iyi erişimi sağlar, bol yetişkin tünekleri sunar ve gereksiz uçuş faaliyetlerini en aza indirir.</li>
	<li>Uçuş kafesinde bir saksı ev sahibi bitki yerleştirin. Bu, çiftleştirilmiş bir çift kaçırılsa bile ortaya çıkan yumurtaların toplanmasını sağlar.</li>
	<li>Tutarlı hava akışı sağlayın. Bu kur aktivitesi ve muvariyet başarısını artırır. Bir sera ortamında, üfleyiciler ve sabit montaj sirkülasyon fanlar en iyi havalandırma ve hava hareketini geliştirmeye yardımcı olmak için kullanılır. Kutu veya masa fanları gibi daha küçük taşınabilir havalandırma da kullanılabilir.</li>
	<li>Optimum yetişkin aktivitesini ve yetişkinlik başarısını teşvik etmek için 27 °C ile 32 °C arasındaki iç sera sıcaklığını koruyun. Kafesin içindeki sıcaklık izlenebilir bir bellek izleme termometresi kullanılarak izlenir.</li>
	<li>Bir el pompası, plastik tank püskürtücü veya bahçe hortumu kullanarak su ile düzenli olarak (yaklaşık her 2 saat) ekranlı uçuş kafesi sis.</li>
	<li>50 dram berrak plastik snap kap şişe(Malzeme Tablosu)kullanarak ekranlı uçuş kafesinden tek tek çiftleme çiftlerini yavaşça toplayın, şişe başına bir ila iki çift yerleştirerek ve kapalı bir yetiştirme odasına veya laboratuvara ulaşım(Ek Şekil 3).</li>
</ol>2. Yumurta üretimini maksimize etmek
<ol><li>Oviposition odasını birleştirin.<ol>
<li>12 ons düz beyaz kağıt bardak alın ve bir çırpıda bıçak programı bıçak kullanarak, birbirlerine karşısında fincan her iki tarafında iki yatay kesim yapmak. Her kesim jantın yaklaşık 1 cm altında olmalıdır.</li>
		<li>Yarısında tek bir pamuklu bez kesin ve pamuklu bez kısmı fincan iç doğru yaklaşık 2 cm uzanır, böylece kağıt fincan her iki tarafında iki yatay kesim içine her çubuk ucu ekleyin.</li>
		<li>Bir çırpıda bıçak programı bıçak kullanarak, kağıt fincan altında iki "X" kesim yapmak. Her diyagonal kesim yaklaşık 1 cm uzunluğunda olmalıdır.</li>
		<li>9 ons plastik bardak alın ve musluk suyu yaklaşık 2 cm ile alt doldurun.</li>
		<li>Alttaki "X" kesiklerinden biri aracılığıyla sapı takarak, yaklaşık 15 cm uzunluğunda, terminal larva konak bitkisi büyümesini kağıt kabına yerleştirin. Yaklaşık 4-5 cm alt çıkıntı böylece kesim ile kök itin.</li>
		<li>Kağıt kabı ev sahibi malzemeyle plastik bardağa yerleştirin ve bitki sapınsuda olmasını sağlar.</li>
		<li>1 ml'lik bir alt Q şırıngasını (0,45 mm x 16 mm) aromalı bir spor içeceğiyle doldurun ve kağıt bardakta her iki pamuklu bezi de doygunlayın. Bunlar yapay çiçek gibi davranır. NOT: Kavun ve meyve yumruk aromalı spor içeceği en iyi nektar alternatifini sunar.</li>
		<li>Her çiftleşme çifti ayrıldıktan sonra, 2-3 gravid dişileri birleştirilmiş fincan konfigürasyonuna (yani oviposition odasına) yerleştirin.</li>
		<li>Siyah tül (yaklaşık 15 cm x 15 cm) bir kesme kare parçası ile fincan kapağı ve kapağı etrafında bir lastik bant ile sabit(Ek Şekil 4). Siyah tül fincan içine en iyi görünürlük ve bazen tül üzerine döşenebilir herhangi bir yumurta kolay kimlik sağlar.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Yetişkin kelebek aktivitesi ve oviposition teşvik edin.<ol>
<li>Bir laboratuvar tezgahı veya masaya her oviposition odası yerleştirin yaklaşık 19 cm altında bir 8.5 inç (21.59 cm) bir alüminyum reflektör muhafaza ile kelepçe ışığı 40 W akkor ampul(Ek Şekil 5). NOT: Akkor ışık yetişkin aktivitesi ni ve oviposition uyarmak için gerekli radyant ısı sağlar.</li>
		<li>Işıklara bitişik izlenebilir bir bellek izleme termometresi yerleştirin ve sıcaklık sensörünü doğrudan bir kelepçe ışığı altında bulunan bir oviposition haznesinin üzerine dayanacak şekilde çalıştırın. NOT: Hedef sıcaklık aralığı 27.5 °C-29 °C arasındadır.</li>
		<li>Dağıtılan toplam ovipositional oda sayısına bağlı olarak gerektiğinde tamamlayıcı kelepçe ışıkları ekleyin.</li>
		<li>Kelepçe ışıklarını iki çıkışlı (30 dk zamanlanmış aralıklarla programlanabilir) programlanabilir 15 Amp 24 h kapalı tak-in mekanik zamanlayıcıya takın.</li>
		<li>Kelepçe ışığını 30 dakika aralıklarla (yani, 30 dk açık, 30 dk kapalı tekrarlanabilir bir döngü) açmak için zamanlayıcıyı ayarlayın. NOT: Bu ışık döngüsü yetişkin kelebek aktivitesi ve oviposition kısa karanlık dinlenme süreleri ardından teşvik etmek için aydınlatma tekrarlanabilir süreler sağlayarak yumurta üretimini en üst düzeye çıkarmak için yardımcı olur.</li>
		<li>Her bardakta pamuklu bezleri, yaklaşık her 2-3 saat veya gerektiğinde plastik bir sprey şişesi kullanarak düzenli olarak su ile q şırınga ve sis ile aromalı spor içeceği ile yenileyin. NOT: Bu, kelebeklerin istenilen şekilde serbest beslenmelerini sağlamak için yeterli yapay nektar ve nem sağlar. Bu nedenle, yaşam, çiçeklenme bitki materyali kolayca kullanılamadığı laboratuvar koşullarında hem yetişkin uzun ömürlülüğünü hem de oviposition verimliliğini artırır.</li>
		<li>Bardakları düzenli olarak izleyin ve gerektiğinde ev sahibi tesisi taze kesimlerle değiştirin.</li>
		<li>Yumurtalar yumurtadan çıkmaya başladığında veya yumurtaların yoğunluğu yüksek olduğunda, dişileri taze konaklı yeni bir bardağa taşıyın ve yeni setlerle larva protokolüne başlayın.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. Larva bakım ve bakımı
<ol><li>Larvalar için bardak monte etmek için adımları 2.3-2.6 tekrarlayın.</li>
	<li>Yumurtalar yumurtadan çıkmaya başladığında, yumurta ve yenidoğan larvaları ile konak bitki malzemesini yeni monte edilmiş bir bardağa taşıyın, kökü alttaki ikinci "X" ile yerleştirerek bitki sapına suda olmasını ve yaprakların bitişik taze konak kesimine dokunmasını sağlar.</li>
	<li>Larvalar gençken (yenidoğan-2 instar), ev sahibi bitki materyalinin tazeliği ve küf veya aşırı frass varlığı için günlük larva kaplarını kontrol edin. NOT: Larvalar gençken ev sahibi malzemenin günlük olarak çıkarılması önerilmez, çünkü bu durum taze konak malzemesinin taşınması ve/veya gereksiz atıkların taşınması nedeniyle organizma yaralanmasına neden olabilir.</li>
	<li>Ev sahibi malzeme solmuşsa veya kötü durumdaysa, taze konak malzemesinin başka bir kesimini bardağa yerleştirin, böylece mevcut yeşilliklere dokunuyor ve larvaların kendi başlarına yeni konakçıya taşınmasına izin verin.</li>
	<li>Larvalar3 instar ulaştıktan sonra, kağıt bardak değiştirin ve taze konak malzeme günlük ekleyin.</li>
	<li>Larvaları eski ana malzemeden veya bardak yüzeyinden yeni bardaktaki taze konak malzemesine taşımak için küçük bir deve tüyü suluboya boya fırçası kullanın.</li>
	<li>Eski ana malzemeyi boş dikdörtgen plastik gıda saklama kabına yerleştirin.</li>
	<li>Günlük 3.5-3.7 adımlarını tekrarlayın ve larvalı tüm bardaklar işlenene kadar.</li>
	<li>Tamamlandığında, gıda depolama kabında bitki atık üstüne taze konak malzeme küçük bir miktar ekleyin ve gevşek üstüne bir kapak yerleştirin. NOT: Bu, herhangi bir larvanın günlük işleme sırasında gözden kaçırılmaması durumunda bir koruma görevi görmektedir, çünkü tesis atıklarının üzerine yeni konak malzemesi üzerine sürünerek giderilirler ve ertesi gün çıkarılabilirler.</li>
	<li>Optimum larva aktivitesi ve gelişimi için 25 °C-28 °C arasında laboratuvar sıcaklığıaltında bardakları muhafaza edin (Ek Şekil 6). NOT: İç mekan koşullarında optimum yetiştirme sıcaklıklarına ulaşmak için, bardakları 40 W akkor ampule sahip alüminyum reflektörlü kelepçe ışıklarının altına yerleştirmek genellikle gereklidir. Daha sonra sıcaklıklar izlenebilir bellek izleme termometresi ve optimum yetiştirme koşullarına ulaşacak şekilde ayarlanan ışık yüksekliği kullanılarak aktif olarak izlenebilir.</li>
</ol>4. Yavru odasının oluşturulması
<ol><li>Eşit büyüklükte 3,8 cm x 3,8 cm kareler halinde tek bir yüz oluklu kağıt rulo kesin.</li>
	<li>2 ons net plastik porsiyon fincan içine bir kare yerleştirin.</li>
	<li>Bardağı berrak bir plastik bardak tepsisine yerleştirin(Ek Şekil 7).</li>
</ol>5. Yavru larvaların hazırlanması
<ol><li>Günlük koloni işleme sırasında pupate hazır olgun larvaları tanımlayın. NOT: Bu tür larvalar düzgün bir mat yeşilimsi-kahverengi dönecek, onların chevrons kaybetmek, ve sık sık ev sahibi dolaşmak.</li>
	<li>Yavaşça küçük bir deve saç suluboya fırça veya forceps ile her olgun larva kaldırmak ve her yavru odasına bir yerleştirin.</li>
	<li>Sıkıca yavru odası üzerinde net plastik kapak tutturun.</li>
	<li>5.1-5.3 adımlarını tekrarlayın, yavrup hazır tüm larvalar gerektiğinde yeni plastik tepsiler ekleyerek yavru lama odalarına aktarılır(Ek Şekil 8).</li>
</ol>6. Pupa bakımı
<ol><li>Her bir yavru oda tepsisi için, ilk yavrulama tarihini ve gerekli diğer ilgili bilgileri (örn. genetik hat, deneysel deneme, vb.) kaydedin.</li>
	<li>Tepsileri laboratuvar içinde güvenli bir yerde tarih ve yere göre düzenleyin (Ek Şekil 8).</li>
	<li>Yetişkin klopsiyon için günlük monitör tepsileri. NOT: Sıcaklık gibi laboratuvar koşulları gelişim süresini güçlü bir şekilde etkileyecektir.</li>
	<li>Erişkin klopasyondan önce (genellikle ilk yavrulamadan sonraki 10 gün içinde), kapakları tek tek yavru odalarından çıkarın ve tepsiyi 34,29 cm x 34,29 cm x 60,96 cm katlanabilir örgü açılır kafese yerleştirin (Ek Şekil 9). NOT: Oluklu kağıt karelerin olukları içinde güvenli bir şekilde bağlanmış pupalar başarılı yetişkin klozyonu kolaylaştırır (Ek Şekil 10).</li>
	<li>Sonraki esir nesil için adım 1.1'den tüm protokolü yineleyin.</li>
</ol>7. Olgunlaşmamış aşamaların gelişim süresini ve stadia sayısını değerlendirmek
<ol><li>Tek bir larvayı bir kesme mikroskobunun altına yerleştirin. Organizmanın yaralanmasını önlemek için larvaları dikkatlice hareket ettirmek ve izole etmek için küçük bir deve tüyü suluboya boya fırçası kullanın.</li>
	<li>Boya fırçasının tek bir saçını toksik olmayan parlak boyaya batırın(Malzeme Tablosu),ve larvanın arkasına (dorsum) dikkatlice küçük bir damla boya koyun. Larvanın arka plan rengi ve desen renginden göze çarpan bir boya rengi kullanın (Ek Şekil 11). Larva nın başına boya yerleştirmekten kaçının.</li>
	<li>Boya kurur sonra (yaklaşık 30 s kadar), taze terminal konak malzeme yaklaşık 1-3 küçük yaprakları içeren kendi 2 ons net plastik porsiyon fincan her bir larva yerleştirin ve fincan ve kapak üzerinde benzersiz bir tanımlayıcı yazmak(Ek Şekil 12).</li>
	
	<li>Her larvayı her gün dikkatlice kontrol edin. Yaprakları çıkarın ve beyaz yüzeye ayarlayın. Bardak, açık kapak inceleyin ve larva eksüle (dökme deriler) ve / veya baş kapsülvarlığı için bir diseksiyon mikroskop altında yaprakları inceleyin.</li>
	<li>Bir larva eksüresi bulunursa, bardaktan çıkarın ve ilgili fincan numarası ve tarih ile etiketlenmiş bir mikrosantrifüj tüp yerleştirin (aşağıdaki adımlar 8.1-8.6. bakınız).</li>
	<li>Her molt ve kayıt molt tarihleri sonra larvaları yeniden boya.</li>
	<li>Dijital kaliperler kullanarak her larva günlük toplam vücut uzunluğu (son karın segmentine baş) ölçün. Üç ölçüm alın ve tarih ve saatile birlikte üç ünün ortalamasını kaydedin. Erken instar larvaları için, doğru ölçümleri sağlamak için ölçüm yaparken büyüteç veya diseksiyon kapsamı kullanılmalıdır.</li>
	<li>Larvayı ilgili plastik porsiyon kabına geri döndürün.</li>
	<li>Gerektiği gibi taze ana malzeme ekleyin ve tüm frass ve eski ana enkaz kaldırın. Kalıp fincan bulunursa, atın ve yeni bir fincan kullanın. Yeni fincana doğru benzersiz tanımlayıcı numarasını yazın.</li>
	<li>Tüm larvalar son yıldızlarına ulaşana ve hazırlık aşamasına başlayana kadar 7.5-7.9 adımlarını tekrarlayın. Larvalar beslenmeyi bıraktığında, düzgün bir mat yeşilimsi-kahverengi rengi açın, chevronlarını kaybedin ve genellikle konaktan uzaklaşın, onları rahatsız etmeyi en aza indirin.</li>
	<li>Fincana küçük bir parça oluklu kağıt yerleştirin (bkz. adım 4.1).</li>
	<li>Her larva tamamen pupated sonra, yukarıdaki adım 7.8 olarak toplam uzunluğu ölçmek ve yavru tarihini kaydedin. Bu her bireyin son molt olacaktır.</li>
	<li>Pupa günlük kontrol ve kayıt klosion tarih ve cinsiyet her çıkan yetişkin kelebek.</li>
	<li>Dijital kaliperler kullanarak her kelebeğin kanat akoru uzunluğunu ölçün. Kelebekler hafifçe ölçüm için forseps ile tutulabilir. Kelebek kolayca ölçmek için çok aktif ise, geçici olarak 30 s veya daha az bir buzdolabına yerleştirin ve tekrar deneyin.</li>
</ol>8. Larva eksülelerini toplama
<ol><li>Bir larva eksülezi gözlendiğinde, bir mikrosantrifüj tüpünü 0.2 μl gliserinle doldurun. Kapağın üst kısmını ve yan tarafını larva numarası, molt tarihi ve baş kapsülü (H.C.) ile etiketlayın. NOT: Bazı lepidopteran larvalarının larvaları düzenli olarak eksülyalarını tüketirler ancak baş kapsülü kaolmalıdır.</li>
	<li>Larva exuvia ve açık bir plastik porsiyon fincan kapağı na bağlı kafa kapsülü yerleştirin ve etanol damla bir çift koyun.</li>
	<li>Bir diseksiyon mikroskop altında larva eksüle inceleyin net bir plastik kısmı fincan kapağına yerleştirerek ve üzerine etanol birkaç damla koyarak. Larva kafa kapsülü zaten eksüle ayrılırsa, sivri entomolojik forceps ucuna gliserin bir damla yerleştirin ve yavaşça gliserin baş kapsül dokunun. Kafa kapsülünü ilişkili mikrosantrifüj tüpüne yerleştirin.</li>
	<li>Baş kapsülü hala larva eksülene bağlıysa, baş kapsülü larva eksüleğinden ayırmak için sivri büşreler ve böcek iğnesi kullanın.</li>
	<li>Bir kez ayrılır, baş kapsül almak için gliserin tekniğini kullanın. Çok fazla etanol varsa, bazı kaldırmak için küçük bir kağıt havlu kullanabilirsiniz, ama yanlışlıkla baş kapsülü kaldırmak için dikkatli olun.</li>
	<li>Baş kapsülü gliserin dolu etiketli bir şişeye yerleştirin ve kapağı sıkıca kapatın.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Thomas, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Butterfly+communities+under+threat.">Butterfly communities under threat.</a> Science. 352 (6296), 216-218 (2016).</li><li>Swengel, S. R., Schlicht, D., Olsen, F., Swengel, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Declines+of+prairie+butterflies+in+the+Midwestern+USA.">Declines of prairie butterflies in the Midwestern USA.</a> Journal of Insect Conservation. 15 (1-2), 327-339 (2011).</li><li>Habel, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Butterfly+community+shifts+over+two+centuries.">Butterfly community shifts over two centuries.</a> Conservation Biology. 30 (4), 754-762 (2016).</li><li>Gilburn, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Are+neonicotinoid+insecticides+driving+declines+of+widespread+butterflies?.">Are neonicotinoid insecticides driving declines of widespread butterflies?.</a> Peer J. 3, e1402 (2015).</li><li>S&#225;nchez-Bayo, F., Wyckhuys, K. A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Worldwide+decline+of+the+entomofauna:+A+review+of+its+drivers.">Worldwide decline of the entomofauna: A review of its drivers.</a> Biological Conservation. 232, 8-27 (2019).</li><li>Daniels, J. C., Magdich, M., Tolson, P., Daniels, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Butterfly+recovery+planning:+Determining+how+to+contribute.">Butterfly recovery planning: Determining how to contribute.</a> Butterfly Conservation in North America: Efforts to Help Save Our Charismatic Microfauna. , 1-21 (2015).</li><li>. Environmental Conservation Online System. Listed Animals Available from: <a target="_blank" href="https://ecos.fws.gov/ecp">https://ecos.fws.gov/ecp</a> (2019)</li><li>Schultz, C. B., Russell, C., Wynn, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restoration,+reintroduction+and+captive+propagation+efforts+for+at-risk+butterflies:+a+review.">Restoration, reintroduction and captive propagation efforts for at-risk butterflies: a review.</a> Israel Journal of Ecology and Evolution. 54, 41-61 (2008).</li><li>Grow, S., Allard, R., Luke, D., Daniels, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+AZA-accredited+zoos+and+aquariums+in+butterfly+conservation.">The role of AZA-accredited zoos and aquariums in butterfly conservation.</a> Butterfly Conservation in North America: Efforts to Help Save Our Charismatic Microfauna. , 23-34 (2015).</li><li>Crone, E. E., Pickering, D., Schultz, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Can+captive+rearing+promote+recovery+of+endangered+butterflies?+An+assessment+in+the+face+of+uncertainty.">Can captive rearing promote recovery of endangered butterflies? An assessment in the face of uncertainty.</a> Biological Conservation. 139, 103-112 (2007).</li><li>Sanchez, S. J., Daniels, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+butterfly+conservation+initiative:+Developing+a+new+conservation+vision+through+compound+eyes.">The butterfly conservation initiative: Developing a new conservation vision through compound eyes.</a> News of the Lepidopterists' Society. 49 (3), 75-77 (2007).</li><li>Wardlaw, J. C., Elmes, G. W., Thomas, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Techniques+for+studying+Maculinea+butterflies:+I.+Rearing+Maculinea+caterpillars+with+Myrmica+ants+in+the+laboratory.">Techniques for studying Maculinea butterflies: I. Rearing Maculinea caterpillars with Myrmica ants in the laboratory.</a> Journal of Insect Conservation. 2 (1), 79-84 (1998).</li><li>Mattooni, R., Longcore, T., Krenova, Z., Lipman, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mass+rearing+the+endangered+Palos+Verdes+blue+butterfly+(Glaucopsyche+lygdamus+palosverdesensis:Lycaenidae).">Mass rearing the endangered Palos Verdes blue butterfly (Glaucopsyche lygdamus palosverdesensis:Lycaenidae).</a> Journal of Research on the Lepidoptera. 37, 55-67 (1998).</li><li>Pearce-Kelly, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+captive+rearing+of+threatened+Orthoptera:+a+comparison+of+the+conservation+potential+and+practical+considerations+of+two+species'+breeding+programmes+at+the+Zoological+Society+of+London.">The captive rearing of threatened Orthoptera: a comparison of the conservation potential and practical considerations of two species' breeding programmes at the Zoological Society of London.</a> Journal of Insect Conservation. 2 (3-4), 201-210 (1998).</li><li>Wells, C. N., Edwards, L., Hawkins, R., Smith, L., Tonkyn, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rearing+method+for+Agrynnis+(Speyeria)+diana+(Lepidoptera:+Nymphalidae)+that+avoids+diapause.">A rearing method for Agrynnis (Speyeria) diana (Lepidoptera: Nymphalidae) that avoids diapause.</a> Psyche. , 1-6 (2011).</li><li>Grosboll, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Captive+Rearing+the+Endangered+Mardon+Skipper+(Polites+mardon)+and+Taylor's+Checkerspot+(Euphydryas+editha+taylori)+Butterflies:+Initial+Results+(Lepidoptera,+Nymphalidae).">Captive Rearing the Endangered Mardon Skipper (Polites mardon) and Taylor's Checkerspot (Euphydryas editha taylori) Butterflies: Initial Results (Lepidoptera, Nymphalidae).</a> Proceedings of the species at risk, pathways to recovery conference. , 1-6 (2004).</li><li>Barclay, E., Arnold, M., Andersen, M., Shepherdson, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Husbandry manual: Taylor's checkerspot (Euphydryas editha taylori). , (2009).</li><li>Johnson, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Captive Rearing of the Laguna Mountains Skipper (Pyrgus ruralis laguanae): Final Report. , (2010).</li><li>Linders, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Captive+rearing+and+translocation+of+Taylor's+checkerspot+in+South+Puget+Sound:+2011-2012.">Captive rearing and translocation of Taylor's checkerspot in South Puget Sound: 2011-2012.</a> 2012 Annual Progress Report to the ACUB Technical Review Committee. , (2012).</li><li>Linders, M., Lewis, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Captive+rearing+and+translocation+of+Taylor's+checkerspot+butterfly+(Euphydryas+editha+taylori.):+South+Puget+Sound,+Washington,+2012–2013.">Captive rearing and translocation of Taylor's checkerspot butterfly (Euphydryas editha taylori.): South Puget Sound, Washington, 2012–2013.</a> 2013 Annual Report to the US Fish and Wildlife Service (Cooperative Agreement F12ACI00835), Joint Base Lewis-McChord Fish and Wildlife Program and JBLM-ACUB Technical Review Committee. , (2013).</li><li>Department of Conservation and Research, Toledo Zoo. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Propagation Handbook for the Karner Blue Butterfly Lycaeides melissa samuelis. , (2006).</li><li>Johnson, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Captive+Rearing+of+Lange's+Metalmark+Butterfly,+2011-2015.">Captive Rearing of Lange's Metalmark Butterfly, 2011-2015.</a> United States Fish and Wildlife Service, CVPIA Habitat Restoration Program (F11AP00168). , (2016).</li><li>Andersen, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Oregon Silverspot Butterfly Husbandry Manual. , (2010).</li><li>Washington Department of Fish and Wildlife. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Threatened+and+Endangered+Wildlife+in+Washington:+2012+Annual+Report.">Threatened and Endangered Wildlife in Washington: 2012 Annual Report.</a> Listing and Recovery Section, Wildlife Program, Washington Department of Fish and Wildlife. , (2013).</li><li>McGowan, P. J. K., Traylor-Holzer, K., Leus, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IUCN+guidelines+for+determining+how+ex+situ+management+should+be+used+in+species+conservation.">IUCN guidelines for determining how ex situ management should be used in species conservation.</a> Conservation Letters. 10 (3), 361-366 (2017).</li><li>Pearce-Kelly, P., Stuart, A. J. A., New, T. R., Lewis, O. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+conservation+value+of+insect+breeding+programmes:+Rationale,+evaluation+tools+and+example+programme+case+studies.">The conservation value of insect breeding programmes: Rationale, evaluation tools and example programme case studies.</a> Insect Conservation Biology: Proceedings of the Royal Entomological Society's 23nd Symposium. , 57-75 (2007).</li><li>U.S. Fish and Wildlife Service. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Policy+Regarding+Controlled+Propagation+of+Species+Listed+Under+the+Endangered+Species+Act.">Policy Regarding Controlled Propagation of Species Listed Under the Endangered Species Act.</a> United States Federal Register. 65 (183), 56916-56922 (2000).</li><li>IUCN/SSC. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+on+the+use+of+ex+situ+management+for+species+conservation.+Version+2.0.">Guidelines on the use of ex situ management for species conservation. Version 2.0.</a> IUCN Species Survival Commission. , (2014).</li><li>Sutherland, W. J., Pullin, A. S., Dolman, P. M., Knight, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+need+for+evidence-based+conservation.">The need for evidence-based conservation.</a> Trends in Ecology &amp; Evolution. 19 (6), 305-308 (2004).</li><li>Daniels, J. C., Nordmeyer, C., Runquist, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+standards+for+at-risk+butterfly+translocations.">Improving standards for at-risk butterfly translocations.</a> Diversity. 10, 67 (2018).</li><li>Saarinen, E. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Population genetics of the endangered Miami blue butterfly Cyclargus thomasi bethunebakeri.: implications for conservation. , (2009).</li><li>R Core Team. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=R+A+Language+and+Environment+for+Statistical+Computing.">R A Language and Environment for Statistical Computing.</a> R Foundation for Statistical Computing. , (2016).</li><li>Schultz, C. B., Dzurisin, J. D., Russell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Captive+rearing+of+Puget+blue+butterflies+(Icaricia+icarioides+blackmorei)+and+implications+for+conservation.">Captive rearing of Puget blue butterflies (Icaricia icarioides blackmorei) and implications for conservation.</a> Journal of Insect Conservation. 13 (3), 309-313 (2009).</li><li>Frankham, R., Loebel, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+problems+in+conservation+genetics+using+captive+Drosophila+populations:+Rapid+genetic+adaptation+to+captivity.">Modeling problems in conservation genetics using captive Drosophila populations: Rapid genetic adaptation to captivity.</a> Zoo Biology. 11 (5), 333-342 (1992).</li></ol>

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Burada, risk altındaki kelebeklerin seri üretimi için bu kanıtlanmış ex situ koruma ıslah protokolünün etkinliğini ve temel davranışsal, yaşam öyküsü veya ekolojik veri boşluklarını gidermeye yardımcı olmak için bilimsel araştırmalara nasıl uyarlanabileceğini gösteriyoruz. Ortalama toplam gelişim süresinin (yumurtadan yetişkine) daha iyi anlaşılması, her yaşam evresinde ortalama süre ve örneğin, ortalama üreme için en uygun sıcaklık, protokolün geliştirilmesine ve genel programın başarısının artırılmasına yardımcı olmak için kullanılmıştır. Mevcut protokollerin büyük çoğunluğu sadece organizma yetiştiriciliği yöntemlerini ayrıntılarıyla anlatır ve eski situ yöntemlerini bilgilendirmek ve potansiyel olarak uyarlamak için veri toplama, bilimsel araştırma veya bu tür sonuçların kullanımını tartışmaz.
Bu protokol günlük organizma yetiştiriciliği gerektirir. Organizma sağlığı ve üretkenliği, temiz yetiştirme koşulları, aşırı kalabalık organizma eksikliği ve yüksek kaliteli larva konak bitki materyalinin kullanılabilirliği ile en üst düzeye çıkar. Çoğunlukla, tek kullanımlık yetiştirme malzemeleri ve kaplar (örneğin, kağıt ve plastik bardak) kullanmak ve genellikle düzenli olarak değiştirin, genellikle günlük, ve malzeme yeniden asla. Bu hem uygun maliyetlidir hem de malzemelerin daha fazla emek yoğun sanitasyon ihtiyacını en aza indirir. Ancak entomolojik forsepsler, suluboya boya fırçaları ve küçük açılır uçuş kafesleri gibi yaygın olarak kullanılan aletlerin yanı sıra masa üstü ve laboratuvar tezgahı üstleri gibi tüm yetiştirme yüzeyleri %5 çamaşır suyu çözeltisi kullanılarak düzenli olarak dezenfekte edilmektedir. Sanitasyon tam programı son derece kullanım sıklığı, organizma fenolojisi ve diğer değişkenlere bağlıdır ve her ex situ programının özel ihtiyaçlarına göre uyarlanmalıdır. Ayrıca beyaz kasap kağıt tüm yetiştirme yüzeyleri kapsayacak şekilde yararlı olduğunu bulabilirsiniz. Bu ucuz, kolayca dağıtılabilir temiz substrat sağlar, ve beyaz arka plan rengi herhangi bir sokak organizmaların görülmesini kolaylaştırır. Günlük hayvancılık için, tüm laboratuvar personeli kontaminasyonu en aza indirmek ve bitki veya organizma işleme kaynaklanan herhangi bir potansiyel cilt tahrişine karşı personel korumak için her zaman tek kullanımlık laboratuvar muayene eldivengiymek gerekir. Herhangi bir laboratuvar personeli topikal pire tedavileri gerektiren ev hayvanları varsa bu özellikle önemlidir. Hatta az miktarda aktif madde kalıntısı bile esir çiftlik hayvanları için tehlikeli olabilir.
Ayrıca, dikkat organizmanın aşırı kalabalık en aza indirmek için alınmalıdır. Larvaların aşırı kalabalık hızla azaltılmış organizma sağlığı ve hatta bazı takvalarda yamyamlık yol açabilir, özellikle Lycaenidae. Larvaların düzenli olarak ayrıştırılması, yetiştirme kapları içindeki sayıları azaltmak ve/veya protokolün yaşam öyküsü bölümünde açıklandığı gibi bireysel larvaları izole etmek gerekebilir. Konteyner başına ideal sayılar, belirli takson ve mevcut bütçe, laboratuvar tesisleri ve toplam hayvancılık personeli sayısı gibi çeşitli ex situ programı kısıtlamalarına bağlı olarak önemli ölçüde değişebilir. Benzer şekilde, kaplar arasındaki organizma hareketinin potansiyelini en aza indirmek için larvaları barındıran bardaklar arasında yeterli boşluk bırakmanızı öneririz. Son olarak, daha büyük tutsak popülasyonlar için, bir veya daha fazla laboratuvar tesisi arasında stok ayırmak şiddetle tavsiye edilir. Bu koruma stratejisi, hastalık veya diğer öngörülemeyen etkiler nedeniyle tüm nüfusun yıkıcı kaybını en aza indirmeye yardımcı olabilir.
Larva ev sahibi bitki kalitesi ve kullanılabilirliği hayvancılık üretimini yönlendirir ve hem larva gelişim oranlarını hem de genel nüfus sağlığını güçlü bir şekilde etkiler. Yine de, yayınlanan çok az rapor veya çalışma bu sahne arkası gereksinimini vurgular veya en iyi kreş uygulamalarını tartışır. Başarılı ex situ programı planlaması yeterli tesis miktarları, üretim ve bakım için hesap gerekir. Birçok larva da gerektirir veya belirli bitki parçaları tercih (örneğin, terminal yeni büyüme, çiçek tomurcukları ve çiçek, meyve, vb), uygun bitki fenolojisi sağlamak için etkili evreleme gereklidir.
Ek hususlar uygun demografik ve genetik yönetimi ve esaret herhangi bir potansiyel olumsuz etkilerinin en aza inme içerir. Genetik bir yönetim planı nın geliştirilmesini öneriyoruz. Bu, düzenli olarak yeni genetik materyal infüzyonu dahil etmek, çeşitliliği en üst düzeye çıkarmak ve yakın üremeyi önlemek, anahtar organizma fitness değişkenlerini periyodik olarak değerlendirmek ve genetikleri bir düzeyde izleyerek, günümüze kadar gelen popülasyonların karşılaştırılmasını sağlamak ve tutsak stok sağlığını kontrol etmek için stratejiler içerebilir. Esir bireylerin özelliklerinin kurucu popülasyonlardan bireylerle periyodik olarak karşılaştırılması da34,35garanti dir.
Bu protokoller kanıtlanmış en iyi uygulamaları temsil eder. Yöntemlerimizi doğrudan uygulayabilen veya kendi çalışmalarına adapte edebilen ve risk altındaki kelebek veya böcek koruma ve kurtarma programlarına doğrudan uygulayabilen veya uyarlayabilen çeşitli araştırmacılar ve koruma uygulayıcıları için yararlı olmalıdırlar. Belirli özetlenen esir ıslah protokolü büyük olasılıkla diğer Lycaenidae, ilgili takson veya daha küçük boyutlu takson odaklı programlar için geçerlidir. Bununla birlikte, başarılı kur ve çiftleşme, yapay nektar ile yetişkin bakımı, yontmayı maksimize etme ve genel larva bakımı gibi çok sayıda bileşen daha geniş bir şekilde uygulanabilir veya daha geniş bir diziye uyarlanabilir. takson. Daha önce de belirtildiği gibi, protokol esnekliği vurgulanmalıdır, diğer yerleşik metodolojilere erişim değerli içgörü ve adaptasyon ve yenilik için uygun bir çıkış noktası sağlamaya yardımcı olabilir. Larva gelişim süresi ve larva stadia sayısı gibi çeşitli yaşam öyküsü özelliklerini değerlendirmek için sunulan yöntemler, diğer koruma ıslah programlarına ve risk altındaki taksonaya geniş uygulanabilirliğe sahiptir. Başkalarını, mümkün olduğunda önemli ekolojik veri açıklarını gidermeye ve incelenmiş protokolleri ve program sonuçlarını yayınlamaya yardımcı olmaya teşvik ediyoruz.

Çalışmaların büyüyen bir liste kelebek popülasyonları1yaygın ve ciddi küresel düşüşler gösterir1 ,2,3,4,5. Bu risk altındaki türlerin büyük çoğunluğu içerir. Bu tür düşüşleri azaltmak için tasarlanmış koruma programları genellikle nüfus izleme, habitat yönetimi ve restorasyon, bilimsel araştırma, esiryayılma ve organizma translokasyonu 6 dahil olmak üzere stratejilerin bir karışımını kullanır. Sadece ABD ve kendi topraklarında, toplam 30 kelebek takson Tehlike Altındaki Türler Yasası (ESA) altında tehdit veya tehlike altında olarak listelenir, bunların 21 taslak veya nihai kurtarma planları onayladı sahip. Bu tür takson için, tanımlanan kurtarma stratejilerinin yarısından fazlası esir yayılımı önerir veya esir yayılımının7olarak değerlendirilmesi gerektiğini belirtir. Kelebekler için ex situ koruma çabalarının kullanımı son yıllarda önemli ölçüde büyüdü8,9, ve kurtarma çabalarına yardımcı olmak için kritik bir araç olma potansiyeline sahiptir10. Çok sayıda kurum, kuruluş ve ajans şu anda en az 11 ESA listelenen kelebek takson (yani, Cyclargus thomasi bethunebakeri, Euphydryas editha quino, Euphydryas editha taylori, ex situ çabaları ile ilgilidir, Heraclides aristodemus, Hesperia dacotae, Lycaeides melissa samuelis, Oarisma poweshiek, Pyrgus ruralis lagunae ve Speryeria zerene hippolyta)ve diğer bazı risk altındaki takson (örneğin, Callophrys irus, Euphydryas phaeton, Speyeria idalia, ve Eumaeus atala)11. Sağlam ve başarılı çabaların sayısına rağmen, programlar arasında ve koruma uygulayıcıları arasında fikir alışverişi, veri, etkili metodolojiler ve sonuçlar içeren düzenli iletişim eksikliği devam etmektedir. Bu tür bilgi paylaşımı, çabanın tekrarını en aza indirmeye yardımcı olduğu, genel en iyi uygulamaları geliştirdiği ve koruma etkisini artıracağı için önemlidir. Birkaç yayınlanan baş-başlangıç, esir yetiştirme, ıslah ıslahı, ya da hayvancılık protokolleri risk altındaki kelebek takson için hazır, ve bu genellikle yeterli anlatı detay ve / veya illüstrasyon lar yoksundur. Bunlar genellikle sınırlı adım adım talimatlar ve eşlik eden görüntüler ile çoğunlukla özet ayrıntıları sağlamak, çoğaltma zor veya diğer takson uygulama zor12,13,14,15değerlendirmek için yapma . Mevcut protokollerin çoğu bir şekilde sınırlıdır: bunlar sadece gri literatürde, ya da farklı ayrıntı düzeylerinde, yayın çağında veya sempozyum bildirilerinde bileşen parçaları olarak, ajans/funder raporları veya şirket içi kılavuzlar16,17,18,19,20,21,22,23,24.
En koruma programları için, esir yayılımı öncelikle yeniden giriş, takviye (yani, büyütme) ve giriş25,26kapsayan koruma translokasyon, desteklemek için yapılır. Bu tür faaliyetler, listelenen türlerin, alt türlerin veya popülasyonların yok olmasını önlemeye yardımcı olmak amacıyla genel kurtarma stratejisinin bir bileşeni olarak stratejik olarak uygulanması amaçlanmıştır. Ancak, bu tür ex situ programları hizmet edebilir birkaç diğer potansiyel rollerden biri olduğu unutulmamalıdır. Bunlar aynı zamanda bir sigorta (yani, refugia) nüfus, geçici organizma kurtarma, kurtarma ile ilgili araştırma ve / veya eğitim destekleyen ve koruma ile ilgili eğitim ve bilinçlendirme çabaları teşvik korumak içerebilir27,28. Ex situ programlarının tek bir tanımlanmış hedefi veya birkaç tane karışımı olup olmadığına bakılmaksızın, koruma uygulayıcıları mümkün olduğunda önemli bilgi boşluklarını doldurmak için veri toplama fırsatlarını en üst düzeye çıkarmalıdır. Risk altındaki taksonların büyük çoğunluğu genellikle önemli vahşi nüfus düşüşlerinden önce kötü incelenmiştir, çünkü bu özellikle önemlidir. Ortaya çıkan gelişmiş bilgi odak takson çeşitli davranışsal, ekolojik, ya da yaşam öyküsü yönleri elde etkili türlerin korunması ve yönetimi29ilerlemeye yardımcı olmak için hizmet verebilir.
Burada, daha büyük bir koruma ve kurtarma programının bir parçası olarak federal tehlike altındaki Miami mavi kelebeği(Cyclargus thomasi bethunebakeri)(Ek Şekil 1) için geliştirilen esir yayılma protokolünü ayrıntılı olarak açıklıyoruz. Bu durumda, esir yayılma programı üç özel tanımlanmış rol hizmet vermektedir: 1) bir sigorta popülasyonu mevcut yabani nüfus kaybedilmeli, 2) kurtarma ve / veya yönetim bilgilendirmek yardımcı olabilir tanımlanmış ekolojik ve yaşam öyküsü bilgi boşlukları doldurmak için tasarlanmış bir araştırma popülasyonu, ve 3) takson tarihsel aralığı içinde sitelere koruma translokasyon için uygun organizmalar üretmek için. Ortaya çıkan protokol iyi incelenmiş ve kanıtlanmıştır, on yılı aşkın bir süredir kullanılmaktadır ve geliştirilmiştir. Sonuç olarak, açıklanan teknik ve metodolojilerin, özellikle Lycaenidae veya ilgili takson içeren diğer ex situ risk altındaki kelebek programlarına uygulanabilen veya kolayca uyarlanabilen uygulanabilir bir modeli temsil ettiğini düşünüyoruz. Açıklanan protokolün diğerlerinden daha üstün olduğunu önermesek de, üretkenliği, bakımı veya verimliliği artırmaya yardımcı olmak için bazı yöntemleri daha geniş anlamda uygulama fırsatları olduğunu düşünüyoruz. Bu bizim ıslahı çok sınırlı alan ile kapalı laboratuvar koşullarında yapılır gibi özellikle doğrudur, Euphydryas editha taylori ve Speryeria zerene hippolytaiçeren koruma programlarına benzer17,23. Çok sayıda diğer protokoller genellikle oviposition veya larva yetiştirme için saksı malzeme kullanmak, bazen yırtıcı kontrolü ile ilgili artan karmaşıklıklara yol açabilir, çevresel kontrol (yani, nem, sıcaklık), hayvancılık izleme, veri toplama, bitki haşere sorunları, ve alan birkaçisim 21,22. Son olarak, sunulan protokol tutsak Üreme yöntemleri özetliyor. Risk altındaki diğer pek çok kelebek koruma programı, bu farklılıkları yansıtan temsili protokollerle baş başını çalıştırma yı veya esir yetiştirmeyi içerir. Genellikle küçük olmakla birlikte, bunun diğer programların gözden geçirilmesi için mevcut bilgi havuzunu genişletmeye yardımcı olduğunu düşünüyoruz. Çoğu ex situ programları nadir ve genellikle kötü çalışılan takson kurtarma kolaylaştırmak için öncü çabaları temsil çünkü bu, önemlidir. Mevcut protokoller, değerli bilgiler sağlamaya, çabanın çoğaltılmasını azaltmaya ve yeniliği teşvik etmeye yardımcı olmak için mükemmel bir başlangıç noktası olarak hizmet verebilir. "Kelebek davranışları, yaşam öyküsü özellikleri ve ekolojik gereksinimleri n "program tesisleri, bütçeler, uygulayıcı uzmanlık sık sık belirgin farklılıklar ile birlikte" ve diğer doğal farklılıklar, tek bir metodoloji güven, hatta yakından ilgili takson için, geniş interspesifik çeşitlilik sayesinde genellikle sınırlayıcı ve yersiz30. Belirli takson veya programların ihtiyaçlarına uygun yeni protokolleri rafine etme veya geliştirme esnekliği başarı için gereklidir ve bu nedenle vurgulanmalıdır. Ayrıca larva yıldız sayısı, bireysel gelişim aşamalarının süresi, toplam gelişim süresi ve larva ve pupal uzunluğu dahil olmak üzere tutsak koşullar altında organizma gelişimi ölçümleri toplamak için laboratuvar teknikleri açıklar. Bu teknikler, lepidoptera'nın eski situ protokollerini geliştirmek veya alan verilerini bilgilendirmek için kullanılabilecek yaşam öyküsü çalışmaları için geniş uygulanabilirliğe sahiptir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>12 oz plain white paper cups (Karat)</td>
			<td>Lollicup</td>
			<td>C-KC16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15-Amp 2-Outlet Mechanical Residential Plug-in Countdown Lighting Timer</td>
			<td>Lowes</td>
			<td>UTTNI2423</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1ml sub-Q syringes (0.45 mm x 16 mm)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-829-10F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 oz clear plastic portion cup lids</td>
			<td>Party City</td>
			<td>#791091</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 oz Clear Plastic Portion Cups</td>
			<td>Party City</td>
			<td>#791088</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>34.29 cm x 34.29 cm x 60.96 cm collapsible mesh popup rearing cage</td>
			<td>Bioquip</td>
			<td>1466BV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8.5&#34; 1-Watt Incandescent Clamped Work Light</td>
			<td>Lowes</td>
			<td>PTC301L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adoric Electronic Digital Caliper</td>
			<td>Amazon.com</td>
			<td>B07QX2SK2F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Big Kid&#39;s Choice Arts &#38; Crafts Brush Set-12/Pkg, assorted sizes</td>
			<td>Walmart</td>
			<td>#10965135</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clear Plastic Cup Tray</td>
			<td>Frontier Scientific Services</td>
			<td>AG_9040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fisher Scientific traceable memory monitoring thermometer</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>15-077-8D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps, Straight Points, Swiss Style #4, Stainless</td>
			<td>BioQuip</td>
			<td>4531</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Humco Glycerin 6 oz</td>
			<td>Walmart</td>
			<td>#303951037966</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luminous Paint Kit, Blue, Red, Yellow, 4 Dram</td>
			<td>Bioquip</td>
			<td>1166A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Melon flavored Gatorade Fierce Thirst Quencher or fruit punch flavored Gatorade Thirst Quencher sports drink</td>
			<td>Walmart</td>
			<td>#568456137</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neoteck Digital 2 in 1 Hygrometer-Thermometer</td>
			<td>Amazon.com</td>
			<td>NTK026</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Olympus 0.6 ml Microtubes, Clear, Polypropylene, Nonsterile</td>
			<td>Amazon.com</td>
			<td>24-272C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic Tank Sprayer</td>
			<td>Lowes</td>
			<td>#5318</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Q-tips Cotton swabs</td>
			<td>Walmart</td>
			<td>#551398298</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rectangular plastic tupperware container with lid (Rubbermaid)</td>
			<td>Walmart</td>
			<td>#554320171</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Showgard 903 Stamp Tongs, 4 5/8 inch Spade Tip</td>
			<td>Amazon.com</td>
			<td>#787793151378</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Single face corrugated paper roll</td>
			<td>Amazon.com</td>
			<td>BXSF12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Snap blade utility knife</td>
			<td>OLFA</td>
			<td>#5023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Solo 9 oz plastic cups</td>
			<td>Solo</td>
			<td>SQ950</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thorton Plastics 50 dram clear plastic snap cap vial (6.25 oz.)</td>
			<td>Thorton Plastics</td>
			<td>#50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tulle Spool 9 inch x 150 feet - Black</td>
			<td>Jo Ann Fabrics</td>
			<td>#16029696</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zep 32 oz Plastic Spray Bottle</td>
			<td>Lowes</td>
			<td>HDPRO36</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

at-risk butterfly captive propagation programs to enhance life history knowledge and effective ex situ conservation techniques

Risk altındaki kelebekler için ex situ en iyi uygulamalar bilgisinin geliştirilmesi başarılı koruma ve kurtarma programı sonuçları üretmek için önemlidir. Bu tür tutsak popülasyonlar üzerinde yapılan araştırmalar, hedef taksonun davranışı, yaşam geçmişi ve ekolojisi hakkındaki önemli bilgi boşluklarını gidermek için değerli veriler de sağlayabilir. Biz federal tehlike altındaki Cyclargus thomasi bethunebakeri diğer risk kelebek ex situ programları için bir model olarak kullanılabilir esir yayılması için bir protokol tarif, özellikle aile Lycaenidae. Ayrıca ex situ metodolojileri bilgilendirmek için yararlı olabilir yanı sıra diğer lepidopteralaboratuvar çalışmaları için uyarlanmış çeşitli yaşam öyküsü ölçümleri kayıt için basit ve basit bir protokol sağlar.

Watch this Scientific Journal Video about At-Risk Butterfly Captive Propagation Programs to Enhance Life History Knowledge and Effective Ex Situ Conservation Techniques at JoVE.com

At-Risk Butterfly Captive Propagation Programs to Enhance Life History Knowledge and Effective Ex Situ Conservation Techniques

Burada, 1) federal tehlike altındaki Miami mavi kelebek laboratuvar esir yayılımı(Cyclargus thomasi bethunebakeri),ve 2) olgunlaşmamış gelişim süresi ve larva stadia sayısı gibi temel yaşam öyküsü bilgileri değerlendirmek için protokoller salıyoruz. Her iki yöntem de diğer ex situ koruma programları ile kullanılmak üzere uyarlanabilir.

Risk Kelebek Esir Yayılımı Programları Yaşam Tarihi Bilgi ve Etkili Ex Situ Koruma Teknikleri geliştirmek için

Improving knowledge of ex situ best practices for at-risk butterflies is important for generating successful conservation and recovery program outcomes. ...

Bu yöntem, risk altındaki kelebeklerin laboratuvar seri üretimi için kullanılan daha büyük bir ex situ koruma ıslah ıprotokolünün bir kısmını temsil eder. Temel hayvancılık yöntemlerinin temel davranışsal, yaşam öyküsü veya ekolojik veri boşluklarını gidermeye yardımcı olmak için bilimsel araştırmalara nasıl uyarlanabileceğini göstermektedir. Larva gelişim süresini ve larva stadia sayısını değerlendirmek için sunulan özel yöntemler, diğer kelebek koruma ıslahı veya araştırma programlarına geniş ölçüde uygulanabilirliğe sahiptir.Bu teknik, nesli tükenmekte olan bir kelebeğin yaşam öyküsü ölçümlerini belgelemek için etkili bir yaklaşımdır, örneğin larva yıldız sayısı, gelişim evrelerinin süresi ve tüm yaşam evrelerinin büyüklüğü gibi. Kısa bir zaman diliminde veri toplarken özellikle önemli olan laboratuvarda verimlilik ve verimliliğin arttırılması için protokolümüzü kolaylaştırdık. Kelebek larvaları özellikle neonat larvaları olarak çok küçük olduğundan, bu yöntem organizmanın zarar görmemesi için el becerisi ve detaylara dikkat gerektirir.Prosedürü gösteren Jacob Hornfeldt, bizim laboratuvar bir lisans olacaktır. Başlamak için, dikkatle hareket ve tek bir larva izole etmek ve bir petri kabında bir diseksiyon mikroskobu altında yerleştirmek için küçük bir deve saç suluboya boya fırçası kullanın. Böcek kaleminin tek bir saçını larvanınkine zıt renkteki toksik olmayan parlak boyaya batırın ve larvanın arkasına küçük bir damla boya koyun.30 saniye sonra boya kurur. Küçük bir deve saç suluboya boya fırçası yardımıyla, taze terminal konak malzeme yaklaşık bir ila üç küçük yaprakları içeren kendi iki ons net plastik porsiyon fincan her bir larva yerleştirin ve fincan ve kapak üzerinde benzersiz bir tanımlayıcı yazmak. Kapağı sıkıca sabitle.Her larvayı her gün dikkatlice kontrol edin. Forceps ile, yaprakları çıkarın ve beyaz bir yüzeye yerleştirin. Bardağı ve şeffaf kapağı inceleyin.Larva eksülonu ve baş kapsüllerinin varlığı için bir diseksiyon mikroskobu altında yaprakları inceleyin. Bir larva eksülegözlendiğinde, bardaktan çıkarın ve gliserin 0.2 mikrolitre ile dolu bir şişe yerleştirin. Kapağın üst kısmını ve yan tarafını larva numarası, molt tarihi ve baş kapsülü ile etiketlayın.Larva exuvia ve açık bir plastik porsiyon fincan kapağı na bağlı baş kapsülü yerleştirin ve etanol damla bir çift koyun. Bir diseksiyon mikroskobu altında larva eksülesini gözlemleyin. Larva kafa kapsülü zaten eksüleden ayrılmışsa, sivri entimolojik truçların ucuna bir damla gliserin yerleştirin ve baş kapsülüne yavaşça gliserine dokunun.Kafa kapsülünü ilişkili mikrosantrifüj tüpüne yerleştirin. Baş kapsülü hala larva eksülene bağlıysa, baş kapsülü larva eksüleğinden ayırmak için sivri büşreler ve böcek iğnesi kullanın. Ayrıldıktan sonra baş kapsülü almak için gliserin tekniğini kullanın.Her molt sonra, larvalar yeniden boya ve molt tarihleri kaydedin. Her gün, her larva son karın segmentine baş toplam vücut uzunluğu ölçmek için dijital kalipers kullanın. Üç ölçüm alın ve tarih ve saat ile birlikte üç ortalama kaydedin.Hiçbir kalıp olduğundan emin olmak için ilgili plastik fincan kontrol edin. Tüm frass ve eski konak enkaz kaldırın ve gerektiği gibi taze ana malzeme ekleyin. Larvayı bardağa geri ver.Optimum larva aktivitesi ve gelişimi için bardakları laboratuvar sıcaklığında 27 ile 32 santigrat derece arasında koruyun. Tüm larvalar son yıldızulaşıncaya ve hazırlık aşamasına başlayana kadar durumu koruyun. Larvalar beslenmeyi bıraktığında, düzgün bir mat yeşilimsi-kahverengi rengi açın, chevronlarını kaybedin ve genellikle ev sahibinden uzaklaşın, fincana küçük bir parça oluklu kağıt koyun.Bir kez her larva tamamen pupated toplam uzunluğu ölçmek ve yavru tarihini kaydedin. Bu her bireyin son molt olduğunu. Her gün pupa'yı kontrol et.Onlar kelebekler haline büyüdüklerinde, yetişkin kelebek tutmak ve yavaşça üst kanat yüzey rengini ortaya çıkarmak için kanatları darbe forseps kullanın. Erkeklerin kanatlarının her yerinde mavi var gibi görünüyor ve dişiler maviyi ve arka kanatta turuncu bir göz lekesini azalttılar. Ortaya çıkan her yetişkin kelebeğin künye tarihini ve cinsiyetini kaydedin.Her kelebeğin kanat akoru uzunluğunu ölçmek için kelebeği hafifçe forsepsle tutun ve dijital kaliperler kullanın. Kelebek ölçülmeyecek kadar aktif olması durumunda 30 saniye veya daha kısa bir süre buzdolabında yerleştirin ve tekrar deneyin. Bu protokol, en iyi laboratuvar ıslahı ve hayvancılık uygulamalarını geliştirmek için önemli olan çok sayıda önemli veri açığı üzerinde yönlendirilmiş araştırma ve kapsamlı veri toplama olanağı sağlamıştır.Burada bir kişi için toplanan dört kafa kapsülleri vardır. Larvaların çoğunda her olgunlaşmamış yaşam evresinde beş günden az dört molvardı. Dişiler genellikle tüm olgunlaşmamış evrelerde erkeklere göre daha hızlı gelişirler.Bu 0.625 p değeri ile önemli bir etkisi olmamasına rağmen. Bu adım özellikle larvalar yeni yumurtadan çıkan neonatlar olduğunda çok titizdir. Boyanın tırtılın sırtındaki uygun yere uygulandığından emin olmak için bu adımda mikroskop kullanmayı unutmamak önemlidir.Bu yöntemler, gelişimsel aşama sağkalım oranlarını, birden fazla larva konaklarında diferansiyel performansı değerlendirmeye yardımcı olmak ve araştırmacıların alandaki verileri daha iyi yorumlamalarına yardımcı olmak için genişletilebilir. Bu basit yöntem, biraz planlama temel organizma yetiştiriciliği uygulamaları ile kolayca bilimsel araştırma için adapte edilebilir nasıl göstermektedir. Sonuçlar daha sonra, başarıyı artırmak için ex situ yöntemlerini bilgilendirmek ve potansiyel olarak uyarlamak için kullanılabilir.

Research

JoVE Journal

Biology

In situ Protocol for Butterfly Pupal Wings Using Riboprobes

Riboprobes kullanarak Kelebek pupa Wings in situ Protokolü

Here we present, in video format, a protocol for in situ hybridizations in pupal wings of the butterfly Bicyclus anynana using riboprobes.  In situ ...

A Noninvasive Hair Sampling Technique to Obtain High Quality DNA from Elusive Small Mammals

Elusive Küçük Memeliler Yüksek Kalite DNA Edinme Noninvaziv Saç Örnekleme Tekniği

Noninvasive genetic sampling approaches are becoming increasingly important to study wildlife populations. A number of studies have reported using ...

Techniques to Induce and Quantify Cellular Senescence

Teknikler İndüklemek ve Ölçmek Hücresel Yaşlılık etmek

In response to cellular stress or damage, proliferating cells can induce a specific program that initiates a state of long-term cell-cycle arrest, termed ...

Simple and Effective Administration and Visualization of Microparticles in the Circulatory System of Small Fishes Using Kidney Injection

Basit ve etkili yönetim ve küçük balıklar böbrek enjeksiyon kullanarak dolaşım sistemi içinde Microparticles görselleştirme

The systemic administration of micro-size particles into a living organism can be applied for vasculature visualization, drug and vaccine delivery, ...

Reproductive Techniques for Ovarian Monitoring and Control in Amphibians

Anbürlerde Ovaryalı Izleme ve kontrol için üreme teknikleri

Ovarian control and monitoring in amphibians require a multi-faceted approach. There are several applications that can successfully induce reproductive ...

Applications of Spatio-temporal Mapping and Particle Analysis Techniques to Quantify Intracellular Ca2+ Signaling In Situ

Applications of Spatio-temporal Mapping and Particle Analysis Techniques to Quantify Intracellular Ca2+ Signaling In Situ

Kendisinin geçici eşleme ve parçacık analiz teknikleri intrasellüler Ca sinyal2 + in Situ ölçmek için uygulamaları

Ca2+ imaging of isolated cells or specific types of cells within intact tissues often reveals complex patterns of Ca2+ signaling. This activity requires ...

Analysis of Mitochondrial Respiratory Chain Complexes in Cultured Human Cells using Blue Native Polyacrylamide Gel Electrophoresis and Immunoblotting

Mitokondrial solunum zinciri kompleksleri kültürlü insan hücrelerinde mavi yerli Polyacrylamide Jel Elektroforez ve Immunoblotting kullanarak Analizi

Mitochondrial respiration is performed by oxidative phosphorylation (OXPHOS) complexes within mitochondria. Internal and environmental factors can perturb ...

Glomerular Outgrowth as an Ex Vivo Assay to Analyze Pathways Involved in Parietal Epithelial Cell Activation

Parietal Epitel Hücre Aktivasyonunda Yer Alan Yolları Analiz Etmek Için Ex Vivo Analizi olarak Glomerüler Büyüme

Parietal epithelial cell (PEC) activation is one of the key factors involved in the development and progression of glomerulosclerosis. Inhibition of ...

Nucleofection and In Vivo Propagation of Chicken Eimeria Parasites

Nucleofection and In Vivo Propagation of Chicken Eimeria Parasites

Tavuk Eimeria Parazitlerinin Nükleofeksiyon uyup In Vivo Propagation

Transfection is a technical process through which genetic material, such as DNA and double-stranded RNA, are delivered into cells to modify the gene of ...