Name: a delayed inoculation model of chronic pseudomonas aeruginosa wound infection
Uploaded: 2020-02-20T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Delayed Inoculation Model of Chronic Pseudomonas aeruginosa Wound Infection at JoVE.com

وكان pUT-Tn5-EM7-lux-Km1 الإنارة بناء ناقلات هدية كريمة من J. هاردي. تم إنشاء التخطيطات مع BioRender.com. نشكر مختبر (جي غورتنر) على نصائحهم بشأن نموذج عدوى الجروح كما نشكر ت. دويل من مركز ستانفورد للابتكار في التصوير في فيفو على خبرته التقنية. تم دعم هذا العمل من خلال المنح R21AI133370، R21AI133240، R01AI12492093، والمنح من ستانفورد سبارك، وثقة الأبحاث الطبية فالك ومؤسسة التليف الكيسي (CFF) إلى P.L.B. C.R.D كان مدعوما من قبل T32AI007502. زمالة خريج ة في جامعة غابلان ستانفورد للعلوم والهندسة وزمالة لوبرت ستراير بيو-إكس ستانفورد للدراسات العليا متعددة التخصصات تدعم J.M.S.

تمت الموافقة على جميع الطرق الموضحة هنا من قبل لجنة رعاية الحيوانات المؤسسية واستخدامها (IACUC) في جامعة ستانفورد.
1. إعداد ونمو البكتيريا
<ol><li>إجراء جميع الأعمال مع P. aeruginosa والحيوانات مع احتياطات BSL-2 لكل لجنة السلامة البيولوجية المؤسسية للباحث والمبادئ التوجيهية للجنة ?...

<ol>
	<li>Sen, C. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+skin+wounds:+a+major+and+snowballing+threat+to+public+health+and+the+economy.">Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy.</a> Wound Repair and Regeneration. 17 (6), 763-771 (2009).</li><li>Serra, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+wound+infections:+the+role+of+Pseudomonas+aeruginosa+and+Staphylococcus+aureus.">Chronic wound infections: the role of Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus.</a> Expert Review of Anti-infective Therapy. 13 (5), 605-613 (2015).</li><li>Obritsch, M. D., Fish, D. N., MacLaren, R., Jung, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nosocomial+infections+due+to+multidrug-resistant+Pseudomonas+aeruginosa:+epidemiology+and+treatment+options.">Nosocomial infections due to multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa: epidemiology and treatment options.</a> Pharmacotherapy. 25 (10), 1353-1364 (2005).</li><li>Secor, P. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Filamentous+Bacteriophage+Produced+by+Pseudomonas+aeruginosa+Alters+the+Inflammatory+Response+and+Promotes+Noninvasive+Infection+In+Vivo.">Filamentous Bacteriophage Produced by Pseudomonas aeruginosa Alters the Inflammatory Response and Promotes Noninvasive Infection In Vivo.</a> Infection and Immunity. 85 (1), (2017).</li><li>Rice, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biofilm+life+cycle+and+virulence+of+Pseudomonas+aeruginosa+are+dependent+on+a+filamentous+prophage.">The biofilm life cycle and virulence of Pseudomonas aeruginosa are dependent on a filamentous prophage.</a> The ISME Journal. 3 (3), 271-282 (2009).</li><li>Bayes, H. K., Ritchie, N., Irvine, S., Evans, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+early+Pseudomonas+aeruginosa+lung+disease+with+transition+to+chronic+infection.">A murine model of early Pseudomonas aeruginosa lung disease with transition to chronic infection.</a> Scientific Reports. 6, 35838 (2016).</li><li>van Gennip, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interactions+between+polymorphonuclear+leukocytes+and+Pseudomonas+aeruginosa+biofilms+on+silicone+implants+in+vivo.">Interactions between polymorphonuclear leukocytes and Pseudomonas aeruginosa biofilms on silicone implants in vivo.</a> Infection and Immunity. 80 (8), 2601-2607 (2012).</li><li>Tr&#248;strup, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pseudomonas+aeruginosa+biofilm+aggravates+skin+inflammatory+response+in+BALB/c+mice+in+a+novel+chronic+wound+model.">Pseudomonas aeruginosa biofilm aggravates skin inflammatory response in BALB/c mice in a novel chronic wound model.</a> Wound Repair and Regeneration. 21 (2), 292-299 (2013).</li><li>Zhao, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+course+study+of+delayed+wound+healing+in+a+biofilm-challenged+diabetic+mouse+model.">Time course study of delayed wound healing in a biofilm-challenged diabetic mouse model.</a> Wound Repair and Regeneration. 20 (3), 342-352 (2012).</li><li>Brubaker, A. L., Rendon, J. L., Ramirez, L., Choudhry, M. A., Kovacs, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduced+neutrophil+chemotaxis+and+infiltration+contributes+to+delayed+resolution+of+cutaneous+wound+infection+with+advanced+age.">Reduced neutrophil chemotaxis and infiltration contributes to delayed resolution of cutaneous wound infection with advanced age.</a> Journal of Immunolology. 190 (4), 1746-1757 (2013).</li><li>Watters, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pseudomonas+aeruginosa+biofilms+perturb+wound+resolution+and+antibiotic+tolerance+in+diabetic+mice.">Pseudomonas aeruginosa biofilms perturb wound resolution and antibiotic tolerance in diabetic mice.</a> Medical Microbiology and Immunology. 202 (2), 131-141 (2013).</li><li>Lee, C., Kerrigan, C. L., Picard-Ami, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cyclophosphamide-induced+neutropenia:+effect+on+postischemic+skin-flap+survival.">Cyclophosphamide-induced neutropenia: effect on postischemic skin-flap survival.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 89 (6), 1092-1097 (1992).</li><li>Sweere, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+immune+response+to+Chronic+Pseudomonas+aeruginosa+wound+infection+in+immunocompetent+mice.">The immune response to Chronic Pseudomonas aeruginosa wound infection in immunocompetent mice.</a> Advances in Wound Care. , (2019).</li><li>Sweere, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bacteriophage+trigger+antiviral+immunity+and+prevent+clearance+of+bacterial+infection.">Bacteriophage trigger antiviral immunity and prevent clearance of bacterial infection.</a> Science. 363 (6434), (2019).</li></ol>

لقد وضعنا رواية تأخر التطعيم P. aeruginosa نموذج عدوى الجرح. استراتيجية تأخير التطعيم مع البكتيريا حتى 24 ساعة بعد جرح الختان تمكن من تقييم التهابات الجروح على مدى فترة زمنية 1 أسبوع. باستخدام سلالة الإنارة من P. aeruginosa، فمن الممكن لتتبع تطور العدوى في جميع أنحاء دورة العدوى. وسيتيح المسا?...

Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa)هي بكتيريا على شكل قضيب سلبي الغرام مع زيادة صلتها بصحة الإنسان والمرض. وهي مسؤولة عن المراضة والوفيات واسعة النطاق في البيئات nosocomial، ولا سيما التي تنطوي على التهابات الجروح في المرضى الذين يعانون من نقص المناعة1،2. وقد وفرت ظهور سلالات مقاومة للأدوية المتعددة من هذا العامل الممرض المزيد من الزخم للتحقيق في العوامل التي تسهم في فوعة P. aeruginosa ، وآليات مقاومة المضادات الحيوية P. aeruginosa ، وأساليب جديدة للوقاية والعلاج من هذه العدوى القاتلة3. وعلى هذا النحو، فإن الحاجة إلى نماذج الحيوانات من عدوى الجروح المزمنة كأدوات للتحقيق في هذه الأسئلة البحثية لم تكن أكبر من أي وقت مضى.
لسوء الحظ ، تميل العديد من النماذج الحيوانية من عدوى P. aeruginosa إلى محاكاة العدوى الحادة مع دقة سريعة للعدوى أو الانخفاض السريع بسبب الإنتان4،5، والذي لا يحاكي بشكل كاف الطبيعة المزمنة في كثير من الأحيان لهذه العدوى. لمعالجة هذا العيب ، تستخدم بعض النماذج زرع الأجسام الغريبة مثل حبات الأغار ، أو غرسات السيليكون ، أو هلام الجينات6،7،8. تستخدم نماذج أخرى الفئران التي لا تنقصها المناعة بسبب التقدم في العمر أو السمنة أو مرض السكري ، أو من خلال وسائل دوائية مثل العدلات الناجمة عن السيكلوفوسفاميد9،10،11،12. ومع ذلك ، إما أن استخدام المواد الأجنبية أو المضيفين المحصنين يغير على الأرجح العملية الالتهابية المحلية ، مما يجعل من الصعب فهم الفيزيولوجيا المرضية المشاركة في التهابات الجروح المزمنة في المضيفين الذين يعانون من جهاز مناعي طبيعي.
لقد طورنا نموذجًا مزمنًا لعدوى الجروح P. aeruginosa في الفئران التي تنطوي على تأخير التلقيح مع البكتيريا بعد جرح الختان. يسمح التطعيم المتأخر بإجراء تجارب لتقييم العبء البكتيري الذي يمتد إلى 7 أيام على الأقل. هذا النموذج يفتح فرصا جديدة للتحقيق في كل من الإمراض والعلاجات الجديدة للالتهابات المزمنة P. aeruginosa.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.9% Sodium Chloride injection</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>2484457</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18 G x 1 sterile needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305195</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25 G x 1 1/5 sterile needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcohol swab</td>
			<td>BD</td>
			<td>326895</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aura Imaging Software</td>
			<td>Spectral Instruments Imaging</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Purdue Frederick Company</td>
			<td>19-065534</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine SR LAB</td>
			<td>Zoopharm</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6J male mice</td>
			<td>The Jackson Laboratory</td>
			<td>000664</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable biopsy punch, 6mm</td>
			<td>Integra</td>
			<td>33-36</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine scissors - Tungsten Carbide</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14568-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Bead Dry Sterilizer</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>61-0183</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Granulated Agar</td>
			<td>Fisher BioReagents</td>
			<td>BP9744</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating Pad</td>
			<td>Milliard</td>
			<td>804879481218</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringe with 28 G needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>329461</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lago X Imaging System</td>
			<td>Spectral Instruments Imaging</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LB broth</td>
			<td>Fisher BioReagents</td>
			<td>BP1426</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leur-Lok 1 mL syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309628</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mini Arco Animal Trimmer</td>
			<td>Wahl Professional</td>
			<td>919152</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nair Hair Removal Lotion with Baby Oil</td>
			<td>Church and Dwight</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Available at any pharmacy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Octagon Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11041-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>351029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline (PBS) 1x</td>
			<td>Corning</td>
			<td>21-040-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Press and Seal Cling Wrap</td>
			<td>Glad</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SafetyGlide Insulin syringe with 30 G needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305934</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safetyglide Insulin syringe, 1/2 mL, 30 G x 5/16 TW</td>
			<td>BD</td>
			<td>305934</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scale</td>
			<td>Ohaus Scout Pro</td>
			<td>SP202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Supplical Nutritional Supplement</td>
			<td>Henry Schein Animal Health</td>
			<td>29908</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tegaderm, 6 cm x 7 cm</td>
			<td>3M</td>
			<td>1624W</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a delayed inoculation model of chronic pseudomonas aeruginosa wound infection

Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa)هو أحد مسببات الأمراض الرئيسية nosocomial ذات الصلة المتزايدة لصحة الإنسان والمرض, لا سيما في وضع التهابات الجروح المزمنة في مرضى السكري والمستشفيات. هناك حاجة ملحة لنماذج العدوى المزمنة للمساعدة في التحقيق في مسببات الجروح وتطوير علاجات جديدة ضد هذا العامل الممرض. هنا ، نصف بروتوكول يستخدم التطعيم المتأخر بعد 24 ساعة من جرح الاستئصال الكامل السماكة. عدوى مصفوفة الجرح المؤقت الحالي في هذا الوقت إما إحباط التطهير السريع أو نشر العدوى وبدلا من ذلك يؤسس العدوى المزمنة تستمر 7-10 أيام دون الحاجة إلى زرع مواد أجنبية أو قمع المناعة. يحاكي هذا البروتوكول مسارًا زمنيًا نموذجيًا للعدوى بعد الجراحة في البشر. استخدام سلالة P. aeruginosa الإنارة (PAO1:lux) يسمح للتقييم الكمي اليومي للعبء البكتيري لالتهابات الجروح P. aeruginosa. قد يكون هذا النموذج الجديد أداة مفيدة في التحقيق في الإمراض البكتيري وتطوير علاجات جديدة لالتهابات الجروح P. aeruginosa المزمنة.

باستخدام سلالة الإنارة من PAO1 مع البلازميد ترميز نظام مراسل luxABCDE (PAO1:lux)، قمنا بإجراء جرح الختان على الفئران، وتلقيح هذه الجروح مع العوالق P. aeruginosa 24 ح في وقت لاحق، وقياس العبء البكتيري على مر الزمن(الشكل 1 والشكل 2). صورة تمثيلية تم الحصو?...

Watch this Scientific Journal Video about A Delayed Inoculation Model of Chronic Pseudomonas aeruginosa Wound Infection at JoVE.com

A Delayed Inoculation Model of Chronic Pseudomonas aeruginosa Wound Infection

نحن نصف بروتوكول التطعيم المتأخر لتوليد التهابات الجروح المزمنة في الفئران ذات الكفاءة المناعية.

نموذج التلقيح المتأخر لعدوى الجروح المزمنة الزائفة الجيروجينوسا

Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) is a major nosocomial pathogen of increasing relevance to human health and disease, particularly in the setting of ...

هذا البروتوكول مهم لأنه يصف نموذجا لعدوى الجرح Aeruginosa Pseudomonas المزمنة دون الحاجة إلى زرع المواد الأجنبية أو قمع المناعة. تأخر التلقيح مع Pseudomonas aeruginosa 24 ساعة بعد كامل سمك جرح الختان pros الإزالة السريعة ونشر البكتيريا ، مما يشكل العدوى التي تستمر من سبعة إلى 10 أيام. هذا النموذج الفريد سيكون أداة مفيدة للتحقيقات من التسبب البكتيرية, التفاعلات الممرض المضيف, وتطوير علاجات جديدة لالتهابات الجرح Aeruginosa Pseudomonas المزمنة.سيساعدني في مظاهرة من الإجراء سيكون دان ليو، وهو طالب طب من مختبر بوليكي. قبل البدء في الإجراء، وزن الماوس من العمر من ثمانية إلى 12 أسبوعًا، للحصول على وزن أساسي ووضع الماوس في موضع عرضة. بعد التأكد من عدم وجود استجابة لدواسة منعكس، حقن تحت الجلد الماوس مع 250 ميكرولترات من قبل الدافئة معقمة 0.9٪ كلوريد الصوديوم على كل جناح.استخدم آلة حلاقة كهربائية لإزالة الشعر من منطقة الظهر من الفأرة وطبق طبقة رقيقة من كريم إزالة الشعر على الجلد المكشوف. بعد 20 إلى 60 ثانية، وإزالة الشعر ومستحضرات محلول الزائدة مع الشاش مبللة في الماء الدافئ. لجراحة الجرح الختاني سمك كامل، استخدم أولا إبرة قياس 25 لحقن تحت الجلد 0.6 إلى ملليغرام واحد لكل كيلوغرام من buprenorphine الإفراج المستمر في منطقة منتصف الظهر من الماوس ومسح الموقع الجراحي بطريقة دائرية مع ثلاثة بيتادين عقيمة بديلة ومسحات الكحول.وضع البلاستيك التشبث التفاف الستائر على موقع الجراحة وتمتد الجلد مشدود caudally. عندما يجف الجلد، استخدم معقمة 6 ملليمتر قطر جلد خزعة لكمة لجعل شق أولي من خلال البشرة الظهرية اليسرى، تليها شق ثان على البشرة الظهرية اليمنى. استخدام ملقط خيمه الجلد من وسط منطقة الجرح المبينة على اليسار واستخدام مقص لإخراج البشرة وطبقات الجلد.بعد تكرار الشق على منطقة الجرح المحددة على اليمين لخلق الجروح الختانية المتناظرة، وغسل كل من الجروح مع 50 ميكرولترات من المالحة العقيمة. عندما يكون الموقع الجراحي والجلد المحيطة بها قد جفت، وتغطي الجروح والضلم مع صلصة فيلم شفاف ووضع الماوس في قفص نظيف على وسادة التدفئة مع مراقبة حتى إعادة شغل كامل. بعد 24 ساعة من الجراحة، وزن الماوس المُعاد تخديره مرة أخرى وحقن الحيوان تحت الجلد بـ 250 ميكرولترات من كلوريد الصوديوم قبل الدافئة 0.9٪ في كلا الجناحين.المقبل, تحميل 100 ميكرولترات من تعليق سلالة P.aeruginosa الإنارة في 500 ميكروليتر قبعة سقف سلامة حقنة مجهزة بإبرة قياس 27 وحقن 40 ميكرولترات من تعليق البكتيريا من خلال خلع الملابس فيلم شفافة في كل جرح. تأكد من أن التعليق البكتيري مختلط بشكل جيد وأن الضمادات الشفافة سليمة. تأكد من أن تثقب الملابس الشفافة مرة واحدة فقط مع جانب الإطار الإبرة.ثم العودة إلى قفص الماوس على صفحة التدفئة مع رصد وتوفير معجون الغذائية عالية السعرات الحرارية تقع بين الكريات الغذائية على أرضية القفص. لوحة inoculum المتبقية على لوحة LB أجار والعد المستعمرات لتأكيد عدد البكتيريا التي تم تدار. لفي التصوير في الجسم الحي من الجروح المصابة، اتبع السلامة الحيوية بروتوكولي الاحتواء اثنين لنقل الفئران من وإلى أداة التصوير ووضع الفأر تخدير في موقف عرضة داخل غرفة التصوير.في برنامج التصوير، قم بتعيين وقت التعرض، وbinning، وf-stop، ومجال الرؤية حسب ما هو مناسب للتجربة. بعد ذلك، قم بإنشاء منطقة ذات أهمية في موقع الجرح وقياس متوسط التدفق المكتشف في الفوتونات في الثانية. لقياس الخلفية، قم بإنشاء منطقة ذات أهمية على مساحة عشوائية على منصة التصوير واطرح رقم الخلفية للفوتونات في الثانية.في نهاية التجربة ، في مجلس الوزراء سلامة البيولوجية ، واستخدام مقص معقمة ملقط لإخراج أسرة الجرح ووضع كل سرير في ملليلتر واحد من برنامج تلفزيوني عقيمة في أنبوب البولي بروبلين 1.5 ملليلتر. اِنم نسيج الجرح بمقص و ينقب قطع الأنسجة على شاكر بأربع درجات مئوية في 300 دوران في الدقيقة لمدة ساعتين. في نهاية الحضانة، دوامة كل أنبوب لمدة 10 ثانية قبل تخفيفها بشكل متسلسل النفايات البكتيرية في برنامج تلفزيوني والطلاء النفايات البكتيرية المخففة على أجار LB لتحديد حجم العبء البكتيري.هذه الصورة التمثيلية التي تم الحصول عليها باستخدام نظام التصوير البصري يوضح أن هذا النموذج ينتج عنه إضاءة قابلة للكشف. في هذه التجربة، بلغت العدوى ذروتها في اليوم الثالث تلقيح آخر واستمرت سبعة أيام بعد التطعيم على أساس كل من الإضاءة الحيوية وعدد المستعمرة. ثقافة البكتيريا المعزولة من الجرح تثبت كذلك أن وحدات تشكيل مستعمرة كمي لكل جرح ترتبط مع الإنارة المكتشفة.على الرغم من أن هناك فقدان الوزن السريع الأولي مباشرة بعد الحقن، والحقن المالحة والتغذية التكميلية يمكن استعادة الفئران إلى الأوزان الأولية. تم تحديد جرعة التلقيح المحسوبة التي 50٪ من الجروح التي ستصبح مصابة بشكل كبير لتكون حوالي 7.7 مرات 10 إلى الوحدة الثانية لتشكيل مستعمرة لكل ملليلتر. جرعات أعلى من واحد مرات 10 إلى مستعمرة الرابع تشكيل وحدات لكل ملليلتر نتيجة في معدل العدوى 100٪.يمكن تطبيق مختلف العلاجات الموضعية والنظامية بعد إجراءات الجرح والتطعيم للتحقيق في العلاجات المحتملة الجديدة لـ Pseudomonas aeruginosa. وينبغي إجراء جميع العمل مع Pseudomonas aeruginosa والفئران المصابة مع احتياطات السلامة BSL-2 وفقا للمبادئ التوجيهية للجنة السلامة الحيوية المؤسسية للباحث واستخدام الحيوانات.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

A Delayed Inoculation Model of Chronic Pseudomonas aeruginosa Wound Infection

Co-culture Models of Pseudomonas aeruginosa Biofilms Grown on Live Human Airway Cells

Co-culture Models of Pseudomonas aeruginosa Biofilms Grown on Live Human Airway Cells

شارك في نماذج من الثقافة الزائفة الزنجارية الأغشية الحيوية نمت على خلايا حية إيرواي الإنسان

Bacterial biofilms have been associated with a number of different human diseases, but biofilm development has generally been studied on non-living ...

Pseudomonas aeruginosa and Saccharomyces cerevisiae Biofilm in Flow Cells

Pseudomonas aeruginosa and Saccharomyces cerevisiae Biofilm in Flow Cells

والزائفة الزنجارية السكيراء بيوفيلم في خلايا خميرة تدفق

Many microbial cells have the ability to form sessile microbial communities defined as biofilms that have altered physiological and pathological ...

RNA Isolation of Pseudomonas aeruginosa Colonizing the Murine Gastrointestinal Tract

RNA Isolation of Pseudomonas aeruginosa Colonizing the Murine Gastrointestinal Tract

عزل الحمض النووي الريبي الزائفة الزنجارية استعمار الهضمي المسالك الفئران

Pseudomonas aeruginosa (PA) infections result in significant morbidity and mortality in hosts with compromised immune systems, such as patients with ...

Use of Artificial Sputum Medium to Test Antibiotic Efficacy Against Pseudomonas aeruginosa in Conditions More Relevant to the Cystic Fibrosis Lung

Use of Artificial Sputum Medium to Test Antibiotic Efficacy Against Pseudomonas aeruginosa in Conditions More Relevant to the Cystic Fibrosis Lung

استخدام متوسط ​​البلغم الاصطناعي لاختبار فعالية المضادات الحيوية لمكافحة<em&gt; الزائفة الزنجارية</em&gt; في شروط أكثر ملاءمة لالرئة التليف الكيسي

There  is growing concern about the relevance of in vitro antimicrobial  susceptibility tests when applied to isolates of P. aeruginosa from  cystic ...

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

على المدى الطويل المزمن<em&gt; الزائفة الزنجارية</em&gt; عدوى مجرى الهواء في الفئران

A mouse model of chronic airway infection is a key asset in cystic fibrosis (CF) research, although there are a number of concerns regarding the model ...

Pseudomonas aeruginosa Induced Lung Injury Model

Pseudomonas aeruginosa Induced Lung Injury Model

الزائفة الزنجارية المستحثة الرئة الإصابات نموذج

In order to study human acute lung injury and pneumonia, it is important to develop animal models to mimic various pathological features of this disease. ...

Studying Microbial Communities In Vivo: A Model of Host-mediated Interaction Between Candida Albicans and Pseudomonas Aeruginosa in the Airways

Studying Microbial Communities In Vivo: A Model of Host-mediated Interaction Between Candida Albicans and Pseudomonas Aeruginosa in the Airways

دراسة المجتمعات الميكروبية<em&gt; في فيفو</em&gt;: نموذج من التفاعل بوساطة بين المضيف<em&gt; المبيضات البيض</em&gt; و<em&gt; الزائفة الزنجارية</em&gt; في الخطوط الجوية

Studying host-pathogen interaction enables us to understand the underlying mechanisms of the pathogenicity during microbial infection. The prognosis of ...

Come to the Light Side: In Vivo Monitoring of Pseudomonas aeruginosa Biofilm Infections in Chronic Wounds in a Diabetic Hairless Murine Model

Come to the Light Side: In Vivo Monitoring of Pseudomonas aeruginosa Biofilm Infections in Chronic Wounds in a Diabetic Hairless Murine Model

تأتي إلى "جانب الضوء": "في فيفو" الرصد الزائفة الزّنجاريّة بيوفيلم الالتهابات في "الجروح المزمنة" في "نموذج مورين أصلع السكري"

The presence of bacteria as structured biofilms in chronic wounds, especially in diabetic patients, is thought to prevent wound healing and resolution. ...

Methods for Detecting Cytotoxic Amyloids Following Infection of Pulmonary Endothelial Cells by Pseudomonas aeruginosa

Methods for Detecting Cytotoxic Amyloids Following Infection of Pulmonary Endothelial Cells by Pseudomonas aeruginosa

طرق "كشف السامة للخلايا أميلويدس التالية العدوى من الرئة خلايا بطانية" الزائفة الزّنجاريّة

Patients who survive pneumonia have elevated death rates in the months following hospital discharge. It has been hypothesized that infection of pulmonary ...

Generation of In-Frame Gene Deletion Mutants in Pseudomonas aeruginosa and Testing for Virulence Attenuation in a Simple Mouse Model of Infection

Generation of In-Frame Gene Deletion Mutants in Pseudomonas aeruginosa and Testing for Virulence Attenuation in a Simple Mouse Model of Infection

جيل من المتحولين في الإطار الجينات الحذف في الزائفة الزنجاريه واختبار لتوهين ضراوة في نموذج الماوس بسيطه من العدوى

Microorganisms are genetically versatile and diverse and have become a major source of many commercial products and biopharmaceuticals. Though some of ...