Name: a delayed inoculation model of chronic pseudomonas aeruginosa wound infection
Uploaded: 2020-02-20T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Delayed Inoculation Model of Chronic Pseudomonas aeruginosa Wound Infection at JoVE.com

pUT-Tn5-EM7-lux-Km1 parlak yapı vektörj Hardy zarif bir hediye oldu. Şemalar BioRender.com ile oluşturuldu. G. Gurtner'ın laboratuvarına yara enfeksiyonu modeli hakkındaki tavsiyelerinden dolayı teşekkür ederiz. Ayrıca Stanford In Vivo Imaging Yenilik Merkezi'nden T. Doyle'a teknik uzmanlığı için teşekkür ederiz. Bu çalışma R21AI133370, R21AI133240, R01AI12492093 hibeleri ile desteklenmiş ve Stanford SPARK, Falk Medical Research Trust ve Kistik Fibrozis Vakfı'ndan (CFF) P.L.B. C.R.D.'ye verilen hibeler T32AI007502 tarafından desteklenmiştir. Gabilan Stanford Bilim ve Mühendislik Yüksek Lisans Bursu ve Lubert Stryer Bio-X Stanford Disiplinlerarası Yüksek Lisans Bursu J.M.S. tarafından desteklendi.

Burada açıklanan tüm yöntemler Stanford Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmıştır.
1. Bakterilerin hazırlanması ve büyümesi
<ol><li>P. aeruginosa ve hayvanlarla, araştırmacının kurumsal biyogüvenlik komitesi ve hayvan kullanım komitesi yönergelerine göre BSL-2 önlemleri ile tüm çalışmaları gerçekleştirin. Burada p. aeruginosaiçeren açıklanan tüm adımları yapın , fare aşılama dahil, bir bi...

<ol>
	<li>Sen, C. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+skin+wounds:+a+major+and+snowballing+threat+to+public+health+and+the+economy.">Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy.</a> Wound Repair and Regeneration. 17 (6), 763-771 (2009).</li><li>Serra, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+wound+infections:+the+role+of+Pseudomonas+aeruginosa+and+Staphylococcus+aureus.">Chronic wound infections: the role of Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus.</a> Expert Review of Anti-infective Therapy. 13 (5), 605-613 (2015).</li><li>Obritsch, M. D., Fish, D. N., MacLaren, R., Jung, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nosocomial+infections+due+to+multidrug-resistant+Pseudomonas+aeruginosa:+epidemiology+and+treatment+options.">Nosocomial infections due to multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa: epidemiology and treatment options.</a> Pharmacotherapy. 25 (10), 1353-1364 (2005).</li><li>Secor, P. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Filamentous+Bacteriophage+Produced+by+Pseudomonas+aeruginosa+Alters+the+Inflammatory+Response+and+Promotes+Noninvasive+Infection+In+Vivo.">Filamentous Bacteriophage Produced by Pseudomonas aeruginosa Alters the Inflammatory Response and Promotes Noninvasive Infection In Vivo.</a> Infection and Immunity. 85 (1), (2017).</li><li>Rice, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biofilm+life+cycle+and+virulence+of+Pseudomonas+aeruginosa+are+dependent+on+a+filamentous+prophage.">The biofilm life cycle and virulence of Pseudomonas aeruginosa are dependent on a filamentous prophage.</a> The ISME Journal. 3 (3), 271-282 (2009).</li><li>Bayes, H. K., Ritchie, N., Irvine, S., Evans, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+early+Pseudomonas+aeruginosa+lung+disease+with+transition+to+chronic+infection.">A murine model of early Pseudomonas aeruginosa lung disease with transition to chronic infection.</a> Scientific Reports. 6, 35838 (2016).</li><li>van Gennip, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interactions+between+polymorphonuclear+leukocytes+and+Pseudomonas+aeruginosa+biofilms+on+silicone+implants+in+vivo.">Interactions between polymorphonuclear leukocytes and Pseudomonas aeruginosa biofilms on silicone implants in vivo.</a> Infection and Immunity. 80 (8), 2601-2607 (2012).</li><li>Tr&#248;strup, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pseudomonas+aeruginosa+biofilm+aggravates+skin+inflammatory+response+in+BALB/c+mice+in+a+novel+chronic+wound+model.">Pseudomonas aeruginosa biofilm aggravates skin inflammatory response in BALB/c mice in a novel chronic wound model.</a> Wound Repair and Regeneration. 21 (2), 292-299 (2013).</li><li>Zhao, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+course+study+of+delayed+wound+healing+in+a+biofilm-challenged+diabetic+mouse+model.">Time course study of delayed wound healing in a biofilm-challenged diabetic mouse model.</a> Wound Repair and Regeneration. 20 (3), 342-352 (2012).</li><li>Brubaker, A. L., Rendon, J. L., Ramirez, L., Choudhry, M. A., Kovacs, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduced+neutrophil+chemotaxis+and+infiltration+contributes+to+delayed+resolution+of+cutaneous+wound+infection+with+advanced+age.">Reduced neutrophil chemotaxis and infiltration contributes to delayed resolution of cutaneous wound infection with advanced age.</a> Journal of Immunolology. 190 (4), 1746-1757 (2013).</li><li>Watters, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pseudomonas+aeruginosa+biofilms+perturb+wound+resolution+and+antibiotic+tolerance+in+diabetic+mice.">Pseudomonas aeruginosa biofilms perturb wound resolution and antibiotic tolerance in diabetic mice.</a> Medical Microbiology and Immunology. 202 (2), 131-141 (2013).</li><li>Lee, C., Kerrigan, C. L., Picard-Ami, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cyclophosphamide-induced+neutropenia:+effect+on+postischemic+skin-flap+survival.">Cyclophosphamide-induced neutropenia: effect on postischemic skin-flap survival.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 89 (6), 1092-1097 (1992).</li><li>Sweere, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+immune+response+to+Chronic+Pseudomonas+aeruginosa+wound+infection+in+immunocompetent+mice.">The immune response to Chronic Pseudomonas aeruginosa wound infection in immunocompetent mice.</a> Advances in Wound Care. , (2019).</li><li>Sweere, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bacteriophage+trigger+antiviral+immunity+and+prevent+clearance+of+bacterial+infection.">Bacteriophage trigger antiviral immunity and prevent clearance of bacterial infection.</a> Science. 363 (6434), (2019).</li></ol>

Biz yeni bir gecikmiş inoülsülasyon P. aeruginosa yara enfeksiyonu modeli geliştirdik. Eksizyoniyal yarası sonrası bakterilerle aşılamayı 24 saate kadar geciktirme stratejisi, yara enfeksiyonlarının 1 haftalık bir zaman dilimi içinde değerlendirilmesini sağlar. P. aeruginosabir Parlak suşu kullanarak , enfeksiyon ders boyunca enfeksiyon ilerlemesini izlemek mümkündür. Diğer P. aeruginosa enfeksiyon modellerine göre enfeksiyonun uzun seyri, ev sahibi-patojen etkileşimlerini...

Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa)insan sağlığı ve hastalığı ile artan alaka ile gram-negatif çubuk şeklinde bir bakteridir. Nosokomial ortamlarda, özellikle immünazasyonsuz hastalarda yara enfeksiyonlarını içeren geniş morbidite ve mortaliteden sorumludur1,2. Bu patojenin çoklu ilaca dirençli suşlarının ortaya çıkması P. aeruginosa virülans, P. aeruginosa antibiyotik direnci mekanizmaları ve bu ölümcül enfeksiyonun önlenmesi ve tedavisi için yeni yöntemler katkıda bulunan faktörlerin araştırılması için daha fazla ivme sağlamıştır3. Bu nedenle, bu araştırma soruları araştırmak için araç olarak kronik yara enfeksiyonu hayvan modelleri için ihtiyaç daha büyük olmamıştı.
Ne yazık ki, P. aeruginosa enfeksiyonu birçok hayvan modelleri yeterli bu enfeksiyonların oftentimes kronik doğasını taklit etmez sepsis4,5nedeniyle enfeksiyon veya hızlı düşüş hızlı çözünürlüğü ile akut enfeksiyon simüle eğilimindedir. Bu dezavantajı gidermek için, bazı modeller agar boncuk, silikon implantlar veya aljinat jeller6,7,8gibi yabancı cisimlerin implantasyonu kullanmak. Diğer modeller ileri yaş, obezite veya diyabet nedeniyle bağışıklık veya siklofosfamid kaynaklı nötropeni9,10,11,12gibi farmakolojik yollarla bağışıklık bozulan fareler kullanın. Ancak, yabancı maddelerin kullanımı ya da bağışıklık bozulmuş konaklar büyük olasılıkla yerel inflamatuar süreci değiştirir, zor aksi normal bağışıklık sistemleri ile konaklarda kronik yara enfeksiyonları dahil patofizyolojisi bir anlayış kazanmak için yapım.
Farelerde eksizyonel yarası sonrası bakterilerle gecikmiş aşılama içeren kronik bir P. aeruginosa yara enfeksiyonu modeli geliştirdik. Gecikmiş aşılama, en az 7 güne kadar uzanan bakteriyel yükü değerlendiren deneylere olanak sağlar. Bu model hem patogenezi hem de P. aeruginosa kronik enfeksiyonların yeni tedavileri için yeni fırsatlar sunmaktadır.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.9% Sodium Chloride injection</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>2484457</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18 G x 1 sterile needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305195</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25 G x 1 1/5 sterile needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcohol swab</td>
			<td>BD</td>
			<td>326895</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aura Imaging Software</td>
			<td>Spectral Instruments Imaging</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Purdue Frederick Company</td>
			<td>19-065534</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine SR LAB</td>
			<td>Zoopharm</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6J male mice</td>
			<td>The Jackson Laboratory</td>
			<td>000664</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable biopsy punch, 6mm</td>
			<td>Integra</td>
			<td>33-36</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine scissors - Tungsten Carbide</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14568-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Bead Dry Sterilizer</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>61-0183</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Granulated Agar</td>
			<td>Fisher BioReagents</td>
			<td>BP9744</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating Pad</td>
			<td>Milliard</td>
			<td>804879481218</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringe with 28 G needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>329461</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lago X Imaging System</td>
			<td>Spectral Instruments Imaging</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LB broth</td>
			<td>Fisher BioReagents</td>
			<td>BP1426</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leur-Lok 1 mL syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309628</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mini Arco Animal Trimmer</td>
			<td>Wahl Professional</td>
			<td>919152</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nair Hair Removal Lotion with Baby Oil</td>
			<td>Church and Dwight</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Available at any pharmacy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Octagon Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11041-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>351029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline (PBS) 1x</td>
			<td>Corning</td>
			<td>21-040-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Press and Seal Cling Wrap</td>
			<td>Glad</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SafetyGlide Insulin syringe with 30 G needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305934</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safetyglide Insulin syringe, 1/2 mL, 30 G x 5/16 TW</td>
			<td>BD</td>
			<td>305934</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scale</td>
			<td>Ohaus Scout Pro</td>
			<td>SP202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Supplical Nutritional Supplement</td>
			<td>Henry Schein Animal Health</td>
			<td>29908</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tegaderm, 6 cm x 7 cm</td>
			<td>3M</td>
			<td>1624W</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a delayed inoculation model of chronic pseudomonas aeruginosa wound infection

Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa),özellikle diyabetik ve hastanede yatan hastalarda kronik yara enfeksiyonlarının belirlenmesinde, insan sağlığı ve hastalığı ile olan alakadüzeyinin giderek artan önemli bir nosokomiyal patojenidir. Yara patogenezinin araştırılmasına ve bu patojene karşı yeni tedavilerin geliştirilmesine yardımcı olmak için kronik enfeksiyon modellerine acil ihtiyaç vardır. Burada, tam kalınlıkta eksizyonel yaralanmadan 24 saat sonra gecikmiş aşı kullanan bir protokol açıklıyoruz. Şu anda mevcut olan geçici yara matrisinin enfeksiyonu, enfeksiyonun hızlı bir şekilde temizlenmesini veya yayılmasını engeller ve bunun yerine yabancı maddelerin implantasyonuna veya immün baskılanmasına gerek kalmadan 7-10 gün süren kronik enfeksiyon oluşturur. Bu protokol insanlarda ameliyat sonrası enfeksiyonun tipik bir temporal seyrini taklit eder. Bir Parlak P. aeruginosa suşu kullanımı (PAO1:lux) P. aeruginosa yara enfeksiyonları için bakteriyel yükün kantitatif günlük değerlendirme sağlar. Bu yeni model bakteriyel patogenezin araştırılmasında ve kronik P. aeruginosa yara enfeksiyonları için yeni tedavilerin geliştirilmesinde yararlı bir araç olabilir.

LuxABCDE muhabir sistemini (PAO1:lux) kodlayan bir plazmid ile PAO1'in parlak bir suşını kullanarak, farelerde eksizyonel yaralar uyguladık, bu yaraları planktonik P. aeruginosa 24 saat sonra aşıladık ve zaman içinde ölçülen bakteriyel yükü(Şekil 1 ve Şekil 2). Görüntüleme optik sistemi kullanılarak elde edilen temsili bir görüntü, bu modelin saptanabilir parlaklıkla sonuçverdiğini göstermekted...

Watch this Scientific Journal Video about A Delayed Inoculation Model of Chronic Pseudomonas aeruginosa Wound Infection at JoVE.com

A Delayed Inoculation Model of Chronic Pseudomonas aeruginosa Wound Infection

İmmün yetersiz farelerde kronik yara enfeksiyonları oluşturmak için gecikmiş bir aşılama protokolünü tanımladık.

Kronik Pseudomonas aeruginosa Yara Enfeksiyonu Gecikmiş Aşılama Modeli

Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) is a major nosocomial pathogen of increasing relevance to human health and disease, particularly in the setting of ...

Bu protokol, yabancı madde implantasyonu veya immün baskılama gerek kalmadan kronik Pseudomonas aeruginosa yara enfeksiyonu için bir model açıklar, çünkü önemlidir. Pseudomonas aeruginosa ile gecikmiş aşılama 24 saat sonra tam kalınlıkta eksizyonel yara prostalls hızlı açıklık ve bakteri yayılması, 7 ila 10 gün süren bir enfeksiyon oluşturur. Bu benzersiz model bakteriyel patogenez intifaları, konak patojen etkileşimleri ve kronik Pseudomonas aeruginosa yara enfeksiyonları için yeni tedavilerin geliştirilmesi için yararlı bir araç olacaktır.Prosedürün bir gösterisinde bana yardımcı olan Dan Liu, Bollyky Laboratuvarı'ndan bir tıp öğrencisi olacak. İşleme başlamadan önce, temel ağırlık elde etmek ve fareyi eğilimli konuma getirmek için sekiz ila 12 haftalık bir fareyi tartın. Pedal refleksine yanıt eksikliğini doğruladıktan sonra, fareye her kanadında önceden ısıtılmış steril %0,9 sodyum klorür 250 mikrolitre sodyum klorür enjekte edin.Farenin sırt alanından saç kaldırmak ve maruz kalan cilde piliç krem ince bir tabaka uygulamak için bir elektrikli tıraş makinesi kullanın. 20 ila 60 saniye sonra, ılık suda nemlendirilmiş gazlı bez ile saç ve aşırı losyonu çıkarın. Tam kalınlıkta eksizyonel yara cerrahisi için, ilk deri altı farenin orta dorsal alanda sürekli salınım buprenorfin kilogram başına 0,6 ila bir miligram enjekte etmek için 25 gauge iğne kullanın ve üç alternatif steril Betadine ve alkol bezleri ile dairesel bir şekilde cerrahi site silmek.Cerrahi site nin üzerine plastik bir yapışkan şal drap yerleştirin ve caudally cilt gergin germek. Cilt kuruduğunda, sol dorsal epidermis ile ilk kesi yapmak için steril altı milimetre çapında deri biyopsisi yumruk kullanın, sağ dorsal epidermis üzerinde ikinci bir kesi takip. Sol özetlenen yara alanının merkezinden cildi çadır ve epidermal ve dermal katmanları çıkarmak için makas kullanın forceps kullanın.Simetrik eksizyonel yaralar oluşturmak için sağ daki yara bölgesinde kesi tekrarladıktan sonra her iki yarayı 50 mikrolitre steril salin ile yıkayın. Cerrahi bölge ve çevresindeki cilt kuruduğunda, yaraları ve dorsum şeffaf bir film pansum ile kapatın ve fareyi tam recumbency kadar izleme ile bir ısıtma yastığı üzerinde temiz bir kafese yerleştirin. Ameliyattan 24 saat sonra, yeniden anestezi li fareyi tekrar tartın ve hayvana her iki tarafta da 250 mikrolitre önceden ısıtılmış steril klorür enjekte edin.Daha sonra, 27 gauge iğne ile donatılmış 500 mikrolitre tüberkülin emniyet kapağı şırınga içine parlak P.aeruginosa gerinim süspansiyon 100 mikrolitre yük ve her yara içine şeffaf film pansuman yoluyla bakteri süspansiyon 40 mikrolitre enjekte. Bakteriyel süspansiyonun iyi bir şekilde karıştırıldığından ve şeffaf pansumanın sağlam olduğundan emin olun. Şeffaf pansumanı iğne çerçevesi yan tarafı yukarı doğru sadece bir kez deldiğinizden emin olun.Daha sonra izleme ile bir ısıtma sayfasında kendi kafese fare dönmek ve kafesin zemin üzerinde gıda pelet arasında sandviç yüksek kalorili besin takviyesi yapıştırmak sağlar. Bir LB agar plaka üzerinde kalan inoculum plaka ve uygulanan bakteri sayısını doğrulamak için koloniler saymak. Enfekte yaraların canlı görüntülemesinde, farelerin görüntüleme aletine taşınması için biyo güvenlik seviyesi iki koruma protokolünü uygulayın ve anestezili fareyi görüntüleme odası içinde yatkın konuma yerleştirin.Görüntüleme yazılımında, pozlama süresini, binning, f-stop'u ve görüş alanını deney için uygun olarak ayarlayın. Daha sonra, yara yerinde ilgi bir bölge oluşturmak ve saniyede fotonlar ortalama algılanan akı ölçmek. Arka planı ölçmek için, görüntüleme platformunda rasgele bir alan üzerinde ilgi alanı oluşturun ve saniyede fotonların arka plan numarasını çıkarın.Deneyin sonunda, bir biyo güvenlik kabininde, yara yataklarını çıkarmak için steril makas ve çömeçler kullanın ve her yatağı 1,5 mililitrelik polipropilen tüpe bir mililitre steril PBS'ye yerleştirin. Makasla yara dokusunu doğrama ve doku parçalarını iki saat boyunca dakikada 300 dönüşte dört derece santigrat derecede bir çalkalayıcıya katarak. Kuluçka sonunda, girdap 10 saniye boyunca seri PBS bakteriyel atık seyreltilmiş ve lb agar üzerinde seyreltilmiş bakteriyel atık kaplama önce 10 saniye boyunca bakteriyel yükü ölçmek için.Görüntüleme optik sistemi kullanılarak elde edilen bu temsili görüntü, bu modelin tespit edilebilir parlaklık la sonuçverdiğini göstermektedir. Bu deneyde, enfeksiyon gün üç post aşılama doruğa ve biyolüminesans ve koloni sayıları hem dayalı yedi gün sonrası aşılama devam etti. Yaradan izole edilen bakterilerin kültürü, yara başına oluşan ölçülebilir koloni nin tespit edilen lüminesansla ilişkili olduğunu daha da göstermektedir.Enjeksiyondan hemen sonra ilk hızlı kilo kaybı olmasına rağmen, tuzlu enjeksiyonlar ve ek beslenme fareleri ilk ağırlıklarına geri getirebilir. Yaraların %50'sinin önemli ölçüde enfekte olacağı hesaplanan aşılama dozu, mililitre başına ikinci koloni oluşturan ünitelere yaklaşık 7.7 kat 10 olarak saptanmıştır. Mililitre başına dördüncü koloni oluşturan birimlere 10 kereden daha yüksek dozlar %100 enfeksiyon oranı sağlar.Pseudomonas aeruginosa için yeni potansiyel tedavileri araştırmak için yaralama ve aşılama prosedürlerinden sonra çeşitli topikal ve sistemik tedaviler uygulanabilir. Pseudomonas aeruginosa ve enfekte fareler ile tüm çalışmalar, araştırmacının kurumsal biyo güvenlik ve hayvan kullanım komitesi yönergelerine uygun olarak BSL-2 güvenlik önlemleri ile yapılmalıdır.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

A Delayed Inoculation Model of Chronic Pseudomonas aeruginosa Wound Infection

Co-culture Models of Pseudomonas aeruginosa Biofilms Grown on Live Human Airway Cells

Co-culture Models of Pseudomonas aeruginosa Biofilms Grown on Live Human Airway Cells

Co-kültür Modelleri Pseudomonas aeruginosa</emCanlı İnsan Havayolu Hücreler Yetiştirilen> Biyofilmler

Bacterial biofilms have been associated with a number of different human diseases, but biofilm development has generally been studied on non-living ...

Pseudomonas aeruginosa and Saccharomyces cerevisiae Biofilm in Flow Cells

Pseudomonas aeruginosa and Saccharomyces cerevisiae Biofilm in Flow Cells

Pseudomonas aeruginosa ve Saccharomyces cerevisiae Biyofilm Akış Hücreler

Many microbial cells have the ability to form sessile microbial communities defined as biofilms that have altered physiological and pathological ...

RNA Isolation of Pseudomonas aeruginosa Colonizing the Murine Gastrointestinal Tract

RNA Isolation of Pseudomonas aeruginosa Colonizing the Murine Gastrointestinal Tract

RNA İzolasyonu Pseudomonas aeruginosa Murin Gastrointestinal Yolu koloniler

Pseudomonas aeruginosa (PA) infections result in significant morbidity and mortality in hosts with compromised immune systems, such as patients with ...

Use of Artificial Sputum Medium to Test Antibiotic Efficacy Against Pseudomonas aeruginosa in Conditions More Relevant to the Cystic Fibrosis Lung

Use of Artificial Sputum Medium to Test Antibiotic Efficacy Against Pseudomonas aeruginosa in Conditions More Relevant to the Cystic Fibrosis Lung

Karşı Antibiyotik Etkinlik Test Yapay Balgam Orta Kullanımı<em&gt; Pseudomonas aeruginosa</em&gt; Kistik Fibrozis Akciğer Daha İlgili Koşullar

There  is growing concern about the relevance of in vitro antimicrobial  susceptibility tests when applied to isolates of P. aeruginosa from  cystic ...

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

Uzun Vadeli Kronik<em&gt; Pseudomonas aeruginosa</emFarelerde&gt; Havayolu Enfeksiyon

A mouse model of chronic airway infection is a key asset in cystic fibrosis (CF) research, although there are a number of concerns regarding the model ...

Pseudomonas aeruginosa Induced Lung Injury Model

Pseudomonas aeruginosa Induced Lung Injury Model

Pseudomonas aeruginosa Kaynaklı Akciğer Hasarı Modeli

In order to study human acute lung injury and pneumonia, it is important to develop animal models to mimic various pathological features of this disease. ...

Studying Microbial Communities In Vivo: A Model of Host-mediated Interaction Between Candida Albicans and Pseudomonas Aeruginosa in the Airways

Studying Microbial Communities In Vivo: A Model of Host-mediated Interaction Between Candida Albicans and Pseudomonas Aeruginosa in the Airways

Mikrobiyal Toplulukları incelenmesi<em&gt; İn Vivo</em&gt;: Arası Ana aracılı Etkileşim Modeli<em&gt; Candida albicans</em&gt; Ve<em&gt; Pseudomonas aeruginosa</em&gt; Airways

Studying host-pathogen interaction enables us to understand the underlying mechanisms of the pathogenicity during microbial infection. The prognosis of ...

Come to the Light Side: In Vivo Monitoring of Pseudomonas aeruginosa Biofilm Infections in Chronic Wounds in a Diabetic Hairless Murine Model

Come to the Light Side: In Vivo Monitoring of Pseudomonas aeruginosa Biofilm Infections in Chronic Wounds in a Diabetic Hairless Murine Model

Işık tarafa: In Vivo izleme bir diyabetik tüysüz fare modelinde kronik yaralarda Pseudomonas aeruginosa biyofilm enfeksiyonların

The presence of bacteria as structured biofilms in chronic wounds, especially in diabetic patients, is thought to prevent wound healing and resolution. ...

Methods for Detecting Cytotoxic Amyloids Following Infection of Pulmonary Endothelial Cells by Pseudomonas aeruginosa

Methods for Detecting Cytotoxic Amyloids Following Infection of Pulmonary Endothelial Cells by Pseudomonas aeruginosa

Yöntemleri için algılama sitotoksik Amyloids aşağıdaki enfeksiyon pulmoner endotel hücre Pseudomonas aeruginosa tarafından

Patients who survive pneumonia have elevated death rates in the months following hospital discharge. It has been hypothesized that infection of pulmonary ...

Generation of In-Frame Gene Deletion Mutants in Pseudomonas aeruginosa and Testing for Virulence Attenuation in a Simple Mouse Model of Infection

Generation of In-Frame Gene Deletion Mutants in Pseudomonas aeruginosa and Testing for Virulence Attenuation in a Simple Mouse Model of Infection

Pseudomonas aeruginosa In-Frame Gen Silme Mutantlar Üretimi ve Enfeksiyon Basit Bir Fare Modelinde Virülans Zayıflama sıiçin Test

Microorganisms are genetically versatile and diverse and have become a major source of many commercial products and biopharmaceuticals. Though some of ...