Name: monocular visual deprivation and ocular dominance plasticity measurement in the mouse primary visual cortex
Uploaded: 2020-02-08T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Monocular Visual Deprivation and Ocular Dominance Plasticity Measurement in the Mouse Primary Visual Cortex at JoVE.com

Это исследование было поддержано Национальным фондом естественных наук Китая (81571770, 81771925, 81861128001).

В этом протоколе, мышей C57Bl/6 мышки были получены от института животных лаборатории Академии медицинских наук Sichuan и стационара провинции Sichuan. Все процедуры по уходу за животными и экспериментальные процедуры были одобрены Институциональным комитетом по уходу и использованию животных...

<ol>
	<li>Hubel, D. H., Wiesel, T. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+monocular+deprivation+in+kittens.">Effects of monocular deprivation in kittens.</a> Naunyn-Schmiedebergs Archiv f&#252;r experimentelle Pathologie und Pharmakologie. 248 (6), 492-497 (1964).</li><li>Daw, N. W., Fox, K., Sato, H., Czepita, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Critical+period+for+monocular+deprivation+in+the+cat+visual+cortex.">Critical period for monocular deprivation in the cat visual cortex.</a> Journal of Neurophysiology. 67 (1), 197-202 (1992).</li><li>Guire, E. S., Lickey, M. E., Gordon, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Critical+period+for+the+monocular+deprivation+effect+in+rats:+assessment+with+sweep+visually+evoked+potentials.">Critical period for the monocular deprivation effect in rats: assessment with sweep visually evoked potentials.</a> Journal of Neurophysiology. 81 (1), 121-128 (1999).</li><li>Wang, L., Sarnaik, R., Rangarajan, K. V., Liu, X., Cang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+receptive+field+properties+of+neurons+in+the+superficial+superior+colliculus+of+the+mouse.">Visual receptive field properties of neurons in the superficial superior colliculus of the mouse.</a> Journal of Neuroscience. 30 (49), 16573-16584 (2010).</li><li>Niell, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+Types,+circuits,+and+receptive+fields+in+the+mouse+visual+cortex.">Cell Types, circuits, and receptive fields in the mouse visual cortex.</a> Annual Review of Neuroscience. 38 (1), 413-431 (2015).</li><li>Lee, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+specific+interneurons+improves+V1+feature+selectivity+and+visual+perception.">Activation of specific interneurons improves V1 feature selectivity and visual perception.</a> Nature. 488 (8), 379-383 (2012).</li><li>Cossell, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+organization+of+excitatory+synaptic+strength+in+primary+visual+cortex.">Functional organization of excitatory synaptic strength in primary visual cortex.</a> Nature. 518 (2), 399-403 (2015).</li><li>Lacaruso, M. F., Gasler, L. T., Hofer, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+organization+of+visual+space+in+primary+visual+cortex.">Synaptic organization of visual space in primary visual cortex.</a> Nature. 547 (7), 449-452 (2017).</li><li>Metin, C., Godement, P., Imbert, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+primary+visual+cortex+in+the+mouse:+Receptive+field+properties+and+functional+organization.">The primary visual cortex in the mouse: Receptive field properties and functional organization.</a> Experimental Brain Research. 69 (3), 594-612 (1988).</li><li>Marshel, J. H., Garrett, M. E., Nauhaus, I., Callaway, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+specialization+of+seven+mouse+visual+cortical+areas.">Functional specialization of seven mouse visual cortical areas.</a> Neuron. 72 (6), 1040-1054 (2011).</li><li>Gordon, J. A., Stryker, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experience-dependent+plasticity+of+binocular+responses+in+the+primary+visual+cortex+of+the+mouse.">Experience-dependent plasticity of binocular responses in the primary visual cortex of the mouse.</a> The Journal of Neuroscience. 16 (10), 3274-3286 (1996).</li><li>McGee, A. W., Yang, Y., Fischer, Q. S., Daw, N. W., Strittmatter, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experience-driven+plasticity+of+visual+cortex+limited+by+myelin+and+Nogo+receptor.">Experience-driven plasticity of visual cortex limited by myelin and Nogo receptor.</a> Science. 309 (5744), 2222-2226 (2005).</li><li>Sawtell, N. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NMDA+receptor-dependent+ocular+dominance+plasticity+in+adult+visual+cortex.">NMDA receptor-dependent ocular dominance plasticity in adult visual cortex.</a> Neuron. 38 (6), 977-985 (2003).</li><li>Hofer, S. B., Mrsic-Flogel, T. D., Bonhoeffer, T., Hubener, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prior+experience+enhances+plasticity+in+adult+visual+cortex.">Prior experience enhances plasticity in adult visual cortex.</a> Nature Neuroscience. 9 (12), 127-132 (2006).</li><li>Crozier, R. A., Wang, Y., Liu, C., Bear, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deprivation-induced+synaptic+depression+by+distinct+mechanisms+in+different+layers+of+mouse+visual+cortex.">Deprivation-induced synaptic depression by distinct mechanisms in different layers of mouse visual cortex.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 104 (4), 1383-1388 (2007).</li><li>Tagawa, Y., Kanold, P. O., Majdan, M., Shatz, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+periods+of+functional+ocular+dominance+plasticity+in+mouse+visual+cortex.">Multiple periods of functional ocular dominance plasticity in mouse visual cortex.</a> Nature Neuroscience. 8 (3), 380-388 (2005).</li><li>Lickey, M. E., Pham, T. A., Gordon, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Swept+contrast+visual+evoked+potentials+and+their+plasticity+following+monocular+deprivation+in+mice.">Swept contrast visual evoked potentials and their plasticity following monocular deprivation in mice.</a> Vision Research. 44, 3381-3387 (2004).</li><li>Cang, J., Kalatsky, V. A., Lowel, S., Stryker, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+imaging+of+the+intrinsic+signal+as+a+measure+of+cortical+plasticity+in+the+mouse.">Optical imaging of the intrinsic signal as a measure of cortical plasticity in the mouse.</a> Vision Neuroscience. 22 (5), 685-691 (2005).</li><li>Khan, I. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+different+suturing+techniques+for+cystotomy+closure+in+canines.">Evaluation of different suturing techniques for cystotomy closure in canines.</a> Journal of Animal &amp; Plant Sciences. 23 (4), 981-985 (2013).</li><li>Weisman, D. L., Smeak, D. D., Birchard, S. J., Zweigart, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+a+continuous+suture+pattern+with+a+simple+interrupted+pattern+for+enteric+closure+in+dogs+and+cats:+83+cases+(1991-1997).">Comparison of a continuous suture pattern with a simple interrupted pattern for enteric closure in dogs and cats: 83 cases (1991-1997).</a> Journal of the American Veterinary Medical Association. 214 (10), 1507-1510 (1999).</li><li>Heneghan, C. P. H., Thornton, C., Navaratnarajah, M., Jones, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+isoflurane+on+the+auditory+evoked+response+in+man.">Effect of isoflurane on the auditory evoked response in man.</a> BJA: British Journal of Anaesthesia. 59 (3), 277-282 (1987).</li><li>Mitzdorf, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+source-density+method+and+application+in+cat+cerebral+cortex:+investigation+of+evoked+potentials+and+EEG+phenomenal.">Current source-density method and application in cat cerebral cortex: investigation of evoked potentials and EEG phenomenal.</a> Physiological Reviews. 65 (1), 37-100 (1985).</li></ol>

Мы представляем подробный протокол для MD и измерения пластичности OD с помощью записи одного блока. Этот протокол широко используется в зрительной нейронауке. Хотя протокол MD не является сложным, Есть некоторые критические хирургические процедуры, которые должны соблюдаться тщательно...

Монокулярная визуальная депривация является отличной экспериментальной парадигмой для изучения пластичности V1. Чтобы изучить важность визуального опыта в нервном развитии, Дэвид Хубэль и Торстен Визель1,2 лишили котят нормального зрения на один глаз в различные моменты времени и в течение различных периодов времени. Затем они наблюдали изменения интенсивности реакции в V1 для обездоленных и необездоеденных глаз. Их результаты показали аномально низкое число нейронов, реагирующих на глаз, который был зашивается закрыты в первые три месяца. Тем не менее, ответы от нейронов в котят остались идентичныво во всех отношениях, чтобы те из нормального взрослого кошачьего глаза, который был зашепан закрыты в течение года, и котята не восстановить. MD у взрослых кошек не может вызвать ПРО пластичности. Таким образом, влияние визуального опыта на проводку V1 сильно во время краткой, четко определенной фазы развития, до и после чего те же стимулы имеют меньшее влияние. Такая фаза повышенной восприимчивости к визуальному вхожжью известна как критический период в зрительной коре.
Хотя мышь ночная животное, отдельные нейроны в мыши V1 имеют сходные свойства с нейронами, найденными у кошек3,4,5. В последние годы, с быстрым развитием трансгенных технологий, все большее число исследований в области визуальной нейронауки использовали мышей в качестве экспериментальной модели6,7,8. В мышах визуальных исследований, нейробиологи используют мутантов и нокаут мыши линий, которые позволяют контролировать генетический состав мышей. Хотя мышам V1 не хватает OD колонны, одиночные нейроны в бинокулярной зоне V1 показывают значительные свойства OD. Например, большинство клеток более сильно реагируют на контралатеральную стимуляцию, чем на ипсилатеральную стимуляцию. Временное закрытие одного глаза в критический период вызывает значительный сдвиг в распределении индекса OD9,10,11. Таким образом, MD может быть использован для создания модели пластичности OD для исследования того, как гены, участвующие в нервных расстройств развития влияют на корковую пластичность in vivo.
Здесь мы внедряем экспериментальный метод md и предлагаем широко используемый метод (электрофизиологическая запись) для анализа изменений в пластичности ОД во время монокулярной визуальной депривации. Метод широко используется во многих лабораториях уже более 20 лет12,13,14,15,16. Есть и другие методы, используемые в измерении пластичности ОД, а также, такие как хронические визуальные вызвал потенциал (VEP) записи17, и внутреннее оптическое изображение (IOI)18. Существенным преимуществом этого острого метода является то, что его легко следовать, и результаты удивительно надежны.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>502 glue</td>
			<td>M&#38;G Chenguang Stationery Co., Ltd.</td>
			<td>AWG97028</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acquizition card</td>
			<td>National Instument</td>
			<td>PCI-6250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose</td>
			<td>Biowest</td>
			<td>G-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amplifier</td>
			<td>A-M system</td>
			<td>Model 1800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atropine</td>
			<td>Aladdin Bio-Chem Technology Co., Ltd</td>
			<td>A135946-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brain Stereotaxic Apparatus</td>
			<td>RWD Life Science Co.,Ltd</td>
			<td>68001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cohan-Vannas spring scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15000-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Contact Lenses Solutions</td>
			<td>Beijing Dr. Lun Eye Care Products Co., Ltd.</td>
			<td>GM17064</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs</td>
			<td>Henan Guangderun Medical Instruments Co.,Ltd</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine needle holder</td>
			<td>SuZhou Stronger Medical Instruments Co.,Ltd</td>
			<td>CZQ1370</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forcep</td>
			<td>66 Vision Tech Co., Ltd.</td>
			<td>53320A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forcep</td>
			<td>66 Vision Tech Co., Ltd.</td>
			<td>53072</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forcep</td>
			<td>66 Vision Tech Co., Ltd.</td>
			<td>#5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>Stryker</td>
			<td>TP 700 T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Illuminator</td>
			<td>Motic China Group Co., Ltd.</td>
			<td>MLC-150C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>RWD Life Science Co.,Ltd</td>
			<td>R510-22</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LCD monitor</td>
			<td>Philips (China) Investment Co., Ltd.</td>
			<td>39PHF3251/T3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>SOPTOP</td>
			<td>SZMT1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Noninvasive Vital Signs Monitor</td>
			<td>Mouseox</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oil hydraulic micromanipulator</td>
			<td>NARISHIGE International Ltd.</td>
			<td>PC-5N06022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petrolatum Eye Gel</td>
			<td>Dezhou Yile Disinfection Technology Co., Ltd.</td>
			<td>17C801</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spike2</td>
			<td>Cambridge Electronic Design, Cambridge, UK</td>
			<td>Spike2 Version 9</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical scissors</td>
			<td>66 Vision Tech Co., Ltd.</td>
			<td>54010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical scissors</td>
			<td>66 Vision Tech Co., Ltd.</td>
			<td>54002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture Needle</td>
			<td>Ningbo Medical Co.,Ltd</td>
			<td>3/8 arc 2.5*8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tungsten Electrode</td>
			<td>FHC, Inc</td>
			<td>L504-01B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylocaine</td>
			<td>Huaqing</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

monocular visual deprivation and ocular dominance plasticity measurement in the mouse primary visual cortex

Монокулярная лишение зрения является отличной экспериментальной парадигмой, чтобы вызвать первичной зрительной корковой реакции пластичности. В целом, реакция коры на контралатеральный глаз на стимул гораздо сильнее, чем реакция ипсилатерального глаза в бинокулярном сегменте первичной зрительной коры мыши (V1). В критический период млекопитающих, зашивание контралатерального глаза приведет к быстрой потере отзывчивости клеток V1 к контралатеральной стимуляции глаз. С продолжающимся развитием трансгенных технологий, все больше и больше исследований используют трансгенных мышей в качестве экспериментальных моделей для изучения влияния конкретных генов на глазное доминирование (OD) пластичность. В этом исследовании мы вводим подробные протоколы для монокулярной визуальной депривации и вычисляем изменения в пластичности OD в мыши V1. После монокулярной депривации (MD) в течение 4 дней в критический период измеряются кривые настройки ориентации каждого нейрона, а кривые настройки четырех нейронов уровня в V1 сравниваются между стимуляцией ипсилатеральных и контралатеральных глаз. Контралатеральный индекс смещения (CBI) может быть рассчитан с помощью глазной оценки OD каждой клетки, чтобы указать степень пластичности OD. Этот экспериментальный метод важен для изучения нейронных механизмов пластичности ОД в критический период и для съемки роли конкретных генов в нервном развитии. Основным ограничением является то, что острое исследование не может исследовать изменения в нервной пластичности одной и той же мыши в разное время.

Экспериментальные результаты, описанные здесь, позволяют успешно измерять пластичность MD и OD из обездоленной и нелишенной мыши в критический период (P19-P32). На рисунке 1 показано, как выполнять записи одного блока в слое 4 из V1 бинокль зоны для сравнения ответов в ipsilateral и к...

Watch this Scientific Journal Video about Monocular Visual Deprivation and Ocular Dominance Plasticity Measurement in the Mouse Primary Visual Cortex at JoVE.com

Monocular Visual Deprivation and Ocular Dominance Plasticity Measurement in the Mouse Primary Visual Cortex

Здесь мы представляем подробные протоколы для монокулярной визуализации зрения и анализа пластики глазного доминирования, которые являются важными методами для изучения нейронных механизмов визуальной пластичности в критический период и влияния специфических генов на визуальное развитие.

Монокулярный визуальный лишение и глазной доминирование Пластика Измерения в мыши первичной визуальной коры

Monocular visual deprivation is an excellent experimental paradigm to induce primary visual cortical response plasticity. In general, the response of the ...

Монокулярная зрительная депривация является отличным экспериментальным протоколом, чтобы вызвать первичную пластичность зрительного кортикальной реакции. Как правило, нейроны в бинокулярном сегменте первичной зрительной коры у мыши реагируют примерно в два раза сильнее на стимуляцию контралатерального глаза, чем на ипсилатеральный глаз. Тем не менее, швы закрыли контралатеральный глаз в критический период для глазного доминирования пластичности привести к быстрой потере отзывчивости нейронов V1 к контралатеральной стимуляции глаз, а также последующее увеличение в ответ на ипсилатеральный глаз.Здесь мы вводим экспериментальный протокол для монокулярных лишений и предлагаем широко используемый метод для анализа тенденции в глазное доминирование во время зрительных лишений. Положите хирургические инструменты в алюминиевую коробку и автоклав их под 120 градусов по Цельсию в течение получаса. Приготовьте раствор 2%agarose в чайнике для водяной ванны и держите его на уровне 75 градусов по Цельсию.Нанесите тонкий слой глазной мази на оба глаза. Под анатомическим микроскопом с подсветкой швы век. Сделайте около четырех швов.Сделайте два-три узла потока. Нанесите три микролитера мгновенного сушки клея 502 на голову узла, чтобы повысить устойчивость узла. Затем вырежьте нить как достаточно короткую.Когда мышь полностью проснется, поместите их в отделенную клетку. Перед электрофизиологической записью используйте изофлюран для анестезии мыши. Снимите швы и выставить глазное яблоко.Аккуратно обрежьте веко. Промыть глаза с контактными линзами решений и проверить глаза на ясность. Использовать можно только мышь с хорошим состоянием глазных яблок.После анестезии мыши поместите мышь на стереотаксис. Используйте грелку для поддержания температуры тела на протяжении всей процедуры. Нанесите мазь глаза на поверхность глаз, чтобы держать его влажным.Удалите волосы мыши, чтобы разоблачить ее кожу. Incise восемь миллиметров умножается на восемь миллиметров области кожи между обоими ушами, чтобы разоблачить череп и удалить ткани головы. Затем удалите чрезмерно соединительной ткани с перекисью водорода.Просверлите отверстие в черепе над мозжечок. Зафиксните небольшой костной винт в отверстие в качестве эталона. Выполните небольшую краниотомию диаметром один миллиметр в бинокулярной области V1.Аккуратно удалите фрагмент черепа, не повреев мозгу. Обложка подвергаются корковой поверхности с 2%agarose для предотвращения высыхания. Зафиксните электрод вольфрама на стереотаксисной раме.Поместите электрод вольфрама вертикально на бинокулярную область V1, чтобы убедиться, что записанные клетки реагируют на оба глаза. Стимул разделен на 30 градусов в случайном блоке. В каждом измерении было представлено в общей сложности три-пять блоков.Маска один глаз с непрозрачной пластиковой пластины. Настоящее LCD1 для положения в 23 сантиметрах от глаз мыши. Предварительный микроэлектрод медленно масляным гидравлическим микроманипулятором.Остановить продвижение высокого сигнала шумоподавительных сигналов сигнала, когда электрод продвинулся до уровня четыре и начать измерение. Мы усиливаем активность шипов в 1000 раз и фильтруем ее от 300 до 10 килогерц, а затем пробуем на уровне 40 килогерц. Затем маскировать другой глаз и измерить реакцию контралатерального глаза.Сигналы, измеряемые одними электродами, являются деятельностью популяции. Используйте программное обеспечение для отдельных шипов различных ячеек. Во-первых, отфильтруй сигнал от 500 до 5000 герц.Установите два курсора, один для положительного отклонения и один для отрицательных шипов отклонения. Настройка шаблонов шипов. Установите область шаблонов, где она показывает наибольшую вариацию между различными классами шипов.Используйте анализ основных компонентов, чтобы разделить их на кластеры. Классифицируем шипы границы с помощью алгоритма K-средств. Соотносите ориентацию с скоростью стрельбы шипа и навяжите кривые настройки ориентации для ипсилатеральных и контралатеральных глаз.Затем вычислите индекс OD для одиночных ячеек, представляющий контралатеральный и ипсилатеральный ответ, назначьте оценку OD для каждой ячейки в соответствии с индексом OD. Рассчитайте индекс контралатерального смещения в соответствии с формулой. На этой диаграмме показано ориентационо-тюнинговые кривые ипсилатерального и контралатерального глаза в монокулярной лишенной и неописуемой мыши.Этот протокол позволяет успешно монокулярной зрительной депривации и глазного измерения доминирования от обездоленных и неотделимых мыши в критический период. Мы только что показали вам, как выполнить этот эксперимент, и мы проанализировали изменения в глазного доминирования во время зрительных лишений. В ходе эксперимента важно избегать инфекции в процессе занасывания и взаимодействия при электрофизиологической записи.Спасибо за просмотр нашего видео.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Production and Use of Lentivirus to Selectively Transduce Primary Oligodendrocyte Precursor Cells for In Vitro Myelination Assays

Production and Use of Lentivirus to Selectively Transduce Primary Oligodendrocyte Precursor Cells for In Vitro Myelination Assays

Производство и использование Лентивирус, чтобы выборочно преобразовывать Первичная олигодендроцитов клеток-предшественников для<em&gt; In Vitro</em&gt; миелинизации Анализы

Myelination is a complex process that involves both neurons and the myelin forming glial cells, oligodendrocytes in the central nervous system (CNS) and ...

Generating Primary Fibroblast Cultures from Mouse Ear and Tail Tissues

Создание первичного фибробластов Культуры с уха мыши и хвост тканей

Primary cells are derived directly from tissue and are thought to be more representative of the physiological state of cells in vivo than established cell ...

Live Imaging of Mouse Secondary Palate Fusion

Живая визуализация мышей

The fusion of the secondary palatal shelves to form the intact secondary palate is a key process in mammalian development and its disruption can lead to ...

Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains

Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains

Рассечение и Immunofluorescent окрашивание гриб тело и фоторецепторных нейронов в мозге взрослого Drosophila melanogaster

Nervous system development involves a sequential series of events that are coordinated by several signaling pathways and regulatory networks. Many of the ...

Evaluation of Injury-induced Senescence and In Vivo Reprogramming in the Skeletal Muscle

Evaluation of Injury-induced Senescence and In Vivo Reprogramming in the Skeletal Muscle

Оценка травмы индуцированного старения и в естественных условиях перепрограммирования в скелетных мышцах

Cellular senescence is a stress response that is characterized by a stable cellular growth arrest, which is important for many physiological and ...

Multi-Photon Time Lapse Imaging to Visualize Development in Real-time: Visualization of Migrating Neural Crest Cells in Zebrafish Embryos

Мульти Фотон время Замедленная съемка изображений для визуализации в режиме реального времени разработки: Визуализация миграции клеток нервной гребень в Zebrafish эмбриона

Congenital eye and craniofacial anomalies reflect disruptions in the neural crest, a transient population of migratory stem cells that give rise to ...

Culturing of Retinal Pigment Epithelial Cells on an Ex Vivo Model of Aged Human Bruch's Membrane

Culturing of Retinal Pigment Epithelial Cells on an Ex Vivo Model of Aged Human Bruch's Membrane

Культивирование клеток эпителия сетчатки пигментного модель Ex Vivo мембраны Бруха возрасте человека на

Aside from vitamins and antioxidants recommended by the Age-Related Eye Disease Study, there is no effective therapy for &#34;dry,&#34;&#160;or atrophic ...

Induction and Validation of Cellular Senescence in Primary Human Cells

Индукция и проверки клеточного старения в первичных клеток человека

Cellular senescence is a state of permanent cell cycle arrest activated in response to different damaging stimuli. Activation of cellular senescence is a ...

Visualizing the Node and Notochordal Plate In Gastrulating Mouse Embryos Using Scanning Electron Microscopy and Whole Mount Immunofluorescence

Визуализация узлов и Notochordal пластины в Gastrulating эмбрионов мыши, используя растровая электронная микроскопия и вся гора иммунофлуоресценции

The post-implantation mouse embryo undergoes major shape changes after the initiation of gastrulation and morphogenesis. A hallmark of morphogenesis is ...

Visualization of the Superior Ocular Sulcus during Danio rerio Embryogenesis

Visualization of the Superior Ocular Sulcus during Danio rerio Embryogenesis

Визуализация глазной борозды Superior во время эмбриогенеза данио рерио

Congenital ocular coloboma is a genetic disorder that is typically observed as a cleft in the inferior aspect of the eye resulting from incomplete choroid ...