Name: monitoring pd-1-blocking antibodies bound to t cells derived from a drop of peripheral blood
Uploaded: 2020-02-05T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Monitoring PD-1-Blocking Antibodies Bound to T Cells Derived from a Drop of Peripheral Blood at JoVE.com

تم دعم هذا العمل من خلال منح إلى S.K. من الجمعية اليابانية لتعزيز العلوم KAKENHI (JP17K16045) والوكالة اليابانية للبحث والتطوير الطبي (JP18cm0106335 و 19cm0106310).

تم إجراء أخذ العينات أثناء الإجراءات السريرية الروتينية. وتم الحصول على جميع العينات البشرية بعد أن قدم الأشخاص الموافقة المستنيرة، وفقا لإعلان هلسنكي وبموافقة مجلس المراجعة الأخلاقية لكلية الطب العليا، جامعة أوساكا، اليابان (15383 و 752).
1. إعداد عينة الدم كله وتلطيخ
<ol><li>جم...

<ol>
	<li>Gong, J., Chehrazi-Raffle, A., Reddi, S., Salgia, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+PD-1+and+PD-L1+inhibitors+as+a+form+of+cancer+immunotherapy:+a+comprehensive+review+of+registration+trials+and+future+considerations.">Development of PD-1 and PD-L1 inhibitors as a form of cancer immunotherapy: a comprehensive review of registration trials and future considerations.</a> Journal for ImmunoTherapy of Cancer. 6 (1), 8 (2018).</li><li>Borghaei, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nivolumab+versus+Docetaxel+in+Advanced+Nonsquamous+Non-Small-Cell+Lung+Cancer.">Nivolumab versus Docetaxel in Advanced Nonsquamous Non-Small-Cell Lung Cancer.</a> The New England Journal of Medicine. 373 (17), 1627-1639 (2015).</li><li>Brahmer, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nivolumab+versus+Docetaxel+in+Advanced+Squamous-Cell+Non-Small-Cell+Lung+Cancer.">Nivolumab versus Docetaxel in Advanced Squamous-Cell Non-Small-Cell Lung Cancer.</a> The New England Journal of Medicine. 373 (2), 123-135 (2015).</li><li>Herbst, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pembrolizumab+versus+docetaxel+for+previously+treated,+PD-L1-positive,+advanced+non-small-cell+lung+cancer+(KEYNOTE-010):+a+randomised+controlled+trial.">Pembrolizumab versus docetaxel for previously treated, PD-L1-positive, advanced non-small-cell lung cancer (KEYNOTE-010): a randomised controlled trial.</a> The Lancet. 387 (10027), 1540-1550 (2016).</li><li>Postow, M. A., Sidlow, R., Hellmann, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune-Related+Adverse+Events+Associated+with+Immune+Checkpoint+Blockade.">Immune-Related Adverse Events Associated with Immune Checkpoint Blockade.</a> The New England Journal of Medicine. 378 (2), 158-168 (2018).</li><li>Weber, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+Profile+of+Nivolumab+Monotherapy:+A+Pooled+Analysis+of+Patients+With+Advanced+Melanoma.">Safety Profile of Nivolumab Monotherapy: A Pooled Analysis of Patients With Advanced Melanoma.</a> Journal of Clinical Oncology. 35 (7), 785-792 (2017).</li><li>Champiat, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Management+of+immune+checkpoint+blockade+dysimmune+toxicities:+a+collaborative+position+paper.">Management of immune checkpoint blockade dysimmune toxicities: a collaborative position paper.</a> Annals of Oncology. 27 (4), 559-574 (2016).</li><li>Brahmer, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phase+I+study+of+single-agent+anti-programmed+death-1+(MDX-1106)+in+refractory+solid+tumors:+safety,+clinical+activity,+pharmacodynamics,+and+immunologic+correlates.">Phase I study of single-agent anti-programmed death-1 (MDX-1106) in refractory solid tumors: safety, clinical activity, pharmacodynamics, and immunologic correlates.</a> Journal of Clinical Oncology. 28 (19), 3167-3175 (2010).</li><li>Bommareddy, P. K., Lowe, D. B., Kaufman, H. L., Rabkin, S. D., Saha, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multi-parametric+flow+cytometry+staining+procedure+for+analyzing+tumor-infiltrating+immune+cells+following+oncolytic+herpes+simplex+virus+immunotherapy+in+intracranial+glioblastoma.">Multi-parametric flow cytometry staining procedure for analyzing tumor-infiltrating immune cells following oncolytic herpes simplex virus immunotherapy in intracranial glioblastoma.</a> Journal of Biological Methods. 6 (2), 112 (2019).</li><li>Osa, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+implications+of+monitoring+nivolumab+immunokinetics+in+non-small+cell+lung+cancer+patients.">Clinical implications of monitoring nivolumab immunokinetics in non-small cell lung cancer patients.</a> JCI Insight. 3 (19), 59125 (2018).</li><li>Zelba, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accurate+quantification+of+T-cells+expressing+PD-1+in+patients+on+anti-PD-1+immunotherapy.">Accurate quantification of T-cells expressing PD-1 in patients on anti-PD-1 immunotherapy.</a> Cancer Immunology, Immunotherapy. 67 (12), 1845-1851 (2018).</li><li>Simoni, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bystander+CD8(+)+T+cells+are+abundant+and+phenotypically+distinct+in+human+tumour+infiltrates.">Bystander CD8(+) T cells are abundant and phenotypically distinct in human tumour infiltrates.</a> Nature. 557 (7706), 575-579 (2018).</li><li>Chiu, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+general+method+for+quantifying+IgG-based+therapeutic+monoclonal+antibodies+in+human+plasma+using+protein+G+purification+coupled+with+a+two+internal+standard+calibration+strategy+using+LC-MS/MS.">Development of a general method for quantifying IgG-based therapeutic monoclonal antibodies in human plasma using protein G purification coupled with a two internal standard calibration strategy using LC-MS/MS.</a> Analytica Chimica Acta. 1019, 93-102 (2018).</li></ol>

في هذه المقالة ، نبلغ عن طريقة تستخدم مقياس التدفق الخلوي للكشف عن الأجسام المضادة PD-1 - حظر مرتبطة بالخلايا التائية المشتقة من قطرة من الدم المحيطي ، والتي طورناها في الأصل للكشف عن nivolumab10. على الرغم من أن هذه التقنية بسيطة جدا وسهلة الأداء، ينبغي ملاحظة نقطتين مهمتين من أجل ال...

PD-1-حظر الأجسام المضادة أصبحت الخيار القياسي لعلاج أنواع مختلفة من السرطان، بما في ذلك سرطان الرئة الخلايا غير الصغيرة (NSCLC)1،2،3،4. أنها تظهر تأثير علاجي ملحوظ في مجموعة فرعية من مرضى السرطان الذين لم يستجيبوا للعلاج الكيميائي السامة للخلايا التقليدية. ومع ذلك ، يمكن أن تسبب مثبطات نقاط التفتيش المناعية (ICIs) ، والتي تشمل PD-1 - الأجسام المضادة المانعة ، طيفًا فريدًا ومتميزًا من الأحداث الضائرة ، التي يطلق عليها الأحداث الضائرة المرتبطة بالمناعة (irAEs)5. على الرغم من أن irAEs يمكن أن تؤثر على جميع الأنسجة تقريبًا ، إلا أنها لوحظت بشكل شائع في الجهاز الهضمي والغدد الصماء والجلد والكبد ، ويمكن أن تسبب الطفح الجلدي والغثيان والإسهال واضطرابات الغدة الدرقية6،7. بشكل عام ، تظهر معظم irAEs في غضون شهر إلى شهرين بعد بدء ICIs. ومع ذلك ، في بعض الحالات ، يمكن أن تحدث بعد عام واحد من بداية العلاج أو حتى بعد توقف العلاج6،7. كما أنها تسبب أعراضًا مختلفة قد يكون من الصعب التمييز بينها والأمراض الأخرى. وبالتالي، يمكن أن يكون من الصعب تشخيص irAEs على وجه السرعة ومعالجتها بشكل مناسب. يمكن أن تؤثر الـ irAEs على جميع الأنسجة ، ويتأثر ظهورها بشدة بالخلايا المناعية المتداولة ، وخاصة الخلايا التائية المرتبطة بالأجسام المضادة المانعة PD-1. لذلك ، من المهم في البيئات السريرية وجود طريقة مباشرة وطفيفة التوغل لمراقبة الخلايا التائية المستهدفة بالأجسام المضادة.
هنا ، قمنا بتطوير طريقة بسيطة لتقييم ربط PD-1 -حظر الأجسام المضادة للخلايا التائية باستخدام قطرة من الدم كله المحيطي من مرضى السرطان الذين تلقوا nivolumab أو pembrolizumab. باستخدام هذا النهج، تمكنا من رصد كل من التالي: 1) مدة الأجسام المضادة ملزمة للخلايا التائية، 2) شغل جزيئات الخلايا التائية PD-1 بواسطة الأجسام المضادة العلاجية، و 3) حالة التنشيط والميزات المناعية للخلايا التائية. هذا الأسلوب هو تعديل تقنية تم الإبلاغ عنها مسبقاً8. كمية الدم المطلوبة هي تقريبا نفس اللازمة لاختبار الجلوكوز، والنهج لا يتطلب إثراء الخلايا أحادية النواة أو المشاركة في الاستزراع مع PD-1-حجب الأجسام المضادة. أكدنا أن هذه الطريقة يمكن أيضا أن يتم باستخدام عينات مجمدة، بما في ذلك خلايا الدم الطرفية أحادية النواة (PBMCs) وخلايا من الانصباب الجنبي، والانصباب التاموي، وسائل اللاعال القصبي، والسائل النخاعي، مما يشير إلى أن هذه الاستراتيجية قد تكون مفيدة في سياق دراسة متعددة المراكز. قد تسهل هذه الطريقة التشخيص المبكر للـ irAEs ، وتساعد أيضًا على تحديد العلاجات المثبطة للمناعة المناسبة للسيطرة على أعراضها وتحديد الأوقات المثلى لبدء العلاجات اللاحقة بعد مثبطات PD-1.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>10X RBC Lysis Buffer (Multi-species)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>00-4300-54</td>
			<td>50 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>APC/Cyanine7 anti-human CD4 Antibody</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>300518</td>
			<td>Clone RPA-T4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACS Canto II Flow Cytometer</td>
			<td>BD</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brilliant Violet 510 anti-human CD8a Antibody</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>301048</td>
			<td>Clone RPA-T8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Phosphate Buffered Saline</td>
			<td>nacalai tesque</td>
			<td>14249-95</td>
			<td>500 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon Round-Bottom Polystyrene Tubes</td>
			<td>STEMCELL Technologies</td>
			<td>352058</td>
			<td>5 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FcR Blocking Reagent, human</td>
			<td>Miltenyi Biotec</td>
			<td>130-059-901</td>
			<td>2 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FLOWJO</td>
			<td>BD</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gibco Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>12676029</td>
			<td>500 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse IgG1 monoclonal - Isotype control</td>
			<td>abcam</td>
			<td>ab81200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse monoclonal Anti-Human IgG4 Fc</td>
			<td>abcam</td>
			<td>ab99825</td>
			<td>Clone HP6025</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pacific Blue Mouse Anti-Human CD3</td>
			<td>BD</td>
			<td>558117</td>
			<td>Clone UCHT1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-Cy7 Mouse anti-Human CD279 (PD-1)</td>
			<td>BD</td>
			<td>561272</td>
			<td>Clone EH12.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-Cy7 Mouse IgG1 &#954; Isotype Control</td>
			<td>BD</td>
			<td>557646</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

monitoring pd-1-blocking antibodies bound to t cells derived from a drop of peripheral blood

مثبطات نقطة التفتيش المناعية، بما في ذلك PD-1-حجب الأجسام المضادة، قد تحسنت بشكل كبير نتائج العلاج في أنواع مختلفة من السرطان. الفعالية الدوائية لهذه العلاجات المناعية طويلة الأمد ، وتمتد حتى إلى ما بعد توقف حقنها ، بسبب تركيزات الدم المستمرة. هنا قمنا بتطوير اختبار التدفق الخلوي البسيط لتقييم حالة ربط الخلية T للأجسام المضادة PD-1-حظر nivolumab وpembrolizumab. مثل اختبار الجلوكوز، يتطلب هذا الفحص قطرة واحدة فقط من الدم المحيطي. تصور الأجسام المضادة ملزمة على الخلايا التائية هو أكثر موثوقية من قياس تركيزات الدم الأجسام المضادة. بالإضافة إلى ذلك ، إذا لزم الأمر ، يمكننا تحليل العديد من العلامات المميزة المتعلقة بالمناعة على الخلايا التائية المرتبطة بالأجسام المضادة لحجب PD-1. وبالتالي ، هذه هي استراتيجية بسيطة وطفيفة التوغل لتحليل التأثير الدوائي للأجسام المضادة لمنع PD-1 في مرضى السرطان.

يمكن لاستراتيجية الجاتينغ وتحليل قياس الخلايا المتدفق(الشكل 1)الكشف عن الأجسام المضادة المانعة PD-1 الملزمة للخلايا التائية التي تم الحصول عليها من قطرة من الدم المحيطي المريض NSCLC. قبل أن يتم إعطاء PD-1-حظر الأجسام المضادة، لا توجد خلايا CD8 أو CD4 T بشرية IGG4 إيجابية، ويمكن تأكيد ?...

Watch this Scientific Journal Video about Monitoring PD-1-Blocking Antibodies Bound to T Cells Derived from a Drop of Peripheral Blood at JoVE.com

Monitoring PD-1-Blocking Antibodies Bound to T Cells Derived from a Drop of Peripheral Blood

لقد طورنا فحصًا بسيطًا للتدفق الخلوي لتقييم ربط الأجسام المضادة لحجب PD-1 بالخلايا التائية ، مما يتطلب فقط قطرة من الدم المحيطي من مرضى السرطان.

رصد PD-1-حظر الأجسام المضادة ملزمة الخلايا التائية المستمدة من قطرة من الدم المحيطي

Immune checkpoint inhibitors, including PD-1&#8211;blocking antibodies, have significantly improved treatment outcomes in various types of cancer. The ...

لأن هذه الطريقة تحدد الخلايا المضادة للأجسام المضادة التي تمنع PD-1 باستخدام الدم المحيطي من المرضى، يمكن تحديد المجموعة الفرعية المحددة المسؤولة عن تأثيرات مضادات الوفاة والأحداث الضائرة المرتبطة بالمناعة. هذه الطريقة تحتاج فقط كمية صغيرة من عينة الدم وعملية التحليل بسيطة إلى حد ما وسريعة. انها تحتاج فقط إلى آلة تدفق القياسات.للبدء، جمع عينات الدم الكامل في أنابيب جمع الدم التي تحتوي على EDTA. علاج كل خمسة ملليلتر جولة أسفل البوليسترين تدفق أنبوب الخلايا مع ملليلتر واحد من مصل الأبقار الجنين 2٪ في برنامج تلفزيوني. دوامة لمدة 10 ثوان.ثم نقل 20 ميكرولترات من عينات الدم كله إلى معالجة خمسة ملليلتر أنابيب القاع الجولة. إضافة 20 microliters من 2٪ FBS في برنامج تلفزيوني و 10 ميكرولترات من مستقبلات FC محددة الإنسان منع الكاشف. اخلطي جيداً وينبيها لمدة 15 دقيقة في درجة حرارة الغرفة.المقبل، إضافة 500 ميكرولترات من خلايا الدم الحمراء العازلة. اخلطي جيداً وينكضن لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة. إضافة أربعة ملليلترات من 2٪ FBS في برنامج تلفزيوني وتدور أسفل الخلايا في 400 مرات ز لمدة خمس دقائق في أربع درجات مئوية.إزالة المناط من الطموح. كرر عملية الغسيل والتطلع. إعادة تعليق الخلايا في 100 ميكرولترات من 2٪ FBS في برنامج تلفزيوني وتقسيمها إلى أنبوبين من 50 ميكرولترات لكل منهما.إضافة الأجسام المضادة لعلامة السطح. اخلطي جيداً وينكضن لمدة 20 دقيقة في درجة حرارة الغرفة في الظلام. غسل العينات مرتين في 2٪ FBS في برنامج تلفزيوني كما كان سابقا.Resuspend الخلايا في 200 ميكرولترات من 2٪ FBS في برنامج تلفزيوني. أدخل الأنابيب في عداد الخلايا المتدفقة والحصول على الخلايا باتباع البروتوكول الموصى به. سجل 10، 000 الأحداث وبوابات الخلايا الليمفاوية وتدفق البيانات التصدير كملفات FCS للتحليل.فتح الملفات في برنامج التحليل وانقر على ملف عنصر تحكم isotype لتصور الخلايا على مبعثر إلى الأمام مقابل الجانب مؤامرة مبعثر وبوابات الخلايا الليمفاوية. حدد خلايا مفردة باستخدام FSCH مقابل FSCW و SSCH مقابل SSCW وعرضها على CD3 مقابل CD8 أو CD3 مقابل رسم CD4. بوابة CD8 T-الخلايا وCD4 الخلايا التائية على التوالي.حدد الخلايا المسور وعرضها على مخطط PD-1 مقابل IgG4 الإنسان. ثم استناداً إلى التحكم isotype، حدد Q3 لتحديد PD-1-حظر الأجسام المضادة ملزمة CD8 وCD4 الخلايا T-الخلايا. في هذه الدراسة، كشفت استراتيجية الغاء وتحليل تدفق قياس الخلايا PD-1-حظر الأجسام المضادة ملزمة للخلايا التائية التي تم الحصول عليها من قطرة دم المحيطية المريض.يُظهر مخطط PD-1 مقابل IgG4 البشري حالة الربط للأجسام المضادة المانعة لـ PD-1 على الخلايا التائية. تشير النقاط البرتقالية والنقاط السوداء إلى الأجسام المضادة IgG4 وتلوين التحكم في الأيزو نوع على التوالي. قبل أن تدار PD-1-حظر الأجسام المضادة, لم IgG4 الإنسان إيجابية CD8 أو CD4 الخلايا T-الخلايا كانت موجودة وتم تأكيد التعبير PD-1 من قبل جهاز مكافحة الأجسام المضادة الكشف PD-1.بعد nivolumab أو pembrolizumab الإدارة، يمكن الكشف عن IgG4 على الخلايا التائية من قبل المضادة IgG4 المضادة في حين أن PD-1 الكشف عن الأجسام المضادة EH12.1 لا تعترف أي PD-1 على الخلايا التائية. تشير البوابات الحمراء والزرقاء والأخضر إلى الربط الكامل والربط الجزئي وفقدان الربط على التوالي. بعد توقف المرضى nivolumab وpembrolizumab، انخفضت حالة الجسم المضاد PD-1 حظر ملزمة لCD8 الخلايا التائية.كان هناك ربط جزئي وأخيراً فقدان كامل للربط. يرجى التأكد من خلط عينة الدم مع تحلل RBC كذلك. أيضا، خلط تحلل RBC قبل تلطيخ علامة السطح هو الخطوة الرئيسية في هذه الطريقة.إذا كان الباحث لديه إمكانية الوصول إلى آلة متقدمة تدفق الخلايا الخلوية، PD-1 حظر الأجسام المضادة ملزمة الخلايا تي يمكن تقييمها مع علامات أكثر وأكثر ذات الصلة بهذه الاستراتيجية يمكن تطبيقها لتحديد الأنماط الظاهرية T-الخلية المسؤولة عن الأحداث السلبية الناجمة عن الأجسام المضادة PD-1-حظر. أخذ العينات من المرضى الذين يعانون من الأحداث السلبية المتقدمة مهم لتقييم فائدة هذه الاستراتيجية.

Research

JoVE Journal

Medicine

Rapid Point-of-Care Assay of Enoxaparin Anticoagulant Efficacy in Whole Blood

السريع في نقاط الفحص من كفاءة الرعاية تخثر الدم الكامل في Enoxaparin

There is the need for a clinical assay to determine the extent to which a patient's blood is effectively anticoagulated by the ...

Repair of a Critical-sized Calvarial Defect Model Using Adipose-derived Stromal Cells Harvested from Lipoaspirate

إصلاح نموذج الحرجة الحجم عيب قبي طريق الدهنية المشتقة من الخلايا اللحمية المقطوع Lipoaspirate

Craniofacial skeletal repair and regeneration offers the promise of de novo tissue formation through a cell-based approach utilizing stem cells. ...

High Throughput Sequential ELISA for Validation of Biomarkers of Acute Graft-Versus-Host Disease

عالية الإنتاجية ELISA متسلسل للتأكد من صحة العلامات الحيوية من الأمراض الطعم ضد المضيف الحاد

Unbiased discovery proteomics strategies have  the potential to identify large numbers of novel biomarkers that can improve  diagnostic and prognostic ...

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

العزلة، وتوصيف المقارن التمييز بين الخلايا الجذعية البشرية الأسنان اللب المستمدة من الأسنان الدائمة باستخدام طريقتين مختلفتين

Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Time-lapse Imaging of Primary Preneoplastic Mammary Epithelial Cells Derived from Genetically Engineered Mouse Models of Breast Cancer

الوقت الفاصل بين التصوير من الخلايا الثديية سابق للورم ظهاري الأولية المستمدة من نماذج الماوس المعدلة وراثيا لسرطان الثدي

Time-lapse  imaging can be used to compare behavior of cultured primary preneoplastic  mammary epithelial cells derived from different genetically ...

Orthotopic Implantation and Peripheral Immune Cell Monitoring in the II-45 Syngeneic Rat Mesothelioma Model

مثلي زرع والأجهزة الطرفية المناعي رصد خلية في نموذج II-45 مسانج الجرذ ورم الظهارة المتوسطة

The enormous upsurge of interest in immune-based treatments for cancer such as vaccines and immune checkpoint inhibitors, and increased understanding of ...

Generation of Prostate Cancer Patient Derived Xenograft Models from Circulating Tumor Cells

جيل من سرطان البروستاتا المريض المشتقة نماذج طعم أجنبي من تعميم الخلايا السرطانية

Patient derived xenograft (PDX) models are gaining popularity in cancer research and are used for preclinical drug evaluation, biomarker identification, ...

Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System

وكرر جمع الدم من الوريد الذيل من الفئران غير تخديره مع نظام لجمع دم فراغ

Blood can be collected from rats in a number of sampling locations. For instance, the tail vein is a superior location for blood sampling. However, the ...

Microelectrode Impalement Method to Record Membrane Potential from a Cannulated Middle Cerebral Artery

طريقة التكليك الكهربائي لتسجيل الغشاء المحتمل من شريان دماغي متوسط كانولاتيد

Membrane potential (Vm) of vascular smooth muscle cells determines vessel tone and thus blood flow to an organ. Changes in the expression and function of ...

Isolation of Adipose Derived Regenerative Cells for the Treatment of Erectile Dysfunction Following Radical Prostatectomy

عزل الخلايا التجديدية المشتقة من الدهون لعلاج ضعف الانتصاب بعد استئصال البروستاتا الجذري

Stem cells are used in many research areas within regenerative medicine in part because these treatments can be curative rather than symptomatic. Stem ...