Name: monitoring pd-1-blocking antibodies bound to t cells derived from a drop of peripheral blood
Uploaded: 2020-02-05T13:00:00
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इस काम को जापान सोसायटी फॉर द प्रमोशन ऑफ साइंस ककेन्ही (JP17K16045) और जापान एजेंसी फॉर मेडिकल रिसर्च एंड डेवलपमेंट (JP18cm0106335 और 19cm0106310) से एसके को अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था ।

नियमित नैदानिक प्रक्रियाओं के दौरान नमूना करण किया गया। हेलसिंकी की घोषणा के अनुसार और ग्रेजुएट स्कूल ऑफ मेडिसिन, ओसाका विश्वविद्यालय, जापान (15383 और 752) के नैतिक समीक्षा बोर्ड के अनुमोदन से विषयों द्वार?...

<ol>
	<li>Gong, J., Chehrazi-Raffle, A., Reddi, S., Salgia, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+PD-1+and+PD-L1+inhibitors+as+a+form+of+cancer+immunotherapy:+a+comprehensive+review+of+registration+trials+and+future+considerations.">Development of PD-1 and PD-L1 inhibitors as a form of cancer immunotherapy: a comprehensive review of registration trials and future considerations.</a> Journal for ImmunoTherapy of Cancer. 6 (1), 8 (2018).</li><li>Borghaei, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nivolumab+versus+Docetaxel+in+Advanced+Nonsquamous+Non-Small-Cell+Lung+Cancer.">Nivolumab versus Docetaxel in Advanced Nonsquamous Non-Small-Cell Lung Cancer.</a> The New England Journal of Medicine. 373 (17), 1627-1639 (2015).</li><li>Brahmer, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nivolumab+versus+Docetaxel+in+Advanced+Squamous-Cell+Non-Small-Cell+Lung+Cancer.">Nivolumab versus Docetaxel in Advanced Squamous-Cell Non-Small-Cell Lung Cancer.</a> The New England Journal of Medicine. 373 (2), 123-135 (2015).</li><li>Herbst, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pembrolizumab+versus+docetaxel+for+previously+treated,+PD-L1-positive,+advanced+non-small-cell+lung+cancer+(KEYNOTE-010):+a+randomised+controlled+trial.">Pembrolizumab versus docetaxel for previously treated, PD-L1-positive, advanced non-small-cell lung cancer (KEYNOTE-010): a randomised controlled trial.</a> The Lancet. 387 (10027), 1540-1550 (2016).</li><li>Postow, M. A., Sidlow, R., Hellmann, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune-Related+Adverse+Events+Associated+with+Immune+Checkpoint+Blockade.">Immune-Related Adverse Events Associated with Immune Checkpoint Blockade.</a> The New England Journal of Medicine. 378 (2), 158-168 (2018).</li><li>Weber, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+Profile+of+Nivolumab+Monotherapy:+A+Pooled+Analysis+of+Patients+With+Advanced+Melanoma.">Safety Profile of Nivolumab Monotherapy: A Pooled Analysis of Patients With Advanced Melanoma.</a> Journal of Clinical Oncology. 35 (7), 785-792 (2017).</li><li>Champiat, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Management+of+immune+checkpoint+blockade+dysimmune+toxicities:+a+collaborative+position+paper.">Management of immune checkpoint blockade dysimmune toxicities: a collaborative position paper.</a> Annals of Oncology. 27 (4), 559-574 (2016).</li><li>Brahmer, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phase+I+study+of+single-agent+anti-programmed+death-1+(MDX-1106)+in+refractory+solid+tumors:+safety,+clinical+activity,+pharmacodynamics,+and+immunologic+correlates.">Phase I study of single-agent anti-programmed death-1 (MDX-1106) in refractory solid tumors: safety, clinical activity, pharmacodynamics, and immunologic correlates.</a> Journal of Clinical Oncology. 28 (19), 3167-3175 (2010).</li><li>Bommareddy, P. K., Lowe, D. B., Kaufman, H. L., Rabkin, S. D., Saha, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multi-parametric+flow+cytometry+staining+procedure+for+analyzing+tumor-infiltrating+immune+cells+following+oncolytic+herpes+simplex+virus+immunotherapy+in+intracranial+glioblastoma.">Multi-parametric flow cytometry staining procedure for analyzing tumor-infiltrating immune cells following oncolytic herpes simplex virus immunotherapy in intracranial glioblastoma.</a> Journal of Biological Methods. 6 (2), 112 (2019).</li><li>Osa, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+implications+of+monitoring+nivolumab+immunokinetics+in+non-small+cell+lung+cancer+patients.">Clinical implications of monitoring nivolumab immunokinetics in non-small cell lung cancer patients.</a> JCI Insight. 3 (19), 59125 (2018).</li><li>Zelba, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accurate+quantification+of+T-cells+expressing+PD-1+in+patients+on+anti-PD-1+immunotherapy.">Accurate quantification of T-cells expressing PD-1 in patients on anti-PD-1 immunotherapy.</a> Cancer Immunology, Immunotherapy. 67 (12), 1845-1851 (2018).</li><li>Simoni, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bystander+CD8(+)+T+cells+are+abundant+and+phenotypically+distinct+in+human+tumour+infiltrates.">Bystander CD8(+) T cells are abundant and phenotypically distinct in human tumour infiltrates.</a> Nature. 557 (7706), 575-579 (2018).</li><li>Chiu, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+general+method+for+quantifying+IgG-based+therapeutic+monoclonal+antibodies+in+human+plasma+using+protein+G+purification+coupled+with+a+two+internal+standard+calibration+strategy+using+LC-MS/MS.">Development of a general method for quantifying IgG-based therapeutic monoclonal antibodies in human plasma using protein G purification coupled with a two internal standard calibration strategy using LC-MS/MS.</a> Analytica Chimica Acta. 1019, 93-102 (2018).</li></ol>

इस लेख में, हम पीडी-1 का पता लगाने के लिए फ्लो साइटोमीटर का उपयोग करके एक विधि की रिपोर्ट करते हैं- परिधीय रक्त की एक बूंद से प्राप्त टी कोशिकाओं से बंधे एंटीबॉडी को अवरुद्ध करते हैं, जिसे हमने मूल रूप से न?...

पीडी-1- अवरुद्ध एंटीबॉडी विभिन्न प्रकार के कैंसर के उपचार के लिए मानक विकल्प बन गए हैं, जिनमें गैर-छोटे सेल फेफड़े का कैंसर (एनएससीएलसी)1,2,3,4शामिल है। वे कैंसर रोगियों के एक सबसेट में एक उल्लेखनीय चिकित्सीय प्रभाव दिखाते हैं जिन्होंने पारंपरिक साइटोटॉक्सिक कीमोथेरेपी का जवाब नहीं दिया है। हालांकि, प्रतिरक्षा चेकपॉइंट अवरोधक (आईसीआई), जिसमें पीडी-1-अवरुद्ध एंटीबॉडी शामिल हैं, प्रतिकूल घटनाओं का एक अनूठा और विशिष्ट स्पेक्ट्रम पैदा कर सकता है, जिसे प्रतिरक्षा से संबंधित प्रतिकूल घटनाओं (आईआरईई)5कहा जाता है। हालांकि आईआरईई लगभग सभी ऊतकों को प्रभावित कर सकता है, लेकिन वे आमतौर पर गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल ट्रैक्ट, एंडोक्राइन ग्रंथियों, त्वचा और यकृत में देखे जाते हैं, और वे प्रूरिटस, दाने, मतली, दस्त और थायराइड विकारों6,7का कारण बन सकते हैं। सामान्य तौर पर, अधिकांश आईआरई आईसीआई की दीक्षा के बाद 1 से 2 महीने के भीतर दिखाई देते हैं। हालांकि, कुछ मामलों में, वे उपचार की शुरुआत के बाद या उपचार समाप्ति6,7 के बाद भी 1 साल से बाद में हो सकतेहैं। वे विभिन्न लक्षणों का कारण भी बनते हैं जो अन्य विकृतियों से भेदभाव करना मुश्किल हो सकता है। इस प्रकार, आईआरईई का तुरंत निदान करना और उनका उचित इलाज करना चुनौतीपूर्ण हो सकता है। आईआरईस सभी ऊतकों को प्रभावित कर सकता है, और उनकी शुरुआत प्रतिरक्षा कोशिकाओं को प्रसारित करने से दृढ़ता से प्रभावित होती है, विशेष रूप से पीडी-1-अवरुद्ध एंटीबॉडी से बंधे टी कोशिकाएं। इसलिए, एंटीबॉडी-लक्षित टी कोशिकाओं की निगरानी के लिए एक सीधी और न्यूनतम आक्रामक विधि नैदानिक सेटिंग्स में महत्वपूर्ण है।
यहां, हमने पीडी-1 के बंधन का आकलन करने के लिए एक सरल विधि विकसित की- कैंसर रोगियों से परिधीय पूरे रक्त की एक बूंद का उपयोग करटी कोशिकाओं को एंटीबॉडी अवरुद्ध करना, जिन्हें निवोलुमाब या पेम्ब्रोलिज़ुमाब प्राप्त हुआ था। इस दृष्टिकोण का उपयोग करके, हम निम्नलिखित में से प्रत्येक की निगरानी करने में सक्षम थे: 1) टी कोशिकाओं के लिए एंटीबॉडी बाध्यकारी की अवधि, 2) चिकित्सीय एंटीबॉडी द्वारा टी सेल पीडी-1 अणुओं की अधिभोग, और 3) टी कोशिकाओं की सक्रियता की स्थिति और प्रतिरक्षा विशेषताएं। यह विधि पहले से रिपोर्ट की गई तकनीक8का संशोधन है। आवश्यक रक्त की मात्रा लगभग ग्लूकोज परीक्षण के लिए आवश्यक है, और दृष्टिकोण को मोनोन्यूक्लियर सेल संवर्धन या पीडी-1-अवरुद्ध एंटीबॉडी के साथ सह-निर्माण की आवश्यकता नहीं होती है। हमने पुष्टि की है कि इस विधि को जमे हुए नमूनों का उपयोग करके भी किया जा सकता है, जिसमें परिधीय रक्त मोनोन्यूक्लियर कोशिकाएं (पीबीएमसी) और प्लीरल एफफ्यूजन, पेरिकार्डियल एफफ्यूजन, ब्रोंकोल्वेलर लैवेज तरल पदार्थ और सेरेब्रोस्पाइनल तरल पदार्थ से कोशिकाएं शामिल हैं, यह सुझाव देते हुए कि यह रणनीति बहुकेंद्र अध्ययन के संदर्भ में उपयोगी हो सकती है। यह विधि आईआरईई के प्रारंभिक निदान को सुविधाजनक बना सकती है, और उनके लक्षणों को नियंत्रित करने और पीडी-1 अवरोधकों के बाद बाद के उपचार शुरू करने के लिए इष्टतम समय की पहचान करने के लिए उपयुक्त इम्यूनोसप्रेसिव उपचार निर्धारित करने में भी मदद कर सकती है।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>10X RBC Lysis Buffer (Multi-species)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>00-4300-54</td>
			<td>50 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>APC/Cyanine7 anti-human CD4 Antibody</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>300518</td>
			<td>Clone RPA-T4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACS Canto II Flow Cytometer</td>
			<td>BD</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brilliant Violet 510 anti-human CD8a Antibody</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>301048</td>
			<td>Clone RPA-T8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Phosphate Buffered Saline</td>
			<td>nacalai tesque</td>
			<td>14249-95</td>
			<td>500 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon Round-Bottom Polystyrene Tubes</td>
			<td>STEMCELL Technologies</td>
			<td>352058</td>
			<td>5 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FcR Blocking Reagent, human</td>
			<td>Miltenyi Biotec</td>
			<td>130-059-901</td>
			<td>2 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FLOWJO</td>
			<td>BD</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gibco Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>12676029</td>
			<td>500 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse IgG1 monoclonal - Isotype control</td>
			<td>abcam</td>
			<td>ab81200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse monoclonal Anti-Human IgG4 Fc</td>
			<td>abcam</td>
			<td>ab99825</td>
			<td>Clone HP6025</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pacific Blue Mouse Anti-Human CD3</td>
			<td>BD</td>
			<td>558117</td>
			<td>Clone UCHT1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-Cy7 Mouse anti-Human CD279 (PD-1)</td>
			<td>BD</td>
			<td>561272</td>
			<td>Clone EH12.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-Cy7 Mouse IgG1 &#954; Isotype Control</td>
			<td>BD</td>
			<td>557646</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

monitoring pd-1-blocking antibodies bound to t cells derived from a drop of peripheral blood

पीडी-1-अवरुद्ध एंटीबॉडी सहित प्रतिरक्षा चेकपॉइंट अवरोधकों ने विभिन्न प्रकार के कैंसर में उपचार परिणामों में काफी सुधार किया है। इन इम्यूनोथेरपी की औषधीय प्रभावकारिता लंबे समय तक चलने वाली है, लगातार रक्त सांद्रता के कारण उनके इंजेक्शन के विच्छेदन से परे भी विस्तारित होती है। यहां हमने पीडी-1 की टी सेल बाध्यकारी स्थिति का मूल्यांकन करने के लिए एक सरल प्रवाह साइटोमेट्री परख विकसित की- एंटीबॉडी निवोलुमाब और पेम्ब्रोलिज़ुमाब को अवरुद्ध करना। ग्लूकोज टेस्ट की तरह, इस परख के लिए परिधीय रक्त की सिर्फ एक बूंद की आवश्यकता होती है। टी कोशिकाओं पर एंटीबॉडी बाध्यकारी कल्पना एंटीबॉडी रक्त सांद्रता को मापने की तुलना में अधिक विश्वसनीय है। इसके अलावा, यदि आवश्यक हो, तो हम संभावित रूप से पीडी-1-अवरुद्ध एंटीबॉडी से बंधे टी कोशिकाओं पर कई विशिष्ट प्रतिरक्षा से संबंधित मार्कर का विश्लेषण कर सकते हैं। इस प्रकार, यह पीडी-1 के औषधीय प्रभाव का विश्लेषण करने के लिए एक सरल और न्यूनतम आक्रामक रणनीति है- कैंसर रोगियों में एंटीबॉडी को अवरुद्ध करना।

गेटिंग रणनीति और प्रवाह साइटोमेट्री विश्लेषण(चित्रा 1)पीडी-1 का पता लगा सकता है-एनएससीएलसी रोगी परिधीय रक्त की एक बूंद से प्राप्त टी कोशिकाओं के लिए एंटीबॉडी बाध्यकारी अवरुद्ध । पीडी-1 से पह?...

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Monitoring PD-1-Blocking Antibodies Bound to T Cells Derived from a Drop of Peripheral Blood

हमने पीडी-1 के बंधन का मूल्यांकन करने के लिए एक सरल प्रवाह साइटोमेट्री परख विकसित की- टी कोशिकाओं को एंटीबॉडी अवरुद्ध करना, कैंसर रोगियों से परिधीय रक्त की केवल एक बूंद की आवश्यकता होती है।

निगरानी पीडी-1-अवरुद्ध एंटीबॉडी टी कोशिकाओं के लिए बाध्य परिधीय रक्त की एक बूंद से व्युत्पन्न

Immune checkpoint inhibitors, including PD-1&#8211;blocking antibodies, have significantly improved treatment outcomes in various types of cancer. The ...

क्योंकि यह विधि रोगियों से परिधीय रक्त का उपयोग करके पीडी-1-अवरुद्ध एंटीबॉडी-बाउंड कोशिकाओं को निर्धारित करती है, इसलिए एंटीट्यूमर प्रभावों और प्रतिरक्षा से संबंधित प्रतिकूल घटनाओं के लिए जिम्मेदार विशिष्ट सबसेट की पहचान की जा सकती है। इस विधि को केवल थोड़ी मात्रा में रक्त नमूने की आवश्यकता होती है और विश्लेषण प्रक्रिया काफी सरल और त्वरित होती है। इसके लिए सिर्फ फ्लो साइटोमेट्री मशीन की जरूरत होती है।शुरू करने के लिए, EDTA युक्त रक्त संग्रह ट्यूबों में पूरे रक्त के नमूने एकत्र करें। पीबीएस में 2% भ्रूण गोजातीय सीरम के एक मिलीलीटर के साथ प्रत्येक पांच मिलीलीटर गोल नीचे पॉलीस्टीरिन प्रवाह साइटोमेट्री ट्यूब का इलाज करें। 10 सेकंड के लिए भंवर।फिर इलाज पांच मिलीलीटर गोल नीचे ट्यूबों के लिए पूरे रक्त नमूनों के 20 माइक्रोलीटर स्थानांतरित। पीबीएस में 2% एफबीएस के 20 माइक्रोलीटर और मानव-विशिष्ट एफसी रिसेप्टर के 10 माइक्रोलीटर जोड़ें जो अभिवार्जक को अवरुद्ध करते हैं। कमरे के तापमान पर 15 मिनट के लिए अच्छी तरह से मिलाएं और इनक्यूबेट करें।इसके बाद, लाल रक्त कोशिका लाइसिस बफर के 500 माइक्रोलीटर जोड़ें। कमरे के तापमान पर 10 मिनट के लिए अच्छी तरह से मिलाएं और इनक्यूबेट करें। पीबीएस में 2% एफबीएस के चार मिलीलीटर जोड़ें और चार डिग्री सेल्सियस पर पांच मिनट के लिए ४०० बार जी पर कोशिकाओं को नीचे स्पिन ।आकांक्षा द्वारा सुपरनिटेंट को हटा दें। वॉश और आकांक्षा प्रक्रिया दोहराएं। पीबीएस में 2% एफबीएस के 100 माइक्रोलीटर में कोशिकाओं को फिर से खर्च करें और प्रत्येक 50 माइक्रोलीटर की दो ट्यूबों में विभाजित करें।सतह मार्कर एंटीबॉडी जोड़ें। अंधेरे में कमरे के तापमान पर 20 मिनट के लिए अच्छी तरह से मिलाएं और इनक्यूबेट करें। पहले की तरह पीबीएस में 2% एफबीएस में दो बार नमूने धोएं।पीबीएस में 2% एफबीएस के 200 माइक्रोलीटर में कोशिकाओं को फिर से खर्च करें। प्रवाह साइटोमीटर में ट्यूब डालें और अनुशंसित प्रोटोकॉल के बाद कोशिकाओं को प्राप्त करें। विश्लेषण के लिए एफसीएस फाइल के रूप में लिम्फोसाइट गेट और निर्यात प्रवाह डेटा के रूप में रिकॉर्ड 10, 000 घटनाओं।विश्लेषण सॉफ्टवेयर में फ़ाइलों को खोलें और आगे बिखरे हुए बनाम साइड स्कैटर प्लॉट और गेट लिम्फोसाइट्स पर कोशिकाओं की कल्पना करने के लिए आइसोटाइप नियंत्रण की फाइल पर क्लिक करें। एफएससीडब्ल्यू बनाम एफएससीडब्ल्यू और एसएससीएच बनाम एसएससीडब्ल्यू का उपयोग करके एकल कोशिकाओं का चयन करें और उन्हें सीडी 3 बनाम सीडी 8 या सीडी 3 बनाम सीडी 4 प्लॉट पर प्रदर्शित करें। क्रमशः सीडी 8 टी-सेल और सीडी 4 टी-सेल को गेट करें।गेटेड कोशिकाओं का चयन करें और उन्हें पीडी-1 बनाम मानव IgG4 प्लॉट पर प्रदर्शित करें। और फिर आइसोटाइप नियंत्रण के आधार पर, पीडी-1-ब्लॉकिंग एंटीबॉडी-बाउंड सीडी 8 और सीडी 4 टी-कोशिकाओं की पहचान करने के लिए Q3 का चयन करें। इस अध्ययन में, गेटिंग रणनीति और प्रवाह साइटोमेट्री विश्लेषण ने रोगी परिधीय रक्त की एक बूंद से प्राप्त टी-कोशिकाओं के लिए बाध्यकारी पीडी-1-अवरुद्ध एंटीबॉडी का पता लगाया।पीडी-1 बनाम मानव IgG4 भूखंड टी-कोशिकाओं पर पीडी-1-अवरुद्ध एंटीबॉडी की बाध्यकारी स्थिति से पता चलता है । ऑरेंज डॉट्स और ब्लैक डॉट्स क्रमशः एंटी-आईजीजी4 एंटीबॉडी और आइसोटाइप कंट्रोल स्टेनिंग का संकेत देते हैं। इससे पहले कि पीडी-1-अवरुद्ध एंटीबॉडी प्रशासित किया गया था, कोई मानव IgG4 सकारात्मक सीडी 8 या सीडी 4 टी कोशिकाओं मौजूद थे और पीडी-1 अभिव्यक्ति एक पीडी-1 एंटीबॉडी का पता लगाने से पुष्टि की थी ।Nivolumab या pembrolizumab प्रशासन के बाद, IgG4 विरोधी IgG4 एंटीबॉडी द्वारा टी कोशिकाओं पर पता लगाया जा सकता है जबकि पीडी-1 एंटीबॉडी EH12.1 का पता लगाने टी कोशिकाओं पर किसी भी पीडी-1 को पहचान नहीं है । लाल, नीले और हरे रंग के द्वार क्रमशः पूर्ण बाध्यकारी, आंशिक बाध्यकारी और बाध्यकारी की हानि का संकेत देते हैं। रोगियों के बाद nivolumab और pembrolizumab बंद कर दिया, पीडी-1 की स्थिति-सीडी 8 टी कोशिकाओं के लिए बाध्यकारी एंटीबॉडी अवरुद्ध की स्थिति में कमी आई ।आंशिक बाध्यकारी और अंत में बाध्यकारी का पूरा नुकसान हुआ । कृपया आरबीसी लाइसिस के साथ रक्त नमूना मिश्रण के रूप में अच्छी तरह से सुनिश्चित करें । इसके अलावा, सतह मार्कर धुंधला से पहले आरबीसी lysis मिश्रण इस विधि में महत्वपूर्ण कदम है ।यदि शोधकर्ता के पास एक उन्नत प्रवाह साइटोमेट्री मशीन तक पहुंच है, तो पीडी-1-अवरुद्ध एंटीबॉडी-बाउंड टी-कोशिकाओं का मूल्यांकन इस रणनीति से संबंधित अधिक से अधिक मार्कर के साथ किया जा सकता है, जो पीडी-1-अवरुद्ध एंटीबॉडी के कारण होने वाली प्रतिकूल घटनाओं के लिए जिम्मेदार टी-सेल फेनोटाइप के लिए लागू किया जा सकता है। विकसित प्रतिकूल घटनाओं के साथ रोगियों से नमूना इस रणनीति की उपयोगिता का मूल्यांकन करने के लिए महत्वपूर्ण है ।

Research

JoVE Journal

Medicine

Rapid Point-of-Care Assay of Enoxaparin Anticoagulant Efficacy in Whole Blood

पूरे रक्त में तेजी से प्वाइंट की देखभाल enoxaparin anticoagulant प्रभावकारिता की परख

There is the need for a clinical assay to determine the extent to which a patient's blood is effectively anticoagulated by the ...

Repair of a Critical-sized Calvarial Defect Model Using Adipose-derived Stromal Cells Harvested from Lipoaspirate

एक क्रिटिकल आकार Calvarial दोष मॉडल वसा से व्युत्पन्न Stromal Lipoaspirate से काटा कोशिकाओं का उपयोग की मरम्मत

Craniofacial skeletal repair and regeneration offers the promise of de novo tissue formation through a cell-based approach utilizing stem cells. ...

High Throughput Sequential ELISA for Validation of Biomarkers of Acute Graft-Versus-Host Disease

गंभीर बीमारी भ्रष्टाचार बनाम मेजबान के बायोमार्कर के सत्यापन के लिए उच्च Throughput अनुक्रमिक एलिसा

Unbiased discovery proteomics strategies have  the potential to identify large numbers of novel biomarkers that can improve  diagnostic and prognostic ...

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

मानव दंत लुगदी स्टेम सेल के अलगाव विशेषता, और तुलनात्मक भेदभाव दो अलग अलग तरीकों का उपयोग करके स्थायी दांत से व्युत्पन्न

Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Time-lapse Imaging of Primary Preneoplastic Mammary Epithelial Cells Derived from Genetically Engineered Mouse Models of Breast Cancer

प्राथमिक Preneoplastic स्तन उपकला कोशिकाओं के समय चूक इमेजिंग स्तन कैंसर के आनुवंशिक रूप से इंजीनियर माउस मॉडल से निकाली

Time-lapse  imaging can be used to compare behavior of cultured primary preneoplastic  mammary epithelial cells derived from different genetically ...

Orthotopic Implantation and Peripheral Immune Cell Monitoring in the II-45 Syngeneic Rat Mesothelioma Model

द्वितीय -45 syngeneic चूहा Mesothelioma के मॉडल में ओर्थोटोपिक आरोपण और परिधीय इम्यून सेल निगरानी

The enormous upsurge of interest in immune-based treatments for cancer such as vaccines and immune checkpoint inhibitors, and increased understanding of ...

Generation of Prostate Cancer Patient Derived Xenograft Models from Circulating Tumor Cells

प्रोस्टेट कैंसर के रोगी की पीढ़ी परिसंचारी ट्यूमर कोशिकाओं से xenograft मॉडल व्युत्पन्न

Patient derived xenograft (PDX) models are gaining popularity in cancer research and are used for preclinical drug evaluation, biomarker identification, ...

Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System

एक वैक्यूम रक्त संग्रह प्रणाली के साथ गैर Anesthetized चूहों की पूंछ नस से दोहराया रक्त संग्रह

Blood can be collected from rats in a number of sampling locations. For instance, the tail vein is a superior location for blood sampling. However, the ...

Microelectrode Impalement Method to Record Membrane Potential from a Cannulated Middle Cerebral Artery

Microelectrode Impalement विधि एक Cannulated मध्य सेरेब्रल धमनी से झिल्ली क्षमता रिकॉर्ड करने के लिए

Membrane potential (Vm) of vascular smooth muscle cells determines vessel tone and thus blood flow to an organ. Changes in the expression and function of ...

Isolation of Adipose Derived Regenerative Cells for the Treatment of Erectile Dysfunction Following Radical Prostatectomy

रेडिकल प्रोस्टेटेक्टोमी के बाद स्तंभन दोष के उपचार के लिए वसा व्युत्पन्न पुनर्योजी कोशिकाओं का अलगाव

Stem cells are used in many research areas within regenerative medicine in part because these treatments can be curative rather than symptomatic. Stem ...