Name: monitoring pd-1-blocking antibodies bound to t cells derived from a drop of peripheral blood
Uploaded: 2020-02-05T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Monitoring PD-1-Blocking Antibodies Bound to T Cells Derived from a Drop of Peripheral Blood at JoVE.com

Bu çalışma, Japonya Bilim KAKENHI (JP17K16045) ve Japonya Tıbbi Araştırma ve Geliştirme Ajansı (JP18cm0106335 ve 19cm0106310) için Japonya Derneği'nden S.K.'ye verilen hibelerle desteklenmiştir.

Rutin klinik işlemler sırasında örnekleme yapıldı. Tüm insan örnekleri, Helsinki Bildirgesi uyarınca ve Japonya Osaka Üniversitesi Tıp Fakültesi Etik İnceleme Kurulu'nun (15383 ve 752) etik inceleme kurulunun onayı ile, denekler tarafından bilgilendirilmiş onay sağlandıktan sonra elde edilmiştir.
1. Tam Kan Örneği Hazırlama ve Boyama
<ol><li>Etilen diamin tetra-asetik asit (EDTA) içeren kan toplama tüpleri içine tam kan örnekleri toplamak. NOT: Kan toplama ya nor...

<ol>
	<li>Gong, J., Chehrazi-Raffle, A., Reddi, S., Salgia, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+PD-1+and+PD-L1+inhibitors+as+a+form+of+cancer+immunotherapy:+a+comprehensive+review+of+registration+trials+and+future+considerations.">Development of PD-1 and PD-L1 inhibitors as a form of cancer immunotherapy: a comprehensive review of registration trials and future considerations.</a> Journal for ImmunoTherapy of Cancer. 6 (1), 8 (2018).</li><li>Borghaei, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nivolumab+versus+Docetaxel+in+Advanced+Nonsquamous+Non-Small-Cell+Lung+Cancer.">Nivolumab versus Docetaxel in Advanced Nonsquamous Non-Small-Cell Lung Cancer.</a> The New England Journal of Medicine. 373 (17), 1627-1639 (2015).</li><li>Brahmer, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nivolumab+versus+Docetaxel+in+Advanced+Squamous-Cell+Non-Small-Cell+Lung+Cancer.">Nivolumab versus Docetaxel in Advanced Squamous-Cell Non-Small-Cell Lung Cancer.</a> The New England Journal of Medicine. 373 (2), 123-135 (2015).</li><li>Herbst, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pembrolizumab+versus+docetaxel+for+previously+treated,+PD-L1-positive,+advanced+non-small-cell+lung+cancer+(KEYNOTE-010):+a+randomised+controlled+trial.">Pembrolizumab versus docetaxel for previously treated, PD-L1-positive, advanced non-small-cell lung cancer (KEYNOTE-010): a randomised controlled trial.</a> The Lancet. 387 (10027), 1540-1550 (2016).</li><li>Postow, M. A., Sidlow, R., Hellmann, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune-Related+Adverse+Events+Associated+with+Immune+Checkpoint+Blockade.">Immune-Related Adverse Events Associated with Immune Checkpoint Blockade.</a> The New England Journal of Medicine. 378 (2), 158-168 (2018).</li><li>Weber, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+Profile+of+Nivolumab+Monotherapy:+A+Pooled+Analysis+of+Patients+With+Advanced+Melanoma.">Safety Profile of Nivolumab Monotherapy: A Pooled Analysis of Patients With Advanced Melanoma.</a> Journal of Clinical Oncology. 35 (7), 785-792 (2017).</li><li>Champiat, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Management+of+immune+checkpoint+blockade+dysimmune+toxicities:+a+collaborative+position+paper.">Management of immune checkpoint blockade dysimmune toxicities: a collaborative position paper.</a> Annals of Oncology. 27 (4), 559-574 (2016).</li><li>Brahmer, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phase+I+study+of+single-agent+anti-programmed+death-1+(MDX-1106)+in+refractory+solid+tumors:+safety,+clinical+activity,+pharmacodynamics,+and+immunologic+correlates.">Phase I study of single-agent anti-programmed death-1 (MDX-1106) in refractory solid tumors: safety, clinical activity, pharmacodynamics, and immunologic correlates.</a> Journal of Clinical Oncology. 28 (19), 3167-3175 (2010).</li><li>Bommareddy, P. K., Lowe, D. B., Kaufman, H. L., Rabkin, S. D., Saha, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multi-parametric+flow+cytometry+staining+procedure+for+analyzing+tumor-infiltrating+immune+cells+following+oncolytic+herpes+simplex+virus+immunotherapy+in+intracranial+glioblastoma.">Multi-parametric flow cytometry staining procedure for analyzing tumor-infiltrating immune cells following oncolytic herpes simplex virus immunotherapy in intracranial glioblastoma.</a> Journal of Biological Methods. 6 (2), 112 (2019).</li><li>Osa, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+implications+of+monitoring+nivolumab+immunokinetics+in+non-small+cell+lung+cancer+patients.">Clinical implications of monitoring nivolumab immunokinetics in non-small cell lung cancer patients.</a> JCI Insight. 3 (19), 59125 (2018).</li><li>Zelba, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accurate+quantification+of+T-cells+expressing+PD-1+in+patients+on+anti-PD-1+immunotherapy.">Accurate quantification of T-cells expressing PD-1 in patients on anti-PD-1 immunotherapy.</a> Cancer Immunology, Immunotherapy. 67 (12), 1845-1851 (2018).</li><li>Simoni, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bystander+CD8(+)+T+cells+are+abundant+and+phenotypically+distinct+in+human+tumour+infiltrates.">Bystander CD8(+) T cells are abundant and phenotypically distinct in human tumour infiltrates.</a> Nature. 557 (7706), 575-579 (2018).</li><li>Chiu, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+general+method+for+quantifying+IgG-based+therapeutic+monoclonal+antibodies+in+human+plasma+using+protein+G+purification+coupled+with+a+two+internal+standard+calibration+strategy+using+LC-MS/MS.">Development of a general method for quantifying IgG-based therapeutic monoclonal antibodies in human plasma using protein G purification coupled with a two internal standard calibration strategy using LC-MS/MS.</a> Analytica Chimica Acta. 1019, 93-102 (2018).</li></ol>

Bu makalede, başlangıçta nivolumabtespitiiçin geliştirdiğimiz periferik kan damlasından elde edilen T hücrelerine bağlı PD-1-bloke edici antikorları tespit etmek için bir akış sitometresi kullanarak bir yöntem rapor ediyoruz. Bu teknik çok basit ve kolay bir şekilde gerçekleştirilebilmesine rağmen, doğru sonuçlar elde etmek için iki önemli noktaya dikkat edilmelidir. Bir PD-1 molekülleri tespit etmek için, nivolumab ve pembrolizumab ile rekabet uygun bir antikor kullanıl...

PD-1-bloke antikorlar kanser çeşitli tedavi için standart seçim haline gelmiştir, küçük hücreli dışı akciğer kanseri de dahil olmak üzere (NSCLC)1,2,3,4. Onlar konvansiyonel sitotoksik chemotherapies yanıt vermedi kanser hastalarının bir alt kümesinde dikkate değer bir terapötik etki göstermektedir. Ancak, pd-1-bloke antikorlar içeren bağışıklık kontrol noktası inhibitörleri (ICIs), advers olayların benzersiz ve farklı bir spektrum neden olabilir, immün ilişkili advers olaylar (irAEs) olarak adlandıran5. IrAEs hemen hemen tüm dokuları etkileyebilir rağmen, en sık gastrointestinal sistem gözlenen, endokrin bezleri, cilt, ve karaciğer, ve onlar kaşıntı neden olabilir, döküntü, mide bulantısı, ishal, ve tiroid bozuklukları6,7. Genel olarak, çoğu irAEs ICIs başlatılmasından sonra 1 ila 2 ay içinde görünür. Ancak, bazı durumlarda, onlar tedavinin başlamasından sonra 1 yıl daha sonra oluşabilir hatta tedavi kesilmesinden sonra6,7. Ayrıca diğer patolojilerden ayırt etmek zor olabilir çeşitli belirtilere neden olur. Bu nedenle, irAEs derhal teşhis etmek ve uygun şekilde tedavi etmek zor olabilir. irAE'ler tüm dokuları etkileyebilir ve bunların başlangıcı, özellikle PD-1-bloke edici antikorlara bağlı T hücreleri olmak üzere dolaşan bağışıklık hücrelerinden güçlü bir şekilde etkilenir. Bu nedenle, antikor hedefli T hücrelerini izlemek için basit ve minimal invaziv bir yöntem klinik ortamlarda önemlidir.
Burada, nivolumab veya pembrolizumab alan kanser hastalarından periferik tam kan damlası kullanarak PD-1-bloke antikorların T hücrelerine bağlanmasını değerlendirmek için basit bir yöntem geliştirdik. Bu yaklaşımı kullanarak, aşağıdakilerin her birini izleyebildik: 1) T hücrelerine bağlanma nın süresi, 2) T hücre PD-1 moleküllerinin terapötik antikorlar tarafından doluluğu ve 3) T hücrelerinin aktivasyon durumu ve immünolojik özellikleri. Bu yöntem, daha önce bildirilen teknik8bir değişikliktir. Gerekli kan miktarı bir glikoz testi için gerekli hemen hemen aynıdır, ve yaklaşım mononükleer hücre zenginleştirme veya PD-1-bloke antikorlar ile co-culturing gerektirmez. Bu yöntemin periferik kan mononükleer hücreleri (PBMCs) ve plevral efüzyon, perikardiyal efüzyon, bronkoalveoler lavaj sıvısı ve beyin omurilik sıvısı hücreleri de dahil olmak üzere dondurulmuş numuneler kullanılarak da uygulanabileceğini doğruladık ve bu stratejinin çok merkezli bir çalışma bağlamında yararlı olabileceğini öne sürdük. Bu yöntem irAE'lerin erken tanısını kolaylaştırabilir ve aynı zamanda semptomlarını kontrol etmek için uygun immünsupresif tedavilerin belirlenmesine ve PD-1 inhibitörlerinden sonra sonraki tedavilerin başlatılması için en uygun süreyi belirlemeye yardımcı olabilir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>10X RBC Lysis Buffer (Multi-species)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>00-4300-54</td>
			<td>50 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>APC/Cyanine7 anti-human CD4 Antibody</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>300518</td>
			<td>Clone RPA-T4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACS Canto II Flow Cytometer</td>
			<td>BD</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brilliant Violet 510 anti-human CD8a Antibody</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>301048</td>
			<td>Clone RPA-T8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Phosphate Buffered Saline</td>
			<td>nacalai tesque</td>
			<td>14249-95</td>
			<td>500 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon Round-Bottom Polystyrene Tubes</td>
			<td>STEMCELL Technologies</td>
			<td>352058</td>
			<td>5 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FcR Blocking Reagent, human</td>
			<td>Miltenyi Biotec</td>
			<td>130-059-901</td>
			<td>2 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FLOWJO</td>
			<td>BD</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gibco Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>12676029</td>
			<td>500 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse IgG1 monoclonal - Isotype control</td>
			<td>abcam</td>
			<td>ab81200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse monoclonal Anti-Human IgG4 Fc</td>
			<td>abcam</td>
			<td>ab99825</td>
			<td>Clone HP6025</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pacific Blue Mouse Anti-Human CD3</td>
			<td>BD</td>
			<td>558117</td>
			<td>Clone UCHT1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-Cy7 Mouse anti-Human CD279 (PD-1)</td>
			<td>BD</td>
			<td>561272</td>
			<td>Clone EH12.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-Cy7 Mouse IgG1 &#954; Isotype Control</td>
			<td>BD</td>
			<td>557646</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

monitoring pd-1-blocking antibodies bound to t cells derived from a drop of peripheral blood

PD-1-bloke antikorlar da dahil olmak üzere bağışıklık kontrol noktası inhibitörleri, kanser çeşitli tedavi sonuçları önemli ölçüde iyileşmiştir. Bu immünoterapilerin farmakolojik etkinliği uzun ömürlüdür, kalıcı kan konsantrasyonları nedeniyle enjeksiyonlarının kesilmesinin bile ötesine uzanır. Burada PD-1-bloke antikorlar nivolumab ve pembrolizumab T hücre bağlama durumunu değerlendirmek için basit bir akış sitometri tsay geliştirdi. Glikoz testi gibi, bu tahlil sadece bir damla periferik kan gerektirir. T hücrelerinde antikor bağlanmasını görselleştirmek antikor kan konsantrasyonlarını ölçmekten daha güvenilirdir. Buna ek olarak, gerekirse, PD-1-bloke edici antikorlara bağlı T hücrelerinde bağışıklıkla ilgili birçok ayırt edici belirteçleri analiz edebiliriz. Bu nedenle, bu kanser hastalarında PD-1-bloke antikorların farmakolojik etkisini analiz etmek için basit ve minimal invaziv bir stratejidir.

Gating stratejisi ve akış sitometri analizi(Şekil 1)NSCLC hasta periferik kan damlasından elde edilen T hücrelerine bağlanan PD-1-bloke antikor ları saptayabiliyor. PD-1-bloke edici antikor verilmeden önce insan IgG4-pozitif CD8 veya CD4 T hücreleri bulunmaz ve PD-1 ekspresyonu PD-1-saptanan antikor (EH12.1) ile doğrulanabilir(Şekil 2A). Nivolumab veya pembrolizumab uygulamasından sonra, IgG4 (nivolumab, pembrolizumab) T hücrelerind...

Watch this Scientific Journal Video about Monitoring PD-1-Blocking Antibodies Bound to T Cells Derived from a Drop of Peripheral Blood at JoVE.com

Monitoring PD-1-Blocking Antibodies Bound to T Cells Derived from a Drop of Peripheral Blood

PD-1-bloke antikorların T hücrelerine bağlanmasını değerlendirmek için basit bir akış sitometrisi tsay geliştirdik ve kanser hastalarından sadece bir damla periferik kan almasını gerektiren bir çalışma sitometri sitometri sitometri sitometri sitometri sitometri sitometri geliştirdik.

Periferik Kan Damlasından Elde Edilen T Hücrelerine Bağlı Pd-1-Blokaj Antikorlarının İzlenmesi

Immune checkpoint inhibitors, including PD-1&#8211;blocking antibodies, have significantly improved treatment outcomes in various types of cancer. The ...

Bu yöntem hastalardan periferik kan kullanarak PD-1-bloke antikor-bağlı hücreleri belirlediği için, antitümör etkileri ve immün ile ilgili advers olaylardan sorumlu spesifik alt küme tespit edilebilir. Bu yöntem kan örneği sadece küçük bir miktar ihtiyacı ve analiz süreci oldukça basit ve hızlıdır. Sadece akış sitometri makinesine ihtiyacı var.Başlamak için, EDTA içeren kan toplama tüpleri içine tam kan örnekleri toplamak. Her beş mililitre yuvarlak alt polistiren akış sitometri tüppbs% 2 fetal sığır serum bir mililitre ile tedavi. 10 saniyelik girdap.Daha sonra 20 mikrolitre tam kan örneğini tedavi edilen beş mililitrelik yuvarlak alt tüplere aktarın. PBS'de 20 mikrolitre %2 FBS ve insana özgü FC reseptör bloke reaktifinin 10 mikrolitresini ekleyin. İyi bir şekilde karıştırın ve oda sıcaklığında 15 dakika kuluçkaya yatırın.Sonra, kırmızı kan hücresi lisis tampon 500 mikrolitre ekleyin. İyi bir şekilde karıştırın ve oda sıcaklığında 10 dakika kuluçkaya yatırın. PBS'de %2 FBS'lik dört mililitre ekleyin ve hücreleri 400 kez g'de dört santigrat derecede beş dakika boyunca aşağı doğru döndürün.Aspirasyon tarafından supernatant çıkarın. Yıkama ve aspirasyon işlemini tekrarlayın. PBS'de %2 FBS'lik 100 mikrolitredeki hücreleri yeniden askıya alın ve her biri 50 mikrolitreden oluşan iki tüpe bölün.Yüzey marker antikorları ekleyin. İyi bir şekilde karıştırın ve karanlıkta oda sıcaklığında 20 dakika kuluçkaya yatırın. Örnekleri pbs'de daha önce olduğu gibi %2 FBS'de iki kez yıkayın.PBS'de %2 FBS'nin 200 mikrolitresinde hücreleri yeniden askıya alın. Tüpleri akış sitometresine yerleştirin ve önerilen protokolü izleyerek hücreleri edinin. 10.000 olayı lenfosit kapısı olarak kaydedin ve akış verilerini analiz için FCS dosyaları olarak dışa aktarın.Analiz yazılımındaki dosyaları açın ve ileri dağılımdaki hücreleri yan dağılım çizimine ve kapı lenfositlerine karşı görselleştirmek için izotip kontrolü dosyasına tıklayın. FSCH ile FSCW ve SSCH ve SSCW'yi kullanarak tek hücreleri seçin ve bunları CD3'e karşı CD8 veya CD3 ile CD4 çiziminde görüntüleyin. Cd8 T-hücrelerini ve CD4 T-hücrelerini sırasıyla açın.Kapılı hücreleri seçin ve bunları insan IgG4 çizimine karşı bir PD-1 üzerinde görüntüleyin. Ve sonra izotip kontrolüne dayanarak, PD-1 engelleyen antikora bağlı CD8 ve CD4 T hücrelerini tanımlamak için Q3'u seçin. Bu çalışmada, gating stratejisi ve akış sitometri analizi, hastanın periferik kan damlasından elde edilen T-hücrelerine PD-1 blokajlı antikor bağlanması nı saptmıştır.PD-1 karşı insan IgG4 arsa T-hücreleri üzerinde PD-1-bloke antikorların bağlayıcı durumunu gösterir. Turuncu noktalar ve siyah noktalar sırasıyla anti-IgG4 antikor ve isotip kontrol boyama gösterir. PD-1-bloke edici antikor verilmeden önce insan IgG4 pozitif CD8 veya CD4 T-hücreleri mevcut değildi ve PD-1 ekspresyonu pd-1 saptanan antikor ile doğrulandı.Nivolumab veya pembrolizumab uygulamasından sonra, IgG4 anti-IgG4 antikor ile T-hücrelerinde tespit edilebilirken, PD-1 tespit antikor EH12.1 T-hücrelerinde herhangi bir PD-1 tanımaz. Kırmızı, mavi ve yeşil kapılar sırasıyla tam bağlama, kısmi bağlama ve bağlama kaybını gösterir. Hastalar nivolumab ve pembrolizumab kesildikten sonra, CD8 T hücrelerine bağlanan PD-1-bloke edici antikor ların durumu azaldı.Kısmi bağlama ve nihayet tam bağlama kaybı vardı. Lütfen kan örneğini RBC lysis ile karıştırdığından emin olun. Ayrıca, yüzey marker boyama önce RBC lysis karıştırma bu yöntemin önemli bir adımdır.Araştırmacı gelişmiş bir akış sitometri makinesine erişebiliyorsa, PD-1-bloke edici antikor-bağlı T-hücreleri, PD-1-bloke edici antikorların neden olduğu advers olaylardan sorumlu T-hücre fenotiplerinin profilini çıkarmak için bu stratejiye ilişkin daha fazla belirteçle değerlendirilebilir. Gelişmiş advers olayları olan hastalardan örnekleme bu stratejinin yarar değerlendirmek için önemlidir.

Research

JoVE Journal

Medicine

Rapid Point-of-Care Assay of Enoxaparin Anticoagulant Efficacy in Whole Blood

Tüm Kan enoksaparin Antikoagülan Etkinliğinin Rapid Point-of-Care Assay

There is the need for a clinical assay to determine the extent to which a patient's blood is effectively anticoagulated by the ...

Repair of a Critical-sized Calvarial Defect Model Using Adipose-derived Stromal Cells Harvested from Lipoaspirate

Lipoaspirate itibaren hasat Yağ kaynaklı stromal hücreler kullanarak Kritik ölçekli Kalvaryum Defekt Model tamiri

Craniofacial skeletal repair and regeneration offers the promise of de novo tissue formation through a cell-based approach utilizing stem cells. ...

High Throughput Sequential ELISA for Validation of Biomarkers of Acute Graft-Versus-Host Disease

Akut Graft-Versus-Host Hastalığı Biyomarkörler onaylanması için Yüksek Verimli Sıralı ELISA

Unbiased discovery proteomics strategies have  the potential to identify large numbers of novel biomarkers that can improve  diagnostic and prognostic ...

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

İnsan Diş Pulp Kök Hücre İzolasyonu, Karakterizasyonu ve Karşılaştırmalı Farklılaşma İki Farklı Yöntemler Kullanılarak Daimi Dişler türetilen

Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Time-lapse Imaging of Primary Preneoplastic Mammary Epithelial Cells Derived from Genetically Engineered Mouse Models of Breast Cancer

Birincil Preneoplastic Meme Epitel Hücrelerinin Time-lapse görüntüleme Meme Kanseri Genetik Fare Modelleri türetilen

Time-lapse  imaging can be used to compare behavior of cultured primary preneoplastic  mammary epithelial cells derived from different genetically ...

Orthotopic Implantation and Peripheral Immune Cell Monitoring in the II-45 Syngeneic Rat Mesothelioma Model

II-45 singenik Rat Mezotelyoma Modelinde Ortotopik Yerleştirilmesi ve Periferik Bağışıklık Hücre İzleme

The enormous upsurge of interest in immune-based treatments for cancer such as vaccines and immune checkpoint inhibitors, and increased understanding of ...

Generation of Prostate Cancer Patient Derived Xenograft Models from Circulating Tumor Cells

Prostat Kanseri Hasta Üretimi Tümör Hücreleri Sirkülasyon gelen Xenograftlarında Modeller Türetilmiş

Patient derived xenograft (PDX) models are gaining popularity in cancer research and are used for preclinical drug evaluation, biomarker identification, ...

Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System

Kuyruk damar anestezi sıçan bir vakum kan toplama sistemi ile kan koleksiyonundan tekrarlanan

Blood can be collected from rats in a number of sampling locations. For instance, the tail vein is a superior location for blood sampling. However, the ...

Microelectrode Impalement Method to Record Membrane Potential from a Cannulated Middle Cerebral Artery

Mikroelektrot Impalement yöntemi bir kanüle orta serebral arter membran potansiyelini kaydetmek için

Membrane potential (Vm) of vascular smooth muscle cells determines vessel tone and thus blood flow to an organ. Changes in the expression and function of ...

Isolation of Adipose Derived Regenerative Cells for the Treatment of Erectile Dysfunction Following Radical Prostatectomy

Radikal Prostatektomi Sonrası Erektil Disfonksiyon Tedavisinde Yağ Kaynaklı Rejeneratif Hücrelerin İzolasyonu

Stem cells are used in many research areas within regenerative medicine in part because these treatments can be curative rather than symptomatic. Stem ...