Name: reduced complications after arterial reconnection in a rat model of orthotopic liver transplantation
Uploaded: 2020-11-07T13:00:00
Duration: 8 min 39 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation at JoVE.com

تم تمويل هذا البحث من خلال أموال من برنامج زرع الأعضاء المتعددة في UHN ودعم من مؤسسة تورونتو العامة والغربية تورونتو.

ليس لدى أصحاب البلاغ ما يكشفون عنه.

نماذج زراعة الكبد الحيوانية الصغيرة مهمة لفهم مناعة الزراعة وتحديد الاستراتيجيات العلاجية الجديدة32. نموذج زراعة الكبد الحيوانية الصغيرة المثالية يكرر جميع خطوات الإجراء البشري، بما في ذلك التهاب الأوعية الشريانية. يمكن أن يكون تحديا لتفسير النتائج من نموذج OLT الفئران، كما أن معظم الإصدارات لا تتضمن خطوة هات الانتمائي، مما يؤدي إلى ارتفاع معدلات المضاعفات والمراضة42. وقد استخدمت بعض إجراءات إعادة الإعمار الشريان الكلوي، الأمر الذي يتطلب إزالة الكلى27. هذا البروتوكول يتجنب إزالة الأعضاء ، لأنها تتجاوز ما يحدث في الإجراء البشري.
يمكن أيضا أن تتم إعادة بناء الشرايين عن طريق التلاعب في الشريان الأورطي الفئران31. ومع ذلك، تتطلب هذه الطرق تشريح وقط واسعة النطاق من الشريان الأورطي. إذا طال وقت المشبك ، فسيكون لدى الجرذ المتلقي نتائج سيئة تتعلق بـ ischemia43. في البشر، تقنية جراحية LT ينطوي على ربط وتقسيم الشريان المعدية المعوية المتلقي (GDA). ومع ذلك، فإن السمات الفسيولوجية والتشريحية للقوارض تجعل الزرع باستخدام هذه التقنية أكثر صعوبة من الناحية الفسيولوجية وقد يؤدي إلى مضاعفات (أي نخر البنكرياس والقناة الصفراوية35 وتسرب الصفراء44). ويهدف إعادة الاتصال الشرياني في هذا البروتوكول إلى التحايل على هذا التحدي، والحفاظ على تدفق الدم في القناة، وتحسين نتائج المتلقي.
وقد وصفت استخدام الأكمام وتقنية الدعامات لإعادة بناء ها الفئران سابقا27. في هذه التقنية، يتم استخدام الدعامة كدليل، ويتم إعادة بناء الشريان من جذع الاضطرابات الهضمية المانحة إلى ها المشترك المتلقي. ثم يتم تشريح ها المشترك المتلقي بها، ويتم ربط المتلقي GDA قبالة27. ونتيجة لذلك، قد يتعرض مصدر الدم إلى الجزء السفلي من BD المتلقي ورئيس البنكرياس للخطر. ويعتقد أن التداول الجانبية إلى هذه المنطقة غالبا ما يوفر تدفق الدم غير كافية إلى القناة الصفراوية. على سبيل المثال، هذا البروتوكول اختبار المشابك المتلقي GDA أولاً مع مقطع microvascular، ثم يقسم BD المتلقي. مع GDA فرضت، BD مقسمة لا تنزف. بعد إزالة المشبك GDA, ويلاحظ نزيف سريع من BD. هذا البروتوكول، الذي يحافظ على تدفق جيد إلى القناة الصفراوية المتلقي مقسمة، يحمي فسيولوجيا أنسجة الكبد المتلقي من خلال توفير كافية كبد الدم الضخ ومنع إصابة الكبد نقص الأكسجين ما بعد OLT.
على الجانب المانح، يتم إدراج الدعامة ها في جذع الاضطرابات الهضمية أثناء إعداد الكسب غير المشروع بكل سهولة عن طريق إنشاء التصحيح من جذع الاضطرابات الهضمية، الشريان المعدي الأيسر، والشريان الزلي. يمكن إدراج الدعامة من خلال الفتحة الواسعة ، وهي أقل صعوبة من محاولة إدخال الدعامة في جذع الاضطرابات الهضمية وحدها. وقد تبين أن 24 G هو الحجم المثالي لاستخدامها في الدعامة HA. يجب أن يكون طول الدعامة 1.0-1.5 ملم، لأنه يعمل بمثابة بوابة مفتوحة للسماح للمستلم HA المناسبة ليتم سحبها بسهولة إلى HA المشترك للمانحين. مع الاهتمام الدقيق حيث يتم وضع خياطة الإثين 10-0 ، فإن الدم المتدفق من خلال هذا الاتصال لن يمس الدعامة مباشرة ، وسوف يحميه HA المناسب للمتلقي من الداخل ، مما يقلل من خطر حدوث مضاعفات. الأهم من ذلك، لا يتم فرض HA المانحة من أجل تجنب vasospasm. يتم تقييم نجاح إعادة بناء الشرايين عن طريق ترك المانحة GDA مفتوحة. نتائج استومومي ناجحة في تدفق الدم جيدة من GDA المانحة بمجرد الانتهاء من إعادة الإعمار.
في هذا البروتوكول، مشابهة للآخرين، إعادة الاتصال SHVC هو أبطأ خطوة و أخيراً يفرض مدة المرحلة anhepatic. كما يزيد من مدة الوقت anhepatic، وإصابة نقص تروية خطر والخلل الكبد يزيد45. عنصر آخر حاسم من نماذج الفئران OLT هو أحجام الكسب غير المشروع والدعامات والأصفاد. إذا كان الكسب غير المشروع صغير جدا، قد تطور الكسب غير المشروع أو الوجه، وعرقلة اتصالات الأوعية الدموية. قد يتطلب حجم الدعامات والأصفاد تعديلات وفقا للعمر والجنس والوزن والضغط من الفئران. تم اختيار حجم الأصفاد المستخدمة هنا كما سبق وصفها28، وتم استخدام حجم واحد للصفة التي تسيطر عليها لحجم الفئران. لم تكن هناك أي علامات على الضائقة أو المضاعفات (أي احتقان الكبد، وذمة، استسقاء، أو splenomegaly) خلال فترة المتابعة (حتى الآن: متوسط = 133 يوما بعد العملية، الحد الأدنى = 115 يوما بعد العملية، الحد الأقصى = 161 يوما بعد العملية). وهناك ما يبرر إجراء دراسات أخرى لتحديد الحجم المناسب لـ PV و IHVC لمختلف سلالات الفئران التي تمثل العمر والجنس.
يستخدم هذا البروتوكول OLT الفئران المعدلة الأصفاد المطبوعة 3D ل PV و IHVC، كما هو موضح سابقا39،40. وتشمل الطرق الحالية لربط PV و IHVC تقنية microsuture32، وتقنية الكفة46، وتقنية جبيرة47microsuture مؤقت. تم اختيار تقنية الكفة المطبوعة ثلاثية الأبعاد ، لأنها تسمح بتوحيد حجم الكفة وفقًا لسلالة الفئران وسهلة التحضير والاستخدام. يمكن طباعة كميات كبيرة من الأصفاد ذات الأبعاد نفسها في وقت واحد. السطح الخارجي للكمة اثنين من الأخاصر للمساعدة في تأمين العلاقات ومنع الانزلاق. كما يتم دمج ذيل في تصميم الكفة للسماح للتلاعب أسهل من الكفة. عموما، ويعتقد أن دمج الأصفاد المطبوعة 3D يؤدي إلى معدلات نجاح عالية وإعادة إنتاج الإجراء OLT عن طريق تقصير الوقت anhepatic. ومن المقرر أن هذه التقنية أيضا تقصير منحنى التعلم الجراحية.
في الختام، أنشأ البروتوكول الموصوف نموذجًا أكثر تشابهًا مع زراعة الكبد البشري من خلال دمج خطوة إعادة توصيل الشرايين. ويمكن تكييف هذا البروتوكول لدراسة العديد من الجوانب المناعية والجراحية لزراعة الكبد ويمكن أن يكون بمثابة نموذج لاختبار التدخلات العلاجية الجديدة ذات الصلة بزرع.

ولا يزال العبء العالمي لأمراض الكبد في ازدياد، مع ارتفاع بنسبة 30 في المائة في الوفيات المرتبطة بأمراض الكبد من عام 2005 إلى عام 20131،2. غالبًا ما تكون زراعة الكبد هي الملاذ الوحيد للمرضى الذين يعانون من أمراض الكبد في المرحلة النهائية. الكبد هو ثاني أكثر الأعضاء الصلبة المزروعة في كثير من الأحيان، وعدد عمليات زرع الكبد التي أجريت على الصعيد العالمي بنسبة 7.25٪ من 2015 إلى 20161,2. على الرغم من انتشاره، أصبحت معدلات البقاء على قيد الحياة بعد زرع ركود3،4،5. 15 سنة معدل البقاء على قيد الحياة المريض هو 53٪، ومعدل البقاء على قيد الحياة 20 عاما قد يكون منخفضا كما 21٪3،5. في حين أن هناك مبادرات البيولوجيا المناعية الجديدة المثيرة التي قد تؤدي إلى علاجات جديدة وتحسين النتائج السريرية، لا يوجد حتى الآن نموذج حيواني صغير موثوق به لاختبارها.
وقد استخدمت على نطاق واسع نموذج الجرذان OLT في التحقيق في زراعة الكبد، بما في ذلك الرفض6،,7،,8،,9،,10، التسامح المناعي11، زرع 12- إصابة12، مناعة13، وإصابة شجرة الصفراوية14،15،16،17. ومع ذلك ، فإن عيب النموذج في شكله الحالي هو ارتفاع معدل الاعتلال والوفيات بعد الجراحة18،19. هذا هو العيب الخطير الذي يتعارض مع عملية الإنسان، وأنه يعرض للخطر القدرة على استخلاص استنتاجات ذات الصلة سريريا من نموذج20.
بالإضافة إلى ذلك، يمكن أن تعزى نسبة كبيرة من هذه المراضة إلى عدم وجود أو نقص في إعادة الاتصال الشريان الكبدي (HA)18. على الرغم من أن خطوة حاسمة في زرع الكبد البشري, الصعوبات التقنية تميل إلى تعريض إعادة الاتصال HA في نموذج OLT الفئران. ونتيجة لذلك، القناة الصفراوية (BD) anastomosis ضعيفة ويؤدي إلى معدلات عالية من تسرب الصفراء و BD نخر21. وراء ارتفاع نسبة المضاعفات الصفراوية22, غياب تدفق الشرايين يغير فسيولوجيا الكبد الكسب غير المشروع بعد زرع23, مع نقص الأكسجة في الكسب غير المشروع الكبد المانح24 وتلف الكبد لوحظ في الفصوص الملتهبة19,25,26. الفئران OLT دون إعادة الاتصال الشرياني يميل أيضا إلى تعزيز التليف27. الجرذان OLT البروتوكول الموصوفة أدناه يعالج هذه القضايا من خلال دمج خطوة إعادة الإعمار ها بسيطة مع الفئران التي نشرت سابقا OLT طريقة28, مما أدى إلى الحفاظ على parenchyma الكبد وتحسين معدلات البقاء على قيد الحياة.
زرع الكبد له ثلاث مراحل: (1) استخراج الكسب غير المشروع للكبد من المتبرع، (2) إعداد الكسب غير المشروع الكبد المانح، و (3) استبدال الكبد المتلقي مع الكسب غير المشروع الكبد. يتضمن الإجراء التلاعب بخمسة هياكل تشريحية: الوريد السفلي فوق الوهني (SHVC) ، الوريد البوّالي (PV) ، الوريد السفلي الوريدي السفلي (IHVC) ، الشريان الكبدي (HA) ، والقناة الصفراوية (BD).
OLT في الفئران تم عرضه لأول مرة من قبل لي وآخرون باستخدام اغراس microsuture من SHVC، الكهروضوئية و IHVC، وتقنية سحب من خلال لBD29. تم تحسين هذا النموذج في وقت لاحق من خلال استخدام تقنية اثنين الكفة في 197930. ومنذ ذلك الحين، تم اقتراح العديد من التقنيات البديلة، مع التركيز على معظمها على مرض الاستئصال الوريدي واستخدام تقنية ثنائية الكفة مع بعض التعديلات31. على الرغم من أن ها anastomosis قد وصفت سابقا في نموذج OLT الفئران باستخدام تقنيات مثل microsuture، الكفة، والأكمام داخل الأرصاد26،31،32،33،34، وغالبا ما تتطلب هذه التقنيات مهارات الجرخ المدربة تدريبا عاليا ، وتغيير كبير في فسيولوجيا الفئران ، ويعوقها تجلط و / أو مضاعفات الصفراوية27،35.
وعلاوة على ذلك، فإن اختيار الإجراء الجراحي يمكن أن يؤثر أيضا على الوقت الكبدي (الوقت من لقط PV إلى إعادة ضخ الكسب غير المشروع من خلال الكهروضوئية المعاد تشكيلها)، وهو أمر بالغ الأهمية لنجاح زرع كبد الفئران. على وجه التحديد، ويلاحظ معدلات البقاء على قيد الحياة مع أوقات anhepatic من 15-20 دقيقة36، و 30 دقيقة هو الحد الأعلى للنجاح37،38. ولذلك، فإن الهدف من هذه الطريقة هو تنفيذ أقل الغازية وأكثر سهولة اعتماد فئران جراحية OLT النموذج الذي هو قادر على إعادة الاتصال الشريان الكبدي، وتعزيز ضخ كفاءة الكبد المزروعة، والحفاظ على تدفق إلى القناة الصفراوية المتلقي، والحفاظ على حالة المريض الفسيولوجية.
مفصلة هنا هي جميع الخطوات من هذا البروتوكول المنقحة، بما في ذلك التلاعب في جذع الاضطرابات الهضمية للكبد المانحة، فضلا عن استخدام 1) 1.5 مم الدعامة لأداء اتصال الأكمام خارج البلوم مع المتلقي HA السليم، 2) خياطة تشغيل لإعادة الإعمار SHVC، 3) اثنين من الأصفاد البلاستيكية المطبوعة 3D ل PV وإعادة الإعمار IHVC39،,40،4) إعادة توصيل الأكمام microvascular لH HA18،,27،,41 و 5) وهو سبق وصفها تقنية الدعامات BD28. كما تم تضمين خطوتين إضافيتين: تدفق بارد عبر PV، ونظام مضاد حيوي يستند إلى النتائج السابقة17. هذا البروتوكول OLT الأمثل يقلل من المضاعفات والأمراض في فترة ما حول العملية، ونماذج أكثر عن كثب إجراء العمليات الجراحية المستخدمة في زرع الكبد البشري.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>10-0 Ethilon</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>2830G</td>
			<td>10-0 Ethilon Black 1X5&#34; BV100-4 Taper</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>B302995</td>
			<td>Luer-Lok Tip, Sterile, Disposable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>B309628</td>
			<td>Luer-Lok Tip, Sterile, Disposable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>B301031</td>
			<td>Luer-Lok Tip, Sterile, Disposable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3D Printed Cuff for IHVC</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Custom</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3D Printed Cuff for PV</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Custom</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3D Printed Holder for IHVC</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Custom</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3D Printed Holder for PV</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Custom</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>B309657</td>
			<td>Luer-Lok Tip, Sterile, Disposable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 Sofsilk</td>
			<td>Coviden</td>
			<td>GS-835</td>
			<td>Wx coded braided silk, 30&#34;, Suture 1-Needle 26 mm Length 1/2 Circle Taper Point Needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-0 Monocryl</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>Y433H</td>
			<td>Undyed Monofilament 1X27&#34; TF</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>B309646</td>
			<td>Luer-Lok Tip, Sterile, Disposable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>7-0 Silk</td>
			<td>Teleflex Medical</td>
			<td>103-S</td>
			<td>Black</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8-0 Prolene</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>2775G</td>
			<td>8-0 Prolene Blue 1X24&#34; BV130-5 EVP Double Armed</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Barraquer Micro Needle Holder Without Catch</td>
			<td>Aesculap Surgical Instruments</td>
			<td>FD231R</td>
			<td>Curved 120 mm, 4 3/4&#8243;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Barraquer Needle Holder, Extra Fine Jaws 8.0mm, Curved With Out Lock</td>
			<td>Rumex International Co.</td>
			<td>8-025T</td>
			<td>Small Size, Titanium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Barraquer Needle Holder, Fine Jaws 12.0mm, Curved With Out Lock</td>
			<td>Rumex International Co.</td>
			<td>8-021T</td>
			<td>Small Size, Titanium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Insyte Autoguard BC 22 GA x 1.00 IN</td>
			<td>BD Angiocath / Autoguard</td>
			<td>382523</td>
			<td>22 G x 1.00&#34; (0.9 mm x 25 mm) Wingless catheter, 37 mL/min</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BDPrecisionGlide Single-use Needles: Regular Bevel - Regular Wall.</td>
			<td>BD</td>
			<td>B305106</td>
			<td>PrecisionGlide stainless-steel needles with translucent, color-coded, polypropylene hubs. 22 G</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Precisionglide Syringe Needle 21G</td>
			<td>BD</td>
			<td>305167</td>
			<td>Gauge 21, length 1.5 inch, hypodermic needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Precisionglide Syringe Needle 30G</td>
			<td>BD</td>
			<td>305128</td>
			<td>Gauge 30, length 1 inch, hypodermic needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine Solution by Purdue Products LP</td>
			<td>Purdue Products Lp</td>
			<td>67618-150-17</td>
			<td>10% povidone&#8211;iodine topical solution USP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bupivacaine Injection BP 0.5%</td>
			<td>SteriMax Inc.</td>
			<td>DIN:02443694</td>
			<td>0.5% (100mg/20mL)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved Tying Forceps</td>
			<td>Duckworth &#38; Kent</td>
			<td>2-501E</td>
			<td>6mm tying platforms, straight shafts, flat handle, length 88mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DC Temperature Controller</td>
			<td>FHC Inc.</td>
			<td>40-90-8D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DK Iris Scissors (Curved)</td>
			<td>Duckworth &#38; Kent</td>
			<td>1-211B</td>
			<td>Blunt tips, cut length 4mm, tip to pivot length 11mm, round handle, length 107mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol, 200 proof (100%), USP, Decon Labs</td>
			<td>Decon Labs, Inc.</td>
			<td>2716</td>
			<td>Dilute to 70% with d2H2O</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Adjustable Wire Retractor</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>17004-05</td>
			<td>Maximum spread: 3.5cm, Depth 5cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Harvard Apparatus Isoflurane Funnel-Fill Vaporizer</td>
			<td>Harvard Appartus Limited</td>
			<td>34-1040SV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin LEO(heparin sodium)</td>
			<td>LEO Pharma Inc.</td>
			<td>DIN:00453811</td>
			<td>10,000 i.u./10 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ice-Pak</td>
			<td>Cryopak</td>
			<td>FIP88016</td>
			<td>4.00 in. x 7.00 in., thickness 1.50 inch</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane United States Pharmacopeia (USP) 99.9%</td>
			<td>Piramal Healthcare Limited</td>
			<td>DIN: 02231929</td>
			<td>250 mL, Inhalation Anesthetic, NDC 66794-017-25</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Khaw Transconjunctival Adjustable Suture Control Forceps</td>
			<td>Duckworth &#38; Kent</td>
			<td>2-502N</td>
			<td>5mm highly polished tying platforms, straight shafts, flat handle, length 84mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lactate Ringer&#39;s Injected USP, 1000mL</td>
			<td>Baxter Co.</td>
			<td>DIN: 00061085</td>
			<td>JB2324</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>McPherson Tying Forceps</td>
			<td>Duckworth &#38; Kent</td>
			<td>2-500E</td>
			<td>6mm tying platforms, straight shafts, flat handle, length 90mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum Scissors - 14.5 cm</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14024-14</td>
			<td>Straight Sharp/Blunt</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Kitzmiller Clamp</td>
			<td>Scanlan</td>
			<td>3003-630</td>
			<td>Jaw length 23mm, Length 11cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope-Leica M525 F20</td>
			<td>Leica Microsystems</td>
			<td></td>
			<td>No catalog number</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-woven Gauze Sponges</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>22-028-556</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Olsen-Hegar with Suture Cutter</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12002-14</td>
			<td>15 mm cutting edge, 2mm jaw surface - 14cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OptixCare Eye Lube, 25gm</td>
			<td>OptixCare</td>
			<td>ES-KE8O-69U1</td>
			<td>Formerly Optixcare Surgical Eye Lubricant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Piperacillin sodium salt</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P8396</td>
			<td>Penicillin analog</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Puritan 3&#34; Standard Cotton Swab w/Wooden Handle</td>
			<td>Puritan Medical Products Company LLC</td>
			<td>803-WC</td>
			<td>Regular Cotton Tipped Applicator with Wooden Handle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Round Handled Needle Holder Straight w/ Lock</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12075-12</td>
			<td>Round handles allow easy fingertip adjustments - 12.5cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shea Scissors Curved Blunt</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14105-12</td>
			<td>Transplant scissors with light and delicate pattern - 12cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steel Micro Serrefines Curved - 4mm</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18055-06</td>
			<td>Jaw length 4mm, Jaw width 0.75mm, Total length 16mm, Jaw pressure 125g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steel Micro Serrefines Curved - 6mm</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18055-05</td>
			<td>Jaw length 6mm, Jaw width 1mm, Total length 17mm, Jaw pressure 100g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steel Micro Serrefines Straight - 6mm</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18055-03</td>
			<td>Jaw length 6mm, Jaw width 1mm, Total length 15mm, Jaw pressure 100g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Platform</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Custom, magnetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SurgiVet Vaporstick Anesthesia Machine</td>
			<td>General Anesthetic Services, Inc</td>
			<td>V7015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T/Pump Localized Therapy</td>
			<td>Stryker</td>
			<td></td>
			<td>TP700 Series</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacuum-Pressure Pump</td>
			<td>Barnant Co.</td>
			<td>400-1901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Scissors with Microserrations Straight</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15070-08</td>
			<td>Cutting edge: 5mm, Tip diameter: 0.1mm - 8.5cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetergesic Buprenorphine</td>
			<td>Ceva Animal Health Ltd</td>
			<td>NAC No.:12380352</td>
			<td>0.324 mg/ml buprenorphine hydochloride Solution for Injection for Dogs and Cats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetroson V-10 Bipolar Electrosurgical Unit</td>
			<td>Summit Hill Laboratories</td>
			<td></td>
			<td>No catalog number</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

reduced complications after arterial reconnection in a rat model of orthotopic liver transplantation

نموذج زراعة الكبد التقويمي للفئران (OLT) هو أداة قوية لدراسة الرفض الحاد والمزمن. ومع ذلك، فإنه ليس تمثيلا كاملا من زرع الكبد البشري بسبب عدم وجود إعادة الاتصال الشرياني. وتوصف هنا هي عملية زرع معدلة تشمل دمج إعادة ربط الشريان الكبدي (HA) مما يؤدي إلى تحسن ملحوظ في نتائج الزرع. مع متوسط الوقت anhepatic من 12 دقيقة و 14 ثانية، وHA إعادة الاتصال يؤدي إلى ضخ محسنة للكبد المزروع وزيادة في البقاء على قيد الحياة على المدى الطويل المتلقي من 37.5٪ إلى 88.2٪. ويشمل هذا البروتوكول استخدام الأصفاد المطبوعة ثلاثية الأبعاد وأصحابها لربط الوريد المدخلي و الوريد السفلي الوريدي السفلي. ويمكن تنفيذها لدراسة جوانب متعددة من زرع الكبد، من الاستجابة المناعية والعدوى إلى الجوانب التقنية للعملية. من خلال دمج طريقة بسيطة وعملية لإعادة الاتصال الشرياني باستخدام تقنية الأوعية الدموية الدقيقة ، وهذا البروتوكول OLT الفئران المعدلة يحاكي عن كثب جوانب من زرع الكبد البشري ، وسوف تكون بمثابة نموذج البحوث القيمة ذات الصلة سريريا.

أثناء إنشاء نموذج OLT الفئران 11 1 فئران غير ها باستخدام بروتوكول28الموصوف سابقًا ، لاحظ فريقنا معدلات بقاء 50٪ و 37.5٪ في 21 يومًا و 60 يومًا بعد العملية ، على التوالي. على الرغم من أن معدلات عالية من البقاء على قيد الحياة على المدى الطويل دون ه قد تم الإبلاغ عن anastomosis من قبل بعض المجموعات28, هذه النتائج المبكرة تسليط الضوء على عيوب عدم وجود تدفق الشرايين. وعلى النقيض من ذلك، فإن إجراء إعادة الاتصال الأمثل من الها زاد بشكل كبير من البقاء على قيد الحياة على المدى الطويل من 37.5٪ إلى 88.2٪ (p = 0.015) (الشكل 6).
تحليل النسيج من مجموعة فرعية تمثيلية من الحيوانات المزروعة دون إعادة الاتصال HA (في أيام 6 و 13 بعد العملية) أظهرت علامات إصابة الكبد نقص الأكسجة مع نخر ه (الشكل 7). ارتبط نخر الكبد واسعة النطاق مع مستويات مرتفعة للغاية من أميناترانفيراز ألانين (ALT) وaspartate aminotransferase (AST) في هذه الحيوانات(الشكل 7). في المقابل، الفئران المزروعة مع إعادة الاتصال HA أظهرت أي علامات على إصابة الكبد، وكشف تحليل النسيجية بنية الكبد البارينشيما طبيعية مع acini المنظمة، والفص (على سبيل المثال، الوريد المركزي وبوابة ثالوث مع الوريد الكبدي)، والشرايين، والقناة الصفراوية(الشكل 7).
وعلى الرغم من أن متوسط الوقت الواهي على مدى 23 عملية منفصلة كان مقبولاً (12 دقيقة و14 s [± 78 s])، إلا أنه لا يزال من الممكن أن البقاء في نموذج إعادة الاتصال غير HA يمكن تحسينه في نهاية المطاف مع زيادة الممارسة. ومع ذلك ، تجدر الإشارة إلى أن ثلاثة من الحيوانات الأربعة المزروعة دون إعادة توصيل HA (والتي كانت تتبع للبقاء على قيد الحياة على المدى الطويل) تم قتلها بسبب الضيق في الأيام 56 و 96 و 111 بعد العملية. بالإضافة إلى ذلك، كشف التحليل النسيجي للكبد عن تغيرات تفاعلية بعد إصابة الكبد المهووسة بما في ذلك انتشار القناة الصفراوية الملحوظة، والتليف البيربورتالي والالتهاب، وتسمية الكبد المشوهة(الشكل التكميلي 2). وجود ملامح مورفولوجية من إصابة الكبد نقص الأكسجة تؤكد النتائج التي إعادة الاتصال HA مهم لضخ الكبد كفاءة والوظائف العادية.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60628/60628fig1.jpg"> الشكل 1: التمثيل التخطيطي لتصميم الكفة المطبوعة ثلاثية الأبعاد للوريد المدخلي و الوريد السفلي السفلي الوريدي الوريدي. يتم شد ربطة العنق الأولى في الأخدود (الثاني) الأقرب إلى المقبض (الثالث)، ويتم شد التعادل الثاني في الأخدود (i) الأبعد عن المقبض. أما القطر الخارجي فهي (4) 2.38 مم للوريد المدخلي (PV) و2.15 مم لفرهيدباغية الوريد السفلية (IHVC). أما القطران الداخليان فتكونان (v) 1.74 مم بالنسبة لـ PV و1.38 مم بالنسبة للـ IHVC. أطوال هي (6) 2.60 ملم ل PV و 2.15 ملم لـ IHVC (يمكن العثور على المواصفات الدقيقة لجميع المواد المطبوعة ثلاثية الأبعاد في المواد التكميلية). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/60628fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60628/60628fig2.jpg"> الشكل 2: الشريان الكبدي الدعامة الإدراج في الكسب غير المشروع. (أ) يتم توسيع النهاية الافتتاحية للشنع الاضطرابات الهضمية (i) عن طريق قطع الشريان الزبليني إلى الشريان المعد الأيسر ، مما يعرض تشعب الـ HA المشترك. '2' ربط الدعامة BD قبل استخراج كبد الفئران المتبرع. '3' تُدرج الكفة الكهروضوئية و (4) كفة IHVC وتُربط عن طريق طي أطراف الأوعية فوق الكفة. (B)(ط) لإدراج الدعامة HA، يتم تمديد HA المشتركة المكشوفة عدة مرات مع ملقط. (C)(ط) يتم وضع الدعامة HA بشكل آمن في HA المشتركة وتعادل مع 8-0 برولين. (D)(i) يتم مسح الدعامة ها مع (2) حل اللاكتات Ringer (BD = القناة الصفراوية، IHVC = الوريد السفلي الوريدي السفلي، HA = الشريان الكبدي). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/60628fig2large.jpg" target="_blank">الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60628/60628fig3.jpg"> الشكل 3: اتصال الوريد السفلي الوريدي السفلي باستخدام حامل مطبوع 3D. (A) يتم توصيل (i) PV باستخدام نفس تقنية اتصال IHVC. الكسب غير المشروع هو (2) فرضت فوق (3) IHVC الكفة. فتح IHVC المتلقي هو (4) خياطة على جانبي الفتحة إلى حامل مطبوع ثلاثي الأبعاد لإبقائه مفتوحًا. وتعادل فضفاضة (v) 7-0 الحرير حول المتلقي IHVC. (ب) يتم إدراج الكفة من الطعم غير المشروع IHVC (i) داخل IHVC المتلقي. التعادل الفضفاض أصبح الآن مُحكماً (C) تتم إزالة المشبك ، و (i) يتم فصل حامل المطبوعة ثلاثية الأبعاد مع مقص. (D) يتم ربط حرير إضافي (i) 7-0 حول الاتصال إن لم يكن آمنًا ، ولكن عادةً ما يكون التعادل واحدًا كافيًا (PV = Vein portal ، IHVC = الوريد السفلي الوريدي السفلي). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/60628fig3large.jpg" target="_blank">الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60628/60628fig4.jpg"> الشكل 4: اتصال الأكمام الدقيقة الوعائية للشريان الكبدي. (أ) (i) الدعامة BD غير متصلة بالمستلم. '2' توضع دعامة الـ HA في الكسب غير المشروع، الذي يرتبط بـ (4) الـ HA المناسبة للمتلقي. '3' تكون الطاقة الكهروضوئية متصلة. (B) 10-0 ethilon مع (ط) يتم رسم إبرة منحنية من خلال الدعامة HA إلى جانبي الطرف فتح HA المتلقي. (C) يتم سحب ethilon 10-0 مرة أخرى من خلال الدعامة HA؛ لذلك ، يتم سحب HA المناسبة للمستلم من خلال الدعامة مثل الأكمام. (D)(ط) يتم التعادل مع 10-0 ethilon مرة واحدة يتم سحب HA المتلقي السليم في الدعامة إلى الجزء الذي يعمل لأول مرة من خلال الدعامة HA. (E) هو موضح هنا هو مخطط من anastomosis HA الموصوفة في (B)، (C) ، و (D) (BD = القناة الصفراوية ، HA = الشريان الكبدي ، PV = الوريد المدخلي). * يتم توسيع نهاية افتتاح الجذع الاضطرابات الهضمية عن طريق قطع الشريان الزلي إلى الشريان المعدي الأيسر. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/60628fig4large.jpg" target="_blank">الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60628/60628fig5.jpg"> الشكل 5: اتصال القناة الصفراوية باستخدام اثنين من الدعامات. (أ)(ط) يتم إدراج دعامات BD Graft في BD المتلقي بمساعدة (ii) الدعامات المربوطة بشكل فضفاض عند افتتاح BD الخاص بالمستلم. (3) ترتبط PV قبل اتصال BD، الذي يقع خلف BD. (B)تتم إزالة الدعامة في نهاية BD الخاص بالمستلم واستخدامها كفتحة موسعة لـ (i) إدراج دعامة BD المربوطة بالكسب غير المشروع. (C) يتم الآن استخدام ربطة العنق التي تضمن بشكل فضفاض دعامات المتلقي لربط الاتصال ، و (ط) آخر 7-0 الحرير يستخدم للحفاظ بحزم على الدعامة في مكان لتجنب الانزلاق أو التواء من الدعامة. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/60628fig5large.jpg" target="_blank">الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60628/60628fig6.jpg"> الشكل 6: نسبة الزرع في البقاء على قيد الحياة. زرع كبد الفئران العظام دون إعادة توصيل HA (n = 8) ومع إعادة الاتصال HA (n = 17). تتم متابعة الحيوانات عن كثب بعد زرع لعلامات فشل الكبد و / أو العدوى لمدة 60 يوما على الأقل. الفئران التي لم تظهر أي مضاعفات بعد الجراحة اعتبرت الناجين (* ع = 0.015، كما حسبت تقدير كابلان ماير [اختبار الرتبة الطويلة]). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/60628fig6large.jpg" target="_blank">الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60628/60628fig7.jpg"> الشكل 7: التقييم الهستوولوجي للكبد. ممثل الهيماتوكسيلين والأيوسين الملون أقسام في الحيوانات (A) بدون و (B) مع إعادة الاتصال الشريان الكبدي (HA) في أيام 6 و 13 بعد زرع الكبد (LTx). (C) الكبد العادي parenchyma تظهر البوابة ثالوث (الوريد المدخل, الشريان, والقناة الصفراوية), الفصيصات بما في ذلك الوريد المركزي, و acini. خلايا الكبد بجوار ثالوث المدخل هي منطقة 1 خلايا الكبد; خلايا الكبد بجوار الوريد المركزي داخل الفص هي المنطقة 3 خلايا الكبد؛ و هي خلايا الكبد بين المناطق 1 و 3 هي منطقة 2 خلايا الكبد (ALT = ألانين أمينوترانترفيراز، AST = أمينباترينفيراز الأسبارتات، CV = الوريد المركزي). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/60628fig7large.jpg" target="_blank">الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Supplementary Figure 1" src="/files/ftp_upload/60628/60628suppfig1.jpg"> الشكل التكميلي 1: أبعاد الدعامة والكفة. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/60628suppfig1large.jpg" target="_blank">الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Supplementary Figure 2" src="/files/ftp_upload/60628/60628suppfig2.jpg"> الشكل التكميلي 2: التقييم الهستوولوجي للكبد يظهر اضطراباً في الورم الكبدي. ممثل الهيماتوكسيلين والأيوسين الملون في أقسام الحيوانات دون إعادة الاتصال HA في أيام 54 و 96 و 111 بعد LTx. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/60628suppfig2large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
المواد التكميلية 1: بورتا الكفة 200g - دعم 2.0. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/supplementary1.stl" target="_blank">الرجاء الضغط هنا لعرض هذا الملف (انقر بزر الماوس الأيمن للتحميل).</a>
المواد التكميلية 2: كافا الكفة 200g - دعم 2.0. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/supplementary2.stl" target="_blank">الرجاء الضغط هنا لعرض هذا الملف (انقر بزر الماوس الأيمن للتحميل).</a>
المواد التكميلية 3: 200g ناص الكبد. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/supplementary3.stl" target="_blank">الرجاء الضغط هنا لعرض هذا الملف (انقر بزر الماوس الأيمن للتحميل).</a>
المواد التكميلية 4: حامل الظهر - 1.2. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/supplementary4.stl" target="_blank">الرجاء الضغط هنا لعرض هذا الملف (انقر بزر الماوس الأيمن للتحميل).</a>
المواد التكميلية 5: كافا 150g - 2.1. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/supplementary5.stl" target="_blank">الرجاء الضغط هنا لعرض هذا الملف (انقر بزر الماوس الأيمن للتحميل).</a>
المواد التكميلية 6: بورتا 1.4.1. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/supplementary6.stl" target="_blank">الرجاء الضغط هنا لعرض هذا الملف (انقر بزر الماوس الأيمن للتحميل).</a>
المواد التكميلية 7: حامل الذراع McGil. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/supplementary7.stl" target="_blank">الرجاء الضغط هنا لعرض هذا الملف (انقر بزر الماوس الأيمن للتحميل).</a>
المواد التكميلية 8: حامل الذراع المصغرة LAB. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/supplementary8.stl" target="_blank">الرجاء الضغط هنا لعرض هذا الملف (انقر بزر الماوس الأيمن للتحميل).</a>
مادة تكميلية 9: حامل وذراع الجزء لينة 1.3. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/supplementary9.stl" target="_blank">الرجاء الضغط هنا لعرض هذا الملف (انقر بزر الماوس الأيمن للتحميل).</a>
المواد التكميلية 10: قاعدة حامل - 3.1. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/supplementary10.stl" target="_blank">الرجاء الضغط هنا لعرض هذا الملف (انقر بزر الماوس الأيمن للتحميل).</a>

Watch this Scientific Journal Video about Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation at JoVE.com

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

الهدف من هذه الدراسة هو تعديل نموذج زرع الكبد العظام الفئران لتمثيل أفضل زرع الكبد البشري وتحسين البقاء على قيد الحياة المتلقي. تعيد الطريقة المعروضة إعادة تأسيس تدفق الشرايين الكبدية عن طريق ربط الشريان الكبدي المشترك للكبد المتبرع بالشريان الكبدي السليم في الكبد.

مضاعفات مخفضة بعد إعادة الاتصال الشرياني في نموذج الجرذ من زرع الكبد العظام

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...

نموذج زرع الكبد العظام الفئران هو أداة قوية لدراسة جوانب متعددة من زرع الكبد. من الاستجابة المناعية على العدوى ، إلى الجوانب التقنية للإجراء. المزايا الرئيسية لهذه التقنية هي أنه يمكن أن تقلل من المضاعفات، وأفضل تمثيل زرع الكبد المجيئي، وتحسين البقاء على قيد الحياة المتلقي.هذا البروتوكول المعدل لزراعة الكبد العظام الفئران يحاكي عن كثب جوانب زرع الكبد البشري، وسوف تكون بمثابة نموذج البحوث المتغيرة ذات الصلة سريريا. ونأمل أن يتمكن المشاهدون من خلال العرض المرئي من معرفة كل التفاصيل وتقصير منحنى التعلم لإتقان مهارة الجراحة المجهرية المطلوبة لهذه التقنية. بعد حقن 300 وحدة دولية من الصوديوم الهيبارين في الوريد السفلي داخل الجسم الوريدي الوريدي السفلي من الجرذ من العمر 12 إلى 14 أسبوعًا ، قم بعمل شق خمسة ملليمترات تحت تشعب القناة الصفراوية ، وأدخل دعامة القناة الصفراوية في القناة الصفراوية الشائعة.تأمين الدعامة مع واحد 7-0 ربط الحرير، ملليمتر واحد فوق الشق، و1 أربطة 10 ملليمترات تحت التشعب. قطع القناة الصفراوية بين العلاقات اثنين وفضح الشريان الكبدي السليم. تقسيم الشريان المعدية بين اثنين من 7-0 خيوط الحرير، وفضح الشريان المعدي الأيسر والشريان الزلي والجذع الاضطرابات الهضمية.ثم قطع الشريان الأيسر في المعدة، والشريان الزلي، والجذع البطني بين ربطات عنق الشريان. استخدام حقنة 20 ملليلتر مجهزة بإبرة قياس 21.5 لحقن ببطء 20 ملليلتر من محلول لاكتات رينغر أربع درجات مئوية في الوريد المدخل. لإعداد الكبد المانح، قم بقطع تشعب جذع الاضطرابات الهضمية والشريان الزلي والشريان المعدي الأيسر لتشكيل كفة أكبر كم شرياني وأدخل الدعامة الشريانية قياس 1.5 ملليمتر 24 في الشريان الكبدي المشترك المانح عبر الكفة.ثم تأمين الدعامة مع 8-0 البولي بروبلين رباط وشطف الدعامة مع الحل لاكتات رينجر. بعد تعريض الوريد المدخل من 12 إلى 14 أسبوع من العمر الجرذان المتلقي، تقسيم القناة الصفراوية المتلقي في 0.5 سم تحت تشعب التليط، وإدراج دعامة القناة الصفراوية في القناة الصفراوية المشتركة. كشف الشرايين الكبدية اليسرى والوسطى والأيّني وربط الأوعية بتشعب الشريان الكبدي.قطع الشرايين على مقربة من الكبد فوق العلاقات ووضع قطعة طويلة رقيقة من الشاش وراء الوريد الكبدي أدنى السوبر الكافا. وضع 3D المطبوعة داخل الجسم حامل الكافا الوريدي وراء الوريدي intrahepatic كافا واستخدام خياطة أحادية تينو غير قابلة للامتصاص لخياطة نهايات مقبض 3D المطبوعة معا. ربط فضفاضة 7-0 الرباط الحرير أدناه كل من حامل المطبوعة 3D بين الكافا فينا داخل الكبد والوريد البوابة، ومقبك الوريد intrahepatic كافا فقط فوق الوريد الكلوي الأيمن تحت حامل الكافا المطبوعة 3D.المشبك الوريد المدخل فقط فوق الوريد البواقل وتحت حامل PV المطبوعة 3D. باستخدام حقنة ثلاثة ملليلتر مع إبرة قياس 27 المرفقة، مسح ملليلتر اثنين من محلول اللاكتات رينغر 37 درجة مئوية عبر تشعب الوريد المدخل، ومشابك الوريد الكبدي السوبر الكافا فوق الكبد مع المشبك Kitzmiller. ثم قطع تحت المشبك أقرب ما يمكن إلى الكبد وقطع فوق أصحاب 3D المطبوعة لكل من الوريد المدخل وبين الكبد الكبد لإزالة الكبد المتلقي.لزرع الكبد المانحة، توجيه بعناية الكبد المانحة داخل تجويف الجسم المتلقي في مثل هذه الطريقة التي يمكن إنشاء تنام الاستئصال المرصوفة بالحصى العلوي. أدخل الكفة الوريدية المدخل من المتبرع في الوريد المدخل المتلقي وتشديد التعادل الحرير 7-0. إزالة المشبك اليابانتيك من الكفاة الكبدية السوبر وإزالة مقطع microvascular للوريد المدخل.بعد إعادة ضخ الكبد بالدم الدافئ، أدخل الكفة الوريدية داخل الوريد المانحة داخل الوريد داخل الوريد داخل الكافا المتلقي وتأمين السفينة مع ربطة عنق حريرية 7-0. ثم إزالة المانحة داخل الكبد مقطع كافا قبل إزالة مقطع المتلقي. لإجراء التهاب الأوعية الشرياني ، قطع جزء من جذع الاضطرابات الهضمية من المتبرع الذي يمتد إلى ما وراء الدعامة ، وتضييق الشريان الكبدي السليم للمتلقي.قطع ربطة العنق في نهاية وأي أنسجة إضافية المحيطة السفينة. واستخدام حل اللاكتات رينجر لطرد التجويف من كل من المانحة والمتلقية السفينة ينتهي. باستخدام إبرة منحنية، ضع خياطة 10-0 الإثنيلون من خلال الجانب الأيسر من الشريان الكبدي المانح، 2.5 ملليمتر فوق الفوهة من الدعامة، والخروج من خلال نهاية الدعامة.احول الشريان الكبدي المناسب للمتلقي 0.5 ملليمتر أسفل فتحة الوعاء من الجانب الأيسر من الوعاء، إلى الجانب الأيمن من الشريان. وضع خياطة المقبل من خلال الجدار الأيمن للشريان الكبدي المانح من الداخل إلى الخارج، على مسافة من فتحة الدعامة متطابقة إلى غرزة الأصلي، وسحب ما يصل على طرفي أحادية 10-0 غير مُسْبَنِبِة لتنزلق الشريان الكبدي المناسب المتلقي إلى الأعلى، وإلى دعامة الشريان الكبدي. ثم ربط أحادية 10-0 غير قابلة للابكاب مع نفسها على الشريان الكبدي المانح.تدفق كل من القنوات الصفراوية المتلقي والمتبرع، وإدراج الدعامات القناة الصفراوية المانحة في القناة الصفراوية المتلقي. ثم تشديد التعادل التي كانت وضعت سابقا حول القناة الصفراوية المتلقي. في هذه التجربة التمثيلية، أظهر نموذج زرع الكبد التقويمي للفئران 50 و37.5٪ من معدلات البقاء على قيد الحياة، بمعدل 21 يومًا و60 يومًا، بعد العملية على التوالي.وعلى النقيض من ذلك، فإن إجراء إعادة توصيل الشريان الكبدي الأمثل زاد بشكل كبير من البقاء على قيد الحياة على المدى الطويل. كشف التحليل النسيجي لمجموعة فرعية تمثيلية من الحيوانات المزروعة دون إعادة توصيل الشريان الكبدي عن علامات إصابة الكبد نقص الأكسجين مع نخر الفصيص المركزي، في اليوم السادس والثالث عشر بعد إجراء عملية زرع. ارتبط نخر الكبد الواسع بمستويات مرتفعة بشكل كبير من نقل مناعة ألانين وناقلات أمينية الأسبارتات في هذه الحيوانات.في المقابل، لم تظهر الفئران المزروعة التي لديها إعادة توصيل الشريان الكبدي أي علامات على إصابة الكبد وكشف التحليل النسيجي عن بنية بارينشيما كبدية طبيعية، مع acini المنظم والفص والشرايين والقنوات الصفراوية. بالإضافة إلى ذلك، كشف التحليل النسيجي للكبد من الفئران نموذج إعادة الاتصال الشريان غير الكبدي التغيرات التفاعلية بعد إصابة الكبد نقص الأكسج. بما في ذلك انتشار القناة الصفراوية السوق, بيري بوابة التليف والالتهاب, وتشويه الكبد parenchyma.ويمكن تكييف هذا البروتوكول لدراسة العديد من الجوانب المناعية والجراحية لزراعة الكبد ويمكن أن يكون بمثابة نموذج لاختبار التدخلات العلاجية الجديدة ذات الصلة بزرع.

Research

JoVE Journal

Medicine

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

زرع مثلي الأورطي : نموذج الفأر لدراسة تطوير المزمنة اعتلال وعائي

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation

تطوير النزلات الشعبية مسد في نموذج الفئران من زرع الرئة Orthotopic

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and ...

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

زراعة كبد في الفئران

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat ...

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

العمليات الجراحية لنموذج الفئران من الجزئي زرع الكبد orthotopic مع إعادة الإعمار الكبدي الشرياني

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

نموذج الفئران من أورثوتوبيك زرع الكبد استخدام تقنية رواية ملامسة مغناطيسي للتعمير الوريد الأجوف سوبراهيباتيك

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...

Transplantation of Adipose Tissue-Derived Stem Cell Sheet to Reduce Leakage After Partial Colectomy in A Rat Model

زرع صفحة الخلايا الجذعية المشتقة من الأنسجة الدهنية للحد من تسرب بعد Colectomy الجزئية في نموذج الفئران

Anastomotic leakage is a disastrous complication after colorectal surgery. Although current methods for leakage prevention have different levels of ...

A Pre-Clinical Porcine Model of Orthotopic Heart Transplantation

نموذج بورسين ما قبل السريرية لزراعة القلب التقويمي

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart ...

Orthotopic Rat Kidney Transplantation: A Novel and Simplified Surgical Approach

زرع الكلي الفئران العظام: نهج الجراحية الجديدة والمبسطة

Kidney transplantation offers increased survival rates and improved quality of life for patients with end-stage renal disease, as compared to any type of ...

Organ Ischemia-Reperfusion Injury by Simulating Hemodynamic Changes in Rat Liver Transplant Model

إصابة الجهاز الإقصاب الإقفاري-Reperfusion عن طريق محاكاة التغيرات الديناميكية الدموية في نموذج زراعة كبد الفئران

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats is a tried and proven animal model used for preoperative, intraoperative, and postoperative studies, ...

Left Lung Orthotopic Transplantation in a Juvenile Porcine Model for ESLP

زرع تقويم الرئة اليسرى في نموذج خنزير الأحداث ل ESLP

Lung transplantation is the gold-standard treatment for end-stage lung disease, with over 4,600 lung transplantations performed worldwide annually. ...