Name: reduced complications after arterial reconnection in a rat model of orthotopic liver transplantation
Uploaded: 2020-11-07T13:00:00
Duration: 8 min 39 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation at JoVE.com

Это исследование финансировалось за счет средств от программы пересадки нескольких органов в UHN и поддержки со стороны Торонто Генеральный и Торонто Западный фонд.

Авторов нечего раскрывать.

Модели пересадки печени маленьких животных имеют важное значение для понимания иммунитета к трансплантации и выявления новых терапевтическихстратегий 32. Идеальная модель трансплантации печени маленького животного повторяет все этапы человеческой процедуры, включая артериальный астомоз. Это может быть сложной задачей для интерпретации результатов от крысы OLT модели, так как большинство версий не включают ha анатомоз шаг, который приводит к более высоким показателям осложнений изаболеваемости 42. Некоторые процедуры реконструкции использовали почечную артерию, которая требует удаления почки27. Этот протокол позволяет избежать удаления органов, так как он выходит за рамки того, что происходит в человеческой процедуре.
Артериальные реконструкции также могут быть выполнены путем манипулирования аортыкрысы 31. Однако эти методы требуют обширного вскрытия и зажима аорты. Если время зажима продлевается, то получатель крысы будет иметь плохие результаты, связанные с дистальной ишемии43. У людей, LT хирургическая техника включает в себя перевязку и деление реципиента гастродуодеальной артерии (GDA). Однако физиологические и анатомические особенности грызунов делают трансплантацию с использованием этой методики более физиологически сложной и могут привести к осложнениям (т.е. некрозу поджелудочной железы и желчногопротока 35 иутечке желчи 44). Артериальное воссоединение в этом протоколе предназначено, чтобы обойти эту проблему, поддерживать кровоток протока, и улучшить результат реципиента.
Использование рукава и стентирования техники для реконструкции крысы HA было описано ранее27. В этой технике, стент используется в качестве руководства, и артерия реконструируется от донора целиакии ствола получателя общего HA. Получатель общего HA затем рассечены, и получатель GDA связан с27. В результате может быть нарушено кровоснабжение нижней части реципиента БД и головой поджелудочной железы. Считается, что коллатеральной циркуляции в этой области часто обеспечивает недостаточный приток крови к желчному протоку. Например, этот протокол тест-зажимы получателя GDA сначала с микрососудистым клипом, а затем делит получателя BD. С GDA зажата, разделенный BD не кровоточит. После удаления зажима GDA наблюдается оживленное кровотечение из BD. Этот протокол, который поддерживает хороший поток к разделенному желчному протоку получателя, защищает физиологию ткани печени получателя, обеспечивая адекватную перфузию крови печени и предотвращая гипоксическую травму печени после OLT.
На стороне донора, стент HA вставляется в ствол целиакии во время подготовки трансплантата с легкостью, создавая патч из целиакии ствола, левой желудочной артерии, и splenic артерии. Стент может быть вставлен через широкое отверстие, которое является менее трудным, чем пытаться вставить стент в ствол целиакии в одиночку. Было установлено, что 24 G является идеальным размером для использования для стента HA. Длина стента должна быть 1,0-1,5 мм в длину, потому что он действует как открытые ворота, чтобы позволить реципиента надлежащего HA быть легко вытащил в общий HA донора. При внимательном внимании к местам, где находится 10-0 этилоновый шов, кровь, протекающая через эту связь, никогда не коснется стента напрямую, и надлежащий HA получателя оградит его изнутри, снижая риск осложнений. Важно отметить, что HA донора никогда не зажимается, чтобы избежать вазоспазма. Успех артериальной реконструкции оценивается путем оставляя донора GDA открытым. Успешный анатомоз приводит к хорошему притоку крови от донора GDA после завершения реконструкции.
В этом протоколе, как и в других, повторное подключение SHVC является самым медленным шагом и в конечном итоге диктует продолжительность анхепатической фазы. По мере увеличения продолжительности анхепатической времени риск ишемической травмы и дисфункции печени увеличивается на45. Другим важным компонентом OLT крысы модели размеров трансплантата, стенты и манжеты. Если трансплантат слишком мал, трансплантат может крутиться или переворачиваться, препятствуя сосудистым соединениям. Размер стентов и манжет может потребовать корректировки в зависимости от возраста, пола, веса и деформации крысы. Размер манжеты, используемые здесь был выбран, как ранееописано 28, и один размер манжеты, которые контролируются для крыс размер был использован. Не было никаких признаков бедствия или осложнений (т.е. перегрузки печени, отеки, асциты или splenomegaly) в течение последующего периода (на сегодняшний день: средний 133 дней после операции, минимум 115 дней после операции, максимум 161 дней после операции). Необходимы дальнейшие исследования для определения подходящего размера PV и IHVC для различных штаммов крыс, учитывая как возраст, так и пол.
Этот модифицированный протокол крысы OLT использует 3D-печатные манжеты для PV и IHVC, какописано ранее 39,40. Существующие методы подключения PV и IHVC включают в себя техникумикросутуры 32,манжеты техники 46, и микросутуры временнойтехники шины 47. 3D-печать манжеты техника была выбрана, так как она позволяет размер манжеты, чтобы быть стандартизированы в зависимости от штамма крысы и легко подготовить и использовать. Большое количество манжет с одинаковыми размерами можно распечатать сразу. Внешняя поверхность манжеты имеет два канавки, чтобы помочь с обеспечением связей и предотвращения скольжения. Хвост также включен в конструкцию манжеты, чтобы облегчить манипуляцию манжетой. В целом, считается, что включение 3D-печатных манжет приводит к высоким показателям успеха и воспроизводимости процедуры OLT за счет сокращения времени анхепатики. Установлено, что этот метод также сокращает хирургическую кривую обучения.
В заключение, описанный протокол установил модель, которая больше похожа на трансплантацию печени человека путем включения артериального шага воссоединения. Этот протокол может быть адаптирован для изучения многих иммунологических и хирургических аспектов трансплантации печени и может служить моделью для тестирования новых терапевтических вмешательств, имеющих отношение к трансплантации.

Глобальное бремя заболеваний печени продолжает расти, с 30% рост смертности, связанных с заболеваниями печени с 2005 по 2013год 1,2. Трансплантация печени часто является единственным средством для пациентов с заболеваниями печени на конец стадии. Печень является вторым наиболее часто пересаженным твердым органом, а количество пересадок печени, выполняемых во всем мире, увеличилось на 7,25% с 2015 по 2016год 1,2. Несмотря на свою распространенность, показатели выживаемости после трансплантации сталистагнировать 3,,4,,5. 15-летняя выживаемость пациентов, как сообщается, составляет 53%, а 20-летняя выживаемость пациентов может быть как низко как 21%3,5. Хотя существуют новые интересные иммунобиологические инициативы, которые могут привести к новым методом лечения и улучшению клинических результатов, пока еще нет надежной модели малых животных, в которой можно было бы их протестировать.
Крыса OLT модель широко используется в расследовании трансплантации печени, в томчисле отказ 6,7,8,9,10, иммуннаятолерантность 11, трансплантации ишемии-реперфузиитравмы 12, иммуносупрессии13, и желчныхтравмы дерева 14,15,16,17.9 Однако недостатком модели в ее нынешнем виде является ее высокая послеоперационная заболеваемость и смертность18,,19. Это серьезный недостаток, который находится в противоречии с человеческой операции, и это ставит под угрозу способность делать клинически соответствующие выводы из модели20.
Кроме того, большая часть этой заболеваемости может быть отнесена к отсутствующей или несовершенной печеночным артерии (HA) воссоединение18. Хотя критический шаг в трансплантации печени человека, технические трудности, как правило, компрометации HA воссоединения в крысы OLT модели. В результате, анастомоз желчных протоков (BD) является слабым и приводит к высоким показателям утечки желчи и некрозаBD 21. Помимо высокой частоты желчныхосложнений 22, отсутствие артериального притока изменяет физиологию трансплантата печени после трансплантации23, с гипоксией в донорскойпечени трансплантата 24 и повреждения печени наблюдается воспалениедолей 19,25,26. Крыса OLT без артериального воссоединения также имеет тенденцию содействовать фиброз27. Крыса OLT протокол, описанный ниже, решает эти вопросы путем включения простой шаг реконструкции HA с ранее опубликованным методом OLTкрысы 28, в результате чего сохранение печени parenchyma и улучшение выживаемости.
Трансплантация печени имеет три фазы: (1) экстракция трансплантата печени от донора, (2) препарат донорского трансплантата печени и (3) замена печени реципиента трансплантатом печени. Процедура включает в себя манипуляции пяти анатомических структур: супрагепатической нижней вены кавы (SHVC), портальный вены (PV), инфрахепатическое нижней кавы вены (IHVC), печеночных артерий (HA), и желчный проток (BD).
OLT в крысе был впервые введен Ли и др. с использованием микросутурного анатомоза SHVC, PV и IHVC, а также протягивания техники для BD29. Эта модель была позже улучшена с помощью двух-манжеты техники в 1979году 30. С тех пор было предложено несколько альтернативных методов, при этом большинство из них сосредоточились на венозном анатомозе и использовании двухзапонной техники с несколькимимодификациями 31. Хотя HA анатомоз был описан ранее в модели крысы OLT с использованием таких методов, как микросутура, манжеты и внутрисветовые рукава26,31,32,33,34, эти методы часто требуют высококвалифицированных микрохирургических навыков, значительно изменить физиологию крыс, и препятствуют тромбоза и / или желчныхосложнений 27,35.
Кроме того, выбор хирургической процедуры может также влиять на анхепатической времени (время от. зажима для reperfusion трансплантата через восстановленный П.В.), который имеет решающее значение для успеха трансплантации печени крысы. В частности, высокие показатели выживаемости наблюдаются с анхепатической раз 15-20мин 36, и 30 мин является верхнимпределом успеха 37,38. Таким образом, цель этого метода заключается в реализации менее инвазивных и более легко принять хирургической крысы OLT модель, которая способна восстановить печеночной артерии, содействовать эффективной перфузии пересаженной печени, поддерживать поток к получателю желчного протока, и сохранить физиологическое состояние получателя.
Подробные здесь все шаги этого пересмотренного протокола, в том числе манипуляции целиакии ствол донорской печени, а также использование 1) 1,5 мм стент для выполнения экстралюминального рукав связи с получателем надлежащего HA, 2) работает шов для реконструкции SHVC, 3) два 3D-печатных пластиковых манжет для PV и IHVCреконструкции 39,40, 4) микрососудистый рукав повторного подключения для HA18,27,41 и 5) ранее описанные BD стентированиетехники 28. Два дополнительных шага также включены: холодный флеш через PV, и антибиотик режим, который основан на предыдущих выводах17. Этот оптимизированный протокол OLT сводит к минимуму периоперационные осложнения и заболеваемость и более тесно моделирует хирургическую операционную процедуру, занятую в трансплантации печени человека.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>10-0 Ethilon</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>2830G</td>
			<td>10-0 Ethilon Black 1X5&#34; BV100-4 Taper</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>B302995</td>
			<td>Luer-Lok Tip, Sterile, Disposable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>B309628</td>
			<td>Luer-Lok Tip, Sterile, Disposable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>B301031</td>
			<td>Luer-Lok Tip, Sterile, Disposable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3D Printed Cuff for IHVC</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Custom</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3D Printed Cuff for PV</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Custom</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3D Printed Holder for IHVC</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Custom</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3D Printed Holder for PV</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Custom</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>B309657</td>
			<td>Luer-Lok Tip, Sterile, Disposable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 Sofsilk</td>
			<td>Coviden</td>
			<td>GS-835</td>
			<td>Wx coded braided silk, 30&#34;, Suture 1-Needle 26 mm Length 1/2 Circle Taper Point Needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-0 Monocryl</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>Y433H</td>
			<td>Undyed Monofilament 1X27&#34; TF</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>B309646</td>
			<td>Luer-Lok Tip, Sterile, Disposable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>7-0 Silk</td>
			<td>Teleflex Medical</td>
			<td>103-S</td>
			<td>Black</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8-0 Prolene</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>2775G</td>
			<td>8-0 Prolene Blue 1X24&#34; BV130-5 EVP Double Armed</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Barraquer Micro Needle Holder Without Catch</td>
			<td>Aesculap Surgical Instruments</td>
			<td>FD231R</td>
			<td>Curved 120 mm, 4 3/4&#8243;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Barraquer Needle Holder, Extra Fine Jaws 8.0mm, Curved With Out Lock</td>
			<td>Rumex International Co.</td>
			<td>8-025T</td>
			<td>Small Size, Titanium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Barraquer Needle Holder, Fine Jaws 12.0mm, Curved With Out Lock</td>
			<td>Rumex International Co.</td>
			<td>8-021T</td>
			<td>Small Size, Titanium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Insyte Autoguard BC 22 GA x 1.00 IN</td>
			<td>BD Angiocath / Autoguard</td>
			<td>382523</td>
			<td>22 G x 1.00&#34; (0.9 mm x 25 mm) Wingless catheter, 37 mL/min</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BDPrecisionGlide Single-use Needles: Regular Bevel - Regular Wall.</td>
			<td>BD</td>
			<td>B305106</td>
			<td>PrecisionGlide stainless-steel needles with translucent, color-coded, polypropylene hubs. 22 G</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Precisionglide Syringe Needle 21G</td>
			<td>BD</td>
			<td>305167</td>
			<td>Gauge 21, length 1.5 inch, hypodermic needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Precisionglide Syringe Needle 30G</td>
			<td>BD</td>
			<td>305128</td>
			<td>Gauge 30, length 1 inch, hypodermic needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine Solution by Purdue Products LP</td>
			<td>Purdue Products Lp</td>
			<td>67618-150-17</td>
			<td>10% povidone&#8211;iodine topical solution USP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bupivacaine Injection BP 0.5%</td>
			<td>SteriMax Inc.</td>
			<td>DIN:02443694</td>
			<td>0.5% (100mg/20mL)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved Tying Forceps</td>
			<td>Duckworth &#38; Kent</td>
			<td>2-501E</td>
			<td>6mm tying platforms, straight shafts, flat handle, length 88mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DC Temperature Controller</td>
			<td>FHC Inc.</td>
			<td>40-90-8D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DK Iris Scissors (Curved)</td>
			<td>Duckworth &#38; Kent</td>
			<td>1-211B</td>
			<td>Blunt tips, cut length 4mm, tip to pivot length 11mm, round handle, length 107mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol, 200 proof (100%), USP, Decon Labs</td>
			<td>Decon Labs, Inc.</td>
			<td>2716</td>
			<td>Dilute to 70% with d2H2O</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Adjustable Wire Retractor</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>17004-05</td>
			<td>Maximum spread: 3.5cm, Depth 5cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Harvard Apparatus Isoflurane Funnel-Fill Vaporizer</td>
			<td>Harvard Appartus Limited</td>
			<td>34-1040SV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin LEO(heparin sodium)</td>
			<td>LEO Pharma Inc.</td>
			<td>DIN:00453811</td>
			<td>10,000 i.u./10 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ice-Pak</td>
			<td>Cryopak</td>
			<td>FIP88016</td>
			<td>4.00 in. x 7.00 in., thickness 1.50 inch</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane United States Pharmacopeia (USP) 99.9%</td>
			<td>Piramal Healthcare Limited</td>
			<td>DIN: 02231929</td>
			<td>250 mL, Inhalation Anesthetic, NDC 66794-017-25</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Khaw Transconjunctival Adjustable Suture Control Forceps</td>
			<td>Duckworth &#38; Kent</td>
			<td>2-502N</td>
			<td>5mm highly polished tying platforms, straight shafts, flat handle, length 84mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lactate Ringer&#39;s Injected USP, 1000mL</td>
			<td>Baxter Co.</td>
			<td>DIN: 00061085</td>
			<td>JB2324</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>McPherson Tying Forceps</td>
			<td>Duckworth &#38; Kent</td>
			<td>2-500E</td>
			<td>6mm tying platforms, straight shafts, flat handle, length 90mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum Scissors - 14.5 cm</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14024-14</td>
			<td>Straight Sharp/Blunt</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Kitzmiller Clamp</td>
			<td>Scanlan</td>
			<td>3003-630</td>
			<td>Jaw length 23mm, Length 11cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope-Leica M525 F20</td>
			<td>Leica Microsystems</td>
			<td></td>
			<td>No catalog number</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-woven Gauze Sponges</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>22-028-556</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Olsen-Hegar with Suture Cutter</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12002-14</td>
			<td>15 mm cutting edge, 2mm jaw surface - 14cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OptixCare Eye Lube, 25gm</td>
			<td>OptixCare</td>
			<td>ES-KE8O-69U1</td>
			<td>Formerly Optixcare Surgical Eye Lubricant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Piperacillin sodium salt</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P8396</td>
			<td>Penicillin analog</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Puritan 3&#34; Standard Cotton Swab w/Wooden Handle</td>
			<td>Puritan Medical Products Company LLC</td>
			<td>803-WC</td>
			<td>Regular Cotton Tipped Applicator with Wooden Handle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Round Handled Needle Holder Straight w/ Lock</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12075-12</td>
			<td>Round handles allow easy fingertip adjustments - 12.5cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shea Scissors Curved Blunt</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14105-12</td>
			<td>Transplant scissors with light and delicate pattern - 12cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steel Micro Serrefines Curved - 4mm</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18055-06</td>
			<td>Jaw length 4mm, Jaw width 0.75mm, Total length 16mm, Jaw pressure 125g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steel Micro Serrefines Curved - 6mm</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18055-05</td>
			<td>Jaw length 6mm, Jaw width 1mm, Total length 17mm, Jaw pressure 100g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steel Micro Serrefines Straight - 6mm</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18055-03</td>
			<td>Jaw length 6mm, Jaw width 1mm, Total length 15mm, Jaw pressure 100g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Platform</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Custom, magnetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SurgiVet Vaporstick Anesthesia Machine</td>
			<td>General Anesthetic Services, Inc</td>
			<td>V7015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T/Pump Localized Therapy</td>
			<td>Stryker</td>
			<td></td>
			<td>TP700 Series</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacuum-Pressure Pump</td>
			<td>Barnant Co.</td>
			<td>400-1901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Scissors with Microserrations Straight</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15070-08</td>
			<td>Cutting edge: 5mm, Tip diameter: 0.1mm - 8.5cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetergesic Buprenorphine</td>
			<td>Ceva Animal Health Ltd</td>
			<td>NAC No.:12380352</td>
			<td>0.324 mg/ml buprenorphine hydochloride Solution for Injection for Dogs and Cats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetroson V-10 Bipolar Electrosurgical Unit</td>
			<td>Summit Hill Laboratories</td>
			<td></td>
			<td>No catalog number</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

reduced complications after arterial reconnection in a rat model of orthotopic liver transplantation

Крыса ортопедической трансплантации печени (OLT) модель является мощным инструментом для изучения острого и хронического отторжения. Тем не менее, это не полное представление о трансплантации печени человека из-за отсутствия артериального воссоединения. Описана здесь модифицированная процедура трансплантации, которая включает в себя включение печеночным артериям (HA) воссоединение, что приводит к заметному улучшению результатов трансплантации. При среднем анхепатической времени 12 мин и 14 с, HA воссоединение приводит к улучшению перфузии пересаженной печени и увеличение долгосрочного выживания реципиента с 37,5% до 88,2%. Этот протокол включает в себя использование 3D-печатных манжет и держателей для подключения портала вены и infrahepatic нижней вены кавы. Он может быть реализован для изучения нескольких аспектов трансплантации печени, от иммунного ответа и инфекции до технических аспектов процедуры. Путем включения простого и практического метода артериального воссоединения с использованием микрососудистой техники, этот модифицированный протокол OLT крысы тесно имитирует аспекты трансплантации печени человека и будет служить ценной и клинически актуальной моделью исследования.

Watch this Scientific Journal Video about Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation at JoVE.com

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

Цель этого исследования состоит в том, чтобы изменить модель пересадки крысы ортопедической печени, чтобы лучше представлять трансплантацию печени человека и улучшить выживание реципиента. Представленный метод восстанавливает приток печеночных артерий путем подключения общей печеночной артерии донорской печени к надлежащей печеночной артерии реципиента печени.

Снижение осложнений после артериального воссоединения в крысиной модели трансплантации ортопедической печени

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...

Крыса ортопедической модели трансплантации печени является мощным инструментом для изучения нескольких аспектов трансплантации печени. От иммунного ответа на инфекцию до технических аспектов процедуры. Основными преимуществами этого метода является то, что он может уменьшить осложнения, лучше представляющих комей трансплантации печени, и улучшить выживание реципиента.Этот модифицированный протокол трансплантации крысиной ортопедической печени тесно имитирует аспекты трансплантации печени человека и будет служить переменной и клинически актуальной моделью исследования. Мы надеемся, что благодаря визуальной демонстрации зрители смеются со всеми деталями и сократят кривую обучения для освоения навыков микрохирургии, необходимых для этой техники. После введения 300 международных единиц гепарина натрия в внутригепатической нижней вены кавы анестезированной 12 до 14 недель крысы, сделать пять миллиметров разрез ниже бифуркации желчного протока, и вставить стент желчного протока в общий желчный проток.Закрепте стент одной шелковой лигатурой 7-0, на один миллиметр выше разреза и одной лигатурой на 10 миллиметров ниже бифуркации. Вырезать желчный проток между двумя связями и подвергать надлежащей печеночным артерии. Разделите гастродуодерную артерию между двумя 7-0 шелковыми лигатурами и обнажите левую желудочную артерию, спленовую артерию и целиакию ствола.Затем вырезать левую желудочную артерию, splenic артерии, и целиакия ствол между артерии связей. Используйте 20 миллилитров шприц оснащен 21,5 калибровочных иглы медленно вводить 20 миллилитров четырех градусов по Цельсию Ringer в лактат раствор в портале вены. Чтобы подготовить донорскую печень, разрежьте бифуркацию ствола целиакии, сплениковой артерии и левой желудочной артерии, чтобы сформировать большую артериальную манжету рукава и вставьте 1,5-миллиметровый артериальный стент 24 калибра в общую печеночную артерию донора через манжету.Затем закрете стент с 8-0 полипропиленовая лигатура и промыть стент лактатным раствором Ringer. После разоблачения портала вены от 12 до 14 недель получателя крысы, разделить получателя желчного протока на 0,5 сантиметра ниже плитки бифуркации, и вставить стент желчного протока в дистальный общий желчный проток. Выставить левую, среднюю и правую печеночную артерии и связать сосуды дистальной к бифуркации печеночным артериям.Вырезать артерии близко к печени выше связей и место длинный тонкий кусок марли за супер печеночной нижней кавы. Поместите 3D печатных внутрипечепатических кава держатель за внутрипечепатической кавы вены и использовать Tenno неаспасаемый монофизамент шов шить концы 3D печатной ручкой вместе. Свободно связать 7-0 шелковой лигатуры ниже как 3D печатных держатель между внутрицепатической вены кавы и портал вены, и зажим интрагепатической вены вены чуть выше правой почечной вены ниже 3D печатных держатель кавы.Зажим портала вены чуть выше пилорийской вены и ниже 3D печатных. держатель. Используя трехмиллилитровый шприц с 27 калибровочной иглой прилагается, флеш два миллилитров 37 градусов по Цельсию Ringer в лактат решение через бифуркацию портвейна вены, и зажим супер печеночной вены кавы над печенью с зажимом Kitzmiller. Затем вырезать ниже зажима как можно ближе к печени, как это возможно, и вырезать выше 3D печатных держателей как для портала вены и меж печеночной вены кавы, чтобы удалить печень получателя.Для трансплантации донорской печени тщательно ориентируйте донорскую печень в полость тела реципиента таким образом, чтобы можно было создать верхний мощеный анатомоз. Вставьте манжету вены портала от донора в вену портала реципиента и затяните шелковый галстук 7-0. Удалите атрауматический зажим из супер печеночной ены кавы и удалите микрососудистый зажим для вены портала.После повторного perfusing печени с теплой кровью, вставьте донора внутриэпатической вены кава манжеты в реципиента интрагепатической вены кавы и обеспечить сосуд с 7-0 шелковый галстук. Затем удалите донорский внутрицепатический клип vena cava перед удалением клипа реципиента. Для выполнения артериального анатомоза, отрезать часть ствола целиакии от донора, который простирается за стент, и зажать надлежащей печеночные артерии реципиента.Отрежьте галстук в конце и любые дополнительные ткани, окружающие сосуд. И используйте лактатное решение Ringer, чтобы промыть люмены как донора, так и сосуда-реципиента. Используя изогнутую иглу, поместите 10-0 этилоновый шов через левый аспект донорской печеночным артерии, на 2,5 миллиметра выше дистальной отверстия стента, и через конец стента.Замирает реципиент надлежащей печеночным артерии 0,5 миллиметра ниже отверстия сосуда с левой стороны сосуда, на правую сторону артерии. Поместите следующий шов через правую стенку донорской печеночных артерий изнутри на улицу, на расстоянии от стентового отверстия, идентичного первоначальному стежку, и подтяните на двух концах 10-0 неабсорбируемого монофиламента, чтобы проскользнуть реципиента надлежащей печеночных артерий вверх, и в стент печеночных артерий. Затем свяжите 10-0 неабсорбируемых монофиламент с собой над донорской печеночным артерией.Промыть как реципиента и донора желчных протоков, и вставить донор желчных протоков стент в реципиент желчного протока. Затем затяните галстук, который ранее был помещен вокруг желчного протока получателя. В этом репрезентативном эксперименте, не печеночной артерии анатомоз крысы ортопедической модели пересадки печени продемонстрировали 50 и 37,5% выживаемости, на 21 дней и 60 дней, после операции соответственно.В отличие от этого, оптимизированная процедура повторного подключения печеночным артериям значительно увеличила долгосрочное выживание. Гистологический анализ репрезентативного подмножества пересаженных животных без воссоединения печеночной артерии выявил признаки гипоксической травмы печени с центральным лобкулярным некрозом, на шестой и тринадцатый день после трансплантации. Обширный некроз печени был связан с чрезвычайно повышенным уровнем аланина иммуно трансферов и аспарта аминокислотной трансферазы у этих животных.В отличие от этого, пересаженные крысы с воссоединением печеночной артерии не проявляли никаких признаков повреждения печени, а гистологический анализ выявил нормальную структуру печеночной паренхимы, с организованными ачини, лобулами, артериями и желчными протокими. Кроме того, гистологический анализ печени из не печеночной артерии воссоединения модели крыс показали реактивные изменения после гипоксической травмы печени. В том числе пролиферации рыночных желчных протоков, фиброз пери портала и воспаление, а также искаженная печеночная паренхима.Этот протокол может быть адаптирован для изучения многих иммунологических и хирургических аспектов трансплантации печени и может служить моделью для тестирования новых терапевтических вмешательств, имеющих отношение к трансплантации.

Research

JoVE Journal

Medicine

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Ортотопическая аорты трансплантации: Крыса модель для изучения развития хронического заболевания сосудов

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation

Развитию облитерирующего бронхиолит в мышиной модели ортотопической трансплантации легких

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and ...

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

Ортотопической трансплантации печени у крыс

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat ...

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Хирургические процедуры для крысиной модели частичного ортотопической трансплантации печени с печеночной артериальной реконструкции

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

Крыса модель ортотопическая трансплантация печени, используя технику Роман магнитные анастомоза Suprahepatic полой реконструкции

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...

Transplantation of Adipose Tissue-Derived Stem Cell Sheet to Reduce Leakage After Partial Colectomy in A Rat Model

Трансплантация стволовых клеток жировой ткани производные листа для уменьшения утечки после частичное колэктомия в мышиной модели

Anastomotic leakage is a disastrous complication after colorectal surgery. Although current methods for leakage prevention have different levels of ...

A Pre-Clinical Porcine Model of Orthotopic Heart Transplantation

Доклинальная свиная модель ортотопической трансплантации сердца

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart ...

Orthotopic Rat Kidney Transplantation: A Novel and Simplified Surgical Approach

Трансплантация почки ортотопическая: Роман и упрощенный хирургический подход

Kidney transplantation offers increased survival rates and improved quality of life for patients with end-stage renal disease, as compared to any type of ...

Organ Ischemia-Reperfusion Injury by Simulating Hemodynamic Changes in Rat Liver Transplant Model

Травма ишемии-реперфузии органов путем моделирования гемодинамических изменений в модели трансплантации печени крыс

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats is a tried and proven animal model used for preoperative, intraoperative, and postoperative studies, ...

Left Lung Orthotopic Transplantation in a Juvenile Porcine Model for ESLP

Ортотопическая трансплантация левого легкого на ювенильной модели свиньи для ESLP

Lung transplantation is the gold-standard treatment for end-stage lung disease, with over 4,600 lung transplantations performed worldwide annually. ...