Name: inducing acute liver injury in rats via carbon tetrachloride (ccl4) exposure through an orogastric tube
Uploaded: 2020-04-28T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Inducing Acute Liver Injury in Rats via Carbon Tetrachloride CCl4 Exposure Through an Orogastric Tube at JoVE.com

המחברים מכירים בהכרת תודה את ברטה דלגדו, המחלקה לפתולוגיה, המרכז הרפואי סורוקה, הפקולטה למדעי הבריאות, אוניברסיטת בן-גוריון בנגב, לעזרתה במעבדה ובניתוח היסטולוגיה.

הניסויים נערכו על פי המלצות ההצהרות של הלסינקי וטוקיו ולהנחיות לשימוש בבעלי חיים ניסיוניים בקהילה האירופית. הניסויים אושרו על ידי הוועדה לטיפול בבעלי חיים באוניברסיטת בן-גוריון בנגב.
הערה: דגם CCl4 נוצר ונעשה בו שימוש במחקר הקודם17. ציר הזמן של הפרוטוקול מו...

<ol>
	<li>Hoofnagle, J. H., Carithers, R. L., Shapiro, C., Ascher, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fulminant+hepatic+failure:+Summary+of+a+workshop.">Fulminant hepatic failure: Summary of a workshop.</a> Hepatology. 21 (1), 240-252 (1995).</li><li>Rakela, J., Lange, S. M., Ludwig, J., Baldus, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fulminant+hepatitis:+Mayo+clinic+experience+with+34+cases.">Fulminant hepatitis: Mayo clinic experience with 34 cases.</a> Mayo Clinic Proceedings. 60 (5), 289-292 (1985).</li><li>Riordan, S. M., Williams, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+hepatic+encephalopathy.">Treatment of hepatic encephalopathy.</a> New England Journal of Medicine. 337, 473-479 (1997).</li><li>Bernuau, J., Rueff, B., Benhamou, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fulminant+and+subfulminant+liver+failure:+Definitions+and+causes.">Fulminant and subfulminant liver failure: Definitions and causes.</a> Seminars in Liver Disease. 6 (2), 97-106 (1986).</li><li>Lidofsky, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liver+transplantation+for+fulminant+hepatic+failure.">Liver transplantation for fulminant hepatic failure.</a> Gastroenterology Clinics of North America. 22 (2), 257-269 (1993).</li><li>Auzinger, G., Wendon, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intensive+care+management+of+acute+liver+failure.">Intensive care management of acute liver failure.</a> Current opinion in critical care. 14 (2), 179-188 (2008).</li><li>Wu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protection+of+regenerating+liver+after+partial+hepatectomy+from+carbon+tetrachloride+hepatotoxicity+in+rats:+Roles+of+mitochondrial+uncoupling+protein+2+and+ATP+stores.">Protection of regenerating liver after partial hepatectomy from carbon tetrachloride hepatotoxicity in rats: Roles of mitochondrial uncoupling protein 2 and ATP stores.</a> Digestive Diseases and Sciences. 54 (9), 1918-1925 (2009).</li><li>Tu&#241;&#243;n, M. J., Alvarez, M., Culebras, J. M., Gonz&#225;lez-Gallego, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+overview+of+animal+models+for+investigating+the+pathogenesis+and+therapeutic+strategies+in+acute+hepatic+failure.">An overview of animal models for investigating the pathogenesis and therapeutic strategies in acute hepatic failure.</a> World Journal of Gastroenterologyl. 15 (25), 3086-3098 (2009).</li><li>van de Kerkhove, M. P., Hoekstra, R., van Gulik, T. M., Chamuleau, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large+animal+models+of+fulminant+hepatic+failure+in+artificial+and+bioartificial+liver+support+research.">Large animal models of fulminant hepatic failure in artificial and bioartificial liver support research.</a> Biomaterials. 25 (9), 1613-1625 (2004).</li><li>Butterworth, R. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+models+of+hepatic+encephalopathy:+ISHEN+guidelines.">Experimental models of hepatic encephalopathy: ISHEN guidelines.</a> Liver International. 29 (6), 783-788 (2009).</li><li>Zhang, B., Gong, D., Mei, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protection+of+regenerating+liver+after+partial+hepatectomy+from+carbon+tetrachloride+hepatotoxicity+in+rats:+Role+of+hepatic+stimulator+substance.">Protection of regenerating liver after partial hepatectomy from carbon tetrachloride hepatotoxicity in rats: Role of hepatic stimulator substance.</a> Journal of Gastroenterology and Hepatology. 14 (10), 1010-1017 (1999).</li><li>Ugazio, G., Danni, O., Milillo, P., Burdino, E., Congiu, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+protection+against+carbon+tetrachloride+toxicity.+I.+prevention+of+lethal+effects+by+partial+surgical+hepatectomy.">Mechanism of protection against carbon tetrachloride toxicity. I. prevention of lethal effects by partial surgical hepatectomy.</a> Drug and Chemical Toxicology. 5 (2), 115-124 (1982).</li><li>Taniguchi, M., Takeuchi, T., Nakatsuka, R., Watanabe, T., Sato, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+process+in+acute+liver+injury+and+regeneration+induced+by+carbon+tetrachloride.">Molecular process in acute liver injury and regeneration induced by carbon tetrachloride.</a> Life Science. 75 (13), 1539-1549 (2004).</li><li>Gordis, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipid+metabolites+of+carbon+tetrachloride.">Lipid metabolites of carbon tetrachloride.</a> Journal of Clinical Investigation. 48 (1), 203-209 (1969).</li><li>Albrecht, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+RNA+synthesis+in+experimental+hepatogenic+encephalopathy.">Cerebral RNA synthesis in experimental hepatogenic encephalopathy.</a> Journal of Neuroscience Research. 6 (4), 553-558 (1981).</li><li>Terblanche, J., Hickman, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+fulminant+hepatic+failure.">Animal models of fulminant hepatic failure.</a> Digestive Diseases and Sciences. 36 (6), 770-774 (1991).</li><li>Gruenbaum, B. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-free+DNA+as+a+potential+marker+to+predict+carbon+tetrachloride-induced+acute+liver+injury+in+rats.">Cell-free DNA as a potential marker to predict carbon tetrachloride-induced acute liver injury in rats.</a> Hepatology International. 7 (2), 721-727 (2013).</li><li>Juricek, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analytical+evaluation+of+the+clinical+chemistry+analyzer+Olympus+AU2700+plus.">Analytical evaluation of the clinical chemistry analyzer Olympus AU2700 plus.</a> Biochemia Medica. 20 (3), 334-340 (2010).</li><li>Feldman, A. T., Wolfe, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+processing+and+hematoxylin+and+eosin+staining.">Tissue processing and hematoxylin and eosin staining.</a> Methods in Molecular Biology. 1180, 31-43 (2014).</li><li>Wang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effects+of+dehydrocavidine+on+carbon+tetrachloride-induced+acute+hepatotoxicity+in+rats.">Protective effects of dehydrocavidine on carbon tetrachloride-induced acute hepatotoxicity in rats.</a> Journal of Ethnopharmacology. 117 (2), 300-308 (2008).</li><li>Ye, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatoprotective+effects+of+coptidis+rhizoma+aqueous+extract+on+carbon+tetrachloride-induced+acute+liver+hepatotoxicity+in+rats.">Hepatoprotective effects of coptidis rhizoma aqueous extract on carbon tetrachloride-induced acute liver hepatotoxicity in rats.</a> Journal of Ethnopharmacology. 124 (1), 130-136 (2009).</li><li>Wills, P. J., Asha, V. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effect+of+lygodium+flexuosum+(L.)+sw.+extract+against+carbon+tetrachloride-induced+acute+liver+injury+in+rats.">Protective effect of lygodium flexuosum (L.) sw. extract against carbon tetrachloride-induced acute liver injury in rats.</a> Journal of Ethnopharmacology. 108 (3), 320-326 (2006).</li><li>Senior, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+for+hepatotoxicity:+What+is+the+predictive+value+of+liver+"function"+tests.">Monitoring for hepatotoxicity: What is the predictive value of liver "function" tests.</a> Clinical Pharmacology &amp; Therapeutics. 85 (3), 331-334 (2009).</li><li>Karmen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+note+on+the+spectrometric+assay+of+glutamic-oxalacetic+transaminase+in+human+blood+serum.">A note on the spectrometric assay of glutamic-oxalacetic transaminase in human blood serum.</a> Journal of Clinical Investigation. 34 (1), 131-133 (1955).</li><li>Hubner, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrastructural+liver+damage+caused+by+direct+action+of+carbon+tetrachloride+in+vivo+and+in+vitro.">Ultrastructural liver damage caused by direct action of carbon tetrachloride in vivo and in vitro.</a> Virchows Archiv fur Pathologische Anatomie und Physiologie und fur Klinische Medizin. 339 (3), 187-197 (1965).</li><li>Newsome, P. N., Plevris, J. N., Nelson, L. J., Hayes, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+fulminant+hepatic+failure:+A+critical+evaluation.">Animal models of fulminant hepatic failure: A critical evaluation.</a> Liver Transplantation. 6 (1), 21-31 (2000).</li></ol>

בפרוטוקול זה, CCl4 משמש רעלן הכבד כדי לגרום ALI בחולדות. עלי מאופיין על ידי אובדן של הכבד בתוך כימומה ולאחר הדיסתקנה של פונקציות מטבולית וסינתטי של ההכבד. תרופות, וירוסים, רעלים, מחלות אוטואימוניות, מחלות מטבוליות, ובעיות בכלי הדם כל לגרום מוות hepatocyte, ואת התגובה הדלקתית הבאה תורמת הפתוגנ?...

תדירות העלבונות הרעילים לכבד, בעיקר בשל אלכוהול ושימוש בסמים, גוברת. פגיעה חריפה בכבד (עלי) קשורה לשיעורי תמותה גבוהים וגרמה לחששות קליניים1,2. פציעה רעילה מובילה למוות איתות מסלולים בכבד, וכתוצאה מכך ההיפטציט אפופטוזיס, נמק, או פירופסיס. עלי משחק תפקיד מכריע בהתפתחות כשל הכבד, אשר מאופיין בתפקוד כבד בעיות כולל סיבוכים כגון אנצפלופתיה הכבד סינתזה חלבון לקויי3,4. למרות שמחקרים אחרונים הגדילו את הידע שלנו על השינויים הפיזיולוגיים והפתולוגיים הנלווים לכישלון הכבד, הוא לא הסביר לחלוטין את התכונות הפתומקולריות המשפיעות על מנגנוני מוות התאים. יתר על כן, תרופות אינן זמינות כעת כדי להפוך את ההתדרדרות הפרוגרסיבית בחולים ALI. כיום, הטיפול האפקטיבי היחיד באופן משמעותי הוא השתלת כבד5,6.
על מנת לחקור את המנגנון ואת פתופסיולוגיה של עלי ולבדוק אסטרטגיות hepatopquo שונים, מודלים בעלי חיים שונים משמשים כדי לגרום ALI. מודל בעל חיים מועדפת של עלי לחקות את התהליך הפתולוגי של המחלה באמצעות שיטה אמינה, מאומתת, זולה וקלה להחלה. דוגמאות של מודלים ניסיוניים כוללים סוכני hepatotoxic, הליכים כירורגיים כגון סה כ כריתת העין הכוללת, מלאה או ארעי הליכים, ו-בהליכים מסוימים7,8,9. חומרים מוכרים כוללים את החומר הרעיל של גלטוסמיטין, פרצטמול, תיודרחאמיד, אזובמיתאן ו-CCl4. מאלה, ccl4 נמצא בשימוש נרחב למרות שזה עדיין לא מאופיין היטב10,11,12,13.
CCl4 הוא תרכובת נוזלית אורגנית עם ריח מתוק וכמעט ללא צבע בטמפרטורות נמוכות. חשיפה לריכוזים גבוהים של CCl4 יכול לגרום נזק למערכת העצבים המרכזית, כולל הידרדרות של הכבד והכליות. CCl4 גורם עלי באמצעות טרנספורמציה ביולוגית בכבד, אשר מהווה מיני חמצן תגובתי. זה מתרחש באמצעות האנזים P450 ציטוכרום 2E1, ויוצרים פעילות מטבוליט פעילה וכתוצאה מכך נזק לתא על ידי מקרומולקולה binding, שיפור peroxidation שומנים והפרעה של סידן תאיים הומאוסטזיס14. בנוסף, מודל CCl4 יכול לשמש כדי לעורר את האסטרוציטים ברמה של סינתזה RNA15. הפאטאוטוקסין הזה מנוהל על ידי הצפק, הפנים, דרך הפה, ודרכי העיכול16.
בפרוטוקול זה, אנו מתארים בפירוט CCl4המושרה עלי בחולדות באמצעות צינור הקיבה. שיטה זו מעוררת עלי החזקה והניתנת לקריאה, שניתן להשתמש בה כדי לחקור את הפתוגנזה של עלי. קביעת חומרת מחלת הכבד היא בפיקוח על ידי מדידה של הנסיוב גלוטמט-פירואמיאז (GPT), גלוטמית אוקסלואצטט טרנסאמיאז (יש) אנזימים הכולל בילירובין (TB), כמו גם אבחנה היסטולוגית סופית על ידי המטאוקסילין ואאוזין (H & E) רקמות הכבד ויטראז '. חשיפה ל-CCl4 דרך גישה התוך הקיבה מאפשר שיטה מעשית, זולה, פולשנית עם סיכון סכנה מינימלי.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:924px;" width="923">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:212px;">22 G catheter BD Neoflon TM</td>
			<td style="width:153px;">Becton Dickinson Infusion Therapy AB</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:443px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:212px;">4% buffered formaldehyde solution</td>
			<td style="width:153px;">Sigma - Aldrich lab materials technologies</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:212px;">BD Microtainer SST TM Tubes</td>
			<td style="width:153px;">Becton Dickinson and Company</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:212px;">Carbone tetrachloride</td>
			<td style="width:153px;">Sigma - Aldrich lab materials technologies</td>
			<td style="width:116px;">CAS 56-23-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:212px;">Isofluran, USP 100%</td>
			<td style="width:153px;">Piramamal Critical Care, Inc</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:212px;">Olympus AU2700 Chemistry-Immuno Analyzer</td>
			<td style="width:153px;">Olympus (MN, USA)</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td>Analysis of blood samples was done by the fluorescence method</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:212px;">Olympus BX 40 microscope</td>
			<td style="width:153px;">Olympus</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:212px;">RAT Feeding Needles</td>
			<td style="width:153px;">ORCHID SCIENTIFICS</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:212px;">SYRINGE SET 1 and 2 ml MEDI -PLUS</td>
			<td style="width:153px;">Shandong Zibo Shanchuan Medical Instruments Co., Ltd</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

inducing acute liver injury in rats via carbon tetrachloride (ccl4) exposure through an orogastric tube

פגיעה חריפה בכבד (ALI) ממלאת תפקיד מכריע בהתפתחות כשל הכבד, אשר מאופיין בתפקוד כבד של בעיות כגון סיבוכים כגון אנצפלופתיה הכבד סינתזה חלבון לקויי. מודלים בעלי חיים מתאימים חיוניים לבדיקת המנגנון והפתופסולוגיה של עלי ולחקור אסטרטגיות שונות של hepatopquo. בשל יכולתה לבצע טרנספורמציות כימיות, פחמן טטרכלוריד (CCl4) נמצא בשימוש נרחב בכבד כדי לגרום ALI דרך היווצרות של מינים חמצן תגובתי. חשיפה CCl4 ניתן לבצע intraperitoneally, על ידי שאיפת, או דרך שפופרת או באמצעות צינור הקיבה. כאן, אנו מתארים מודל מכרסם, שבו עלי נגרמת על ידי חשיפה CCl4 דרך צינור הקיבה. שיטה זו זולה, מבוצעת בקלות והיא מסכנת סיכון מינימלי. המודל הוא מאוד ניתן לשימוש והוא יכול לשמש רבות כדי לקבוע את היעילות של אסטרטגיות hepatopquo פוטנציאלי ולהעריך סמנים של פציעה בכבד.

שחפת, יש, ורמות GPT גדל באופן משמעותי 24 שעות לאחר גרימת עלי (יותר ב-CCl4 מינונים) בהשוואה לפקדים בעלי הפעלה מזויפת (p < 0.001) (איור 1). רמות של TB, הגיע, ו-GPT בתוכנית הבסיסית היו נורמליים ולא היו שונים באופן משמעותי מאשר בקרות מופעל המזויף. ב 24 שעות, כל שלוש קבוצות התערבותית, 1 מ"ל/ק"ג...

Watch this Scientific Journal Video about Inducing Acute Liver Injury in Rats via Carbon Tetrachloride CCl4 Exposure Through an Orogastric Tube at JoVE.com

Inducing Acute Liver Injury in Rats via Carbon Tetrachloride CCl4 Exposure Through an Orogastric Tube

פרוטוקול זה מתאר שיטה נפוצה ומקובלת לגרימת פגיעה בכבד חריפה (ALI) באמצעות החשיפה של CCl4 דרך צינור הקיבה. החשיפה CCl4 גורמת ALI דרך היווצרות של מינים חמצן תגובתי במהלך ביומרה בכבד. שיטה זו משמשת כדי לנתח את הפתופסולוגיה של עלי ולבחון אסטרטגיות hepatop, שונים.

גרימת פגיעה חמורה בכבד חולדות באמצעות פחמן טטרכללוריד (CCl4) חשיפה באמצעות צינורית אורוקיבה

Acute liver injury (ALI) plays a crucial role in the development of hepatic failure, which is characterized by severe liver dysfunction including ...

אני רוצה להציג את העבודה שלנו על פגיעה חמורה בכבד בחולדות באמצעות חשיפה לטרטרצ'לורידים פחמן דרך צינור אורגזמי. בחר זכר בוגר חולדות ספראג-דאולי במשקל 300 עד 350 גרם. לספק צ'או עכברוש ומים עד ליביום.בצע את כל הניסויים בין שש בבוקר ל-12 בערב. קומדיית הטיפול בבעלי חיים של אוניברסיטת בן-גוריון בנגב אישרה את כל נוהלי הטיפול והבדיקות המשמשים בפרוטוקול זה. לשמור על חולדות בטמפרטורת החדר של 22 מעלות צלזיוס עם אורות 12 שעות ומחזורים כהים 12 שעות. לאכלס את וריד הזנב עם קטטר 22 מד.לאסוף דגימות דם בבסיס. ניתוח ביוכימי בדם כולל את המדידה של סרום GOT, GPT, ו בילירובין הכולל. בדיקה של אנזימי כבד ורמת בילירובין כוללת בוצעו במעבדה הביוכימית של המרכז הרפואי סורוקה.זהירות:חשיפה לריכוז גבוה של פחמן tetrachloride, כולל אדים או ספיגת העור יכול להשפיע על מערכת העצבים המרכזית, לנטרל את הכבד והכליות, וחשיפה ממושכת עלולה להוביל לתרדמת או למוות. הכן פתרון 50 אחוז של tetrachloride פחמן מעורבב עם שמן זית כרכב ביחס אחד לאחד. לגרום את הפתוטוקסיות ב vivo על ידי ממשל tetrachloride פחמן באמצעות צינור אורגזמי.הכנס צינור אורגזמי דרך חלל הפה של החולדה. לחשוף את החולדות למינונים שונים של tetrachloride פחמן. מיליליטר אחד לקילו לפגיעה קלה בכבד חריפה, שתי נקודות חמש מיליליטר לקילו לפגיעה חמורה בכבד, או חמישה מיליליטר לקילו לפגיעה חמורה בכבד.עבור קבוצה מזויפת, לחשוף את החולדות לחמישה מיליליטר לקילו רק שמן זית. לאסוף דגימות דם ב24 שעות מחשיפה tetrachloride פחמן. ניתוח ביוכימי בדם כולל את המדידה של סרום GOT, GPT, ו בילירובין הכולל.מניחים חולדה מתה על לוח ניתוח רקומביננטי הגבי עם הבטן פונה כלפי מעלה לגלח את הבטן שלה. באמצעות אזמל, להסית את האורך המלא של ventrum מן פי הטבעת אל הסנטר. לשקף את העור.עם האזמל, חגר את דופן הבטן מהפי הטבעת לסחוס xiphoid כדי לחשוף את הקרביים הבטן. מעבירים את הכבד לצלחת פטרי. בצע מכתים המטוקסילין ואוזין.בחן את הפרוסות תחת הגדלת מיקרוסקופ של 200 פעמים עם אורך אובייקטיבי של 20 מילימטרים. סעיף הכבד צריך להיות מדורג על ידי פתולוג מיוחד, עיוור לפרוטוקול הטיפול. הציון של אפס מצביע על כך שאין חריגות בכבד, אחת עד שתיים מצביעות על פגיעה קלה בכבד, שלוש עד ארבע מצביעות על פגיעה בינונית בכבד, וחמישה עד שישה מצביעים על פגיעה חמורה בכבד.קבוצות שונות של חולדות בזמנים שונים מוצגים על התכנית. 24 שעות לאחר גרימת פגיעה חמורה בכבד, חלה עלייה משמעותית GOT, GPT, ואת רמות בילירובין הכולל, בהתאם tetrachloride פחמן חשוף בהשוואה לקבוצת הביקורת. ערך P היה קטן מאפס נקודה אפס אפס אחת.שינויים היסטופתולוגיים נצפו לאחר 24 שעות בכל הקבוצות לאחר שיכרון פחמן tetrachloride במינונים שונים. ציון הדירוג ההיסטולוגי ב-24 שעות בין כל שלוש הקבוצות המתערבות לקבוצת הביקורת היה גבוה משמעותית. ערך P היה קטן מאפס נקודה אפס חמש.קבוצת המחקר שלנו הציגה את השיטה הנפוצה והפיזית של פגיעה חמורה בכבד בחולדות באמצעות חשיפה לטרטרצ'לורידים פחמן באמצעות צינור אורגזמי. שיטה זו משמשת כדי לחקור את הפתופיזיולוגיה של פגיעה בכבד חריפה כדי לבדוק שונה על אסטרטגיית ההגנה. תודה רבה לך על תשומת הלב שלך.

Research

JoVE Journal

Medicine

Inducing Acute Liver Injury in Rats via Carbon Tetrachloride (CCl4) Exposure Through an Orogastric Tube

Acute Myocardial Infarction in Rats

באוטם שריר הלב אצל חולדות

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular ...

Pressure Controlled Ventilation to Induce Acute Lung Injury in Mice

לחץ אוורור מבוקר כדי לגרום פגיעה ריאות חריפה על עכברים

Murine models are extensively used to investigate acute injuries of different organs systems (1-34). Acute lung injury (ALI), which occurs with prolonged ...

X-ray Dose Reduction through Adaptive Exposure in Fluoroscopic Imaging

קרני ה-X באמצעות הפחתת מינון חשיפה מסתגלת בתחום ההדמיה fluoroscopic

X-ray fluoroscopy is widely used for image guidance during cardiac intervention. However, radiation dose in these procedures can be high, and this is a ...

Acute and Chronic Tactile Sensory Testing after Spinal Cord Injury in Rats

אקוטי וכרוני בדיקה חושי טקטילי לאחר פגיעה בחוט השדרה של חולדות

Spinal cord injury (SCI) impairs sensory systems causing allodynia1-8. To identify cellular and molecular causes of allodynia, sensitive and valid sensory ...

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

השתלת כבד Orthotopic בחולדות

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat ...

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

דגם איסכמיה reperfusion של פגיעה חריפה בכליות ופגיעים ההודעה פיברוזיס בעכברים

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

Open Tracheostomy Gastric Acid Aspiration Murine Model of Acute Lung Injury Results in Maximal Acute Nonlethal Lung Injury

להרחיב הנשמת קיבת חומצה שאיפת Murine הדגם של פגיעה החריפה ריאות תוצאות ב מקסימלי חריפה קטלנית פגיעת ריאות

Acid pneumonitis is a major cause of sterile acute lung injury (ALI) in humans. Acid pneumonitis spans the clinical spectrum from asymptomatic to acute ...

Evaluation of Coronary Flow Reserve After Myocardial Ischemia Reperfusion in Rats

הערכה של שמורת זרם כלילית לאחר איסכמיה אוטם שריר הלב Reperfusion בחולדות

Coronary artery disease is the leading cause of death worldwide. After an acute myocardial infarction, early and successful myocardial intervention via ...

Inducing Acute Lung Injury in Mice by Direct Intratracheal Lipopolysaccharide Instillation

גרימת פציעה חריפה של הריאה בעכברים על ידי הישירה ליפופוליסכראסטיליאלגרלציה

Airway administration of lipopolysaccharide (LPS) is a common way to study pulmonary inflammation and acute lung injury (ALI) in small animal models. ...

Acute Kidney Injury Model Induced by Cisplatin in Adult Zebrafish

מודל פגיעה בכליות חריפה המושרה על ידי ציספלטין בדג זברה למבוגרים

Cisplatin is commonly used as chemotherapy. Although it has positive effects in cancer-treated individuals, cisplatin can easily accumulate in the kidney ...