Name: inducing acute liver injury in rats via carbon tetrachloride (ccl4) exposure through an orogastric tube
Uploaded: 2020-04-28T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Inducing Acute Liver Injury in Rats via Carbon Tetrachloride CCl4 Exposure Through an Orogastric Tube at JoVE.com

Forfatterne anerkjenner takknemlig Bertha Delgado, Institutt for patologi, Soroka Medical Center, Fakultet for helsevitenskap, Ben-Gurion University of the Negev, for hennes hjelp i laboratoriet så vel som i histologianalysen.

Forsøkene ble utført i henhold til anbefalingene fra Helsingfors- og Tokyo-erklæringene og retningslinjene for bruk av eksperimentelle dyr i Det europeiske fellesskap. Eksperimentene ble godkjent av Animal Care Committee of Ben-Gurion University of the Negev.
MERK: CCl4-modellen er generert og brukt i en tidligere studie17. Protokolltidslinjen er demonstrert i tabell 1.
1. Klargjøre rotter for eksperimentell pros...

<ol>
	<li>Hoofnagle, J. H., Carithers, R. L., Shapiro, C., Ascher, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fulminant+hepatic+failure:+Summary+of+a+workshop.">Fulminant hepatic failure: Summary of a workshop.</a> Hepatology. 21 (1), 240-252 (1995).</li><li>Rakela, J., Lange, S. M., Ludwig, J., Baldus, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fulminant+hepatitis:+Mayo+clinic+experience+with+34+cases.">Fulminant hepatitis: Mayo clinic experience with 34 cases.</a> Mayo Clinic Proceedings. 60 (5), 289-292 (1985).</li><li>Riordan, S. M., Williams, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+hepatic+encephalopathy.">Treatment of hepatic encephalopathy.</a> New England Journal of Medicine. 337, 473-479 (1997).</li><li>Bernuau, J., Rueff, B., Benhamou, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fulminant+and+subfulminant+liver+failure:+Definitions+and+causes.">Fulminant and subfulminant liver failure: Definitions and causes.</a> Seminars in Liver Disease. 6 (2), 97-106 (1986).</li><li>Lidofsky, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liver+transplantation+for+fulminant+hepatic+failure.">Liver transplantation for fulminant hepatic failure.</a> Gastroenterology Clinics of North America. 22 (2), 257-269 (1993).</li><li>Auzinger, G., Wendon, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intensive+care+management+of+acute+liver+failure.">Intensive care management of acute liver failure.</a> Current opinion in critical care. 14 (2), 179-188 (2008).</li><li>Wu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protection+of+regenerating+liver+after+partial+hepatectomy+from+carbon+tetrachloride+hepatotoxicity+in+rats:+Roles+of+mitochondrial+uncoupling+protein+2+and+ATP+stores.">Protection of regenerating liver after partial hepatectomy from carbon tetrachloride hepatotoxicity in rats: Roles of mitochondrial uncoupling protein 2 and ATP stores.</a> Digestive Diseases and Sciences. 54 (9), 1918-1925 (2009).</li><li>Tu&#241;&#243;n, M. J., Alvarez, M., Culebras, J. M., Gonz&#225;lez-Gallego, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+overview+of+animal+models+for+investigating+the+pathogenesis+and+therapeutic+strategies+in+acute+hepatic+failure.">An overview of animal models for investigating the pathogenesis and therapeutic strategies in acute hepatic failure.</a> World Journal of Gastroenterologyl. 15 (25), 3086-3098 (2009).</li><li>van de Kerkhove, M. P., Hoekstra, R., van Gulik, T. M., Chamuleau, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large+animal+models+of+fulminant+hepatic+failure+in+artificial+and+bioartificial+liver+support+research.">Large animal models of fulminant hepatic failure in artificial and bioartificial liver support research.</a> Biomaterials. 25 (9), 1613-1625 (2004).</li><li>Butterworth, R. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+models+of+hepatic+encephalopathy:+ISHEN+guidelines.">Experimental models of hepatic encephalopathy: ISHEN guidelines.</a> Liver International. 29 (6), 783-788 (2009).</li><li>Zhang, B., Gong, D., Mei, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protection+of+regenerating+liver+after+partial+hepatectomy+from+carbon+tetrachloride+hepatotoxicity+in+rats:+Role+of+hepatic+stimulator+substance.">Protection of regenerating liver after partial hepatectomy from carbon tetrachloride hepatotoxicity in rats: Role of hepatic stimulator substance.</a> Journal of Gastroenterology and Hepatology. 14 (10), 1010-1017 (1999).</li><li>Ugazio, G., Danni, O., Milillo, P., Burdino, E., Congiu, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+protection+against+carbon+tetrachloride+toxicity.+I.+prevention+of+lethal+effects+by+partial+surgical+hepatectomy.">Mechanism of protection against carbon tetrachloride toxicity. I. prevention of lethal effects by partial surgical hepatectomy.</a> Drug and Chemical Toxicology. 5 (2), 115-124 (1982).</li><li>Taniguchi, M., Takeuchi, T., Nakatsuka, R., Watanabe, T., Sato, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+process+in+acute+liver+injury+and+regeneration+induced+by+carbon+tetrachloride.">Molecular process in acute liver injury and regeneration induced by carbon tetrachloride.</a> Life Science. 75 (13), 1539-1549 (2004).</li><li>Gordis, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipid+metabolites+of+carbon+tetrachloride.">Lipid metabolites of carbon tetrachloride.</a> Journal of Clinical Investigation. 48 (1), 203-209 (1969).</li><li>Albrecht, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+RNA+synthesis+in+experimental+hepatogenic+encephalopathy.">Cerebral RNA synthesis in experimental hepatogenic encephalopathy.</a> Journal of Neuroscience Research. 6 (4), 553-558 (1981).</li><li>Terblanche, J., Hickman, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+fulminant+hepatic+failure.">Animal models of fulminant hepatic failure.</a> Digestive Diseases and Sciences. 36 (6), 770-774 (1991).</li><li>Gruenbaum, B. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-free+DNA+as+a+potential+marker+to+predict+carbon+tetrachloride-induced+acute+liver+injury+in+rats.">Cell-free DNA as a potential marker to predict carbon tetrachloride-induced acute liver injury in rats.</a> Hepatology International. 7 (2), 721-727 (2013).</li><li>Juricek, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analytical+evaluation+of+the+clinical+chemistry+analyzer+Olympus+AU2700+plus.">Analytical evaluation of the clinical chemistry analyzer Olympus AU2700 plus.</a> Biochemia Medica. 20 (3), 334-340 (2010).</li><li>Feldman, A. T., Wolfe, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+processing+and+hematoxylin+and+eosin+staining.">Tissue processing and hematoxylin and eosin staining.</a> Methods in Molecular Biology. 1180, 31-43 (2014).</li><li>Wang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effects+of+dehydrocavidine+on+carbon+tetrachloride-induced+acute+hepatotoxicity+in+rats.">Protective effects of dehydrocavidine on carbon tetrachloride-induced acute hepatotoxicity in rats.</a> Journal of Ethnopharmacology. 117 (2), 300-308 (2008).</li><li>Ye, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatoprotective+effects+of+coptidis+rhizoma+aqueous+extract+on+carbon+tetrachloride-induced+acute+liver+hepatotoxicity+in+rats.">Hepatoprotective effects of coptidis rhizoma aqueous extract on carbon tetrachloride-induced acute liver hepatotoxicity in rats.</a> Journal of Ethnopharmacology. 124 (1), 130-136 (2009).</li><li>Wills, P. J., Asha, V. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effect+of+lygodium+flexuosum+(L.)+sw.+extract+against+carbon+tetrachloride-induced+acute+liver+injury+in+rats.">Protective effect of lygodium flexuosum (L.) sw. extract against carbon tetrachloride-induced acute liver injury in rats.</a> Journal of Ethnopharmacology. 108 (3), 320-326 (2006).</li><li>Senior, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+for+hepatotoxicity:+What+is+the+predictive+value+of+liver+"function"+tests.">Monitoring for hepatotoxicity: What is the predictive value of liver "function" tests.</a> Clinical Pharmacology &amp; Therapeutics. 85 (3), 331-334 (2009).</li><li>Karmen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+note+on+the+spectrometric+assay+of+glutamic-oxalacetic+transaminase+in+human+blood+serum.">A note on the spectrometric assay of glutamic-oxalacetic transaminase in human blood serum.</a> Journal of Clinical Investigation. 34 (1), 131-133 (1955).</li><li>Hubner, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrastructural+liver+damage+caused+by+direct+action+of+carbon+tetrachloride+in+vivo+and+in+vitro.">Ultrastructural liver damage caused by direct action of carbon tetrachloride in vivo and in vitro.</a> Virchows Archiv fur Pathologische Anatomie und Physiologie und fur Klinische Medizin. 339 (3), 187-197 (1965).</li><li>Newsome, P. N., Plevris, J. N., Nelson, L. J., Hayes, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+fulminant+hepatic+failure:+A+critical+evaluation.">Animal models of fulminant hepatic failure: A critical evaluation.</a> Liver Transplantation. 6 (1), 21-31 (2000).</li></ol>

I denne protokollen brukes CCl4 som levertoksin for å indusere ALI hos rotter. ALI er preget av tap av leverparenchyma og påfølgende dysregulering av leverens metabolske og syntetiske funksjoner. Legemidler, virus, toksiner, autoimmune sykdommer, metabolske sykdommer og vaskulære lidelser induserer alle hepatocytdød, og den påfølgende inflammatoriske responsen bidrar til patogenese av ALI.
Den første fornærmelse naven fører til cytokinproduksjon, chemokinfrigjøring og på...

Hyppigheten av giftige fornærmelser mot leveren, spesielt på grunn av alkohol og narkotikamisbruk, øker. Akutt leverskade (ALI) er forbundet med høy dødelighet og har forårsaket kliniske bekymringer1,2. Giftig skade fører til dødssignalveier i leveren, noe som resulterer i hepatocytt apoptose, nekrose eller pyroptose. ALI spiller en avgjørende rolle i utviklingen av leversvikt, som er preget av alvorlig leverdysfunksjon, inkludert komplikasjoner som hepatisk encefalopati og nedsatt proteinsyntese3,4. Selv om nyere forskning har økt vår kunnskap om de fysiologiske og patologiske forandringene som følger med leversvikt, har den ikke helt forklart de patogene egenskapene som påvirker mekanismene for celledød. Videre er ingen medisiner for tiden tilgjengeligfor å reversere den progressive forverringen hos ALI-pasienter. Foreløpig er den eneste signifikant effektive behandlingen levertransplantasjon5,6.
For å undersøke mekanismen og patofysiologien til ALI og for å teste forskjellige hepatoprotektoringsstrategier, brukes forskjellige dyremodeller til å indusere ALI. En foretrukket dyremodell av ALI bør etterligne den patologiske prosessen av sykdommen via en pålitelig, validert, billig og lett å bruke metode. Eksempler på eksperimentelle modeller inkluderer hepatotoksiske midler, kirurgiske prosedyrer som total eller delvis hepatectomy, fullstendig eller forbigående devaskularisering, og infeksiøs prosedyrer7,,8,9. Kjente hepatotoksiske stoffer inkluderer galaktosamin, paracetamol, tioacetamid, azoksysan og CCl4. Av disse er CCl4 mye brukt selv om det ennå ikke er godt karakterisert10,11,12,13.
CCl4 er en organisk fargeløs væskeforbindelse med en søt lukt og nesten ingen brennbarhet ved lavere temperaturer. Eksponering for høye konsentrasjoner av Cl4 kan forårsake skade på sentralnervesystemet, inkludert forverring av leveren og nyrene. CCl4 induserer ALI gjennom sin biotransformasjon i leveren, som danner reaktive oksygenarter. Dette skjer via P450 cytokromenzymet 2E1, danner en aktiv metabolitt og resulterer i celleskade ved makromolekylbinding, forbedring av lipidperoksidasjon og forstyrrelse av intracellulær kalsium homeostase14. I tillegg kan CCl4-modellen brukes til å stimulere astrocytter på nivået av RNA-syntese15. Dette hepatotoksin har blitt administrert av intraperitoneal, intraportal, orale og intragastriske ruter16.
I denne protokollen beskriver vi i detalj CCl4-indusert ALI hos rotter via et orogastrisk rør. Denne metoden induserer robust og reproduserbar ALI som kan brukes til å undersøke patogenesen til ALI. Bestemmelse av leversykdom alvorlighetsgrad overvåkes ved måling av serum glutamat-pyruvate transaminase (GPT), glutamic oxaloacetic transaminase (GOT) enzymer og total bilirubin (TB) samt definitiv histologisk diagnose av hematoksyslin og eosin (H & E) farget levervev. Eksponering for CCl4 gjennom en intragastrisk tilgang gir en praktisk, billig, minimal invasiv metode med minimal fare.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:924px;" width="923">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:212px;">22 G catheter BD Neoflon TM</td>
			<td style="width:153px;">Becton Dickinson Infusion Therapy AB</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:443px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:212px;">4% buffered formaldehyde solution</td>
			<td style="width:153px;">Sigma - Aldrich lab materials technologies</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:212px;">BD Microtainer SST TM Tubes</td>
			<td style="width:153px;">Becton Dickinson and Company</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:212px;">Carbone tetrachloride</td>
			<td style="width:153px;">Sigma - Aldrich lab materials technologies</td>
			<td style="width:116px;">CAS 56-23-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:212px;">Isofluran, USP 100%</td>
			<td style="width:153px;">Piramamal Critical Care, Inc</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:212px;">Olympus AU2700 Chemistry-Immuno Analyzer</td>
			<td style="width:153px;">Olympus (MN, USA)</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td>Analysis of blood samples was done by the fluorescence method</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:212px;">Olympus BX 40 microscope</td>
			<td style="width:153px;">Olympus</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:212px;">RAT Feeding Needles</td>
			<td style="width:153px;">ORCHID SCIENTIFICS</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:212px;">SYRINGE SET 1 and 2 ml MEDI -PLUS</td>
			<td style="width:153px;">Shandong Zibo Shanchuan Medical Instruments Co., Ltd</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

inducing acute liver injury in rats via carbon tetrachloride (ccl4) exposure through an orogastric tube

Akutt leverskade (ALI) spiller en avgjørende rolle i utviklingen av leversvikt, som er preget av alvorlig leverdysfunksjon, inkludert komplikasjoner som hepatisk encefalopati og nedsatt proteinsyntese. Passende dyremodeller er avgjørende for å teste mekanismen og patofysiologien til ALI og undersøke ulike hepatoprotektoriske strategier. På grunn av sin evne til å utføre kjemiske transformasjoner, er karbontetrachlorid (CCl4) mye brukt i leveren for å indusere ALI gjennom dannelsen av reaktive oksygenarter. CCl4 eksponering kan utføres intraperitonealt, ved innånding, eller gjennom et nasogastrisk eller orogastrisk rør. Her beskriver vi en gnagermodell, der ALI induseres av CCl4 eksponering gjennom et orogastrisk rør. Denne metoden er billig, lett utført, og har minimal fare. Modellen er svært reproduserbar og kan brukes mye for å bestemme effekten av potensielle hepatoprotective strategier og vurdere markører for leverskade.

TB-, GOT- og GPT-nivåene økte betydelig 24 timer etter indusert ALI (mer ved høyere CCl4-doser) sammenlignet med sham-opererte kontroller (p < 0,001) ( Figur1). Nivåene av TB, GOT og GPT ved baseline var normale og var ikke signifikant annerledes enn sham-opererte kontroller. Ved 24 timer, alle tre intervensjonsgruppene, 1 ml/kg CCl4 (1, 1−2), 2,5 ml/kg CCl4 (3, 3–4) og 5 ml/kg CCl4 (4, 4–5,75), hadde en signifikant høyere histologisk gr...

Watch this Scientific Journal Video about Inducing Acute Liver Injury in Rats via Carbon Tetrachloride CCl4 Exposure Through an Orogastric Tube at JoVE.com

Inducing Acute Liver Injury in Rats via Carbon Tetrachloride CCl4 Exposure Through an Orogastric Tube

Denne protokollen beskriver en vanlig og gjennomførbar metode for å indusere akutt leverskade (ALI) via CCl4 eksponering gjennom et orogastrisk rør. CCl4 eksponering induserer ALI gjennom dannelsen av reaktive oksygenarter under biotransformasjon i leveren. Denne metoden brukes til å analysere patofysiologien til ALI og undersøke forskjellige hepatoprotektoriske strategier.

Indusere akutt leverskade hos rotter via karbon tetrachloride (CCl4) Eksponering gjennom et orogastrisk rør

Acute liver injury (ALI) plays a crucial role in the development of hepatic failure, which is characterized by severe liver dysfunction including ...

Jeg ønsker å presentere vårt arbeid om indusert akutt leverskade hos rotter via karbontetraklorideksponering gjennom orogastrisk rør. Velg voksne hann Sprague-Dawley rotter som veier 300 til 350 gram. Gi rotte chow og vann ad libitum.Utfør alle eksperiment mellom seks AM og 12 PM. Dyrepleiekomedien til Ben-Gurion University of the Negev, Israel godkjente all behandlings- og testprosedyre som brukes i denne protokollen. Opprettholde rotter ved romtemperatur på 22 Celsius grad med 12 timers lys og 12 timers mørke sykluser. Kanyler halevenen med et 22 gauge kateter.Samle blodprøver ved baseline. Blod biokjemisk analyse inkluderer måling av serum GOT, GPT, og total bilirubin. Undersøkelse av leverenzymer og totalt bilirubinnivå ble utført i det biokjemiske laboratoriet til Soroka Medical Center.Forsiktig:eksponering for høy konsentrasjon av karbontetraklorid, inkludert damp eller hudabsorpsjon kan påvirke sentralnervesystemet, degenerere leveren og nyrene, og langvarig eksponering kan føre til koma eller død. Forbered en 50 prosent løsning av karbontetraklorid blandet med olivenolje som kjøretøy i ett til ett forhold. Induser patototoksisitet in vivo ved administrering av karbontettraklorid via et orogastrisk rør.Sett inn et orogastrisk rør gjennom rottens munnhule. Utsett rotter for ulike doser av karbontetraklorid. En milliliter per kilo for mild akutt leverskade, to punkt fem milliliter per kilo for moderat akutt leverskade, eller fem milliliter per kilo for alvorlig akutt leverskade.For sham gruppe, utsette rotter til fem milliliter per kilo bare olivenolje. Samle blodprøver ved 24 timer fra karbontetraklorideksponering. Blod biokjemisk analyse inkluderer måling av serum GOT, GPT, og total bilirubin.Plasser død rotte på disseksjonsbrettet i dorsal rekombinant med magen vendt oppover og barber magen. Ved hjelp av skalpell, incise hele lengden av ventrum fra anus til haken. Reflektere huden.Med skalpell, incise bukveggen fra anus til xiphoid brusk for å avsløre abdominal viscera. Overfør leveren til en petriskål. Utfør en hematoksylin og eosin farging.Undersøk skivene under mikroskopforstørrelse på 200 ganger med en 20 millimeter objektiv lengde. Leverseksjonen skal graderes av en spesialisert patolog, blindet til behandlingsprotokollen. Poengsummen på null indikerer ingen leverabnormiteter, en til to indikerer mild leverskade, tre til fire indikerer moderat leverskade, og fem til seks indikerer alvorlig leverskade.De ulike gruppene av rotter til forskjellige tider er vist på ordningen. 24 timer etter å ha forårsaket akutt leverskade, var det en betydelig økning i GOT, GPT og totale bilirubinnivåer, avhengig av karbontettraklorid eksponert sammenlignet med kontrollgruppen. P-verdien var mindre enn nullpunkt null null én.Histopatologiske endringer ble observert etter 24 timer i alle grupper etter karbontetrakloridforgiftning i ulike doser. Histologisk gradering score på 24 timer mellom alle tre intervensjonsgrupper til kontrollgruppen var betydelig høyere. P-verdien var mindre enn nullpunkt null fem.Vår forskningsgruppe presenterte den vanlige og fysiske metoden for indusert akutt leverskade hos rotter via karbontetraklorideksponering gjennom orogastrisk rør. Denne metoden brukes til å undersøke patofysiologien til akutt leverskade og for å teste forskjellig om beskyttelsesstrategien. Tusen takk for din oppmerksomhet.

Research

JoVE Journal

Medicine

Inducing Acute Liver Injury in Rats via Carbon Tetrachloride (CCl4) Exposure Through an Orogastric Tube

Acute Myocardial Infarction in Rats

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular ...

Pressure Controlled Ventilation to Induce Acute Lung Injury in Mice

Murine models are extensively used to investigate acute injuries of different organs systems (1-34). Acute lung injury (ALI), which occurs with prolonged ...

X-ray Dose Reduction through Adaptive Exposure in Fluoroscopic Imaging

X-ray fluoroscopy is widely used for image guidance during cardiac intervention. However, radiation dose in these procedures can be high, and this is a ...

Acute and Chronic Tactile Sensory Testing after Spinal Cord Injury in Rats

Akutt og kronisk Taktil Sensory Testing etter ryggmargsskade i Rats

Spinal cord injury (SCI) impairs sensory systems causing allodynia1-8. To identify cellular and molecular causes of allodynia, sensitive and valid sensory ...

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

Orthotopic levertransplantasjon i Rats

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat ...

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

Iskemi-reperfusjon Modell av akutt nyreskade og Post Injury fibrose i Mus

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

Open Tracheostomy Gastric Acid Aspiration Murine Model of Acute Lung Injury Results in Maximal Acute Nonlethal Lung Injury

Åpne trakeostomi magesyre aspire Murine modell av akutt lungeskade Resultater i Maximal Akutt-dødelige lungeskade

Acid pneumonitis is a major cause of sterile acute lung injury (ALI) in humans. Acid pneumonitis spans the clinical spectrum from asymptomatic to acute ...

Evaluation of Coronary Flow Reserve After Myocardial Ischemia Reperfusion in Rats

Evaluering av koronar Flow Reserve etter hjerteinfarkt ischemia reperfusion i rotter

Coronary artery disease is the leading cause of death worldwide. After an acute myocardial infarction, early and successful myocardial intervention via ...

Inducing Acute Lung Injury in Mice by Direct Intratracheal Lipopolysaccharide Instillation

Inducing akutt lungeskade i mus ved direkte Intratrakeal lipopolysakkarid drypping

Airway administration of lipopolysaccharide (LPS) is a common way to study pulmonary inflammation and acute lung injury (ALI) in small animal models. ...

Acute Kidney Injury Model Induced by Cisplatin in Adult Zebrafish

Akutt nyreskademodell indusert av Cisplatin i voksen sebrafisk

Cisplatin is commonly used as chemotherapy. Although it has positive effects in cancer-treated individuals, cisplatin can easily accumulate in the kidney ...