Name: inducing acute liver injury in rats via carbon tetrachloride (ccl4) exposure through an orogastric tube
Uploaded: 2020-04-28T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Inducing Acute Liver Injury in Rats via Carbon Tetrachloride CCl4 Exposure Through an Orogastric Tube at JoVE.com

Los autores agradecen a Bertha Delgado, Departamento de Patología, Centro Médico Soroka, Facultad de Ciencias de la Salud, Universidad Ben-Gurion del Negev, por su ayuda en el laboratorio, así como en el análisis de histología.

Los experimentos se llevaron a cabo de conformidad con las recomendaciones de las Declaraciones de Helsinki y Tokio y las Directrices para el uso de animales experimentales de la Comunidad Europea. Los experimentos fueron aprobados por el Comité de Cuidado Animal de la Universidad Ben-Gurion del Negev.
NOTA: El modelo CCl4 se ha generado y utilizado en un estudio anterior17. La escala de tiempo del protocolo se muestra en la Tabla 1.
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	<li>Hoofnagle, J. H., Carithers, R. L., Shapiro, C., Ascher, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fulminant+hepatic+failure:+Summary+of+a+workshop.">Fulminant hepatic failure: Summary of a workshop.</a> Hepatology. 21 (1), 240-252 (1995).</li><li>Rakela, J., Lange, S. M., Ludwig, J., Baldus, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fulminant+hepatitis:+Mayo+clinic+experience+with+34+cases.">Fulminant hepatitis: Mayo clinic experience with 34 cases.</a> Mayo Clinic Proceedings. 60 (5), 289-292 (1985).</li><li>Riordan, S. M., Williams, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+hepatic+encephalopathy.">Treatment of hepatic encephalopathy.</a> New England Journal of Medicine. 337, 473-479 (1997).</li><li>Bernuau, J., Rueff, B., Benhamou, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fulminant+and+subfulminant+liver+failure:+Definitions+and+causes.">Fulminant and subfulminant liver failure: Definitions and causes.</a> Seminars in Liver Disease. 6 (2), 97-106 (1986).</li><li>Lidofsky, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liver+transplantation+for+fulminant+hepatic+failure.">Liver transplantation for fulminant hepatic failure.</a> Gastroenterology Clinics of North America. 22 (2), 257-269 (1993).</li><li>Auzinger, G., Wendon, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intensive+care+management+of+acute+liver+failure.">Intensive care management of acute liver failure.</a> Current opinion in critical care. 14 (2), 179-188 (2008).</li><li>Wu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protection+of+regenerating+liver+after+partial+hepatectomy+from+carbon+tetrachloride+hepatotoxicity+in+rats:+Roles+of+mitochondrial+uncoupling+protein+2+and+ATP+stores.">Protection of regenerating liver after partial hepatectomy from carbon tetrachloride hepatotoxicity in rats: Roles of mitochondrial uncoupling protein 2 and ATP stores.</a> Digestive Diseases and Sciences. 54 (9), 1918-1925 (2009).</li><li>Tu&#241;&#243;n, M. J., Alvarez, M., Culebras, J. M., Gonz&#225;lez-Gallego, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+overview+of+animal+models+for+investigating+the+pathogenesis+and+therapeutic+strategies+in+acute+hepatic+failure.">An overview of animal models for investigating the pathogenesis and therapeutic strategies in acute hepatic failure.</a> World Journal of Gastroenterologyl. 15 (25), 3086-3098 (2009).</li><li>van de Kerkhove, M. P., Hoekstra, R., van Gulik, T. M., Chamuleau, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large+animal+models+of+fulminant+hepatic+failure+in+artificial+and+bioartificial+liver+support+research.">Large animal models of fulminant hepatic failure in artificial and bioartificial liver support research.</a> Biomaterials. 25 (9), 1613-1625 (2004).</li><li>Butterworth, R. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+models+of+hepatic+encephalopathy:+ISHEN+guidelines.">Experimental models of hepatic encephalopathy: ISHEN guidelines.</a> Liver International. 29 (6), 783-788 (2009).</li><li>Zhang, B., Gong, D., Mei, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protection+of+regenerating+liver+after+partial+hepatectomy+from+carbon+tetrachloride+hepatotoxicity+in+rats:+Role+of+hepatic+stimulator+substance.">Protection of regenerating liver after partial hepatectomy from carbon tetrachloride hepatotoxicity in rats: Role of hepatic stimulator substance.</a> Journal of Gastroenterology and Hepatology. 14 (10), 1010-1017 (1999).</li><li>Ugazio, G., Danni, O., Milillo, P., Burdino, E., Congiu, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+protection+against+carbon+tetrachloride+toxicity.+I.+prevention+of+lethal+effects+by+partial+surgical+hepatectomy.">Mechanism of protection against carbon tetrachloride toxicity. I. prevention of lethal effects by partial surgical hepatectomy.</a> Drug and Chemical Toxicology. 5 (2), 115-124 (1982).</li><li>Taniguchi, M., Takeuchi, T., Nakatsuka, R., Watanabe, T., Sato, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+process+in+acute+liver+injury+and+regeneration+induced+by+carbon+tetrachloride.">Molecular process in acute liver injury and regeneration induced by carbon tetrachloride.</a> Life Science. 75 (13), 1539-1549 (2004).</li><li>Gordis, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipid+metabolites+of+carbon+tetrachloride.">Lipid metabolites of carbon tetrachloride.</a> Journal of Clinical Investigation. 48 (1), 203-209 (1969).</li><li>Albrecht, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+RNA+synthesis+in+experimental+hepatogenic+encephalopathy.">Cerebral RNA synthesis in experimental hepatogenic encephalopathy.</a> Journal of Neuroscience Research. 6 (4), 553-558 (1981).</li><li>Terblanche, J., Hickman, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+fulminant+hepatic+failure.">Animal models of fulminant hepatic failure.</a> Digestive Diseases and Sciences. 36 (6), 770-774 (1991).</li><li>Gruenbaum, B. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-free+DNA+as+a+potential+marker+to+predict+carbon+tetrachloride-induced+acute+liver+injury+in+rats.">Cell-free DNA as a potential marker to predict carbon tetrachloride-induced acute liver injury in rats.</a> Hepatology International. 7 (2), 721-727 (2013).</li><li>Juricek, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analytical+evaluation+of+the+clinical+chemistry+analyzer+Olympus+AU2700+plus.">Analytical evaluation of the clinical chemistry analyzer Olympus AU2700 plus.</a> Biochemia Medica. 20 (3), 334-340 (2010).</li><li>Feldman, A. T., Wolfe, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+processing+and+hematoxylin+and+eosin+staining.">Tissue processing and hematoxylin and eosin staining.</a> Methods in Molecular Biology. 1180, 31-43 (2014).</li><li>Wang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effects+of+dehydrocavidine+on+carbon+tetrachloride-induced+acute+hepatotoxicity+in+rats.">Protective effects of dehydrocavidine on carbon tetrachloride-induced acute hepatotoxicity in rats.</a> Journal of Ethnopharmacology. 117 (2), 300-308 (2008).</li><li>Ye, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatoprotective+effects+of+coptidis+rhizoma+aqueous+extract+on+carbon+tetrachloride-induced+acute+liver+hepatotoxicity+in+rats.">Hepatoprotective effects of coptidis rhizoma aqueous extract on carbon tetrachloride-induced acute liver hepatotoxicity in rats.</a> Journal of Ethnopharmacology. 124 (1), 130-136 (2009).</li><li>Wills, P. J., Asha, V. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effect+of+lygodium+flexuosum+(L.)+sw.+extract+against+carbon+tetrachloride-induced+acute+liver+injury+in+rats.">Protective effect of lygodium flexuosum (L.) sw. extract against carbon tetrachloride-induced acute liver injury in rats.</a> Journal of Ethnopharmacology. 108 (3), 320-326 (2006).</li><li>Senior, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+for+hepatotoxicity:+What+is+the+predictive+value+of+liver+"function"+tests.">Monitoring for hepatotoxicity: What is the predictive value of liver "function" tests.</a> Clinical Pharmacology &amp; Therapeutics. 85 (3), 331-334 (2009).</li><li>Karmen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+note+on+the+spectrometric+assay+of+glutamic-oxalacetic+transaminase+in+human+blood+serum.">A note on the spectrometric assay of glutamic-oxalacetic transaminase in human blood serum.</a> Journal of Clinical Investigation. 34 (1), 131-133 (1955).</li><li>Hubner, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrastructural+liver+damage+caused+by+direct+action+of+carbon+tetrachloride+in+vivo+and+in+vitro.">Ultrastructural liver damage caused by direct action of carbon tetrachloride in vivo and in vitro.</a> Virchows Archiv fur Pathologische Anatomie und Physiologie und fur Klinische Medizin. 339 (3), 187-197 (1965).</li><li>Newsome, P. N., Plevris, J. N., Nelson, L. J., Hayes, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+fulminant+hepatic+failure:+A+critical+evaluation.">Animal models of fulminant hepatic failure: A critical evaluation.</a> Liver Transplantation. 6 (1), 21-31 (2000).</li></ol>

En este protocolo, CCl4 se utiliza como una toxina hepática para inducir ALI en ratas. LA ALI se caracteriza por la pérdida de parénquima hepático y la posterior desregulación de las funciones metabólicas y sintéticas del hígado. Los medicamentos, virus, toxinas, enfermedades autoinmunes, enfermedades metabólicas y trastornos vasculares inducen la muerte de hepatocitos, y la posterior respuesta inflamatoria contribuye a la patogénesis de la ALI.
El insulto inicial al híga...

La frecuencia de los insultos tóxicos en el hígado, especialmente debido al abuso de alcohol y drogas, está aumentando. La lesión hepática aguda (ALI) se asocia con altas tasas de mortalidad y ha causado problemas clínicos1,,2. La lesión tóxica conduce a las vías de señalización de la muerte en el hígado, lo que resulta en apoptosis de hepatocitos, necrosis o piroptosis. LA ALI desempeña un papel crucial en el desarrollo de la insuficiencia hepática, que se caracteriza por una disfunción hepática grave que incluye complicaciones como la encefalopatía hepática y el deterioro de la síntesis de proteínas3,4. Aunque investigaciones recientes han aumentado nuestro conocimiento sobre los cambios fisiológicos y patológicos que acompañan a la insuficiencia hepática, no ha explicado completamente las características patomoleculares que afectan los mecanismos de la muerte celular. Además, actualmente no hay medicamentos disponibles para revertir el deterioro progresivo en pacientes con ALA. Actualmente, el único tratamiento significativamente eficaz es el trasplante de hígado5,,6.
Con el fin de investigar el mecanismo y la fisiopatología de ALI y para probar diferentes estrategias hepatoprotectoras, diferentes modelos animales se utilizan para inducir ALI. Un modelo animal preferible de ALI debe imitar el proceso patológico de la enfermedad a través de un método fiable, validado, barato y fácil de aplicar. Algunos ejemplos de modelos experimentales son los agentes hepatotóxicos, los procedimientos quirúrgicos como la hepatectomía total o parcial, la desvascularización completa o transitoria y los procedimientos infecciosos7,,8,,9. Las sustancias hepatotóxicas conocidas incluyen galactosamina, paracetamol, tioacetamida, azoximetano y CCl4. De estos, CCl4 es ampliamente utilizado aunque todavía no ha sido bien caracterizado10,11,12,13.
CCl4 es un compuesto líquido incoloro orgánico con un olor dulce y casi sin inflamabilidad a temperaturas más bajas. La exposición a altas concentraciones de CCl4 puede causar daños en el sistema nervioso central, incluyendo el deterioro del hígado y los riñones. CCl4 induce ALI a través de su biotransformación en el hígado, que forma especies reactivas de oxígeno. Esto ocurre a través de la enzima citocromo P450 2E1, formando un metabolito activo y resultando en daño celular por unión a macromoléculas, mejora de la peroxidación lipídica y alteración de la homeostasis de calcio intracelular14. Además, el modelo CCl4 se puede utilizar para estimular los astrocitos a nivel de síntesis de ARN15. Esta hepatotoxina ha sido administrada por las vías intraperitoneal, intraportal, oral e intragástrica16.
En este protocolo, describimos en detalle la ALI inducida por CCl4en ratas a través de una sonda orogástrica. Este método induce ALI robusto y reproducible que se puede utilizar para investigar la patogénesis de la ALI. La determinación de la gravedad de la enfermedad hepática se controla mediante la medición de glutamato-piruvato transaminasa sérica (GPT), enzimas transaloacéticas oxaloacéticas glutámicas (GOT) y bilirrubina total (TB), así como diagnóstico histológico definitivo por hematoxilina y tejidos hepáticos manchados de hematoxilina y eosina (H&E). La exposición a CCl4 a través de un acceso intragástrico permite un método práctico, barato y mínimamente invasivo con un riesgo mínimo de peligro.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:924px;" width="923">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:212px;">22 G catheter BD Neoflon TM</td>
			<td style="width:153px;">Becton Dickinson Infusion Therapy AB</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:443px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:212px;">4% buffered formaldehyde solution</td>
			<td style="width:153px;">Sigma - Aldrich lab materials technologies</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:212px;">BD Microtainer SST TM Tubes</td>
			<td style="width:153px;">Becton Dickinson and Company</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:212px;">Carbone tetrachloride</td>
			<td style="width:153px;">Sigma - Aldrich lab materials technologies</td>
			<td style="width:116px;">CAS 56-23-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:212px;">Isofluran, USP 100%</td>
			<td style="width:153px;">Piramamal Critical Care, Inc</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:212px;">Olympus AU2700 Chemistry-Immuno Analyzer</td>
			<td style="width:153px;">Olympus (MN, USA)</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td>Analysis of blood samples was done by the fluorescence method</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:212px;">Olympus BX 40 microscope</td>
			<td style="width:153px;">Olympus</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:212px;">RAT Feeding Needles</td>
			<td style="width:153px;">ORCHID SCIENTIFICS</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:212px;">SYRINGE SET 1 and 2 ml MEDI -PLUS</td>
			<td style="width:153px;">Shandong Zibo Shanchuan Medical Instruments Co., Ltd</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

inducing acute liver injury in rats via carbon tetrachloride (ccl4) exposure through an orogastric tube

La lesión hepática aguda (ALI) desempeña un papel crucial en el desarrollo de la insuficiencia hepática, que se caracteriza por una disfunción hepática grave, incluyendo complicaciones como la encefalopatía hepática y la síntesis de proteínas deterioradas. Los modelos animales apropiados son vitales para probar el mecanismo y la fisiopatología de la ALI e investigar diferentes estrategias hepatoprotectoras. Debido a su capacidad para realizar transformaciones químicas, tetracloruro de carbono (CCl4) es ampliamente utilizado en el hígado para inducir ALI a través de la formación de especies reactivas de oxígeno. La exposición a CCl4 se puede realizar por vía intraperitoneal, por inhalación o a través de una sonda nasogástrica u orogástrica. Aquí, describimos un modelo de roedor, en el que la ALI es inducida por la exposición de CCl4 a través de un tubo orogástrico. Este método es barato, fácil de realizar y tiene un riesgo mínimo de peligro. El modelo es altamente reproducible y puede ser ampliamente utilizado para determinar la eficacia de posibles estrategias hepatoprotectoras y evaluar marcadores de lesión hepática.

Los niveles de TB, GOT y GPT aumentaron significativamente 24 h después de inducir ALI (más adosis más altas de CCl 4) en comparación con los controles accionados por falsos (p < 0.001)(Figura 1). Los niveles de TB, GOT y GPT al inicio eran normales y no eran significativamente diferentes de los controles falsos operados. A las 24 h, los tres grupos de intervención, 1 mL/kg CCl4 (1, 1x2), 2,5 mL/kg CCl4 (3, 3x4) y 5 mL/kg CCl4 (4, 4 x 5,75), t...

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Inducing Acute Liver Injury in Rats via Carbon Tetrachloride CCl4 Exposure Through an Orogastric Tube

Este protocolo describe un método común y factible para inducir lesiones hepáticas agudas (ALI) a través de la exposición de CCl4 a través de un tubo orogástrico. La exposición a CCl4 induce ALI a través de la formación de especies reactivas de oxígeno durante su biotransformación en el hígado. Este método se utiliza para analizar la fisiopatología de ALI y examinar diferentes estrategias hepatoprotectoras.

Inducir lesiones hepáticas agudas en ratas a través de tetracloruro de carbono (CCl4) Exposición a través de un tubo orogástrico

Acute liver injury (ALI) plays a crucial role in the development of hepatic failure, which is characterized by severe liver dysfunction including ...

Me gustaría presentar nuestro trabajo sobre la lesión hepática aguda inducida en ratas a través de la exposición a tetracloruro de carbono a través de tubo orogástrico. Seleccione ratas Sprague-Dawley machos adultos que pesen de 300 a 350 gramos. Proporcione comida de rata y agua ad libitum.Realice todo el experimento entre las seis AM y las 12 PM. La comedia de cuidado animal de la Universidad Ben-Gurion del Negev, Israel aprobó todo el procedimiento de tratamiento y prueba utilizado en este protocolo. Mantenga las ratas a una temperatura ambiente de 22 grados Celsius con 12 horas de luces y 12 horas de oscuros. Cannula la vena de la cola con un catéter de calibre 22.Recoger muestras de sangre al inicio. Los análisis bioquímicos en sangre incluyen la medición de GOT sérico, GPT y bilirrubina total. El examen de las enzimas hepáticas y el nivel total de bilirrubina se llevaron a cabo en el laboratorio bioquímico de Soroka Medical Center.Precaución: la exposición a una alta concentración de tetracloruro de carbono, incluida la absorción de vapor o piel, puede afectar al sistema nervioso central, degenerar el hígado y el riñón, y la exposición prolongada puede conducir al coma o a la muerte. Preparar una solución del 50 por ciento de tetracloruro de carbono mezclado con aceite de oliva como vehículo en una proporción a una. Inducir la patotoxicidad in vivo mediante la administración de tetracloruro de carbono a través de un tubo orogástrico.Inserte un tubo orogástrico a través de la cavidad oral de la rata. Exponer las ratas a diferentes dosis de tetracloruro de carbono. Un mililitro por kilo para lesiones hepáticas agudas leves, dos mililitros de cinco mililitros por kilo para lesiones hepáticas agudas moderadas, o cinco mililitros por kilo para lesiones hepáticas agudas graves.Para el grupo falso, exponga las ratas a cinco mililitros por kilo sólo aceite de oliva. Recoger muestras de sangre a las 24 horas de la exposición al tetracloruro de carbono. Los análisis bioquímicos en sangre incluyen la medición de GOT sérico, GPT y bilirrubina total.Coloque la rata muerta en la tabla de disección en recombinante dorsal con el abdomen mirando hacia arriba y afeite su abdomen. Usando bisturí, incise toda la longitud del ventrum desde el ano hasta la barbilla. Refleja la piel.Con el bisturí, incitar la pared abdominal desde el ano hasta el cartílago xifoide para exponer las vísceras abdominales. Transfiera el hígado a un plato de petri. Realice una tinción de hematoxilina y eosina.Examine las rodajas bajo aumento del microscopio de 200 veces con una longitud objetiva de 20 milímetros. La sección hepática debe ser calificada por un patólogo especializado, cegado al protocolo de tratamiento. La puntuación de cero indica que no hay anomalías hepáticas, uno a dos indica una lesión hepática leve, tres a cuatro indica una lesión hepática moderada y de cinco a seis indica una lesión hepática grave.Los diversos grupos de ratas en diferentes momentos se muestran en el esquema. 24 horas después de inducir una lesión hepática aguda, hubo un aumento significativo en los niveles de GOT, GPT y bilirrubina total, dependiendo del tetracloruro de carbono expuesto en comparación con el grupo de control. El valor P era menor que cero punto cero cero uno.Se observaron cambios histopatológicos después de 24 horas en todos los grupos después de la intoxicación por tetracloruro de carbono en varias dosis. La puntuación histológica a las 24 horas entre los tres grupos de intervención y el grupo de control fue significativamente mayor. El valor P era menor que cero punto cero cinco.Nuestro grupo de investigación presentó el método común y físico de lesión hepática aguda inducida en ratas a través de la exposición a tetracloruro de carbono a través de tubo orogástrico. Este método se utiliza para investigar la fisiopatología de la lesión hepática aguda y para probar diferentes sobre la estrategia de protección. Muchas gracias por su atención.

Research

JoVE Journal

Medicine

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