Name: measuring and manipulating functionally specific neural pathways in the human motor system with transcranial magnetic stimulation
Uploaded: 2020-02-23T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measuring and Manipulating Functionally Specific Neural Pathways in the Human Motor System with Transcranial Magnetic Stimulation at JoVE.com

Detta arbete stöddes av University of Michigan: MCubed Scholars Program och School of Kinesiology.

Följande tre TMS-metoder beskrivs nedan. För det första beskrivs två metoder för att mäta kortikokortikal anslutning med dubbla platser transkraniell magnetisk stimulering (dsTMS) medan deltagarna antingen är 1) i vila (viloläge) eller 2) utför en objektriktad reach-to-grasp rörelse ( uppgiftsberoende). För det andra beskrivs en atorisk kombinationsstimuleringsmetod (cPAS) för att modulera samspelet mellan två hjärnområden på ett kontrollerat sätt genom att para ihop när som helst stimuli (t.ex. bakre p...

Den tms-metod med dubbla platser som beskrivs här kan användas för att undersöka funktionella interaktioner mellan olika när områden som är sammankopplade med den primära motorbarken medan en deltagare är i vila eller planerar en målinriktad åtgärd. Medan hjärnan imaging är korrelerad, grundläggande kunskaper från dual-site TMS metoder kan avslöja kausala hjärnan-beteende relationer i samband med förändringar i kortikokortikala kretsar. Dessutom kan kortikal asociativ stimulering med två TMS-ringar a...

Noninvasive hjärnan stimulering är en lovande bedömning verktyg och behandling för många neurologiska sjukdomar, såsom Parkinsons sjukdom, Alzheimers sjukdom, och stroke1,2,3,4. Det finns ackumulerande bevis som fastställer förhållandet mellan beteendemässiga manifestationer av neurologiska sjukdomar och avvikelser i när som är retbarhet, neuroplasticitet, kortikala och kortikala och kortikala konnektikulära anslutning5,6. Därför kan grundläggande kunskaper om hjärnans nätverksdynamik och plasticitet i neurologiska tillstånd ge ovärderlig inblick i sjukdomsdiagnos, progression och svar på terapi. Funktionell magnetisk resonanstomografi (fMRI) är ett användbart verktyg för att förstå de komplexa relationerna mellan hjärna och beteende i både friska och sjuka hjärnnätverk och har potential att förbättra behandlingen baserat på ett nätverksperspektiv7,8,9. Men fMRI är korrelationsrelaterad karaktär och kan inte ge ett orsakssamband mellan hjärnans funktion och beteende, eller manipulera funktionell anslutning för att återställa onormala neurala kretsar i samband med beteendemässiga funktionsnedsättningar hos patienter10,11,12. Transkraniell magnetisk stimulering (TMS) kan både kausalt mäta och modulera mänskliga hjärnans funktion och beteende i hälsa och sjukdom3,13,14,15.
TMS är en säker, noninvasive metod för att stimulera den mänskliga hjärnan16,17och kan användas för att inducera och mäta plasticitet18. Denna metod kan främja vår förståelse av orsakssamband mellan enskilda hjärnområden och beteende10,11,12,19och deras specifika funktionella interaktioner med andra noder i ett hjärnnätverk20,21,22,23. Hittills har de flesta studier fokuserat på det mänskliga motorsystemet, med tanke på att TMS till handområdet i motorcortex (M1) kan producera motoriska framkallade potentialer (PARLAMENTSLEDAMÖTER) som fysiologiska avläsningar för förändringar i samband med motoriskt beteende24, vilket möjliggör undersökning av olika hämmande och excitatoriska kretsar på systemnivå i den mänskliga hjärnan25. Senaste framsteg med hjälp av en konditionering test TMS strategi med två spolar visar att det är möjligt att mäta funktionella interaktioner mellan olika när områden. I motorsystemet visar TMS-experiment med dubbla platser att indata från när områden som är sammankopplade med M1 kan förändras med uppgiftskrav, ålder eller sjukdom14,26. Nyskapande arbete av Ferbert och kollegor har funnit att tillämpa en konditionering stimulans till M1 före ett test stimulans av den andra M1 kan resultera i hämning av parlamentsledamoten amplitud, ett fenomen som kallas kort intervall interhemispheric hämning (SIHI)28. Ett antal TMS-studier med detta tillvägagångssätt har också visat att M1 är starkt sammankopplad med den kontralaterala M1, ventrala premotorcortex (PMv), dorsala premotor cortex (PMd), kompletterande motorområde (SMA), pre-SMA, primära sensorisk cortex (S1), dorsolateral prefrontalcortex (DLPFC), och bakre parietal cortex (PPC) i vila27,28,29,30,31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42. Intressant nog är effekten av stimulering från dessa när områden på motoriska kortikala retbarhet anatomiskt, tidsmässigt och funktionellt specifika för den pågående hjärnaktiviteten under beredningen av en rörelse (tillstånd- och kontextberoende43,44,45,46,47,48,49,50,51,52,53,54,55,56,57,58,59,60,61,62,63,64,65,66,67,69). Emellertid, mycket få studier med dubbla platser TMS har karakteriserat mönster av funktionella kortikala anslutning med motoriska och kognitiva funktionsnedsättningar hos patienter med hjärnsjukdomar70,71,72. Detta ger möjligheter att utveckla nya metoder för att bedöma och behandla motoriska och kognitiva störningar.
Med hjälp av denna teknik har det också visat sig att upprepade par när tms appliceras på när områden som är sammankopplade med M1 såsom kontralateral M168,69,70, PMv76,77,78, SMA71, och PPC80,81,82 kan framkalla förändringar i synaptisk effektivitet i specifika neurala vägar baserat på hebbianprincipen om assotivecia plasticitet83 ,84,85,86 och förbättra beteendemässiga prestanda72,73,74. Fortfarande, få studier har använt denna metod för att studera krets och plasticitet dysfunktion i neurologiska sjukdomar2,75,76,77,78,79,80,81,82,83,84,90,91,92, 93,94,95,96. Det återstår att visa om stärka funktionellt specifika neurala vägar med TMS kan återställa aktiviteten i dysfunktionella kretsar, eller om den framtida förstärkningen av intakt kretskan ökamotståndskraften 97 i hjärnannätverk stödja motorisk och kognitiv funktion under hela livslängden och i sjukdom. Bristen på grundläggande förståelse av neurala mekanismer bakom neurologiska sjukdomar och effekter av stimulering på sammankopplade dysfunktionella hjärnnätverk begränsar nuvarande behandling.
Trots sin förmåga, TMS har ännu inte blivit en standard del av armamentarium av neurovetenskap och kliniska verktyg för att förstå hjärnanbeteende relationer, patofysiologi av hjärnsjukdomar, och effektiviteten av behandling. Därför, för att förverkliga sin potential och stödja sin storskaliga tillämpning, standardisera TMS metoder är viktigt eftersom det är mer sannolikt att öka stringensen för framtida TMS experiment och reproducerbarhet över oberoende laboratorier. I den här artikeln beskrivs hur TMS kan användas för att både mäta och manipulera funktionella interaktioner. Här beskriver vi denna teknik i motorsystemet (t.ex. parietomotorväg44) genom att mäta TMS-baserade utgående åtgärder (t.ex. ledamöter), där metoden bäst förstås. Det är dock viktigt att notera att detta protokoll också kan anpassas till mål funktionell koppling av andra subkortikala85,cerebellar86,87, och när områden. 73,74,88 Dessutom neuroimaging tekniker såsom EEG89,90,91 och fMRI92,93 kan användas för att bedöma TMS-inducerad förändringar i aktivitet och anslutning26,94. Vi avslutar med att föreslå att studiet av det funktionella deltagandet av kretsnivå kortikal anslutning med dessa TMS metoder i både hälsa och sjukdom gör det möjligt att utveckla riktade diagnoser och innovativa terapier baserade på mer sofistikerade nätverksmodeller av hjärnan-beteende relationer.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Alpha B.I. D50 coil (coated)</td>
			<td>Magstim</td>
			<td></td>
			<td>50mm coil</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BrainSight 2.0 Software</td>
			<td>Rogue Research</td>
			<td></td>
			<td>Neuronavigation software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BrainSight frameless Stereotactic System</td>
			<td>Rogue Research</td>
			<td></td>
			<td>Neuronavigation equiptment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D702 Coil</td>
			<td>Magstim</td>
			<td></td>
			<td>70mm coil</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Discovery MR750</td>
			<td>General Electric</td>
			<td></td>
			<td>3.0T MRI machine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable Earplugs</td>
			<td>3M</td>
			<td></td>
			<td>Foam earplugs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ECG Electrodes 30mm x 24mm</td>
			<td>Coviden-Kendall</td>
			<td>H124SG</td>
			<td>Disposable electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Four Channel Isolated Amplifier</td>
			<td>Intronix Technologies Corporation</td>
			<td>2024F</td>
			<td>EMG amplifier</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gGAMMAcap</td>
			<td>g.tec Medical Engineering</td>
			<td></td>
			<td>EEG head cap</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro1401-3</td>
			<td>Cambridge Electronic Design</td>
			<td></td>
			<td>Scientific data recorder and processing machine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nuprep Skin Prep Gel</td>
			<td>Weaver and Company</td>
			<td></td>
			<td>Skin prep abrasive gel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Signal v.7</td>
			<td>Cambridge Electronic Design</td>
			<td></td>
			<td>Data acquisition and analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>The Magstim BiStim2</td>
			<td>Magstim</td>
			<td></td>
			<td>Transcranial magnetic stimulator (two 2002 units)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measuring and manipulating functionally specific neural pathways in the human motor system with transcranial magnetic stimulation

Att förstå interaktioner mellan hjärnområden är viktigt för studier av målstyrt beteende. Funktionell neuroimaging av hjärnans anslutning har gett viktiga insikter i grundläggande processer i hjärnan som kognition, lärande och motorisk kontroll. Detta tillvägagångssätt kan dock inte ge orsaksbevis för inblandning av hjärnområden av intresse. Transkraniell magnetisk stimulering (TMS) är ett kraftfullt, noninvasive verktyg för att studera den mänskliga hjärnan som kan övervinna denna begränsning genom att övergående ändra hjärnans aktivitet. Här lyfter vi fram de senaste framstegen med hjälp av en ihopkopplad TMS-metod med dubbla platser med två spolar som kausalt sonderkortikala interaktioner i det mänskliga motorsystemet under olika uppgiftskontexter. Dessutom beskriver vi en dual-site TMS protokoll baserat på när som parisk associativ stimulering (cPAS) som transiently förbättrar synaptisk effektivitet i två sammankopplade hjärnområden genom att tillämpa upprepade par när som är i pärm med två spolar. Dessa metoder kan ge en bättre förståelse av de mekanismer som ligger bakom kognitiv-motorisk funktion samt ett nytt perspektiv på att manipulera specifika neurala vägar på ett målinriktat sätt att modulera hjärnan kretsar och förbättra beteendet. Detta tillvägagångssätt kan visa sig vara ett effektivt verktyg för att utveckla mer sofistikerade modeller av hjärnan-beteende relationer och förbättra diagnos och behandling av många neurologiska och psykiska störningar.

Figur 5 visar storleken på ett exempellig parlamentsledamot svar framkallas i FDI muskel av TMS för en okonditionerad test stimuli (TS ensam till M1, blå spår) eller konditionerade stimuli från PPC (CS-TS, rött spår) medan deltagaren var i vila (övre panelen) eller planerar en målinriktad greppa åtgärder till ett objekt (nedre panelen). I vila utövar PPC en hämmande påverkan på ipsilateral M1, vilket framgår av minskningen av pmep amplituder potentieras av en subthreshold CS ...

Watch this Scientific Journal Video about Measuring and Manipulating Functionally Specific Neural Pathways in the Human Motor System with Transcranial Magnetic Stimulation at JoVE.com

Measuring and Manipulating Functionally Specific Neural Pathways in the Human Motor System with Transcranial Magnetic Stimulation

Denna artikel beskriver nya metoder för att mäta och stärka funktionellt specifika neurala vägar med transkraniell magnetisk stimulering. Dessa avancerade noninvasive hjärnan stimulering metoder kan ge nya möjligheter för förståelse av hjärnan-beteende relationer och utveckling av nya terapier för att behandla hjärnsjukdomar.

Mätning och manipulera funktionellt specifika neurala vägar i det mänskliga motorsystemet med transkraniell magnetisk stimulering

Understanding interactions between brain areas is important for the study of goal-directed behavior. Functional neuroimaging of brain connectivity has ...

Denna teknik ger insikt i hur hjärnkretsar går snett, i psykiatriska och neurologiska sjukdomar. Och hur vi kan manipulera hjärnans aktivitet för att reparera dessa dysfunktionella kretsar för att förbättra beteendet. Genom att direkt aktivera och hämma hjärnans retbarhet och kretsar möjliggör denna teknik förskjutning av neurovetenskapligt fokus från observation till orsakssamband, och ger en djupare förståelse av hjärnan och beteendet.Icke-invasiv hjärnstimulering kan användas för att både bedöma och behandla många neurologiska sjukdomar och kan bidra till att förbättra diagnoser och terapier, baserat på mer sofistikerade modeller av hjärnans beteende anslutningar. Denna metod kan inte bara motverka förändrade anslutningsmönster i motorsystemet, utan även i kognitiva nätverk som är associerade med fysiologiskt åldrande, psykiatriska och neurologiska sjukdomar. Efter screening deltagare för rätt handedness och eventuella kontraindikationer till TMS och MRI, informera varje deltagare om studiemål, förfaranden och risker som godkänts av den lokala institutionella granskningsnämnden och få skriftligt medgivande.För placering av EMG-elektroderna, har deltagaren sitta bekvämt i den experimentella stolen, med båda armarna stöds i en avslappnad position och ge en hak vila för att hålla huvudet rörelsen till ett minimum under stimuleringen. Använd ett milt slipmedel för att rengöra huden över den muskel av intresse. Med hjälp av en mage sena elektrod arrangemang, placera en disponibel silver silverklorid elektrod på magen muskeln, och en annan på en närliggande beniga landmärke som referens plats på båda händerna på deltagaren.Anslut sedan en jordelektrod till ägarna styloid process, kontrollera sedan mellan varje elektrod i huden för att bekräfta en fullständig kontakt. Placera tejp över ytan av elektroden för att förbättra hudens ytkontakt vid behov. Före TMS-sessionen, ladda upp deltagarna strukturella MRI scan till en neuro-navigationssystem.Inom skanningen, placera en bana markör vid handrattet anatomiska landmärke som motsvarar M-en. I den vänstra precentral gyrus 45 grader från mitten sagittal linje, och ungefär vinkelrätt mot den centrala sulcus. Spela in och namnge det anatomiska landmärket, med neuronavigeringssystemet, och placera en andra banmarkör över det icke-motoriska intresseområdet.Spela sedan in och namnge den andra platsen med neuro-navigationssystemet. Kalibrera först varje TMS-spole med kalibreringsblocket, och placera huvudspåraren säkert på deltagarens huvud så att spåraren är i sikte under hela experimentets varaktighet. Samregistrera de anatomiska landmärkena på deltagarnas huvud, till neuronavigeringssystemet.Att lokalisera och tröskel med spole två, första position mitten av spolen över målet M-en plats, att inducera en bakre-främre ström riktning i hjärnan. För att hitta den optimala platsen för aktivering av målmuskeln, leverera pulser till M-en vid 30%av maskinerna maximal stimulator utgång, och observera om den levererade stimulering producerar en muskel rycka. Bestäm amplituden för den motor-evoked potential som registrerats med EMG-elektroderna från muskelaktiviteten som visas av datainsamlingssystemet.Om en motor-framkallad potential eller en synlig muskelryckning inte observeras, fortsätt att öka stimulatorns utdata med 5%steg. När ett svar observeras, sänka intensiteten på ett stegvis sätt till den lägsta intensiteten, som producerar minst fem av 10 motor-framkallade potentiella svar med en amplitud på minst 50 mikrovolt, medan deltagaren är à jour för att bestämma den vilomotor tröskel. För att lokalisera och tröskel med spole M-en, använd M-en spolen för att bestämma den optimala stimulering plats.Bestäm den lägsta stimulatorintensiteten som behövs för att generera motor-evoked potentialer på minst en millivolt, i fem av 10 försök i målhandmuskeln, när muskeln är helt avslappnad. Markera och registrera sedan positionen för M-en-spolen, inom neuro-navigationssystemet. För dual-site TMS när deltagaren är i vilotillstånd, anslut figuren åttaformade spolar till två enskilda TMS-stimulatorer.Leverera testet stimuli över M-en med M-en spole, och leverera konditionering stimuli till det andra området av intresse med spole två. Bestäm andelen av den maximala stimulatorutgångsintensiteten för konditioneringsstimulansen för spole två som visats. För testet stimulans, använd den tidigare bestämda intensitet som framkallar motor-framkallade potentiella amplituder av cirka en millivolt i den riktade quiescent handmuskeln, och ställa in exakt interstimulus intervall mellan konditionering och test stimuli.Placera M-en spolen över den vänstra M-en och position spole två över det andra området av intresse. Leverera testet stimuli ensam försök med M-en spole. För de parade pulsförsöken, leverera konditionering stimuli med spole två följt av testning stimuli till M-en spole vid förutbestämda interstimulus intervall, med hjälp av en fyra andra datainsamling svep för varje försök, följt av en andra inter-trial intervall.För att leverera programmet till TMS pulser, använd avtryckarknappen på TMS-maskinen för den medföljande styrmjukvaran, eller använd det specialtillverkade kodningsskriptet från den externa styrenheten. Med hjälp av den tidigare beskrivna metoden undersöka de funktionella interaktionerna mellan olika kortikala områden sammankopplade med M-en, men under den förberedande fasen av en uppgift som engagerar nätverket. För att leverera upprepade par av monofasiska pulser till två olika kortikala områden under korta perioder med hjälp av en skräddarsydd kodning skript, generera 100 par stimuli på 0,2 hertz för 8,3 minuter per stimulus.För den experimentella cPAS till M-ett villkor, leverera den första pulsen av varje stimuli par över icke-motoriska området med spole två, innan du levererar den andra pulsen över M-en med M-en spole, med en inter stimulans intervall på fem millisekunder. Pulsintensitet för båda spolarna, bör tidigare fastställas under tröskelvärden och lokalisering. Efter erhållande av baslinjekortikospinalmätningar med M-en spolen, erhålla kortikospinalmätningar med M-en spolen vid olika tidpunkter efter cPAS, att undersöka tidsföringen av TMS inducerad effekt på hjärnan retbarhet.Här storleken på en representativ motor-framkallade potentiella svar framkallas i den första dorsala interosseous muskeln av TMS för en obetingad test, eller konditionerad stimulans från den bakre parietalloben, medan deltagaren var i vila, eller planerar ett mål riktad gripa åtgärder till ett objekt som visas. I vila, den bakre parietal cortex utövar en hämmande inflytande på ipsilateral M-en, vilket framgår av minskningen av MEP amplituder, potentiated av en sub-tröskel konditionering stimulans levereras över PPC, fem millisekunder före en super tröskel testa stimulans över M-en. Under utarbetandet av ett grepp åtgärd, detta netto hämmande enhet i vila från den bakre parietal cortex, växla till underlättande.Normalisering av motor-framkallat potentiella amplituder att testa stimuli ensam prövningar för varje villkor, och rita som ett förhållande för motor-framkallade potentiella amplituden visar att den bakre parietalloben cortex M-en interaktion underlättades från vila, när du planerar ett objekt riktat grepp. I dessa analyser kan förändringarna i motor-framkallade potentiella amplituder under administrering av cPAS-protokollet, observeras. Motor-framkallat potentiella amplituder inducerad av parade stimulering av den bakre parietal cortex och M-en, gradvis ökat över tiden under stimulering protokollet, vilket tyder på plast effekter på nivån för den parietal-motoriska anslutningen, M-en kortikospinal nervceller eller båda.Storleken på motor-framkallat potentiella amplituder ökade 10 minuter efter cPAS protokollet, vilket tyder på att motor retbarhet efter effekter inducerades efter administrering av de upprepade par av när stimuli över den bakre parietalloben och M-en. Detta protokoll kan tillämpas på andra hjärnan regioner eller användas tillsammans med hjärnavbildning att studera när anslutning och dess effekt på kognition, sensorisk perception och humör. Standardisera dessa dubbla syn protokoll, kommer att möjliggöra förbättringar i experimentell design och optimering av riktade terapier.Minska sjuklighet och funktionsnedsättningar i neurologiska och psykiatriska störningar.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Combining Transcranial Magnetic Stimulation and fMRI to Examine the Default Mode Network

Kombinera transkraniell magnetisk stimulering och fMRI för att undersöka nätverket standardläge

The default mode network is a group of brain regions that are active when an individual is not focused on the outside world and the brain is at "wakeful ...

Electrode Positioning and Montage in Transcranial Direct Current Stimulation

Elektrod Positionering och Montage i Transkraniell likström stimulering

Transcranial direct current stimulation (tDCS) is a technique that has been intensively investigated in the past decade as this method offers a ...

The Use of Magnetic Resonance Spectroscopy as a Tool for the Measurement of Bi-hemispheric Transcranial Electric Stimulation Effects on Primary Motor Cortex Metabolism

Användning av magnetisk resonansspektroskopi som ett verktyg för mätning av Bi-hemisfären transkraniell elektriska retningar Effekter på Primär Motor Cortex Metabolism

Transcranial direct current stimulation (tDCS) is a neuromodulation technique that has been increasingly used over the past decade in the treatment of ...

Effects of Transcranial Alternating Current Stimulation on the Primary Motor Cortex by Online Combined Approach with Transcranial Magnetic Stimulation

Effekterna av transkraniell växelström stimulering på primära motoriska Cortex av Online kombinerat tillvägagångssätt med transkraniell magnetisk stimulering

Transcranial Alternating Current Stimulation (tACS) is a neuromodulatory technique able to act through sinusoidal electrical waveforms in a specific ...

Online Transcranial Magnetic Stimulation Protocol for Measuring Cortical Physiology Associated with Response Inhibition

Online transkraniell magnetisk stimulering protokoll för mätning av kortikal fysiologi är associerad med svar hämning

We describe the development of a reproducible, child-friendly motor response inhibition task suitable for online Transcranial Magnetic Stimulation (TMS) ...

Combined Transcranial Magnetic Stimulation and Electroencephalography of the Dorsolateral Prefrontal Cortex

Kombinerade transkraniell magnetisk stimulering och elektroencefalografi av dorsolaterala prefrontala Cortex

Transcranial magnetic stimulation (TMS) is a non-invasive method that produces neural excitation in the cortex by means of brief, time-varying magnetic ...

Bilateral Assessment of the Corticospinal Pathways of the Ankle Muscles Using Navigated Transcranial Magnetic Stimulation

Bilaterala bedömning av Corticospinal vägar av fotled muskler använder navigerat transkraniell magnetisk stimulering

Distal leg muscles receive neural input from motor cortical areas via the corticospinal tract, which is one of the main motor descending pathway in humans ...

3D Kinematic Analysis for the Functional Evaluation in the Rat Model of Sciatic Nerve Crush Injury

3D Kinematic Analys för funktionell utvärdering i Rat Modell av Sciatic Nerve Crush Skada

Compared to the Sciatic Functional Index (SFI), kinematic analysis is a more reliable and sensitive method for performing functional evaluations of ...

Simultaneous Application of Transcranial Direct Current Stimulation during Virtual Reality Exposure

Samtidig tillämpning av transkraniell likströmsstimulering under virtual reality-exponering

Transcranial direct current stimulation (tDCS) is a form of non-invasive brain stimulation that changes the likelihood of neuronal firing through ...

Transcranial Direct Current Stimulation (tDCS) for Memory Enhancement

Transcranial Direct Current Stimulation tDCS for Memory Enhancement

Transkraniell direktströmsstimulering (tDCS) för minnesförbättring

Memory enhancement is one of the great challenges in cognitive neuroscience and neurorehabilitation. Among various techniques used for memory enhancement, ...