Мы благодарим д-ра Чжэ Мина Ли за его техническую поддержку. Эта работа была поддержана грантами Национального исследовательского фонда Кореи (NRF), финансируемыми корейским правительством (NRF-2019R1A2C1003958, NRF-2019K2A9A2A08000167).

Все экспериментальные процедуры были одобрены Комитетом по этике Католического университета Кореи и проводились в соответствии с Национальным руководством по охране здоровья для ухода и использования лабораторных животных (NIH Publications No 80-23).
1. Новый тест на местоположени...

Эта работа описывает экспериментальные процедуры для оценки когнитивных функций у мышей с хронической эпилепсией. Много различных поведенческих парадигм испытания использованы для того чтобы оценить учя и функции памяти в мышах18. Лабиринт воды Морриса, радиальный лабир?...

Эпилепсия является хроническим заболеванием, характеризующимся спонтанными рецидивирующими припадками1,,2,,3. Потому что повторяющиеся судороги могут вызвать структурные и функциональные аномалии в головном мозге1,2,3, ненормальная активность захвата может способствовать когнитивной дисфункции, которая является одним из наиболее распространенных эпилепсиисвязанныхсопутствующих 4,5,6.3 Вопреки хроническим припадам событий, которые являются временными и сиюминутными, когнитивные нарушения могут сохраняться на протяжении всей жизни эпилептических пациентов, ухудшая их качество жизни. Поэтому важно понимать патофизиологические механизмы связанного с эпилепсией когнитивного спада.
Различные экспериментальные модели животных эпилепсии были использованы для демонстрации обучения и дефицита памяти, связанные с хронической эпилепсией7,8,,9,,10,11,12. Например, лабиринт воды Морриса, контекстуальные кондиционирования страха, отверстие борту, место расположения новых объектов (NL), и новые объекты распознавания (NO) тесты часто используются для оценки дисфункции памяти в височной доли эпилепсии (TLE). Поскольку гиппокамп является одним из основных областей, в которых TLE показывает патологию, поведенческие тесты, которые могут оценить гиппокампа-зависимой функции памяти часто предпочтительно выбраны. Однако, учитывая, что судороги могут вызвать аномальный гиппокампа нейрогенеза и способствовать эпилепсии связанных когнитивных снижение10, поведенческие парадигмы для тестирования протезирования новорожденных нейронной функции (т.е. пространственное разделение шаблона, PS)8,13 также может предоставить ценную информацию о клеточных механизмов нарушения памяти при эпилепсии.
В этой статье мы демонстрируем батарею тестов памяти, NL, NO и PS, для эпилептических мышей. Тесты просты и легко доступны и не требуют сложной системы.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 ml syringe</td>
			<td>Sung-shim</td>
			<td></td>
			<td>Use with the 26 or 30 gauge needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% Ethanol</td>
			<td>Duksan</td>
			<td>UN1170</td>
			<td>Spray to clean the box and objects</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>black curtain</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>For avoiding unnecessary visual cues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cresyl violet</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C5042</td>
			<td>For Cresyl violet staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cryotome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>E21040041</td>
			<td>For tissue sectioning</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>double-sided sticky tape</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>For the firm placement of the objects</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPX mounting medium</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>06522</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ethanol series</td>
			<td>Duksan</td>
			<td>UN1170</td>
			<td>Make 100%, 95%, 90%, 80%, 70% ethanol solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>floor plate with narrow grid patterns</td>
			<td>Leehyo-bio</td>
			<td></td>
			<td>Behavioral experiment equipment, plate size: 42.5 x 42.5 x 0.5 cm, grid size: 2.75 x 2.75 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>floor plate with wide grid patterns</td>
			<td>Leehyo-bio</td>
			<td></td>
			<td>Behavioral experiment equipment, plate size: 42.5 x 42.5 x 0.5 cm, grid size: 5.5 x 5.5 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>illuminometer</td>
			<td>TES Electrical Electronic Corp.</td>
			<td>1334A</td>
			<td>For the measurement of the room lighting (60 Lux)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intensive care unit</td>
			<td>Thermocare</td>
			<td>#W-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ketamine hydrochloride</td>
			<td>Yuhan</td>
			<td>7003</td>
			<td>Use to anesthetize the mouse for transcardial perfusion</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LED lamp</td>
			<td>Lungo</td>
			<td>P13A-0422-WW-04</td>
			<td>Lighting for the behavioral test room</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>objects</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Rubber doll, 50 ml plastic tube, glass Coplin jar, plastic T-flask, glass bottle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>open field box</td>
			<td>Leehyo-bio</td>
			<td></td>
			<td>Behavioral experiment equipment, size: 44 x 44 x 31 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>paper towel</td>
			<td>Yuhan-Kimberly</td>
			<td>47201</td>
			<td>Use to dry open field box and objects</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>paraformaldehyde</td>
			<td>Merck Millipore</td>
			<td>104005</td>
			<td>Make 4% solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pilocarpine hydrochloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P6503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ruler</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Use to locate the objects in the open field box</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>scopolamine methyl nitrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S2250</td>
			<td>Make 10X stock</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Smart system 3.0</td>
			<td>Panlab</td>
			<td></td>
			<td>Video tracking system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>stopwatch</td>
			<td>Junso</td>
			<td>JS-307</td>
			<td>For the measurement of explorative activities of mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sucrose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S9378</td>
			<td>For cryoprotection of tissue sections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>terbutaline hemisulfate salt</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T2528</td>
			<td>Make 10X stock</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>video camera (CCD camera)</td>
			<td>Vision</td>
			<td>VCE56HQ-12</td>
			<td>Place the camera directly overhead of the open field box</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>xylazine (Rompun)</td>
			<td>Bayer korea</td>
			<td>KR10381</td>
			<td>Use to anesthetize the mouse for transcardial perfusion</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>xylene</td>
			<td>Duksan</td>
			<td>UN1307</td>
			<td>For Cresyl violet staining</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessment of memory function in pilocarpine-induced epileptic mice

Когнитивные нарушения является одним из наиболее распространенных сопутствующих больных височной доли эпилепсии. Чтобы резюмировать эпилепсии связанных когнитивных снижение в животных модели эпилепсии, мы создали пилокарпин лечения хронических эпилептических мышей. Мы представляем протокол для трех различных поведенческих тестов с использованием этих эпилептических мышей: местоположение новых объектов (NL), распознавание новых объектов (NO) и тесты разделения шаблонов (PS) для оценки обучения и памяти мест, объектов и контекстов, соответственно. Мы объясняем, как установить поведенческий аппарат и обеспечить экспериментальные процедуры для NL, NO, и PS испытаний после открытого полевого теста, который измеряет животных базальной локомотивной деятельности. Мы также описываем технические преимущества тестов NL, NO и PS в отношении других поведенческих тестов для оценки функции памяти у эпилептических мышей. Наконец, мы обсуждаем возможные причины и решения для эпилептических мышей не в состоянии сделать 30 с хорошим контактом с объектами во время ознакомления сессий, что является критическим шагом для успешных тестов памяти. Таким образом, этот протокол содержит подробную информацию о том, как оценить связанные с эпилепсией нарушения памяти с использованием мышей. Тесты NL, NO и PS являются простыми, эффективными анализами, которые подходят для оценки различных видов памяти у эпилептических мышей.

Общий экспериментальный график и настройка для оценки когнитивных функций показаны на рисунке 1. Через шесть недель после введения пилокарпинов индуцированных острых припадков, мышей были подвергнуты NL, NO, и PS испытаний в этом порядке разделены на 3 дневных периодов отд...

Watch this Scientific Journal Video about Assessment of Memory Function in Pilocarpine-induced Epileptic Mice at JoVE.com

Assessment of Memory Function in Pilocarpine-induced Epileptic Mice

В этой статье представлены экспериментальные процедуры для оценки нарушений памяти у эпилептических мышей, вызванных пилокарпинами. Этот протокол может быть использован для изучения патофизиологических механизмов эпилепсии связанных когнитивных снижение, которое является одним из наиболее распространенных сопутствующих заболеваний при эпилепсии.

Оценка функции памяти у эпилептических мышей, вызванных пилокарпинами

Cognitive impairment is one of the most common comorbidities in temporal lobe epilepsy. To recapitulate epilepsy-associated cognitive decline in an animal ...

assessment-of-memory-function-in-pilocarpine-induced-epileptic-mice

Research

JoVE Journal

Behavior

8.1K Views.  The Catholic University of Korea. Cognitive impairment is one of the most common co-morbidities in temporal lobe epilepsy. We will present a protocol describing how to assess memory impairment using a mouse model of chronic epilepsy. Novel object location, novel object recognition and pattern separation test are simple and short asses that can minimally stress the animals.It makes this test optimal for evaluating memory function in epileptic mice, without additional triggers for a spontaneous recurrent seizures. To beg...