Name: growth of human and sheep corneal endothelial cell layers on biomaterial membranes
Uploaded: 2020-02-06T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Growth of Human and Sheep Corneal Endothelial Cell Layers on Biomaterial Membranes at JoVE.com

Met dank aan Noémie Gallorini voor haar hulp bij de voorbereiding van figuur 7. Dit werk werd ondersteund door een project subsidie toegekend aan DH door de National Health and Medical Research Council of Australia (Project Grant 1099922), en door aanvullende financiering ontvangen van de Queensland Eye Institute Foundation.

Menselijke hoornvliezen met donortoestemming voor onderzoek werden verkregen van de Queensland Eye Bank en gebruikt met ethische goedkeuring van de Metro South Hospital en Health Service's Human Research Ethics Committee (HREC/07/QPAH/048). Schapen hoornvliezen werden verkregen uit geëuthanaseerde dieren op de Herston Medical Research Facility van de Universiteit van Queensland onder een weefsel delen overeenkomst.
1. Bereiding van hulpmiddelen voor ontleding
<ol><li>Steriliseren twee paar ...

<ol>
	<li>G&#252;ell, J. L., El Husseiny, M. A., Manero, F., Gris, O., Elies, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Historical+Review+and+Update+of+Surgical+Treatment+for+Corneal+Endothelial+Diseases.">Historical Review and Update of Surgical Treatment for Corneal Endothelial Diseases.</a> Ophthalmology and Therapy. 3, 1-15 (2014).</li><li>Tan, D. T. H., Dart, J. K. G., Holland, E. J., Kinoshita, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+transplantation.">Corneal transplantation.</a> The Lancet. 379 (9827), 1749-1761 (2012).</li><li>Soh, Y. Q., Peh, G. S. L., Mehta, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translational+issues+for+human+corneal+endothelial+tissue+engineering.">Translational issues for human corneal endothelial tissue engineering.</a> Journal of Tissue Engineering and Regnerative Medicine. 11 (9), 2425-2442 (2017).</li><li>Senoo, T., Joyce, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+Cycle+Kinetics+in+Corneal+Endothelium+from+Old+and+Young+Donors.">Cell Cycle Kinetics in Corneal Endothelium from Old and Young Donors.</a> Investigative Ophthalmology, Visual Science. 41 (3), 660-667 (2000).</li><li>Roy, O., Leclerc, V. B., Bourget, J. M., Th&#233;riault, M., Proulx, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+the+process+of+corneal+endothelial+morphological+change+in+vitro.">Understanding the process of corneal endothelial morphological change in vitro.</a> Investigative Ophthalmology, Visual Science. 56, 1228-1237 (2015).</li><li>Harkin, D. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mounting+of+Biomaterials+for+Use+in+Ophthalmic+Cell+Therapies.">Mounting of Biomaterials for Use in Ophthalmic Cell Therapies.</a> Cell Transplantation. 26 (11), 1717-1732 (2017).</li><li>Trepat, X., Chen, Z., Jacobson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+migration.">Cell migration.</a> Comprehensive Physiology. 2 (4), 2369-2392 (2012).</li><li>Walshe, J., Harkin, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serial+explant+culture+provides+novel+insights+into+the+potential+location+and+phenotype+of+corneal+endothelial+progenitor+cells.">Serial explant culture provides novel insights into the potential location and phenotype of corneal endothelial progenitor cells.</a> Experimental Eye Research. 127, 9-13 (2014).</li><li>Al Abdulsalam, N. K., Barnett, N. L., Harkin, D. G., Walshe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cultivation+of+corneal+endothelial+cells+from+sheep.">Cultivation of corneal endothelial cells from sheep.</a> Experimental Eye Research. 173, 24-31 (2018).</li><li>Parekh, M., Ferrari, S., Sheridan, C., Kaye, S., Ahmad, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Concise+Review:+An+Update+on+the+Culture+of+Human+Corneal+Endothelial+Cells+for+Transplantation.">Concise Review: An Update on the Culture of Human Corneal Endothelial Cells for Transplantation.</a> Stem Cells Translational Medicine. 5 (2), 258-264 (2016).</li><li>Peh, G. S., Toh, K. P., Wu, F. Y., Tan, D. T., Mehta, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cultivation+of+human+corneal+endothelial+cells+isolated+from+paired+donor+corneas.">Cultivation of human corneal endothelial cells isolated from paired donor corneas.</a> PLoS One. 6 (12), 28310 (2011).</li></ol>

Een belangrijke technische uitdaging in verband met het opzetten en uitbreiden van menselijke hoornvlies endotheelcellen is het voorkomen van EMT optreden in de culturen. EMT kan worden geactiveerd in hoornvlies endotheelcellen door verlies van cel-op-cel contact, maar de meeste celkweek protocollen voor deze cellen te betrekken enzymatische dissociatie naar enkele cellen tijdens isolatie en subcultuur10. Hier presenteren we een alternatief celkweekprotocol voor hoornvliesendotheliale cellen dat h...

Het hoornvlies is een transparant weefsel dat zich aan de voorkant van het oog bevindt. Het bestaat uit drie grote lagen: een epitheellaag op het buitenoppervlak, een middelste stromalaag en een binnenste laag genaamd het hoornvliesendotheel. Het hoornvlies endothehelium is een monolaag van cellen die zit op een kelder membraan genaamd Descemet's membraan en het handhaaft de transparantie van het hoornvlies door het reguleren van de hoeveelheid vloeistof die de stroma van de onderliggende waterige humor. Te veel vocht in de stroma veroorzaakt hoornvlies zwelling, dekking en verlies van het gezichtsvermogen. Het endotheel is daarom van vitaal belang voor het behoud van visie.
Het hoornvlies endotheel kan disfunctioneel worden om een aantal redenen, waaronder veroudering, ziekte en letsel, en de enige huidige behandeling is transplantatie chirurgie. Tijdens deze operatie worden het endotheel en het membraan van Descemet uit het hoornvlies van de patiënt verwijderd en vervangen door een graft van endotheel en het membraan van Descemet verkregen uit een donorhoornvlies. Veel endotheelgrafts bevatten ook een dunne laag stromal weefsel om de behandeling en gehechtheid aan het gastheerhoornvlies te helpen1.
Wereldwijd is de vraag naar hoornvliesdonorweefsel voor transplantatieoperaties groter dan het bedrag dat door oogbanken kan worden geleverd2. Er is daarom een drive om weefsel-engineered hoornvlies endotheeltransplantaties die kunnen worden gebruikt om dit tekort te verlichten3ontwikkelen. De reden hiervoor is gebaseerd op het feit dat momenteel, endotheel van een individueel hoornvlies kan alleen worden overgedragen aan een enkele patiënt, echter, als het hoornvlies endotheel cellen werden voor het eerst uitgebreid en geteeld op biomateriële steigers in weefselcultuur, ze kunnen worden gebruikt om meerdere patiënten te behandelen.
Grote uitdagingen die moeten worden aangepakt voordat weefsel-engineered hoornvlies endotheeltransplantaties een haalbare optie voor chirurgen worden: (1) het vaststellen van technieken voor het uitbreiden van hoornvlies endotheelcellen van hoge kwaliteit en voor het produceren van volwassen en functionele hoornvlies endotheel cellagen in vitro, en (2) het vaststellen van technieken voor het kweken van de cellen op biomateriële steigers om weefsel-engineered grafts die gelijk zijn aan, of beter dan, de donor hoornvlies-afgeleide grafts die momenteel worden gebruikt te produceren.
Hoornvliesendotheliale cellen hebben een zeer laag proliferative potentieel in vivo, maar kunnen worden gestimuleerd om in vitro te verdelen4. Niettemin hebben ze een sterke neiging om in vitro epitheel-naar-mesenchymale overgang (EMT) te ondergaan, wat hun vermogen om een volwassen, functionele endotheellaag te vormen vermindert. Bekende triggers voor EMT in hoornvlies endotheelcellen zijn blootstelling aan bepaalde groeifactoren en verlies van cel-op-cel contact5. Het is dus bijna onvermijdelijk dat hoornvliesendotheliale celculturen die enzymatisch gescheiden zijn tijdens de subcultuur veranderingen zullen ondergaan die verband houden met EMT. Hier presenteren we een celkweekmethode voor menselijke of schapen hoornvliesendotheliale cellen die is ontworpen om verstoring van cel-cel-celcontacten tijdens isolatie-, expansie- en subcultuurfasen te minimaliseren, om het potentieel voor EMT te verminderen. Bovendien tonen we aan hoe weefsel-engineered grafts die lijken op donor hoornvlies-afgeleide endotheel / Descemet's membraan / stromal weefsel grafts kunnen worden geproduceerd door groeiende gekweekte cellagen aan beide zijden van een bio-materiaal membraan in een op maat gemaakte montage-apparaat.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Attachment factor</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>S006100</td>
			<td>A 1X sterile solution containing gelatin that is used to coat tissue culture surfaces. Store at 4 &#176;C.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine pituitary extract</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>13028014</td>
			<td>A single vial contains 25 mg. Freeze in aliquots.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride</td>
			<td>Merck</td>
			<td>C5670</td>
			<td>Dissolve in HBSS to make a 1 mM stock solution. Filter sterilise.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tube, 50 ml</td>
			<td>Labtek</td>
			<td>650.550.050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chondroitin sulphate</td>
			<td>LKT Laboratories</td>
			<td>C2960</td>
			<td>This is bovine chondroitin sulphate. Dissolve in HBSS to make a 0.08 g/mL stock solution. Filter sterilise and freeze in aliquots.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dispase II</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17105-041</td>
			<td>Dissolve in DPBS to make a 2 mg/mL stock solution. Filter sterilise and freeze in aliquots.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Labtek</td>
			<td>EA043</td>
			<td>100% undenatured ethanol should be diluted to 70% in deionised water for sterilising instruments and surfaces.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foetal bovine serum</td>
			<td>GE Healthcare Australia Pty Ltd</td>
			<td>SH30084.03</td>
			<td>This is a HyClone brand of foetal bovine serum.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverglass No. 1, &#216; 13 mm</td>
			<td>Proscitech</td>
			<td>G401-13</td>
			<td>Place sterilised cover slips into 24-well plates for tissue culture.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14025-092</td>
			<td>Hank&#39;s balanced salt solution, 1X, containing calcium chloride and magnesium chloride.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-ascorbic acid 2-phosphate</td>
			<td>Merck</td>
			<td>A8960</td>
			<td>Dissolve in HBSS to make a 150 mM stock solution. Filter sterilise.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Boyden chamber</td>
			<td>CNC Components Pty. Ltd.</td>
			<td>Upper ring: QUT-0002-0006, Base ring: QUT-0002-0007</td>
			<td>Both components are made from polytetrafluoroethelyne (PTFE).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O-ring for micro-Boyden chamber</td>
			<td>Ludowici Sealing Solutions</td>
			<td>RSB012</td>
			<td>Composed of silicon rubber.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opti-MEM 1 (1X) + GlutaMAX-1</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>51985-034</td>
			<td>A reduced serum medium containing glutamine.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14190-144</td>
			<td>Dulbecco&#39;s phosphate buffered saline, 1X, without calcium chloride and magnesium chloride.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pen Strep</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td>A 100X antibiotic solution containing 10,000 Units/mL penicillin and 10,000 &#181;g/mL streptomycin.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>82.14473.001</td>
			<td>Sterile Petri dish, 92 X 16 mm, for tissue dissections.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture plate, 24 well</td>
			<td>Corning Incorporated</td>
			<td>Costar 3524</td>
			<td>A plate containing 24 wells, each with a surface area of 2 cm2.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture plate, 6 well</td>
			<td>Corning Incorporated</td>
			<td>Costar 3516</td>
			<td>A plate containing 6 wells, each with a surface area of 9 cm2.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TrypLE Select</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12563-011</td>
			<td>A 1X enzyme solution for dissociating cells.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Versene</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15040-066</td>
			<td>A 1X EDTA solution for dissociating cells.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Watchmaker forceps</td>
			<td>Labtek</td>
			<td>BWMF4</td>
			<td>Number 4 watchmaker forceps work well for removing strips of endothelium/Descemet&#39;s membrane from corneas.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

growth of human and sheep corneal endothelial cell layers on biomaterial membranes

Hoornvlies endotheelcelculturen hebben de neiging om epitheel-naar-mesenchymale overgang (EMT) te ondergaan na verlies van cel-op-cel contact. EMT is schadelijk voor de cellen omdat het hun vermogen om een volwassen en functionele laag te vormen vermindert. Hier presenteren we een methode voor het vaststellen en subcultureren van menselijke en schapen hoornvlies endotheliale celculturen die het verlies van cel-op-cel contact minimaliseert. Explants van hoornvlies endothehelium / Descemet's membraan worden genomen uit donorhoornvliezen en geplaatst in weefselcultuur onder omstandigheden die het mogelijk maken de cellen collectief migreren naar het cultuuroppervlak. Zodra een cultuur is vastgesteld, worden de explants overgebracht naar verse platen om nieuwe culturen te initiëren. Dispase II wordt gebruikt om klontjes cellen voorzichtig van weefselkweekplaten te tillen voor subculturing. Hoornvlies endotheelcelculturen die met dit protocol zijn vastgesteld, zijn geschikt voor de overdracht naar biomateriële membranen om weefsel-gemanipuleerde cellagen te produceren voor transplantatie in dierproeven. Een op maat gemaakt apparaat voor de ondersteuning van biomateriële membranen tijdens weefselkweek wordt beschreven en een voorbeeld van een weefsel-engineered graft samengesteld uit een laag hoornvlies endotheelcellen en een laag hoornvlies stromal cellen aan weerszijden van een collageen type I membraan wordt gepresenteerd.

De methode voor het isoleren en uitbreiden van hoornvliescellen van menselijke of schapenhoornvliezen wordt samengevat in figuur 1 en figuur 2. De meeste explants die zijn afgeleid van de hoornvliezen van 1 tot 2-jarige schapen of menselijke donoren van minder dan 30 jaar oud zal hechten aan Attachment Factor-gecoate weefsel kweekplaten binnen een week, echter, is het niet ongebruikelijk om te vinden dat tot een derde van de explants niet hechten binnen deze tij...

Watch this Scientific Journal Video about Growth of Human and Sheep Corneal Endothelial Cell Layers on Biomaterial Membranes at JoVE.com

Growth of Human and Sheep Corneal Endothelial Cell Layers on Biomaterial Membranes

Dit protocol beschrijft de kritieke stappen die nodig zijn om hoornvliesendotheliale celculturen uit explants van menselijk of schapenweefsel vast te stellen en te kweken. Er wordt ook een methode gepresenteerd voor het subculturen van hoornvliescellen op membranous biomaterialen.

Groei van menselijke en schapen hoornvlies endotheliale cellagen op biomateriële membranen

Corneal endothelial cell cultures have a tendency to undergo epithelial-to-mesenchymal transition (EMT) after loss of cell-to-cell contact. EMT is ...

Dit celcultuurprotocol is ontworpen om te voorkomen dat hoornvlies endotheelcellen epitheliale naar mesenchymale overgang ondergaan tijdens isolatie, expansie en subcultuur. Celculturen worden vastgesteld uit hoornvliesweefsel explants, die kunnen worden hergebruikt om een voortdurende levering van primaire cellen van een donor te garanderen. Begin met het coaten van de putten van een zes-goed weefsel kweekplaat met gehechtheid factor met behulp van de instructies van de fabrikant.Voeg vervolgens een milliliter cultuurmedium toe aan elke gecodeerde put. Plaats het hoornvlies endotheel kant omhoog in een steriel petrischaaltje op het podium van een ontledende microscoop. Pas de verlichting zo aan dat het hoornvliesoppervlak goed verlicht is met voldoende contrast om de endotheellaag te markeren en pas de zoom zo aan dat de rand en een centraal hoornvlies endotheel in beeld zijn.Gebruik gesteriliseerde horlogemaker tangen om het membraan van Descemet voorzichtig op te tillen en te scheuren uit de buurt van de onderliggende stroma. Plaats de membraanstrook in een van de bereide putten van de kweekplaat, zorg ervoor dat u het deksel van de plaat onmiddellijk vervangt om het risico op besmetting te verminderen. Verwijder eerst de stroken van het membraan van Descemet uit de extreme periferie van het endotheel, en later uit de centrale gebieden, waarbij alle stroken van één hoornvlies in één put worden verwijderd.Wanneer voltooid, inculbateren van de explants in een bevochtigde cel cultuur incubator ingesteld op 37 graden Celsius en 5% kooldioxide. Monteer de bovenste kamer van de micro Boyden kamer door het plaatsen van een rode O ring in het midden. Gebruik een trephine met een diameter van 18 millimeter om een schijf van een biomateriaalplaat op een PTFE snijplank te ponsen.Plaats vervolgens de schijf over de rode O-ring in de bovenste kamer van de micro-boydenkamer. Schroef de onderste kamer op de bovenste kamer en beveilig de schijf van het biomateriaal ertussen. En week de geassembleerde micro Boyden kamer in 70% ethanol voor een uur om het te steriliseren.Na het weken, volledig onderdompelen in steriele HBSS gedurende 10 minuten om de ethanol te verwijderen. Was vervolgens de kamer in cultuurmedium gedurende 10 minuten. En overdracht naar cultuurmedium in een put van een zes-put plaat, ervoor te zorgen dat de bovenste kamer is naar boven georiënteerd.Pas het niveau van het medium zo aan dat het contact maakt met het onderste oppervlak van het biomateriaalmembraan, maar niet in de bovenste kamer stroomt. Pipette 100 microliters van celsuspensie op het membraan in de micro Boyden kamer, en uitbroeden in de weefselkweek incubator voor vier uur, alvorens het toevoegen van medium om volledig onder te dompelen de kamer. De meeste explants die werden afgeleid uit de hoornvliezen van een tot twee jaar oude schapen of menselijke donoren van minder dan 30 jaar oud verbonden aan gehechtheid factor gecodeerde weefselkweek platen binnen een week.Na zes weken waren er veel kleine, strak verpakte cellen aanwezig naast de explant. Kleine, strak verpakte cellen in de hoornvlies endotheelcelculturen zijn bestand tegen vertering met drievoudige, terwijl de grotere fibblastic cellen er gevoeliger voor zijn. Dit verschil werd benut om selectief grote cellen uit de culturen te verwijderen alvorens de kleinere cellen naar nieuwe platen over te brengen.Immunole bloemscentie analyses werden uitgevoerd op hoornvlies endotheel celculturen om ZO-1 te lokaliseren, een strak knooppunt eiwit, en N-cadherine, een hechting knooppunt eiwit. Dezelfde antilichamen werden gebruikt voor zowel schapen als menselijke cellen, en beide eiwitten werden gedetecteerd in de plasmamembranen van cellen van beide soorten. De op maat gemaakte micro Boyden kamer stond toe dat beide zijden van een membraan tegelijkertijd als celkweekoppervlakken konden worden gebruikt.Een dwarsdoorsnede weergave van een weefsel ontworpen cel constructie toont een enkele laag van hoornvlies endotheelcellen op een oppervlak, en een meerlaagse cultuur van hoornvlies stromal cellen op de andere. Bij het proberen van dit protocol, is het belangrijk om te voorkomen dat schrapen het endotheel met je tangen als je peeling Descemet membraan uit de buurt van het hoornvlies. Na deze procedure kan de integriteit van een hoornvlies endotheelcellaag op een membraan worden gecontroleerd door de elektrische weerstand te meten.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

On-Chip Endothelial Inflammatory Phenotyping

On-Chip Endotheliale Inflammatoire Fenotypering

Atherogenesis is potentiated by metabolic abnormalities that contribute to a heightened state of systemic inflammation resulting in endothelial ...

Mass Cytometry: Protocol for Daily Tuning and Running Cell Samples on a CyTOF Mass Cytometer

Massa Cytometry: Protocol voor dagelijks Tuning en Running Cell Samples op een CyTOF Mass Cytometer

In recent years, the rapid analysis of single cells has commonly been performed using flow cytometry and fluorescently-labeled antibodies. However, the ...

Combination of Microstereolithography and Electrospinning to Produce Membranes Equipped with Niches for Corneal Regeneration

Combinatie van Microstereolithography en Electrospinning naar Membranen Uitgerust met Niches voor cornearegeneratie Produce

Corneal problems affect millions of people worldwide reducing their quality of life significantly. Corneal disease can be caused by illnesses such as ...

From Fast Fluorescence Imaging to Molecular Diffusion Law on Live Cell Membranes in a Commercial Microscope

Van Fast Fluorescentie Imaging om moleculaire diffusie wet op de Live-celmembranen in een Commercial Microscoop

It has become increasingly evident that the spatial distribution and the motion of membrane components like lipids and proteins are key factors in the ...

Ferromagnetic Bare Metal Stent for Endothelial Cell Capture and Retention

Ferromagnetische Bare Metal Stent voor endotheelcellen Capture and Retention

Rapid endothelialization of cardiovascular stents is needed to reduce stent thrombosis and to avoid anti-platelet therapy which can reduce bleeding risk. ...

Characterization of Leukocyte-platelet Rich Fibrin, A Novel Biomaterial

Karakterisering van Leukocyte bloedplaatjes Rich fibrine, A Novel Biomateriaal

Autologous platelet concentrates represent promising innovative tools in the field of regenerative medicine and have been extensively used in oral ...

Rapid Subtractive Patterning of Live Cell Layers with a Microfluidic Probe

Rapid Subtractieve patroonvorming van Live-Cell Lagen met een microfluïdische Probe

The microfluidic probe (MFP) facilitates performing local chemistry on biological substrates by confining nanoliter volumes of liquids. Using one ...

Co-transplantation of Human Ovarian Tissue with Engineered Endothelial Cells: A Cell-based Strategy Combining Accelerated Perfusion with Direct Paracrine Delivery

Co transplantatie van menselijke eierstokweefsel met gemanipuleerde endotheliale cellen: een combinatie van cel-gebaseerde strategie versneld perfusie met directe Paracrine levering

Infertility is a frequent side effect of chemotherapy and/or radiotherapy and for some patients, cryopreservation of oocytes or embryos is not an option. ...

A Macrophage Reporter Cell Assay to Examine Toll-Like Receptor-Mediated NF-kB/AP-1 Signaling on Adsorbed Protein Layers on Polymeric Surfaces

Een macrophage reporter Celassay om Tolachtige receptor-gemedieerde NF-kB/AP-1-signalering op geadsorbeerde proteïne lagen op polymere oppervlakken te onderzoeken

The persistent inflammatory host response to an implanted biomaterial, known as the foreign body reaction, is a significant challenge in the development ...