Name: growth of human and sheep corneal endothelial cell layers on biomaterial membranes
Uploaded: 2020-02-06T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Growth of Human and Sheep Corneal Endothelial Cell Layers on Biomaterial Membranes at JoVE.com

Merci à Noémie Gallorini pour son aide lors de la préparation de la Figure 7. Ces travaux ont été soutenus par une subvention de projet accordée à La DH par le National Health and Medical Research Council of Australia (Project Grant 1099922), et par un financement supplémentaire reçu de la Queensland Eye Institute Foundation.

Des cornées humaines avec le consentement des donateurs pour la recherche ont été obtenues de la Queensland Eye Bank et utilisées avec l’approbation éthique du Comité d’éthique de la recherche humaine du Metro South Hospital and Health Service (HREC/07/QPAH/048). Des cornées de mouton ont été obtenues des animaux euthanasiés au centre médical de recherche de Herston de l’université du Queensland en vertu d’un accord de partage de tissu.
1. Préparation d’outils de dissecti...

<ol>
	<li>G&#252;ell, J. L., El Husseiny, M. A., Manero, F., Gris, O., Elies, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Historical+Review+and+Update+of+Surgical+Treatment+for+Corneal+Endothelial+Diseases.">Historical Review and Update of Surgical Treatment for Corneal Endothelial Diseases.</a> Ophthalmology and Therapy. 3, 1-15 (2014).</li><li>Tan, D. T. H., Dart, J. K. G., Holland, E. J., Kinoshita, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+transplantation.">Corneal transplantation.</a> The Lancet. 379 (9827), 1749-1761 (2012).</li><li>Soh, Y. Q., Peh, G. S. L., Mehta, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translational+issues+for+human+corneal+endothelial+tissue+engineering.">Translational issues for human corneal endothelial tissue engineering.</a> Journal of Tissue Engineering and Regnerative Medicine. 11 (9), 2425-2442 (2017).</li><li>Senoo, T., Joyce, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+Cycle+Kinetics+in+Corneal+Endothelium+from+Old+and+Young+Donors.">Cell Cycle Kinetics in Corneal Endothelium from Old and Young Donors.</a> Investigative Ophthalmology, Visual Science. 41 (3), 660-667 (2000).</li><li>Roy, O., Leclerc, V. B., Bourget, J. M., Th&#233;riault, M., Proulx, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+the+process+of+corneal+endothelial+morphological+change+in+vitro.">Understanding the process of corneal endothelial morphological change in vitro.</a> Investigative Ophthalmology, Visual Science. 56, 1228-1237 (2015).</li><li>Harkin, D. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mounting+of+Biomaterials+for+Use+in+Ophthalmic+Cell+Therapies.">Mounting of Biomaterials for Use in Ophthalmic Cell Therapies.</a> Cell Transplantation. 26 (11), 1717-1732 (2017).</li><li>Trepat, X., Chen, Z., Jacobson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+migration.">Cell migration.</a> Comprehensive Physiology. 2 (4), 2369-2392 (2012).</li><li>Walshe, J., Harkin, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serial+explant+culture+provides+novel+insights+into+the+potential+location+and+phenotype+of+corneal+endothelial+progenitor+cells.">Serial explant culture provides novel insights into the potential location and phenotype of corneal endothelial progenitor cells.</a> Experimental Eye Research. 127, 9-13 (2014).</li><li>Al Abdulsalam, N. K., Barnett, N. L., Harkin, D. G., Walshe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cultivation+of+corneal+endothelial+cells+from+sheep.">Cultivation of corneal endothelial cells from sheep.</a> Experimental Eye Research. 173, 24-31 (2018).</li><li>Parekh, M., Ferrari, S., Sheridan, C., Kaye, S., Ahmad, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Concise+Review:+An+Update+on+the+Culture+of+Human+Corneal+Endothelial+Cells+for+Transplantation.">Concise Review: An Update on the Culture of Human Corneal Endothelial Cells for Transplantation.</a> Stem Cells Translational Medicine. 5 (2), 258-264 (2016).</li><li>Peh, G. S., Toh, K. P., Wu, F. Y., Tan, D. T., Mehta, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cultivation+of+human+corneal+endothelial+cells+isolated+from+paired+donor+corneas.">Cultivation of human corneal endothelial cells isolated from paired donor corneas.</a> PLoS One. 6 (12), 28310 (2011).</li></ol>

Un défi technique important lié à l’établissement et à l’expansion des cellules endothéliales cornéennes humaines empêche l’EMT de se produire dans les cultures. L’EMT peut être déclenchée dans les cellules endothéliales cornéennes par la perte du contact cellule-cellule, pourtant la plupart des protocoles de culture cellulaire pour ces cellules impliquent la dissociation enzymatique aux cellules simples pendant l’isolement et la sous-culture10. Ici nous présentons un proto...

La cornée est un tissu transparent qui est situé à l’avant de l’œil. Il est composé de trois couches principales : une couche épithéliale sur la surface extérieure, une couche de stroma moyenne, et une couche intérieure appelée l’endothélium cornéen. L’endothélium cornéen est une monocouche de cellules qui se trouve sur une membrane de sous-sol appelée membrane de Descemet et il maintient la transparence de la cornée en régulant la quantité de liquide qui pénètre dans le stroma de l’humour aqueux sous-jacent. Trop de liquide dans le stroma provoque un gonflement cornéen, l’opacité et la perte de vision. L’endothélium est donc essentiel pour maintenir la vision.
L’endothélium cornéen peut devenir dysfonctionnel pour un certain nombre de raisons, y compris le vieillissement, la maladie et les blessures, et le seul traitement actuel est la chirurgie de transplantation. Pendant cette chirurgie, l’endothélium et la membrane de Descemet sont enlevés de la cornée du patient et remplacés par une greffe de l’endothélium et de la membrane de Descemet obtenues d’une cornée de distributeur. Beaucoup de greffes d’endothélium contiennent également une fine couche de tissu stromal pour faciliter la manipulation et l’attachement à la cornée hôte1.
Dans le monde entier, la demande de tissus de donneurs cornéens pour les chirurgies de transplantation est supérieure à la quantité qui peut être fournie par les banques oculaires2. Il y a donc eu une volonté de développer des greffes d’endothélium cornéen tissulaire qui pourraient être utilisées pour pallier ce manque à gagner3. La raison d’être de ceci est basée sur le fait qu’actuellement, l’endothélium d’une cornée individuelle ne peut être transféré à un seul patient, cependant, si les cellules endothéliales cornéennes ont été d’abord étendues et cultivées sur des échafaudages de biomatériaux dans la culture de tissu, elles pourraient être employées pour traiter plusieurs patients.
Les principaux défis qui doivent être relevés avant que les greffes d’endothélium cornéen tissulal deviennent une option réalisable pour les chirurgiens comprennent: (1) l’établissement de techniques pour l’expansion des cellules endothéliales cornéennes de haute qualité et pour la production de maturité et couches endothéliales endothéliales cornées fonctionnelles in vitro, et (2) établissant des techniques pour cultiver les cellules sur des échafaudages de biomatériaux pour produire des greffes tissulaires qui sont égales, ou meilleures que, les greffes cornées de donneur qui sont actuellement employées.
Les cellules endothéliales cornéennes ont un très faible potentiel de prolifération in vivo, mais peuvent être stimulées pour diviser in vitro4. Néanmoins, ils ont une forte tendance à subir une transition épithéliale-mésenchymale in vitro (EMT), ce qui réduit leur capacité à former une couche endothéliale fonctionnelle et mature. Les déclencheurs connus de l’EMT dans les cellules endothéliales cornéennes comprennent l’exposition à certains facteurs de croissance et la perte de contact cellule-cellule5. Il est donc presque inévitable que les cultures endothéliales endothéliales cornéennes qui sont enzymatiquement dissociées pendant la sous-culture subiront des changements associés à l’EMT. Ici, nous présentons une méthode de culture cellulaire pour les cellules endothéliales cornéennes humaines ou brebis qui est conçue pour minimiser la perturbation des contacts de cellule à cellule pendant les étapes d’isolement, d’expansion et de sous-culture, afin de réduire le potentiel d’EMT. En outre, nous démontrons comment les greffes tissulaires qui ressemblent à l’endothélium/greffes de tissu stromal de la cornée dérivée de la cornée de donneur peuvent être produites en cultivant des couches de cellules cultivées des deux côtés d’une membrane de biomatériau dans un dispositif de montage fait sur mesure.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Attachment factor</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>S006100</td>
			<td>A 1X sterile solution containing gelatin that is used to coat tissue culture surfaces. Store at 4 &#176;C.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine pituitary extract</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>13028014</td>
			<td>A single vial contains 25 mg. Freeze in aliquots.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride</td>
			<td>Merck</td>
			<td>C5670</td>
			<td>Dissolve in HBSS to make a 1 mM stock solution. Filter sterilise.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tube, 50 ml</td>
			<td>Labtek</td>
			<td>650.550.050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chondroitin sulphate</td>
			<td>LKT Laboratories</td>
			<td>C2960</td>
			<td>This is bovine chondroitin sulphate. Dissolve in HBSS to make a 0.08 g/mL stock solution. Filter sterilise and freeze in aliquots.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dispase II</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17105-041</td>
			<td>Dissolve in DPBS to make a 2 mg/mL stock solution. Filter sterilise and freeze in aliquots.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Labtek</td>
			<td>EA043</td>
			<td>100% undenatured ethanol should be diluted to 70% in deionised water for sterilising instruments and surfaces.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foetal bovine serum</td>
			<td>GE Healthcare Australia Pty Ltd</td>
			<td>SH30084.03</td>
			<td>This is a HyClone brand of foetal bovine serum.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverglass No. 1, &#216; 13 mm</td>
			<td>Proscitech</td>
			<td>G401-13</td>
			<td>Place sterilised cover slips into 24-well plates for tissue culture.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14025-092</td>
			<td>Hank&#39;s balanced salt solution, 1X, containing calcium chloride and magnesium chloride.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-ascorbic acid 2-phosphate</td>
			<td>Merck</td>
			<td>A8960</td>
			<td>Dissolve in HBSS to make a 150 mM stock solution. Filter sterilise.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Boyden chamber</td>
			<td>CNC Components Pty. Ltd.</td>
			<td>Upper ring: QUT-0002-0006, Base ring: QUT-0002-0007</td>
			<td>Both components are made from polytetrafluoroethelyne (PTFE).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O-ring for micro-Boyden chamber</td>
			<td>Ludowici Sealing Solutions</td>
			<td>RSB012</td>
			<td>Composed of silicon rubber.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opti-MEM 1 (1X) + GlutaMAX-1</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>51985-034</td>
			<td>A reduced serum medium containing glutamine.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14190-144</td>
			<td>Dulbecco&#39;s phosphate buffered saline, 1X, without calcium chloride and magnesium chloride.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pen Strep</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td>A 100X antibiotic solution containing 10,000 Units/mL penicillin and 10,000 &#181;g/mL streptomycin.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>82.14473.001</td>
			<td>Sterile Petri dish, 92 X 16 mm, for tissue dissections.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture plate, 24 well</td>
			<td>Corning Incorporated</td>
			<td>Costar 3524</td>
			<td>A plate containing 24 wells, each with a surface area of 2 cm2.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture plate, 6 well</td>
			<td>Corning Incorporated</td>
			<td>Costar 3516</td>
			<td>A plate containing 6 wells, each with a surface area of 9 cm2.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TrypLE Select</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12563-011</td>
			<td>A 1X enzyme solution for dissociating cells.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Versene</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15040-066</td>
			<td>A 1X EDTA solution for dissociating cells.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Watchmaker forceps</td>
			<td>Labtek</td>
			<td>BWMF4</td>
			<td>Number 4 watchmaker forceps work well for removing strips of endothelium/Descemet&#39;s membrane from corneas.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

growth of human and sheep corneal endothelial cell layers on biomaterial membranes

Les cultures épithéliales de cellules endothéliales cornéennes ont tendance à subir la transition épithéliale-à-mesenchymal (EMT) après perte du contact de cellule-à-cellule. EMT est délétère pour les cellules car il réduit leur capacité à former une couche mature et fonctionnelle. Ici, nous présentons une méthode pour établir et subculper les cultures endothéliales endotales cornées humaines et breturantes qui minimisent la perte de contact de cellule à cellule. Les explants de l’endothélium cornéen/de la membrane de Descemet sont prélevés sur des cornées donneuses et placés dans la culture tissulaire dans des conditions qui permettent aux cellules de migrer collectivement sur la surface de la culture. Une fois qu’une culture a été établie, les explantations sont transférées dans des assiettes fraîches pour initier de nouvelles cultures. Dispase II est utilisé pour soulever doucement des amas de cellules des plaques de culture tissulaire pour la subculturing. Les cultures de cellules endothéliales cornéennes qui ont été établies en utilisant ce protocole sont appropriées pour le transfert aux membranes de biomatériaux pour produire des couches cellulaires tissulaires pour la transplantation dans les essais sur les animaux. Un dispositif fait sur mesure pour soutenir des membranes de biomatériau pendant la culture de tissu est décrit et un exemple d’une greffe tissulaire-engineered composée d’une couche des cellules endothéliales cornéennes et d’une couche des cellules stromal cornéennes de chaque côté d’une membrane de type de collagène I est présentée.

La méthode d’isoler et d’élargir les cellules endothéliales cornéennes des cornées humaines ou brebis est résumée dans la figure 1 et la figure 2. La plupart des explants qui sont dérivés des cornées de moutons de 1 à 2 ans ou de donneurs humains de moins de 30 ans se fixent aux plaques de culture tissulaire enduites de facteur d’attachement dans une semaine, cependant, il n’est pas rare de constater que jusqu’à un tiers des explants ne se ...

Watch this Scientific Journal Video about Growth of Human and Sheep Corneal Endothelial Cell Layers on Biomaterial Membranes at JoVE.com

Growth of Human and Sheep Corneal Endothelial Cell Layers on Biomaterial Membranes

Ce protocole décrit les étapes critiques nécessaires pour établir et cultiver les cultures endothéliales cornéennes de cellules des explants des tissus humains ou de mouton. Une méthode pour subculturing cellules endothéliales cornéennes sur les biomatériaux membranaires est également présentée.

Croissance des couches cellulaires endothéliales coréennes humaines et brebis sur les membranes biomatériaux

Corneal endothelial cell cultures have a tendency to undergo epithelial-to-mesenchymal transition (EMT) after loss of cell-to-cell contact. EMT is ...

Ce protocole de culture cellulaire est conçu pour empêcher les cellules endothéliales cornéeles de subir une transition épithéliale à mésenchymale pendant l’isolement, l’expansion et la sous-culture. Les cultures cellulaires sont établies à partir d’explantations de tissus cornéens, qui peuvent être réutilisées pour assurer un approvisionnement continu en cellules primaires à partir d’un donneur. Commencez par enduire les puits d’une plaque de culture tissulaire de six puits avec le facteur d’attachement en utilisant les instructions du fabricant.Ajoutez ensuite un millilitre de milieu de culture à chaque bien codé. Placer le côté endothélium de la cornée vers le haut dans une boîte de Pétri stérile sur la scène d’un microscope disséquant. Ajustez l’éclairage de sorte que la surface cornéenne soit bien éclairée avec un contraste suffisant pour mettre en évidence la couche endothéliale, et ajustez le zoom de sorte que le bord et un certain endothélium cornéen central est en vue.Utilisez des forceps d’horlogers stérilisés pour soulever et arracher doucement la membrane de Descemet du stroma sous-jacent. Placez la bande membranaire dans l’un des puits préparés de la plaque de culture, en vous assurant de remplacer immédiatement le couvercle de la plaque afin de réduire le risque de contamination. Retirez d’abord les bandes de la membrane de Descemet de la périphérie extrême de l’endothélium, puis des régions centrales, en plaçant toutes les bandes d’une cornée dans un seul puits.Une fois terminé, incuber les explants dans un incubateur humidifié de culture cellulaire fixé à 37 degrés Celsius et 5% de dioxyde de carbone. Assembler la chambre haute de la chambre micro Boyden en plaçant un anneau rouge O dans son centre. Utilisez une tréphine de 18 millimètres de diamètre pour percer un disque à partir d’une feuille de biomatériau sur une planche à découper PTFE.Ensuite, placez le disque sur l’anneau rouge O dans la chambre haute de la chambre boyden micro. Vissez la chambre basse sur la chambre haute, en sécurisant le disque du matériau bio entre les deux. Et tremper la chambre micro Boyden assemblée dans 70% d’éthanol pendant une heure pour la stériliser.Après le trempage, plonger complètement la chambre dans le HBSS stérile pendant 10 minutes pour enlever l’éthanol. Ensuite, laver la chambre dans le milieu de la culture pendant 10 minutes. Et le transfert à la culture milieu à l’intérieur d’un puits d’une plaque de six puits, en s’assurant que la chambre haute est orientée vers le haut.Ajustez le niveau du milieu de sorte qu’il entre en contact avec la surface inférieure de la membrane biomatériale, mais ne s’écoule pas dans la chambre haute. Pipette 100 microlitres de suspension cellulaire sur la membrane dans la chambre micro Boyden, et l’incuber dans l’incubateur de culture tissulaire pendant quatre heures, avant d’ajouter moyen pour submerger complètement la chambre. La plupart des explants qui ont été dérivés des cornées d’un à deux ans moutons ou donneurs humains de moins de 30 ans attachés à des plaques de culture de tissu codé facteur d’attachement dans la semaine.Après six semaines, de nombreuses petites cellules serrées étaient présentes à côté de l’explant. Les petites cellules serrées dans les cultures cellulaires endothéliales cornéeles sont résistantes à la digestion avec triple, tandis que les plus grandes cellules fibroblastiques sont plus sensibles à elle. Cette différence a été exploitée pour éliminer sélectivement les grosses cellules des cultures avant de transférer les cellules plus petites vers de nouvelles plaques.Des analyses immunisées de flourescence ont été conduites sur des cultures endothéliales cornéennes de cellules pour localiser ZO-1, une protéine serrée de jonction, et N-cadherin, une protéine de jonction d’adhérence. Les mêmes anticorps ont été utilisés pour les cellules ovines et humaines, et les deux protéines ont été détectées dans les membranes plasmatiques des cellules des deux espèces. La chambre de micro Boyden sur mesure permettait aux deux côtés d’une membrane d’être utilisés simultanément comme surfaces de culture cellulaire.Une vue transversale d’une construction de cellule machinée de tissu montre une seule couche des cellules endothéliales cornéeles sur une surface, et une culture multicouche des cellules stromal cornéeles de l’autre. Lorsque vous essayez ce protocole, il est important d’éviter de racler l’endothélium avec vos forceps lorsque vous épluchez la membrane de Descemet loin de la cornée. Après cette procédure, l’intégrité d’une couche de cellules endothéliales cornéeennes sur une membrane peut être vérifiée en mesurant sa résistance électrique.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

On-Chip Endothelial Inflammatory Phenotyping

On-Chip phénotypage endothélium inflammatoire

Atherogenesis is potentiated by metabolic abnormalities that contribute to a heightened state of systemic inflammation resulting in endothelial ...

Recherche

Bio-ingénierie

Mass Cytometry: Protocol for Daily Tuning and Running Cell Samples on a CyTOF Mass Cytometer

Cytométrie de masse: Protocole pour Tuning quotidien et échantillons cellulaires course sur un cytomètre de masse CyTOF

In recent years, the rapid analysis of single cells has commonly been performed using flow cytometry and fluorescently-labeled antibodies. However, the ...

Combination of Microstereolithography and Electrospinning to Produce Membranes Equipped with Niches for Corneal Regeneration

Combinaison de Microstéréolithographie et Électrofilage à produire des membranes Equipé Niches pour la régénération de la cornée

Corneal problems affect millions of people worldwide reducing their quality of life significantly. Corneal disease can be caused by illnesses such as ...

From Fast Fluorescence Imaging to Molecular Diffusion Law on Live Cell Membranes in a Commercial Microscope

De Fluorescence Imaging rapide à moléculaire loi Diffusion sur les membranes cellulaires en direct dans un microscope commercial

It has become increasingly evident that the spatial distribution and the motion of membrane components like lipids and proteins are key factors in the ...

Ferromagnetic Bare Metal Stent for Endothelial Cell Capture and Retention

Ferromagnétique Bare Metal Stent pour endothéliale capture de cellules et de la conservation

Rapid endothelialization of cardiovascular stents is needed to reduce stent thrombosis and to avoid anti-platelet therapy which can reduce bleeding risk. ...

Characterization of Leukocyte-platelet Rich Fibrin, A Novel Biomaterial

Caractérisation de leuco-plaquettaire Rich fibrine, un roman biomatériaux

Autologous platelet concentrates represent promising innovative tools in the field of regenerative medicine and have been extensively used in oral ...

Rapid Subtractive Patterning of Live Cell Layers with a Microfluidic Probe

Modélisation soustractive rapide des couches de cellules vivantes avec une sonde microfluidique

The microfluidic probe (MFP) facilitates performing local chemistry on biological substrates by confining nanoliter volumes of liquids. Using one ...

Co-transplantation of Human Ovarian Tissue with Engineered Endothelial Cells: A Cell-based Strategy Combining Accelerated Perfusion with Direct Paracrine Delivery

Co transplantation de tissu ovarien humain avec des cellules endothéliales ingénieries : une combinaison de stratégie basés sur les cellules accéléré la Perfusion avec livraison directe Paracrine

Infertility is a frequent side effect of chemotherapy and/or radiotherapy and for some patients, cryopreservation of oocytes or embryos is not an option. ...

A Macrophage Reporter Cell Assay to Examine Toll-Like Receptor-Mediated NF-kB/AP-1 Signaling on Adsorbed Protein Layers on Polymeric Surfaces

The persistent inflammatory host response to an implanted biomaterial, known as the foreign body reaction, is a significant challenge in the development ...