Name: growth of human and sheep corneal endothelial cell layers on biomaterial membranes
Uploaded: 2020-02-06T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Growth of Human and Sheep Corneal Endothelial Cell Layers on Biomaterial Membranes at JoVE.com

Gracias a Noémie Gallorini por su ayuda durante la preparación de la Figura 7. Este trabajo fue apoyado por una subvención de proyecto otorgada a DH por el Consejo Nacional de Salud e Investigación Médica de Australia (Project Grant 1099922), y por fondos complementarios recibidos de la Queensland Eye Institute Foundation.

Las córneas humanas con el consentimiento de los donantes para la investigación se obtuvieron del Banco de Ojos de Queensland y se utilizaron con la aprobación ética del Comité de ética de investigación humana del Hospital Metro Sur y del Servicio de Salud (HREC/07/QPAH/048). Las córneas de oveja se obtuvieron de animales eutanasiados en el Centro de Investigación Médica de Herston de la Universidad de Queensland bajo un acuerdo de intercambio de tejidos.
1. Preparación de herramienta...

<ol>
	<li>G&#252;ell, J. L., El Husseiny, M. A., Manero, F., Gris, O., Elies, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Historical+Review+and+Update+of+Surgical+Treatment+for+Corneal+Endothelial+Diseases.">Historical Review and Update of Surgical Treatment for Corneal Endothelial Diseases.</a> Ophthalmology and Therapy. 3, 1-15 (2014).</li><li>Tan, D. T. H., Dart, J. K. G., Holland, E. J., Kinoshita, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+transplantation.">Corneal transplantation.</a> The Lancet. 379 (9827), 1749-1761 (2012).</li><li>Soh, Y. Q., Peh, G. S. L., Mehta, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translational+issues+for+human+corneal+endothelial+tissue+engineering.">Translational issues for human corneal endothelial tissue engineering.</a> Journal of Tissue Engineering and Regnerative Medicine. 11 (9), 2425-2442 (2017).</li><li>Senoo, T., Joyce, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+Cycle+Kinetics+in+Corneal+Endothelium+from+Old+and+Young+Donors.">Cell Cycle Kinetics in Corneal Endothelium from Old and Young Donors.</a> Investigative Ophthalmology, Visual Science. 41 (3), 660-667 (2000).</li><li>Roy, O., Leclerc, V. B., Bourget, J. M., Th&#233;riault, M., Proulx, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+the+process+of+corneal+endothelial+morphological+change+in+vitro.">Understanding the process of corneal endothelial morphological change in vitro.</a> Investigative Ophthalmology, Visual Science. 56, 1228-1237 (2015).</li><li>Harkin, D. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mounting+of+Biomaterials+for+Use+in+Ophthalmic+Cell+Therapies.">Mounting of Biomaterials for Use in Ophthalmic Cell Therapies.</a> Cell Transplantation. 26 (11), 1717-1732 (2017).</li><li>Trepat, X., Chen, Z., Jacobson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+migration.">Cell migration.</a> Comprehensive Physiology. 2 (4), 2369-2392 (2012).</li><li>Walshe, J., Harkin, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serial+explant+culture+provides+novel+insights+into+the+potential+location+and+phenotype+of+corneal+endothelial+progenitor+cells.">Serial explant culture provides novel insights into the potential location and phenotype of corneal endothelial progenitor cells.</a> Experimental Eye Research. 127, 9-13 (2014).</li><li>Al Abdulsalam, N. K., Barnett, N. L., Harkin, D. G., Walshe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cultivation+of+corneal+endothelial+cells+from+sheep.">Cultivation of corneal endothelial cells from sheep.</a> Experimental Eye Research. 173, 24-31 (2018).</li><li>Parekh, M., Ferrari, S., Sheridan, C., Kaye, S., Ahmad, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Concise+Review:+An+Update+on+the+Culture+of+Human+Corneal+Endothelial+Cells+for+Transplantation.">Concise Review: An Update on the Culture of Human Corneal Endothelial Cells for Transplantation.</a> Stem Cells Translational Medicine. 5 (2), 258-264 (2016).</li><li>Peh, G. S., Toh, K. P., Wu, F. Y., Tan, D. T., Mehta, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cultivation+of+human+corneal+endothelial+cells+isolated+from+paired+donor+corneas.">Cultivation of human corneal endothelial cells isolated from paired donor corneas.</a> PLoS One. 6 (12), 28310 (2011).</li></ol>

Un desafío técnico significativo asociado con el establecimiento y la expansión de las células endoteliales corneales humanas es evitar que la EMT ocurra en los cultivos. La EMT se puede activar en las células endoteliales corneales por pérdida de contacto de célula a célula, sin embargo, la mayoría de los protocolos de cultivo celular para estas células implican disociación enzimática a células individuales durante el aislamiento y la subcultura10. Aquí presentamos un protocolo de c...

La córnea es un tejido transparente que se encuentra en la parte delantera del ojo. Se compone de tres capas principales: una capa epitelial en la superficie externa, una capa de estroma medio y una capa interna llamada endotelio corneal. El endotelio corneal es una monocapa de células que se asienta sobre una membrana del sótano llamada membrana de Descemet y mantiene la transparencia de la córnea regulando la cantidad de líquido que entra en el estroma desde el humor acuoso subyacente. El exceso de líquido dentro del estroma causa hinchazón de la córnea, opacidad y pérdida de la visión. Por lo tanto, el endotelio es vital para mantener la visión.
El endotelio corneal puede llegar a ser disfuncional por una serie de razones, incluyendo el envejecimiento, enfermedad y lesión, y el único tratamiento actual es la cirugía de trasplante. Durante esta cirugía, la membrana del endotelio y Descemet se extrae de la córnea del paciente y se reemplaza con un injerto de endotelio y la membrana de Descemet obtenida de una córnea donante. Muchos injertos de endotelio también contienen una fina capa de tejido estroveral para ayudar a la manipulación y fijación a la córnea huésped1.
En todo el mundo, la demanda de tejido de donante corneal para cirugías de trasplante es mayor que la cantidad que pueden ser suministradas por los bancos oculares2. Por lo tanto, ha habido un impulso para desarrollar trasplantes de endotelio corneal de ingeniería de tejido que podrían utilizarse para aliviar este déficit3. La razón de ser de esto se basa en el hecho de que actualmente, el endotelio de una córnea individual sólo puede ser transferido a un solo paciente, sin embargo, si las células endoteliales corneales se expandieron y cultivaron por primera vez en andamios biomateriales en el cultivo de tejidos, podrían ser utilizados para tratar a múltiples pacientes.
Los principales desafíos que deben abordarse antes de que los trasplantes de endotelio corneal con ingeniería de tejido se conviertan en una opción factible para los cirujanos incluyen: (1) establecer técnicas para expandir las células endoteliales corneales de alta calidad y para producir células endoteliales maduras y funcionales capas de células endoteliales corneales in vitro, y (2) establecer técnicas para el cultivo de las células en andamios biomateriales para producir injertos de ingeniería tisular que sean iguales o mejores que los injertos derivados de la córnea del donante que se utilizan actualmente.
Las células endoteliales corneales tienen un potencial proliferativo in vivo muy bajo, pero se pueden estimular para dividir in vitro4. Sin embargo, tienen una fuerte tendencia a someterse a una transición epitelial-mesenquimal (EMT) in vitro, lo que reduce su capacidad para formar una capa endotelial madura y funcional. Los desencadenantes conocidos de la EMT en las células endoteliales corneales incluyen la exposición a ciertos factores de crecimiento y la pérdida del contacto entre células5. Por lo tanto, es casi inevitable que los cultivos celulares endoteliales corneales que se disilizan enzimáticamente durante la subcultura sufren cambios asociados con la EMT. Aquí, presentamos un método de cultivo celular para células endoteliales corneales humanas u ovinas que está diseñado para minimizar la interrupción de los contactos de célula a célula durante las etapas de aislamiento, expansión y subcultivo, para reducir el potencial de EMT. Además, demostramos cómo los injertos de ingeniería tisular que se asemejan a los injertos de endotelio/tejido estrogénico derivados de la córnea de donantes que se asemejan a los injertos de endotelio/tejido estrogénico de descemet pueden ser producidos por el cultivo de capas celulares cultivadas en ambos lados de una membrana biomaterial en un dispositivo de montaje hecho a medida.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Attachment factor</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>S006100</td>
			<td>A 1X sterile solution containing gelatin that is used to coat tissue culture surfaces. Store at 4 &#176;C.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine pituitary extract</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>13028014</td>
			<td>A single vial contains 25 mg. Freeze in aliquots.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride</td>
			<td>Merck</td>
			<td>C5670</td>
			<td>Dissolve in HBSS to make a 1 mM stock solution. Filter sterilise.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tube, 50 ml</td>
			<td>Labtek</td>
			<td>650.550.050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chondroitin sulphate</td>
			<td>LKT Laboratories</td>
			<td>C2960</td>
			<td>This is bovine chondroitin sulphate. Dissolve in HBSS to make a 0.08 g/mL stock solution. Filter sterilise and freeze in aliquots.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dispase II</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17105-041</td>
			<td>Dissolve in DPBS to make a 2 mg/mL stock solution. Filter sterilise and freeze in aliquots.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Labtek</td>
			<td>EA043</td>
			<td>100% undenatured ethanol should be diluted to 70% in deionised water for sterilising instruments and surfaces.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foetal bovine serum</td>
			<td>GE Healthcare Australia Pty Ltd</td>
			<td>SH30084.03</td>
			<td>This is a HyClone brand of foetal bovine serum.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverglass No. 1, &#216; 13 mm</td>
			<td>Proscitech</td>
			<td>G401-13</td>
			<td>Place sterilised cover slips into 24-well plates for tissue culture.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14025-092</td>
			<td>Hank&#39;s balanced salt solution, 1X, containing calcium chloride and magnesium chloride.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-ascorbic acid 2-phosphate</td>
			<td>Merck</td>
			<td>A8960</td>
			<td>Dissolve in HBSS to make a 150 mM stock solution. Filter sterilise.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Boyden chamber</td>
			<td>CNC Components Pty. Ltd.</td>
			<td>Upper ring: QUT-0002-0006, Base ring: QUT-0002-0007</td>
			<td>Both components are made from polytetrafluoroethelyne (PTFE).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O-ring for micro-Boyden chamber</td>
			<td>Ludowici Sealing Solutions</td>
			<td>RSB012</td>
			<td>Composed of silicon rubber.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opti-MEM 1 (1X) + GlutaMAX-1</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>51985-034</td>
			<td>A reduced serum medium containing glutamine.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14190-144</td>
			<td>Dulbecco&#39;s phosphate buffered saline, 1X, without calcium chloride and magnesium chloride.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pen Strep</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td>A 100X antibiotic solution containing 10,000 Units/mL penicillin and 10,000 &#181;g/mL streptomycin.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>82.14473.001</td>
			<td>Sterile Petri dish, 92 X 16 mm, for tissue dissections.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture plate, 24 well</td>
			<td>Corning Incorporated</td>
			<td>Costar 3524</td>
			<td>A plate containing 24 wells, each with a surface area of 2 cm2.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture plate, 6 well</td>
			<td>Corning Incorporated</td>
			<td>Costar 3516</td>
			<td>A plate containing 6 wells, each with a surface area of 9 cm2.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TrypLE Select</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12563-011</td>
			<td>A 1X enzyme solution for dissociating cells.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Versene</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15040-066</td>
			<td>A 1X EDTA solution for dissociating cells.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Watchmaker forceps</td>
			<td>Labtek</td>
			<td>BWMF4</td>
			<td>Number 4 watchmaker forceps work well for removing strips of endothelium/Descemet&#39;s membrane from corneas.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

growth of human and sheep corneal endothelial cell layers on biomaterial membranes

Los cultivos de células endoteliales corneales tienden a someterse a una transición epitelial a mesenquimal (EMT) después de la pérdida del contacto entre células. La EMT es perjudicial para las células, ya que reduce su capacidad para formar una capa madura y funcional. Aquí, presentamos un método para establecer y suculcar cultivos celulares endoteliales humanos y ovinos que minimiza nalve la pérdida de contacto de célula a célula. Los explantas de la membrana del endotelio/Descemet se toman de las córneas del donante y se colocan en el cultivo de tejidos en condiciones que permiten que las células migren colectivamente a la superficie de cultivo. Una vez establecida una cultura, los explantes se transfieren a placas nuevas para iniciar nuevos cultivos. Dispase II se utiliza para levantar suavemente los grupos de células de las placas de cultivo de tejido para su subcultura. Los cultivos celulares endoteliales corneales que se han establecido utilizando este protocolo son adecuados para transferir a membranas biomateriales para producir capas celulares de ingeniería tisular para trasplante en ensayos con animales. Se describe un dispositivo hecho a medida para apoyar las membranas biomateriales durante el cultivo del tejido y se presenta un ejemplo de un injerto de ingeniería tisular compuesto por una capa de células endoteliales corneales y una capa de células estromales corneales a ambos lados de una membrana de colágeno tipo I.

El método para aislar y expandir las células endoteliales corneales de las córneas humanas u ovinas se resume en la Figura 1 y la Figura 2. La mayoría de los explantes que se derivan de las córneas de 1 a 2 años de edad ovejas o donantes humanos de menos de 30 años de edad se unirán a las placas de cultivo de tejido recubierto de Factor de Apéndice dentro de una semana, sin embargo, no es inusual encontrar que hasta un tercio de los explantas no se adhi...

Watch this Scientific Journal Video about Growth of Human and Sheep Corneal Endothelial Cell Layers on Biomaterial Membranes at JoVE.com

Growth of Human and Sheep Corneal Endothelial Cell Layers on Biomaterial Membranes

Este protocolo describe los pasos críticos necesarios para establecer y cultivar cultivos celulares endoteliales corneales a partir de explantas de tejido humano o ovino. También se presenta un método para subculturizar células endoteliales corneales en biomateriales membranosas.

Crecimiento de capas celulares endoteliales corneales humanas y ovinas en membranas biomateriales

Corneal endothelial cell cultures have a tendency to undergo epithelial-to-mesenchymal transition (EMT) after loss of cell-to-cell contact. EMT is ...

Este protocolo de cultivo celular está diseñado para evitar que las células endoteliales corneales se sometan a transición epitelial a mesenquimal durante el aislamiento, la expansión y la subcultura. Los cultivos celulares se establecen a partir de explantes de tejido corneal, que se pueden reutilizar para garantizar un suministro continuo de células primarias de un donante. Comience por recubrir los pozos de una placa de cultivo de tejido de seis pozos con factor de fijación utilizando las instrucciones del fabricante.A continuación, agregue un mililitro de medio de cultivo a cada pozo codificado. Coloque el lado del endotelio de la córnea en una placa estéril de Petri en el escenario de un microscopio diseccionante. Ajuste la iluminación de modo que la superficie corneal esté bien iluminada con suficiente contraste para resaltar la capa endotelial, y ajuste el zoom de modo que el borde y algún endotelio corneal central estén a la vista.Utilice fórceps de relojero esterilizados para levantar y desgarrar suavemente la membrana de Descemet del estroma subyacente. Coloque la tira de membrana en uno de los pozos preparados de la placa de cultivo, asegurándose de reemplazar inmediatamente la tapa de la placa para reducir el riesgo de contaminación. Retire las tiras de la membrana de Descemet de la periferia extrema del endotelio primero, y de las regiones centrales más tarde, colocando todas las tiras de una córnea en un solo pozo.Cuando haya terminado, incubar los explantes en una incubadora de cultivo celular humidificado de 37 grados centígrados y 5% de dióxido de carbono. Montar la cámara superior de la cámara micro Boyden colocando un anillo O rojo en su centro. Utilice una trete de 18 milímetros de diámetro para perforar un disco de una hoja de biomaterial en una placa de corte de PTFE.A continuación, coloque el disco sobre el anillo O rojo en la cámara superior de la cámara micro Boyden. Atornille la cámara inferior a la cámara superior, asegurando el disco del biomaterial en el medio. Y remoje la cámara micro Boyden montada en 70% etanol durante una hora para esterilizarla.Después del remojo, sumerja completamente la cámara en HBSS estéril durante 10 minutos para retirar el etanol. A continuación, lave la cámara en un medio de cultivo durante 10 minutos. Y transferir al medio de cultivo dentro de un pozo de una placa de seis pozos, asegurándose de que la cámara superior está orientada hacia arriba.Ajuste el nivel del medio para que entre en contacto con la superficie inferior de la membrana de biomaterial, pero no fluya hacia la cámara superior. Pipetear 100 microlitros de suspensión celular sobre la membrana en la cámara micro Boyden, e incubarlo en la incubadora de cultivo de tejido durante cuatro horas, antes de agregar medio para sumergir completamente la cámara. La mayoría de los explantes que se derivaron de las córneas de ovejas de uno a dos años de edad o donantes humanos de menos de 30 años de edad unidos a placas de cultivo de tejido codificados por factor de unión dentro de una semana.Después de seis semanas, muchas células pequeñas y apretadas estaban presentes junto al explant. Las células pequeñas y apretadas dentro de los cultivos celulares endoteliales corneales son resistentes a la digestión con triple, mientras que las células fibroblásticas más grandes son más sensibles a ella. Esta diferencia se aprovechó para eliminar selectivamente células grandes de los cultivos antes de transferir las células más pequeñas a nuevas placas.Se realizaron análisis de harinaína inmunización en cultivos celulares endoteliales corneales para localizar ZO-1, una proteína de unión apretada, y N-cadherina, una proteína de unión de adherencia. Se utilizaron los mismos anticuerpos tanto para las células ovinas como para las células humanas, y ambas proteínas se detectaron en las membranas plasmáticas de las células de ambas especies. La cámara micro Boyden hecha a medida permitía que ambos lados de una membrana se utilizaran como superficies de cultivo celular simultáneamente.Una vista transversal de una construcción de células de ingeniería de tejido muestra una sola capa de células endoteliales corneales en una superficie, y un cultivo multicapa de células estromales corneales en la otra. Al intentar este protocolo, es importante evitar raspar el endotelio con los fórceps cuando estés pelando la membrana de Descemet lejos de la córnea. Después de este procedimiento, la integridad de una capa de células endoteliales corneales en una membrana se puede comprobar midiendo su resistencia eléctrica.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

On-Chip Endothelial Inflammatory Phenotyping

On-Chip fenotipificación inflamatoria endotelial

Atherogenesis is potentiated by metabolic abnormalities that contribute to a heightened state of systemic inflammation resulting in endothelial ...

Investigación

Bioingeniería

Mass Cytometry: Protocol for Daily Tuning and Running Cell Samples on a CyTOF Mass Cytometer

Citometría de masas: Protocolo para la afinación y servicio diario muestras de células en un citómetro de masas CyTOF

In recent years, the rapid analysis of single cells has commonly been performed using flow cytometry and fluorescently-labeled antibodies. However, the ...

Combination of Microstereolithography and Electrospinning to Produce Membranes Equipped with Niches for Corneal Regeneration

Combinación de Microstereolithography y electrospinning para Fabricación de membranas Equipado con nichos para la regeneración de la córnea

Corneal problems affect millions of people worldwide reducing their quality of life significantly. Corneal disease can be caused by illnesses such as ...

From Fast Fluorescence Imaging to Molecular Diffusion Law on Live Cell Membranes in a Commercial Microscope

De Fluorescencia Fast Imaging a la Ley de Difusión Molecular en membranas de células vivas en un microscopio Comercial

It has become increasingly evident that the spatial distribution and the motion of membrane components like lipids and proteins are key factors in the ...

Ferromagnetic Bare Metal Stent for Endothelial Cell Capture and Retention

Ferromagnético Bare Metal stent para la captura de la célula endotelial y Retención

Rapid endothelialization of cardiovascular stents is needed to reduce stent thrombosis and to avoid anti-platelet therapy which can reduce bleeding risk. ...

Characterization of Leukocyte-platelet Rich Fibrin, A Novel Biomaterial

Caracterización de los leucocitos-plaquetas Rich fibrina, una novela de Biomateriales

Autologous platelet concentrates represent promising innovative tools in the field of regenerative medicine and have been extensively used in oral ...

Rapid Subtractive Patterning of Live Cell Layers with a Microfluidic Probe

Patrones sustractiva rápida de las capas de células vivas con una sonda de microfluidos

The microfluidic probe (MFP) facilitates performing local chemistry on biological substrates by confining nanoliter volumes of liquids. Using one ...

Co-transplantation of Human Ovarian Tissue with Engineered Endothelial Cells: A Cell-based Strategy Combining Accelerated Perfusion with Direct Paracrine Delivery

Co el trasplante de tejido ovárico humano con células endoteliales Ingeniería: una combinación de estrategia basado en la célula acelerada perfusión con entrega directa paracrina

Infertility is a frequent side effect of chemotherapy and/or radiotherapy and for some patients, cryopreservation of oocytes or embryos is not an option. ...

A Macrophage Reporter Cell Assay to Examine Toll-Like Receptor-Mediated NF-kB/AP-1 Signaling on Adsorbed Protein Layers on Polymeric Surfaces

Un ensayo celular de reportero de macrófagos para examinar la señalización NF-kB/AP-1 mediada por receptores similares al peaje en capas de proteínas absorbentes en superficies poliméricas

The persistent inflammatory host response to an implanted biomaterial, known as the foreign body reaction, is a significant challenge in the development ...