Name: quantification of ethanol levels in zebrafish embryos using head space gas chromatography
Uploaded: 2020-02-11T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Quantification of Ethanol Levels in Zebrafish Embryos Using Head Space Gas Chromatography at JoVE.com

이 문서에 제시된 연구는 J.K.E에 국립 보건원/국립 치과 및 두개안면 연구 (NIH/NIDCR) R01DE020884에서 이전 교부금에 의해 지원되었습니다. 그리고 알코올 남용 및 알코올 중독에 대한 건강 / 국립 연구소의 국립 연구소 (NIH / NIAAA) F32AA021320 C.B.L.에 알코올 남용에 대한 국립 보건 원 / 국립 연구소의 현재 보조금에 의해 (NIH / NIAAA) R00AA023560 에 C.B.L. 우리는 가스 크로마토그래프 분석을 제공하고 지원해 준 Rueben Gonzales에게 감사드립니다. 티아나 온티베로스와 지나 노블스 박사의 글쓰기 지원에 감사드립니다.

이 절차에 사용된 모든 제브라피시 배아는 확립된 IACUC 프로토콜27에따라 사육및 사육되었다. 이 프로토콜은 오스틴텍사스 대학과 루이빌 대학에 의해 승인되었습니다.
참고: 제브라피쉬 라인 Tg(fli1:EGFP)y1은 본 연구에서 사용하였다28. 이 절차에 사용되는 모든 물은 멸균 역삼투수입니다. 모든 통계 분석은 그래프패드 프리즘...

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개발 모델 시스템인 zebrafish는 환경 요인이 개발에 미치는 영향을 연구하는 데 이상적입니다. 그(것)들은 에탄올 연구 결과에 있는 정확한 타이밍 그리고 복용량 패러다임을 허용하는 외부기름지게 한 태아의 다수를 일으킵니다. 이것은 살아있는 화상 진찰 기능 및 인간을 가진 유전과 발달 보존과 결합하여, zebrafish를 기형학 연구를 위한 강력한 모형 체계를 만듭니다. 기재된 것은 헤드 스페이스 ...

태아 알코올 스펙트럼 장애(FASD)는 배아 에탄올 노출과 관련된 광범위한 신경 장애 및 두개안면이상학을1. 에탄올 노출 및 유전적 배경의 타이밍 및 투여량을 포함한 여러 요인이 FASD2,3의변이에 기여한다. 인간에서는, 이 변수의 복잡한 관계는 공부하고 FASD의 병인학을 이해하는 도전을 만듭니다. 동물 모델은 에탄올 기형의 기계적 기초에 대한 우리의 이해를 개발하는 데 중요한 것으로 입증되었습니다. 다양한 동물 모델 시스템이 FASD의 여러 측면을 연구하는 데 사용되었으며 결과는 인간에서 노출에서 발견되는 것과 현저하게 일치했습니다4. 설치류 모델 시스템은 FASD의 많은 측면을 검사하는 데 사용되며 마우스가 가장 일반적인5,6,7입니다. 이 작업의 대부분은 초기 에탄올 노출에 발달 결함에 초점을 맞추고있다8,에탄올에 나중에 노출뿐만 아니라 개발 이상을 일으키는 것으로 나타났다하지만9. 더욱이, 마우스의 유전 적 능력은 FASD10,11의유전 적 기초를 탐구하는 우리의 능력에 크게 도움이되었습니다. 마우스에서 이러한 연구는 강하게 소닉 고슴도치 경로와 유전자 에탄올 상호 작용이 있음을 제안, 레티노산 신호, 수퍼 옥사이드 디스뮤타아제, 산화 산화 신타제 I, Aldh2 및 Fancd28,10,11,12,13,14,15,16,17,18, 19,20,21. 이러한 연구는 동물 모델이 FASD와 그 기본 메커니즘에 대한 우리의 이해를 발전시키는 데 중요하다는 것을 보여줍니다.
제브라피쉬는 에탄올 기형의 여러 측면을 검사하는 강력한 모델 시스템으로 부상하고있다 22,23. 그들의 외부 풍부하게 함, 높은 fecundity, 유전 성 및 살아있는 화상 진찰 기능 때문에, zebrafish는 이상적으로 에탄올 기형의 타이밍, 복용량 및 유전학과 같은 요인을 공부하기 위하여 적당합니다. 에탄올은 정확하게 단계적 배아에 투여될 수 있고 배아는 발달 과정 동안 에탄올의 직접적인 영향을 조사하기 위해 이미지화될 수 있다. 이 연구는 개발의 유전 프로그램이 제브라피시와 인간 사이에서 매우 보존되어 있기 때문에 인간과 직접 관련될 수 있으며 따라서 FASD 인간 연구24를안내하는 데 도움이 될 수 있다. 제브라피쉬가 에탄올 기형 생성을 검사하는 데 사용되었지만, 배아 에탄올 농도보고에 대한 합의가 부족하면 인간과 비교하기가 어렵다25. 포유류 시스템에서, 혈중 알코올 수준은 조직 에탄올 수준과 직접 상관 관계26. 제브라피쉬 연구의 대부분은 순환계가 완전히 형성되기 전에 배아를 치료합니다. 검사할 모계 샘플이 없는 경우, 에탄올 농도를 평가하는 과정이 배아 내의 에탄올 수준을 정량화하는 데 필요합니다. 여기에서 우리는 헤드 스페이스 가스 크로마토그래피를 사용하여 개발 하는 제브라피시 배아에서 에탄올 농도를 정량화하는 과정을 설명합니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Air</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Provided by contract to the university</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Analytical Balance</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10204-962</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AutoSampler, CP-8400</td>
			<td>Varian</td>
			<td></td>
			<td>Gas Chromatograph Autosampler</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Chloride</td>
			<td>VWR</td>
			<td>97062-590</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Decon Labs</td>
			<td>2701</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas chromatograph vial with polytetrafluoroethylene/silicone septum and plastic cap 2 mL</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>8010-0198</td>
			<td>Can reuse the vials after cleaning, but not the caps/septa</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas Chromatograph, CP-3800</td>
			<td>Varian</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Helium</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Provided by contract to the university</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HP Innowax capillary column</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>19095N-123I</td>
			<td>30 m x 0.53 mm x 1.0 &#956;m film thick</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyrdogen</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Provided by contract to the university</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium Sulfate (Heptahydrate)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>M63-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentrifuge tube 1.5 mL</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>2682002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette tips 10 &#956;L</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13611106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette tips 1000 &#956;L</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13611127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette tips 200 &#956;L</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13611112</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes 100 mm</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>FB012924</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipetman L p1000L Micropipette</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>FA10006M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipetman L p200L Micropipette</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>FA10005M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipetman L p2L Micropipette</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>FA10001M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polytetrafluoroethylene/silicone septum and plastic cap</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>5190-7021</td>
			<td>Replacement caps/septa for gas chromatograph vials</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Chloride</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>P217-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Phosphate (Dibasic)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BDH9266-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pronase</td>
			<td>VWR</td>
			<td>97062-916</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silica Beads .5 mm</td>
			<td>Biospec Products</td>
			<td>11079105z</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silica Beads 1.0 mm</td>
			<td>Biospec Products</td>
			<td>11079110z</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Bicarbonate</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BDH9280-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S271-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Phosphate (Dibasic)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S374-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Solid-phase microextraction fiber assembly Carboxen/Polydimethylsiloxane</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>57343-U</td>
			<td>Replacement fibers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Star Chromatography Workstation</td>
			<td>Varian</td>
			<td></td>
			<td>Chromatography software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermogreen Low Bleed (LB-2) Septa</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>23154</td>
			<td>Replacement inlet septa</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

quantification of ethanol levels in zebrafish embryos using head space gas chromatography

태아 알콜 스펙트럼 무질서 (FASD)는 안면 이형성증 및 신경 손상을 포함하여 에탄올 유도한 발달 결함의 높게 변명한 연속체를 기술합니다. 복잡한 병리학으로, FASD는 미국에서 태어난 100명의 아이들에 대하여 대략 1에 매년 영향을 미칩니다. FASD의 매우 가변적인 특성으로 인해 동물 모델은 에탄올로 인한 개발 결함에 대한 현재의 기계적 이해에서 중요한 것으로 입증되었습니다. 점점 더 많은 실험실에서 제브라피시를 사용하여 에탄올로 인한 발달 결함을 검사하는 데 주력하고 있습니다. Zebrafish는 외부에서 수정되고 유전적으로 견인할 수 있는 반투명 배아를 다수 생산합니다. 이를 통해 연구자들은 여러 유전적 맥락에서 에탄올 노출의 타이밍과 복용량을 정확하게 제어하고 라이브 이미징 기술을 통해 배아 에탄올 노출의 영향을 정량화할 수 있습니다. 이것은 유전학과 인간과의 발달의 높은 수준의 보존과 결합되어, 에탄올 기형의 기계적 기초를 연구하는 강력한 모델로 제브라피쉬가 입증되었습니다. 그러나, 에탄올 노출 식이요법은 이 연구 결과에 걸쳐 제브라피시 데이터의 해석을 혼동한 다른 제브라피시 연구 사이에서 변화했습니다. 여기서는 헤드 스페이스 가스 크로마토그래피를 사용하여 제브라피시 배아에서 에탄올 농도를 정량화하는 프로토콜이다.

혈액 에탄올 수준은 완전히 형성된 순환 계통이 부족하기 때문에 초기 배아 제브라피시에서 결정될 수 없습니다. 제브라피쉬 배아에서 에탄올 농도수준을 결정하기 위해 에탄올 수준은 균질화된 배아 조직에서 직접 측정됩니다. 배아 에탄올 농도를 적절하게 측정하려면 배아 량을 고려해야 합니다. 배아 (노른자 부착)는 초원 내부에 앉아 (달걀 껍질) 엑스트라 배아 유체에 둘러싸여<strong class="xfi...

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Quantification of Ethanol Levels in Zebrafish Embryos Using Head Space Gas Chromatography

이 작품은 적절한 노출 방법에서 배아 처리 및 에탄올 분석에 헤드 스페이스 가스 크로마토그래피를 사용하여 제브라피쉬 배아에서 에탄올 수준을 정량화하는 프로토콜을 설명합니다.

헤드 스페이스 가스 크로마토그래피를 이용한 제브라피시 배아의 에탄올 수치 정량화

Fetal Alcohol Spectrum Disorders (FASD) describe a highly variable continuum of ethanol-induced developmental defects, including facial dysmorphologies ...

이 프로토콜은 제브라피시 배아 를 개발하는 에탄올의 약동학을 이해하는 데 도움이되며 이것은 제브라피시 연구에서 에탄올 노출 정권을 표준화하는 데 도움이 되기 때문에 중요합니다. 우리의 기술의 주요 장점은 연구원이 배아 발달 도중 에탄올 수준을 신속하고 재현적으로 측정할 수 있다는 것입니다, 특히 혈액 공급이 유효하지 않는 태아에서. 이 방법은 적절한 기술 및 장비 설정을 가정하는 다른 환경 요인뿐만 아니라 다른 모델 시스템에 쉽게 적용 할 수 있습니다.나는 태아 처리 도중 에탄올 증발을 방지하는 데 필요한 속도로 투쟁하기 위하여 처음으로 이 프로토콜을 능력을 발휘하는 개별을 기대할 것입니다. 250 마이크로리터의 부피에서 라인으로 표시된 1.5 밀리리터 미세 원심 분리 튜브로 여분의 배아 액을 가진 10개의 배아를 이송하는 것으로 시작합니다. 채우기 라인에 물을 추가합니다.비반향 샘플을 위해 추가 미세 원심 분리튜브를 준비하십시오. 초리온을 제거하려면 배아를 10분 동안 배아 매체에 밀리리터 당 2밀리그램의 페트리 접시에 배아를 배양합니다. 몇 분마다 부드럽게 접시를 소용돌이어 초리온을 깨뜨린다.모든 배아가 초리온이 없는 후에는 프로테아제 칵테일에서 제거하고 신선한 매체로 두 번 씻으시다. 그런 다음 배아를 신선한 100밀리미터 접시로 옮기습니다. 모든 시료가 부피 측정준비가 되면, 배아 주위의 모든 액체를 주의 깊게 제거하기 위해 가능한 가장 작은 팁이 있는 P200 마이크로파이프를 사용하십시오.0.1 밀리그램 이하의 정밀도로 수량을 계량한 다음 250 마이크로리터에서 제거된 물의 무게를 빼서 10개의 배아의 부피를 결정합니다. 단일 배아의 부피를 결정하기 위해 차이를 10으로 나눕니다. 짝짓기 탱크에서 배아를 모아 표준 100mm 페트리 접시에 넣은 다음 28.5섭씨로 접시를 배양합니다.수정 후 6 시간에서, 배아 미디어와 1 % 에탄올 또는 미디어 혼자 새로운 접시에 최대 100 배아를 전송합니다. 뚜껑을 덮지만 페트리 요리를 밀봉하지 않고 18시간 동안 섭씨 28.5도의 인큐베이터에 넣거나 수정 후 24시간 까지 보관하십시오. 50 마이크로리터로 설정된 두 개의 P200 마이크로파이펫을 사용하고 프로테아제 칵테일 용액을 하나와 물을 두 번째로 흡인시합니다.그런 다음 유리 파이펫을 사용하여 1.5 밀리리터 미세 원심 분리기 튜브에 10 개의 배아를 신속하게 배치하고 캡을 닫습니다. 모든 샘플을 테스트, 제어 및 에탄올 치료 배아에 대해이 과정을 반복하십시오. 한 번에 하나의 샘플로 작업하여 캡을 빠르게 열고 200 마이크로리터로 설정된 P200 마이크로파이펫으로 모든 잔류 배아 미디어를 흡인합니다.빠르게 하지만 부드럽게 추가 하 고 물 50 마이크로 리터를 제거, 다음 프로테이즈 칵테일의 50 마이크로 리터를 추가 하 고 튜브 캡을 닫습니다. 샘플이 실온에서 10분 동안 앉아 서염화 나트륨 5개 중 450마이크로리터를 빠르게 추가하고 튜브 캡을 닫습니다. 10분 동안 소용돌이를 통해 시료를 균질화하고 두 개의 초미세먼지를 가스 크로마토그래피 바이알로 이송한다.바이알을 폴리테트라플루오로틸렌 캡으로 밀봉합니다. 시작 방법을 완료한 후 현재 SPME 에탄올 436개를 로드하여 2~5분 RG 런을 로드합니다. 샘플 목록의 각 샘플에 대한 분석 소프트웨어의 메서드 메뉴에서 메타메타.공기, 물, 5개의 어금니 나트륨 염화 나트륨 프로테아제 칵테일 블랭크로 시작하여 샘플 목록을 작성합니다. 그런 다음 0.3125에서 40 밀리머까지 순으로 에탄올 표준을 입력합니다. 공백의 두 번째 라운드와 표준을 따르십시오.모든 균질화 배아 상체 샘플을 입력하여 가장 낮은 에서 가장 높은 예측 에탄올 농도까지 테스트하고 빈칸의 세 번째 라운드를 입력하여 완료합니다. 가스 크로마토그래피 바이알을 자동 샘플러에 추가하여 시료를 입력하고 10~15분 동안 따뜻하게 할 수 있도록 합니다. 그런 다음 소프트웨어를 사용하여 샘플 실행을 시작합니다.실행이 완료되면 샘플 목록에 최종 샘플을 추가하고 대기.meth를 실행하여 종료 방법을 활성화합니다. 샘플 실행 중에 획득한 모든 데이터를 백업합니다. 종료 방법이 완료되면 열 크로마토그램을 클릭하고 결과와 함께 폴더를 엽니다.샘플은 이 프로그램에 자동으로 통합됩니다. 결과에서 올바른 피크가 통합되었는지 확인합니다. 모든 샘플이 확인되면 결과를 인쇄하거나 내보냅니다.그래프에서 에탄올 표준의 피크 높이를 플롯한 다음 경사, y-intercept 및 r 제곱 값을 계산합니다. 표준의 y-intercept에서 샘플의 피크 높이를 빼고 이 값을 표준의 경사로 나누어 각 샘플에 대한 에탄올 값을 가져옵니다. 배아에서 에탄올 농도를 계산하려면 각 샘플에 대한 희석 계수를 계산하고 이 희석 계수에 의해 샘플 에탄올 값을 곱합니다.마지막으로 미디어 에탄올 값을 10의 희석 계수로 곱하여 미디어 참조 샘플을 계산합니다. 배아 에탄올 농도를 제대로 계산하기 위해, 그들의 초리온에서 배아의 양을 측정하고 그들의 초리온에서 제거되었습니다. 이 분석에서, 태아는 초리온 내부의 총 부피의 56%를 구성하였다.이전에 발표된 작업을 기반으로, 73.6%는 제시된 모든 분석을 위한 배아 수분 함량으로 사용되었다. 이로 인해 배아 부피의 1.1 마이크로리터의 0.82 마이크로리터를 포함하는 물. 총 물 부피 중 49%는 배아에 함유되어 있으며 51%는 배아 유체에 함유되어 있습니다.가스 크로마토그래피 분석을 위해, 15개의 샘플과 처리된 매체의 2개의 단이 그룹당 5회 측정되었다는 것을 분석하였다. 미디어 에탄올 수준은 그룹 1용 143.6 밀리몰어, 그룹 2의 경우 133.6 밀리몰러였다. 배아의 에탄올 농도는 각각 63.5 밀리몰러와 53.1 밀리몰러를 각각 1개와 2군으로 측정했다.각 샘플에 대해 에탄올의 미디어 수준에 배아 에탄올 농도의 비율이 계산되었다. 그룹 1은 미디어 에탄올 레벨의 44%를, 그룹은 미디어 에탄올 레벨의 40%를 차지했다. 처리되지 않은 대조군 배아는 0 밀리몰라 미디어 에탄올 농도로 측정하였다.이 절차를 시도할 때 기억해야 할 가장 중요한 것은 에탄올이 휘발성이고 빠르게 증발하기 때문에 GC 분석을 위한 배아를 제대로 처리하는 것이 중요하다는 것입니다. 이 단계를 수행하는 가장 좋은 방법은 설명, 하지만 적절 한 근육 메모리를 개발 하기 위해 연습 해야. 이 절차는 제브라피시의 에탄올 치료 정권을 표준화하고 에탄 테라토겐성의 유전 및 세포 메커니즘을 해부하는 미래의 작업을 허용하는 데 도움이됩니다.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Measuring Protein Stability in Living Zebrafish Embryos Using Fluorescence Decay After Photoconversion (FDAP)

Measuring Protein Stability in Living Zebrafish Embryos Using Fluorescence Decay After Photoconversion FDAP

광 변환 한 후 형광 붕괴를 사용하여 생활 Zebrafish의 태아의 단백질 안정성을 측정 (FDAP)

Protein stability influences many aspects of biology, and measuring the clearance kinetics of proteins can provide important insights into biological ...

연구

발생학

Mechanical Vessel Injury in Zebrafish Embryos

Zebrafish의 태아에서 기계 선박 부상

Zebrafish (Danio rerio) embryos have proven to be a powerful model for studying a variety of developmental and disease processes.  External development ...

Analyzing In Vivo Cell Migration using Cell Transplantations and Time-lapse Imaging in Zebrafish Embryos

Analyzing In Vivo Cell Migration using Cell Transplantations and Time-lapse Imaging in Zebrafish Embryos

분석<em&gt; 생체</em&gt; 셀 마이그레이션 Zebrafish의 배아에서 세포 이식 및 시간 경과 이미징을 사용하여

Cell migration is key to many physiological and pathological conditions, including cancer metastasis. The cellular and molecular bases of cell migration ...

Isolation and Characterization of Single Cells from Zebrafish Embryos

분리 및 Zebrafish의 배아에서 단일 세포의 특성

The zebrafish (Danio rerio) is a powerful model organism to study vertebrate development. Though many aspects of zebrafish embryonic development have been ...

Development of an Ethanol-induced Fibrotic Liver Model in Zebrafish to Study Progenitor Cell-mediated Hepatocyte Regeneration

Zebrafish의에서 에탄올에 의한 섬유 성 간 모델의 개발은 전구 세포 매개 간세포의 재생을 연구하는

Sustained liver fibrosis with continuation of extracellular matrix (ECM) protein build-up results in the loss of cellular competency of the liver, leading ...

Biosensing Motor Neuron Membrane Potential in Live Zebrafish Embryos

The protocols described here are designed to allow researchers to study cell communication without altering the integrity of the environment in which the ...

Induction of Hypoxia in Living Frog and Zebrafish Embryos

살아있는 개구리와 Zebrafish 태아의 저산소증 유도

Here, we introduce a novel system for hypoxia induction, which we developed to study the effects of hypoxia in aquatic organisms such as frog and ...

Visualization of Cellular Electrical Activity in Zebrafish Early Embryos and Tumors

Zebrafish 초기 배아에 종양 세포 전기 활동의 시각화

Bioelectricity, endogenous electrical signaling mediated by ion channels and pumps located on the cell membrane, plays important roles in signaling ...

Preparation of Drosophila Larval Samples for Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS)-based Metabolomics

Preparation of Drosophila Larval Samples for Gas Chromatography-Mass Spectrometry GC-MS-based Metabolomics

가스 크로마토그래피-질량 분석 (GC-MS) 초파리 애벌레 샘플의 준비-대사체학을 기반으로

Recent advances in the field of metabolomics have established the fruit fly Drosophila melanogaster as a powerful genetic model for studying animal ...

Visualizing the Node and Notochordal Plate In Gastrulating Mouse Embryos Using Scanning Electron Microscopy and Whole Mount Immunofluorescence

노드 및 스캐닝 전자 현미경 검사 법, 면역 형광 산 전체를 사용 하 여 Gastrulating 마우스 배아에서 Notochordal 접시를 시각화

The post-implantation mouse embryo undergoes major shape changes after the initiation of gastrulation and morphogenesis. A hallmark of morphogenesis is ...