Name: quantification of ethanol levels in zebrafish embryos using head space gas chromatography
Uploaded: 2020-02-11T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Quantification of Ethanol Levels in Zebrafish Embryos Using Head Space Gas Chromatography at JoVE.com

A pesquisa apresentada neste artigo foi apoiada por subvenções anteriores dos Institutos Nacionais de Saúde/Instituto Nacional de Pesquisa Odontológica e Craniofacial (NIH/NIDCR) R01DE0208884 para J.K.E. e InstitutoNacional de Saúde/Instituto Nacional de Abuso de Álcool e Alcoolismo (NIH/NIAAA) F32AA021320 para C.B.L. e pela atual subvenção dos Institutos Nacionais de Saúde/Instituto Nacional de Abuso de Álcool (NIH/NIAAA) R00AA023560 para C.B.L. Agradecemos a Rueben Gonzales por fornecer e ajudar na análise do cromatógrafo a gás. Agradecemos a Tiahna Ontiveros e à Dra.

Todos os embriões de zebrafish utilizados neste procedimento foram levantados e criados seguindo protocolos estabelecidos da IACUC27. Esses protocolos foram aprovados pela Universidade do Texas em Austin e pela Universidade de Louisville.
NOTA: A linha de zebrafish Tg (fli1:EGFP)y1 foi utilizada neste estudo28. Toda a água utilizada neste procedimento é água de osmose reversa estéril. Todas as análises estatísticas for...

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J., Mangieri, R. A., Dilly, G. A., Gonzales, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microdialysis+of+ethanol+during+operant+ethanol+self-administration+and+ethanol+determination+by+gas+chromatography.">Microdialysis of ethanol during operant ethanol self-administration and ethanol determination by gas chromatography.</a> Journal of Visualized Experiments. (67), e4142 (2012).</li><li>Adalsteinsson, E., Sullivan, E. V., Mayer, D., Pfefferbaum, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+quantification+of+ethanol+kinetics+in+rat+brain.">In vivo quantification of ethanol kinetics in rat brain.</a> Neuropsychopharmacology. 31 (12), 2683-2691 (2006).</li><li>Quertemont, E., Green, H. L., Grant, K. 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L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ethanol-+and+acetaldehyde-mediated+developmental+toxicity+in+zebrafish.">Ethanol- and acetaldehyde-mediated developmental toxicity in zebrafish.</a> Neurotoxicology and Teratology. 26 (6), 769-781 (2004).</li><li>Zhang, C., Ojiaku, P., Cole, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Forebrain+and+hindbrain+development+in+zebrafish+is+sensitive+to+ethanol+exposure+involving+agrin,+Fgf,+and+sonic+hedgehog+function.">Forebrain and hindbrain development in zebrafish is sensitive to ethanol exposure involving agrin, Fgf, and sonic hedgehog function.</a> Birth Defects Research Part A: Clinical and Molecular Teratology. 97 (1), 8-27 (2013).</li></ol>

Como um sistema modelo de desenvolvimento, os zebrafish são idealmente adequados para estudar o impacto dos fatores ambientais no desenvolvimento. Eles produzem um grande número de embriões fertilizados externamente, o que permite paradigmas precisos de tempo e dosagem em estudos de etanol. Isso, combinado com as capacidades de imagem ao vivo e a conservação genética e de desenvolvimento com humanos, faz do zebrafish um poderoso sistema modelo para estudos de teratologia. Descrito é um protocolo para medir as conc...

Os Distúrbios do Espectro Alcoólica Fetal (FASD) descrevem uma ampla gama de deficiências neurológicas e dismorfimias craniofaciais associadas à exposição embrionária do etanol1. Múltiplos fatores, incluindo tempo e dosagem de exposição ao etanol e fundo genético, contribuem para a variação do FASD2,3. Em humanos, a complexa relação dessas variáveis torna o estudo e a compreensão da etiologia do FASD desafiador. Os modelos animais têm se mostrado cruciais no desenvolvimento da nossa compreensão da base mecanicista da teratogenicidade do etanol. Uma grande variedade de sistemas de modelos animais tem sido usada para estudar múltiplos aspectos do FASD e os resultados têm sido notavelmente consistentes com o que é encontrado em exposição em humanos4. Os sistemas de modelos de roedores são usados para examinar muitos aspectos do FASD, sendo os camundongos os mais comuns5,6,7. A maior parte deste trabalho tem se concentrado em defeitos de desenvolvimento para a exposição precoce do etanol8, embora a exposição posterior ao etanol tenha sido demonstrada para causar anomalias de desenvolvimento também9. Além disso, as capacidades genéticas dos camundongos ajudaram muito em nossa capacidade de sondar os fundamentos genéticos do FASD10,11. Esses estudos em camundongos sugerem fortemente que existem interações gene-etanol com a via sônica de ouriço, sinalização de ácido retinóico, dismutase de superóxido, óxido nítrico sintetizador I, Aldh2 e Fancd28,10,11,12,13,14,15,16,17,18, 19,20,21. Esses estudos mostram que os modelos animais são fundamentais para avançar em nossa compreensão da FASD e seus mecanismos subjacentes.
O zebrafish emergiu como um poderoso sistema modelo para examinar muitos aspectos da teratogênese do etanol22,23. Devido à sua fertilização externa, alta fecundidade, tratério genético e capacidades de imagem ao vivo, os zebrafish são idealmente adequados para estudar fatores como tempo, dosagem e genética da teratogênese do etanol. O etanol pode ser administrado a embriões precisamente encenados e os embriões podem então ser imagem para examinar o impacto direto do etanol durante os processos de desenvolvimento. Este trabalho pode estar relacionado diretamente aos seres humanos, pois os programas genéticos de desenvolvimento são altamente conservados entre zebrafish e humanos e, portanto, podem ajudar a orientar os estudos humanos da FASD24. Embora os zebrafish tenham sido usados para examinar a teratogênese do etanol, a falta de consenso em relatar concentrações embrionárias de etanol torna difícil a comparação com os humanos25. Nos sistemas de mamíferos, os níveis de álcool no sangue correlacionam-se diretamente aos níveis de etanol tecidual26. Muitos dos estudos de zebrafish tratam embriões antes da formação completa de seu sistema circulatório. Sem amostra materna para examinar, é necessário um processo para avaliar as concentrações de etanol para quantificar os níveis de etanol dentro do embrião. Aqui descrevemos um processo para quantificar as concentrações de etanol em um embrião de zebrafish em desenvolvimento usando cromatografia de gás espacial da cabeça.

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	<tbody>
		<tr>
			<td>Air</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Provided by contract to the university</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Analytical Balance</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10204-962</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AutoSampler, CP-8400</td>
			<td>Varian</td>
			<td></td>
			<td>Gas Chromatograph Autosampler</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Chloride</td>
			<td>VWR</td>
			<td>97062-590</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Decon Labs</td>
			<td>2701</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas chromatograph vial with polytetrafluoroethylene/silicone septum and plastic cap 2 mL</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>8010-0198</td>
			<td>Can reuse the vials after cleaning, but not the caps/septa</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas Chromatograph, CP-3800</td>
			<td>Varian</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Helium</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Provided by contract to the university</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HP Innowax capillary column</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>19095N-123I</td>
			<td>30 m x 0.53 mm x 1.0 &#956;m film thick</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyrdogen</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Provided by contract to the university</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium Sulfate (Heptahydrate)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>M63-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentrifuge tube 1.5 mL</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>2682002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette tips 10 &#956;L</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13611106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette tips 1000 &#956;L</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13611127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette tips 200 &#956;L</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13611112</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes 100 mm</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>FB012924</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipetman L p1000L Micropipette</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>FA10006M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipetman L p200L Micropipette</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>FA10005M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipetman L p2L Micropipette</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>FA10001M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polytetrafluoroethylene/silicone septum and plastic cap</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>5190-7021</td>
			<td>Replacement caps/septa for gas chromatograph vials</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Chloride</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>P217-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Phosphate (Dibasic)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BDH9266-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pronase</td>
			<td>VWR</td>
			<td>97062-916</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silica Beads .5 mm</td>
			<td>Biospec Products</td>
			<td>11079105z</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silica Beads 1.0 mm</td>
			<td>Biospec Products</td>
			<td>11079110z</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Bicarbonate</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BDH9280-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S271-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Phosphate (Dibasic)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S374-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Solid-phase microextraction fiber assembly Carboxen/Polydimethylsiloxane</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>57343-U</td>
			<td>Replacement fibers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Star Chromatography Workstation</td>
			<td>Varian</td>
			<td></td>
			<td>Chromatography software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermogreen Low Bleed (LB-2) Septa</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>23154</td>
			<td>Replacement inlet septa</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

quantification of ethanol levels in zebrafish embryos using head space gas chromatography

Distúrbios do Espectro Alcoólica Fetal (FASD) descrevem um contínuo altamente variável de defeitos de desenvolvimento induzidos por etanol, incluindo dismorfiologias faciais e prejuízos neurológicos. Com uma patologia complexa, a FASD afeta aproximadamente 1 em cada 100 crianças nascidas nos Estados Unidos a cada ano. Devido à natureza altamente variável da FASD, os modelos animais têm se mostrado críticos em nossa compreensão mecanicista atual de defeitos de desenvolvimento induzidos por etanol. Um número crescente de laboratórios se concentrou no uso de zebrafish para examinar defeitos de desenvolvimento induzidos por etanol. Os zebrafish produzem um grande número de embriões fertilizados externamente, geneticamente tráteis e translúcidos. Isso permite que os pesquisadores controlem precisamente o tempo e a dosagem da exposição ao etanol em múltiplos contextos genéticos e quantifiquem o impacto da exposição embrionária do etanol por meio de técnicas de imagem ao vivo. Isso, combinado com o alto grau de conservação da genética e do desenvolvimento com humanos, provou que os zebrafish são um modelo poderoso para estudar a base mecanicista da teratogenicidade do etanol. No entanto, os regimes de exposição ao etanol variaram entre diferentes estudos de zebrafish, o que confundiu a interpretação dos dados de zebrafish nesses estudos. Aqui está um protocolo para quantificar as concentrações de etanol em embriões de zebrafish usando cromatografia de gás espacial da cabeça.

Os níveis de etanol sanguíneo não podem ser determinados em zebrafish embrionário siciado precocemente, porque eles não têm um sistema circulatório totalmente formado. Para determinar o nível de concentração de etanol nos embriões de zebrafish, os níveis de etanol são medidos diretamente a partir de tecido embrionário homogeneizado. Para medir adequadamente as concentrações embrionárias de etanol, o volume embrionário deve ser levado em conta. O embrião (gema anexada) fica dentro da corção (casca de ...

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Quantification of Ethanol Levels in Zebrafish Embryos Using Head Space Gas Chromatography

Este trabalho descreve um protocolo para quantificar os níveis de etanol em um embrião de zebrafish usando cromatografia de gás espacial da cabeça de métodos de exposição adequados ao processamento de embriões e análise de etanol.

Quantificação dos níveis de etanol em embriões de zebrafish usando cromatografia de gás espacial da cabeça

Fetal Alcohol Spectrum Disorders (FASD) describe a highly variable continuum of ethanol-induced developmental defects, including facial dysmorphologies ...

Este protocolo é significativo porque ajuda na compreensão da farmacocinética do etanol no desenvolvimento de embriões de zebrafish e isso ajudará a padronizar os regimes de exposição ao etanol em estudos de zebrafish. A principal vantagem de nossa técnica é que permite aos pesquisadores medir rapidamente e reprodutivelmente os níveis de etanol durante o desenvolvimento embrionário, particularmente em embriões onde o suprimento de sangue não está disponível. Este método pode ser facilmente aplicado a outros sistemas de modelo, bem como outros fatores ambientais assumindo a técnica adequada e a configuração do equipamento.Eu esperaria que os indivíduos que executam este protocolo pela primeira vez lutassem com a velocidade necessária para evitar a evaporação do etanol durante o processamento de embriões. Comece transferindo 10 embriões com fluido embrionário extra em tubos de microcentrífugo de 1,5 mililitros marcados com uma linha em um volume de 250 microliters. Adicione água à linha de enchimento.Prepare tubos adicionais de microcentrifuuge para amostras descorriodas. Para remover o acorde, incubar os embriões em uma placa de Petri de 100 milímetros com dois miligramas por mililitro de coquetel de protease em mídia de embriões por 10 minutos. Gire suavemente o prato a cada poucos minutos para quebrar o acorde.Uma vez que todos os embriões estejam livres do acorde, remova-os do coquetel protease e lave-os duas vezes com mídia fresca. Em seguida, transfira os embriões para um prato fresco de 100 milímetros. Quando todas as amostras estiverem prontas para medição de volume, use uma micropipette P200 com a menor ponta possível para remover cuidadosamente todo o líquido ao redor dos embriões.Pesar a água com uma balança com menos de 0,1 miligrama de precisão, em seguida, determinar o volume dos 10 embriões subtraindo o peso da água removida de 250 microliters. Para determinar o volume de um único embrião, divida a diferença em 10. Reúna os embriões dos tanques de acasalamento e coloque-os em uma placa de Petri padrão de 100 milímetros e incubar a placa a 28,5 graus Celsius.Em seis horas após a fertilização, transfira até 100 embriões para um novo prato com mídia embrionária e 1% de etanol ou mídia sozinho. Cubra, mas não sele as placas de Petri e coloque-as em uma incubadora Celsius de 28,5 graus por 18 horas ou até que atinjam 24 horas após a fertilização. Use dois micropipettos P200 definidos para 50 microliters e aspire a solução de coquetel protease em um e água no segundo.Em seguida, coloque rapidamente 10 embriões em um tubo de microcentrífuga de 1,5 mililitro usando uma pipeta de vidro e feche a tampa. Repita este processo para que todas as amostras sejam testadas, controles e embriões tratados com etanol. Trabalhando com uma amostra de cada vez, abra rapidamente a tampa e aspire toda a mídia de embrião residual com uma micropipette P200 definida para 200 microliters.Adicione rapidamente, mas suavemente, e remova os 50 microliters de água, em seguida, adicione os 50 microliters de coquetel protease e feche a tampa do tubo. Deixe a amostra descansar por 10 minutos à temperatura ambiente e adicione rapidamente 450 microliters de cinco cloreto de sódio molar e feche a tampa do tubo. Homogeneize a amostra por vórtice por 10 minutos e transfira dois microlitadores de supernascer para um frasco de cromatografia gasosa.Sele o frasco com uma tampa de politetrafluoroetileno. Após completar o método de inicialização, carregue 436 etanol SPME atual de dois a cinco minutos de funcionamento. metanfetamina do menu de métodos no software de análise para cada amostra na lista de amostras.Preencha a lista de amostras começando com o ar, água e cinco coquetéis de protease de cloreto de sódio molar. Em seguida, entre nas normas do etanol em ordem de 0,3125 a 40 mililitros. Siga os padrões com a segunda rodada de espaços em branco.Insira todas as amostras de sobrenaspentes de embriões homogeneizados a serem testadas da menor e mais alta concentração de etanol prevista e finalize entrando em uma terceira rodada de espaços em branco. Adicione os frascos de cromatografia gasosa ao autosampler na ordem em que as amostras foram inseridas e permita que elas aqueçam por 10 a 15 minutos. Em seguida, inicie as amostras usando o software.Depois de todas as execuções serem concluídas, ative o método de desligamento adicionando uma amostra final na lista de amostras e executando standby.meth. Ressardepois de todos os dados adquiridos durante a execução da amostra. Uma vez que o método de desligamento esteja concluído, clique em cromatograma aberto e abra a pasta com os resultados.As amostras são automaticamente integradas neste programa. Nos resultados, certifique-se de que os picos corretos foram integrados. Uma vez confirmadas todas as amostras, imprima ou exporte os resultados.Plote a altura máxima dos padrões de etanol em um gráfico, em seguida, calcule os valores de inclinação, y-intercept e r ao quadrado. Obtenha o valor do etanol para cada amostra subtraindo a altura máxima da amostra a partir da interceptação y das normas e dividindo esse valor pela inclinação das normas. Para calcular a concentração de etanol nos embriões, calcule o fator de diluição para cada amostra e multiplique o valor amostral do etanol por este fator de diluição.Por fim, calcule as amostras de referência de mídia multiplicando o valor do etanol de mídia por um fator de diluição de 10. Para calcular adequadamente as concentrações embrionárias de etanol, os volumes de embriões tanto em seu acorde quanto removidos de seu chorão foram medidos. Nesta análise, o embrião compreendeu 56% do volume total dentro do chorão.Com base em trabalhos publicados anteriormente, 73,6% foram utilizados como teor de água embrionária para todas as análises apresentadas. Isso resultou em água composta por 0,82 microlitres dos 1,1 microliters de volume embrionário. Do volume total de água, 49% está contido no embrião e 51% no fluido extraembrínico.Para a análise da cromatografia gasosa, foram analisados dois grupos de 15 amostras e os meios com os quais foram tratados medidos cinco vezes por grupo. Os níveis de etanol de mídia foram de 143,6 milimililar para o grupo um e 133,6 mililitros para o grupo dois. As concentrações de etanol dos embriões tiveram uma média de 63,5 milimililar e 53,1 mililitro para os grupos um e dois, respectivamente.Calculou-se uma razão de concentração de etanol embrionário para os níveis de mídia de etanol para cada amostra. O grupo um tinha 44% dos níveis de etanol de mídia, enquanto o grupo tinha 40% dos níveis de etanol de mídia. Os embriões de controle não tratados foram medidos na concentração de etanol de mídia zero mililitro.A coisa mais importante a ser lembrada ao tentar este procedimento é que o processamento dos embriões para análise de GC adequadamente é fundamental, pois o etanol é volátil e evaporará rapidamente. A melhor maneira de realizar esta etapa é descrita, mas precisa ser praticada para desenvolver a memória muscular adequada. Este procedimento ajudará a padronizar os regimes de tratamento do etanol em zebrafish e permitirá que futuros trabalhos dissequem os mecanismos genéticos e celulares da teratogenicidade etanoal.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Measuring Protein Stability in Living Zebrafish Embryos Using Fluorescence Decay After Photoconversion (FDAP)

Measuring Protein Stability in Living Zebrafish Embryos Using Fluorescence Decay After Photoconversion FDAP

Medir a estabilidade da proteína em Viver embriões Zebrafish Usando Fluorescência Decay Após Fotoconversão (FDAP)

Protein stability influences many aspects of biology, and measuring the clearance kinetics of proteins can provide important insights into biological ...

Biologia do Desenvolvimento

Mechanical Vessel Injury in Zebrafish Embryos

Lesão Vessel Mecânica em embriões Zebrafish

Zebrafish (Danio rerio) embryos have proven to be a powerful model for studying a variety of developmental and disease processes.  External development ...

Analyzing In Vivo Cell Migration using Cell Transplantations and Time-lapse Imaging in Zebrafish Embryos

Analyzing In Vivo Cell Migration using Cell Transplantations and Time-lapse Imaging in Zebrafish Embryos

analisando<em&gt; In Vivo</em&gt; Migração celular usando transplantes de células e de imagem Time-lapse em embriões Zebrafish

Cell migration is key to many physiological and pathological conditions, including cancer metastasis. The cellular and molecular bases of cell migration ...

Isolation and Characterization of Single Cells from Zebrafish Embryos

Isolamento e caracterização de células individuais de embriões Zebrafish

The zebrafish (Danio rerio) is a powerful model organism to study vertebrate development. Though many aspects of zebrafish embryonic development have been ...

Development of an Ethanol-induced Fibrotic Liver Model in Zebrafish to Study Progenitor Cell-mediated Hepatocyte Regeneration

Desenvolvimento de um modelo de fígado fibrótica induzida por etanol no peixe-zebra para estudar Progenitor mediada por células de regeneração de hepatócitos

Sustained liver fibrosis with continuation of extracellular matrix (ECM) protein build-up results in the loss of cellular competency of the liver, leading ...

Biosensing Motor Neuron Membrane Potential in Live Zebrafish Embryos

Potencial de membrana de neurônio motor biossensível em embriões vivos de peixe-zebra

The protocols described here are designed to allow researchers to study cell communication without altering the integrity of the environment in which the ...

Induction of Hypoxia in Living Frog and Zebrafish Embryos

Indução de hipóxia em sapos vivos e embriões de peixe-zebra

Here, we introduce a novel system for hypoxia induction, which we developed to study the effects of hypoxia in aquatic organisms such as frog and ...

Visualization of Cellular Electrical Activity in Zebrafish Early Embryos and Tumors

Visualização da atividade elétrica celular no Zebrafish embriões adiantados e tumores

Bioelectricity, endogenous electrical signaling mediated by ion channels and pumps located on the cell membrane, plays important roles in signaling ...

Preparation of Drosophila Larval Samples for Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS)-based Metabolomics

Preparation of Drosophila Larval Samples for Gas Chromatography-Mass Spectrometry GC-MS-based Metabolomics

Preparação de amostras de larvas de Drosophila por cromatografia gasosa / espectrometria de massa (GC-MS)-com base em metabolómica

Recent advances in the field of metabolomics have established the fruit fly Drosophila melanogaster as a powerful genetic model for studying animal ...

Visualizing the Node and Notochordal Plate In Gastrulating Mouse Embryos Using Scanning Electron Microscopy and Whole Mount Immunofluorescence

Visualizando o nó e placa Notochordal em Gastrulating embriões de rato usando microscopia eletrônica e imunofluorescência de montagem inteira

The post-implantation mouse embryo undergoes major shape changes after the initiation of gastrulation and morphogenesis. A hallmark of morphogenesis is ...