Name: quantification of ethanol levels in zebrafish embryos using head space gas chromatography
Uploaded: 2020-02-11T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Quantification of Ethanol Levels in Zebrafish Embryos Using Head Space Gas Chromatography at JoVE.com

La investigación presentada en este artículo fue apoyada por subvenciones previas de los Institutos Nacionales de Salud/Instituto Nacional de Investigación Dental y Craneofacial (NIH/NIDCR) R01DE020884 a J.K.E. y Institutos Nacionales de Salud/Instituto Nacional sobre Abuso de Alcohol y Alcoholismo (NIH/NIAAA) F32AA021320 a C.B.L. y por la subvención actual de los Institutos Nacionales de Salud/Instituto Nacional sobre Abuso de Alcohol (NIH/NIAAA) R00AA023560 a C.B.L. Agradecemos a Rueben Gonzales por proporcionar y ayudar con el análisis de cromatógrafo de gases. Agradecemos a Tiahna Ontiveros y a la Dra. Gina Nobles la asistencia para escribir.

Todos los embriones de pez cebra utilizados en este procedimiento fueron criados y criados siguiendo los protocolos establecidos de la IACUC27. Estos protocolos fueron aprobados por la Universidad de Texas en Austin y la Universidad de Louisville.
NOTA: La línea de pez cebra Tg(fli1:EGFP)y1 se utilizó en este estudio28. Toda el agua utilizada en este procedimiento es agua estéril de ósmosis inversa. Todos los análisis es...

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J., Mangieri, R. A., Dilly, G. A., Gonzales, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microdialysis+of+ethanol+during+operant+ethanol+self-administration+and+ethanol+determination+by+gas+chromatography.">Microdialysis of ethanol during operant ethanol self-administration and ethanol determination by gas chromatography.</a> Journal of Visualized Experiments. (67), e4142 (2012).</li><li>Adalsteinsson, E., Sullivan, E. V., Mayer, D., Pfefferbaum, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+quantification+of+ethanol+kinetics+in+rat+brain.">In vivo quantification of ethanol kinetics in rat brain.</a> Neuropsychopharmacology. 31 (12), 2683-2691 (2006).</li><li>Quertemont, E., Green, H. L., Grant, K. 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L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ethanol-+and+acetaldehyde-mediated+developmental+toxicity+in+zebrafish.">Ethanol- and acetaldehyde-mediated developmental toxicity in zebrafish.</a> Neurotoxicology and Teratology. 26 (6), 769-781 (2004).</li><li>Zhang, C., Ojiaku, P., Cole, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Forebrain+and+hindbrain+development+in+zebrafish+is+sensitive+to+ethanol+exposure+involving+agrin,+Fgf,+and+sonic+hedgehog+function.">Forebrain and hindbrain development in zebrafish is sensitive to ethanol exposure involving agrin, Fgf, and sonic hedgehog function.</a> Birth Defects Research Part A: Clinical and Molecular Teratology. 97 (1), 8-27 (2013).</li></ol>

Como sistema de modelo de desarrollo, el pez cebra es ideal para estudiar el impacto de los factores ambientales en el desarrollo. Producen un gran número de embriones fertilizados externamente, lo que permite paradigmas precisos de sincronización y dosificación en estudios de etanol. Esto, combinado con las capacidades de imagen en vivo y la conservación genética y del desarrollo con los seres humanos, hacen del pez cebra un poderoso sistema modelo para estudios de teratología. Descrito es un protocolo para medir ...

Los Trastornos del Espectro Alcohólico Fetal (TEAF) describen una amplia gama de deficiencias neurológicas y dismorfologías craneofaciales asociadas con la exposición al etanol embrionario1. Múltiples factores, incluyendo el momento y la dosis de la exposición al etanol y los antecedentes genéticos, contribuyen a la variación del TEAF2,3. En los seres humanos, la compleja relación de estas variables hace que estudiar y entender la etiología del TEAF sea un reto. Los modelos animales han demostrado ser cruciales en el desarrollo de nuestra comprensión de la base mecanicista de la teratogenicidad del etanol. Se ha utilizado una amplia variedad de sistemas de modelos animales para estudiar múltiples aspectos del TEAF y los resultados han sido notablemente consistentes con lo que se encuentra en la exposición en humanos4. Los sistemas de modelos de roedores se utilizan para examinar muchos aspectos del FASD, siendo los ratones los5,6,7más comunes. La mayor parte de este trabajo se ha centrado en defectos de desarrollo a la exposición temprana al etanol8, aunque se ha demostrado que la exposición posterior al etanol causa anomalías en el desarrollo también9. Además, las capacidades genéticas de los ratones han ayudado en gran medida en nuestra capacidad de sondear los fundamentos genéticos del TEAF10,11. Estos estudios en ratones sugieren fuertemente que hay interacciones gene-etanol con la vía sónica de erizo, señalización de ácido retinoico, Superóxido dismutasa, óxido nítrico sintasa I, Aldh2 y Fancd28,10,11,12,13,14,15,16,17,18, 19,20,21. Estos estudios muestran que los modelos animales son fundamentales para avanzar en nuestra comprensión del TEAF y sus mecanismos subyacentes.
El pez cebra ha surgido como un potente sistema modelo para examinar muchos aspectos de la teratogénesis del etanol22,23. Debido a su fertilización externa, alta fecundidad, capacidad genética de tractificación y capacidad de imagen en vivo, el pez cebra es ideal para estudiar factores como el momento, la dosificación y la genética de la teratogénesis del etanol. El etanol se puede administrar a embriones escenificados con precisión y los embriones pueden ser imágenados para examinar el impacto directo del etanol durante los procesos de desarrollo. Este trabajo puede estar relacionado directamente con los seres humanos, ya que los programas genéticos de desarrollo están altamente conservados entre los peces cebra y los seres humanos y, por lo tanto, pueden ayudar a guiar los estudios en humanos del TEAF24. Mientras que el pez cebra se ha utilizado para examinar la teratogénesis del etanol, la falta de consenso en la notificación de concentraciones de etanol embrionario hace que la comparación con los seres humanos sea difícil25. En los sistemas de mamíferos, los niveles de alcohol en sangre se correlacionan directamente con los niveles de etanol tisular26. Muchos de los estudios de pez cebra tratan embriones antes de la formación completa de su sistema circulatorio. Sin una muestra materna que examinar, se requiere un proceso para evaluar las concentraciones de etanol para cuantificar los niveles de etanol dentro del embrión. Aquí describimos un proceso para cuantificar las concentraciones de etanol en un embrión de pez cebra en desarrollo utilizando cromatografía de gases del espacio de la cabeza.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Air</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Provided by contract to the university</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Analytical Balance</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10204-962</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AutoSampler, CP-8400</td>
			<td>Varian</td>
			<td></td>
			<td>Gas Chromatograph Autosampler</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Chloride</td>
			<td>VWR</td>
			<td>97062-590</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Decon Labs</td>
			<td>2701</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas chromatograph vial with polytetrafluoroethylene/silicone septum and plastic cap 2 mL</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>8010-0198</td>
			<td>Can reuse the vials after cleaning, but not the caps/septa</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas Chromatograph, CP-3800</td>
			<td>Varian</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Helium</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Provided by contract to the university</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HP Innowax capillary column</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>19095N-123I</td>
			<td>30 m x 0.53 mm x 1.0 &#956;m film thick</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyrdogen</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Provided by contract to the university</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium Sulfate (Heptahydrate)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>M63-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentrifuge tube 1.5 mL</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>2682002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette tips 10 &#956;L</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13611106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette tips 1000 &#956;L</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13611127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette tips 200 &#956;L</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13611112</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes 100 mm</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>FB012924</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipetman L p1000L Micropipette</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>FA10006M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipetman L p200L Micropipette</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>FA10005M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipetman L p2L Micropipette</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>FA10001M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polytetrafluoroethylene/silicone septum and plastic cap</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>5190-7021</td>
			<td>Replacement caps/septa for gas chromatograph vials</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Chloride</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>P217-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Phosphate (Dibasic)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BDH9266-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pronase</td>
			<td>VWR</td>
			<td>97062-916</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silica Beads .5 mm</td>
			<td>Biospec Products</td>
			<td>11079105z</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silica Beads 1.0 mm</td>
			<td>Biospec Products</td>
			<td>11079110z</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Bicarbonate</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BDH9280-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S271-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Phosphate (Dibasic)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S374-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Solid-phase microextraction fiber assembly Carboxen/Polydimethylsiloxane</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>57343-U</td>
			<td>Replacement fibers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Star Chromatography Workstation</td>
			<td>Varian</td>
			<td></td>
			<td>Chromatography software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermogreen Low Bleed (LB-2) Septa</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>23154</td>
			<td>Replacement inlet septa</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

quantification of ethanol levels in zebrafish embryos using head space gas chromatography

Los Trastornos del Espectro Alcohólico Fetal (TEAF) describen un continuo muy variable de defectos del desarrollo inducidos por etanol, incluyendo dismorfologías faciales y deficiencias neurológicas. Con una patología compleja, el TEAF afecta aproximadamente a 1 de cada 100 niños nacidos en los Estados Unidos cada año. Debido a la naturaleza altamente variable del FASD, los modelos animales han demostrado ser críticos en nuestra comprensión mecanicista actual de los defectos de desarrollo inducidos por etanol. Un número cada vez mayor de laboratorios se ha centrado en el uso de peces cebra para examinar defectos de desarrollo inducidos por etanol. Los peces cebra producen un gran número de embriones translúcidos, genéticamente traficados y fertilizados externamente. Esto permite a los investigadores controlar con precisión el tiempo y la dosis de la exposición al etanol en múltiples contextos genéticos y cuantificar el impacto de la exposición al etanol embrionario a través de técnicas de imagen en vivo. Esto, combinado con el alto grado de conservación tanto de la genética como del desarrollo con los seres humanos, ha demostrado que el pez cebra es un modelo potente en el que estudiar la base mecanicista de la teratogenicidad del etanol. Sin embargo, los regímenes de exposición al etanol han variado entre diferentes estudios de pez cebra, lo que ha confundido la interpretación de los datos del pez cebra a través de estos estudios. Este es un protocolo para cuantificar las concentraciones de etanol en embriones de pez cebra utilizando cromatografía de gases del espacio de la cabeza.

Los niveles de etanol en sangre no se pueden determinar en los primeros peces cebra embrionarios, porque carecen de un sistema circulatorio completamente formado. Para determinar el nivel de concentración de etanol en los embriones de pez cebra, los niveles de etanol se miden directamente a partir del tejido embrionario homogeneizado. Para medir adecuadamente las concentraciones de etanol embrionario, debe tenerse en cuenta el volumen embrionario. El embrión (yema unida) se encuentra dentro del coro (cáscara de huevo)...

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Quantification of Ethanol Levels in Zebrafish Embryos Using Head Space Gas Chromatography

Este trabajo describe un protocolo para cuantificar los niveles de etanol en un embrión de pez cebra utilizando cromatografía de gases del espacio de la cabeza a partir de métodos de exposición adecuados para el procesamiento de embriones y el análisis de etanol.

Cuantificación de los niveles de etanol en embriones de pez cebra mediante cromatografía de gases del espacio de cabeza

Fetal Alcohol Spectrum Disorders (FASD) describe a highly variable continuum of ethanol-induced developmental defects, including facial dysmorphologies ...

Este protocolo es significativo porque ayuda a entender la farmacocinética del etanol en el desarrollo de embriones de pez cebra y esto ayudará a estandarizar los regímenes de exposición al etanol en estudios de peces cebra. La principal ventaja de nuestra técnica es que permite a los investigadores medir rápida y reproduciblemente los niveles de etanol durante el desarrollo embrionario, particularmente en embriones donde el suministro de sangre no está disponible. Este método se puede aplicar fácilmente a otros sistemas modelo, así como a otros factores ambientales asumiendo la técnica adecuada y la configuración del equipo.Yo esperaría que las personas que realizan este protocolo por primera vez luchen con la velocidad necesaria para evitar la evaporación del etanol durante el procesamiento de embriones. Comience por transferir 10 embriones con líquido embrionario extra en tubos de microcentrífuga de 1,5 mililitros marcados con una línea a un volumen de 250 microlitros. Agregue agua a la línea de relleno.Prepare tubos de microcentrífuga adicionales para muestras descorionadas. Para eliminar el chorion, incubar los embriones en un plato de Petri de 100 milímetros con dos miligramos por mililitro de cóctel proteasa en medios embrionarios durante 10 minutos. Revuelva suavemente el plato cada pocos minutos para romper el coro.Una vez que todos los embriones estén libres de la coral, retírelos del cóctel proteasa y lávelos dos veces con medios frescos. Luego transfiera los embriones a un plato fresco de 100 milímetros. Cuando todas las muestras estén listas para la medición del volumen, utilice una micropipeta P200 con la punta más pequeña posible para eliminar cuidadosamente todo el líquido alrededor de los embriones.Pesar el agua con una báscula con menos de 0,1 miligramos de precisión, luego determinar el volumen de los 10 embriones restando el peso del agua eliminada de 250 microlitros. Para determinar el volumen de un solo embrión, divida la diferencia entre 10. Reúne los embriones de los tanques de apareamiento y colóquelos en un plato petri estándar de 100 milímetros y luego incuba el plato a 28,5 grados centígrados.A las seis horas después de la fertilización, transfiera hasta 100 embriones a un nuevo plato con medios embrionarios y un 1% de etanol o medios solos. Cubra pero no selle los platos de Petri y colóquelos en una incubadora de 28,5 grados Celsius durante 18 horas o hasta que lleguen a las 24 horas después de la fertilización. Utilice dos micropipetas P200 en 50 microlitros y aspire la solución de cóctel proteasa en una y riegó en la segunda.A continuación, coloque rápidamente 10 embriones en un tubo de microcentrífuga de 1,5 mililitros con una pipeta de vidrio y cierre la tapa. Repita este proceso para que todas las muestras sean probadas, controles y embriones tratados con etanol. Trabajando con una muestra a la vez, abra rápidamente la tapa y aspire todos los medios embrionarios residuales con una micropipeta P200 ajustada a 200 microlitros.Agregue y retire rápidamente las 50 microlitros de agua, luego agregue las 50 microlitros del cóctel de proteasa y cierre la tapa del tubo. Deje reposar la muestra durante 10 minutos a temperatura ambiente y luego agregue rápidamente 450 microlitros de cinco molares de cloruro de sodio y cierre la tapa del tubo. Homogeneizar la muestra mediante vórtices durante 10 minutos y transferir dos microlitros de sobrenadante a un vial de cromatografía de gases.Selle el vial con una tapa de politetrafluoroetileno. Después de completar el método de inicio, cargue 436 spME de etanol actual de dos a cinco minutos de ejecución RG. metanfetamina del menú de métodos en el software de análisis para cada muestra de la lista de muestras.Rellene la lista de muestras comenzando con el aire, el agua y cinco espacios en blanco de cóctel de proteasa de cloruro sódico molar. A continuación, introduzca las normas de etanol en orden de 0.3125 a 40 milimolar. Siga las normas con la segunda ronda de espacios en blanco.Introduzca todas las muestras de sobrenadantes embrionarios homogeneizados que se probarán de menor a mayor concentración de etanol prevista y termine entrando en una tercera ronda de espacios en blanco. Añadir los viales de cromatografía de gases al muestreador automático en el orden en que se introdujeron las muestras y dejar que se calienten durante 10 a 15 minutos. A continuación, inicie las ejecuciones de ejemplo con el software.Una vez completadas todas las ejecuciones, active el método de apagado agregando una muestra final en la lista de ejemplo y ejecutando standby.meth. Realice una copia de seguridad de todos los datos adquiridos durante la ejecución de ejemplo. Una vez completado el método de apagado, haga clic en el cromatograma abierto y abra la carpeta con los resultados.Las muestras se integran automáticamente en este programa. En los resultados, asegúrese de que se han integrado los picos correctos. Una vez confirmadas todas las muestras, imprima o exporte los resultados.Trazar la altura máxima de los estándares de etanol en un gráfico y, a continuación, calcular los valores de pendiente, intercepción y y r al cuadrado. Obtenga el valor de etanol para cada muestra restando la altura máxima de la muestra de la intercepción y de las normas y dividiendo este valor por la pendiente de las normas. Para calcular la concentración de etanol en los embriones, calcule el factor de dilución para cada muestra y multiplique el valor de etanol de la muestra por este factor de dilución.Por último, calcule las muestras de referencia de medios multiplicando el valor del etanol de los medios por un factor de dilución de 10. Para calcular adecuadamente las concentraciones de etanol embrionario, se midieron los volúmenes de embriones tanto en su coro como eliminados de su coro. En este análisis, el embrión comprendía el 56% del volumen total dentro de la tarea.Sobre la base de trabajos publicados anteriormente, el 73,6% se utilizó como contenido de agua embrionaria para todos los análisis presentados. Esto dio lugar a agua que comprendía 0,82 microlitros de los 1,1 microlitros de volumen embrionario. Del volumen total de agua, el 49% está contenido en el embrión y el 51% en el líquido extraembiónónico.Para el análisis de cromatografía de gases, se analizaron dos grupos de 15 muestras y los medios con los que fueron tratados medidos cinco veces por grupo. Los niveles medios de etanol fueron de 143,6 milimolares para el grupo uno y de 133,6 milimolar para el grupo dos. Las concentraciones de etanol de los embriones promediaron 63,5 milimolar y 53,1 milimolar para los grupos uno y dos respectivamente.Se calculó una proporción de concentración de etanol embrionario con niveles medios de etanol para cada muestra. El grupo uno tenía el 44% de los niveles de etanol mediático, mientras que el grupo tenía el 40% de los niveles de etanol mediático. Los embriones de control no tratados se midieron a cero concentración de etanol medios militrolares.Lo más importante a recordar al intentar este procedimiento es que procesar los embriones para el análisis de GC correctamente es crítico, ya que el etanol es volátil y se evaporará rápidamente. Se describe la mejor manera de realizar este paso, pero debe practicarse para desarrollar la memoria muscular adecuada. Este procedimiento ayudará a estandarizar los regímenes de tratamiento del etanol en el pez cebra y permitirá que los trabajos futuros diseccionen los mecanismos genéticos y celulares de la teratogenicidad etano.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Measuring Protein Stability in Living Zebrafish Embryos Using Fluorescence Decay After Photoconversion (FDAP)

Measuring Protein Stability in Living Zebrafish Embryos Using Fluorescence Decay After Photoconversion FDAP

Medición de la estabilidad de proteínas en la sala de embriones de pez cebra Utilizando fluorescencia Decay Después Fotoconversión (FDAP)

Protein stability influences many aspects of biology, and measuring the clearance kinetics of proteins can provide important insights into biological ...

Investigación

Biología del Desarrollo

Mechanical Vessel Injury in Zebrafish Embryos

Lesiones Embarcaciones mecánica en embriones de pez cebra

Zebrafish (Danio rerio) embryos have proven to be a powerful model for studying a variety of developmental and disease processes.  External development ...

Analyzing In Vivo Cell Migration using Cell Transplantations and Time-lapse Imaging in Zebrafish Embryos

Analyzing In Vivo Cell Migration using Cell Transplantations and Time-lapse Imaging in Zebrafish Embryos

analizando<em&gt; En Vivo</em&gt; Migración de células usando trasplantes de células y time-lapse en embriones de pez cebra

Cell migration is key to many physiological and pathological conditions, including cancer metastasis. The cellular and molecular bases of cell migration ...

Isolation and Characterization of Single Cells from Zebrafish Embryos

Aislamiento y caracterización de células individuales a partir de embriones de pez cebra

The zebrafish (Danio rerio) is a powerful model organism to study vertebrate development. Though many aspects of zebrafish embryonic development have been ...

Development of an Ethanol-induced Fibrotic Liver Model in Zebrafish to Study Progenitor Cell-mediated Hepatocyte Regeneration

Desarrollo de un Modelo de hígado fibrótico inducida por etanol en el pez cebra para el Estudio de células progenitoras mediada por la regeneración de hepatocitos

Sustained liver fibrosis with continuation of extracellular matrix (ECM) protein build-up results in the loss of cellular competency of the liver, leading ...

Biosensing Motor Neuron Membrane Potential in Live Zebrafish Embryos

Potencial de membrana de la neurona motora de Biosensing en los embriones vivos de pez cebra

The protocols described here are designed to allow researchers to study cell communication without altering the integrity of the environment in which the ...

Induction of Hypoxia in Living Frog and Zebrafish Embryos

Inducción de la hipoxia en los sapos vivos y los embriones de pez cebra

Here, we introduce a novel system for hypoxia induction, which we developed to study the effects of hypoxia in aquatic organisms such as frog and ...

Visualization of Cellular Electrical Activity in Zebrafish Early Embryos and Tumors

Visualización de la actividad eléctrica celular en embriones tempranos de pez cebra y tumores

Bioelectricity, endogenous electrical signaling mediated by ion channels and pumps located on the cell membrane, plays important roles in signaling ...

Preparation of Drosophila Larval Samples for Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS)-based Metabolomics

Preparation of Drosophila Larval Samples for Gas Chromatography-Mass Spectrometry GC-MS-based Metabolomics

Preparación de muestras de larvas de Drosophila para cromatografía de gases-espectrometría de masas (GC-MS)-base metabolómica

Recent advances in the field of metabolomics have established the fruit fly Drosophila melanogaster as a powerful genetic model for studying animal ...

Visualizing the Node and Notochordal Plate In Gastrulating Mouse Embryos Using Scanning Electron Microscopy and Whole Mount Immunofluorescence

Visualización de la placa notocordal en embriones de ratón Gastrulating con microscopía electrónica e inmunofluorescencia de Monte todo y nodo

The post-implantation mouse embryo undergoes major shape changes after the initiation of gastrulation and morphogenesis. A hallmark of morphogenesis is ...