Name: oaaep1-mediated enzymatic synthesis and immobilization of polymerized protein for single-molecule force spectroscopy
Uploaded: 2020-02-05T14:30:00
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इस काम को चीन के नेशनल नेचुरल साइंस फाउंडेशन (ग्रांट नंबर 21771103, 21977047), जियांग्सू प्रांत के नेचुरल साइंस फाउंडेशन (ग्रांट नंबर एक) ने सपोर्ट किया। बीके20160639) और जियांग्सू प्रांत का शुआंगचुआंग कार्यक्रम।

1. प्रोटीन उत्पादन
<ol><li>
जीन क्लोन
	<ol>
<li>ब्याज के प्रोटीन (पीओआई): यूबिक्विटिन, रूबेडॉक्सिन (आरडी)51,सेल्यूलोज-बाइंडिंग मॉड्यूल (सीबीएम), डॉकरिन-एक्स डोमेन (एक्सडॉक) और रूमिनोकोकस फ्लैवफैक्स...

हमने एंजाइमैटिक बायोसिंथेसिस और पॉलीप्रोटीन के स्थिरीकरण के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन किया है और एएफएम-आधारित एसएमएफएस द्वारा पॉलीप्रोटीन डिजाइन का सत्यापन किया है। यह पद्धति एक डिजाइन किए गए अनुक?...

सिंथेटिक पॉलिमर की तुलना में, प्राकृतिक बहु-डोमेन प्रोटीन में एक समान संरचना होती है जिसमें एक अच्छी तरह से नियंत्रित संख्या और उपडोमेन1का प्रकार होता है। इस विशेषता से आमतौर पर जैविक कार्य में सुधार होता है और स्थिरता2,3होती है . साइस्टीन आधारित डिसुल्फिफाइड बॉन्ड कपलिंग और रिकॉम्बिनेंट डीएनए तकनीक जैसे कई दृष्टिकोणों को कई डोमेन4,5,6,7के साथ इस तरह के बहुलीकृत प्रोटीन के निर्माण के लिए विकसित किया गया है। हालांकि, पूर्व विधि हमेशा एक यादृच्छिक और अनियंत्रित अनुक्रम में परिणाम है, और बाद में एक विषाक्त और बड़े आकार के प्रोटीन की अतिअभिव्यक्ति के लिए कठिनाई और कोफैक्टर और अन्य नाजुक एंजाइमों के साथ जटिल प्रोटीन की शुद्धि सहित अन्य समस्याओं की ओर जाता है।
इस चुनौती का सामना करने के लिए, हम एक एंजाइमैटिक विधि विकसित करते हैं जो एक प्रोटीन लिगाज ओएएईपी 1का उपयोग करके एक स्टेपवाइज फैशन में पॉलीमर/पॉलीप्रोटीन के लिए एक साथ प्रोटीन मोनोमर को एक साथ संजोए रखताहै। OaAEP1 एक सख्त और कुशल एंडोपेप्टिडास है। दो प्रोटीन को 30 से कम समय में OaAEP1 द्वारा दो टर्मिनी के माध्यम से Asn-Gly-Leu अनुक्रम (NGL) के रूप में सहसंयोजक के रूप में जोड़ा जा सकता है अगर एन-टर्मिनस ग्ली-ली-एलयू अवशेष (जीएल) है और जिसमें से अन्य सी-टर्मिनस एनजीएल अवशेष10है । हालांकि, केवल प्रोटीन मोनोमर को जोड़ने के लिए OaAEP1 का उपयोग साइस्टीन आधारित युग्मन विधि जैसे अनियंत्रित अनुक्रम के साथ प्रोटीन बहुलक की ओर जाता है। इसलिए, हम प्रोटीन इकाई के एन-टर्मिनस को हटाने योग्य टीईवी प्रोटीज़ साइट के साथ-साथ ENLYFQ/G-L-POI के रूप में एक ल्यूसिन अवशेषों के साथ डिजाइन करते हैं । टीईवी क्लीवेज से पहले, एन-टर्मिनल OaAEP1 लिगेशन में भाग नहीं लेगा। और फिर एन-टर्मिनस में जीएल अवशेष, जो आगे OaAEP1 लिगेशन के साथ संगत हैं, TEV दरार के बाद उजागर होता है। इस प्रकार, हमने अपेक्षाकृत अच्छी तरह से नियंत्रित अनुक्रम के साथ पॉलीप्रोटीन की एक अनुक्रमिक एंजाइमैटिक बायोसिंथेसिस विधि हासिल की है।
यहां, हमारे स्टेपवाइज एंजाइमैटिक संश्लेषण विधि का उपयोग पॉलीप्रोटीन नमूना तैयारकरने में किया जा सकता है, जिसमें अनुक्रम-नियंत्रित और अनियंत्रित, और एकल अणु अध्ययनों के लिए प्रोटीन स्थिरीकरण भी शामिल है, विशेष रूप से जटिल प्रणाली के लिए जैसे मेटलोप्रोटीन।
इसके अलावा, एएफएम आधारित एसएमएफएस प्रयोग हमें एकल अणु स्तर पर प्रोटीन बहुलक निर्माण और स्थिरता की पुष्टि करने की अनुमति देते हैं । एएफएम, ऑप्टिकल ट्वीजर और मैग्नेटिक ट्वीजर सहित एकल अणु बल स्पेक्ट्रोस्कोपी, नैनो में एक सामान्य उपकरण है जो यांत्रिक रूप से जैव अणु में हेरफेर करता है और उनकी स्थिरता को मापताहै 11,12,13,14,15,16, 17,18,19,20। एकल अणु एएफएम का व्यापक रूप से प्रोटीन (यूएन) फोल्डिंग21,22,23,24,25,रिसेप्टर-लिगामेंट इंटरैक्शन26,27,28,29,30,31,32,33,34के अध्ययन में व्यापक रूप से उपयोग किया गयाहै, 35, अकार्बनिक रासायनिक बॉन्ड20,36,37,38,39,40,41,42,43 औरमेटललोप्रोटीन44,45,46,47,48,49,50 में धातु-लिगलैंड बॉन्ड . यहां, एकल अणु AFM इसी प्रोटीन खुलासा संकेत के आधार पर संश्लेषित पॉलीप्रोटीन अनुक्रम को सत्यापित करने के लिए प्रयोग किया जाता है ।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>iron (III) chloride hexahydrate</td>
			<td>Energy chemical</td>
			<td></td>
			<td>99%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zinc chloride</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td></td>
			<td>100.00%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>calcium chloride hydrate</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td></td>
			<td>99.9965% crystalline aggregate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Ascorbic Acid</td>
			<td>Sigma Life Science</td>
			<td></td>
			<td>Bio Xtra, &#8805;99.0%, crystalline</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>(3-Aminopropyl) triethoxysilane</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td></td>
			<td>&#8805;99%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sulfosuccinimidyl 4-(N-maleimidomethyl) cyclohexane-1-carboxylate</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td></td>
			<td>90%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Macklin</td>
			<td></td>
			<td>99%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5,5&#39;-dithiobis(2-nitrobenzoic acid)</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Genes</td>
			<td>Genscript</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanowizard 4 AFM</td>
			<td>JPK Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MLCT cantilever</td>
			<td>Bruker Corp</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mono Q 5/50 GL</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AKTA FPLC system</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass coverslip</td>
			<td>Sail Brand</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanodrop 2000</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Avanti JXN-30 Centrifuge</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gel Image System</td>
			<td>Tanon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

oaaep1-mediated enzymatic synthesis and immobilization of polymerized protein for single-molecule force spectroscopy

हाल के वर्षों में रासायनिक और जैव-संयोजन तकनीकों को तेजी से विकसित किया गया है और प्रोटीन पॉलिमर के निर्माण की अनुमति देता है। हालांकि, एक नियंत्रित प्रोटीन बहुलीकरण प्रक्रिया हमेशा एक चुनौती है। यहां, हमने तर्कसंगत रूप से नियंत्रित अनुक्रम में कदम से बहुलक प्रोटीन कदम के निर्माण के लिए एक एंजाइमैटिक पद्धति विकसित की है। इस विधि में, प्रोटीन मोनोमर का सी-टर्मिनस ओएएईपी 1(ओल्डेंलैंडिया एफिडेनिसिस शतावरील एंडोपेप्टिडेस)1) का उपयोग करके प्रोटीन संयुग्मन के लिए एनजीएल है जबकि एन-टर्मिनस अस्थायी एन-टर्मिनल की रक्षा के लिए एक क्लेवबल टीईवी (तंबाकू etch वायरस) दरार साइट प्लस एक एल (ENLYFQ/GL) था। नतीजतन, OaAEP1 एक समय में केवल एक प्रोटीन मोनोमर जोड़ने में सक्षम था, और फिर TEV प्रोटीज क्यूऔर जी के बीच एन-टर्मिनस cleaved एनएच 2-Gly-Leu बेनकाब करने के लिए । फिर यूनिट अगले OaAEP1 लिगेशन के लिए तैयार है। इंजीनियर पॉलीप्रोटीन की जांच परमाणु बल माइक्रोस्कोपी आधारित एकल अणु बल स्पेक्ट्रोस्कोपी (एएफएम-एसएमएफएस) का उपयोग करके व्यक्तिगत प्रोटीन डोमेन का खुलासा करके की जाती है । इसलिए, यह अध्ययन पॉलीप्रोटीन इंजीनियरिंग और स्थिरीकरण के लिए एक उपयोगी रणनीति प्रदान करता है।

OaAEP1 लिगेशन द्वारा आसन्न प्रोटीन के बीच पेश किए गए एनजीएल अवशेष बहुलक में प्रोटीन मोनोमर स्थिरता को प्रभावित नहीं करेंगे क्योंकि खुलासा बल (<Fu>), और समोच्च लंबाई वृद्धि (<ALc>) पिछले अध्ययन(चि?...

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OaAEP1-Mediated Enzymatic Synthesis and Immobilization of Polymerized Protein for Single-Molecule Force Spectroscopy

यहां, हम एक नियंत्रित अनुक्रम के साथ प्रोटीन बहुलक बनाने एंजाइमों द्वारा प्रोटीन मोनोमर को संजन्य करने के लिए एक प्रोटोकॉल पेश करते हैं और इसे एकल-अणु बल स्पेक्ट्रोस्कोपी अध्ययनों के लिए सतह पर स्थिर करते हैं।

OaAEP1-मध्यस्थता एंजाइमैटिक संश्लेषण और एकल अणु बल स्पेक्ट्रोस्कोपी के लिए बहुलक प्रोटीन के Immobilization

Chemical and bio-conjugation techniques have been developed rapidly in recent years and allow the building of protein polymers. However, a controlled ...

हमारी एंजाइमेटिक विधि पॉलीमराइजेशन डिग्री की एक नियंत्रित संख्या के साथ प्रोटीन ओलिगोमर का उपयोग करें। यह एकल अणु बल स्पेक्ट्रोस्कोपी अध्ययन के साथ-साथ प्रोटीन आधारित सामग्री निर्माण के लिए एक आदर्श नमूना तैयारी है। हमारी विधि लक्षित प्रोटीन के लिए सिस्टीन पेश नहीं करती है।क्योंकि सिस्टीन प्रोटीन के लिए सबसे महत्वपूर्ण कार्यात्मक अवशेषों में से एक है, यह बहुलक पदार्थ प्रोटीन या एंजाइमों के निर्माण की सुविधा प्रदान करता है। प्रक्रिया का प्रदर्शन Yibing देंग और शेंगचाओ शि, मेरी प्रयोगशाला से स्नातक छात्रों होगा । शुरू करने के लिए, एक बीकर में 40 मिलीलीटर अल्ट्रापुरे पानी में 20 ग्राम पोटेशियम क्रोमेट घोलें।धीरे-धीरे पोटेशियम डिक्रोमेट समाधान में केंद्रित सल्फ्यूरिक एसिड के 360 मिलीलीटर जोड़ें और धीरे-धीरे हलचल करने के लिए ग्लास रॉड का उपयोग करें। क्रोमिक एसिड में एक ग्लास कवरलिप रखें और इसे 30 मिनट के लिए 80 डिग्री सेल्सियस पर ओवन में स्थानांतरित करें। कवरस्लिप को पानी से साफ करें और फिर निरपेक्ष एथिल अल्कोहल और नाइट्रोजन की धारा के साथ कवरस्लिप को सुखा लें।पूरी तरह से कमरे के तापमान पर एक घंटे के लिए मात्रा APTES toluene समाधान द्वारा 1% मात्रा में कवरलिप विसर्जित करते हुए उन्हें प्रकाश से बचाने के लिए। कवरलिप को पहले टोल्यून के साथ धोएं और फिर पूर्ण एथिल अल्कोहल के साथ और नाइट्रोजन की धारा के साथ कवरस्लिप को सुखाएं। 15 मिनट के लिए 80 डिग्री सेल्सियस पर कवरस्लिप को इनक्यूबेट करें और फिर इसे कमरे के तापमान तक ठंडा होने दें।दो स्थिर कवर्लिप्स के बीच DMSO समाधान में मिलीलीटर सल्फो-एसएमसीसी प्रति मिलीलीटर सल्फो-एसएमसीसी के 200 माइक्रोलीटर जोड़ने के लिए एक पिपेट का उपयोग करें और प्रकाश से संरक्षित एक घंटे के लिए इनक्यूबेट करें। एक घंटे के बाद, अवशेष सल्फो-एसएमसीसी को हटाने के लिए पहले डीएमएसओ के साथ कवरस्लिप धोएं और फिर पूर्ण एथिल अल्कोहल के साथ। नाइट्रोजन की धारा के नीचे कवरस्लिप को सुखाएं।पिपेट 60 माइक्रोलीटर के 200 माइक्रोमोलर जीएल-ईएलपी-50 सिस-प्रोटीन समाधान पर एक कार्यात्मक कवरस्लिप पर और लगभग तीन घंटे के लिए 25 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट। उसके बाद, अप्रतिक्रियाकृत जीएल-ईएलपी-50-सीवाई को हटाने के लिए कवरस्लिप को अल्ट्रापुरे पानी से धोएं। कार्यात्मक कैंटिलीवर सतह तैयार करने के लिए, पहले क्रोमिक एसिड में कैंटिलीवर विसर्जित करें और 10 मिनट के लिए 80 डिग्री सेल्सियस पर कैंटिलीवर को साफ करें।एसिड को धोने के लिए पानी और निरपेक्ष एथिल अल्कोहल का उपयोग करें। एक घंटे के लिए प्लास्टिक ट्यूब कैप में अमीनो सैलिनाइजेशन करने के लिए वॉल्यूम एपीटीईएस टोल्यूईन समाधान द्वारा 1% वॉल्यूम के साथ कैंटिलीवर विसर्जित करें। निरपेक्ष एथिल अल्कोहल के साथ कैंटिलीवर कुल्ला और फिर 15 मिनट के लिए 80 डिग्री सेल्सियस पर कैंटिलीवर सेंकना।एक घंटे के लिए सल्फो-एसएमसीसी समाधान में कैंटिलीवर विसर्जित करें और फिर निरपेक्ष एथिल अल्कोहल के साथ कैंटिलीवर कुल्ला करें। सीइएसएस-ईएलपी-50-एनजीएल को सतह से जोड़ने के लिए, 1.5 घंटे के लिए सुल्फो-एसएमसीसी के मलेमाइड समूह के साथ सीइंस-ईएलपी-50-एनजीएल में कैंटिलीवर्स विसर्जित करें। फिर अपरा पानी द्वारा कैंटिलीवर पर अप्रतिम सीइएसएस-ईएलपी-50-एनजीएल को धो लें।इसके बाद, 200 नैनोमोलर जीएईपी1 के साथ 50 माइक्रोमोलर जीएल-सीबीएम-एक्सडोकरिन प्रोटीन समाधान के 200 माइक्रोलीटर वाले समाधान में एक कार्यात्मक कैंटिलीवर विसर्जित करें और उन्हें 20 से 30 मिनट के लिए 25 डिग्री सेल्सियस पर रखें। फिर अट्रैक्ट किए गए प्रोटीन को धोने के लिए एएफएम बफर का उपयोग करें। एएफएम प्रयोग से पहले अप्रतिबद्ध अवशिष्ट प्रोटीन को धोना महत्वपूर्ण है क्योंकि यह सतह पर नए प्रोटीन लेने के लिए एक कोहेसिन-डॉकरिन जोड़े और ब्लॉक कैंटिलीवर बनाएगा।ब्याज की लिगेशन यूनिट कोहेसिन-टी-एल-प्रोटीन को कवरस्लिप सतह पर स्थिर जीएल-ईएलपी-50 से जोड़ने के लिए, कवरस्लिप पर OaEP1 के 15 माइक्रोलीटर जोड़ें और इसे 30 मिनट के लिए इनक्यूबेट करें। किसी भी अप्रतिक्रियाकृत प्रोटीन को धोने के लिए एएफएम बफर के 15 से 20 मिलीलीटर का उपयोग करें। 25 डिग्री सेल्सियस पर एक घंटे के लिए TEV मांयता स्थल पर प्रोटीन इकाई क्लीव करने के लिए TEV प्रोटीज के १०० माइक्रोलीटर जोड़ें ।फिर अवशिष्ट प्रोटीन को धोने के लिए 15 से 20 मिलीलीटर एएफएम बफर का उपयोग करें। ब्याज की लिगेशन यूनिट कोहेसिन-टी-एल-प्रोटीन को जीएल-सर्वव्यापकइन-एनजीएल ग्लास से 10 मिनट के लिए OaEP1 से लिंक करें । प्रोटीन के आधार पर कांच की सतह पर बनाया जाने वाला जीएल-सर्वव्यापकता-एनजीएल का निर्माण करता है, पॉलीप्रोटीन तैयारी चरणों को दोहराएं।प्रोटीन बहुलक पर कोहेसिन-तेवी-एल-सर्वव्यापकता-एन-एनजीएल ग्लास के रूप में रिजर्व कोहेसिन के लिए अंतिम तेव दरार प्रतिक्रिया को छोड़ दें। एएफएम फ्लूइड चैंबर में 10 मिलीमोलर कैल्शियम क्लोराइड और पांच मिलीमोलर एस्कॉर्बिक एसिड के साथ एएफएम बफर का एक मिलीलीटर जोड़ें। प्रयोग के लिए कार्यात्मक एएफएम जांच का डी टिप चुनें।एएफएम बफर में जांच विसर्जित कर दिया । सतह से प्रति सेकंड 400 नैनोमीटर के निरंतर वेग पर कैंटिलीवर को वापस लें। इस दौरान फोर्स एक्सटेंशन कर्व को 4 हजार हर्ट्ज के सैंपल रेट पर रिकॉर्ड करें।प्रत्येक प्रयोग से पहले एक सटीक वसंत स्थिर कश्मीर मूल्य के साथ एएफएम बफर में कैंटिलीवर को कैलिब्रेट करने के लिए इक्विपर्टिशन प्रमेय का उपयोग करें। कोहेसिन-डॉकरिन जोड़ी बनाने के लिए कोहेसिन के साथ कार्यात्मक प्रोटीन जमा सतह के साथ डॉकरिन के साथ कार्यात्मक कैंटिलीवर टिप संलग्न करें। फिर जेपीके डेटा प्रोसेसिंग सॉफ्टवेयर खोलें और विशेषता सॉटूथ जैसे पैटर्न और एक उच्च टुकड़ी बल के साथ बल विस्तार वक्र का चयन करें।इस अध्ययन में, OaAEP1 ligation द्वारा आसन्न प्रोटीन के बीच शुरू किए गए एनजीएल अवशेषों ने बहुलक में प्रोटीन मोनोमर स्थिरता को प्रभावित नहीं किया क्योंकि खुलासा बल और कॉन्ट्रा-लेंथ वेतन वृद्धि पिछले अध्ययन के साथ तुलनीय थी । फेरिक फॉर्म रूब्रेडॉक्सिन के शुद्धिकरण ने 495 नैनोमीटर और 575 नैनोमीटर पर विशिष्ट यूवी-विज़ुअल अवशोषण चोटियों को प्रस्तुत किया जबकि जिंक फॉर्म नहीं था। स्टेपवाइज पाचन और लिगामेंटेशन के एसडीएस-पेज जेल परिणाम एकजुट टीईवी-एल-सर्वव्यापकता, टीईवी क्लीवेज का परिणाम प्रोटीन मिश्रण, शुद्ध GFP-TEV-protease, और शुद्ध उत्पाद जीएल-सर्वव्यापकइन दिखाते हैं।क्लीव्ड जीएल-सर्वव्यापकता और कोहेसिन-तेव-एल-सर्वव्यापकता मिश्रण के साथ या OaAEP1 और शुद्ध OaAEP1 के बिना भी दिखाया गया है। सफलतापूर्वक पेप्टाइड लगाव के लिए सक्रिय सल्फो-एसएमसीसी के साथ सतह को कार्यात्मक करना महत्वपूर्ण है। यहां हम पॉलीमराइज्ड प्रोटीन बनाने के लिए एक नई विधि प्रदान करते हैं।यह शोधकर्ताओं को एकल अणु बल स्पेक्ट्रोस्कोपी का उपयोग करके जटिल प्रोटीन प्रणाली का अध्ययन करने की सुविधा प्रदान करता है । क्रोमिक एसिड दृढ़ता से संक्षारक और अम्लीय होता है। जब आप इसे तैयार करते हैं और संभालते हैं तो सावधान रहें।

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Rapid One-step Enzymatic Synthesis and All-aqueous Purification of Trehalose Analogues

रैपिड एक कदम एंजाइमी संश्लेषण और Trehalose analogues के सभी जलीय शोधन

Chemically modified versions of trehalose, or trehalose analogues, have applications in biology, biotechnology, and pharmaceutical science, among other ...

High Precision FRET at Single-molecule Level for Biomolecule Structure Determination

बायोमोलेस्क्यू संरचना निर्धारण के लिए एकल अणु स्तर पर उच्च शुद्धता FRET

A protocol on how to perform high-precision interdye distance measurements using F&#246;rster resonance energy transfer (FRET) at the single-molecule ...

Force Spectroscopy of Single Protein Molecules Using an Atomic Force Microscope

एक परमाणु बल माइक्रोस्कोप का उपयोग कर एकल प्रोटीन अणुओं के बल स्पेक्ट्रोस्कोपी

The determination of the folding process of proteins from their amino acid sequence to their native 3D structure is an important problem in biology. ...

Single-molecule Manipulation of G-quadruplexes by Magnetic Tweezers

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Using Three-color Single-molecule FRET to Study the Correlation of Protein Interactions

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Single-molecule F&#246;rster resonance energy transfer (smFRET) has become a widely used biophysical technique to study the dynamics of biomolecules. For ...

Covalent Immobilization of Proteins for the Single Molecule Force Spectroscopy

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In recent years, atomic force microscopy (AFM) based single molecule force spectroscopy (SMFS) extended our understanding of molecular properties and ...

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प्रोसिटोम एकल अणु स्तर पर लेबलिंग एकरूपता का व्यापक परिमाणन

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रिबोसोम प्रोटीन संश्लेषण का एकल अणु फ्लोरेसेंस एनर्जी ट्रांसफर अध्ययन

The ribosome is a large ribonucleoprotein complex that assembles proteins processively along mRNA templates. The diameter of the ribosome is approximately ...