大鼠的肠系膜上动脉插管很难,并且不常用作实验模型。该技术使得进行功能性插管成为可能,并开辟了动脉内药物首次通过效应的实验领域。这种方法避免了出血和血栓形成,同时同意肠系膜上动脉的插管。
并允许在相对自由的动物中长期输注药物,这些动物可以进食和移动。对肠道活性药物的药理学研究可能从这种技术中受益匪浅。没有其他方法可以研究药物直接单次通过的效果。
首先切开较大的套管。然后切开较小的套管,并将其插入较大的套管中一厘米。用氰基丙烯酸酯胶将两个插管固定在一起,避免腔内堵塞。
之后,将较大套管的自由末端连接到安装在装有盐水溶液的一毫升注射器上的鲁尔短截线适配器。用剪刀磨尖较小套管的自由尖端,以促进导管插入肠系膜上动脉的分支。通过用生理盐水冲洗来检查套管的通畅性。
剃掉麻醉大鼠手术区域的皮毛,包括肠系膜上动脉分支或SMA插管的腹部,以及用于套管出口的颈部后部。无菌清洁手术区域。并将动物置于仰卧位置,使四肢固定。
使用手术刀刀片打开腹壁,在中观胃区域的中线上用一个三厘米的直切口,穿过所有腹部平面进入腹膜。将用盐水浸泡的纱布放在剖腹手术切口周围,使用缝合线保持手术切口打开。使用棉签识别并暴露小肠,并将肠系膜从剖腹手术中取出,并将其向下铺在纱布上。
通过感觉脉动来识别 SMA。使用棉签分离肠系膜脂肪,揭开SMA及其近端分支的两到三个。选择 SMA 的近端分支,该分支足够大,可以进行插管手术操作。
将这个分支绑在离其原点下游三到四厘米的地方,通过保持缝合线末端足够长以备以后操作来使其膨胀。在SMA分支下方放置一个刚性支撑,并使用镊子固定较小套管的末端,然后用另一只手拉动缝合线末端以拉紧血管并促进导管进入。保持套管尖端与血管平面成20度角,方向与血流相反。
然后轻轻按压尖端以穿透动脉壁并插入套管。继续在靠近SMA原点的动脉分支中插入插管一厘米。用手术打结将套管固定在动脉上,并通过冲洗一毫升无菌盐水溶液或血液采样来验证其正确功能。
在颈部后部做一个一厘米的切口,并容纳一个球形瓣膜。然后通过皮下组织将插管从剖腹手术通道传递到放置在颈部的瓣膜,并用导管塞关闭套管的远端肢体以避免空气流入。更换腹腔内的小瓣膜,闭合腹壁。
然后用缝线将瓣膜固定到下一个皮肤上。给老鼠穿上夹克,以保护按钮阀。输液过程中用钢棒保护套管的暴露部分,并将其固定在阀门上。
将套管的远端连接到充满50毫升无菌盐水溶液的弹性泵,然后输注24小时。输液后,通过从老鼠身上取下泵,夹套,钢棒和阀门来拆卸动物的外部输液系统。闭合并切开套管,因为它从颈部出来,伤口缝合后将四肢留在颈部皮肤下。
在这项研究中,15只大鼠接受了这种手术,平均每日食物和水的摄入量逐渐增加,直到三天后恢复正常。体重增加也是有规律的,并逐渐增加,直到观察期结束。24小时后,只有两个气球泵中有盐水残留物,而其他13个则完全空置。
此外,输注期过后,12个插管仍然具有血液采样和盐水输注的功能,而三个插管不再是专利。在尸检时,100%的插管位于SMA分支中。没有大鼠有肠缺血或腹腔出血的迹象。
通过将碘化造影剂注射到肠系膜插管中,在五只大鼠中获得了血管造影。在没有造影剂在腹部扩散的情况下观察到肠系膜动脉圈,特别是SMA及其主要分支,确认套管位置良好并固定在SMA的分支上。专利,细致的分支荒凉,以通过血管下方的缝合线向下游的血管套管结扎,并选择最合适的位置刺穿和插入套管是该协议最重要的方面。
错误是不可纠正的。