Name: muscle velocity recovery cycles to examine muscle membrane properties
Uploaded: 2020-02-19T14:00:00
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Questo studio è stato sostenuto finanziariamente principalmente dalle due sovvenzioni della Lundbeck Foundation (numero di concessione R191-2015-931 e numero di sovvenzione R290-2018-751). Inoltre, lo studio è stato sostenuto finanziariamente dal Novo Nordisk Foundation Challenge Programme (numero di sovvenzione NNF14OC0011633) come parte del Consorzio Internazionale di Neuropatia Diabetica.

Tutti i soggetti devono fornire il consenso scritto prima dell'esame e il protocollo deve essere approvato dall'appropriato comitato di revisione etica locale. Tutti i metodi qui descritti sono stati approvati dal Comitato Etico Scientifico Regionale e dall'Agenzia danese per la protezione dei dati.
1. Preparazione del soggetto
<ol><li>Valutare le storie mediche dei soggetti per assicurarsi che non abbiano disturbi del sistema nervoso precedenti diversi dal gruppo di malattie che verrà stud...

<ol>
	<li>Tankisi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology+inferred+from+electrodiagnostic+nerve+tests+and+classification+of+polyneuropathies.+Suggested+guidelines.">Pathophysiology inferred from electrodiagnostic nerve tests and classification of polyneuropathies. Suggested guidelines.</a> Clinical Neurophysiology. 116 (7), 1571-1580 (2005).</li><li>Gregorio, C. C., Hudecki, M. S., Pollina, C. M., Repasky, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+denervation+on+spectrin+concentration+in+avian+skeletal+muscle.">Effects of denervation on spectrin concentration in avian skeletal muscle.</a> Muscle and Nerve. 11 (4), 372-379 (1988).</li><li>Kotsias, B. A., Venosa, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+sodium+and+potassium+permeabilities+in+the+depolarization+of+denervated+rat+muscle+fibers.">Role of sodium and potassium permeabilities in the depolarization of denervated rat muscle fibers.</a> Journal of Physiology. 392, 301-313 (1987).</li><li>Kirsch, G. E., Anderson, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sodium+channel+kinetics+in+normal+and+denervated+rabbit+muscle+membrane.">Sodium channel kinetics in normal and denervated rabbit muscle membrane.</a> Muscle and Nerve. 9 (8), 738-747 (1986).</li><li>Stalberg, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Propagation+velocity+in+human+muscle+fibers+in+situ.">Propagation velocity in human muscle fibers in situ.</a> Acta Physiologica Scandinava Supplementum. 287, 1 (1966).</li><li>Mihelin, M., Trontelj, J. V., Stalberg, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+fiber+recovery+functions+studied+with+double+pulse+stimulation.">Muscle fiber recovery functions studied with double pulse stimulation.</a> Muscle and Nerve. 14 (8), 739-747 (1991).</li><li>Z'Graggen, W. J., Bostock, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Velocity+recovery+cycles+of+human+muscle+action+potentials+and+their+sensitivity+to+ischemia.">Velocity recovery cycles of human muscle action potentials and their sensitivity to ischemia.</a> Muscle and Nerve. 39 (5), 616-626 (2009).</li><li>Bostock, H., Tan, S. V., Boerio, D., Z'Graggen, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validity+of+multi-fiber+muscle+velocity+recovery+cycles+recorded+at+a+single+site+using+submaximal+stimuli.">Validity of multi-fiber muscle velocity recovery cycles recorded at a single site using submaximal stimuli.</a> Clinical Neurophysiology. 123 (11), 2296-2305 (2012).</li><li>Z'Graggen, W. J., Troller, R., Ackermann, K. A., Humm, A. M., Bostock, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Velocity+recovery+cycles+of+human+muscle+action+potentials:+repeatability+and+variability.">Velocity recovery cycles of human muscle action potentials: repeatability and variability.</a> Clinical Neurophysiology. 122 (11), 2294-2299 (2011).</li><li>Lee, J. H. F., Boland-Freitas, R., Ng, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sarcolemmal+excitability+changes+in+normal+human+aging.">Sarcolemmal excitability changes in normal human aging.</a> Muscle and Nerve. 57 (6), 981-988 (2018).</li><li>Lee, J. H. F., Boland-Freitas, R., Ng, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiological+differences+in+sarcolemmal+excitability+between+human+muscles.">Physiological differences in sarcolemmal excitability between human muscles.</a> Muscle and Nerve. 60 (4), 433-436 (2019).</li><li>Humm, A. M., Bostock, H., Troller, R., Z'Graggen, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+ischaemia+in+patients+with+orthostatic+hypotension+assessed+by+velocity+recovery+cycles.">Muscle ischaemia in patients with orthostatic hypotension assessed by velocity recovery cycles.</a> Journal of Neurology, Neurosurgery and Psychiatry. 82 (12), 1394-1398 (2011).</li><li>Z'Graggen, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Velocity+recovery+cycles+of+human+muscle+action+potentials+in+chronic+renal+failure.">Velocity recovery cycles of human muscle action potentials in chronic renal failure.</a> Clinical Neurophysiology. 121 (6), 874-881 (2010).</li><li>Z'Graggen, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+membrane+dysfunction+in+critical+illness+myopathy+assessed+by+velocity+recovery+cycles.">Muscle membrane dysfunction in critical illness myopathy assessed by velocity recovery cycles.</a> Clinical Neurophysiology. 122 (4), 834-841 (2011).</li><li>Lee, J. H., Boland-Freitas, R., Liang, C., Ng, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sarcolemmal+depolarization+in+sporadic+inclusion+body+myositis+assessed+with+muscle+velocity+recovery+cycles.">Sarcolemmal depolarization in sporadic inclusion body myositis assessed with muscle velocity recovery cycles.</a> Clinical Neurophysiology. 19 (31205-2), 1388 (2019).</li><li>Tan, S. V., Z'Graggen, W. J., Hanna, M. G., Bostock, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+assessment+of+muscle+membrane+properties+in+the+sodium+channel+myotonias.">In vivo assessment of muscle membrane properties in the sodium channel myotonias.</a> Muscle and Nerve. 57 (4), 586-594 (2018).</li><li>Tan, S. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+assessment+of+muscle+membrane+properties+in+myotonic+dystrophy.">In vivo assessment of muscle membrane properties in myotonic dystrophy.</a> Muscle and Nerve. 54 (2), 249-257 (2016).</li><li>Tan, S. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Membrane+dysfunction+in+Andersen-Tawil+syndrome+assessed+by+velocity+recovery+cycles.">Membrane dysfunction in Andersen-Tawil syndrome assessed by velocity recovery cycles.</a> Muscle and Nerve. 46 (2), 193-203 (2012).</li><li>Tan, S. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chloride+channels+in+myotonia+congenita+assessed+by+velocity+recovery+cycles.">Chloride channels in myotonia congenita assessed by velocity recovery cycles.</a> Muscle and Nerve. 49 (6), 845-857 (2014).</li><li>Boland-Freitas, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sarcolemmal+excitability+in+the+myotonic+dystrophies.">Sarcolemmal excitability in the myotonic dystrophies.</a> Muscle and Nerve. 57 (4), 595-602 (2018).</li><li>Stalberg, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standards+for+quantification+of+EMG+and+neurography.">Standards for quantification of EMG and neurography.</a> Clinical Neurophysiology. 130 (9), 1688-1729 (2019).</li><li>Witt, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+velocity+recovery+cycles+in+neurogenic+muscles.">Muscle velocity recovery cycles in neurogenic muscles.</a> Clinical Neurophysiology. 130 (9), 1520-1527 (2019).</li><li>Kristensen, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MScanFit+motor+unit+number+estimation+(MScan)+and+muscle+velocity+recovery+cycle+recordings+in+amyotrophic+lateral+sclerosis+patients.">MScanFit motor unit number estimation (MScan) and muscle velocity recovery cycle recordings in amyotrophic lateral sclerosis patients.</a> Clinical Neurophysiology. 130 (8), 1280-1288 (2019).</li><li>Marrero, H. G., Stalberg, E. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimizing+testing+methods+and+collection+of+reference+data+for+differentiating+critical+illness+polyneuropathy+from+critical+illness+MYOPATHIES.">Optimizing testing methods and collection of reference data for differentiating critical illness polyneuropathy from critical illness MYOPATHIES.</a> Muscle and Nerve. 53 (4), 555-563 (2016).</li><li>Allen, D. C., Arunachalam, R., Mills, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Critical+illness+myopathy:+further+evidence+from+muscle-fiber+excitability+studies+of+an+acquired+channelopathy.">Critical illness myopathy: further evidence from muscle-fiber excitability studies of an acquired channelopathy.</a> Muscle and Nerve. 37 (1), 14-22 (2008).</li></ol>

Gli MVRC, come programmato nel software di registrazione, sono una procedura altamente automatizzata, ma è necessaria attenzione per ottenere risultati affidabili. Nella fase di registrazione, durante la regolazione degli aghi, è importante evitare di stimolare la zona di fascia terminale o il nervo. Questo di solito porta a grandi contrazioni di tutto il muscolo, che aumenta il rischio di spostamento della stimolazione e/ o registrazione dell'ago durante la registrazione di MVRC. Fino ad oggi, il metodo è stato appli...

Gli studi di conduzione nervosa (NCS) e l'elettromiografia (EMG) sono i metodi elettrofisiologici convenzionali utilizzati per la diagnosi di disturbi neuromuscolari. NCS consente di rilevare la perdita assonale e la demielinazione nei nervi1, mentre EMG può distinguere se la miopatia o i cambiamenti neurogenici sono presenti nel muscolo a causa di danni ai nervi. Tuttavia, NCS o EMG forniscono informazioni limitate sulle proprietà della membrana della fibra muscolare e sui meccanismi della malattia sottostanti. Queste informazioni possono essere ottenute utilizzando elettrodi intracellulari in muscoli isolati dalle biopsiemuscolari 2,3,4. Tuttavia, è di importanza clinica utilizzare metodologie utilizzando registrazioni da muscoli intatti nei pazienti.
La velocità di un secondo potenziale di azione fibra muscolare cambia in funzione del ritardo dopo il primo5, e questa funzione di recupero della velocità (o ciclo di recupero) ha dimostrato di cambiare nei muscoli distrofici o denervati. La resa di tali registrazioni da fibre muscolari singole era, tuttavia, troppo bassa per essere utile come strumento clinico6. Tuttavia, in seguito, la commissione per la protezione dell'ambiente e la protezione dell'ambiente, non è stata in grado di ottenere tali registrazioni in vivo7. In questometodoviene utilizzata una sequenza di stimoli elettrici a impulsi accoppiati con intervalli interstimoli variabili (ISI).
I parametri MVRC valutati includono i seguenti: 1) periodo refrattario relativo muscolare (MRRP), che è la durata dopo un potenziale di azione muscolare fino a quando il prossimo potenziale di azione può essere suscitato; 2) supernormalità precoce (ESN); e 3) supernormalità tardiva (LSN). ESN e LSN sono i periodi dopo il periodo refrattario in cui i potenziali di azione vengono condotti lungo la membrana muscolare più velocemente del normale. L'accumulo depolarizzante postpotenziale e di potassio nei tubuli t del muscolo rispettivamente, sono ipotizzati come le principali cause per i due periodi di supernormalità.
L'ampia applicabilità degli MVRC ai disturbi muscolari è stata dimostrata nel rilevamento della depolarizzazione della membrana in ischemia7,10,12 e insufficienza renale13, oltre a fornire informazioni sulle anomalie della membrana muscolare nella miopatia della malattia critica14 e miosite corporea di inclusione15. Da allora sono stati introdotti i protocolli di simulazione intermittenti da 15 e 20 Hz. Gli MVRC, insieme a questi protocolli aggiuntivi, hanno dimostrato i diversi effetti sulla eccitabilità della membrana muscolare legati alle mutazioni di perdita di funzione o guadagno di funzione in vari canali ionici muscolari nelle channelopatie degli ioni muscolari ereditari (cioè, canale di sodio miotonia, paramiotonia congenita16, distrofia miaotonica17, Sindrome di Andersen-Tawil18, e miotonia congenita19,20).
In un recente studio, l'applicabilità degli MVRC ai muscoli neurogenici è stata dimostrata per la prima volta. Il termine "muscolo neurogenico" si riferisce ai cambiamenti secondari nei muscoli scheletrici che si sviluppano come denervazione e reinnervazione dopo qualsiasi lesione alle cellule del corno anteriore o agli assoni motori. La denervazione è caratterizzata in EMG come attività spontanea (ad esempio, fibrillazioni [fibs] e onde taglienti positive [psws]), mentre grandi potenzialità di unità motorie con durata prolungata e aumento dell'ampiezza presentano reinnervation21. I cambiamenti EMG sono evidenti nei muscoli denervati, ma i cambiamenti cellulari sottostanti nei potenziali della fibra muscolare sono stati dimostrati solo in studi sperimentali sul tessuto muscolare isolato2,3,4. Gli MVRC forniscono ulteriori informazioni sulle proprietà della membrana muscolare umana in vivo per quanto riguarda il processo di denervazione.
Questo documento descrive in dettaglio la metodologia degli MVRC. Riassume anche i cambiamenti nei muscoli neurogenici in un sottogruppo di pazienti da uno studio precedentemente riportato22 e soggetti di controllo sani che consente di determinare se il metodo è appropriato per uno studio pianificato.
Le registrazioni vengono eseguite utilizzando un protocollo di registrazione che fa parte di un programma software. Altre apparecchiature utilizzate è uno stimolatore di corrente a corrente costante lineare isolato, un eliminatore di rumore di 50 Hz, un amplificatore elettromiografico isolato e un convertitore analogico-digitale.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>50 Hz Noise Eliminator</td>
			<td>Digitimer Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Humbug</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Analogue-to-Digital Converter</td>
			<td>National Instruments</td>
			<td></td>
			<td>NI-6221</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Analysing software program</td>
			<td>Digitimer Ltd (copyright Institute of Neurology, University College, London)</td>
			<td></td>
			<td>QtracP, MANAL9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable concentric needle electrode, 25 mm x 30G</td>
			<td>Natus</td>
			<td></td>
			<td>Dantec DCN</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable monopolar needle electrode, 25 mm x 26G</td>
			<td>Natus</td>
			<td></td>
			<td>TECA elite</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isolated EMG amplifier</td>
			<td>Digitimer Ltd</td>
			<td></td>
			<td>D440</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isolated linear bipolar constant-current stimulator</td>
			<td>Digitimer Ltd</td>
			<td></td>
			<td>DS5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software and recording protocol</td>
			<td>Digitimer Ltd (copyright Institute of Neurology, University College, London)</td>
			<td></td>
			<td>QtracW software, M3REC3 recording protocol written by Hugh Bostock, Istitute of Neurology, London, UK)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

muscle velocity recovery cycles to examine muscle membrane properties

Anche se gli studi convenzionali di conduzione nervosa (NCS) e l'elettromiografia (EMG) sono adatti per la diagnosi di disturbi neuromuscolari, forniscono informazioni limitate sulle proprietà della membrana della fibra muscolare e sui meccanismi della malattia sottostante. I cicli di recupero della velocità muscolare (MVRC) illustrano come la velocità di un potenziale di azione muscolare dipenda dal tempo dopo un potenziale di azione precedente. Gli MVRC sono strettamente correlati ai cambiamenti nel potenziale della membrana che seguono un potenziale d'azione, fornendo così informazioni sulle proprietà della membrana della fibra muscolare. Gli MVRC possono essere registrati in modo rapido e semplice mediante stimolazione diretta e registrazione da fasci multifibra in vivo. Gli MVRC sono stati utili nella comprensione dei meccanismi della malattia in diversi disturbi neuromuscolari. Studi condotti su pazienti con channelopatie hanno dimostrato i diversi effetti di specifiche mutazioni del canale ionico sull'eccitabilità muscolare. MVRC sono stati precedentemente testati in pazienti con muscoli neurogenici. In questo studio precedente, il periodo di rifrazione relativa muscolare (MRRP) è stato prolungato, e la supernormalità precoce (ESN) e la tardiva supernormalità (LSN) sono state ridotte nei pazienti rispetto ai controlli sani. In questo modo, gli MVRC possono fornire prove in vivo della depolarizzazione della membrana in fibre muscolari umane intatte che sono alla base della loro ridotta eccitabilità. Il protocollo qui presentato descrive come registrare mVRC e analizzare le registrazioni. Gli MVRC possono fungere da metodo veloce, semplice e utile per rivelare i meccanismi della malattia in un'ampia gamma di disturbi neuromuscolari.

I seguenti risultati sono stati ottenuti in un sottogruppo di pazienti da un recente studio22, in cui c'erano fibs/psws in tutti i siti che mostravano una prossucusia attività di denervazione. I risultati hanno mostrato che i cambiamenti nelle fibre muscolari dopo la denervazione sono stati valutati in vivo utilizzando la tecnica MVRC descritta in questo protocollo. Gli MVRC hanno mostrato cambiamenti coerenti con la depolarizzazione del potenziale della membrana a riposo nelle fibre muscolari ne...

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Muscle Velocity Recovery Cycles to Examine Muscle Membrane Properties

Presentato qui è un protocollo per la registrazione dei cicli di recupero della velocità muscolare (MVRC), un nuovo metodo di esame delle proprietà della membrana muscolare. Gli MVRC consentono la valutazione in vivo del potenziale della membrana muscolare e alterazioni della funzione del canale ionico muscolare in relazione alla patologia e consentono la dimostrazione della depolarizzazione muscolare nei muscoli neurogenici.

Cicli di recupero della velocità muscolare per esaminare le proprietà della membrana muscolare

Although conventional nerve conduction studies (NCS) and electromyography (EMG) are suitable for the diagnosis of neuromuscular disorders, they provide ...

Questo protocollo descrive come esaminiamo i cambiamenti della membrana muscolare nei muscoli denervatati utilizzando MVRC, cicli di recupero della velocità muscolare. Il vantaggio principale degli MVRC è che è un metodo veloce e semplice per esaminare le proprietà della membrana muscolare in vivo senza disagio per il soggetto. Gli MVRC possono avere un potenziale per essere uno strumento diagnostico nei disturbi neuromuscolari in futuro.Tuttavia, sono necessari ulteriori studi per esplorare questa possibilità. Ci aspettiamo che gli MRVC siano uno strumento prezioso per comprendere la fisiopatologia alla base di diversi disturbi neuromuscolari e un biomarcatore per monitorare i progressi della malattia e gli effetti dei farmaci. Poiché non ci sono rischi e solo un leggero disagio da questo esame, ti consigliamo di esercitarti su soggetti sani prima di esaminare i pazienti.Questa tecnica è completamente innocua purché si seguano le istruzioni di base. Quindi, ricorda di pulire con l'alcol prima dell'inserimento dell'ago e assicurati che non ci siano controindicazioni come l'emofilia o il trattamento diradamento del sangue. Per iniziare, valuta le storie mediche del soggetto per assicurarti che non abbiano precedenti disturbi del sistema nervoso diversi dal gruppo di malattie che verranno studiati.Informare l'interessato in dettaglio sugli esami e richiedere il consenso scritto. Informare il soggetto sull'inserimento di due aghi in un muscolo della gamba e che le fibre muscolari saranno stimolate con una corrente debole. Spiega che la sensazione può sembrare leggermente sgradevole.Informare il soggetto che la stimolazione può essere spenta immediatamente in qualsiasi momento durante la registrazione in caso di disagio. Quindi, pulire la parte inferiore della gamba del soggetto con alcol. Inserire l'elettrodo stimolante dell'ago monopolare sul muscolo tibiale anteriore.Inserire l'elettrodo ad ago concentrico di registrazione di circa due centimetri prossimale allo stimolante elettrodo ad ago monopolare lungo le fibre muscolari e mettere l'elettrodo di superficie adesivo come anodo distale di un centimetro all'ago monopolare. Posizionare un elettrodo di terra distale sull'anodo. Collegare l'ago concentrico di registrazione e gli elettrodi di terra al preamplificatore.Chiedi al soggetto di rimanere in silenzio ed evitare il movimento durante l'esame. Azzerare l'uscita dello stimolatore e collegare gli elettrodi stimolanti allo stimolatore. Mantenere la temperatura della pelle tra 32 e 36 gradi Celsius utilizzando una lampada riscaldante.Avviare lo stimolatore e attivare il software di registrazione semi-automatizzato utilizzando il protocollo di registrazione dell'eccitabilità muscolare. Le stimolazioni iniziano a 2,5 milliambi con un hertz. Aumentare manualmente l'intensità dello stimolo premendo il tasto inserto fino a quando non viene registrata una risposta.Se il potenziale appare capovolto, colpisci la chiave meno per invertire il potenziale di azione muscolare. Regolare gli aghi stimolanti e di registrazione, se necessario, fino a registrare una risposta accettabile con un'intensità di stimolo inferiore a 10 milliarti. La forma del potenziale di azione muscolare dovrebbe essere triphasica e stabile.Evitare grandi contrazioni di tutto il muscolo. Le contrazioni muscolari di tutto il muscolo implicano che stai stimolando la piastra finale. In questo caso, regolare l'ago monopolare o reinserire entrambi gli elettrodi dell'ago in un nuovo sito.Sullo schermo viene visualizzata una linea orizzontale magenta che indica la larghezza del potenziale di azione. Regolare la posizione e la lunghezza della linea magenta trascinando la linea con il mouse. La linea orizzontale verde rappresenta la linea di base.Selezionare la relazione di risposta allo stimolo tra le opzioni principali. Aumentare l'intensità dello stimolo colpendo la chiave dell'inserto a un massimo di 10 milliarti o tollerabile. Fare clic su OK per iniziare a decrescente la curva di risposta dello stimolo.Fare clic su OK quando lo stimolo del test raggiunge lo zero. Impostare l'intensità dello stimolo sul livello per una latenza stabile. Fare clic su OK per tornare al menu principale.Selezionare l'opzione 1-2-5 condizionante per i cicli di recupero. Selezionare un protocollo tra le opzioni del ciclo di ripristino. Ad esempio, avviare un ciclo di ripristino rapido, ignorare i ritardi alternativi.Assicurarsi che il potenziale di azione muscolare sia stabile durante la registrazione e che l'ago non si sia mosso. Lo schermo passa automaticamente alle opzioni principali al termine dei 34 passaggi. Fare clic al termine della registrazione e fare clic sul pulsante Salva dati.Avviare il programma software di analisi per eseguire l'analisi offline. Selezionare la registrazione che verrà analizzata e fare clic sul pulsante OK. Fare clic sui parametri di caricamento dal menu file.Selezionate l'opzione MANAL9 per l'analisi. Fare clic su OK per continuare. Quando viene visualizzata una descrizione dell'analisi di eccitabilità muscolare MANAL9, fare clic su OK per continuare.Se il potenziale appare capovolto, invertire il potenziale di azione muscolare digitando MM-1. Fare clic con il pulsante destro del mouse per rendere visibile la linea magenta. Impostare la finestra sulla base della risposta di picco e con una larghezza corrispondente approssimativamente alla larghezza del potenziale di azione a quell'altezza.Tenere traccia con il mouse per regolare la finestra. La finestra determina le latenze all'interno delle quali l'altezza e la latenza vengono misurate come indicato dalle linee blu pallido e la linea verde indica la linea di base. Fare clic su OK per continuare.Fare clic su OK per rimisurare le latenze e i picchi. Fare clic su OK per creare un file RMC. Ignorare la maggior parte delle opzioni visualizzate nel modulo crea RCC o RMC.Fare clic su Salva e esci per continuare. Dopo aver salvato il file RMC, la casella di richiesta fornisce diverse opzioni. Se sono stati registrati dati di rampa di frequenza e/o stimolazione ripetitiva, seguire le istruzioni per analizzarli.In caso contrario, selezionare vai dritto per creare l'opzione file MEM per creare un file MEM. Fare clic su OK per continuare. Fare clic su Salva e esci per continuare.Fare clic su OK per aggiungere i dati RMC al file MEM. Fare clic su Aggiungi dal file RMC di input per aggiungere questi dati al file MEM, quindi modificare la directory per salvare il file MEM composito. Quindi, fare clic su Salva e esci per salvarlo.Fare clic su OK per salvare il file QZD rimisurato per consentire la differenziazione dal file QZD originale utilizzando un cancello. In questo studio, 14 pazienti sono stati confrontati con 29 soggetti sani. I dati demografici dei soggetti sono mostrati qui.Le registrazioni di un soggetto sano e di un paziente mostrano una differenza netta nella variazione percentuale della latenza. Il confronto dei MRVC dei pazienti con soggetti sani mostra che la MRRP è stata prolungata e che la supernormalità precoce e la supernormalità tardiva sono state ridotte nei pazienti rispetto ai controlli sani. Il passaggio più importante nella registrazione MVRC è il corretto posizionamento dell'ago, in cui si ottiene un'ampiezza stabile con un'intensità di stimolo inferiore a 10 milliampere.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

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Ricerca

Neuroscienze

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Riproducibile nervo sciatico Crush mouse e successiva valutazione da parte della Rigenerazione intera analisi Muscle Monte

Regeneration in the peripheral nervous system (PNS) is widely studied both for its relevance to human disease and to understand the robust regenerative ...

Extracellularly Identifying Motor Neurons for a Muscle Motor Pool in Aplysia californica

Extracellularly Identifying Motor Neurons for a Muscle Motor Pool in Aplysia californica

Extracellulare Identificazione neuroni motori per un pool di motore muscolare in<em&gt; Aplysia californica</em

In animals with large  identified neurons (e.g. mollusks), analysis of motor pools is done using  intracellular techniques1,2,3,4. Recently,  we developed ...

Simultaneous Pre- and Post-synaptic Electrophysiological Recording from Xenopus Nerve-muscle Co-cultures

Simultaneous Pre- and Post-synaptic Electrophysiological Recording from Xenopus Nerve-muscle Co-cultures

Simultanea di pre-e post-sinaptica registrazione elettrofisiologica da<em&gt; Xenopus</em&gt; Nervo-muscolo Co-colture

Much information about the coupling of  presynaptic ionic currents with the release of neurotransmitter has been obtained  from invertebrate preparations, ...

Proprioception and Tension Receptors in Crab Limbs: Student Laboratory Exercises

Propriocezione e la tensione recettori in Crab Arti: Esercizi di laboratorio per studenti

The primary purpose of these procedures is to demonstrate for teaching and research purposes how to record the activity of living primary sensory neurons ...

Dissection of the Transversus Abdominis Muscle for Whole-mount Neuromuscular Junction Analysis

Dissection of the Transversus Abdominis Muscle for Whole-mount Neuromuscular Junction Analysis

Dissezione del muscolo Transversus Abdominis per l'analisi della giunzione neuromuscolare a montaggio intero

Analysis of neuromuscular junction morphology can give important insight into the physiological status of a given motor neuron. Analysis of thin flat ...

An In Vitro Adult Mouse Muscle-nerve Preparation for Studying the Firing Properties of Muscle Afferents

An In Vitro Adult Mouse Muscle-nerve Preparation for Studying the Firing Properties of Muscle Afferents

Un<em&gt; In Vitro</emPreparazione muscolare-nervosa&gt; Adult mouse per studiare le proprietà di cottura delle afferenze muscolari

Muscle sensory neurons innervating muscle spindles and Golgi tendon organs encode length and force changes essential to proprioception. Additional ...

High Throughput Assay to Examine Egg-Laying Preferences of Individual Drosophila melanogaster

High Throughput Assay to Examine Egg-Laying Preferences of Individual Drosophila melanogaster

High Throughput test per esaminare Preferenze deposizione delle uova dei singoli<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Recently, egg-laying preference of Drosophila has emerged as a genetically tractable model to study the neural basis of simple decision-making processes. ...