Name: muscle velocity recovery cycles to examine muscle membrane properties
Uploaded: 2020-02-19T14:00:00
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Este estudio fue apoyado financieramente principalmente por las dos subvenciones de la Fundación Lundbeck (número de subvención R191-2015-931 y número de subvención R290-2018-751). Además, el estudio fue apoyado financieramente por el Programa de Desafío de la Fundación Novo Nordisk (número de subvención NNF14OC0011633) como parte del Consorcio Internacional de Neuropatía Diabética.

Todos los sujetos deben proporcionar consentimiento por escrito antes del examen, y el protocolo debe ser aprobado por la junta de revisión ética local apropiada. Todos los métodos descritos aquí fueron aprobados por el Comité Científico Etico Regional y la Agencia Danesa de Protección de Datos.
1. Preparación del tema
<ol><li>Evaluar los historiales médicos de los sujetos para asegurarse de que no tienen ningún trastorno previo del sistema nervioso que no sea el grupo de la enferm...

<ol>
	<li>Tankisi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology+inferred+from+electrodiagnostic+nerve+tests+and+classification+of+polyneuropathies.+Suggested+guidelines.">Pathophysiology inferred from electrodiagnostic nerve tests and classification of polyneuropathies. Suggested guidelines.</a> Clinical Neurophysiology. 116 (7), 1571-1580 (2005).</li><li>Gregorio, C. C., Hudecki, M. S., Pollina, C. M., Repasky, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+denervation+on+spectrin+concentration+in+avian+skeletal+muscle.">Effects of denervation on spectrin concentration in avian skeletal muscle.</a> Muscle and Nerve. 11 (4), 372-379 (1988).</li><li>Kotsias, B. A., Venosa, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+sodium+and+potassium+permeabilities+in+the+depolarization+of+denervated+rat+muscle+fibers.">Role of sodium and potassium permeabilities in the depolarization of denervated rat muscle fibers.</a> Journal of Physiology. 392, 301-313 (1987).</li><li>Kirsch, G. E., Anderson, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sodium+channel+kinetics+in+normal+and+denervated+rabbit+muscle+membrane.">Sodium channel kinetics in normal and denervated rabbit muscle membrane.</a> Muscle and Nerve. 9 (8), 738-747 (1986).</li><li>Stalberg, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Propagation+velocity+in+human+muscle+fibers+in+situ.">Propagation velocity in human muscle fibers in situ.</a> Acta Physiologica Scandinava Supplementum. 287, 1 (1966).</li><li>Mihelin, M., Trontelj, J. V., Stalberg, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+fiber+recovery+functions+studied+with+double+pulse+stimulation.">Muscle fiber recovery functions studied with double pulse stimulation.</a> Muscle and Nerve. 14 (8), 739-747 (1991).</li><li>Z'Graggen, W. J., Bostock, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Velocity+recovery+cycles+of+human+muscle+action+potentials+and+their+sensitivity+to+ischemia.">Velocity recovery cycles of human muscle action potentials and their sensitivity to ischemia.</a> Muscle and Nerve. 39 (5), 616-626 (2009).</li><li>Bostock, H., Tan, S. V., Boerio, D., Z'Graggen, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validity+of+multi-fiber+muscle+velocity+recovery+cycles+recorded+at+a+single+site+using+submaximal+stimuli.">Validity of multi-fiber muscle velocity recovery cycles recorded at a single site using submaximal stimuli.</a> Clinical Neurophysiology. 123 (11), 2296-2305 (2012).</li><li>Z'Graggen, W. J., Troller, R., Ackermann, K. A., Humm, A. M., Bostock, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Velocity+recovery+cycles+of+human+muscle+action+potentials:+repeatability+and+variability.">Velocity recovery cycles of human muscle action potentials: repeatability and variability.</a> Clinical Neurophysiology. 122 (11), 2294-2299 (2011).</li><li>Lee, J. H. F., Boland-Freitas, R., Ng, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sarcolemmal+excitability+changes+in+normal+human+aging.">Sarcolemmal excitability changes in normal human aging.</a> Muscle and Nerve. 57 (6), 981-988 (2018).</li><li>Lee, J. H. F., Boland-Freitas, R., Ng, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiological+differences+in+sarcolemmal+excitability+between+human+muscles.">Physiological differences in sarcolemmal excitability between human muscles.</a> Muscle and Nerve. 60 (4), 433-436 (2019).</li><li>Humm, A. M., Bostock, H., Troller, R., Z'Graggen, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+ischaemia+in+patients+with+orthostatic+hypotension+assessed+by+velocity+recovery+cycles.">Muscle ischaemia in patients with orthostatic hypotension assessed by velocity recovery cycles.</a> Journal of Neurology, Neurosurgery and Psychiatry. 82 (12), 1394-1398 (2011).</li><li>Z'Graggen, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Velocity+recovery+cycles+of+human+muscle+action+potentials+in+chronic+renal+failure.">Velocity recovery cycles of human muscle action potentials in chronic renal failure.</a> Clinical Neurophysiology. 121 (6), 874-881 (2010).</li><li>Z'Graggen, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+membrane+dysfunction+in+critical+illness+myopathy+assessed+by+velocity+recovery+cycles.">Muscle membrane dysfunction in critical illness myopathy assessed by velocity recovery cycles.</a> Clinical Neurophysiology. 122 (4), 834-841 (2011).</li><li>Lee, J. H., Boland-Freitas, R., Liang, C., Ng, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sarcolemmal+depolarization+in+sporadic+inclusion+body+myositis+assessed+with+muscle+velocity+recovery+cycles.">Sarcolemmal depolarization in sporadic inclusion body myositis assessed with muscle velocity recovery cycles.</a> Clinical Neurophysiology. 19 (31205-2), 1388 (2019).</li><li>Tan, S. V., Z'Graggen, W. J., Hanna, M. G., Bostock, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+assessment+of+muscle+membrane+properties+in+the+sodium+channel+myotonias.">In vivo assessment of muscle membrane properties in the sodium channel myotonias.</a> Muscle and Nerve. 57 (4), 586-594 (2018).</li><li>Tan, S. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+assessment+of+muscle+membrane+properties+in+myotonic+dystrophy.">In vivo assessment of muscle membrane properties in myotonic dystrophy.</a> Muscle and Nerve. 54 (2), 249-257 (2016).</li><li>Tan, S. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Membrane+dysfunction+in+Andersen-Tawil+syndrome+assessed+by+velocity+recovery+cycles.">Membrane dysfunction in Andersen-Tawil syndrome assessed by velocity recovery cycles.</a> Muscle and Nerve. 46 (2), 193-203 (2012).</li><li>Tan, S. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chloride+channels+in+myotonia+congenita+assessed+by+velocity+recovery+cycles.">Chloride channels in myotonia congenita assessed by velocity recovery cycles.</a> Muscle and Nerve. 49 (6), 845-857 (2014).</li><li>Boland-Freitas, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sarcolemmal+excitability+in+the+myotonic+dystrophies.">Sarcolemmal excitability in the myotonic dystrophies.</a> Muscle and Nerve. 57 (4), 595-602 (2018).</li><li>Stalberg, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standards+for+quantification+of+EMG+and+neurography.">Standards for quantification of EMG and neurography.</a> Clinical Neurophysiology. 130 (9), 1688-1729 (2019).</li><li>Witt, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+velocity+recovery+cycles+in+neurogenic+muscles.">Muscle velocity recovery cycles in neurogenic muscles.</a> Clinical Neurophysiology. 130 (9), 1520-1527 (2019).</li><li>Kristensen, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MScanFit+motor+unit+number+estimation+(MScan)+and+muscle+velocity+recovery+cycle+recordings+in+amyotrophic+lateral+sclerosis+patients.">MScanFit motor unit number estimation (MScan) and muscle velocity recovery cycle recordings in amyotrophic lateral sclerosis patients.</a> Clinical Neurophysiology. 130 (8), 1280-1288 (2019).</li><li>Marrero, H. G., Stalberg, E. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimizing+testing+methods+and+collection+of+reference+data+for+differentiating+critical+illness+polyneuropathy+from+critical+illness+MYOPATHIES.">Optimizing testing methods and collection of reference data for differentiating critical illness polyneuropathy from critical illness MYOPATHIES.</a> Muscle and Nerve. 53 (4), 555-563 (2016).</li><li>Allen, D. C., Arunachalam, R., Mills, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Critical+illness+myopathy:+further+evidence+from+muscle-fiber+excitability+studies+of+an+acquired+channelopathy.">Critical illness myopathy: further evidence from muscle-fiber excitability studies of an acquired channelopathy.</a> Muscle and Nerve. 37 (1), 14-22 (2008).</li></ol>

Los MVRC, según lo programado en el software de grabación, es un procedimiento altamente automatizado, pero se necesita cuidado para obtener resultados confiables. En la etapa de grabación, mientras se ajustan las agujas, es importante evitar estimular la zona de la placa final o el nervio. Esto generalmente conduce a grandes contracciones de todo el músculo, lo que aumenta el riesgo de desplazamiento de la estimulación y / o aguja de grabación durante la grabación de MVRCs. Hasta la fecha, el método se ha aplica...

Los estudios de conducción nerviosa (NCS) y la electromiografía (EMG) son los métodos electrofisiológicos convencionales utilizados para el diagnóstico de trastornos neuromusculares. El NCS permite la detección de pérdida axonal y desmielinización en los nervios1, mientras que EMG puede diferenciar si la miopatía o los cambios neurogénicos están presentes en el músculo debido al daño nervioso. Sin embargo, NCS o EMG proporcionan información limitada sobre las propiedades de la membrana de la fibra muscular y los mecanismos subyacentes de la enfermedad. Esta información se puede lograr utilizando electrodos intracelulares en músculos aislados de biopsias musculares2,3,4. Sin embargo, es de importancia clínica utilizar metodologías utilizando grabaciones de músculos intactos en pacientes.
La velocidad de una segunda acción de fibra muscular potencial cambia en función del retraso después de los primeros5, y esta función de recuperación de velocidad (o ciclo de recuperación) se ha demostrado para cambiar en los músculos distróficos o denervados. El rendimiento de tales grabaciones de fibras musculares individuales fue, sin embargo, demasiado bajo para ser de utilidad como una herramienta clínica6. Sin embargo, Z'Graggen y Bostock más tarde encontraron que las grabaciones multifibra, obtenidas mediante estimulación directa y grabación del mismo paquete de fibras musculares, proporcionan un método rápido y sencillo para obtener dichas grabaciones in vivo7. En este método se utiliza una secuencia de estímulos eléctricos de pulso emparejados con diferentes intervalos interestímulos (ISI) en este método7,8,9,10,11.
Los parámetros MVRC evaluados incluyen lo siguiente: 1) período refractario relativo muscular (MRRP), que es la duración después de un potencial de acción muscular hasta que se puede provocar el siguiente potencial de acción; 2) supernormalidad temprana (ESN); y 3) supernormalidad tardía (LSN). ESN y LSN son los períodos posteriores al período refractario en el que los potenciales de acción se llevan a cabo a lo largo de la membrana muscular más rápido de lo normal. El postpotencial despolarizante, y la acumulación de potasio en los t-tubules del músculo respectivamente, se hipotetiza como las principales causas para los dos períodos de supernormalidad.
La amplia aplicabilidad de los MVRC a los trastornos musculares se ha demostrado en la detección de la despolarización de la membrana en isquemia7,10,12 y la insuficiencia renal13, así como proporcionar información sobre las anomalías de la membrana muscular en la miopatía enfermedad crítica14 y la miositis corporal de inclusión15. Desde entonces se han introducido la rampa de frecuencia y los protocolos intermitentes de simulación de 15 Hz y 20 Hz. Los MVRC, junto con estos protocolos adicionales, han demostrado los diferentes efectos sobre la excitabilidad de la membrana muscular relacionados con mutaciones de pérdida de función o ganancia de función en varios canales de iones musculares en las canalopatías iónicos musculares heredadas (es decir, miotonía del canal de sodio, paramiotonía congenita16,distrofiamiotónica17,síndrome de Andersen-Tawil18y miotonía congenita190).
En un estudio reciente, la aplicabilidad de los MVRC a los músculos neurogénicos se demostró por primera vez. El término "músculo neurogénico" se refiere a los cambios secundarios en los músculos esqueléticos que se desarrollan como denervación y reinnervación después de cualquier lesión a las células de cuerno anteriores o axónes motores. La denervación se caracteriza en EMG como actividad espontánea (es decir, fibrilaciones [fibs] y ondas afiladas positivas [psws]), mientras que grandes potenciales de unidades motoras con duración prolongada y mayor amplitud presentan reinnervación21. Los cambios en la EMG son evidentes en los músculos denervados, pero los cambios celulares subyacentes en los potenciales de la membrana de la fibra muscular sólo se han demostrado en estudios experimentales sobre el tejido muscular aislado2,3,4. Los MVRC proporcionan más información sobre las propiedades de la membrana muscular humana in vivo con respecto al proceso de denervación.
Este documento describe en detalle la metodología de los MVRC. También resume los cambios en los músculos neurogénicos en un subgrupo de pacientes de un estudio reportado previamente22 y sujetos de control saludables que permite determinar si el método es apropiado para un estudio planificado.
Las grabaciones se están realizando utilizando un protocolo de grabación que forma parte de un programa de software. Otros equipos utilizados son un estimulador de corriente constante bipolar lineal aislado, eliminador de ruido de 50 Hz, amplificador de electromiografía aislado y convertidor analógico a digital.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>50 Hz Noise Eliminator</td>
			<td>Digitimer Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Humbug</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Analogue-to-Digital Converter</td>
			<td>National Instruments</td>
			<td></td>
			<td>NI-6221</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Analysing software program</td>
			<td>Digitimer Ltd (copyright Institute of Neurology, University College, London)</td>
			<td></td>
			<td>QtracP, MANAL9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable concentric needle electrode, 25 mm x 30G</td>
			<td>Natus</td>
			<td></td>
			<td>Dantec DCN</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable monopolar needle electrode, 25 mm x 26G</td>
			<td>Natus</td>
			<td></td>
			<td>TECA elite</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isolated EMG amplifier</td>
			<td>Digitimer Ltd</td>
			<td></td>
			<td>D440</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isolated linear bipolar constant-current stimulator</td>
			<td>Digitimer Ltd</td>
			<td></td>
			<td>DS5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software and recording protocol</td>
			<td>Digitimer Ltd (copyright Institute of Neurology, University College, London)</td>
			<td></td>
			<td>QtracW software, M3REC3 recording protocol written by Hugh Bostock, Istitute of Neurology, London, UK)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

muscle velocity recovery cycles to examine muscle membrane properties

Aunque los estudios de conducción nerviosa convencional (NCS) y la electromiografía (EMG) son adecuados para el diagnóstico de trastornos neuromusculares, proporcionan información limitada sobre las propiedades de la membrana de la fibra muscular y los mecanismos subyacentes de la enfermedad. Los ciclos de recuperación de velocidad muscular (MVRC) ilustran cómo la velocidad de un potencial de acción muscular depende del tiempo después de un potencial de acción anterior. Los MVRC están estrechamente relacionados con los cambios en el potencial de la membrana que siguen un potencial de acción, proporcionando así información sobre las propiedades de la membrana muscular. Los MVRC se pueden grabar rápida y fácilmente mediante estimulación directa y grabación a partir de paquetes multifibra in vivo. Los MVRC han sido útiles para entender los mecanismos de la enfermedad en varios trastornos neuromusculares. Los estudios realizados en pacientes con canalopatías han demostrado los diferentes efectos de mutaciones específicas del canal iónico en la excitabilidad muscular. Los MVRC se han probado previamente en pacientes con músculos neurogénicos. En este estudio previo, el período de refracción relativa muscular (MRRP) se prolongó, y la supernormalidad temprana (ESN) y la supernormalidad tardía (LSN) se redujeron en pacientes en comparación con controles saludables. De este modo, los MVRC pueden proporcionar evidencia in vivo de despolarización de la membrana en las fibras musculares humanas intactas que subyacen a su reducida excitabilidad. El protocolo presentado aquí describe cómo grabar MVRCs y analizar las grabaciones. Los MVRC pueden servir como un método rápido, simple y útil para revelar los mecanismos de la enfermedad en una amplia gama de trastornos neuromusculares.

Los siguientes resultados se obtuvieron en un subgrupo de pacientes de un estudio reciente22,en el que hubo fibs/psws en todos los sitios que mostraban actividad profusa de denervación. Los resultados mostraron que los cambios en las fibras musculares después de la denervación se evaluaron in vivo utilizando la técnica MVRC descrita en este protocolo. Los MVRC mostraron cambios consistentes con la despolarización del potencial de membrana en reposo en las fibras musculares neurogénicas.
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Muscle Velocity Recovery Cycles to Examine Muscle Membrane Properties

Aquí se presenta un protocolo para el registro de ciclos de recuperación de velocidad muscular (MVRC), un nuevo método de examen de las propiedades de la membrana muscular. Los MVRC permiten la evaluación in vivo del potencial de la membrana muscular y alteraciones en la función del canal de iones musculares en relación con la patología, y permite la demostración de la despolarización muscular en los músculos neurogénicos.

Ciclos de recuperación de velocidad muscular para examinar las propiedades de la membrana muscular

Although conventional nerve conduction studies (NCS) and electromyography (EMG) are suitable for the diagnosis of neuromuscular disorders, they provide ...

Este protocolo describe cómo examinamos los cambios de la membrana muscular en los músculos denervados usando MVRC, ciclos de recuperación de velocidad muscular. La principal ventaja de los MVRCs es que es un método rápido y simple para examinar las propiedades de la membrana muscular in vivo sin molestias para el sujeto. Los MVRC pueden tener un potencial para ser una herramienta de diagnóstico en trastornos neuromusculares en el futuro.Sin embargo, se necesitan más estudios para explorar esta posibilidad. Esperamos que los MRCC una valiosa herramienta de recursos para entender la fisiopatología detrás de varios trastornos neuromusculares y un biomarcador para monitorear el progreso de la enfermedad y los efectos de los medicamentos. Dado que no hay riesgos y sólo ligeras molestias de este examen, le recomendamos que practique en sujetos sanos antes de examinar a los pacientes.Esta técnica es completamente inofensiva siempre y cuando siga las instrucciones básicas. Por lo tanto, recuerde limpiar con alcohol antes de la inserción de la aguja y asegúrese de que no hay contraindicaciones como hemofilia o tratamiento anticoagulante. Para comenzar, evalúe las historias médicas del sujeto para asegurarse de que no tienen ningún trastorno previo del sistema nervioso que no sea el grupo de la enfermedad que se investigará.Informar al sujeto en detalle sobre los exámenes y solicitar el consentimiento por escrito. Informar al sujeto sobre la inserción de dos agujas en el músculo de una pierna y que las fibras musculares serán estimuladas con una corriente débil. Explique que la sensación puede sentirse ligeramente desagradable.Informar al sujeto que la estimulación se puede desactivar inmediatamente en cualquier momento durante la grabación en caso de cualquier molestia. Luego, limpie la parte inferior de la pierna del sujeto con alcohol. Inserte el electrodo de aguja monopolar estimulante sobre el músculo tibial anterior.Inserte el electrodo de aguja concéntrico de grabación de unos dos centímetros proximal al electrodo de aguja monopolar estimulante a lo largo de las fibras musculares y coloque el electrodo de superficie adhesiva como el ánodo un centímetro distal a la aguja monopolar. Coloque un electrodo de tierra distal al ánodo. Conecte la aguja concéntrica de grabación y los electrodos de tierra al preamplificador.Pida al sujeto que permanezca en silencio y evite el movimiento durante el examen. Cero la salida del estimulador y conectar los electrodos estimulantes al estimulador. Mantenga la temperatura de la piel entre 32 y 36 grados centígrados utilizando una lámpara de calentamiento.Inicie el estimulador y encienda el software de grabación semiautomático utilizando el protocolo de grabación de excitabilidad muscular. Las estimulaciones comienzan en 2,5 miliamperios con un hercio. Aumente la intensidad del estímulo manualmente pulsando la tecla de inserción hasta que se registre una respuesta.Si el potencial aparece al revés, pulse la tecla menos para invertir el potencial de acción muscular. Ajuste las agujas estimulantes y de grabación si es necesario hasta que se grabe una respuesta aceptable con una intensidad de estímulo inferior a 10 miliamperios. La forma del potencial de acción muscular debe ser tripásica y estable.Evita grandes espasmos de todo el músculo. Las espasmos musculares de todo el músculo implican que estás estimulando la placa final. En este caso, ajuste la aguja monopolar o vuelva a insertar ambos electrodos de aguja en un nuevo sitio.Aparece una línea horizontal magenta en la pantalla que indica el ancho del potencial de acción. Ajuste la posición y la longitud de la línea magenta arrastrando la línea con el ratón. La línea horizontal verde representa la línea base.Seleccione la relación de respuesta de estímulo entre las opciones principales. Aumente la intensidad del estímulo golpeando la tecla de inserción a un máximo de 10 miliamperios o tolerable. Haga clic en Aceptar para empezar a descender la curva de respuesta de estímulo.Haga clic en Aceptar cuando el estímulo de la prueba llegue a cero. Establezca la intensidad del estímulo en nivel para una latencia estable. Haga clic en Aceptar para volver al menú principal.Seleccione la opción 1-2-5 estímulos de acondicionamiento para ciclos de recuperación. Seleccione un protocolo en las opciones del ciclo de recuperación. Por ejemplo, inicie el ciclo de recuperación rápida, omita los retrasos alternativos.Asegúrese de que el potencial de acción muscular es estable durante la grabación y que la aguja no se ha movido. La pantalla cambia automáticamente a las opciones principales cuando se han completado los 34 pasos. Haga clic en Finalizar grabación y haga clic en el botón Guardar datos.Inicie el programa de software de análisis para realizar el análisis sin conexión. Seleccione la grabación que se analizará y haga clic en el botón Aceptar. Haga clic en los parámetros de carga en el menú de archivos.Seleccione la opción MANAL9 para el análisis. Haga clic en Aceptar para continuar. Cuando aparezca una descripción del análisis de excitabilidad muscular MANAL9, haga clic en Aceptar para continuar.Si el potencial aparece al revés, invierta el potencial de acción muscular escribiendo MM-1. Haga clic con el botón derecho del ratón para hacer visible la línea magenta. Establezca la ventana en la base de la respuesta de pico y con un ancho correspondiente aproximadamente al ancho del potencial de acción a esa altura.Realice un seguimiento con el ratón para ajustar la ventana. La ventana determina las latencias dentro de las cuales la altura y la latencia se miden según lo indicado por las líneas azules pálidos, y la línea verde indica la línea base. Haga clic en Aceptar para continuar.Haga clic en Aceptar para volver a asegurar las latencias y los picos. Haga clic en Aceptar para crear un archivo RMC. Ignore la mayoría de las opciones que aparecen en el formulario Crear RCC o RMC.Haga clic en Guardar y salir para continuar. Después de guardar el archivo RMC, el cuadro de aviso proporciona diferentes opciones. Si se han registrado datos de rampa de frecuencia y/o estimulación repetitiva, siga las instrucciones para analizarlos.De lo contrario, seleccione ir directamente para crear la opción de archivo MEM para crear un archivo MEM. Haga clic en Aceptar para continuar. Haga clic en Guardar y salir para continuar.Haga clic en Aceptar para agregar los datos de RMC al archivo MEM. Haga clic en Agregar desde el archivo RMC de entrada para agregar estos datos al archivo MEM y, a continuación, cambie el directorio para guardar el archivo MEM compuesto. A continuación, haga clic en Guardar y salir para guardarlo.Haga clic en Aceptar para guardar el archivo QZD remesurado para permitir la diferenciación del archivo QZD original mediante un signo de libra. En este estudio, se compararon 14 pacientes con 29 sujetos sanos. Los datos demográficos del sujeto se muestran aquí.Las grabaciones de un sujeto sano y un paciente muestran una diferencia clara en el cambio porcentual en la latencia. La comparación de los MRVC de los pacientes con sujetos sanos muestra que la MRRP se prolongó y la supernormalidad temprana y la supernormalidad tardía se redujeron en los pacientes en comparación con los controles saludables. El paso más importante en la grabación MVRC es el posicionamiento correcto de la aguja, donde se obtiene una amplitud estable con una intensidad de estímulo inferior a 10 miliamperios.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

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Simultánea pre-y post-sináptica de registro electrofisiológico<em&gt; Xenopus</em&gt; Músculo Nervio-Co-culturas

Much information about the coupling of  presynaptic ionic currents with the release of neurotransmitter has been obtained  from invertebrate preparations, ...

Proprioception and Tension Receptors in Crab Limbs: Student Laboratory Exercises

Propiocepción y la tensión en los receptores de cangrejo Limbs: Ejercicios de Laboratorio Estudiante

The primary purpose of these procedures is to demonstrate for teaching and research purposes how to record the activity of living primary sensory neurons ...

Dissection of the Transversus Abdominis Muscle for Whole-mount Neuromuscular Junction Analysis

Dissection of the Transversus Abdominis Muscle for Whole-mount Neuromuscular Junction Analysis

Disección Del Músculo Transverso Abdominis Para El Análisis De La Unión Neuromuscular De Montaje Completo

Analysis of neuromuscular junction morphology can give important insight into the physiological status of a given motor neuron. Analysis of thin flat ...

An In Vitro Adult Mouse Muscle-nerve Preparation for Studying the Firing Properties of Muscle Afferents

An In Vitro Adult Mouse Muscle-nerve Preparation for Studying the Firing Properties of Muscle Afferents

Un<em&gt; In Vitro</em&gt; Mouse Adulto Preparación músculo-nervio para estudiar las propiedades de cocción de los aferentes musculares

Muscle sensory neurons innervating muscle spindles and Golgi tendon organs encode length and force changes essential to proprioception. Additional ...

High Throughput Assay to Examine Egg-Laying Preferences of Individual Drosophila melanogaster

High Throughput Assay to Examine Egg-Laying Preferences of Individual Drosophila melanogaster

Ensayo de Alto Rendimiento para el Examen de Preferencias de la puesta de huevos individual<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Recently, egg-laying preference of Drosophila has emerged as a genetically tractable model to study the neural basis of simple decision-making processes. ...