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•
09:24 min
May 9th, 2020
DOI :
10.3791/60799-v
Chapters
0:04
Introduction
1:02
Generation of Inducible Knockdown GCSCs Lines
3:31
Generation of Stable Transfected Cell Lines
6:12
Sphere Formation Assay
6:54
Results: Inducible Knockdown of Clusterin Inhibits GCSC Self-renewal Capacity
8:22
Conclusion
Transcript
癌幹細胞は、薬剤耐性に再発した癌の転移に関与している。このプロトコルは、がん幹細胞の主要遺伝子の機能を調査するための効率的な方法を提供します。条件付きノックダウンシステムと適応球形成アッセイを用いて、この方法は、異なるタイプの癌幹細胞における幹細胞関連遺伝子に対するインビトロおよびインビボ機能の研究に容易に適応される。
手順を実証すると、私の研究室の研究アシスタントであるユーティン・リーとシャンユー・タンです。レンチウイルス粒子を生成するには、400万個の293Tレンチウイルス
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Summary
本プロトコルでは、患者由来のGCSCsのステムに及ぼすクラスタリングの効果を研究するために、条件付きノックダウンシステムと適合球形成アッセイを用いた実験計画を提示する。このプロトコルは、異なるタイプのCSCにおけるステム関連遺伝子のインビトロおよびインビボ機能の両方を研究するために容易に適応することができる。
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