Name: a rapid method for multispectral fluorescence imaging of frozen tissue sections
Uploaded: 2020-03-30T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Rapid Method for Multispectral Fluorescence Imaging of Frozen Tissue Sections at JoVE.com

Imaging og analyse vejledning blev leveret af Research Resources Center - Research Histology og Tissue Imaging Core ved University of Illinois i Chicago etableret med støtte fra kontoret for vicekansler for forskning. Arbejdet blev støttet af NIH/NCI RO1CA191317 til CLP, af NIH/NIAMS (SBDRC grant 1P30AR075049-01) til Dr. A. Paller, og med støtte fra Robert H. Lurie Comprehensive Cancer Center til Immunotherapy Assessment Core på Northwestern University.

Mus milt og HLF16 mus tumor væv23 blev fremstillet fra vores laboratorium. Human tonsil væv blev købt fra en kommerciel leverandør. Nærmere oplysninger findes i materialetabellen.
1. Indlejring af væv
<ol><li>Integrer frisk væv i OCT (optimal skæretemperatur) opløsning og snap fryse ved hjælp af enten tøris eller flydende nitrogen.</li>
	<li>Opbevar væv ved -80 °C.</li>
</ol>2. Kryosektion
<ol><li>Skær 8 μm sek...

Frosset væv er i vid udstrækning blevet anvendt til mIF-billeddannelse til traditionelt at detektere tre til fire markører31 på et væv ved hjælp af den direkte og indirekte metode32. I den direkte metode konjugeres antistoffer til fluorescerende farvestoffer eller kvanteprikker33 for at mærke vævet, mens der i den indirekte metode anvendes et ukonjugeret primært antistof til at mærke vævet efterfulgt af et fluorophore-konjugeret sekundært...

De seneste fremskridt inden for mikroskopiske billeddannelsesteknikker har forbedret vores viden og forståelse af biologiske processer og sygdomstilstande betydeligt. In situ påvisning af proteiner i væv via kromoogen immunhistokemi (IHC) udføres rutinemæssigt i patologi. Påvisning af flere markører ved hjælp af kromoogen IHC-farvning er imidlertid udfordrende1, og nyere metoder til anvendelse af multiplex immunofluorescens (mIF) farvningsmetoder, hvor flere biologiske markører er mærket på en enkelt vævsprøve, er under udvikling. Påvisning af flere biologiske markører er nyttig, fordi oplysninger om vævsarkitektur, rumlig fordeling af celler og antigen-samekspression alle er fanget i en enkelt vævsprøve2. Brugen af multispektral fluorescensbilleddannelsesteknologi har gjort det muligt at påvise flere biologiske markører. Ved hjælp af specifik optik kan fluorescenssen for hver enkelt fluorophore adskilles eller "ublandede", hvilket gør det muligt at påvise flere markører uden spektralkrydstale3. Multispektraderende fluorescens imaging er ved at blive en kritisk tilgang i cellebiologi, præklinisk lægemiddeludvikling, klinisk patologi, og tumor immun-profilering4,5,6. Vigtigere er det, den spacial fordeling af immunceller (specielt CD8 T-celler) kan tjene som en prognosefaktor for patienter med eksisterende tumorer7.
Forskellige tilgange til multiplex fluorescens farvning er blevet udviklet og kan udføres enten samtidigt eller sekventialt. I den samtidige farvningsmetode tilsættes alle antistofferne sammen som en cocktail i et enkelt trin for at mærke vævet. UltraPlex-teknologi bruger en cocktail af hapten-konjugerede primære antistoffer efterfulgt af en cocktail af fluorophore-konjugerede anti-hapten sekundære antistoffer. InSituPlex teknologi8 bruger en cocktail af unikke DNA-konjugerede primære antistoffer, der samtidig føjes til vævet efterfulgt af en forstærkning trin og endelig fluorophore-konjugerede sonder, der supplerer hver unik DNA-sekvens på det primære antistof. Begge disse teknologier gør det muligt at påvise fire markører plus 4',6-diamino-2-phenylindole (DAPI) til nuklear farvning. To andre metoder til samtidig multiplexfarvning er baseret på sekundært ionmassespektrometri9. Hyperion Imaging System bruger billeddannelse masse cytometri10 til at opdage op til 37 markører. Denne teknologi bruger en cocktail af metal-konjugerede antistoffer til pletter væv, og specifikke områder af væv er ablated af en laser og overføres til en masse cytometer, hvor metalioner detekteres. En anden lignende teknologi er IONPath, som bruger multiplexed ion stråle imaging teknologi11. Denne teknologi bruger et modificeret massespektrometriinstrument og en iltionskilde i stedet for laser til at ablatede de metalkonjugerede antistoffer. Mens alle disse samtidige multiplex farvning tilgange gør det muligt at påvise flere markører, omkostningerne forbundet med konjugering DNA, haptens, eller metaller til antistoffer, tab af væv på grund af ablation, og den omfattende billedbehandling for unmixing kan ikke undervurderes. Desuden er kits og farvningprotokoller i øjeblikket kun tilgængelige for FFPE-væv, og udvikling af brugerdefinerede paneler medfører yderligere tid og udgifter.
Den sekventielle multiplex farvning metode, derimod, omfatter mærkning af vævet med et antistof til en markør, stripning at fjerne antistoffet, efterfulgt af sekventielle gentagelser af denne proces til at mærke flere markører12. Forstærkningen af tyramidsignalet (TSA) er den hyppigst anvendte sekventielle multipleksingmetode. To andre multipleksing teknologier bruger en kombination af samtidige og sekventielle farvning metoder. CODEX-platformen13 anvender en cocktail af antistoffer, der er konjugeret til unikke DNA-oligonukleotidsekvenser, der i sidste ende mærkes med en fluorophore ved hjælp af et indekseret polymeriseringstrin efterfulgt af billeddannelse, stripning og gentagelse af processen for at detektere op til 50 markører. MultiOmyx multiplex-farvningsmetoden14 er en gentagelse af farvning med en cocktail af tre til fire fluorophore-konjugerede antistoffer, billeddannelse, dæmpning af fluorophores og gentagelse af denne cyklus for at detektere op til 60 markører på en enkelt sektion. Svarende til den samtidige multiplex farvning metode, mens en bred vifte af markører kan detekteres, den tid, der er involveret i farvning, billede erhvervelse, behandling og analyse er omfattende. Stripping / quenching trin indebærer opvarmning og / eller blegning af vævsprøve og dermed den sekventielle multiplex farvning tilgang er almindeligt udført på FFPE væv, der opretholder væv integritet ved opvarmning eller blegning.
Formalin fiksering og efterfølgende paraffin indlejring er let udføres i en klinisk indstilling, væv blokke er nemme at gemme, og flere multiplex farvning protokoller er tilgængelige. Men, behandling, indlejring, og deparaffinization af FFPE væv, samt antigen hentning15, en proces, hvorved antistoffer bedre kan få adgang epitoper, er tidskrævende. Desuden bidrager den behandling, der er involveret i FFPE-væv, til autofluorescens16 og masker er rettet mod epitoper, hvilket resulterer i variabilitet og mangel på antistofklon til rådighed til påvisning af antigener i FFPE-væv17,18,19. Et eksempel er det humane leukocytantigen (HLA) klasse I alleler20. I modsætning hertil indebærer fastfrysning af væv ikke omfattende behandlingstrin før eller efter fastsættelse, omgåelse af behovet for antigenudtagning21,22og gør det gavnligt at påvise en bredere vifte af mål. Derfor kan det være værdifuldt at bruge frosset væv til multispektral fluorescensscanning til at påvise mål for prækliniske og kliniske undersøgelser.
I betragtning af ovennævnte begrænsninger ved brug af FFPE-væv spurgte vi, om multispektral fluorescensbilleddannelse kan udføres på frosset væv. For at løse dette spørgsmål, vi testede en samtidig multiplex farvning metode ved hjælp af et panel af fluorophore-konjugerede antistoffer til at opdage flere antigener og analyseret farvning ved hjælp af en semiautomated multispektral imaging system. Vi var i stand til samtidig plette op til seks markører i en enkelt vævssektion inden for 90 min.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetone (histological grade)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A16F-1GAL</td>
			<td>Fixing tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488 anti-mouse CD3</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>100212</td>
			<td>Clone - 17A2; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488, eBioscience anti-human CD20</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>53-0202-82</td>
			<td>Clone - L26; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 555 Mouse anti-Ki-67</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>558617</td>
			<td>Primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 594 anti-human CD3</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>300446</td>
			<td>Clone - UCHT1; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 594 anti-mouse CD8a</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>100758</td>
			<td>Clone - 53-6.7; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 647 anti-human CD8a</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>372906</td>
			<td>Clone - C8/144B; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 647 anti-mouse CD206 (MMR)</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>141711</td>
			<td>Clone - C068C2; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 647 anti-mouse CD4 Antibody</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>100426</td>
			<td>Clone - GK1.5; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6 Mouse</td>
			<td>Charles River Laboratories</td>
			<td>27</td>
			<td>Mouse frozen tissues used for multispectral training</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coplin Jar</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S6016-6EA</td>
			<td>Rehydrating and washing slides</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI Solution</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>564907</td>
			<td>Nucleic Acid stain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diamond White Glass Charged Slides</td>
			<td>DOT Scientific</td>
			<td>DW7590W</td>
			<td>Adhering tissue sections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Phosphate Buffered Saline 1x (without Ca and Mg)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>MT21031CV</td>
			<td>Washing and diluent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gold Seal Cover Slips</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>3306</td>
			<td>Protecting stained tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Normal Tonsil OCT frozen tissue block</td>
			<td>AMSBio</td>
			<td>AMS6023</td>
			<td>Human frozen tissue used for multispectral staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Serum 1X</td>
			<td>Gemini Bio-Products</td>
			<td>100-512</td>
			<td>Blocking and diluent for human tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>inForm</td>
			<td>Akoya Biosciences</td>
			<td>Version 2.4.1</td>
			<td>Machine learning software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PerCP/Cyanine5.5 anti-human CD4</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>300529</td>
			<td>Clone - RPA-T4; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PerCP-Cy 5.5 Rat Anti-CD11b</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>550993</td>
			<td>Clone - M1/70; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenochart</td>
			<td>Akoya Biosciences</td>
			<td>Version 1.0.8</td>
			<td>Whole slide scan software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ProLong Diamond Antifade Mountant</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>P36965</td>
			<td>Mounting medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Research Cryostat</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td>CM3050 S</td>
			<td>Sectioning tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Superblock 1X</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>37515</td>
			<td>Blocking mouse tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue-Tek O.C.T Solution</td>
			<td>Sakura Finetek</td>
			<td>4583</td>
			<td>Embedding tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vectra 3.0 Automated Quantitative Pathology Imaging System, 6 Slide</td>
			<td>Akoya Biosciences</td>
			<td>CLS142568</td>
			<td>Semi-automated multispectral imaging system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vectra Software</td>
			<td>Akoya Biosciences</td>
			<td>Version 3.0.5</td>
			<td>Software to operate microscope</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a rapid method for multispectral fluorescence imaging of frozen tissue sections

Multispektraderende fluorescensbilleddannelse på formalin-fast paraffin-indlejret (FFPE) væv gør det muligt at påvise flere markører i en enkelt vævsprøve, der kan give oplysninger om antigen samekspression og rumlig fordeling af markørerne. Manglen på egnede antistoffer mod formalinfast væv kan dog begrænse arten af markører, der kan påvises. Desuden er farvningsmetoden tidskrævende. Her beskriver vi en hurtig metode til at udføre multispektral fluorescensscanning på frosset væv. Metoden omfatter fluorophore kombinationer, der anvendes, detaljerede trin til farvning af mus og menneskelige frosne væv, og scanning, erhvervelse og analyse procedurer. Til farvningsanalyse anvendes et kommercielt tilgængeligt halvautomatisk multispektral fluorescensbilledsystem. Ved hjælp af denne metode blev op til seks forskellige markører farves og detekteret i en enkelt frossen vævssektion. Machine learning analysis software kan fænotypeceller, der kan bruges til kvantitativ analyse. Den metode, der er beskrevet her for frosset væv, er nyttig til påvisning af markører, der ikke kan påvises i FFPE-væv, eller for hvilke der ikke er antistoffer til rådighed for FFPE-væv.

Påvisning af enkeltfarvede markører på frosne miltsektioner Da det halvautomatiske billedbehandlingssystem bruger et LCTF-system (liquid crystal tunable filter), der giver mulighed for en bredere vifte af bølgelængdedetektering25, og fordi der ikke blev udført signalforstærkningstrin her, optimerede vi først påvisningen af vores primære konjugerede antistoffer for hver markør på mikroskopet. Et eksempel vises i Figur 1, hvor hver enkelt...

Watch this Scientific Journal Video about A Rapid Method for Multispectral Fluorescence Imaging of Frozen Tissue Sections at JoVE.com

A Rapid Method for Multispectral Fluorescence Imaging of Frozen Tissue Sections

Vi beskriver en hurtig farvningmetode til at udføre multispektral billeddannelse på frosset væv.

En hurtig metode til multispektral fluorescensbilleddannelse af frosne vævssektioner

Multispectral fluorescence imaging on formalin-fixed paraffin-embedded (FFPE) tissues enables the detection of multiple markers in a single tissue sample ...

Denne metode er nyttig til at detektere og samlokalisere flere biomarkører i en enkelt kryosektion, herunder markører, der normalt ikke kan påvises i paraffinsektioner. Ved hjælp af denne eksperimentelle farvningsmetode reduceres farvningstiden betydeligt, og metoden kan udføres i ethvert laboratorium. Demonstrere denne metode vil blive Dinesh Jaishankar.Han er en dygtig postdoc fra laboratoriet, og også Immunterapi Assessment Core, Facilities Manager. Når der vælges antistoffer til analysen, skal du overveje de excitations- og emissionsfiltersæt, der er tilgængelige på det halvautomatiske billedsystem. Og efter at have testet forskellige kombinationer af fluorophore konjugeret primære antistoffer, forberede fluorophores, der skal anvendes, så du har minimal spektral overlapning som foreslået i tabellen.For multiplex farvning, forberede en cocktail af antistoffer med kompatible fluorophores på forudbestemte optimale vrangforestillinger, og tilføje cocktail til væv dele af interesse. For en enkelt markør farvning, tilføje den primære konjugeret antistof kun til diaset. For alle farvninger, omfatte en kontrol unstained dias, der gennemgår den samme farvning procedure uden tilsætning af en primær konjugeret antistof.Efter en times inkubation ved stuetemperatur, der er beskyttet mod lys, vaskes objektglassene to gange med PBS i fem minutter pr. vask. Efter den anden vask, tæller pletten multiplex farvede dias med DAPI i syv minutter ved stuetemperatur beskyttet mod lys, efterfulgt af to fem minutters vask i PBS. For at oprette et spektralbibliotek skal du indstille lampens effekt af det multispektrale billedsystem til 100 % og åbne mikroskopets operativsystem.Vælg Rediger protokol og ny protokol. Angiv et protokolnavn, og vælg Fluorescens under billedtilstand. Giv derefter et undersøgelsesnavn, og indlæs de enkelte farvede dias på scenen.Klik på Rediger eksponering, og brug indstillingerne for automatisk fokus og automatisk udbliksering til at justere eksponeringstiderne og få snapshots for de enkelte farvede dias. Når du har afbilledet de enkelte farvede dias, skal du gemme protokollen. Og i machine learning-softwaren under fanen Byg bibliotek skal du indlæse hvert enkelt farves.Vælg det relevante gulv, og klik på Uddrag. Softwaren vil automatisk udtrække fluorescerende signal valgt i gulvet. Hvis du vil gemme den udtrukne farve, skal du klikke på Gem i butikken.Der kan oprettes en ny gruppe, eller den udtrukne farve kan gemmes i en eksisterende gruppe. For multispektrale billedbehandling, når spektralbiblioteket er blevet oprettet og verificeret, skal du justere fokus- og eksponeringstiderne på multixfarvet dias som vist og åbner scannede dias for at oprette en ny opgave. Angiv et slide-id, og vælg en protokol.Vælg hele diasscanningen under opgaven for at udføre en hel diasscanning på multixfarvet slide. Vælg interesseområder på tværs af billedet i hele diasscanningsbilledet. Disse områder scannes ved hjælp af de tidligere indstillede eksponeringstider på multiplex-diaset, der skal bruges til spektral ubblanding og analyse.I mikroscope-driftssoftwaren skal du vælge anskaffe MSI-felter under opgave og derefter klikke på Procesdias for at hente områder af interesse ved en 20x-forstørrelse. Når de områder af interesse er erhvervet, i machine learning software, skal du klikke på Fil og Åbn under fanen Manuel analyse for at indlæse multiplex farvede billeder. Vælg den spektrale bibliotekskilde, og klik på Vælg gulve for at vælge det tidligere gemte spektralbibliotek.Klik på Filer og Åbn for at indlæse det ikke-tilbageholdte billede. Klik derefter på ikonet for automatisk trykfarvemarkør, og tegn en streg eller et område på det uhæmmede dias for at identificere autofluorescens i vævet. Under fanen Rediger mærker og farver skal du derefter tildele navne for hvert mærke, og klik på Forbered alle.Når du har kontrolleret det spektrally ublandet billede, skal du i maskinlæringssoftwaren vælge cytoplasmamembranen og markørindstillingerne fra panelet. Og ved hjælp af ellipse knappen, skal du vælge bruge dette signal til at finde, at konfigurere markøren til at opdage enten kerner, cytoplasma eller membran. Når der vælges en cytoplasmatisk eller membranmarkør, skal du vælge Brug signalet til at hjælpe med nuklear opdeling.Softwaren vil automatisk opdage og skabe individuelle masker til kernen, cytoplasmaet og membranen. Brug patologivisningen til et bestemt mærke og konfigurationsindstillingerne i softwaren til at justere maskerne, og klik på Målgruppe alle for at oprette et cellesegmenteringskort. Efter cellesegmentering skal du markere mærkerne for at fænotype de positive celler.Derudover skal du markere mindst fem celler, der ikke er plettet med den valgte markør for at fænotype de negative celler. Klik derefter på Togse klassificering for at træne softwaren til automatisk at registrere alle de celler, der er plettet med de valgte mærker i billedet. Der oprettes et fænotypekort.Som disse billeder viser, antistoffer valideret for flow cytometri kunne bruges til at visualisere væv farvning ved hjælp af flydende krystal tunable filter i semi-automatiseret billeddannelse system. Her kan der observeres et spektrally ublandet billede af frossen human tonsil, der omfatter mærkning af B-celler og prolifererende celler i follikulært germinalcenter og den intersækkulære T-celleregion. Patologivisningerne giver mulighed for visualisering af det individuelle farvningsmønster for hver markør i det væv af interesse, hvilket tyder på, at multiplex farvningsmetode og spektrale billeddannelse arbejde på frosset væv.Som påvist på en frossen mus tumor sektion, multispektrale billeddannelse kan også bruges til at visualisere tumor infiltrerende T-celler, og andre myeloid celle slægter, herunder tumor tilknyttede makrofager. Cellesegmentering og fænotype kort, og antallet af farvede celler for hver markør analyseret af softwaren kan genereres, viser, at softwaren kan bruges til kvantificering af den multispektrale farvning på frosne væv. For en ny 6to teknikken, er det vigtigt at lære de specifikke funktioner i din fluorochromes, og forberede kvalitet bibliotek dias til spektrale ubmixing med minimal spektral overlapning.Det er også vigtigt at udføre antistof titrering. Efter vores mening kan denne metode give sengeliggende oplysninger om effekten af immunterapi for kræft og andre terapeutiske anvendelser, især når timingen er af afgørende betydning.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Combination of Adhesive-tape-based Sampling and Fluorescence in situ Hybridization for Rapid Detection of Salmonella on Fresh Produce

Combination of Adhesive-tape-based Sampling and Fluorescence in situ Hybridization for Rapid Detection of Salmonella on Fresh Produce

This protocol describes a simple approach for adhesive-tape-based sampling of tomato and other fresh produce surfaces, followed by on-tape fluorescence in ...

Locked Nucleic Acid Flow Cytometry-fluorescence in situ Hybridization (LNA flow-FISH): a Method for Bacterial Small RNA Detection

Locked Nucleic Acid Flow Cytometry-fluorescence in situ Hybridization LNA flow-FISH: a Method for Bacterial Small RNA Detection

Locked Nucleic Acid Flowcytometri-fluorescens In situ Hybridisering (LNA flow-FISH): En metode til bakteriel små RNA Detection

Fluorescence in situ hybridization (FISH) is a powerful technique that is used to detect and localize specific nucleic acid sequences in the cellular ...

Non-invasive Optical Imaging of the Lymphatic Vasculature of a Mouse

Ikke-invasiv optisk billeddannelse af lymfatisk vaskulatur på en mus

The lymphatic  vascular system is an important component of the circulatory system that  maintains fluid homeostasis, provides immune surveillance, and ...

4D Multimodality Imaging of Citrobacter rodentium Infections in Mice

4D Multimodality Imaging of Citrobacter rodentium Infections in Mice

4D Multimodalitet Imaging af<em&gt; Citrobacter rodentium</em&gt; Infektioner i mus

This protocol outlines the steps required to  longitudinally monitor a bioluminescent bacterial infection using composite 3D diffuse light imaging ...

Fluorescence Time-lapse Imaging of the Complete S. venezuelae Life Cycle Using a Microfluidic Device

Fluorescence Time-lapse Imaging of the Complete S. venezuelae Life Cycle Using a Microfluidic Device

Fluorescens Time-lapse Imaging af Complete<em&gt; S. venezuelae</em&gt; Life Cycle Brug af en mikrofluidapparat

Live-cell imaging of biological processes at the single cell level has been instrumental to our current understanding of the subcellular organization of ...

A RAPID Method for Blood Processing to Increase the Yield of Plasma Peptide Levels in Human Blood

En hurtig metode til Blood Processing at øge udbyttet af Plasma-peptid niveauer i Human Blood

Research in the field of food intake regulation is gaining importance. This often includes the measurement of peptides regulating food intake. For the ...

Non-invasive In Vivo Fluorescence Optical Imaging of Inflammatory MMP Activity Using an Activatable Fluorescent Imaging Agent

Non-invasive In Vivo Fluorescence Optical Imaging of Inflammatory MMP Activity Using an Activatable Fluorescent Imaging Agent

Ikke-invasiv<em&gt; In vivo</em&gt; Fluorescens optisk billeddannelse af inflammatorisk MMP Aktivitet Brug et aktiverbart Fluorescent Imaging Agent

This paper describes a non-invasive method for imaging matrix metalloproteinases (MMP)-activity by an activatable fluorescent probe, via in vivo ...

An All-on-chip Method for Rapid Neutrophil Chemotaxis Analysis Directly from a Drop of Blood

En all-on-chip metode til hurtig neutrofile kemotaxis analyse direkte fra en bloddråbe

Neutrophil migration and chemotaxis are critical for our body's immune system. Microfluidic devices are increasingly used for investigating neutrophil ...

Visualizing Intracellular SNARE Trafficking by Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy

Visualisere intracellulære SNARE handel af fluorescens levetid Imaging mikroskopi

Soluble N-ethylmaleimide sensitive fusion protein (NSF) attachment protein receptor (SNARE) proteins are key for membrane trafficking, as they catalyze ...

Imaging Mycobacterium tuberculosis in Mice with Reporter Enzyme Fluorescence

Imaging Mycobacterium tuberculosis in Mice with Reporter Enzyme Fluorescence

Imaging Mycobacterium tuberkulose i mus med Reporter enzym fluorescens

Reporter enzyme fluorescence (REF) utilizes substrates that are specific for enzymes present in target organisms of interest for imaging or detection by ...