Name: a rapid method for multispectral fluorescence imaging of frozen tissue sections
Uploaded: 2020-03-30T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Rapid Method for Multispectral Fluorescence Imaging of Frozen Tissue Sections at JoVE.com

Imaging og analyse veiledning ble gitt av Research Resources Center – Research Histology og Tissue Imaging Core ved University of Illinois i Chicago etablert med støtte fra kontoret til visekansler for forskning. Arbeidet ble støttet av NIH/NCI RO1CA191317 til CLP, av NIH/NIAMS (SBDRC grant 1P30AR075049-01) til Dr. A. Paller, og ved støtte fra Robert H. Lurie Comprehensive Cancer Center til Immunotherapy Assessment Core ved Northwestern University.

Mus milt og HLF16 mus tumor vev23 ble hentet fra vårt laboratorium. Menneskelig mandlene vev ble kjøpt fra en kommersiell leverandør. Detaljer er gitt i materialtabellen.
1. Vevsinnebygging
<ol><li>Bygg inn friskt vev i OCT (optimal skjæretemperatur) løsning og snap fryse ved hjelp av enten tørris eller flytende nitrogen.</li>
	<li>Oppbevar vevet ved -80 °C.</li>
</ol>2. Kryoseksjon
<ol><li>Skjær 8 μm seksjoner i en ...

Frosne vev har i stor grad blitt brukt til mIF-avbildning for tradisjonelt å oppdage tre til fire markører31 på et vev ved hjelp av den direkte og indirekte metoden32. I den direkte metoden blir antistoffer konjugert til fluorescerende fargestoffer eller kvanteprikker33 for å merke vevet, mens i den indirekte metoden brukes et ukonjugert primært antistoff til å merke vevet etterfulgt av et fluorofhore-konjugert sekundært antistoff som spesifik...

Nylige fremskritt innen mikroskopiske bildeteknikker har betydelig forbedret vår kunnskap og forståelse av biologiske prosesser og sykdomstilstander. Ved situ påvisning av proteiner i vev via kromogen immunohistochemistry (IHC) utføres rutinemessig i patologi. Imidlertid er påvisning av flere markører ved hjelp av kromogen IHC farging utfordrende1 og nyere metoder for å bruke multipleks immunofluorescens (mIF) farging tilnærminger, karakterisert ved at flere biologiske markører er merket på en enkelt vevsprøve, blir utviklet. Påvisning av flere biologiske markører er nyttig, fordi informasjon relatert til vevsarkitektur, romlig fordeling av celler og antigenkouttrykk er alle fanget i en enkelt vevsprøve2. Bruken av multispektral fluorescensbildeteknologi har gjort påvisning av flere biologiske markører mulig. I denne teknologien, ved hjelp av spesifikk optikk fluorescensspektra av hver enkelt fluoroforfor kan skilles eller "ublandet", slik at påvisning av flere markører uten spektral crosstalk3. Multispektral fluorescensavbildning blir en kritisk tilnærming i cellebiologi, preklinisk legemiddelutvikling, klinisk patologi og tumorimmunprofilering4,5,6. Viktigere, spacial fordeling av immunceller (spesielt CD8 T celler) kan tjene som en prognostisk faktor for pasienter med eksisterende svulster7.
Ulike tilnærminger til multipleks fluorescens farging er utviklet og kan utføres enten samtidig eller sekvensielt. I den samtidige fargemetoden legges alle antistoffene sammen som en cocktail i et enkelt trinn for å merke vevet. UltraPlex-teknologi bruker en cocktail av hapten-konjugerte primære antistoffer etterfulgt av en cocktail av fluorofofan-konjugerte anti-hapten sekundære antistoffer. InSituPlex-teknologi8 bruker en cocktail av unike DNA-konjugerte primære antistoffer som samtidig legges til vevet etterfulgt av et forsterkningstrinn og til slutt fluoroforiske konjugerte sonder som er komplementære til hver unike DNA-sekvens på det primære antistoffet. Begge disse teknologiene gjør det mulig å oppdage fire markører pluss 4',6-diamino-2-fenylindzol (DAPI) for kjernefysisk farging. To andre tilnærminger for samtidig multipleksfarging er basert på sekundær ionmassespektrometri9. Hyperion Imaging System bruker bildemasse cytometri10 for å oppdage opptil 37 markører. Denne teknologien bruker en cocktail av metall-konjugerte antistoffer for å flekke vevet, og bestemte områder av vevet er ablated av en laser og overføres til et massecytometer hvor metallionene oppdages. En annen lignende teknologi er IONPath, som bruker multipleksert ion strålebildeteknologi11. Denne teknologien bruker et modifisert massespektrometriinstrument og en oksygenionkilde i stedet for laser for å ablate metallkonjugerte antistoffer. Mens alle disse samtidige multipleksfargingsmetodene muliggjør påvisning av flere markører, kan kostnadene som er involvert for å konjugere DNA, haptens eller metaller til antistoffer, tap av vev på grunn av ablasjon og omfattende bildebehandling for unmixing ikke undervurderes. Videre er sett og fargingprotokoller for tiden bare tilgjengelige for FFPE-vev, og utvikling av tilpassede paneler innebærer ekstra tid og utgifter.
Den sekvensielle multipleksfarfargingsmetoden, derimot, inkluderer merking av vevet med et antistoff mot en markør, stripping for å fjerne antistoffet, etterfulgt av sekvensielle gjentakelser av denne prosessen for å merke flere markører12. Tyramidsignalforsterkningen (TSA) er den mest brukte sekvensielle multipleksjonsmetoden. To andre multipleksingsteknologier bruker en kombinasjon av samtidige og sekvensielle fargingsmetoder. CODEX-plattformen13 benytter en cocktail av antistoffer som er konjugert til unike DNA oligonucleotide sekvenser som til slutt er merket med en fluorofor i bruk av et indeksert polymeriseringstrinn etterfulgt av avbildning, stripping og gjentaprosessen for å oppdage opptil 50 markører. MultiOmyx multiplex farging tilnærming14 er en iterasjon av farging med en cocktail av tre til fire fluorofor-konjugerte antistoffer, bildebehandling, slukke fluoroforer, og gjenta denne syklusen for å oppdage opptil 60 markører på en enkelt seksjon. I likhet med den samtidige multipleksfargingsmetoden, mens et bredt spekter av markører kan oppdages, er tiden som er involvert i farging, bildeoppkjøp, behandling og analyse omfattende. Stripping / slukking trinn innebærer oppvarming og / eller bleking vevprøven og dermed den sekvensielle multipleks farging tilnærming er ofte utført på FFPE vev som opprettholder vev integritet ved oppvarming eller bleking.
Formalin fiksering og påfølgende parafin innebygging utføres lett i en klinisk setting, vev blokker er lett å lagre, og flere multipleks farging protokoller er tilgjengelig. Imidlertid er behandlingen, innebygging og deparaffinisering av FFPE vev, samt antigen gjenfinning15, en prosess der antistoffer bedre kan få tilgang til epitoper, tidkrevende. Videre bidrar behandlingen involvert i FFPE vev til autofluorescens16 og masker mål epitoper, noe som resulterer i variabilitet og mangel på antistoff klone tilgjengelig for å oppdage antigener i FFPE vev17,18,19. Et eksempel er humant leukocytter antigen (HLA) klasse jeg alleles20. I motsetning innebærer snap frysing av vev ikke omfattende behandlingstrinn før eller etter fiksering, omgå behovet for antigen henting21,22, og gjør det gunstig for å oppdage et bredere spekter av mål. Derfor kan bruk av frosne vev for multispektral fluorescensavbildning være verdifullt for å oppdage mål for prekliniske og kliniske studier.
Gitt de ovennevnte begrensningene ved bruk av FFPE vev, spurte vi om multispektral fluorescensavbildning kan utføres på frosne vev. For å løse dette spørsmålet testet vi en samtidig multipleksfargingsmetode ved hjelp av et panel av fluorofor-konjugerte antistoffer for å oppdage flere antigener og analyserte farging ved hjelp av et halvautomatisert multispektralt bildesystem. Vi var i stand til å samtidig farge opp til seks markører i en enkelt vev seksjon innen 90 min.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetone (histological grade)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A16F-1GAL</td>
			<td>Fixing tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488 anti-mouse CD3</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>100212</td>
			<td>Clone - 17A2; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488, eBioscience anti-human CD20</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>53-0202-82</td>
			<td>Clone - L26; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 555 Mouse anti-Ki-67</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>558617</td>
			<td>Primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 594 anti-human CD3</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>300446</td>
			<td>Clone - UCHT1; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 594 anti-mouse CD8a</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>100758</td>
			<td>Clone - 53-6.7; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 647 anti-human CD8a</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>372906</td>
			<td>Clone - C8/144B; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 647 anti-mouse CD206 (MMR)</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>141711</td>
			<td>Clone - C068C2; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 647 anti-mouse CD4 Antibody</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>100426</td>
			<td>Clone - GK1.5; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6 Mouse</td>
			<td>Charles River Laboratories</td>
			<td>27</td>
			<td>Mouse frozen tissues used for multispectral training</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coplin Jar</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S6016-6EA</td>
			<td>Rehydrating and washing slides</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI Solution</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>564907</td>
			<td>Nucleic Acid stain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diamond White Glass Charged Slides</td>
			<td>DOT Scientific</td>
			<td>DW7590W</td>
			<td>Adhering tissue sections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Phosphate Buffered Saline 1x (without Ca and Mg)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>MT21031CV</td>
			<td>Washing and diluent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gold Seal Cover Slips</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>3306</td>
			<td>Protecting stained tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Normal Tonsil OCT frozen tissue block</td>
			<td>AMSBio</td>
			<td>AMS6023</td>
			<td>Human frozen tissue used for multispectral staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Serum 1X</td>
			<td>Gemini Bio-Products</td>
			<td>100-512</td>
			<td>Blocking and diluent for human tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>inForm</td>
			<td>Akoya Biosciences</td>
			<td>Version 2.4.1</td>
			<td>Machine learning software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PerCP/Cyanine5.5 anti-human CD4</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>300529</td>
			<td>Clone - RPA-T4; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PerCP-Cy 5.5 Rat Anti-CD11b</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>550993</td>
			<td>Clone - M1/70; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenochart</td>
			<td>Akoya Biosciences</td>
			<td>Version 1.0.8</td>
			<td>Whole slide scan software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ProLong Diamond Antifade Mountant</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>P36965</td>
			<td>Mounting medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Research Cryostat</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td>CM3050 S</td>
			<td>Sectioning tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Superblock 1X</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>37515</td>
			<td>Blocking mouse tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue-Tek O.C.T Solution</td>
			<td>Sakura Finetek</td>
			<td>4583</td>
			<td>Embedding tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vectra 3.0 Automated Quantitative Pathology Imaging System, 6 Slide</td>
			<td>Akoya Biosciences</td>
			<td>CLS142568</td>
			<td>Semi-automated multispectral imaging system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vectra Software</td>
			<td>Akoya Biosciences</td>
			<td>Version 3.0.5</td>
			<td>Software to operate microscope</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a rapid method for multispectral fluorescence imaging of frozen tissue sections

Multispektral fluorescensavbildning på formalin-fast parafin-innebygd (FFPE) vev gjør det mulig å oppdage flere markører i en enkelt vevsprøve som kan gi informasjon om antigenkouttrykk og romlig fordeling av markørene. Imidlertid kan mangel på egnede antistoffer for formalin-fikset vev begrense arten av markører som kan oppdages. I tillegg er fargemetoden tidkrevende. Her beskriver vi en rask metode for å utføre multispektral fluorescensavbildning på frosne vev. Metoden inkluderer fluoroforen kombinasjoner som brukes, detaljerte trinn for farging av mus og menneskelig frosset vev, og skanning, oppkjøp og analyse prosedyrer. For fargingsanalyse brukes et kommersielt tilgjengelig semiautomatisert multispektralt fluorescensbildesystem. Gjennom denne metoden ble opptil seks forskjellige markører farget og oppdaget i en enkelt frossen vevsseksjon. Maskinlæringsanalyseprogramvaren kan fenotypeceller som kan brukes til kvantitativ analyse. Metoden som er beskrevet her for frosne vev er nyttig for påvisning av markører som ikke kan oppdages i FFPE vev eller som antistoffer ikke er tilgjengelige for FFPE vev.

Påvisning av enkeltfargede markører på frosne miltseksjoner Som det halvautomatiske bildebehandlingssystemet bruker et flytende krystalltunablefilter (LCTF) system som gjør det mulig for et bredere spekter av bølgelengdedeteksjon25, og fordi ingen signalforsterkningstrinn ble utført her, optimaliserte vi først påvisning av våre primære konjugerte antistoffer for hver markør på mikroskopet. Et eksempel vises i figur 1, der hver enkeltfar...

Watch this Scientific Journal Video about A Rapid Method for Multispectral Fluorescence Imaging of Frozen Tissue Sections at JoVE.com

A Rapid Method for Multispectral Fluorescence Imaging of Frozen Tissue Sections

Vi beskriver en rask fargingsmetode for å utføre multispektral avbildning på frosne vev.

En rask metode for multispektral fluorescens avbildning av frosne vevseksjoner

Multispectral fluorescence imaging on formalin-fixed paraffin-embedded (FFPE) tissues enables the detection of multiple markers in a single tissue sample ...

Denne metoden er nyttig for å oppdage, og sam-lokalisere flere biomarkører i en enkelt kryoseksjon, inkludert markører som normalt ikke kan oppdages i parafinseksjoner. Ved hjelp av denne eksperimentelle fargingsmetoden reduseres fargetiden betydelig og metoden kan utføres i ethvert laboratorium. Demonstrere denne metoden vil være Dinesh Jaishankar.Han er en dyktig postdoc fra laboratoriet, og også Immunotherapy Assessment Core, Facilities Manager. Når du velger antistoffer for analysen, bør du vurdere eksitasjons- og utslippsfiltersettene som er tilgjengelige på det halvautomatiske bildesystemet. Og etter å ha testet ulike kombinasjoner av fluorofor konjugert primære antistoffer, forberede fluoroforer som skal brukes slik at du har minimal spektral overlapping som foreslått i tabellen.For multipleksfarging, lag en cocktail av antistoffer med kompatible fluoroforer ved forhåndsbestemte optimale vrangforestillinger, og legg til cocktailen til vevseksjonene av interesse. For enkel markørfarging, legg til det primære konjugerte antistoffet bare til lysbildet. For alle flekker, inkluderer en kontroll uopphetet lysbilde som gjennomgår samme farging prosedyre uten tillegg av en primær konjugert antistoff.Etter en times inkubasjon ved romtemperatur beskyttet mot lys, vask lysbildene to ganger med PBS i fem minutter per vask. Etter den andre vasken, teller flekken multipleks farget lysbilder med DAPI i syv minutter ved romtemperatur beskyttet mot lys, etterfulgt av to fem minutters vasker i PBS. Hvis du vil opprette et spektralt bibliotek, setter du lampeeffekten til det flerspektrale bildesystemet til 100 %, og åpner mikroskopets operativsystem.Velg Rediger protokoll og ny protokoll. Skriv inn et protokollnavn, og velg Fluorescence under bildebehandlingsmodus. Deretter gir du et studienavn, og laster de enkle flekkede lysbildene på scenen.Klikk Rediger eksponering, og bruk alternativene for automatisk fokus og automatisk eksponering til å justere eksponeringstidene og hente øyeblikksbilder for enkeltfargede lysbilder. Når du har avbildet de enkle flekkede lysbildene, lagrer du protokollen. Og i maskinlæringsprogramvaren under Bygg bibliotek-fanen laster du inn hvert enkelt farget bilde.Velg riktig gulv og klikk På Pakk ut. Programvaren vil automatisk trekke ut fluorescerende signal valgt i gulvet. Hvis du vil lagre den utpakkede fargen, klikker du Lagre for å lagre.En ny gruppe kan opprettes, eller den utpakkede fargen kan lagres i en eksisterende gruppe. Når spektralbiblioteket er opprettet og verifisert for flerspektral bildebehandling, justerer du fokus- og eksponeringstidene på multipleksfarget lysbilde som vist, og åpner skannede lysbilder for å opprette en ny oppgave. Angi en lysbilde-ID, og velg en protokoll.Under oppgave velger du hele lysbildeskanningen for å utføre en hel lysbildeskanning på multipleksfarget lysbilde. Velg interesseområder på tvers av bildet i hele lysbildeskansbildet. Disse områdene skannes ved hjelp av de tidligere angitte eksponeringstidene på multiplekslysbildet som skal brukes til spektral unmixing og analyse.I programvaren for mikroskopoperatisering velger du hent MSI-felt under oppgave, og deretter klikker du Prosesslysbilde for å skaffe interesseområder på en 20x forstørrelse. Når interesseområdene er anskaffet, klikker du Fil og Åpne under kategorien Manuell analyse i maskinlæringsprogramvaren for å laste inn multipleksfargede bilder. Velg spektral bibliotekkilde, og klikk Velg gulv for å velge det tidligere lagrede spektralbiblioteket.Klikk Fil og Åpne for å laste inn det uopphetede bildet. Klikk deretter ikonet for automatiskfluorescence blekk markør og tegne en linje eller region på ustained lysbildet for å identifisere autofluorescence i vevet. Deretter tilordner du navn for hver markør under kategorien Rediger markører og farger, og klikker Forbered alle.Etter å ha bekreftet det spektralt ubxed bildet, velg cytoplasmamembranen og markøralternativene fra panelet i maskinlæringsprogramvaren. Og ved hjelp av ellipseknappen velger du bruk dette signalet til å finne, for å konfigurere markøren til å oppdage enten kjerner, cytoplasma eller membran. når en cytoplasmatisk eller membranmarkør er valgt, velger du alternativet Bruk signalet til å bistå i kjernefysisk splitting.Programvaren vil automatisk oppdage og lage individuelle masker for kjernen, cytoplasma og membran. Bruk patologivisningen for en bestemt markør og konfigurasjonsalternativene i programvaren til å justere maskene, og klikk Segmenter alle for å opprette et cellesegmenteringskart. Etter cellesegmentering velger du markørene for å fenotype de positive cellene.I tillegg velger du minst fem celler som ikke er farget med den valgte markøren for å fenotype de negative cellene. Klikk deretter På train classifier for å trene programvaren til å automatisk oppdage alle cellene farget med de valgte markørene i bildet. Et fenotypekart vil bli opprettet.Som disse bildene viser, kan antistoffer validert for strømningscytometri brukes til å visualisere vevsfarging ved hjelp av det flytende krystallmottakbare filteret i det halvautomatiske bildesystemet. Her kan det observeres et spektralt ublandt bilde av frosne menneskemandler som inkluderer merking av B-celler og proliferatingceller i follikulært germinalsenter, og det intersepekulære T-celleområdet. Patologi visninger alternativet tillater visualisering av den enkelte farging mønster for hver markør i vev av interesse, noe som tyder på at multiplex farging metode og spektral bildebehandling arbeid på frosset vev.Som demonstrert på en frossen mus tumor seksjon, multispektral avbildning kan også brukes til å visualisere tumor infiltrerende T-celler, og andre myeloid celle avstamning inkludert tumor assosiert makrofager. Cellesegmentering og fenotypekart, og antall fargede celler for hver markør analysert av programvaren kan genereres, noe som viser at programvaren kan brukes til kvantifisering av multispektral farging på frosset vev. For noen nye 6til teknikken, er det viktig å bli kjent med de spesifikke funksjonene i fluorokromene dine, og forberede kvalitetsbibliotek lysbilder for spektral unmixing med minimal spektral overlapping.Det er også viktig å utføre antistofftitrering. Etter vår mening kan denne metoden gi nattbordsinformasjon om effekten av immunterapi for kreft og andre terapeutiske applikasjoner, spesielt når timing er av essensen.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Combination of Adhesive-tape-based Sampling and Fluorescence in situ Hybridization for Rapid Detection of Salmonella on Fresh Produce

Combination of Adhesive-tape-based Sampling and Fluorescence in situ Hybridization for Rapid Detection of Salmonella on Fresh Produce

This protocol describes a simple approach for adhesive-tape-based sampling of tomato and other fresh produce surfaces, followed by on-tape fluorescence in ...

Locked Nucleic Acid Flow Cytometry-fluorescence in situ Hybridization (LNA flow-FISH): a Method for Bacterial Small RNA Detection

Locked Nucleic Acid Flow Cytometry-fluorescence in situ Hybridization LNA flow-FISH: a Method for Bacterial Small RNA Detection

Stengte Nucleic Acid flowcytometrisystemer-fluorescens In situ Hybridisering (LNA flow-FISH): En metode for Bakteriell små RNA Detection

Fluorescence in situ hybridization (FISH) is a powerful technique that is used to detect and localize specific nucleic acid sequences in the cellular ...

Non-invasive Optical Imaging of the Lymphatic Vasculature of a Mouse

Ikke-invasiv optisk avbildning av Lymfatisk blodkar av en mus

The lymphatic  vascular system is an important component of the circulatory system that  maintains fluid homeostasis, provides immune surveillance, and ...

4D Multimodality Imaging of Citrobacter rodentium Infections in Mice

4D Multimodality Imaging of Citrobacter rodentium Infections in Mice

4D Multimodalitet Imaging av<em&gt; Citrobacter rodentium</em&gt; Infeksjoner i Mus

This protocol outlines the steps required to  longitudinally monitor a bioluminescent bacterial infection using composite 3D diffuse light imaging ...

Fluorescence Time-lapse Imaging of the Complete S. venezuelae Life Cycle Using a Microfluidic Device

Fluorescence Time-lapse Imaging of the Complete S. venezuelae Life Cycle Using a Microfluidic Device

Fluorescens Time-lapse Imaging av Complete<em&gt; S. venezuelae</em&gt; Life Cycle Ved hjelp av en mikrofluid Device

Live-cell imaging of biological processes at the single cell level has been instrumental to our current understanding of the subcellular organization of ...

A RAPID Method for Blood Processing to Increase the Yield of Plasma Peptide Levels in Human Blood

En rask metode for Blood Processing å øke utbyttet av Plasma Peptide nivåer i menneskeblod

Research in the field of food intake regulation is gaining importance. This often includes the measurement of peptides regulating food intake. For the ...

Non-invasive In Vivo Fluorescence Optical Imaging of Inflammatory MMP Activity Using an Activatable Fluorescent Imaging Agent

Non-invasive In Vivo Fluorescence Optical Imaging of Inflammatory MMP Activity Using an Activatable Fluorescent Imaging Agent

Non-invasiv<em&gt; In vivo</em&gt; Fluorescens Optisk Imaging av Inflammatorisk MMP Aktivitet ved hjelp av en aktiverbar fluorescerende Imaging Agent

This paper describes a non-invasive method for imaging matrix metalloproteinases (MMP)-activity by an activatable fluorescent probe, via in vivo ...

An All-on-chip Method for Rapid Neutrophil Chemotaxis Analysis Directly from a Drop of Blood

En all-on-chip metode for rask nøytrofilt kjemotaksisanalyse direkte fra en bloddråpe

Neutrophil migration and chemotaxis are critical for our body's immune system. Microfluidic devices are increasingly used for investigating neutrophil ...

Visualizing Intracellular SNARE Trafficking by Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy

Visualisere intracellulær SNARE smugling av fluorescens levetid Imaging mikroskopi

Soluble N-ethylmaleimide sensitive fusion protein (NSF) attachment protein receptor (SNARE) proteins are key for membrane trafficking, as they catalyze ...

Imaging Mycobacterium tuberculosis in Mice with Reporter Enzyme Fluorescence

Imaging Mycobacterium tuberculosis in Mice with Reporter Enzyme Fluorescence

Imaging Mycobacterium tuberculosis i mus med Reporter enzym fluorescens

Reporter enzyme fluorescence (REF) utilizes substrates that are specific for enzymes present in target organisms of interest for imaging or detection by ...