Name: a rapid method for multispectral fluorescence imaging of frozen tissue sections
Uploaded: 2020-03-30T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Rapid Method for Multispectral Fluorescence Imaging of Frozen Tissue Sections at JoVE.com

Imaging och analys vägledning tillhandahölls av Research Resources Center - Forskning Histologi och Tissue Imaging Core vid University of Illinois i Chicago inrättades med stöd från kontoret för vicekansler för forskning. Arbetet stöddes av NIH/NCI RO1CA191317 till CLP, av NIH/NIAMS (SBDRC grant 1P30AR075049-01) till Dr. A. Paller, och med stöd av Robert H. Lurie Comprehensive Cancer Center till Immunotherapy Assessment Core vid Northwestern University.

Mus mjälte och HLF16 mus tumör vävnader23 erhölls från vårt laboratorium. Mänsklig tonsill vävnad köptes från en kommersiell leverantör. Detaljer finns i tabellen över material.
1. Vävnad inbäddning
<ol><li>Bädda in färsk vävnad i OCT -lösningen (optimal skärtemperatur) och snäppfrys med antingen torris eller flytande kväve.</li>
	<li>Lagra vävnader vid -80 °C.</li>
</ol>2. Kryosectioning
<ol><li>Skär ...

Frysta vävnader har i stor utsträckning använts för mIF-avbildning för att traditionellt upptäcka tre till fyra markörer31 på en vävnad med den direkta och indirekta metoden32. I den direkta metoden konjugeras antikroppar till fluorescerande färgämnen eller kvantprickar33 för att märka vävnaden, medan en okonjugerad primärantikropp i den indirekta metoden används för att märka vävnaden följt av en fluoroforekonjugerad sekundär an...

De senaste framstegen inom mikroskopisk avbildning tekniker har avsevärt förbättrat vår kunskap och förståelse för biologiska processer och sjukdomstillstånd. In situ detektion av proteiner i vävnader via kromogena immunohistochemistry (IHC) utförs rutinmässigt i patologi. Detektion av flera markörer med hjälp av kromogenAHC färgning är dock utmanande1 och nyare metoder för att använda multiplex immunofluorescens (mIF) färgning metoder, där flera biologiska markörer är märkta på ett enda vävnadsprov, håller på att utvecklas. Detektion av flera biologiska markörer är användbart, eftersom information om vävnadsarkitektur, rumslig fördelning av celler och antigensamuttryck alla fångas upp i ett enda vävnadsprov2. Användningen av multispektrala fluorescensavbildningsteknik har möjliggjort deteringar av flera biologiska markörer. I denna teknik, med hjälp av specifik optik fluorescensspektra av varje enskild fluorofore kan separeras eller "oblanda", vilket gör det möjligt att upptäcka flera markörer utan spektrala överhörning3. Multispektrala fluorescens imaging blir en kritisk strategi i cellbiologi, preklinisk läkemedelsutveckling, klinisk patologi, och tumör immun-profilering4,,5,6. Viktigt, den spacial fördelningen av immunceller (särskilt CD8 T-celler) kan fungera som en prognostisk faktor för patienter med befintliga tumörer7.
Olika metoder för multiplexfluorescensfärgning har utvecklats och kan utföras antingen samtidigt eller sekventiellt. I den samtidiga färgningsmetoden tillsätts alla antikroppar tillsammans som en cocktail i ett enda steg för att märka vävnaden. UltraPlex-tekniken använder en cocktail av haptenkonjugerade primära antikroppar följt av en cocktail av fluoroforekonjugerade anti-hapten sekundära antikroppar. InSituPlex-teknik8 använder en cocktail av unika DNA-konjugerade primära antikroppar som samtidigt tillsätts vävnaden följt av ett förstärkningssteg och slutligen fluoroforekonjugerade sonder som kompletterar varje unik DNA-sekvens på den primära antikroppen. Båda dessa tekniker möjliggör detektion av fyra markörer plus 4',6-diamino-2-fenylindole (DAPI) för kärnfläckning. Två andra metoder för samtidig multiplexfärgning är baserade på sekundär jonmasspektrometri9. Hyperion Imaging System använder imaging massa cytometri10 för att upptäcka upp till 37 markörer. Denna teknik använder en cocktail av metallkonjugerade antikroppar för att färga vävnaderna, och specifika områden i vävnaderna ablated av en laser och överförs till en massa cytometer där metalljoner upptäcks. En annan liknande teknik är IONPath, som använder multiplexerad jonstrålebildteknik11. Denna teknik använder en modifierad masspektrometri instrument och en syrejonkälla i stället för laser för att ablate metallkonjugerade antikroppar. Medan alla dessa samtidiga multiplex färgning metoder möjliggör detektion av flera markörer, kostnaderna för konjugera DNA, haptens, eller metaller till antikroppar, förlust av vävnad på grund av ablation, och omfattande bildbehandling för oblandning kan inte underskattas. Dessutom, kit och färgning protokoll är för närvarande endast tillgängliga för FFPE vävnader och utveckla anpassade paneler medför ytterligare tid och utgifter.
Den sekventiella multiplexfärgningsmetoden omfattar däremot märkning av vävnaden med en antikropp till en markör, strippning för att avlägsna antikroppen, följt av sekventiella upprepningar av denna process för att märka flera markörer12. Tyramidsignalförstärkning (TSA) är den vanligaste sekventiella multiplexeringsmetoden. Två andra multiplexeringstekniker använder en kombination av samtidiga och sekventiella färgningsmetoder. CODEX-plattformen13 använder en cocktail av antikroppar som är konjugerade till unika DNA-oligonukleotidsekvenser som så småningom är märkta med en fluorofore med hjälp av ett indexerat polymerisationssteg följt av bildbehandling, strippning och upprepande av processen för att upptäcka upp till 50 markörer. MultiOmyx multiplex färgning strategi14 är en iteration av färgning med en cocktail av tre till fyra fluoroforekonjugerade antikroppar, imaging, släcka fluorofores, och upprepa denna cykel för att upptäcka upp till 60 markörer på en enda sektion. I likhet med den samtidiga multiplexfärgningsmetoden, medan ett brett spektrum av markörer kan detekteras, är tiden som är involverad i färgning, bildförvärv, bearbetning och analys omfattande. Strippnings-/släckningssteget innebär uppvärmning och/eller blekning av vävnadsprovet och därmed utförs den sekventiella multiplexfärgningsmetoden vanligen på FFPE-vävnader som bibehåller vävnadsintegritet vid uppvärmning eller blekning.
Formalin fixering och efterföljande paraffin inbäddning utförs lätt i en klinisk miljö, vävnad block är lätta att lagra, och flera multiplex färgning protokoll finns tillgängliga. Emellertid, bearbetning, inbäddning och deparaffinisering av FFPE vävnader, samt antigenhämtning 15, en process genom vilken antikroppar bättre kan komma åt epitopes, är tidskrävande. Dessutom bidrar bearbetningen i FFPE-vävnader till autofluorescens16 och masker måleptoper, vilket resulterar i variationer och brist på antikroppsklon tillgängliga för att upptäcka antigener i FFPE-vävnaderna17,,18,19. Ett exempel är human leukocyte antigen (HLA) klass I alleler20. Däremot innebär snap frysning av vävnader inte omfattande bearbetningssteg före eller efter fastställande, kringgå behovet av antigen hämtning21,22, och gör det fördelaktigt för att upptäcka ett bredare spektrum av mål. Därför kan det vara värdefullt att använda frysta vävnader för multispektrala fluorescensavbildning för att upptäcka mål för prekliniska och kliniska studier.
Med tanke på de ovan nämnda begränsningarna vid användning av FFPE vävnader, frågade vi om multispektrala fluorescens imaging kan utföras på frysta vävnader. För att ta itu med denna fråga testade vi en samtidig multiplex färgning metod med hjälp av en panel av fluoroforekonjugerade antikroppar för att upptäcka flera antigener och analyserade färgning med hjälp av en halvautomatad multispektrala bildsystem. Vi kunde samtidigt färga upp till sex markörer i en enda vävnad avsnitt inom 90 min.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetone (histological grade)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A16F-1GAL</td>
			<td>Fixing tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488 anti-mouse CD3</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>100212</td>
			<td>Clone - 17A2; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488, eBioscience anti-human CD20</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>53-0202-82</td>
			<td>Clone - L26; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 555 Mouse anti-Ki-67</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>558617</td>
			<td>Primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 594 anti-human CD3</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>300446</td>
			<td>Clone - UCHT1; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 594 anti-mouse CD8a</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>100758</td>
			<td>Clone - 53-6.7; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 647 anti-human CD8a</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>372906</td>
			<td>Clone - C8/144B; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 647 anti-mouse CD206 (MMR)</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>141711</td>
			<td>Clone - C068C2; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 647 anti-mouse CD4 Antibody</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>100426</td>
			<td>Clone - GK1.5; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6 Mouse</td>
			<td>Charles River Laboratories</td>
			<td>27</td>
			<td>Mouse frozen tissues used for multispectral training</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coplin Jar</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S6016-6EA</td>
			<td>Rehydrating and washing slides</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI Solution</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>564907</td>
			<td>Nucleic Acid stain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diamond White Glass Charged Slides</td>
			<td>DOT Scientific</td>
			<td>DW7590W</td>
			<td>Adhering tissue sections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Phosphate Buffered Saline 1x (without Ca and Mg)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>MT21031CV</td>
			<td>Washing and diluent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gold Seal Cover Slips</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>3306</td>
			<td>Protecting stained tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Normal Tonsil OCT frozen tissue block</td>
			<td>AMSBio</td>
			<td>AMS6023</td>
			<td>Human frozen tissue used for multispectral staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Serum 1X</td>
			<td>Gemini Bio-Products</td>
			<td>100-512</td>
			<td>Blocking and diluent for human tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>inForm</td>
			<td>Akoya Biosciences</td>
			<td>Version 2.4.1</td>
			<td>Machine learning software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PerCP/Cyanine5.5 anti-human CD4</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>300529</td>
			<td>Clone - RPA-T4; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PerCP-Cy 5.5 Rat Anti-CD11b</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>550993</td>
			<td>Clone - M1/70; primary conjugated antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenochart</td>
			<td>Akoya Biosciences</td>
			<td>Version 1.0.8</td>
			<td>Whole slide scan software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ProLong Diamond Antifade Mountant</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>P36965</td>
			<td>Mounting medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Research Cryostat</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td>CM3050 S</td>
			<td>Sectioning tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Superblock 1X</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>37515</td>
			<td>Blocking mouse tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue-Tek O.C.T Solution</td>
			<td>Sakura Finetek</td>
			<td>4583</td>
			<td>Embedding tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vectra 3.0 Automated Quantitative Pathology Imaging System, 6 Slide</td>
			<td>Akoya Biosciences</td>
			<td>CLS142568</td>
			<td>Semi-automated multispectral imaging system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vectra Software</td>
			<td>Akoya Biosciences</td>
			<td>Version 3.0.5</td>
			<td>Software to operate microscope</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a rapid method for multispectral fluorescence imaging of frozen tissue sections

Multispektrala fluorescensavbildning på formalin-fasta paraffin-inbäddade (FFPE) vävnader gör det möjligt att upptäcka flera markörer i ett enda vävnadsprov som kan ge information om antigen coexpression och rumslig fördelning av markörer. Avsaknaden av lämpliga antikroppar för formalin-fasta vävnader kan dock begränsa arten av markörer som kan detekteras. Dessutom är färgningsmetoden tidskrävande. Här beskriver vi en snabb metod för att utföra multispektrala fluorescens imaging på frysta vävnader. Metoden omfattar fluorofore kombinationer som används, detaljerade steg för färgning av mus och mänskliga frysta vävnader, och skanning, förvärv och analys förfaranden. För färgningsanalys används ett kommersiellt tillgängligt halvautomatiskt multispektralt fluorescensavbildningssystem. Genom denna metod, upp till sex olika markörer var färgas och upptäcktes i en enda fryst vävnad avsnitt. Machine learning-analysprogrammet kan fenotypa celler som kan användas för kvantitativ analys. Den metod som beskrivs här för frysta vävnader är användbar för att upptäcka markörer som inte kan detekteras i FFPE-vävnader eller för vilka antikroppar inte är tillgängliga för FFPE-vävnader.

Detektion av enfärgade markörer på frysta mjältesektioner Eftersom det halvautomatiska bildsystemet använder ett LCTF-system (Liquid Crystal Tunable Filter) som möjliggör ett bredare spektrum av våglängdsdetektering25, och eftersom inga signalförstärkningssteg utfördes här optimerade vi först detektionen av våra primärkonjugerade antikroppar för varje markör på mikroskopet. Ett exempel visas i figur 1, där varje markör med en f...

Watch this Scientific Journal Video about A Rapid Method for Multispectral Fluorescence Imaging of Frozen Tissue Sections at JoVE.com

A Rapid Method for Multispectral Fluorescence Imaging of Frozen Tissue Sections

Vi beskriver en snabb färgning metod för att utföra multispektrala imaging på frysta vävnader.

En snabb metod för multispektrala fluorescensavbildning av frysta vävnadssektioner

Multispectral fluorescence imaging on formalin-fixed paraffin-embedded (FFPE) tissues enables the detection of multiple markers in a single tissue sample ...

Denna metod är till hjälp för att upptäcka, och samlokalisera flera biomarkörer i en enda kryosektion inklusive markörer som normalt inte kan upptäckas i paraffin sektioner. Med hjälp av denna experimentella färgningsmetod reduceras färgningstiden avsevärt och metoden kan utföras i alla laboratorium. Demonstrera denna metod kommer att vara Dinesh Jaishankar.Han är en skicklig postdoc från labbet, och även immunterapi Bedömning Core, Facilities Manager. När du väljer antikroppar för analysen bör du beakta de excitations- och emissionsfilteruppsättningar som finns på det halvautomatiska bildsystemet. Och efter att ha testat olika kombinationer av fluorophore konjugerade primära antikroppar, förbereda fluoroforer som ska användas så att du har minimal spektral överlappning som föreslås i tabellen.För multiplexfärgning, förbered en cocktail av antikroppar med kompatibla fluorforer vid förutbestämda optimala vanföreställningar, och tillsätt cocktail till vävnadssektionerna av intresse. För enstaka markörfärgning lägger du till den primära konjugerade antikroppen endast i bilden. För alla färgningar, inkludera en kontroll obefläckade bild som genomgår samma färgning förfarande utan tillsats av en primär konjugerad antikropp.Efter en timmes inkubering i rumstemperatur skyddad från ljus, tvätta objektglasen två gånger med PBS i fem minuter per tvätt. Efter den andra tvätten, motverka fläck multiplex färgade diabilder med DAPI i sju minuter vid rumstemperatur skyddad från ljus, följt av två fem minuters tvättar i PBS. För att skapa ett spektralbibliotek, ställ in lampeffekten för det multispektrala bildsystemet på 100%och öppna mikroskopets operativsystem.Välj Redigera protokoll och nytt protokoll. Ange ett protokollnamn och välj Fluorescens under bildhanteringsläge. Ge sedan ett studienamn och ladda de enda färgade bilderna på scenen.Klicka på Redigera exponering, och använd alternativen autofokus och auto-exponera för att justera exponeringstiderna och skaffa ögonblicksbilder för de enda färgade bilderna. Efter avbildning av den enda färgade diabilder, spara protokollet. Och i maskininlärningsprogrammet under Build-bibliotekets flik läser du in varje enskild färgad bild.Välj lämplig våning och klicka på Utdrag. Programvaran kommer automatiskt att extrahera den fluorescerande signal som valts i golvet. Om du vill spara den extraherade färgen klickar du på Spara för att lagra.En ny grupp kan skapas eller så kan den extraherade färgen lagras till en befintlig grupp. För multispektrala bild, när spektrala biblioteket har skapats och verifierats, justera fokus och exponering gånger på multiplex färgade bilden som visas, och öppnar skannade bilder för att skapa en ny uppgift. Tillhandahåll ett bild-ID och välj ett protokoll.Under uppgift väljer hela bildskanning för att utföra en hel bildskanning på multiplexfärgad bild. I hela bildsökningsbilden väljer du områden av intresse över hela bilden. Dessa regioner kommer att skannas med hjälp av de tidigare inställda exponeringstiderna på multiplex-glidningen som ska användas för spektral oblandning och analys.I mikroskopets operativsystem, välj anskaffa MSI-fält under uppgift och klicka sedan på Process Slide för att skaffa dig ränteregioner med 20x förstoring. När de regioner av intresse har förvärvats, i maskininlärningsprogram, klicka på Arkiv och Öppna under fliken manuell analys att ladda multiplex färgade bilder. Välj den spektrala bibliotekskällan och klicka på Välj golv för att välja det tidigare sparade spektralbiblioteket.Klicka på Arkiv och Öppna om du vill läsa in den obefläckade bilden. Klicka sedan på ikonen autofluorescence bläck markör och rita en linje eller region på unstained slide att identifiera autofluorescens inom vävnaden. Sedan under fliken Redigera markörer och färger tilldelar du namn för varje markör och klickar på Förbered alla.Efter att ha verifierat den spektralt oblandade bilden, i maskininlärningsprogrammet, välj cytoplasmmembranet och marköralternativen från panelen. Och med hjälp av ellipsknappen, välj använd denna signal för att hitta, för att konfigurera markören för att upptäcka antingen atomkärnor, cytoplasma eller membran. när en cytoplasmatisk eller membranmarkör väljs, välj alternativet Använd signalen för att hjälpa till med kärndelningsalternativet.Programvaran kommer automatiskt att upptäcka och skapa enskilda masker för kärnan, cytoplasman och membranet. Använd patologivyn för en specifik markör och konfigurationsalternativen i programvaran för att justera maskerna och klicka på Segmentera alla om du vill skapa en cellsegmenteringskarta. Efter cellsegmentering, markera markörerna till fenotyp de positiva cellerna.Dessutom väljer minst fem celler som inte färgas med den valda markören att fenotyp de negativa cellerna. Klicka sedan på Träna klassificeraren för att träna programvaran för att automatiskt upptäcka alla celler färgas med de valda markörer inom bilden. En fenotypkarta kommer att skapas.Som dessa bilder visar, antikroppar valideras för flöde cytometri kan användas för att visualisera vävnad färgning med hjälp av flytande kristall avstämbara filter i semi-automatiserade bildbehandlingssystem. Här en spektralt oblandad bild av frysta mänskliga tonsill kan observeras som inkluderar märkning av B-celler och Prolifererande celler inom follikulära germinal centrum, och inter follicular T-cells region. Alternativet patologi vyer tillåter visualisering av det enskilda färgningsmönstret för varje markör inom vävnaden av intresse, vilket tyder på att multiplexfärgningsmetoden och spektralavbildningsarbete på frusen vävnad.Som visat på en fryst mus tumör avsnitt, multispektrala imaging kan också användas för att visualisera tumör infiltrera T-celler och andra myeloisk cell härstamningar inklusive tumör associerade makrofager. Cellsegmentering och fenotyp kartor, och antalet färgade celler för varje markör analyseras av programvaran kan genereras, vilket visar att programvaran kan användas för kvantifiering av de multispektrala färgning på frysta vävnader. För någon ny 6to tekniken, det är viktigt att lära känna de specifika funktionerna i din fluorokromer, och förbereda kvalitet bibliotek diabilder för spektrala oblandar med minimal spektral överlappning.Det är också viktigt att utföra antikroppstitrering. Enligt vår mening kan denna metod ge sänginformation om effekten av immunterapi för cancer och andra terapeutiska tillämpningar, särskilt när tidpunkten är av det väsentliga.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Combination of Adhesive-tape-based Sampling and Fluorescence in situ Hybridization for Rapid Detection of Salmonella on Fresh Produce

Combination of Adhesive-tape-based Sampling and Fluorescence in situ Hybridization for Rapid Detection of Salmonella on Fresh Produce

Kombination av självhäftande tejp grundad på provtagning och fluorescens På plats Hybridisering för snabb upptäckt av Salmonella På färskvaror

This protocol describes a simple approach for adhesive-tape-based sampling of tomato and other fresh produce surfaces, followed by on-tape fluorescence in ...

Locked Nucleic Acid Flow Cytometry-fluorescence in situ Hybridization (LNA flow-FISH): a Method for Bacterial Small RNA Detection

Locked Nucleic Acid Flow Cytometry-fluorescence in situ Hybridization LNA flow-FISH: a Method for Bacterial Small RNA Detection

Låst nukleinsyra Flödescytometri-fluorescens På plats Hybridisering (LNA flow-FISH): En metod för bakteriell små RNA-detektering

Fluorescence in situ hybridization (FISH) is a powerful technique that is used to detect and localize specific nucleic acid sequences in the cellular ...

Non-invasive Optical Imaging of the Lymphatic Vasculature of a Mouse

Icke-invasiv optisk avbildning av det lymfatiska vaskulaturen hos en mus

The lymphatic  vascular system is an important component of the circulatory system that  maintains fluid homeostasis, provides immune surveillance, and ...

4D Multimodality Imaging of Citrobacter rodentium Infections in Mice

4D Multimodality Imaging of Citrobacter rodentium Infections in Mice

4D Multimodalitet Imaging av<em&gt; Citrobacter rodentium</em&gt; Infektioner hos möss

This protocol outlines the steps required to  longitudinally monitor a bioluminescent bacterial infection using composite 3D diffuse light imaging ...

Fluorescence Time-lapse Imaging of the Complete S. venezuelae Life Cycle Using a Microfluidic Device

Fluorescence Time-lapse Imaging of the Complete S. venezuelae Life Cycle Using a Microfluidic Device

Fluorescence Time-lapse avbildning av Complete<em&gt; S. venezuelae</em&gt; Life Cycle använda en mikroflödessystem enhet

Live-cell imaging of biological processes at the single cell level has been instrumental to our current understanding of the subcellular organization of ...

A RAPID Method for Blood Processing to Increase the Yield of Plasma Peptide Levels in Human Blood

En snabb metod för blodbehandlings att öka utbytet av plasmapeptidnivåer i Människoblod

Research in the field of food intake regulation is gaining importance. This often includes the measurement of peptides regulating food intake. For the ...

Non-invasive In Vivo Fluorescence Optical Imaging of Inflammatory MMP Activity Using an Activatable Fluorescent Imaging Agent

Non-invasive In Vivo Fluorescence Optical Imaging of Inflammatory MMP Activity Using an Activatable Fluorescent Imaging Agent

Icke-invasiv<em&gt; In vivo</em&gt; Fluorescence optisk avbildning av inflammatorisk MMP aktivitet Använda en aktiverbar Fluorescent Imaging Agent

This paper describes a non-invasive method for imaging matrix metalloproteinases (MMP)-activity by an activatable fluorescent probe, via in vivo ...

An All-on-chip Method for Rapid Neutrophil Chemotaxis Analysis Directly from a Drop of Blood

En allt-på-chip-metod för snabb neutrofilkemotaxisanalys direkt från en bloddroppe

Neutrophil migration and chemotaxis are critical for our body's immune system. Microfluidic devices are increasingly used for investigating neutrophil ...

Visualizing Intracellular SNARE Trafficking by Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy

Visualisera intracellulära SNARA människohandel genom fluorescens livstid Imaging mikroskopi

Soluble N-ethylmaleimide sensitive fusion protein (NSF) attachment protein receptor (SNARE) proteins are key for membrane trafficking, as they catalyze ...

Imaging Mycobacterium tuberculosis in Mice with Reporter Enzyme Fluorescence

Imaging Mycobacterium tuberculosis in Mice with Reporter Enzyme Fluorescence

Imaging Mycobacterium tuberculosis hos möss med Reporter enzym fluorescens

Reporter enzyme fluorescence (REF) utilizes substrates that are specific for enzymes present in target organisms of interest for imaging or detection by ...