इन विट्रो ने अधिक कठोर विशिष्टता के साथ प्रतिबंध एंनोटुकलीज के विकास का निर्देश दिया

नई अनुक्रम विशिष्टता के साथ प्रतिबंध एंनोन्यूकपट्ट्स को आंशिक रूप से पतित अनुक्रम को पहचानने वाले एंजाइमों से विकसित किया जा सकता है। यहां हम एक विस्तृत प्रोटोकॉल प्रदान करते हैं जिसका उपयोग हम सफलतापूर्वक एनएलएआईवी एंजाइम की अनुक्रम विशिष्टता को बदलने के लिए करते थे। प्रोटोकॉल के प्रमुख तत्व प्रतिलेखन/अनुवाद प्रतिक्रिया और नए अनुक्रम विशिष्टताओं के साथ वेरिएंट के चयन के इन विट्रो विभाजक हैं ।