Name: production of autologous platelet-rich plasma for boosting in vitro human fibroblast expansion
Uploaded: 2021-02-24T12:30:00
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Wir danken Herrn Grégory Schneiter für die technische Unterstützung bei den durchflusszytometrischen Daten; Prof. Dr. Muriel Cuendet (Labor für Pharmakognosie, Fakultät für Pharmazeutische Wissenschaften und Universität Genf) für die Ermöglichung der Verwendung des Attune-Durchflusszytometers und des Hochdurchsatzmikroskops Cytation 3; Prof. Dr. Brigitte Pittet für wissenschaftliche Beratung.

Das Studienprotokoll entsprach der Deklaration von Helsinki, und alle Patienten gaben vor der Teilnahme an der Studie eine schriftliche Einverständniserklärung ab. Die Hautproben stammen von gesunden Frauen, die sich in der Abteilung für Plastische, Rekonstruktive und Ästhetische Chirurgie des Universitätsspitals Genf einer Bauchdeckenstraffung unterziehen. Das Verfahren entspricht den Grundsätzen der Deklaration von Helsinki und wurde von der lokalen institutionellen Ethikkommission genehmigt (Protokoll #3126).</p...

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B., Nayernia, Z., Pittet-Cu&#233;nod, B., Modarressi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+Rich+Plasma+Promotes+Proliferation+of+Adipose+Derived+Mesenchymal+Stem+Cells+via+Activation+of+AKT+and+Smad2+Signaling+Pathways.">Platelet Rich Plasma Promotes Proliferation of Adipose Derived Mesenchymal Stem Cells via Activation of AKT and Smad2 Signaling Pathways.</a> Stem Cell Research &amp; Therapy. 5 (8), (2015).</li></ol>

Zu den Vorteilen der Verwendung autologer Fibroblasten als natürliche Alternative im Vergleich zu anderen Füllstoffen in der Wundzelltherapie gehören eine gute Biokompatibilität, minimale Nebenwirkungen sowie eine einfache Entnahme und Anwendung. Bevor diese Therapeutika jedoch in einer täglichen klinischen Umgebung eingesetzt werden, sind geeignete präklinische Studien erforderlich, um die Wachstumsmerkmale zu identifizieren und die biologische Funktion und Sicherheit isolierter Fibroblasten sowohl vor als auch na...

Die regenerative Medizin zielt darauf ab, Gewebe und Organe, die durch Alter, Krankheit oder Trauma geschädigt wurden, zu heilen oder zu ersetzen sowie angeborene Defekte zu korrigieren. Bei der autologen Therapie werden einem Patienten Zellen oder Gewebe entnommen, expandiert oder modifiziert und dem Spender wieder zugeführt. Diese Form der Therapeutika hat ein breites Potenzial im Bereich der Dermatologie1. Bei der autologen Fibroblastentherapie werden die Fibroblasten eines Patienten kultiviert und erneut injiziert, um Falten, Rhytiden oder Aknenarben zu behandeln. Da Fibroblasten die wichtigsten funktionellen Zellen in der Dermis sind, kann die Injektion von autologen Fibroblasten bei der Gesichtsverjüngung vorteilhafter sein als andere Therapien2.
In der Haut sind Fibroblasten für die Synthese und Sekretion extrazellulärer Proteine (d. h. Kollagen, Elastin, Hyaluronsäure und Glykosaminoglykane) verantwortlich. Sie setzen auch Wachstumsfaktoren frei, die die Zellfunktion, die Migration und die Zell-Matrix-Zell-Zell-Interaktionen in der normalen Hauthomöostase und Wundheilung regulieren3. Dermale Fibroblasten wurden bereits als potenzielle klinische Zelltherapie für die Wundheilung der Haut4, die Geweberegeneration5 oder Hautfüller in ästhetischen und plastisch-chirurgischen Verfahren6 eingeführt. Einige Studien deuten sogar darauf hin, dass Fibroblasten im Kontext der regenerativen Medizin eine praktischere und wirksamere Zelltherapie sein könnten als mesenchymale Stammzellen7.
Um eine ausreichende Anzahl von Fibroblasten für klinische Anwendungen zu erhalten, ist in der Regel eine Zellexpansion erforderlich. Die Ex-vivo-/In-vitro-Zellkultur erfordert Basalmedium, das mit Wachstumsfaktoren, Proteinen und Enzymen ergänzt wird, um die Zelladhäsion und -proliferation zu unterstützen. Fetales Kälberserum (FBS) ist ein gängiges Nahrungsergänzungsmittel für Zellkulturmedien, da fetales Blut 1) im Vergleich zu erwachsenem Blut reich an Wachstumsfaktoren ist und 2) einen niedrigen Antikörpergehalt aufweist8. Mit fortschreitender Zelltherapie gibt es Bedenken hinsichtlich der Sicherheit klassischer Zellkulturbedingungen, bei denen FBS dem Nährmedium zugesetzt wird. Darüber hinaus besteht nun die Tendenz, FBS durch Alternativen zu ersetzen9. Mehrere FBS-Ersatzprodukte haben vielversprechende Ergebnisse gezeigt10.
Hier wurde die Alternative zum plättchenreichen Plasma (PRP) ausgewählt, und wir haben ein Medizinprodukt entwickelt, um ein standardisiertes PRP-Präparat namens CuteCell-PRP herzustellen. Der Verwendungszweck dieser Vorrichtung ist die Herstellung von autologem PRP, das als Nährmedienergänzung für die In-vitro-Expansion autologer Zellen unter GMP-Bedingungen verwendet werden soll.
PRP ist definiert als eine konzentrierte Thrombozytensuspension im Plasma. Da es zahlreiche Zubereitungsprotokolle gibt, die sich in 1) der benötigten Blutmenge, 2) der Art der verwendeten Geräte und 3) dem Zentrifugationsprotokoll unterscheiden, variieren die resultierenden Thrombozytenkonzentrationen von etwas über bis zu mehr als dem 10-fachen des Blutausgangswerts. Darüber hinaus enthalten PRP-Präparate eine unterschiedliche Kontamination der roten und weißen Blutkörperchen. Der Begriff "PRP" wird daher verwendet, um Produkte zu beschreiben, die sich in ihrer biologischen Zusammensetzung und ihren potenziellen therapeutischen Wirkungen stark unterscheiden.
In den meisten Studien wird die FBS-Substitution durch unterschiedliche Konzentrationen von PRP erreicht, das aktiviert wird (durch Thrombin oder Kalzium). Diese künstliche Aktivierung provoziert eine sofortige und wichtige Freisetzung von Thrombozytenwachstumsfaktoren von 15 min bis zu 24 h11. Daher wird angenommen, dass die Aktivierung der Thrombozyten für Anwendungen in Zellkulturen, bei denen die langsame Freisetzung von Wachstumsfaktoren aus der allmählichen Degranulation der Thrombozyten erforderlich ist, unerwünscht ist.
Die PRP-Therapie umfasst die Herstellung von autologen Thrombozyten in konzentriertem Plasma12. Die optimale Thrombozytenkonzentration ist unklar, und es gibt eine breite Palette kommerzieller Geräte zur Herstellung von PRP13. Dieser Mangel an Standardisierung resultiert aus der Inkonsistenz zwischen den Studien und hat zu einer Blackbox in Bezug auf die Dosierung und den Zeitpunkt der Injektion geführt. Dieses Protokoll beschreibt ein Verfahren zur Gewinnung von autologem PRP unter Verwendung dieses speziellen PRP-Geräts zur Expansion von Hautfibroblasten in einem 100% autologen Ex-vivo-Kulturmodell.

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	<tbody>
		<tr>
			<td>96 well black clear flat bottom</td>
			<td>BD Falcon</td>
			<td>353219</td>
			<td>32/case</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell trace Violet Dye</td>
			<td>Thermo Fischer Scientific</td>
			<td>C34557</td>
			<td>180 assays</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CuteCell PRP</td>
			<td>Regen Lab SA</td>
			<td>CC-PRP-3T</td>
			<td>3 tubes per package</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D9542</td>
			<td>1 mg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>52400-025</td>
			<td>500 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10270106</td>
			<td>500 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutamine 200 mM</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25030024</td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematology Counter</td>
			<td>Sysmex</td>
			<td>KK-21N</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin 5000E Liquemine</td>
			<td>Drossapharm AG</td>
			<td></td>
			<td>0.5 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES Buffer Solution 1M</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15630-056</td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liberase DH</td>
			<td>Roche</td>
			<td>5401054001</td>
			<td>2x 5 mg per package</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM NEAA 100x</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11140-035</td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na Pyruvate 1mg/mL</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11360-039</td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140122</td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phalloidin alexa Fluor 488</td>
			<td>Molecular Probes</td>
			<td>A12379</td>
			<td>300 units</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>31966-021</td>
			<td>500 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin 1x 0.25%</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25050-014</td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin EDTA 0.25%</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25200056</td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

production of autologous platelet-rich plasma for boosting in vitro human fibroblast expansion

Derzeit besteht ein großes klinisches Interesse an der Verwendung von autologen Fibroblasten zur Hautreparatur. In den meisten Fällen ist eine In-vitro-Kultivierung von Hautzellen erforderlich. Die Zellkultur mit xenogenen oder allogenen Nährmedien hat jedoch einige Nachteile (z. B. das Risiko einer Übertragung von Infektionserregern oder einer langsamen Zellexpansion). Hier wird ein autologes Kultursystem zur Expansion von humanen Hautfibroblastenzellen in vitro unter Verwendung eines patienteneigenen plättchenreichen Plasmas (PRP) entwickelt. Humane dermale Fibroblasten werden während der Bauchdeckenstraffung aus dem Patienten isoliert. Die Kulturen werden bis zu 7 Tage lang mit einem Medium beobachtet, das entweder mit fötalem Kälberserum (FBS) oder PRP ergänzt wird. Der Blutzellgehalt in PRP-Präparaten, die Proliferation und die Differenzierung der Fibroblasten werden beurteilt. Dieses Protokoll beschreibt die Methode zur Erzielung eines standardisierten, nicht aktivierten PRP-Präparats unter Verwendung eines speziellen Medizinprodukts. Für die Zubereitung werden lediglich ein Medizinprodukt (CuteCell-PRP) und eine Zentrifuge benötigt. Dieses Gerät eignet sich unter ausreichenden medizinischen Praxisbedingungen und ist ein einstufiges, apyrogenes und steriles geschlossenes System, das eine einzelne, weiche Schleuderzentrifugation von 1.500 x g für 5 Minuten erfordert. Nach der Zentrifugation werden die Blutbestandteile getrennt und das plättchenreiche Plasma kann leicht gewonnen werden. Dieses Gerät ermöglicht eine schnelle, konsistente und standardisierte Herstellung von PRP, das als Zellkulturergänzung für die In-vitro-Expansion menschlicher Zellen verwendet werden kann. Das hier erhaltene PRP enthält eine 1,5-fache Thrombozytenkonzentration im Vergleich zu Vollblut zusammen, wobei rote und weiße Blutkörperchen bevorzugt entfernt werden. Es konnte gezeigt werden, dass PRP im Vergleich zu FBS (7,7x) einen verstärkenden Effekt bei der Zellproliferation aufweist und dass Fibroblasten nach PRP-Behandlung aktiviert werden.

Bei dieser patentierten Technologie handelt es sich um ein einfaches, schnelles und reproduzierbares Medizinprodukt, das zur Herstellung standardisierter PRP-Präparate verwendet wird. Es handelt sich um ein einstufiges, vollständig geschlossenes System, das die Herstellung von PRP aus venösem Vollblut nach 5 min Zentrifugation bei 1.500 x g (aufgrund der Trenngeltechnologie) ermöglicht. Das nach der Zentrifugation gewonnene PRP wird aus roten und weißen Blutkörperchen entfernt, die sich unter dem Gel befin...

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Production of Autologous Platelet-Rich Plasma for Boosting In Vitro Human Fibroblast Expansion

Dieses Protokoll stellt ein Gerät vor, das PRP produziert, um die In-vitro-Expansion von Zellen in einem 100% autologen Fibroblastenkultursystem zu fördern.

Herstellung von autologem plättchenreichem Plasma zur Förderung der In-vitro-Expansion humaner Fibroblasten

There is currently great clinical interest in the use of autologous fibroblasts for skin repair. In most cases, culture of skin cells in vitro is ...

Bei diesem Protokoll handelt es sich um das autologe System zur humanen Fibroblastenkultur mit patienteneigenem plättchenreichem Plasma und einem standardisierten Präparat für fünf Minuten. PRP fördert eine massive Zellexpansion von Fibroblasten in Kultur. Ich würde Ihnen empfehlen, diese Methode mit PRP als Zellergänzung zu verwenden, wenn Sie eine massive und sichere Zellexpansion für autologe Zelltherapien benötigen.Wenn Sie dieses Protokoll ausprobieren, würde ich Ihnen empfehlen, die PRP-Integrität zu überprüfen. Ihr Plasma muss sehr sauber sein und keine roten Blutkörperchen enthalten. Wenn Sie es übertragen, müssen Sie es sehr sorgfältig tun.Und was die Verdauung Ihres Gewebes betrifft, so muss es sehr sauber sein, bevor Sie fortfahren. Drehen Sie zunächst die mit Blut gefüllten Röhrchen mit plättchenreichem Plasma (PRP) dreimal vorsichtig auf den Kopf, um das Blut mit dem Gerinnungshemmer zu vermischen. Zentrifugieren Sie die Blutproben bei 1500 g fünf Minuten lang in einem festen, um 45 Grad abgewinkelten Rotor und balancieren Sie die Röhrchen aus.Nach der Zentrifugation hat das fraktionierte Blut rote und weiße Blutkörperchen, die unter dem Trenngel und den Blutplättchen auf der Oberfläche des Gels eingeschlossen sind. Drehen Sie das PRP-Röhrchen 20 Mal vorsichtig um, um die Thrombozytenablagerung im Plasmaüberstand zu resuspendieren. Stellen Sie sicher, dass sich die Blutplättchen vollständig vom Gel gelöst haben und das Plasma von klar und transparent zu trüb wechselt.Sammeln Sie die Plasmalösung aus dem Röhrchen mit einer Transfervorrichtung, die an eine 10-Milliliter-Spritze angeschlossen ist. Geben Sie die Hautproben in ein 50-Milliliter-Polypropylen-Röhrchen mit PBS und schütteln Sie das Röhrchen vorsichtig. Wenn die Hautprobe relativ groß ist, legen Sie sie mit der epidermalen Seite nach unten auf den Deckel einer 150 Quadratzentimeter großen Gewebekulturschale.Entfernen Sie das Unterhautfettgewebe mit einer Pinzette und einer Schere. Um ein Austrocknen des Gewebes zu verhindern, spülen Sie das Gewebe alle paar Minuten in PBS aus. Wenn die Fettentfernung abgeschlossen ist, schneiden Sie die Hautproben mit einem Skalpell in etwa 0,5 x 1,5 Zentimeter große Streifen.Als nächstes geben Sie fünf Milliliter Kollagenase/Dispase-Mischung in ein steriles 15-Milliliter-Röhrchen. Übertragen Sie das geschnittene Gewebe in das Röhrchen. Stellen Sie sicher, dass die Gewebestücke in die Lösung getaucht sind, und verschließen Sie das Röhrchen sicher.Legen Sie die Röhrchen in einen Inkubator bei 37 Grad Celsius mit orbitalem Schütteln für 150 Minuten. Nach der Inkubation wird das Röhrchen mit dem Gewebe in die Biosicherheitswerkbank gebracht. Stellen Sie den Deckel einer sterilen 100-Millimeter-Kulturschale verkehrt herum in die Biosicherheitswerkbank.Übertragen Sie die Gewebesuspension ohne Spritzer auf den Boden der 100-Millimeter-Kulturschale. Wenn Gewebestücke im Röhrchen verbleiben, verwenden Sie eine sterile Ein-Milliliter-Pipette oder eine sterile Pinzette, um die Stücke auf den Boden der Kulturschale zu übertragen. Halten Sie die Dermis mit der Epidermis nach oben mit einer Pinzette.Fassen Sie den Rand der Epidermis mit einer weiteren Pinzette und ziehen Sie die Dermis und die Epidermis auseinander. Bewahren Sie die getrennten Stücke auf demselben Deckel auf und legen Sie die Hautstücke in eine neue 100-Millimeter-Kulturschale, die PBS enthält. Anschließend werden die Hautstücke mit einer Laborzange in ein 15-Milliliter-Polypropylenröhrchen übertragen, das drei Milliliter 0,3%Trypsin PBS enthält.Inkubieren Sie das Röhrchen in einem 37 Grad Celsius warmen Wasserbad und mischen Sie den Inhalt alle zwei bis drei Minuten, indem Sie das Röhrchen mehrmals umdrehen. Stoppen Sie die Reaktion nach 10 bis 20 Minuten, indem Sie drei bis fünf Milliliter eiskaltes Nährmedium hinzufügen. Wirbeln Sie das Rohr mehrmals kräftig vor.Filtern Sie die Suspension, die die Fibroblasten enthält, durch ein 85-Mikron-Nylongewebe in ein 50-Milliliter-Röhrchen. Zentrifugieren Sie die Fibroblastenlösung bei 150 g für 10 Minuten. Saugen Sie den Überstand ab und resuspendieren Sie das Zellpellet in 100 bis 200 Mikrolitern vollständigem Wachstumsmedium für die Zellzählung.Legen Sie die Zellen in einen 25 Quadratzentimeter großen Gewebekulturkolben. Dann wird der Kolben bei 37 Grad Celsius inkubiert. Wechseln Sie das Medium, das nicht anhaftende Zellen enthält, am nächsten Tag und erneut alle drei bis vier Tage.Wenn die Fibroblasten eine Konfluenz von 70 bis 80 % erreichen, waschen Sie sie mit PBS und fügen Sie Trypsin-EDTA-Lösung hinzu. Nachdem Sie den Kolben drei Minuten lang bei 37 Grad Celsius inkubiert haben, stoppen Sie die Reaktion, indem Sie drei bis fünf Milliliter warmes vollständiges Nährmedium hinzufügen. Zentrifugieren Sie dann die Zellsuspension bei 200 g für fünf Minuten.Entfernen Sie den Überstand durch Absaugen. Die Fibroblasten werden in PRP-Medium kultiviert und bei 37 Grad Celsius inkubiert. Die empfohlene Mindestzelldichte beträgt 4.000 lebensfähige Zellen pro Quadratzentimeter.Ein spezielles medizinisches Gerät wurde verwendet, um PRP herzustellen, indem Vollblut von 10 verschiedenen Patienten verarbeitet wurde. Das Gerät entfernte den Großteil der roten Blutkörperchen und der weißen Blutkörperchen. Die mittlere Thrombozytenkonzentration im PRP war ca. 50 % höher als die Thrombozytenkonzentration im Vollblut.Autologe Fibroblasten wurden in Medium mit 10%FBS oder in Medien mit PRP-Konzentrationen von eins bis 50% kultiviertNach sieben Tagen Kultur, ohne das Medium zu wechseln, zeigten die mit 20%PRP geprimten Kulturen eine höhere Anzahl lebensfähiger Fibroblasten. PRP hatte eine bis zu 7,7-fache Wirkung als Proliferationsbooster im Vergleich zu FBS. Die Phalloidin-Färbung zeigte, dass die morphologische Veränderung, die bei der PRP-Aktivierung beobachtet wurde, mit der F-Aktin-Reorganisation zusammenhängt, die eine Signatur der Fibroblastenaktivierung ist.Ein großes Problem bei der schnellen Zellexpansion ist das Risiko genomischer Veränderungen. Um dies zu beurteilen, können Sie einen vergleichenden genomischen Hybridisierungsassay durchführen, um die genomische Stabilität Ihrer Zellen zu beurteilen. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, FBS durch ein PRP zu ersetzen, das ein wirksameres autologes biologisches Nahrungsergänzungsmittel ist.Auf diese Weise können Forscher mehr Zellen schneller wachsen lassen, ohne dass xenogene Substanzen hinzugefügt werden müssen. Wir können diese Technik auch für andere Zelltypen verwenden, die vor der klinischen Anwendung ex vivo expandieren müssen, z. B. Keratinozyten oder mesenchymale Stammzellen.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Surgical Retrieval, Isolation and In vitro Expansion of Human Anterior Cruciate Ligament-derived Cells for Tissue Engineering Applications

Surgical Retrieval, Isolation and In vitro Expansion of Human Anterior Cruciate Ligament-derived Cells for Tissue Engineering Applications

Chirurgische Retrieval, Isolierung und<em&gt; In-vitro-</em&gt; Erweiterung des menschlichen vorderen Kreuzbandes abgeleiteten Zellen für Tissue Engineering Anwendungen

Injury to the ACL is a commonly encountered problem in active individuals. Even partial tears of this intra-articular knee ligament lead to biomechanical ...

Forschung

Biotechnik

Production, Characterization and Potential Uses of a 3D Tissue-engineered Human Esophageal Mucosal Model

Herstellung, Charakterisierung und Einsatzmöglichkeiten von 3D-Tissue-Engineering Menschen Ösophagus-Schleimhaut-Modell

The incidence of both esophageal adenocarcinoma and its precursor, Barrett&#8217;s Metaplasia, are rising rapidly in the western world. Furthermore ...

Cloning and Large-Scale Production of High-Capacity Adenoviral Vectors Based on the Human Adenovirus Type 5

Klonierung und großtechnische Produktion von High-Capacity Adenovirusvektoren Auf der Grundlage des humanen Adenovirus Typ 5

High-capacity adenoviral vectors (HCAdV) devoid of all viral coding sequences represent one of the most advanced gene delivery vectors due to their high ...

Eye Irritation Test (EIT) for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial (RhCE) Tissue Model

Eye Irritation Test EIT for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial RhCE Tissue Model

Test auf Augenreizung (EIT) zur Kennzeichnung der Gefahr von Augen Reizt Chemicals mit rekonstruierter menschlicher Hornhaut-ähnlichen Epithelial (RhCE) Gewebemodell

To comply with the Seventh Amendment to the EU Cosmetics Directive and EU REACH legislation, validated non-animal alternative methods for reliable and ...

Characterization of Leukocyte-platelet Rich Fibrin, A Novel Biomaterial

Charakterisierung von Leukozyten-Thrombozyten-Rich-Fibrin, ein neuartiges Biomaterial

Autologous platelet concentrates represent promising innovative tools in the field of regenerative medicine and have been extensively used in oral ...

Mesenchymal Stromal Cell Culture and Delivery in Autologous Conditions: A Smart Approach for Orthopedic Applications

Mesenchymale Stromazellen Zellkultur und Lieferung in Autologe Bedingungen: Ein intelligenter Ansatz für orthopädische Anwendungen

Human Mesenchymal Stromal Cells (hMSCs) are cultured in vitro with different media. Limits on their use in clinical settings, however, mainly depend on ...

An In Vitro Organ Culture Model of the Murine Intervertebral Disc

An In Vitro Organ Culture Model of the Murine Intervertebral Disc

Ein<em&gt; In Vitro</em&gt; Organ Culture Modell der Murine Bandscheiben

Intervertebral disc (IVD) degeneration is a significant contributor to low back pain. The IVD is a fibrocartilaginous joint that serves to transmit and ...

Bioparticle Microarrays for Chemotactic and Molecular Analysis of Human Neutrophil Swarming in vitro

Biopartikel-Mikroarrays für chemotaktische und molekulare Analysen des menschlichen Neutrophilen-Schwärmens in vitro

Neutrophil swarming is a cooperative process by which neutrophils seal off a site of infection and promote tissue reorganization. Swarming has classically ...

In Vitro Model of Human Cutaneous Hypertrophic Scarring using Macromolecular Crowding

In Vitro Modell der menschlichen kutanen hypertrophen Narbenbildung mit makromolekularer Crowding

It has been shown that in vivo tissues are highly crowded by proteins, nucleic acids, ribonucleoproteins, polysaccharides, etc. The following protocol ...

Advanced 3D Liver Models for In vitro Genotoxicity Testing Following Long-Term Nanomaterial Exposure

Erweiterte 3D-Lebermodelle für In-vitro-Genotoxizitätstests nach langfristiger Nanomaterial-Exposition

Due to the rapid development and implementation of a diverse array of engineered nanomaterials (ENM), exposure to ENM is inevitable and the development of ...