Name: production of autologous platelet-rich plasma for boosting in vitro human fibroblast expansion
Uploaded: 2021-02-24T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Production of Autologous Platelet-Rich Plasma for Boosting In Vitro Human Fibroblast Expansion at JoVE.com

हम फ्लो साइटोमेट्री डेटा के साथ तकनीकी सहायता के लिए श्री ग्रेगोरी श्निटर को धन्यवाद देते हैं; प्रोफेसर मुरील क्यूनडेट (फार्माकोग्नोसी की प्रयोगशाला, स्कूल ऑफ फार्मास्यूटिकल साइंसेज और जिनेवा विश्वविद्यालय) एट्यून फ्लो साइटोमीटर और साइटेशन 3 उच्च-थ्रूपुट माइक्रोस्कोप के उपयोग की अनुमति देने के लिए; वैज्ञानिक सलाह के लिए प्रोफेसर ब्रिगिट पिटेट।

अध्ययन प्रोटोकॉल हेलसिंकी की घोषणा का अनुपालन करता है, और सभी रोगियों ने अध्ययन में भाग लेने से पहले लिखित सूचित सहमति प्रदान की। जिनेवा विश्वविद्यालय अस्पतालों (जिनेवा, स्विट्जरलैंड) में प्लास्टिक, ?...

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C., Cervelli, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+platelet-rich+plasma+in+maxillofacial+surgery:+clinical+evaluation.">Application of platelet-rich plasma in maxillofacial surgery: clinical evaluation.</a> The Journal of Craniofacial Surgery. 21 (3), 900-904 (2010).</li><li>Saleem, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adjunctive+Platelet-Rich+Plasma+(PRP)+in+Infrabony+Regenerative+Treatment:+A+Systematic+Review+and+RCT's+Meta-Analysis.">Adjunctive Platelet-Rich Plasma (PRP) in Infrabony Regenerative Treatment: A Systematic Review and RCT's Meta-Analysis.</a> Stem Cells International. 2018, 9594235 (2018).</li><li>Everts, P. A., Pinto, P. 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घाव कोशिका चिकित्सा में अन्य भराव सामग्री की तुलना में प्राकृतिक विकल्प के रूप में ऑटोलॉगस फाइब्रोब्लास्ट का उपयोग करने के फायदों में अच्छी जैव-अनुकूलता, न्यूनतम दुष्प्रभाव और कटाई और उपयोग की सहजता...

पुनर्योजी चिकित्सा का उद्देश्य उम्र, बीमारी या आघात के साथ-साथ जन्मजात दोषों को ठीक करने से क्षतिग्रस्त ऊतकों और अंगों को ठीक करना या बदलना है। ऑटोलॉगस थेरेपी में, कोशिकाओं या ऊतक को एक रोगी से वापस ले लिया जाता है, विस्तारित या संशोधित किया जाता है, फिर दाता को फिर से पेश किया जाता है। चिकित्सीय के इस रूप में त्वचाविज्ञान के क्षेत्र में व्यापक क्षमता है1. ऑटोलॉगस फाइब्रोब्लास्ट थेरेपी में, एक रोगी के फाइब्रोब्लास्ट को सुसंस्कृत किया जाता है और झुर्रियों, राइटिड्स या मुँहासे के निशान के इलाज के लिए पुन: इंजेक्ट किया जाता है। चूंकि फाइब्रोब्लास्ट डर्मिस में मुख्य कार्यात्मक कोशिकाएं हैं, इसलिए चेहरे के कायाकल्प में अन्य उपचारों की तुलना में ऑटोलॉगस फाइब्रोब्लास्ट का इंजेक्शन अधिक फायदेमंद हो सकताहै।
त्वचा में, फाइब्रोब्लास्ट बाह्य प्रोटीन (यानी, कोलेजन, इलास्टिन, हाइलूरोनिक एसिड और ग्लाइकोसामिनोग्लाइकेन्स) के संश्लेषण और स्राव के लिए जिम्मेदार होते हैं। वे विकास कारकों को भी जारी करते हैं जो सामान्य त्वचा होमियोस्टैसिस और घाव भरने में सेल फ़ंक्शन, माइग्रेशन और सेल-मैट्रिक्स / सेल-सेल इंटरैक्शन को नियंत्रित करतेहैं। त्वचीय फाइब्रोब्लास्ट्स को पहले से ही त्वचा के घाव भरने के लिए एक संभावित नैदानिक सेल थेरेपी के रूप में पेश किया गया है4, ऊतक पुनर्जनन5, या एस्थेटिक और प्लास्टिक सर्जरी प्रक्रियाओं में त्वचीय भराव6. कुछ अध्ययनों से यह भी पता चलता है कि, पुनर्योजी चिकित्सा के संदर्भ में, फाइब्रोब्लास्ट मेसेनकाइमल स्टेम कोशिकाओं की तुलना में अधिक व्यावहारिक और प्रभावी सेल थेरेपी हो सकतीहै।
नैदानिक अनुप्रयोगों के लिए फाइब्रोब्लास्ट की पर्याप्त संख्या प्राप्त करने के लिए, सेल विस्तार आमतौर पर अनिवार्य होता है। इन विट्रो सेल कल्चर को सेल आसंजन और प्रसार का समर्थन करने के लिए विकास कारकों, प्रोटीन और एंजाइमों के साथ पूरक बेसल माध्यम की आवश्यकता होती है। भ्रूण गोजातीय सीरम (एफबीएस) सेल कल्चर मीडिया के लिए एक आम पूरक है, क्योंकि भ्रूण रक्त 1) वयस्क रक्त की तुलना में विकास कारकों में समृद्ध है और 2) कम एंटीबॉडी सामग्रीप्रस्तुत करता है। जैसे-जैसे सेल थेरेपी आगे बढ़ती है, शास्त्रीय सेल संस्कृति स्थितियों की सुरक्षा के बारे में चिंताएं हैं जिसमें एफबीएस को संस्कृति माध्यम में जोड़ा जाता है। इसके अलावा, अब एफबीएस को विकल्प9 के साथ बदलने की प्रवृत्ति है। कई एफबीएस विकल्पों ने आशाजनक परिणाम दिखाए हैं।
प्लेटलेट समृद्ध प्लाज्मा (पीआरपी) विकल्प को यहां चुना गया है, और हमने पीआरपी की मानकीकृत तैयारी का उत्पादन करने के लिए एक चिकित्सा उपकरण विकसित किया है, जिसका नाम क्यूटसेल-पीआरपी है। इस उपकरण का इच्छित उपयोग जीएमपी स्थितियों के तहत ऑटोलॉगस कोशिकाओं के इन विट्रो विस्तार के लिए एक संस्कृति मीडिया पूरक के रूप में उपयोग किए जाने के लिए ऑटोलॉगस पीआरपी की तैयारी है।
पीआरपी को प्लाज्मा में एक केंद्रित प्लेटलेट निलंबन के रूप में परिभाषित किया गया है। क्योंकि कई तैयारी प्रोटोकॉल हैं, जो 1) आवश्यक रक्त की मात्रा, 2) उपयोग किए गए उपकरणों के प्रकार, और 3) सेंट्रीफ्यूजेशन प्रोटोकॉल में भिन्न होते हैं, परिणामस्वरूप प्लेटलेट सांद्रता रक्त बेसलाइन मूल्य से थोड़ा ऊपर से 10 गुना से अधिक तक भिन्न होती है। इसके अलावा, पीआरपी तैयारी में लाल और सफेद रक्त कोशिका संदूषण के परिवर्तनीय स्तर होते हैं। शब्दावली "पीआरपी" का उपयोग इस प्रकार उन उत्पादों का वर्णन करने के लिए किया जाता है जो उनकी जैविक संरचना और संभावित चिकित्सीय प्रभावों में बहुत भिन्न होते हैं।
अधिकांश अध्ययनों में, एफबीएस प्रतिस्थापन पीआरपी की विभिन्न सांद्रता का उपयोग करके प्राप्त किया जाता है जो सक्रिय होता है (थ्रोम्बिन या कैल्शियम द्वारा)। यह कृत्रिम सक्रियण 15 मिनट से 24 घंटे 11 तक प्लेटलेट विकास कारकों की तत्काल और महत्वपूर्ण रिहाई को उकसाताहै। इसलिए, यह माना जाता है कि प्लेटलेट सक्रियण सेल संस्कृतियों में अनुप्रयोगों के लिए अवांछनीय है, जिसमें क्रमिक प्लेटलेट अपघटन से विकास कारकों की धीमी रिहाई की आवश्यकता होती है।
पीआरपी थेरेपी में केंद्रित प्लाज्मा12 में ऑटोलॉगस प्लेटलेट्स की तैयारी शामिल है। इष्टतम प्लेटलेट एकाग्रता स्पष्ट नहीं है, और पीआरपी13 तैयार करने के लिए वाणिज्यिक उपकरणों की एक विस्तृत श्रृंखला उपलब्ध है। मानकीकरण की यह कमी अध्ययनों के बीच असंगति के परिणामस्वरूप होती है और इंजेक्शन की खुराक और समय के बारे में एक ब्लैक बॉक्स का कारण बनी है। यह प्रोटोकॉल 100% ऑटोलॉगस एक्स विवो कल्चर मॉडल में त्वचा फाइब्रोब्लास्ट का विस्तार करने के लिए इस समर्पित पीआरपी डिवाइस का उपयोग करके ऑटोलॉगस पीआरपी प्राप्त करने की प्रक्रिया का वर्णन करता है।

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>96 well black clear flat bottom</td>
			<td>BD Falcon</td>
			<td>353219</td>
			<td>32/case</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell trace Violet Dye</td>
			<td>Thermo Fischer Scientific</td>
			<td>C34557</td>
			<td>180 assays</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CuteCell PRP</td>
			<td>Regen Lab SA</td>
			<td>CC-PRP-3T</td>
			<td>3 tubes per package</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D9542</td>
			<td>1 mg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>52400-025</td>
			<td>500 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10270106</td>
			<td>500 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutamine 200 mM</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25030024</td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematology Counter</td>
			<td>Sysmex</td>
			<td>KK-21N</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin 5000E Liquemine</td>
			<td>Drossapharm AG</td>
			<td></td>
			<td>0.5 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES Buffer Solution 1M</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15630-056</td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liberase DH</td>
			<td>Roche</td>
			<td>5401054001</td>
			<td>2x 5 mg per package</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM NEAA 100x</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11140-035</td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na Pyruvate 1mg/mL</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11360-039</td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140122</td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phalloidin alexa Fluor 488</td>
			<td>Molecular Probes</td>
			<td>A12379</td>
			<td>300 units</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>31966-021</td>
			<td>500 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin 1x 0.25%</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25050-014</td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin EDTA 0.25%</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25200056</td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

production of autologous platelet-rich plasma for boosting in vitro human fibroblast expansion

वर्तमान में त्वचा की मरम्मत के लिए ऑटोलॉगस फाइब्रोब्लास्ट के उपयोग में बहुत नैदानिक रुचि है। ज्यादातर मामलों में, विट्रो में त्वचा कोशिकाओं की संस्कृति की आवश्यकता होती है। हालांकि, ज़ेनोजेनिक या एलोजेनिक कल्चर मीडिया का उपयोग करने वाले सेल कल्चर के कुछ नुकसान हैं (यानी, संक्रामक एजेंट संचरण या धीमी सेल विस्तार का जोखिम)। यहां, एक रोगी के अपने प्लेटलेट-समृद्ध प्लाज्मा (पीआरपी) का उपयोग करके विट्रो में मानव त्वचा फाइब्रोब्लास्ट कोशिकाओं के विस्तार के लिए एक ऑटोलॉगस कल्चर सिस्टम विकसित किया गया है। मानव त्वचीय फाइब्रोब्लास्ट ्स को एब्डोमिनोप्लास्टी से गुजरते समय रोगी से अलग किया जाता है। भ्रूण गोजातीय सीरम (एफबीएस) या पीआरपी के साथ पूरक माध्यम का उपयोग करके 7 दिनों तक संस्कृतियों का पालन किया जाता है। पीआरपी तैयारी, प्रसार और फाइब्रोब्लास्ट भेदभाव में रक्त कोशिका सामग्री का मूल्यांकन किया जाता है। यह प्रोटोकॉल एक समर्पित चिकित्सा उपकरण का उपयोग करके पीआरपी की मानकीकृत, गैर-सक्रिय तैयारी प्राप्त करने की विधि का वर्णन करता है। तैयारी के लिए केवल एक चिकित्सा उपकरण (क्यूटसेल-पीआरपी) और सेंट्रीफ्यूज की आवश्यकता होती है। यह उपकरण पर्याप्त चिकित्सा अभ्यास स्थितियों के तहत उपयुक्त है और एक-चरण, एपिरोजेनिक और बाँझ बंद प्रणाली है जिसके लिए 5 मिनट के लिए 1,500 x g के एकल, नरम स्पिन सेंट्रीफ्यूजेशन की आवश्यकता होती है। सेंट्रीफ्यूजेशन के बाद, रक्त घटक अलग हो जाते हैं, और प्लेटलेट युक्त प्लाज्मा आसानी से एकत्र हो जाता है। यह उपकरण पीआरपी की त्वरित, सुसंगत और मानकीकृत तैयारी की अनुमति देता है जिसे मानव कोशिकाओं के इन विट्रो विस्तार के लिए सेल कल्चर पूरक के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है। यहां प्राप्त पीआरपी में लाल और सफेद रक्त कोशिकाओं के अधिमान्य निष्कासन के साथ पूरे रक्त की तुलना में 1.5 गुना प्लेटलेट एकाग्रता होती है। यह दिखाया गया है कि पीआरपी एफबीएस (7.7x) की तुलना में सेल प्रसार में एक बढ़ावा देने वाला प्रभाव प्रस्तुत करता है और यह कि फाइब्रोब्लास्ट पीआरपी उपचार पर सक्रिय होते हैं।

यह पेटेंट तकनीक एक सरल, तेज और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य चिकित्सा उपकरण है जिसका उपयोग मानकीकृत पीआरपी तैयारी का उत्पादन करने के लिए किया जाता है। यह एक-चरण, पूरी तरह से बंद प्रणाली है जो 1,500 x g (अल?...

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Production of Autologous Platelet-Rich Plasma for Boosting In Vitro Human Fibroblast Expansion

यह प्रोटोकॉल एक उपकरण प्रस्तुत करता है जो 100% ऑटोलॉगस फाइब्रोब्लास्ट संस्कृति प्रणाली में कोशिकाओं के इन विट्रो विस्तार को बढ़ावा देने के लिए पीआरपी का उत्पादन करता है।

इन विट्रो मानव फाइब्रोब्लास्ट विस्तार को बढ़ावा देने के लिए ऑटोलॉगस प्लेटलेट-रिच प्लाज्मा का उत्पादन

There is currently great clinical interest in the use of autologous fibroblasts for skin repair. In most cases, culture of skin cells in vitro is ...

यह प्रोटोकॉल मानव फाइब्रोब्लास्ट संस्कृति के लिए ऑटोलॉगस सिस्टम है जिसमें रोगी के अपने प्लेटलेट-समृद्ध प्लाज्मा और पांच मिनट के लिए एक मानकीकृत तैयारी होती है। पीआरपी संस्कृति में फाइब्रोब्लास्ट के बड़े पैमाने पर सेल विस्तार को बढ़ावा देता है। मैं आपको सेल पूरक के रूप में पीआरपी का उपयोग करके इस विधि का उपयोग करने की सलाह दूंगा जब आपको ऑटोलॉगस सेल थेरेपी के लिए बड़े पैमाने पर क्रीक और सुरक्षित सेल विस्तार की आवश्यकता होती है।जब आप इस प्रोटोकॉल का प्रयास करते हैं, तो मैं आपको पीआरपी अखंडता की जांच करने की सलाह दूंगा। लाल रक्त कोशिकाओं की अनुपस्थिति के साथ आपका प्लाज्मा बहुत साफ होना चाहिए। जब आप इसे स्थानांतरित करते हैं, तो आपको इसे बहुत सावधानी से करना होगा।और आपके ऊतक के पाचन के बारे में, इसे आगे बढ़ने से पहले बहुत साफ होना चाहिए। शुरू करने के लिए, रक्त से भरे प्लेटलेट युक्त प्लाज्मा, या पीआरपी, ट्यूबों को एंटीकोआगुलेंट के साथ रक्त को मिलाने के लिए तीन बार उल्टा करें। एक निश्चित 45 डिग्री-कोण वाले रोटर में पांच मिनट के लिए 1500 ग्राम पर रक्त के नमूनों को सेंट्रीफ्यूज करें और ट्यूबों को संतुलित करें।सेंट्रीफ्यूजेशन के बाद, अंशित रक्त में जेल की सतह पर अलग जेल और प्लेटलेट्स के नीचे लाल और सफेद रक्त कोशिकाएं फंस जाती हैं। प्लाज्मा सुपरनैटेंट में प्लेटलेट जमा को फिर से निलंबित करने के लिए पीआरपी ट्यूब को धीरे से 20 बार उलटा करें। सुनिश्चित करें कि प्लेटलेट्स जेल से पूरी तरह से अलग हैं और प्लाज्मा को स्पष्ट और पारदर्शी से टर्बिड में बदलना चाहिए।10-मिलीलीटर सिरिंज से जुड़े ट्रांसफर डिवाइस का उपयोग करके ट्यूब से प्लाज्मा समाधान एकत्र करें। त्वचा के नमूनों को पीबीएस के साथ 50-मिलीलीटर पॉलीप्रोपाइलीन ट्यूब में रखें और ट्यूब को धीरे से हिलाएं। यदि त्वचा का नमूना अपेक्षाकृत बड़ा है, तो इसे एपिडर्मल साइड के साथ 150-वर्ग सेंटीमीटर ऊतक संस्कृति डिश के ढक्कन पर रखें।बल और कैंची की एक जोड़ी का उपयोग करके चमड़े के नीचे वसा ऊतक को हटा दें। ऊतक को सूखने से रोकने के लिए, पीबीएस में हर कुछ मिनट में ऊतक को कुल्ला करें। जब वसा हटाने का काम पूरा हो जाता है, तो त्वचा के नमूनों को स्ट्रिप्स में काटने के लिए स्केलपेल का उपयोग करें, लगभग 0.5 बाय 1.5 सेंटीमीटर।इसके बाद, एक बाँझ 15-मिलीलीटर ट्यूब में पांच मिलीलीटर कोलेजनेज / डिस्पेज़ मिश्रण जोड़ें। कटे हुए ऊतक को ट्यूब में स्थानांतरित करें। सुनिश्चित करें कि ऊतक के टुकड़े समाधान में डूबे हुए हैं और ट्यूब को सुरक्षित रूप से कैप करें।ट्यूबों को 150 मिनट के लिए कक्षीय झटकों के साथ 37 डिग्री सेल्सियस पर एक इनक्यूबेटर में रखें। इनक्यूबेशन के बाद, ऊतक युक्त ट्यूब को जैव सुरक्षा कैबिनेट में ले जाएं। बायोसेफ्टी कैबिनेट में बाँझ 100 मिलीमीटर कल्चर डिश के ढक्कन को उल्टा रखें।ऊतक निलंबन को 100 मिलीमीटर कल्चर डिश के तल पर बिना छींटे के स्थानांतरित करें। यदि ऊतक का कोई भी टुकड़ा ट्यूब में रहता है, तो टुकड़ों को संस्कृति पकवान के तल में स्थानांतरित करने के लिए बाँझ एक-मिलीलीटर पिपेट या बाँझ बल का उपयोग करें। एपिडर्मिस के सामने होने के साथ, डर्मिस को बल की एक जोड़ी के साथ पकड़ें।एपिडर्मिस के किनारे को बल की एक और जोड़ी के साथ समझें और डर्मिस और एपिडर्मिस को अलग-अलग छील लें। अलग किए गए टुकड़ों को एक ही ढक्कन पर रखते हुए, त्वचीय टुकड़ों को पीबीएस युक्त एक नए 100 मिलीमीटर कल्चर डिश में रखें। इसके बाद, प्रयोगशाला बल का उपयोग करके, त्वचीय टुकड़ों को 15-मिलीलीटर पॉलीप्रोपाइलीन ट्यूब में स्थानांतरित करें जिसमें 0.3% ट्रिप्सिन पीबीएस के तीन मिलीलीटर होते हैं।ट्यूब को 37 डिग्री सेल्सियस पानी के स्नान में इनक्यूबेट करें और ट्यूब को कई बार उलटकर हर दो से तीन मिनट में सामग्री मिलाएं। 10 से 20 मिनट के बाद, तीन से पांच मिलीलीटर बर्फ-ठंडा पूर्ण विकास माध्यम जोड़कर प्रतिक्रिया को रोकें। वोर्टेक्स ट्यूब को कई बार जोर से हिलाता है।निलंबन को फ़िल्टर करें, जिसमें फाइब्रोब्लास्ट होते हैं, 85-माइक्रोन नायलॉन जाल के माध्यम से 50-मिलीलीटर ट्यूब में। फाइब्रोब्लास्ट समाधान को 10 मिनट के लिए 150 ग्राम पर सेंट्रीफ्यूज करें। सुपरनैटेंट को एस्पिरेटेड करें और सेल की गिनती के लिए पूर्ण विकास माध्यम के 100 से 200 माइक्रोलीटर में सेल पेलेट को फिर से निलंबित करें।कोशिकाओं को 25-वर्ग सेंटीमीटर ऊतक संवर्धन फ्लास्क में प्लेट करें। फिर, फ्लास्क को 37 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट करें। उस माध्यम को बदलें जिसमें अगले दिन गैर-अनुयायी कोशिकाएं होती हैं, और फिर, हर तीन से चार दिनों में।जब फाइब्रोब्लास्ट 70 से 80% कंफ्लुएंसी तक पहुंच जाते हैं, तो उन्हें पीबीएस के साथ धो लें और ट्रिप्सिन-ईडीटीए समाधान जोड़ें। फ्लास्क को 37 डिग्री सेल्सियस पर तीन मिनट तक इनक्यूबेट करने के बाद, तीन से पांच मिलीलीटर गर्म पूर्ण विकास माध्यम जोड़कर प्रतिक्रिया को रोकें। फिर, पांच मिनट के लिए 200 ग्राम पर सेल निलंबन को सेंट्रीफ्यूज करें।आकांक्षा से सतह पर तैरने वाले को हटा दें। पीआरपी माध्यम में फाइब्रोब्लास्ट को कल्चर करें और 37 डिग्री सेल्सियस पर सेनेंचते हैं। अनुशंसित न्यूनतम सेल घनत्व 4,000 व्यवहार्य कोशिकाएं प्रति सेंटीमीटर वर्ग है।10 अलग-अलग रोगियों से पूरे रक्त को संसाधित करके पीआरपी का उत्पादन करने के लिए एक समर्पित चिकित्सा उपकरण का उपयोग किया गया था। डिवाइस ने लाल रक्त कोशिकाओं और सफेद रक्त कोशिकाओं के बहुमत को हटा दिया। पीआरपी में औसत प्लेटलेट एकाग्रता पूरे रक्त में प्लेटलेट एकाग्रता की तुलना में लगभग 50% अधिक थी।ऑटोलॉगस फाइब्रोब्लास्ट्स की खेती 10% एफबीएस के साथ माध्यम में या मीडिया में एक से 50% तक पीआरपी सांद्रता के साथ की गई थी, सात दिनों की संस्कृति के बाद, माध्यम को बदले बिना, 20% पीआरपी के साथ प्रमुख संस्कृतियों ने व्यवहार्य फाइब्रोब्लास्ट की अधिक संख्या का प्रदर्शन किया। पीआरपी में एफबीएस की तुलना में 7.7 गुना तक प्रसार बूस्टर के रूप में शक्तिशाली प्रभाव थे। फेलोइडिन धुंधला होने से पता चला है कि पीआरपी सक्रियण पर देखा गया रूपात्मक परिवर्तन एफ-एक्टिन पुनर्गठन से संबंधित था, जो फाइब्रोब्लास्ट सक्रियण का एक हस्ताक्षर है।तेजी से सेल विस्तार की एक प्रमुख चिंता जीनोमिक संशोधन का जोखिम है। इसका आकलन करने के लिए, आप अपनी कोशिकाओं की जीनोमिक स्थिरता का आकलन करने के लिए तुलनात्मक जीनोमिक संकरण परख कर सकते हैं। इस तकनीक का मुख्य लाभ एफबीएस को पीआरपी द्वारा प्रतिस्थापित करना है, जो एक अधिक शक्तिशाली ऑटोलॉगस जैविक पूरक है।इसके साथ, शोधकर्ता एक ज़ेनोजेनिक पदार्थों के किसी भी अतिरिक्त के बिना अधिक सेल तेजी से विकसित कर सकता है। हम इस तकनीक का उपयोग अन्य सेल प्रकारों के लिए कर सकते हैं जिन्हें नैदानिक अनुप्रयोग से पहले पूर्व विवो विस्तार की आवश्यकता होती है, उदाहरण के लिए, केराटिनोसाइट या मेसेनकाइमल स्टेम सेल।

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Surgical Retrieval, Isolation and In vitro Expansion of Human Anterior Cruciate Ligament-derived Cells for Tissue Engineering Applications

Surgical Retrieval, Isolation and In vitro Expansion of Human Anterior Cruciate Ligament-derived Cells for Tissue Engineering Applications

सर्जिकल रिट्रीवल, अलगाव और<em&gt; इन विट्रो</em&gt; ऊतक इंजीनियरिंग अनुप्रयोगों के लिए मानव पूर्वकाल cruciate बंधन व्युत्पन्न कोशिकाओं का विस्तार

Injury to the ACL is a commonly encountered problem in active individuals. Even partial tears of this intra-articular knee ligament lead to biomechanical ...

Production, Characterization and Potential Uses of a 3D Tissue-engineered Human Esophageal Mucosal Model

एक 3 डी ऊतक इंजीनियर मानव इसोफेजियल mucosal मॉडल का उत्पादन, लक्षण और क्षमता का उपयोग करता

The incidence of both esophageal adenocarcinoma and its precursor, Barrett&#8217;s Metaplasia, are rising rapidly in the western world. Furthermore ...

Cloning and Large-Scale Production of High-Capacity Adenoviral Vectors Based on the Human Adenovirus Type 5

मानव Adenovirus प्रकार 5 पर आधारित उच्च क्षमता adenoviral वैक्टर की क्लोनिंग और बड़े पैमाने पर उत्पादन

High-capacity adenoviral vectors (HCAdV) devoid of all viral coding sequences represent one of the most advanced gene delivery vectors due to their high ...

Eye Irritation Test (EIT) for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial (RhCE) Tissue Model

Eye Irritation Test EIT for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial RhCE Tissue Model

खंगाला मानव कॉर्निया की तरह उपकला (RHCE) ऊतक मॉडल का उपयोग नेत्र परेशान रसायन का खतरा पहचान के लिए आंखों में जलन टेस्ट (ईआईटी)

To comply with the Seventh Amendment to the EU Cosmetics Directive and EU REACH legislation, validated non-animal alternative methods for reliable and ...

Characterization of Leukocyte-platelet Rich Fibrin, A Novel Biomaterial

ल्युकोसैट प्लेटलेट रिच आतंच, एक उपन्यास biomaterial की विशेषता

Autologous platelet concentrates represent promising innovative tools in the field of regenerative medicine and have been extensively used in oral ...

Mesenchymal Stromal Cell Culture and Delivery in Autologous Conditions: A Smart Approach for Orthopedic Applications

Mesenchymal stromal सेल संस्कृति और ऑटोलॉगस शर्तों में डिलिवरी: आर्थोपेडिक अनुप्रयोगों के लिए एक स्मार्ट दृष्टिकोण

Human Mesenchymal Stromal Cells (hMSCs) are cultured in vitro with different media. Limits on their use in clinical settings, however, mainly depend on ...

An In Vitro Organ Culture Model of the Murine Intervertebral Disc

An In Vitro Organ Culture Model of the Murine Intervertebral Disc

एक<em&gt; इन विट्रो</em&gt; अंग संस्कृति म्यूरीन intervertebral डिस्क के मॉडल

Intervertebral disc (IVD) degeneration is a significant contributor to low back pain. The IVD is a fibrocartilaginous joint that serves to transmit and ...

Bioparticle Microarrays for Chemotactic and Molecular Analysis of Human Neutrophil Swarming in vitro

कीमोटैक्टिक और मानव न्यूट्रोफिल झुंड के आणविक विश्लेषण के लिए बायोपार्टिकल माइक्रोरेज़ विट्रो में झुंड

Neutrophil swarming is a cooperative process by which neutrophils seal off a site of infection and promote tissue reorganization. Swarming has classically ...

In Vitro Model of Human Cutaneous Hypertrophic Scarring using Macromolecular Crowding

मैक्रोमॉलिक्यूलर क्राउडिंग का उपयोग करके मानव क्यूटिनियस हाइपरट्रोफिक स्कैरिंग के विट्रो मॉडल में

It has been shown that in vivo tissues are highly crowded by proteins, nucleic acids, ribonucleoproteins, polysaccharides, etc. The following protocol ...

Advanced 3D Liver Models for In vitro Genotoxicity Testing Following Long-Term Nanomaterial Exposure

लंबी अवधि के नैनोमैटेरियल एक्सपोजर के बाद इन विट्रो जेनोटॉक्सिसिटी परीक्षण के लिए उन्नत 3डी लिवर मॉडल

Due to the rapid development and implementation of a diverse array of engineered nanomaterials (ENM), exposure to ENM is inevitable and the development of ...