Name: inducing hairy roots by agrobacterium rhizogenes-mediated transformation in tartary buckwheat (fagopyrum tataricum)
Uploaded: 2020-03-11T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Inducing Hairy Roots by Agrobacterium rhizogenes-Mediated Transformation in Tartary Buckwheat Fagopyrum tataricum at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av Fundamental Research Funds for central public welfare research institutes ZXKT17002.

TB brukes i denne studien ble navngitt som BT18, som stammer fra rasen av "JinQiao No.2" dyrket av Research Center of Small Miscellaneous Grain of Shanxi Academy of Agricultural Science. De primære trinnene i denne protokollen er illustrert i figur 1.
MERK: Bruk eksplanterrelatert manipulasjon raskt, og hold petriskålene lukket for å unngå visner og forurensning. Med mindre annet er oppgitt, ble alle eksplanteinkubasjonene utført under forutsetning av et 14-h...

TB har blitt brukt i flere studier relatert til sekundære metabolitter ved genetiske og metabolske nivåer1,2,5,27,28. Hårete rotkultur, som en unik kilde for metabolittproduksjon, spiller en avgjørende rolle i metabolsk engineering29 og kan brukes til å endre metabolske veier ved å sette inn de relaterte genene. Kim et al.<sup cla...

Tartary bokhvete (TB) (Fagopyrum tataricum (L.) Gaertn) er en type dicotyledon som tilhører slekten Fagopyrum og familien Polygonaceae1. Som en type kinesisk medisin homolog mat, har TB fått betydelig interesse på grunn av sin karakteristiske kjemiske sammensetning og ulike bioaktiviteter mot sykdommer. TB er primært rik på karbohydrater, proteiner, vitaminer og karotenoider samt i polyfenoler som fenolsyrer og flavonoider1. Ulike biologiske og farmakologiske aktiviteter av flavonoider, inkludert antioksidative, antihypertensive2, og antiinflammatoriske samt antikreft og antidiabetika egenskaper, har blitt vist3.
Agrobacterium rhizogenes er en jordbakterie som bidrar til utvikling av hårete rotsykdom i flere høyere planter, spesielt dicotyledons, ved å infisere sårsteder4,5. Denne prosessen initieres ved overføring av T-DNA i rotinduserende (Ri) plasmid5,6 og er ofte ledsaget av integrering og uttrykk for et eksogent gen fra Ri plasmid og de påfølgende trinnene for å generere hårete rot fenotype7. A. rhizogenes-medierte transgene hårete røtter, som et kraftig verktøy innen plantebioteknologi, har vært mest brukt på grunn av deres stabile og høye produktivitet og enkel innhenting på kort tid. Videre er hårete røtter indusert av A. rhizogenes effektivt preget av deres plagiotropiske rotutvikling og svært forgreningvekst i et hormonfritt medium8. De kan brukes i flere forskningsområder, inkludert kunstig frøproduksjon, rotknuteforskning, og i å studere interaksjoner med andre organismer som mycorrhizal sopp, nematoder og rotpatogener7,9. I tillegg har hårete rottransformasjonskulturer blitt mye brukt som et eksperimentelt system for å undersøke de biokjemiske veiene og kjemisk evidens og for å produsere plantesekundære metabolitter som brukes som legemidler, kosmetikk og tilsetningsstoffer8,10. De verdifulle sekundære metabolitter, inkludert indole alkaloider, aconites, tropane alkaloider, terpenoider og flavonoider, syntetisert i vill-type hårete røtter har blitt undersøkt i flere tiår i mange arter, for eksempel ginsenoside i Panax ginseng11, coumarine i Ammi majus12, og fenoliske forbindelser i TB2,13.
Hårete røtter har blitt produsert ved hjelp av A. rhizogenes i 79 plantearter fra 27 familier14. For eksempel har A. rhizogenes-mediert hårete rot transformasjon blitt rapportert i soyabønne15,16, Salvia17, Plumbago indica18, Lotus japonicus19, og cikoria (Cichorium intybus L.) 20. TB hårete rot transformasjon har også blitt undersøkt2. Få detaljerte protokoller er tilgjengelige om utviklingen av hårete røtter mediert av A. rhizogenes enten bærer en binær vektor eller ikke. For eksempel introduserte Sandra et al.21 en metode for å produsere transgene potethårete røtter som opprettholdes i vill-type skudd. De fullt utviklede hårete røttene kan visualiseres 5-6 uker etter injeksjonen av A. rhizogenes bærer gus reporter genet inn i stammen internoder av potetplanter. En annen studie hadde også rapportert et transgent hårete rotsystem indusert av A. rhizogenes som huser gusA reporter genet i jute (Corchorus capsularis L.) 22. Videre fikk Supaart et al.23 transgene tobakkhårete røtter ved hjelp av A. rhizogenes forvandlet med uttrykket vektor pBI121 bærer genet δ1-tetrahydrocannabinolic acid (THCA) synthase å produsere THCA.
En trinnvis prosess for en effektiv generasjon av hårete rottransformasjon, spesielt i TB, har imidlertid blitt relativt mindre demonstrert. I denne studien har vi beskrevet en detaljert protokoll ved hjelp av A. rhizogenes som bærer reportergenet (GFP), en selektiv markør (Kan), og et gen av interesse (b4, en identifisert fra vår gruppe, men upublisert gen fra grunnleggende helix-loop-helix (bHLH) familie) for å generere hårete rot genetisk transformasjon i TB. Eksperimentet varte i 5-6 uker, fra inokulasjon av frø til generasjon av hårete røtter, som involverer explant forberedelse, infeksjon, coculturing, subculturing, og påfølgende forplantning. Videre ble A. rhizogenes som inneholder en binær plasmid bærer TB transgene av myeloblastosis transkripsjonfaktor 116 (FtMYB116) brukt til å avgjøre om FtMYB116 kan fremme akkumulering av flavonoider, spesielt rutin, i TB på genet og metabolsk nivå gjennom TB hårete rot transformasjon. FtMYB116, som er en lysindusert transkripsjonsfaktor, regulerer syntesen av rutin under forskjellige lysforhold5. Chalcone synthase (CHS), flavanone-3-hydroxylase (F3H), flavonoid-3'-hydroxylase (F3'H), og flavonol synthase (FLS)24 er viktige enzymer involvert i metabolsk vei av rutin biosyntese. Derfor viser denne studien overuttrykk av FtMYB116 i TB hårete røtter og uttrykk for viktige enzymgener samt innholdet av rutin og andre flavonoider som quercetin.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>2*Taq PCR MasterMix</td>
			<td>Aidlab, China</td>
			<td>PC0901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agar powder</td>
			<td>Solarbio Life Science, Beijing, China</td>
			<td>A8190</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Applied Biosystems 2720 thermo cycler</td>
			<td>ThermoFisher Scientific, US</td>
			<td>A37834</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AS</td>
			<td>Solarbio Life Science, Beijing, China</td>
			<td>A8110</td>
			<td>Diluted in DMSO, 100 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>binary vectors</td>
			<td>ThermoFisher Scientific (invitrogen), US</td>
			<td>/</td>
			<td>pK7WG2D/pK7GWIWG2D (II)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefotaxime,sodium</td>
			<td>Solarbio Life Science, Beijing, China</td>
			<td>C8240</td>
			<td>Diluted in Water, 200 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CF15RXII high-speed micro</td>
			<td>Hitachi, Japan</td>
			<td>No. 90560201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diposable Petri-dish</td>
			<td>Guanghua medical instrument factory, Yangzhou, China</td>
			<td>/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DYY-6C electrophoresis apparatus</td>
			<td>Bjliuyi, Beijing China</td>
			<td>ECS002301</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EASYspin Plus Plant RNA Kit</td>
			<td>Aidlab, China</td>
			<td>RN38</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ELGA purelab untra bioscience</td>
			<td>ELGA LabWater, UK</td>
			<td>82665JK1819</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epoch Microplate Spectrophotometer</td>
			<td>biotek, US</td>
			<td>/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gateway BP/LR reaction enzyme</td>
			<td>ThermoFisher Scientific (invitrogen), US</td>
			<td>11789100/11791110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HYG-C multiple-function shaker</td>
			<td>Suzhou Peiying Experimental Equipment Co., Ltd. China</td>
			<td>/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kan</td>
			<td>Solarbio Life Science, Beijing, China</td>
			<td>K8020</td>
			<td>Diluted in Water, 100 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MLS-3750 Autoclave sterilizer</td>
			<td>Sanyo, Japan</td>
			<td>/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MS salts with vitamins</td>
			<td>Solarbio Life Science, Beijing, China</td>
			<td>M8521</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Solarbio Life Science, Beijing, China</td>
			<td>S8210</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Other chemicals unstated</td>
			<td>Beijing Chemical Works, China</td>
			<td></td>
			<td>ethanol, mercury bichloride, etc.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PHS-3C pH meter</td>
			<td>Shanghai INESA Scientific Instrument Co., Ltd, China</td>
			<td>a008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plant Genomic DNA Kit</td>
			<td>TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO., LTD</td>
			<td>DP305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rifampin</td>
			<td>Solarbio Life Science, Beijing, China</td>
			<td>R8010</td>
			<td>Diluted in DMSO, 50 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectinomycin</td>
			<td>Solarbio Life Science, Beijing, China</td>
			<td>S8040</td>
			<td>Diluted in Water, 100 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Solarbio Life Science, Beijing, China</td>
			<td>S8270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trans2K DNA Marker</td>
			<td>TransGen Biotech, Beijing, China</td>
			<td>BM101-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tryptone</td>
			<td>Solarbio Life Science, Beijing, China</td>
			<td>LP0042</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Whatman diameter 9 cm Filter paper</td>
			<td>Hangzhou wohua Filter Paper Co., Ltd</td>
			<td>/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yeast Extract powder</td>
			<td>Solarbio Life Science, Beijing, China</td>
			<td>LP0021</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

inducing hairy roots by agrobacterium rhizogenes-mediated transformation in tartary buckwheat (fagopyrum tataricum)

Tartary bokhvete (TB) [Fagopyrum tataricum (L.) Gaertn] har ulike biologiske og farmakologiske aktiviteter fordi den inneholder rikelig sekundære metabolitter som flavonoider, spesielt rutin. Agrobacterium rhizogenes har gradvis blitt brukt over hele verden til å indusere hårete røtter i medisinske planter for å undersøke genfunksjoner og øke utbyttet av sekundære metabolitter. I denne studien har vi beskrevet en detaljert metode for å generere A. rhizogenes-medierte hårete røtter i TB. Cotyledons og hypokotyledonary aksen på 7-10 dager ble valgt som explants og infisert med A. rhizogenes bærer en binær vektor, som indusert adventitious hårete røtter som dukket opp etter 1 uke. Den genererte hårete rottransformasjonen ble identifisert basert på morfologi, resistensvalg (kanamycin) og reportergenuttrykk (grønt fluorescerende protein). Deretter ble de forvandlede hårete røttene selvforplantet etter behov. I mellomtiden ble en myeloblastosis (MYB) transkripsjonsfaktor, FtMYB116,forvandlet til TB-genomet ved hjelp av A. rhizogenes-medierte hårete røtter for å verifisere ftmyb116s rolle i syntetiserende flavonoider. Resultatene viste at uttrykket av flavonoid-relaterte gener og utbyttet av flavonoidforbindelser (rutin og quercetin) var betydelig (p < 0,01) fremmet av FtMYB116, noe som indikerer at A. rhizogenes-medierte hårete røtter kan brukes som et effektivt alternativt verktøy for å undersøke genfunksjoner og produksjon av sekundære metabolitter. Den detaljerte trinnvise protokollen beskrevet i denne studien for å generere hårete røtter kan vedtas for enhver genetisk transformasjon eller andre medisinske planter etter justering.

Agrobacterium rhizogenes-mediert TB hårete rot transformasjon Denne studien beskriver den trinnvise protokollen som ble etablert for å oppnå genetisk forvandlede hårete røtter ved hjelp av A. rhizogenes. Det tok ca 5-6 uker fra inokulasjon av TB frø til høsting av identifiserte hårete røtter, og noen viktige trinn er avbildet i figur 1 (A-H). Kort, steriliserte avskallede frø ble inokulert (Figur 1...

Watch this Scientific Journal Video about Inducing Hairy Roots by Agrobacterium rhizogenes-Mediated Transformation in Tartary Buckwheat Fagopyrum tataricum at JoVE.com

Inducing Hairy Roots by Agrobacterium rhizogenes-Mediated Transformation in Tartary Buckwheat Fagopyrum tataricum

Vi beskriver en metode for å indusere hårete røtter av Agrobacterium rhizogenes-mediert transformasjon i Tartary bokhvete (Fagopyrum tataricum). Dette kan brukes til å undersøke genfunksjoner og produksjon av sekundære metabolitter i Tartary bokhvete, vedtas for enhver genetisk transformasjon, eller brukes til andre medisinske planter etter forbedring.

Indusere hårete røtter av Agrobacterium rhizogenes-Mediert Transformasjon i Tartary Bokhvete (Fagopyrum tataricum)

Tartary buckwheat (TB) [Fagopyrum tataricum (L.) Gaertn] possesses various biological and pharmacological activities because it contains abundant ...

Ved hjelp av denne protokollen vil vi demonstrere den trinnvise prosessen for å indusere hårete røtter i tartary bokhvete for første gang. Denne teknikken er en enkel og billig for å begynne å genomikk og mikrobiomikk for tartary bokhvete og andre planter. Selv om denne detaljerte metoden er satt opp for tartary bokhvete, kan den brukes på andre dicot planter med noen modifikasjoner.Selv om denne metoden er enkel å utføre, har den mange detaljerte trinn. Visuell demonstrasjon kan hjelpe forskere med å oppnå en mer effektiv hårete rotinduksjon. Å demonstrere prosedyren vil være Guangtao Qian, en Master-student fra laboratoriet mitt.Begynn med å velge plumpe og uskadet tartary bokhvete frø og soaking frøene i 28 grader Celsius vann i ca 20 minutter. Når frøstrøket lett kan fjernes, plasser 100 til 200 skrelles frø i en sterilisert 100 milliliter konisk kolbe som inneholder 75% etanol i 30 sekunder. På slutten av steriliseringen, erstatt etanol med 5% natriumhypokloritt.Etter 15 minutter dekanterer du natriumhypokloritten og vasker frøene med sterilt deionisert vann fem ganger. Deretter tørker frøene med et stykke sterilt bibulous papir. For å få tartary bokhvete frøplanter, tilsett 10 frø per flaske til individuelle 300 milliliter plantevev kulturflasker som inneholder 50 milliliter MSSA medium.Deretter spirer frøene i et kulturrom på 25, pluss eller minus 1, grader Celsius under lysforhold. Etter 7 til 10 dager, velg robuste frøplanter med to stykker utfoldet cotyledons og kutte plantene fra røttene. Legg plantene i en steril petriskål og skjær hypocotylene i 0,8 til 1 centimeter segmenter.Ren cotyledons i ca 0,5 centimeter stykker og pre-kultur de resulterende explants under lette forhold i 24 timer. Neste dag, overføre explants til en sterilisert 100 milliliter konisk kolbe. For å aktivere A.rhizogenes, tine kulturen på is før jevnt plating bakteriene på YEB solid medium med antibiotika for en 12 til 16 timers inkubasjon ved 28 grader Celsius.Neste morgen, plukke en monoklonal koloni for kultur i en ny petriskål som nettopp demonstrert. Etter en annen 12 til 16 timers inkubasjon, inokulerer de resulterende monoklonale koloniene i en sterilisert konisk kolbe på 10 til 16 timer, og inokulerer de resulterende monoklonalkoloniene i en sterilisert konisk kolbe på 10 til 18 timer til den optiske tettheten på 600 når 2,0. Deretter overfører du 2-4% av bakteriecellekulturen til en ny konisk kolbe på 100 milliliter som inneholder 20 milliliter friskt YEB-fast medium med antibiotika ved 28 grader Celsius og 200 omdreininger per minutt i 4 til 5 timer til den optiske tettheten på 600 nanometer når ca. 0,5.For å indusere hårete rot transformasjon, overføre A.rhizogenes kultur til en steril 50 milliliter konisk rør og samle bakterier ved sentrifugering. Resuspend pellet i MSSAS medium til en optisk tetthet på ca 0,2 og infuse suspensjonen i kolben av explants. Etter 10 minutter, fjern explants fra kolben og blot dem med et stykke sterilt bibulous papir.Legg deretter et sterilt filterpapir med 9 centimeter diameter på en tallerken med MSSAAS-medium og legg de utskrå på filterpapiret i en tre dagers inkubasjon ved 25 grader Celsius i mørket. På slutten av inkubasjonen, overføre ca 20 infiserte explants på MSSACK medium og vertikalt inkubere plantene under lysforhold på 25, pluss eller minus 1, grader Celsius. Etter 10 til 14 dager med kultur, velg de hårete røttene som viser et hvitt utseende og rask vekst og kutt røttene i to til tre centimeter stykker.Tydelig nummerer røttene på en ren benk. Subkultur rotbitene i en sterilisert 100 milliliter konisk kolbe som inneholder MSSK medium ved 25 grader Celsius og 80 omdreininger per minutt i mørket til de overspread til bunnen av kolben. For å identifisere de hårete røttene, fjern eventuelle tawny og forurensede hårete røtter og velg de med et hvitt utseende.Hvis et reportergen ble brukt, sjekk røttene for fluorescens under en blå eller lett dobbel ultrafiolett transilluminator og velg de hårete røttene som viser et sterkt fluorescerende signal. Tørk deretter røttene med absorberende papir og pakk dem i merket aluminiumsfolie for umiddelbar analyse. For langsiktig lagring, lyophilize røttene i flytende nitrogen og plassere røttene på minus 80 grader Celsius til deres undersøkelse.Etter genetisk transformasjon og kultur, som demonstrert, vil de hårete røttene vise en fluffy hvit farge og en plagiotropisk måte i sårområdene til explants og danne en svært forgrenet og sammenlåst matrise. Et reportergen kan brukes til å lette differensiering av de transgene hårete røttene under en blå eller lett dobbel ultrafiolett transillumination, eller identifisering av et målgen av interesse. Her vises det relative uttrykket for en lysindusert transkripsjonsfaktor i de transgene linjene av tartary bokhvete hårete røtter.Spesielt fremmes biosyntesen av rutin og quercetin også på metabolsk nivå som svar på den induserte transkripsjonsfaktoren overuttrykk. Videre er det relative genuttrykket av flavenoidsynteseveigener i alle tre transgene linjer bemerkelsesverdig høyere enn de som måles i kontrollgruppen, noe som indikerer en vellykket hårete rottransformasjon i tartary bokhvete explants. Det er infeksjon av frøene, valg av explants, og konsentrasjonen av bakteriene påvirker direkte suksessen til den hårete rotinduksjonen.Vi kan vurdere genuttrykk, DNA-protein eller proteinproteinreaksjoner eller masseproduksjon av sekundære metabolitter for å studere transkripsjonsregulering sekundære metabolitter. De konstruerte bakteriene er farlige for mennesker og hans miljø. Vær forsiktig med å håndtere, betjene og kast bakteriene riktig.

Research

JoVE Journal

Genetics

Inducing Hairy Roots by Agrobacterium rhizogenes-Mediated Transformation in Tartary Buckwheat (Fagopyrum tataricum)

A Robotic Platform for High-throughput Protoplast Isolation and Transformation

En robot plattform for High-throughput Protoplast Isolering og Transformation

Over the last decade there has been a resurgence in the use of plant protoplasts that range from model species to crop species, for analysis of signal ...

In Situ Labeling of Mitochondrial DNA Replication in Drosophila Adult Ovaries by EdU Staining

In Situ Labeling of Mitochondrial DNA Replication in Drosophila Adult Ovaries by EdU Staining

In Situ Merking av mitokondriell DNA replikasjon i Drosophila voksen Eggstokkene Edu Farging

The mitochondrial genome is inherited exclusively through the maternal line. Understanding of how the mitochondrion and its genome are proliferated and ...

Optogenetic Random Mutagenesis Using Histone-miniSOG in C. elegans

Optogenetic Random Mutagenesis Using Histone-miniSOG in C. elegans

Optogenetic Random Mutagenese Bruke Histone-miniSOG i<em&gt; C. elegans</em

Forward genetic screening in model organisms is the workhorse to discover functionally important genes and pathways in many biological processes. In most ...

Rapid Deletion Production in Fungi via Agrobacterium Mediated Transformation of OSCAR Deletion Constructs

Rapid Deletion Production in Fungi via Agrobacterium Mediated Transformation of OSCAR Deletion Constructs

Rapid Deletion Produksjon i Fungi via<em&gt; Agrobacterium</em&gt; Mediated Transformation of OSCAR Deletion Constructs

Precise deletion of gene(s) of interest, while leaving the rest of the genome unchanged, provides the ideal product to determine that particular ...

Mapping Genome-wide Accessible Chromatin in Primary Human T Lymphocytes by ATAC-Seq

Kartlegging genomet hele tilgjengelig Chromatin i primære menneskelige T-lymfocytter av ATAC-Seq

Assay for Transposase-Accessible Chromatin with high-throughput sequencing (ATAC-seq) is a method used for the identification of open (accessible) regions ...

Visualization of Microbiota in Tick Guts by Whole-mount In Situ Hybridization

Visualization of Microbiota in Tick Guts by Whole-mount In Situ Hybridization

Visualisering av bakterieflora i Tick Guts av hele-mount In Situ hybridisering

Infectious diseases transmitted by arthropod vectors continue to pose a significant threat to human health worldwide. The pathogens causing these ...

Plant Growth and Agrobacterium-mediated Floral-dip Transformation of the Extremophyte Schrenkiella parvula

Plant Growth and Agrobacterium-mediated Floral-dip Transformation of the Extremophyte Schrenkiella parvula

Vekst og Agrobacterium-mediert Floral-dip transformasjonen av Extremophyte Schrenkiella parvula

Schrenkiella parvula is an extremophyte adapted to various abiotic stresses, including multiple ion toxicity stresses. Despite high-quality genomic ...

Characterizing Histone Post-translational Modification Alterations in Yeast Neurodegenerative Proteinopathy Models

Karakterisere Histone post-translasjonell modifikasjon endringer i gjær nevrodegenerative Proteinopathy modeller

Neurodegenerative diseases, such as amyotrophic lateral sclerosis (ALS) and Parkinson&#39;s disease (PD), cause the loss of hundreds of thousands of lives ...

Transforming, Genome Editing and Phenotyping the Nitrogen-fixing Tropical Cannabaceae Tree Parasponia andersonii

Transforming, Genome Editing and Phenotyping the Nitrogen-fixing Tropical Cannabaceae Tree Parasponia andersonii

Transformasjon, Genova redigering og bestemmelse av fenotype av nitrogen-fixing Tropical Cannabaceae Tree Parasponia andersonii

Parasponia andersonii is a fast-growing tropical tree that belongs to the Cannabis family (Cannabaceae). Together with 4 additional species, it forms the ...

Investigation of the Transcriptional Role of a RUNX1 Intronic Silencer by CRISPR/Cas9 Ribonucleoprotein in Acute Myeloid Leukemia Cells

Investigation of the Transcriptional Role of a RUNX1 Intronic Silencer by CRISPR/Cas9 Ribonucleoprotein in Acute Myeloid Leukemia Cells

Gransking av Transcriptional rolle en RUNX1 Intronic lyddemper av CRISPR/Cas9 Ribonucleoprotein i akutt myelogen leukemi celler

The bulk of the human genome (~98%) is comprised of non-coding sequences. Cis-regulatory elements (CREs) are non-coding DNA sequences that contain binding ...