Name: inducing hairy roots by agrobacterium rhizogenes-mediated transformation in tartary buckwheat (fagopyrum tataricum)
Uploaded: 2020-03-11T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Inducing Hairy Roots by Agrobacterium rhizogenes-Mediated Transformation in Tartary Buckwheat Fagopyrum tataricum at JoVE.com

Detta arbete stöddes av fonderna för grundforskning för de centrala offentliga välfärdsforskningsinstituten ZXKT17002.

Tb som används i denna studie namngavs som BT18, som härstammar från rasen av "JinQiao No.2" odlas av Research Center of Small Miscellaneous Grain of Shanxi Academy of Agricultural Science. De primära stegen i det här protokollet illustreras i figur 1.
OBS: Använd explants-relaterade manipulation snabbt, och om möjligt, hålla Petri rätter stängda för att undvika vissning och kontaminering. Om inget annat anges utfördes alla explant-inkuber under förut...

TBC har använts i flera studier relaterade till sekundära metaboliter vid genetiska och metaboliska nivåer1,2,,5,27,28. Hårig rotkultur, som en unik källa för metabolitproduktion, spelar en central roll i metabolisk teknik29 och kan användas för att förändra metaboliska vägar genom att infoga relaterade gener. Kim et al.<sup ...

Tartary bovete (TB) (Fagopyrum tataricum (L.) Gaertn) är en typ av dicotyledon som tillhör släktet Fagopyrum och familjen Polygonaceae1. Som en typ av kinesisk medicin homolog mat, tb har fått stort intresse på grund av dess särskiljande kemisk sammansättning och olika bioaktiviteter mot sjukdomar. TB är främst rik på kolhydrater, proteiner, vitaminer och karotenoider samt i polyfenoler såsom fenoler och flavonoider1. Olika biologiska och farmakologiska aktiviteter av flavonoider, inklusive antioxidativa, blodtryckssänkande2, och antiinflammatoriska samt anticancer och antidiabetiska egenskaper, har visats3.
Agrobacterium rhizogenes är en jordbakterie som bidrar till utvecklingen av hårig rotsjukdom i flera högre växter, särskilt dicotyledons, genom att infektera sårplatser4,5. Denna process initieras av överföringen av T-DNA i rotinducerande (Ri) plasmid5,6 och åtföljs ofta av integration och uttryck av en exogen gen från Ri plasmid och de efterföljande stegen för att generera hårig rot fenotyp7. A. rhizogenes-medieradetransgena hårrötter, som ett kraftfullt verktyg inom växtbioteknik, har använts mest på grund av deras stabila och höga produktivitet och enkel ervisande på kort tid. Dessutom är håriga rötter framkallas av A. rhizogenes effektivt kännetecknas av deras plagiotropa rotutveckling och mycket förgrening tillväxt i ett hormonfritt medium8. De kan användas inom flera forskningsområden, inklusive artificiell utsädeproduktion, rothärdforskning och för att studera interaktioner med andra organismer som mykorrhizalsvampar, nematoder och rotpatogener7,9. Dessutom har håriga rotomvandlingskulturer använts i stor utsträckning som ett experimentellt system för att undersöka de biokemiska vägarna och kemisk signalering och för att producera växtsekundära metaboliter som används som läkemedel, kosmetika och livsmedelstillsatser8,10. De värdefulla sekundära metaboliterna, inklusive indole alkaloider, akoniter, tropane alkaloider, terpenoider och flavonoider, syntetiserade i vildtyp håriga rötter har undersökts i flera decennier i många arter, såsom ginsenoside i Panax ginseng11, coumarine i Ammi majus12, och fenolic föreningar i TB2,13.
Håriga rötter har producerats med A. rhizogenes i 79 växtarter från 27 familjer14. Till exempel, A. rhizogenes-medieradhårig rot omvandling har rapporterats i sojaböna15,16, Salvia17, Plumbago indica18, Lotus japonicus19, och cikoria (Cichorium intybus L.) 20.TB hårig rotomvandling har också undersökts2. Få detaljerade protokoll finns tillgängliga om utvecklingen av håriga rötter medierad av A. rhizogenes antingen bär en binär vektor eller inte. Till exempel införde Sandra et al.21 en metod för att producera transgena potatis håriga rötter i vilda skott. De fullt utvecklade håriga rötterna kan visualiseras 5-6 veckor efter injektionen av A. rhizogenes som transporterar gus reportergenen i stammen internoder av potatisväxter. En annan studie hade också rapporterat en transgena hårig rotsystem framkallas av A. rhizogenes hysa gusA reporter genen i jute (Corchorus capsularis L.) 22.Dessutom erhöll Supaart et al.23 transgena tobakshåriga rötter med hjälp av A. rhizogenes omvandlas med uttrycksvektorn pBI121 som transporterar genen av Δ 1-tetrahydrocannabinolic acid (THCA) syntas för att producera THCA.1
En steg-för-steg-process för en effektiv generation av hårig rotomvandling, särskilt i tuberkulos, har dock varit relativt mindre påvisad. I denna studie har vi beskrivit ett detaljerat protokoll med Hjälp av A. rhizogenes som bär reportergenen (GFP),en selektiv markör (Kan), och en gen av intresse (b4, en identifierad från vår grupp men opublicerad gen från grundläggande helix-loop-helix(bHLH)familj) för att generera hårig rotgenetisk omvandling i tb. Experimentet varade i 5-6 veckor, från inokulering av frön till generering av håriga rötter, med explant beredning, infektion, kokulering, subculturing, och efterföljande förökning. Dessutom användes A. rhizogenes som innehåller en binär plasmid som transporterar tb-transgenen av myeloblastostranskriptionsfaktor 116 (FtMYB116) för att avgöra om FtMYB116 kan främja ackumulering av flavonoider, särskilt rutin, i tbc på gen- och metabolisk nivå genom TB hårig rotomvandling. FtMYB116, som är en ljusinducerad transkriptionsfaktor, reglerar syntesen av rutin under olika ljusförhållanden5. Chalcone syntas (CHS),flavanone-3-hydroxylase (F3H), flavonoid-3'-hydroxylase (F3'H), och flavonol syntas (FLS)24 är viktiga enzymer som är involverade i den metaboliska vägen för rutin biosyntes. Därför visar denna studie överuttryck av FtMYB116 i TB håriga rötter och uttryck för viktiga enzymgener samt innehållet i rutin och andra flavonoider såsom quercetin.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>2*Taq PCR MasterMix</td>
			<td>Aidlab, China</td>
			<td>PC0901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agar powder</td>
			<td>Solarbio Life Science, Beijing, China</td>
			<td>A8190</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Applied Biosystems 2720 thermo cycler</td>
			<td>ThermoFisher Scientific, US</td>
			<td>A37834</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AS</td>
			<td>Solarbio Life Science, Beijing, China</td>
			<td>A8110</td>
			<td>Diluted in DMSO, 100 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>binary vectors</td>
			<td>ThermoFisher Scientific (invitrogen), US</td>
			<td>/</td>
			<td>pK7WG2D/pK7GWIWG2D (II)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefotaxime,sodium</td>
			<td>Solarbio Life Science, Beijing, China</td>
			<td>C8240</td>
			<td>Diluted in Water, 200 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CF15RXII high-speed micro</td>
			<td>Hitachi, Japan</td>
			<td>No. 90560201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diposable Petri-dish</td>
			<td>Guanghua medical instrument factory, Yangzhou, China</td>
			<td>/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DYY-6C electrophoresis apparatus</td>
			<td>Bjliuyi, Beijing China</td>
			<td>ECS002301</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EASYspin Plus Plant RNA Kit</td>
			<td>Aidlab, China</td>
			<td>RN38</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ELGA purelab untra bioscience</td>
			<td>ELGA LabWater, UK</td>
			<td>82665JK1819</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epoch Microplate Spectrophotometer</td>
			<td>biotek, US</td>
			<td>/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gateway BP/LR reaction enzyme</td>
			<td>ThermoFisher Scientific (invitrogen), US</td>
			<td>11789100/11791110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HYG-C multiple-function shaker</td>
			<td>Suzhou Peiying Experimental Equipment Co., Ltd. China</td>
			<td>/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kan</td>
			<td>Solarbio Life Science, Beijing, China</td>
			<td>K8020</td>
			<td>Diluted in Water, 100 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MLS-3750 Autoclave sterilizer</td>
			<td>Sanyo, Japan</td>
			<td>/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MS salts with vitamins</td>
			<td>Solarbio Life Science, Beijing, China</td>
			<td>M8521</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Solarbio Life Science, Beijing, China</td>
			<td>S8210</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Other chemicals unstated</td>
			<td>Beijing Chemical Works, China</td>
			<td></td>
			<td>ethanol, mercury bichloride, etc.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PHS-3C pH meter</td>
			<td>Shanghai INESA Scientific Instrument Co., Ltd, China</td>
			<td>a008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plant Genomic DNA Kit</td>
			<td>TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO., LTD</td>
			<td>DP305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rifampin</td>
			<td>Solarbio Life Science, Beijing, China</td>
			<td>R8010</td>
			<td>Diluted in DMSO, 50 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectinomycin</td>
			<td>Solarbio Life Science, Beijing, China</td>
			<td>S8040</td>
			<td>Diluted in Water, 100 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Solarbio Life Science, Beijing, China</td>
			<td>S8270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trans2K DNA Marker</td>
			<td>TransGen Biotech, Beijing, China</td>
			<td>BM101-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tryptone</td>
			<td>Solarbio Life Science, Beijing, China</td>
			<td>LP0042</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Whatman diameter 9 cm Filter paper</td>
			<td>Hangzhou wohua Filter Paper Co., Ltd</td>
			<td>/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yeast Extract powder</td>
			<td>Solarbio Life Science, Beijing, China</td>
			<td>LP0021</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

inducing hairy roots by agrobacterium rhizogenes-mediated transformation in tartary buckwheat (fagopyrum tataricum)

Tartary bovete (TB) [Fagopyrum tataricum (L.) Gaertn] har olika biologiska och farmakologiska aktiviteter eftersom den innehåller rikliga sekundära metaboliter såsom flavonoider, särskilt rutin. Agrobacterium rhizogenes har gradvis använts över hela världen för att inducera håriga rötter i medicinalväxter för att undersöka genfunktioner och öka avkastningen av sekundära metaboliter. I denna studie har vi beskrivit en detaljerad metod för att generera A. rhizogenes-medierad håriga rötter i TB. Cotyledons och hypocotyledonary axel på 7-10 dagar valdes som explants och infekterade med A. rhizogenes bär en binär vektor, som inducerade oavsiktliga håriga rötter som dök upp efter 1 vecka. Den genererade håriga rotomvandlingen identifierades baserat på morfologi, resistensval (kanamycin) och reportergenuttryck (grönt fluorescerande protein). Därefter var de förvandlade håriga rötterna självförökade efter behov. Under tiden förvandlades en myeloblastos (MYB) transkriptionsfaktor, FtMYB116, till TB-genomet med hjälp av A. rhizogenes-medieradehåriga rötter för att verifiera ftMYB116s roll i syntetiserande flavonoider. Resultaten visade att uttrycket av flavonoid-relaterade gener och avkastningen av flavonoidföreningar (rutin och quercetin) var betydligt (p < 0,01) främjas av FtMYB116, vilket tyder på att A. rhizogenes-medieradhåriga rötter kan användas som ett effektivt alternativt verktyg för att undersöka genfunktioner och produktion av sekundära metaboliter. Det detaljerade steg-för-steg-protokollet som beskrivs i denna studie för att generera håriga rötter kan antas för all genetisk omvandling eller andra medicinalväxter efter justering.

Agrobacterium rhizogenes-medieradTB hårig rotomvandling Denna studie beskriver steg-för-steg protokoll som inrättades för att få genetiskt transformerade håriga rötter med Hjälp av A. rhizogenes. Det tog ungefär 5-6 veckor från inokulering av tbc frön till skörden av identifierade håriga rötter, och några viktiga steg avbildas i figur 1 (A-H). Kortfattat vaccinerade smorde frön vaccinerades (figur 1</...

Watch this Scientific Journal Video about Inducing Hairy Roots by Agrobacterium rhizogenes-Mediated Transformation in Tartary Buckwheat Fagopyrum tataricum at JoVE.com

Inducing Hairy Roots by Agrobacterium rhizogenes-Mediated Transformation in Tartary Buckwheat Fagopyrum tataricum

Vi beskriver en metod för att inducera håriga rötter av Agrobacterium rhizogenes-medieradomvandling i Tartary bovete (Fagopyrum tataricum). Detta kan användas för att undersöka genfunktioner och produktion av sekundära metaboliter i Tartary bovete, antas för någon genetisk omvandling, eller användas för andra medicinalväxter efter förbättring.

Inducera Hairy Roots av Agrobacterium rhizogenes-medierad transformation i tartary bovete (Fagopyrum tataricum)

Tartary buckwheat (TB) [Fagopyrum tataricum (L.) Gaertn] possesses various biological and pharmacological activities because it contains abundant ...

Med hjälp av detta protokoll, kommer vi att visa steg för steg process för att inducera håriga rötter i tartary bovete för första gången. Denna teknik är en enkel och billig för att börja genomik och mikrobiomik för tartary bovete och andra växter. Även om denna detaljerade metod är inställd för tartary bovete, kan den tillämpas på andra dicot växter med vissa ändringar.Även om den här metoden är lätt att utföra, har den många detaljerade steg. Visuell demonstration kan hjälpa forskare att uppnå en effektivare hårig rot induktion. Demonstrerar proceduren blir Guangtao Qian, en Mastersstudent från mitt labb.Börja med att välja fyllig och oskadad tartary bovete frön och blötläggning fröna i 28 grader Celsius vatten i cirka 20 minuter. När frölacken lätt kan tas bort, placera 100 till 200 skalade frön i en steriliserad 100 milliliter konisk kolv som innehåller 75%etanol i 30 sekunder. Vid slutet av steriliseringen, byt ut etanolen med 5%natriumhypoklorit.Efter 15 minuter, dekantera natriumhypoklorit och tvätta fröna med sterilt avjoniserat vatten fem gånger. Sedan blot fröna torka med en bit sterilt bibulous papper. För att få tartary bovete plantor, tillsätt 10 frön per flaska till enskilda 300 milliliter växt vävnadskultur flaskor som innehåller 50 milliliter MSSA medium.Sedan gror fröna i ett kulturrum vid 25, plus eller minus 1, grader Celsius under lätta förhållanden. Efter 7 till 10 dagar, välj robusta plantor med två bitar av ovikta cotyledons och skär plantorna från rötterna. Placera plantorna i en steril petriskål och skär hypokotylerna i 0,8 till 1 centimeter segment.Sheer cotyledonsna in i ungefärligt 0.5 cm lappar och pre-odlar de resulterande explantsna under ljust villkorar för 24 timmar. Nästa dag, överför explants till en steriliserad 100 milliliter konisk kolv. För att aktivera A.rhizogenes, tina kulturen på is innan jämnt plätering bakterierna på YEB fast medium med antibiotika för en 12 till 16 timmars inkubation vid 28 grader Celsius.Nästa morgon, välj en monoklonal koloni för kultur i en ny petriskål som just visat. Efter ytterligare 12 till 16 timmars inkubation, inokulera de resulterande monoklonala kolonierna i en steriliserad 100 milliliter konisk kolv som innehåller 20 milliliter YEB fast medium med antibiotika vid 28 grader Celsius och 200 varv per minut i 16 till 18 timmar tills den optiska densiteten vid 600 når 2,0. Överför sedan 2-4%av bakteriecellkulturen till en ny 100 milliliter konisk kolv som innehåller 20 milliliter färskt YEB fast medium med antibiotika vid 28 grader Celsius och 200 varv per minut i 4 till 5 timmar tills den optiska densiteten vid 600 nanometer når cirka 0,5.För att inducera hårig rot omvandling, överföra A.rhizogenes kultur till en steril 50 milliliter koniska röret och samla bakterierna genom centrifugation. Resuspend pelleten i MSSAS medium till en optisk densitet av ungefär 0,2 och ingjuta suspensionen i kolven av explants. Efter 10 minuter, ta bort explants från kolven och blot dem med en bit sterilt bibulous papper.Placera sedan en steril 9 centimeter diameter bit av filterpapper på en maträtt av MSSAAS medium och överlagra explants på filterpapper för en tre dagars inkubation på 25 grader Celsius i mörkret. Vid inkubationens överför man cirka 20 infekterade explants till MSSACK-medium och ruvar vertikalt plantorna under lätta förhållanden vid 25, plus eller minus 1, grader Celsius. Efter 10 till 14 dagars kultur väljer du de håriga rötterna som demonstrerar ett vitt utseende och snabb tillväxt och skär rötterna i två till tre centimeter bitar.Tydligt numrera rötterna på en ren bänk. Subkultur rotbitarna i en steriliserad 100 milliliter konisk kolv som innehåller MSSK-medium vid 25 grader Celsius och 80 varv per minut i mörker tills de överdeplade till botten av kolven. För att identifiera de håriga rötterna, ta bort alla tawny och förorenade håriga rötter och välj de med ett vitt utseende.Om en reporter gen användes, kontrollera rötterna för fluorescens under en blå eller ljus dubbla ultravioletta transilluminator och välj håriga rötter som uppvisar en stark fluorescerande signal. Torka sedan rötterna med absorberande papper och linda dem i markerad aluminiumfolie för omedelbar analys. För långtidslagring, lyophilize rötterna i flytande kväve och placera rötterna på minus 80 grader Celsius tills deras undersökning.Efter genetisk omvandling och kultur, som visats, kommer de håriga rötterna uppvisar en fluffig vit färg och ett plagiotropiskt sätt på de explants sårplatser och bildar en mycket förgrenad och interlocked matris. En reporter gen kan användas för att underlätta differentiering av de transgena håriga rötter under en blå eller ljus dubbla ultraviolett transillumination, eller identifiering av ett mål gen av intresse. Här visas det relativa uttrycket av en ljusinducerad transkriptionsfaktor i de transgena linjerna av tartary bovete håriga rötter.Noterbart är att biosyntesen av rutin och quercetin också främjas på metabolisk nivå som svar på den inducerade transkriptionsfaktorn överuttryck. Vidare är den relativa genen uttryck för flavenoid syntes utbildningsavsnitt gener i alla tre transgena linjer, anmärkningsvärt högre än de som mäts i kontrollgruppen, vilket tyder på en framgångsrik hårig rot omvandling i tartary bovete explants. Det är infektion av fröna, urval av explants, och koncentrationen av bakterierna direkt påverka framgången för den håriga roten induktion.Vi kan bedöma genuttryck, DNA-protein, eller protein protein reaktioner eller massproduktion av sekundära metaboliter att studera transkriptionell reglering sekundära metaboliter. De konstruerade bakterierna är farliga för människor och hans omgivning. Var noga med att hantera, driva och kassera bakterierna på rätt sätt.

Research

JoVE Journal

Genetics

Inducing Hairy Roots by Agrobacterium rhizogenes-Mediated Transformation in Tartary Buckwheat (Fagopyrum tataricum)

A Robotic Platform for High-throughput Protoplast Isolation and Transformation

En Robotic plattform för hög kapacitet Protoplast Isolering och Transformation

Over the last decade there has been a resurgence in the use of plant protoplasts that range from model species to crop species, for analysis of signal ...

In Situ Labeling of Mitochondrial DNA Replication in Drosophila Adult Ovaries by EdU Staining

In Situ Labeling of Mitochondrial DNA Replication in Drosophila Adult Ovaries by EdU Staining

In Situ Märkning av mitokondrie-DNA-replikering i Drosophila vuxen Äggstockar från edu färgning

The mitochondrial genome is inherited exclusively through the maternal line. Understanding of how the mitochondrion and its genome are proliferated and ...

Optogenetic Random Mutagenesis Using Histone-miniSOG in C. elegans

Optogenetic Random Mutagenesis Using Histone-miniSOG in C. elegans

Optogenetic Slumpmässig mutagenes med användning Histon-miniSOG i<em&gt; C. elegans</em

Forward genetic screening in model organisms is the workhorse to discover functionally important genes and pathways in many biological processes. In most ...

Rapid Deletion Production in Fungi via Agrobacterium Mediated Transformation of OSCAR Deletion Constructs

Rapid Deletion Production in Fungi via Agrobacterium Mediated Transformation of OSCAR Deletion Constructs

Rapid Deletion Production in Fungi via<em&gt; Agrobacterium</em&gt; Medierad transformation av OSCAR Deletion Constructs

Precise deletion of gene(s) of interest, while leaving the rest of the genome unchanged, provides the ideal product to determine that particular ...

Mapping Genome-wide Accessible Chromatin in Primary Human T Lymphocytes by ATAC-Seq

Mappning av Genome-wide tillgängliga kromatin i primära humana T-lymfocyter av ATAC-Seq

Assay for Transposase-Accessible Chromatin with high-throughput sequencing (ATAC-seq) is a method used for the identification of open (accessible) regions ...

Visualization of Microbiota in Tick Guts by Whole-mount In Situ Hybridization

Visualization of Microbiota in Tick Guts by Whole-mount In Situ Hybridization

Visualisering av bakterieflora i Tick tarmar av hela-mount In Situ hybridisering

Infectious diseases transmitted by arthropod vectors continue to pose a significant threat to human health worldwide. The pathogens causing these ...

Plant Growth and Agrobacterium-mediated Floral-dip Transformation of the Extremophyte Schrenkiella parvula

Plant Growth and Agrobacterium-mediated Floral-dip Transformation of the Extremophyte Schrenkiella parvula

Växternas tillväxt och Agrobacterium-medierad Floral-dip omvandlingen av den Extremophyte Schrenkiella parvula

Schrenkiella parvula is an extremophyte adapted to various abiotic stresses, including multiple ion toxicity stresses. Despite high-quality genomic ...

Characterizing Histone Post-translational Modification Alterations in Yeast Neurodegenerative Proteinopathy Models

Karaktärisera Histon posttranslationella modifieringen förändringar i jäst neurodegenerativa Proteinopathy modeller

Neurodegenerative diseases, such as amyotrophic lateral sclerosis (ALS) and Parkinson&#39;s disease (PD), cause the loss of hundreds of thousands of lives ...

Transforming, Genome Editing and Phenotyping the Nitrogen-fixing Tropical Cannabaceae Tree Parasponia andersonii

Transforming, Genome Editing and Phenotyping the Nitrogen-fixing Tropical Cannabaceae Tree Parasponia andersonii

Transformering, genom-redigering och fenotypning av kvävefixerande tropiska Cannabaceae träd Parasponia andersonii

Parasponia andersonii is a fast-growing tropical tree that belongs to the Cannabis family (Cannabaceae). Together with 4 additional species, it forms the ...

Investigation of the Transcriptional Role of a RUNX1 Intronic Silencer by CRISPR/Cas9 Ribonucleoprotein in Acute Myeloid Leukemia Cells

Investigation of the Transcriptional Role of a RUNX1 Intronic Silencer by CRISPR/Cas9 Ribonucleoprotein in Acute Myeloid Leukemia Cells

Utredning av den transkriptionella roll som en RUNX1 Intronic ljuddämpare av CRISPR/Cas9 Ribonucleoprotein i akut myeloisk leukemi celler

The bulk of the human genome (~98%) is comprised of non-coding sequences. Cis-regulatory elements (CREs) are non-coding DNA sequences that contain binding ...