Name: delivery of modified mrna in a myocardial infarction mouse model
Uploaded: 2020-06-11T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Delivery of Modified mRNA in a Myocardial Infarction Mouse Model at JoVE.com

लेखक इस पांडुलिपि के साथ उसकी मदद के लिए ऐन अनु कुरियन को स्वीकार करते हैं । इस काम को एक कार्डियोलॉजी स्टार्ट-अप अनुदान द्वारा वित्त पोषित किया गया था जो ज़ंगी प्रयोगशाला को प्रदान किया गया था और एनआईएच ग्रांट आर01 एचएल142768-01 द्वारा भी

यहां उल्लिखित सभी पशु प्रक्रियाओं को माउंट सिनाई इंस्टीट्यूशनल केयर एंड यूज कमेटी में इकाहान स्कूल ऑफ मेडिसिन द्वारा मंजूरी दी गई है ।
1. मोडरना का संश्लेषण
नोट: मोडरना संश्लेषण का...

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L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthetic+chemically+modified+mRNA-based+delivery+of+cytoprotective+factor+promotes+early+cardiomyocyte+survival+post-acute+myocardial+infarction.">Synthetic chemically modified mRNA-based delivery of cytoprotective factor promotes early cardiomyocyte survival post-acute myocardial infarction.</a> Molecular Pharmaceutics. 12 (3), 991-996 (2015).</li><li>Magadum, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ablation+of+a+Single+N-Glycosylation+Site+in+Human+FSTL+1+Induces+Cardiomyocyte+Proliferation+and+Cardiac+Regeneration.">Ablation of a Single N-Glycosylation Site in Human FSTL 1 Induces Cardiomyocyte Proliferation and Cardiac Regeneration.</a> Molecular Therapy - Nucleic Acids. 13, 133-143 (2018).</li><li>Kondrat, J., Sultana, N., Zangi, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+of+Modified+mRNA+for+Myocardial+Delivery.">Synthesis of Modified mRNA for Myocardial Delivery.</a> Methods in Molecular Biology. 1521, 127-138 (2017).</li><li>Gan, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intradermal+delivery+of+modified+mRNA+encoding+VEGF-A+in+patients+with+type+2+diabetes.">Intradermal delivery of modified mRNA encoding VEGF-A in patients with type 2 diabetes.</a> Nature Communication. 10 (1), 871 (2019).</li></ol>

जीन थेरेपी ने हृदय रोग के उपचार को काफी आगे बढ़ाने की जबरदस्त क्षमता दिखाई है । हालांकि, एचएफ के उपचार के लिए प्रारंभिक नैदानिक परीक्षणों में नियोजित पारंपरिक उपकरणों ने सीमित सफलता दिखाई है और गंभीर ?...

जीन थेरेपी एक शक्तिशाली उपकरण है जिसमें मानव रोगों के उपचार, इलाज या रोकथाम के लिए न्यूक्लिक एसिड की डिलीवरी शामिल है। हृदय रोग के लिए नैदानिक और चिकित्सीय दृष्टिकोणों में प्रगति के बावजूद, मायोकार्डियल इंफार्क्शन (एमआई) और हार्ट फेलियर (एचएफ) में जीन के वितरण में सीमित सफलता मिली है। जीन थेरेपी की प्रक्रिया के रूप में के रूप में सीधा लगता है, यह एक स्पष्ट रूप से जटिल कई कारकों है कि एक विशेष प्रसव वाहन को रोजगार से पहले अनुकूलित करने की जरूरत पर विचार दृष्टिकोण है । मानव शरीर के अंदर सही डिलीवरी वेक्टर गैर-इम्यूनोजेनिक, कुशल और स्थिर होना चाहिए। इस क्षेत्र में प्रयासों ने दो प्रकार के वितरण प्रणालियों को उत्पन्न किया है: वायरल या गैर-वायरल। एडेनोवायरस, रेट्रोवायरस, लेंटीवायरस, या एडेनो से जुड़े वायरस द्वारा जीन हस्तांतरण सहित व्यापक रूप से उपयोग की जाने वाली वायरल प्रणालियों ने असाधारण ट्रांसडक्शन क्षमता दिखाई है । हालांकि, क्लीनिक में उनका उपयोग मजबूत प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया प्रेरित1,ट्यूमरजीनेसिस2का जोखिम, या एंटीबॉडी3को बेअसर करने की उपस्थिति के कारण सीमित है, जिनमें से सभी मानव जीन थेरेपी में वायरल वैक्टर के व्यापक और प्रभावी अनुप्रयोग के लिए एक बड़ी बाधा बने हुए हैं। दूसरी ओर, उनके प्रभावशाली अभिव्यक्ति पैटर्न के बावजूद, नग्न प्लाज्मिड डीएनए का वितरण कम ट्रांसफैक्शन दक्षता प्रदर्शित करता है, जबकि एमआरएनए हस्तांतरण आरएनएसई4द्वारा उच्च इम्यूनोजेनिसिटी और क्षरण के प्रति संवेदनशीलता प्रस्तुत करता है।
एमआरएनए के क्षेत्र में व्यापक शोध के साथ, मोडरना पारंपरिक वैक्टर 5 परइसकेकई फायदों के कारण हृदय और विभिन्न अन्य अंगों में जीन के वितरण के लिए एक आकर्षक उपकरण बन गया है। स्वाभाविक रूप से होने वाली छद्म मूत्र डाइन के साथ यूरिडीन के पूर्ण प्रतिस्थापन के परिणामस्वरूप सहज प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया और जीनोमिक एकीकरण6का जोखिम कम से कम होता है। हाल ही में स्थापित प्रोटोकॉल एंटी-रिवर्स कैप एनालॉग (एआरएए) की एक अनुकूलित मात्रा का उपयोग करते हैं जो सिंथेटिक एमआरएनए 7 कीस्थिरताऔर पारणीयता को बढ़ाकर प्रोटीन अनुवाद को और बढ़ाता है।
पिछली रिपोर्टों में एमआई के बाद कृंतक मायोकार्डियम में मोडरना द्वारा दिए गए विभिन्न रिपोर्टर या कार्यात्मक जीन की अभिव्यक्ति दिखाई गई है । मोडरना अनुप्रयोगों के साथ, कार्डियोमायोसाइट्स और नॉनकार्डियोमायोसाइट्स दोनों सहित मायोकार्डियम के महत्वपूर्ण क्षेत्रों को सफलतापूर्वक हृदय की चोट के बाद8 संक्रमित किया गया है ताकि एंजियोजेनेसिस9,10,कार्डियक सेल सर्वाइवल11और कार्डियोमायोसाइट प्रसार12को प्रेरित किया जा सके।, उत्परिवर्तित मानव फोलिस्टाटिन की तरह 1 के लिए इनकोडेड मोडरना का एक प्रशासन माउस वयस्क सीएम के प्रसार को प्रेरित करता है और कार्डियक फंक्शन को काफी बढ़ाता है, निशान का आकार कम करता है, और एमआई12के बाद 4 सप्ताह के कैपरी घनत्व को बढ़ाता है। हाल ही में एक और अध्ययन में एक सूअर मॉडल10में VEGFA modRNA के आवेदन के साथ एमआई के बाद हृदय समारोह में सुधार की सूचना दी ।
इस प्रकार, हृदय क्षेत्र में मोडरना की बढ़ती लोकप्रियता के साथ, एमआई के बाद दिल में मोडरना के वितरण के लिए एक प्रोटोकॉल विकसित और अनुकूलित करना आवश्यक है। इसके बाद एक प्रोटोकॉल है जो एक जैव संगत साइट्रेट-खारा निर्माण में शुद्ध और अनुकूलित मोडर्ना की तैयारी और वितरण का वर्णन करता है जो किसी भी प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को उत्तेजित किए बिना मजबूत, स्थिर प्रोटीन अभिव्यक्ति प्रदान करता है। इस प्रोटोकॉल और वीडियो में दिखाई गई विधि बाएं पूर्वकाल उतरते धमनी (बालक) के स्थायी बंधन द्वारा माउस एमआई की मानक शल्य प्रक्रिया को दर्शाती है, जिसके बाद मोडरना के तीन साइट इंट्राकार्डिएक इंजेक्शन होते हैं। इस पेपर का उद्देश्य कार्डियक जीन थेरेपी के लिए मोडरना एप्लिकेशन को व्यापक रूप से सुलभ बनाने के लिए मुरीन मायोकार्डियम को मोडरना डिलीवरी की एक अत्यधिक सटीक और प्रजनन योग्य विधि को स्पष्ट रूप से परिभाषित करना है।

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Adenosine triphosphate</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>AMB13345</td>
			<td>Included in Megascript kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antarctic Phosphatase</td>
			<td>New England Biolabs</td>
			<td>M0289L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-reverse cap analog, 30-O-Mem7G(50) ppp(50)G</td>
			<td>TriLink Biotechnologies</td>
			<td>N-7003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bioluminescense imaging system</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>124262</td>
			<td>IVIS100 charge-coupled device imaging system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunt retractors</td>
			<td>FST</td>
			<td>18200-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cardiac tropnin I</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>47003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cytidine triphosphate</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>AMB13345</td>
			<td>Included in Megascript kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dual Anesthesia System</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>75-2001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps- Adson</td>
			<td>FST</td>
			<td>91106-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps- Dumont #7</td>
			<td>FST</td>
			<td>91197-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Guanosine triphosphate</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>AMB13345</td>
			<td>Included in Megascript kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>In vitro transcription kit</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>AMB13345</td>
			<td>5X MEGAscript T7 Kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intubation cannula</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Megaclear kit</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse ventilator</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>73-4279</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N1-methylpseudouridine-5-triphosphate</td>
			<td>TriLink Biotechnologies</td>
			<td>N-1081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NanoDrop Spectrometer</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Olsen hegar needle holder with suture scissors</td>
			<td>FST</td>
			<td>12002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plasmid templates</td>
			<td>GeneArt, Thermo Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sharp-Pointed Dissecting Scissors</td>
			<td>FST</td>
			<td>14200-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>Y433H</td>
			<td>5.00</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>Y432H</td>
			<td>6.00</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>7733G</td>
			<td>7.00</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T7 DNase enzyme</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>AMB13345</td>
			<td>Included in Megascript kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tape station</td>
			<td>Aligent</td>
			<td>4200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transcription clean up kit</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>AM1908</td>
			<td>Megaclear</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra-4 centrifugal filters 10k</td>
			<td>Amicon</td>
			<td>UFC801096</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

delivery of modified mrna in a myocardial infarction mouse model

मायोकार्डियल इंफार्क्शन (एमआई) पश्चिमी दुनिया में रुग्णता और मृत्यु दर का एक प्रमुख कारण है। पिछले एक दशक में, जीन थेरेपी हृदय रोग के लिए एक आशाजनक उपचार विकल्प बन गया है, अपनी दक्षता और असाधारण चिकित्सीय प्रभाव के कारण । क्षतिग्रस्त ऊतक पोस्ट-एमआई की मरम्मत के प्रयास में, विभिन्न अध्ययनों ने डीएनए आधारित या वायरल जीन थेरेपी को नियोजित किया है, लेकिन वितरित जीन, एडेमा, अतालता और हृदय अतिशस्त्री की खराब और अनियंत्रित अभिव्यक्ति के कारण काफी बाधाओं का सामना करना पड़ा है । सिंथेटिक संशोधित एमआरएनए (मोडरना) एक उपन्यास जीन थेरेपी दृष्टिकोण प्रस्तुत करता है जो जीनोमिक एकीकरण के किसी भी जोखिम के बिना दिल के ऊतकों को उच्च, क्षणिक, सुरक्षित, गैर-िममुमोजेनिक और नियंत्रित एमआरएनए डिलीवरी प्रदान करता है। दिल में अपनी घंटी के आकार के फार्माकोकिनेटिक्स के साथ संयुक्त इन उल्लेखनीय विशेषताओं के कारण, मोडरना हृदय रोग के उपचार के लिए एक आकर्षक दृष्टिकोण बन गया है। हालांकि, वीवो में इसकी प्रभावशीलता बढ़ाने के लिए, एक सुसंगत और विश्वसनीय वितरण विधि का पालन करने की आवश्यकता है। इसलिए, वीवो अनुप्रयोगों में मोडरना वितरण दक्षता और प्रोडर्ना उपयोग में उपज स्थिरता को अधिकतम करने के लिए, माउस एमआई मॉडल में मोडरना इंट्राकार्डिएक इंजेक्शन की तैयारी और वितरण की एक अनुकूलित विधि प्रस्तुत की जाती है। यह प्रोटोकॉल बुनियादी और अनुवादात्मक अनुसंधान के लिए मोडरना डिलीवरी को अधिक सुलभ बनाएगा।

आठ से दस सप्ताह पुराने चूहों को आइसोफ्लुरेन और इंस्टुबेट के साथ एनेस्थेटाइज्ड किया गया था । जानवर संज्ञाहरण के तहत होने के बाद, बाएं वक्ष क्षेत्र को मुंडा और इथेनॉल के साथ निष्फल किया गया था, और बालक लि?...

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Delivery of Modified mRNA in a Myocardial Infarction Mouse Model

यह प्रोटोकॉल चूहों में मायोकार्डियल इंफेक्शन के बाद मोडरना का उपयोग करके रुचि के जीन को क्षणिक रूप से अपरेगुलेट करने का एक सरल और सुसंगत तरीका प्रस्तुत करता है।

एक मायोकार्डियल इनफार्क्शन माउस मॉडल में संशोधित एमआरएनए की डिलीवरी

Myocardial infarction (MI) is a leading cause of morbidity and mortality in the Western world. In the past decade, gene therapy has become a promising ...

संशोधित आरएनए हृदय और अन्य अंगों में जीन हस्तांतरण के लिए एक उपन्यास विधि है। यह प्रोटोकॉल दिल में वांछित जीन को क्षणिक रूप से वितरित करने, मायोकार्डियल इंफेक्शन के बाद सटीक दृष्टिकोण प्रदान करेगा। यह विधि मायोकार्डियल इंफार्क्शन तक ही सीमित नहीं है, लेकिन इसे इस्केमिया रिपरफ्यूजन और ट्रांसवर्स महाधमनी संकीर्तन मॉडल पर भी लागू किया जा सकता है।संशोधित आरएनए का उपयोग कई मानव नैदानिक परीक्षणों में किया जा रहा है। हालांकि, इस विधि का उपयोग करके हृदय में स्थानांतरित जीन के लिए कोई मानकीकृत प्रोटोकॉल नहीं है। दृश्य प्रदर्शन शोधकर्ताओं को सही ढंग से दिल में उपयुक्त साइटों पर संशोधित आरएनए सुई करने के लिए सक्षम हो जाएगा ।प्रोसेड्यूल का प्रदर्शन अजीत मगदम, एक पोस्टडॉक्टोरल फेलो, और एलिना चेपुरको हमारी प्रयोगशाला से एक पशु पर्यवेक्षक होगा। मोडरना में पहले से तैयार की एकाग्रता के आधार पर, 100 माइक्रोग्राम इंजेक्शन के लिए आवश्यक मोडरना की मात्रा की गणना करें। सुक्रोज और साइट्रेट समाधानों की बराबर मात्रा बनाता है।फिर 60 माइक्रोलीटर के लिए इंजेक्शन की मात्रा लाने के लिए मोडरना की गणना की मात्रा, और पर्याप्त खारा समाधान जोड़ें। जानवर को एनेस्थेटाइज करने के बाद, इसे वेंट्रल साइड अप रखें, इसके मुंह के साथ प्रयोगकर्ता की ओर सामना करना पड़ रहा है। फिर इंट्राचेल इंटुबेशन करके एक खुले वायुमार्ग को बनाए रखने के लिए, धीरे-धीरे जीभ को खींचें।इंडिबेशन पथ को सीधा करने के लिए गर्दन के कोण को समायोजित करें, और इंस्टुबेशन कैनुला में पुश करें। माउस के वक्ष आंदोलन का निरीक्षण करें ताकि यह सत्यापित किया जा सके कि दोनों फेफड़ों को ऑक्सीजन मिल रही है। श्वसन दर प्रति मिनट लगभग 120 साँस होनी चाहिए।बालक बंधन शुरू करने के लिए, माउस को ध्यान से अपनी दाईं ओर घुमाएं। त्वचा को उठाएं, और तीसरी और चौथी पसलियों के बीच एक बाएं तरफा थोराकोटॉमी करें। किसी भी तेज वस्तुओं के साथ फेफड़ों को छूने के बिना, छाती को ध्यान से खोलें।छाती गुहा को खुला रखने के लिए चीरा में रिट्रैक्टर्स रखें, जो दिल का स्पष्ट दृश्य प्रदान करते हैं। इसके बाद, फेफड़ों को चीरा के किनारे पर ले जाएं, और हृदय को कवर करने वाले पेरिकार्डियल थैली के हिस्से को हटा दें। ध्यान से बालक, एक गहरी बत्ती लाल पोत, फेफड़े की धमनी और बाईं auricle के बीच स्थित की पहचान ।एक रेशम सीवन के साथ समीपस्थ बालक Ligate । इंसुलिन सिरिंज का उपयोग करके, दिल को मोडरना समाधान के कुल 60 माइक्रोलीटर वितरित करें। तीन अलग-अलग साइटों पर 20 माइक्रोलीटर को इंट्रामस्क्युलर रूप से इंजेक्ट करें।लिगेशन के हर तरफ एक साइट और दिल के शीर्ष में एक। सही साइटों में संशोधित आरएनए इंजेक्ट करने का सबसे अच्छा तरीका, लाड के ऑक्सीकरण के बाद, माइक्रोस्कोप के नीचे ऊतक की मलिनता का निरीक्षण करना है। इसके अलावा जब इंजेक्शन, ऊतक में बहुत गहरी जाने के लिए परिसंचरण में दिल कक्षों तक पहुंचने के लिए नहीं है ।परतों में वक्ष चीरा बंद करें। पहला उपयोग पसलियों को अनुकूलित करने के लिए 6-0 रेशम चल रहे टांके था। इसके बाद त्वचा को बंद करने के लिए 5-0 सिल्क रनिंग टांके का इस्तेमाल करें।वसूली चरण के लिए, कैनुला को हटा दें, और सहज श्वास की अनुमति दें। जानवर को एक हीटिंग पैड पर तब तक रखें जब तक कि वह चेतना न आ जाए। जानवर को तब तक उपेक्षित न छोड़ें जब तक कि वह पूरी तरह से जाग न जाए।पोस्टर्जिकल दर्द का प्रबंधन करने के लिए, तीन दिनों के लिए 12 घंटे के अंतराल पर बुप्रेनोरफिन को संक्षेप में इंजेक्ट करें। शरीर के वजन के प्रति किलोग्राम 0.1 मिलीग्राम की खुराक पर। सीएफडब्ल्यू चूहों में लूसिफ़ेरेस मोडरना के बालक लिगेशन और इंजेक्शन के 24 घंटे बाद, बायोल्यूमिनेसेंस इमेजिंग सिस्टम का उपयोग करके लूसिफ़ेरेस प्रोटीन अभिव्यक्ति की जांच करके ट्रांसफैक्शन को मान्य किया गया था।लूसिफ़ेरेस सिग्नल को नियंत्रण चूहों की तुलना करने वाली छवियों में स्पष्ट रूप से पता लगाया जा सकता है, चूहों को लूसिफ़ेरेस मोडरना के साथ इंजेक्शन दिया जाता है। लूसिफ़ेरेस सिग्नल का मात्राकरण नियंत्रण चूहों की तुलना में इलाज चूहों में काफी अधिक प्रोटीन अभिव्यक्ति दिखाता है। क्रॉस मोडरना अभिव्यक्ति ट्रांसजेनिक ROSA26 mTmG चूहों में अपने अनुवाद और जैव वितरण की जांच करके मान्य किया गया था।सर्जरी और क्रे मोडरना इंजेक्शन के 24 घंटे बाद, कला को कार्डियोमायोसाइट मार्कर, कार्डियक ट्रोपोनिन I, और न्यूक्लिई मार्कर डीएपीआई के साथ इम्यूनोदाता के लिए ठीक और संसाधित किया गया था। हरे रंग के कार्डियोमायोसाइट्स की उपस्थिति के कारण सफल क्रे अभिव्यक्ति स्पष्ट थी। एक विलय छवि दो दृश्य इंजेक्शन साइटों के आसपास क्रे सक्रिय कोशिकाओं से पता चलता है ।नीला परमाणु दाग DAPI है। संशोधित आरएनए मंच विभिन्न अंगों में एक ही जीन या जीन संयोजन प्रदान कर सकता है। और इस प्रकार चिकित्सीय उद्देश्यों के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है, जैसे आनुवंशिक विकारों को ठीक करना, या शरीर में लाभकारी तंत्र को सक्रिय करना।संशोधित आरएनए के अद्वितीय फार्माकोकिनेटिक्स हमें इसके इंजेक्शन के तुरंत बाद जीन समारोह का मूल्यांकन करने में सक्षम बनाता है। यह शोधकर्ता को सिग्नलिंग रास्तों को लक्षित करने में सक्षम बनाता है, जो इन्फेक्शन के पहले कुछ घंटों में बदल जाते हैं।

Research

JoVE Journal

Genetics

Measuring mRNA Levels Over Time During the Yeast S. cerevisiae Hypoxic Response

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Efficient Production and Identification of CRISPR/Cas9-generated Gene Knockouts in the Model System Danio rerio

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मॉडल प्रणाली ढाणियो rerio में कुशल उत्पादन और CRISPR/Cas9 जनित जीन नॉकआउट की पहचान

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Biotin-based Pulldown Assay to Validate mRNA Targets of Cellular miRNAs

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वैकल्पिक पूर्व का मात्रात्मक विश्लेषण माउस मस्तिष्क वर्गों में mRNA ब्याह सीटू संकरण परख में आरएनए का उपयोग

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Using Ustilago maydis as a Trojan Horse for In Situ Delivery of Maize Proteins

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मकई प्रोटीन की सीटू प्रसव में के लिए एक ट्रोजन हॉर्स के रूप में Ustilago मेडिस का उपयोग

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A Non-random Mouse Model for Pharmacological Reactivation of Mecp2 on the Inactive X Chromosome

निष्क्रिय एक्स गुणसूत्र पर Mecp2 के औषधीय पुनः सक्रियण के लिए एक गैर यादृच्छिक माउस मॉडल

X chromosome inactivation (XCI) is the random silencing of one X chromosome in females to achieve gene dosage balance between the sexes. As a result, all ...

Navigating MARRVEL, a Web-Based Tool that Integrates Human Genomics and Model Organism Genetics Information

MARRVEL नेविगेट, एक वेब आधारित उपकरण है कि मानव जीनोमिक्स और मॉडल जीव आनुवंशिकी जानकारी एकीकृत करता है

Through whole-exome/genome sequencing, human geneticists identify rare variants that segregate with disease phenotypes. To assess if a specific variant is ...

The Use of Mouse Mammary Tumor Cells in an In Vitro Invasion Assay as a Measure of Oncogenic Cell Behavior

एक इन विट्रो आक्रमण परख में माउस मैमरी ट्यूमर कोशिकाओं का उपयोग Oncogenic सेल व्यवहार के एक उपाय के रूप में

The in vitro invasion assay uses a protein-rich matrix in a Boyden chamber to measure the ability of cultured cells to pass through the matrix and a ...