Name: synthesis of functionalized magnetic nanoparticles, their conjugation with the siderophore feroxamine and its evaluation for bacteria detection
Uploaded: 2020-06-16T14:30:00
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作者感激地感谢克劳斯·汉特克教授（德国蒂宾根大学）为这项工作中使用的叶尔西尼亚肠内侧菌株提供友好供应。这项工作得到了西班牙国家研究局（AEI）提供的AGL2015-63740-C2-1/2-R和RTI2018-093634-B-C21/C22（欧盟AEI/FEDER）的资助，由欧洲联盟的FEDER方案共同资助。圣地亚哥大学、科鲁尼亚大学的工作也得到了来自恩塔-德加利西亚的GRC2018/018、GRC2018/039和ED431E 2018/03（CICA-INIBIC战略小组）的资助。最后，我们要感谢努里亚卡尔沃为她所做的出色的合作，做了这个视频协议的语音关闭。

注：对于在惰性大气条件下进行的反应，所有玻璃器皿以前在烤箱中干燥65°C，用橡胶隔膜密封，用气处理三次清洗。
1. 与铁氧胺结合的磁性纳米粒子的合成
<ol><li>铁3O4磁性纳米粒子（MNPs）的合成<ol>
<li>在20 mL玻璃瓶中加入0.5克Fe（acac）3，然后与10 mL的苯基酒精混合。3</li>
		<li>将这种混合物声波2分钟，然后转移到加热块，并在180°C加热72小时。</li>
...

<ol>
	<li>Pan, Y., Du, X., Zhao, F., Xu, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnetic+nanoparticles+for+the+manipulation+of+proteins+and+cells.">Magnetic nanoparticles for the manipulation of proteins and cells.</a> Chemical Society Reviews. 41 (7), 2912-2942 (2012).</li><li>Zheng, T., Nolan, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Siderophore-based+detection+of+Fe(III)+and+microbial+pathogens.">Siderophore-based detection of Fe(III) and microbial pathogens.</a> Metallomics. 4, 866-880 (2012).</li><li>Hider, R. C., Kong, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemistry+and+biology+of+siderophores.">Chemistry and biology of siderophores.</a> Natural Product Reports. 27 (5), 637-657 (2010).</li><li>Sandy, M., Butler, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microbial+Iron+Acquisition:+Marine+and+Terrestrial+Siderophores.">Microbial Iron Acquisition: Marine and Terrestrial Siderophores.</a> Chemical Reviews. 109 (10), 4580-4595 (2010).</li><li>Pinna, N., Grancharov, S., Beato, P., Bonville, P., Antonietti, M., Niederberger, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnetite+Nanocrystals+:+Nonaqueous+Synthesis,+Characterization.">Magnetite Nanocrystals : Nonaqueous Synthesis, Characterization.</a> Chemistry of Materials. 17 (15), 3044-3049 (2005).</li><li>Li, Y. S., Church, J. S., Woodhead, A. L., Moussa, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+and+characterization+of+silica+coated+iron+oxide+magnetic+nano-particles.">Preparation and characterization of silica coated iron oxide magnetic nano-particles.</a> Spectrochimica Acta - Part A: Molecular and Biomolecular Spectroscopy. 76 (5), 484-489 (2010).</li><li>Chen, J. P., Yang, P. C., Ma, Y. H., Tu, S. J., Lu, Y. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+delivery+of+tissue+plasminogen+activator+by+binding+to+silica-coated+magnetic+nanoparticle.">Targeted delivery of tissue plasminogen activator by binding to silica-coated magnetic nanoparticle.</a> International Journal of Nanomedicine. 7, 5137-5149 (2012).</li><li>El-Boubbou, K., Gruden, C., Huang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnetic+glyco-nanoparticles:+a+unique+tool+for+rapid+pathogen+detection,+decontamination,+and+strain+differentiation.">Magnetic glyco-nanoparticles: a unique tool for rapid pathogen detection, decontamination, and strain differentiation.</a> Journal of the American Chemical Society. 129 (44), 13392-13393 (2007).</li><li>Mart&#237;nez-Matamoros, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+functionalized+magnetic+nanoparticles+conjugated+with+feroxamine+and+their+evaluation+for+pathogen+detection.">Preparation of functionalized magnetic nanoparticles conjugated with feroxamine and their evaluation for pathogen detection.</a> RSC Advances. 9 (24), 13533-13542 (2019).</li><li>Cozar, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Raman+and+surface-enhanced+Raman+study+of+desferrioxamine+B+and+its+Fe(III)+complex,+ferrioxamine+B.">Raman and surface-enhanced Raman study of desferrioxamine B and its Fe(III) complex, ferrioxamine B.</a> Journal of Molecular Structure. 788 (1-3), 1-6 (2006).</li><li>Shebanova, O. N., Lazor, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterisation+of+a-C:H+and+oxygen-containing+Si:C:H+films+by+Raman+spectroscopy+and+XPS.">Characterisation of a-C:H and oxygen-containing Si:C:H films by Raman spectroscopy and XPS.</a> Journal of Solid State Chemistry. 174 (4), 424-430 (2003).</li><li>Gonz&#225;lez, P., Serra, J., Liste, S., Chiussi, S., Le&#243;n, B., P&#233;rez-Amor, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Raman+spectroscopic+study+of+bioactive+silica+based+glasses.">Raman spectroscopic study of bioactive silica based glasses.</a> Journal of Non-Crystalline Solids. 320 (12), 92-99 (2003).</li><li>Veres, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterisation+of+a-C:H+and+oxygen-containing+Si:C:H+films+by+Raman+spectroscopy+and+XPS.">Characterisation of a-C:H and oxygen-containing Si:C:H films by Raman spectroscopy and XPS.</a> Diamond and Related Materials. 14 (3-7), 1051-1056 (2005).</li><li>You, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualization+and+investigation+of+Si-C+covalent+bonding+of+single+carbon+nanotube+grown+on+silicon+substrate.">Visualization and investigation of Si-C covalent bonding of single carbon nanotube grown on silicon substrate.</a> Applied Physics Letters. 93 (10), 103111-103113 (2008).</li><li>Graf, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=XPS+and+NEXAFS+studies+of+aliphatic+and+aromatic+amine+species+on+functionalized+surfaces.">XPS and NEXAFS studies of aliphatic and aromatic amine species on functionalized surfaces.</a> Surface Science. 603 (18), 2849-2860 (2009).</li><li>Michaeli, W., Blomfield, C. J., Short, R. D., Jones, F. R., Alexander, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+study+of+HMDSO/O2+plasma+deposits+using+a+high-sensitivity+and+-energy+resolution+XPS+instrument:+curve+fitting+of+the+Si+2p+core+level.">A study of HMDSO/O2 plasma deposits using a high-sensitivity and -energy resolution XPS instrument: curve fitting of the Si 2p core level.</a> Applied Surface Science. 137 (1-4), 179-183 (2002).</li><li>Liana, A. E., Marquis, C. P., Gunawan, C., Gooding, J. J., Amal, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T4+bacteriophage+conjugated+magnetic+particles+for+E.+coli+capturing:+Influence+of+bacteriophage+loading,+temperature+and+tryptone.">T4 bacteriophage conjugated magnetic particles for E. coli capturing: Influence of bacteriophage loading, temperature and tryptone.</a> Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. 151, 47-57 (2017).</li><li>Fang, W., Han, C., Zhang, H., Wei, W., Liu, R., Shen, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+amino-functionalized+magnetic+nanoparticles+for+enhancement+of+bacterial+capture+efficiency.">Preparation of amino-functionalized magnetic nanoparticles for enhancement of bacterial capture efficiency.</a> RSC Advances. 6, 67875-67882 (2016).</li><li>Zhan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+removal+of+pathogenic+bacteria+and+viruses+by+multifunctional+amine-modified+magnetic+nanoparticles.">Efficient removal of pathogenic bacteria and viruses by multifunctional amine-modified magnetic nanoparticles.</a> Journal of Hazardous Materials. 274, 115-123 (2014).</li></ol>

该协议描述了通过共价粘合合成磁性纳米粒子和侧磷铁氧胺的偶联。磁石的合成是使用Pinna等人5号报告的协议，然后是二氧化硅涂层，以保护水系统中腐蚀的磁芯，尽量减少聚集，并为功能化提供合适的表面。对二氧化硅涂层工艺进行了修改。而不是执行三个涂层，如李等人6报告，MNPs在这种方法中涂有两层二氧化硅层（图2D）...

使用MNP的细菌检测方法基于致病菌1结合MNP的抗体、分枝剂、生物蛋白、碳水化合物的分子识别。考虑到侧肢被细菌外膜上的特定受体识别，它们也可以与MNP相关，以增加它们的特异性2。侧肢是小有机分子参与Fe3+ 被细菌3，44的获取。副体和MNP之间的结合物的制备，以及它们对细菌捕获和分离的评估，尚未报告。
将磁性纳米粒子与小分子结合合成的关键步骤之一是选择它们之间的键或相互作用类型，以确保小分子附着在MNP表面。因此，在磁性纳米粒子和费洛沙胺（Yersinia肠原体识别的侧发）之间制备结合的过程集中在MNP可修改表面的生成上，以便通过carbodiimide化学将其与侧光体均匀地连接。为了获得均匀的磁铁矿纳米粒子（MNP），并改进核化和尺寸控制，用苯基醇进行溶酶反应，在不晃动5的情况下在热块中进行。然后，用Stüber方法生成了二氧化硅涂层，以提供保护，提高水介质6中纳米粒子悬浮液的稳定性。考虑到铁氧胺的结构，引入胺组是产生合适的纳米粒子（MNP@SiO2@NH2）与侧磷结合所必需的。2这是通过冷凝（3-氨基丙基）三氧西烷（APTES）与酒精组存在于硅改性纳米粒子的表面（MNP@SiO2）使用sol-凝胶方法7。
同时，铁氧西胺铁（III）复合物是通过在水溶液中用乙酰乙酰醋酸铁进行商业上可用的递延胺复式制备的。NN-succinylferoxamine，轴承的苏基尼组，将起到链接，是通过铁氧胺与琥珀性氢化物的反应获得的。
MNP@SiO2@NH2和N-succinylferoxamine的结合，使 MNP@SiO2@NH–Fa 通过作为耦合试剂苯甲酸酮-1-yl-oxy-tris-（di） 的 carbodiimide 化学进行 磷酸二氟磷酸（BOP）和1-羟基苯甲酸酯（HOBt）在软的基本介质中激活N-苏基苯甲胺8中的终端酸组。
一旦MNPs被定性，我们评估了裸露和功能化磁性纳米粒子捕获野生类型（WC-A）和缺乏铁氧西胺受体FoxA（FoxA WC-A 12-8）的突变体的能力。普通议员、功能化的MN和2@NH和FaMNP@SiO允许与每个Y.肠胆菌菌株相互作用。细菌结合骨料通过磁场的应用从细菌悬浮液中分离出来。分离的骨料用磷酸盐缓冲盐水（PBS）冲洗两次，重新悬浮在PBS中准备连续稀释，然后镀上聚落计数。该协议演示了MNP@SiO2@NH@Fa合成的每一个步骤，所有中间体和偶联物的结构特征，以及细菌捕获测定法，作为评估偶联物相对于中间体的特异性的简便方法。9

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1-Hydroxybenzotriazole hydrate 
			HOBT</td>
			<td>Acros</td>
			<td>300561000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2,2&#8242;-Bipyridyl</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D216305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-Aminopropyltriethoxysilane 99%</td>
			<td>Acros</td>
			<td>151081000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonium hydroxide solution 28% NH3</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>338818</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Benzotriazol-1-yloxytris(dimethylamino)-phosphonium hexafluorophosphate BOP Reagent</td>
			<td>Acros</td>
			<td>209800050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Benzyl alcohol</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>822259</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deferoxamine mesylate salt &#62;92,5% (TLC)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D9533</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol, anhydrous, 96%</td>
			<td>Panreac</td>
			<td>131085</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl Acetate, Extra Pure, SLR, Fisher Chemical</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iron(III) acetylacetonate 97%</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>F300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LB Broth (Lennox)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>L3022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N,N-Diisopropylethylamine, 99.5+%, AcroSeal</td>
			<td>Acros</td>
			<td>459591000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N,N-Dimethylformamide, 99.8%, Extra Dry, AcroSeal</td>
			<td>Acros</td>
			<td>326871000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pyridine, 99.5%, Extra Dry, AcroSeal</td>
			<td>Acros</td>
			<td>339421000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sephadex LH-20</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>LH20100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Succinic anhydride &#62;99%</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>239690</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tetraethyl orthosolicate &#62;99,0%</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>86578</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

synthesis of functionalized magnetic nanoparticles, their conjugation with the siderophore feroxamine and its evaluation for bacteria detection

在目前的工作中，用SiO2合成磁性纳米粒子，其胺功能化（3-氨基丙酮）三氧西烷（APTES），并结合延高胺，这是Yersinia肠科利质识别的侧发，使用成功素菌作为链接器。
磁铁矿的磁性纳米粒子（Fe3O4）采用溶质法制备，并使用Stüre工艺涂覆SiO 2（MNP@SiO2），然后使用APTES（MNP@SiO2@NH2）进行功能化。22 22然后，用卡博迪米德联轴器将费氧胺与MNP@SiO2@NH2并联，使2MNP@SiO2@NH2@Fa。2通过八种不同的方法，包括粉末X射线衍射（XRD）、傅立叶变换红外光谱（FT-IR）、拉曼光谱学、X射线光电子光谱（XPS）、传输电子显微镜（TEM）和能量分散X射线（EDX）映射等八种不同方法，对偶联和中间体的形态和特性进行了研究。这种详尽的描述证实了结合的形成。最后，为了评估纳米粒子的容量和特异性，他们使用耶尔西尼亚肠科利塔在捕获细菌测定中进行了测试。

进行了详尽的结构表征，以确定每个中间体和最终共聚体的形态和性质。为此，使用XRD、FT-IR、拉曼光谱、TGA、TEM、EDX映射和XPS技术来演示结合的形成。X射线光电子光谱（XPS）获得的纳米粒子表面原子的氧化状态是确认纳米粒子与侧视之间共价键形成的最相关数据。与这些结果一致，此协议是可重现的。
裸MNP、功能化的MN和结合体与PBS溶液中每个Y.肠科利质菌株混合。?...

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Synthesis of Functionalized Magnetic Nanoparticles, Their Conjugation with the Siderophore Feroxamine and its Evaluation for Bacteria Detection

本作品描述了磁性纳米粒子制备的协议，其涂层与SiO2，其次是其胺功能与（3-氨基丙酮）三氧西烷（APTES）及其与递延莫沙胺的结合使用苏基尼莫西作为链接器。还详细介绍了对所有中间纳米粒子和最终偶联物使用Y.肠菌学的深层结构表征描述和捕获细菌测定。

功能化磁性纳米粒子的合成及其与侧双磷铁氧胺的结合及其细菌检测评价

In the present work, the synthesis of magnetic nanoparticles, its coating with SiO2, followed by its amine functionalization with ...

磁性纳米粒子由于其强磁性特性和表面易于功能化，是分析科学和纳米医学的理想工具。我们在这里报告氨基功能化二氧化硅磁性颗粒与侧氟铁氧胺结合的第一个实例，以及光源材料捕获的评估。侧孔是小的有机分子，在铁分体机制中起着关键作用，它们被细菌的特定外膜受体所识别。该视频显示，一步一步，一个有效的协议，准备磁性铁纳米粒子。然后，他们涂上二氧化硅，以保护分散和保护磁核。由此产生的反应器表面与胺群功能化。与铁氧胺结合的磁性纳米粒子的合成。在20 mL玻璃瓶中加入0.5克Fe（acac）3。然后，与10mL的苯基醇混合。使这种混合物声波2分钟。然后，转移到加热块，在180摄氏度加热72小时。用96%乙醇冲洗纳米粒子。离心机30分钟使用磁性磁铁将纳米粒子与上一样物分离开上是由元。丢弃残留溶剂。丢弃上清液，与声波交替，直到溶剂看起来清晰。在80毫升异丙醇中准备悬浮2克MNP，加入4毫升21%氨、7.5毫升蒸馏水和0.56毫升TEOS。在40摄氏度加热混合物2小时，连续搅拌。然后，声波1小时。用磁铁分离MNP，丢弃上流水线，将其分散在30毫升异丙醇中，加入氨、蒸馏水和TEOS，顺序与之前相同。在40摄氏度加热混合物两小时，连续搅拌。然后，声波一个小时。方便地拆下并清洗磁搅拌棒，以回收所有材料。丢弃上清液，用96%乙醇三次冲洗纳米粒子，与声波交替。在室温下将纳米粒子干燥12小时。冲洗500毫克的MNP@SIO2从上一步获得二甲基甲酰胺。声化它们并丢弃。将颗粒重新悬浮在圆底烧瓶中，用磁棒搅拌，并加入 9 毫升的 APTES。在60摄氏度下搅拌混合物12小时。丢弃上清液，用96%乙醇三次冲洗纳米粒子，与声波交替。在5毫升蒸馏水中溶解100毫克的乙酰胺、中盐盐和53.0毫克乙酰酸铁。在室温下搅拌混合物过夜。在分离漏斗中用20毫升乙酸乙酯清洗所得产品三次。在真空下去除有机溶剂。冷冻干燥水相，以提供铁氧胺和红色固体。在50毫升圆底烧瓶中加入350毫克的沙奇氢化物溶液，在5毫升的苯丙胺中加入100毫克的铁氧胺溶液中。在室温下搅拌所得混合物16小时。在减压下去除过量的苯丙胺。将反应原油溶解在3毫升甲醇中。将甲醇溶液转移到LH-20柱中，以0.5 mL/分钟计算。收集红色分数，在真空中去除甲醇。用DMGF冲洗30毫克干胺功能化纳米粒子，并在100毫升Erlenmeyer烧瓶中对纳米粒子进行声波化30分钟。准备200毫克N-苏基苯胺溶液， 173毫克苯甲酸酯 1-yl-oxy-tris-磷六氟磷酸盐 BOP，46毫克1-羟基苯三甲酸酯HOBt和128.8毫克N，N-二异丙基胺DIPEA，在10毫升的DMF，在50毫升的圆底烧瓶。在干燥和无氧条件下MNP@SiO2@NH2在声波条件下将先前冲洗过的清洁液悬浮在 3 毫升 DMF 中。使用 argon 大气。加入，滴，混合 A 混合B.摇动最终的混合物，使用轨道摇床，在室温过夜。使用磁铁将产生的结合与悬架分离。细菌测定与Y.肠细胞菌菌株，以量化分离和捕获致病菌与纳米粒子。在无菌管中，以 1 mg/mL 的 1 mg/mL 准备悬浮所有中间纳米粒子和 PBS 的最终结合。准备一个文化 Y.entorocolitica 在 5 毫升的卢里亚贝尔塔尼， Lb， 肉汤过夜。准备5毫升的缺铁试管大豆汤，TSB，通过添加50微升10 mM 2，2-双酰溶液。用50微升的Y.肠糖糖过夜培养剂接种5毫升缺铁TSB汤。在37摄氏度的温度下孵育，搅拌，直到达到0.5至0.8的OD600。以100微升的隔夜培养，并在含有900微升PBS的管中稀释，以获得第一个1/10稀释。然后，准备1/100稀释从第一次稀释使用相同的程序，以获得细菌细胞的浓度在10到6殖民地形成单位大约每毫升的功率。加入100微升的纳米粒子悬浮液和1毫克/毫升至1毫升的1/100细菌稀释。分离MNP细菌聚集体，使用磁铁，丢弃，小心，上一液。使用涡流用 1 毫米 PBS 冲洗分离的纳米粒子两次。准备从前一个暂停连续四个 1/10 稀释， 直到 10 到负 4 稀释的力量。板 10 微升每次稀释到 TS 阿加板上。在光白色模式下用凝胶数字化器拍摄板。处理图像，使用方便的软件，放大一个点，以计算单个殖民地的数量。为了确认纳米粒子和侧光粒之间的共价键的形成，我们使用FT-IR拉曼光谱来监测合成，观察新波段如何出现在每一步中与一个新的功能群一致。TEM 和 SEM 显微镜用于观察形态和粒径。热重力分析，测量添加有机材料造成的体重减轻。XPS允许我们分析原子在表面的不同氧化状态，并确认共价键的形成。最后，我们使用最终结合物上的所有中间体来测试其捕获细菌的能力，以确定其作为生物传感器的特性。该协议旨在利用磁铁矿纳米粒子的高生物相容性。二氧化硅涂层可改善分散性，保护磁核免受水介质降解的影响。并且还给出一个反应性表面，使胺组功能化，而胺群是用碳酰胺化学共同结合酸改性侧泡所必需的。在这种情况下，N-苏奇尼氢胺。结合细菌捕获能力测试，结果，发现菌落数量小，与中间体没有显著差异，因为PBS细菌悬浮液中呈现的体积效应的特定相互作用。

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